You are on page 1of 77

OBTENCIN DE UNA BEBIDA ALCOHLICA A PARTIR DE LA

FERMENTACIN DEL MANGO DE AZUCAR (Mangifera Indica L)

RUBEN DARIO CANRO FARIAS


JEISSON FERNANDO CRUZ MENDOZA
VILMA ROCIO CASTAEDA ESPNOSA
JENNY ANDREA PERALTA BARRETO
ALEXANDRA MONTEALEGRE TOVAR

SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE - SENA


CENTRO DE GESTIN INDUSTRIAL
TECNOLOGA EN QUMICA APLICADA A LA INDUSTRIA
BOGOT, D.C.
2011

OBTENCIN DE UNA BEBIDA ALCOHLICA A PARTIR DE LA


FERMENTACIN DEL MANGO DE AZCAR (Mangifera Indica L)

RUBEN DARIO CANRO FARIAS


JEISSON FERNANDO CRUZ MENDOZA
VILMA ROCIO CASTAEDA RODRIGUEZ
JENNY ANDREA PERALTA BARRETO
ALEXANDRA MONTEALEGRE TOVAR

Trabajo soporte del proyecto de formacin C.G.I.

Qco. Alex Ricardo Silva Olaya


Qco. Rosben Ruiz Molano
Ing. Qco. Henan Emanuel Cabarcas Cely
Lic. Qco. Giovanny Enrique Forero Castaeda
Mic. Bio. Etna Milena Snchez Castelblanco

SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE - SENA


CENTRO DE GESTIN INDUSTRIAL
TECNOLOGA EN QUMICA APLICADA A LA INDUSTRIA
BOGOT, D.C.
2011

Contenido
GLOSARIO .............................................................................................................. 6
INTRODUCCIN ..................................................................................................... 8
JUSTIFICACIN ...................................................................................................... 9
OBJETIVOS ........................................................................................................... 12
OBJETIVO GENERAL ....................................................................................... 12
OBJETIVOS ESPECFICOS .............................................................................. 12
1.

IDENTIFICACINDEL PRODUCTO QUMICO DE INTERS INDUSTRIAL . 13


1.1

ESTADO DEL ARTE................................................................................. 13

1.1.1

Descripcin de la materia prima ......................................................... 14

1.2. LISTADO DE ANLISIS DE LABORATORIO ............................................. 14


1.2.1 Anlisis de la materia prima; Mango de azcar ..................................... 14
1.2.2 Anlisis al producto terminado; Vino de mango ..................................... 15
1.3. DIAGNOSTICO ANLISIS DOFA DEL PROYECTO DE FORMACIN...... 17
2. ESTABLECIMIENTO DE LAS ACTIVIDADES PARA LA EJECUCIN DE LOS
ENSAYOS Y EL PROCESO QUMICO. ................................................................ 18
2.1

PLANEACIN ESTRATGICA ................................................................ 18

2.1.1
2.2

Misin ................................................................................................. 18

MANUAL DE CALIDAD ............................................................................ 19

2.3 PLAN DE MUESTREO DE MATERIA PRIMA Y PRODUCTO


TERMINADO.(MUESTREO) .............................................................................. 20
2.4 CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES Y ORGANIGRAMA DEL PROYECTO
(SUPERVISAR PLANTAS)................................... Error! Marcador no definido.
3.

MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS. ......................................................... 23


3.1 IDENTIFICACIN DE MATERIALES Y EQUIPOS DE ANLISIS
QUMICO. (MATRIZ DE LOS MISMOS, ALISTAMIENTO) (INFORME DE
RECONOCIMIENTO DEL LABORATORIO, VERIFICACIN DE BALANZAS Y
MANEJO DE MATERIAL- INFORME DE MANEJO DE MONTAJES Y
CALIBRACIN DE MATERIAL VOLUMTRICOANEXO). ................................ 23
3.2 CARACTERIZACIN DE EQUIPOS DE ANLISIS QUMICO
(ASEGURAR)(DESCRIPCIN DE LOS MISMOS) (INSTRUCTIVOS DE

ENSAYO, INSTRUCTIVOS DE MANEJO DE EQUIPOS BSICOS DE


LABORATORIO, INFORME DE VERIFICACIN DE FUNCIONAMIENTO DE
EQUIPOS E INSTRUMENTOS DE ANLISISANEXO) ..................................... 24
3.3 DESCRIPCIN DEL PROCESO PARA LA OBTENCIN DEL
PRODUCTO QUMICO (A NIVEL EXPERIMENTAL) ........................................ 31
3.3.1

Diagrama de flujo del proceso qumico (Flujograma) ......................... 33

3.3.2

Diagrama de bloques y balance de materia del proceso qumico ...... 37

3.3.3 Descripcin de especificaciones tcnicas de equipos para el proceso


en planta. ........................................................................................................ 38
4. EJECUCIN DE ENSAYOS Y ANLISIS FSICOS, QUMICOS Y
MICROBIOLGICOS ............................................................................................ 41
4.1 DOCUMENTOS PARA ESTABLECER EL PLAN DE CALIDAD
(FORMATOS DILIGENCIADOS CON LA INFORMACIN OBTENIDA AL
IMPLEMENTAR EL PLAN DE CALIDAD EN EL LABORATORIO QUMICO Y
PLANTA DE PRODUCCIN DEL PROYECTO EN DESARROLLO. (ANEXOS)
Error! Marcador no definido.
4.2 PLAN DE MANEJO Y DISPOSICIN DE RESIDUOS GENERADOS EN
EL PROCESO QUMICO(ANEXO DE REGISTRO DE CLASIFICACIN DE
DISPOSICIN FINAL DE RESIDUOS GENERADOS EN LOS ENSAYOS.
ALISTAMIENTO) ................................................................................................ 41
4.3 .DESCRIPCIN DE TOMA DE MUESTRA (REGISTROS DEL PROCESO
DE TOMA DE MUESTRAANEXO) ..................................................................... 44
4.4 REFERENCIA DEL PRINCIPIO DE ANLISIS (ANEXOINSTRUCTIVOS
DE ENSAYO) ..................................................................................................... 45
4.5 ANLISIS DE LOS RESULTADOSQUMICOS CUALITATIVOS (clculos
informe) ................................................................ Error! Marcador no definido.
4.6 PROCEDIMIENTOS DE ENSAYOS PARA MODIFICACIN Y ANLISIS
QUMICOS CUANTITATIVOS DE LA MATERIA PRIMA; EVALUANDO LA
CALIDAD DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS. Error! Marcador no definido.
4.7 DESCRIPCIN DEL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DEL
MICROORGANISMO ......................................................................................... 46
4.8

RUTA BIOQUMICA PARA LA OBTENCIN DEL METABOLITO ........... 47

4.9

DIAGRAMA DE FLUJO DEL PROCESO BIOTECNOLGICO ................ 47

4.10
DESCRIPCIN OBTENCIN, SEPARACIN E IDENTIFICACIN, DEL
METABOLITO DE INTERS. ............................... Error! Marcador no definido.
5. IMPLEMENTACINDEL PROCESO QUMICO Y/O BIOTECNOLGICO
TENIENDO EN CUENTA CONTROL DE ENSAYOS Y SUPERVISIN DE
VARIABLES. .......................................................................................................... 50
5.1

DESCRIPCIN DEL PROCESO CON DIAGRAMA PFD ......................... 50

5.2 PLAN DE PRODUCCIN DEL PROCESO QUMICO(ANEXO) ........Error!


Marcador no definido.
5.3 PROGRAMA DE SUPERVISIN DEL PROCESO QUMICO QUE
IDENTIFIQUE LAS REAS Y PERSONAL RESPONSABLE DE CADA UNA DE
LAS ACTIVIDADES (FORMATOS PARA LA RECOLECCIN DE
INFORMACIN DEL PROCESO QUMICO ANEXOS) ..................................... 51
5.4
6.

DESCRIPCIN DE LA INSPECCIN Y SUPERVISIN DEL PROCESO


Error! Marcador no definido.

EVALUACIN Y MONITOREO DEL PROCESO QUMICO ........................... 51


6.1 PROCEDIMIENTOS DE ANLISIS ESTADSTICO DE CONTROL DE
CALIDAD DEL PROCESO QUMICO .................. Error! Marcador no definido.
6.2 DESCRIPCIN DE NO CONFORMIDADES O CORRECCIONES
RESULTANTES DE LA EVALUACIN .............................................................. 51

BIBLIOGRAFA ...................................................................................................... 53
ANEXOS .................................................................. Error! Marcador no definido.

GLOSARIO

pice: este trmino expresa el extremo superior o punta (del latn apex, con el
mismo significado) de la hoja, del fruto, etc. El adjetivo apical se puede aplicar a
flores, frutos, con el significado del ms distal. Distal, a su vez, es lo que se sita
hacia el extremo opuesto a la base o parte basal del rgano en cuestin.
Pednculo: Rabillo de la hoja, flor o fruto con que se une al tallo.
Propiedades organolpticas: Las propiedades organolpticas son el conjunto de
descripciones de las caractersticas fsicas que tiene la materia en general, segn
las pueden percibir nuestros sentidos, por ejemplo su sabor, textura, olor, color. Su
estudio es importante en las ramas de la ciencia en que es habitual evaluar
inicialmente las caractersticas de la materia sin instrumentos cientficos.
Parmetro: Para las matemticas, un parmetro es una variable que permite
identificar, en una familia de elementos, a cada uno de ellos mediante su valor
numrico.
Analito: En qumica analtica un analito es el componente (elemento, compuesto o
ion) de inters analtico de una muestra. Son especies qumicas cuya presencia o
concentracin se desea conocer. El analito es una especie qumica que puede ser
identificado y cuantificado, es decir, determinar su cantidad y concentracin en un
proceso de medicin qumica, constituye un tipo particular de mensurando en la
metrologa qumica.
Metabolito: un metabolito es el producto final utilizada o producida durante el
metabolismo, es decir es el producto final o producto de inters.
Metabolismo: el metabolismo puede definirse como la suma de todas las
reacciones qumicas que ocurren en el organismo viviente. En forma colectiva,
tales reacciones se encargan de mantener la viabilidad del organismo.
Coloide: un coloide se define como una partcula lo suficientemente pequea
como para experimentar movimiento browniano pero a la vez mucho ms grande
que las molculas del medio en que se encuentra.
Residuo: Residuo es definido (por la Ley 42/1975) como todo material resultante
de un proceso de fabricacin, transformacin, utilizacin, consumo o limpieza,
cuando
su
poseedor
o
productor
lo
destina
al
abandono.
Tambin residuo se define como el producto de desecho slido, liquido y gaseoso

generado en actividades de produccin y consumo, que ya no poseen valor


econmico por la falta de tecnologa adecuada que permita su aprovechamiento o
por la inexistencia de un mercado para los posibles productos a recuperar (OCDE)
Patgeno: El trmino patgeno procede de la unin de dos palabras: patos que
significa enfermedad y geno que se traduce como engendrar.
Un patgeno o agente biolgico es aquel elemento o medio capaz de producir
algn tipo de enfermedad o dao en el cuerpo de un animal, un ser humano o un
vegetal, cuyas condiciones estn predispuestas a las ocasiones mencionadas.
Esterilizacin: La esterilizacin es un mtodo de control del crecimiento
microbiano
que
involucra
la
eliminacin
de
todas
las
formas
de vida microscpicas, incluidos virus y esporas, la temperatura utilizada para la
destruccin de los mismos, es de 100 C en adelante. Es un trmino absoluto que
implica la prdida de la viabilidad mediante la destruccin de todos
los microorganismos contenidos en un objeto, rea especfica o sustancia,
acondicionando de tal modo la posterior propagacin o contaminacin a otros
objetos o al medio ambiente.
Micronutrientes: los micronutrientes son aquellos nutrientes que suministran la
mayor parte de la energa metablica del organismo. Los principales
son glcidos, protenas, y lpidos ya que se requieren en grandes cantidades.
Micronutrientes: Se conoce como micronutrientes a aquellas sustancias que el
organismo de los seres vivos necesita en pequeas dosis. Son indispensables
para los diferentes procesos bioqumicos y metablicos de los organismos vivos y
sin ellos moriran. Desempean importantes funciones catalizadoras en el
metabolismo, al formar parte de la estructura de numerosas enzimas.

INTRODUCCIN

En el siguiente documento se darn a conocer los procesos y procedimientos para


la obtencin de una bebida alcohlica, todo esto se realizo con el fin de
aprovechar parte de la produccin nacional de mango de azcar que no se utiliza.
El fruto y el agua para consumo humano fueron las materias primas que se
utilizaron para la elaboracin del vino, a las cuales se le realizaron ensayos
fsicos - qumicos para su caracterizacin y validacin frente a los datos
reportados en las normas estandarizadas.
As mismo, se incluye la identificacin y el aislamiento del microorganismo que se
implemento en el proceso de fermentacin, adems la propuesta a nivel planta
piloto que contiene las operaciones unitarias, balance de materia y energa,
equipos (bandas transportadoras, escaldadora, despulpadora, fermentadores, filtro
prensa, filtro centrifugo, embotelladora y pasteurizador), que se requieren para
una produccin semanal de 500 litros de vino de mango.

JUSTIFICACIN
El proyecto de formacin SENA nace con el fin de innovar en el mercado con una
bebida alcohlica con sabor a mango, para ello se determinaron las diferentes
especies de mango, donde se eligi como materia prima el mango de azcar
Mangifera Indica L, el cual presenta 14,8% en carbohidratos totales y
caractersticas organolpticas que lo hacen atractivo para el proceso fermentativo,
en la obtencin del vino de mango.
Este fruto tropical se produce en muchos pases del mundo ubicando a Colombia
en la octava posicin con 165.000 toneladas anuales segn el Plan Frutcola
Nacional PFN. Siendo los departamentos de Tolima, Cundinamarca, Magdalena,
Bolvar y Antioquia los mayores productores de este fruto.
Del total de estas toneladas solo se aprovecha el 44% el cual se utiliza en la
fabricacin de jugos, salsas, conservas, mermeladas y jaleas, se pierden entonces
alrededor de 75.000 toneladas anuales que corresponden al 66%.Por esta razn
el mango de azcar Mangifera Indica L se hace ideal para la obtencin de la
bebida alcohlica, vino de mango. Por medio de este proyecto se va a aprovechar
la sobreproduccin nacional de este fruto, ofreciendo un producto de alta calidad
en un mercado tan competitivo como lo es la industria licorera. Lo anterior se
implementa por medio de un proceso qumico donde se transforma la materia
prima el cual se denomina fermentacin alcohlica.

RESUMEN
La obtencin de una bebida alcohlica a partir de la fermentacin del mango de
azcar (Mangifera Indica L) es un proyecto que busca aprovechar la
sobreproduccin nacional del mango de azcar e implementarla en un proceso de
fermentacin obteniendo como producto final un vino de mango.
El proyecto inicia con la identificacin de las materias primas, las cuales son el
mango de azcar y agua para consumo humano, y su posterior caracterizacin por
medio de referencias tericas que fueron corroboradas mediante anlisis
fsico qumicos realizados en el laboratorio.
En la transformacin de la materia prima se implementa un proceso qumico
biotecnolgico, en este caso la fermentacin alcohlica, la cual implica el
aislamiento del microorganismo (levadura), posterior identificacin macroscpica y
microscpica y por medio de pruebas bioqumicas la verificacin de que dicha
levadura metaboliza azucares reductores produciendo etanol, lo cual la hizo apta
para el proyecto.
La elaboracin de vino de mango inicia con la recepcin y seleccin de la fruta,
que a continuacin es sometida a un pre tratamiento que consta de un lavado,
escaldado, descortezado, despulpado, licuado y dilucin para la adecuacin del
sustrato. Este sustrato es inoculado con la levadura previamente aislada para que
en este punto se inicie formalmente la transformacin de la materia prima,
controlando variables como temperatura, pH y agitacin constante durante un
periodo de 8 das.
Al terminar la fermentacin se continua con la purificacin de la bebida fermentada
por medio de una filtracin, clarificacin y filtracin centrifuga con lo cual se
elimina la mayor cantidad de fibra, biomasa y slidos suspendidos presentes en el
fermento.
De esta manera se obtiene una bebida alcohlica de color amarillo brillante, el
proceso finaliza con el embotellado y pasteurizado de la bebida alcohlica
asegurando que el producto final cumpla con estndares de calidad.

ABSTRACT
The obtainment of a alcoholic drink from fermentation of sugars mango (Mangifera
Indica L) is a project that search take advantage of the national overproduction of
sugars mango and implement it in a process of fermentation obtaining as endproduct mangos wine.
The project starts with the identification of raw materials, which are sugars mango
and water to human consumption, and itss further characterization by means of
theoretical references that was corroborated through physico-chemical analysis
made in laboratory.
In the transformation of raw materials is implement a biotechnological chemical
process, in this case the alcoholic fermentation, which implies the isolation of
microorganism (yeast), later macroscopic and microscopic identification and
through biochemical tests the verification of such yeast metabolized reducting
sugars producing ethanol, which made it suitable to project.
The elaboration of mangos wine starts with the reception and selection of the fruit,
that below is subjected to a pretreatment that has a washing, scalding, debarking,
pulping, liquefied and dilution to adaptation of substratum. This substratum is
inoculated with the yeast previously isolation to that at this point start formally the
transformation of raw material, controlling variables like temperature, pH and
constant agitation during a period of 8 days.
At end of fermentation is continued with the purification of fermented beverage
through of a filtration, clarification, and centrifugal filtration whereupon is removed
the highest amount of fiber, biomass and suspended solids that is present in the
ferment.
Of that way is obtained a alcoholic beverage of brilliant yellow color, the process
end with the bottling and pasteurized of beverage, ensuring that the end-product
comply with quality standards.

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL
Obtener productos qumicos de inters industrial de manera ms limpia y
sostenible, manteniendo los estndares de calidad mediante la implementacin de
procesos qumicos modificados y/o la aplicacin de la biotecnologa en procesos
qumicos industriales.

OBJETIVOS ESPECFICOS
-Identificar el producto de inters industrial a obtener
-Definir el proceso qumico o biotecnolgico a implementar
-Identificar y evaluar las variables de proceso susceptibles de ser modificadas
-Efectuar las modificaciones al proceso y ejecutar el proceso modificado
-Caracterizar el producto obtenido
-Evaluar las modificaciones implementadas

1. IDENTIFICACINDEL PRODUCTO QUMICO DE INTERS INDUSTRIAL


Cumpliendo con el objetivo principal y los lineamientos del proyecto establecidos
por el SENA, el producto qumico de inters industrial a obtener es una bebida
alcohlica que se produce a partir de la fermentacin de frutas de inters nacional,
para fines de este proyecto, al fruta elegida como materia prima es el mango de
azcar, cuya fermentacin tiene como producto final una bebida alcohlica con
sabor a mango o vino de mango.
ESTADO DEL ARTE
Colombia es un pas rico en especies frutales, entre las que se encuentra el
mango de azcar (Mangifera indica L), con una produccin anual de 165000
toneladas, siendo los departamentos de Tolima, Cundinamarca, Bolvar,
Magdalena y Antioquia los mayores productores de este fruto. Segn el DANE y el
plan Frutcola Nacional PFN tan solo se aprovecha el 44% del total de ellas; en la
industria se utiliza para la fabricacin de jugos, salsas, conservas, mermeladas y
jaleas, as que esta fruta no es aprovechada en la industria licorera nacional.
Al realizar una consulta sobre la posibilidad de producir una bebida alcohlica a
partir de la fermentacin del mango de azcar se encontr que en Australia existe
una empresa dedicada a la produccin de una gran variedad de bebidas
alcohlicas con sabor a mango a partir de su fermentacin. El nombre de esta
empresa es Golden Drop la cual lleva 25 aos en la produccin de vinos de
mango, contando con sus propias plantaciones de fruta. Los productos que han
logrado desarrollar incluyen el vino seco, medio, dulce y espumoso y otros licores
con la combinacin de diversas frutas.
En Australia occidental tambin se ha trabajado en la produccin de vino de
mango de manera tradicional, donde se han obtenido resultados positivos a partir
tanto de la fruta picada como del jugo de mango.

1.1.1 Descripcin de la materia prima


El mango de azcar (Mangifera Indica L) de la familia Anacardiaceae es originario
del Asia tropical y ha sido plantado a travs de todo el trpico. Proviene de un
rbol de copa redondeada y muy densa con hojas verdes y un tronco robusto con
corteza gruesa y spera.
El fruto contiene una semilla cubierta de una pulpa fibrosa de color anaranjado
gruesa y jugosa, se caracteriza por tener forma aplanada con peso aproximado
de 20 a 25g. La corteza que equivale al 8% del fruto es de color amarillo-rojizo que
se refleja en su grado de maduracin, para este caso color tres y cuatro segn la
NTC 5139.
1.2. LISTADO DE ANLISIS DE LABORATORIO
Para el proceso fermentativo es necesario realizar los ensayos fsicos-qumicos
previos a la materia prima para determinar los parmetros de inters y tomar
acciones preventivas en caso de no estar dentro de un rango establecido los
cuales pueden afectar la obtencin del vino, tambin es necesario realizar
ensayos
al producto terminado para establecer estndares de calidad
contemplados en la NTC 708.
1.2.1 Anlisis de la materia prima; Mango de azcar.
Los siguientes ensayos se le realizan al mango de azcar para establecer los
requisitos especficos indicados en la NTC 5139. Frutas frescas, mangos criollos,
especificaciones.

ENSAYO

MTODO

Determinacin de la
consistencia

Se determina sobre la pulpa de mango


por medio de un penetrmetro (dimetro
del mbolo 8 mm) y el resultado se
2
expresa como Kgf/cm .

Determinacin del
contenido de slidos
solubles totales

Se determina por el mtodo refracto


mtrico y se expresa en grados brix.

Determinacin del pH

Se determina por el mtodo


potenciomtrico.

Determinacin de la
acidez titulable

Se determina por el mtodo de titulacin


potenciomtrica. Se expresa como
porcentaje de cido ctrico y se calcula
con la ecuacin indicada en la NTC
5139, numeral 5.8.

1.2.2 Anlisis al producto terminado; Vino de mango


Los siguientes ensayos se le realizan al Vino de mango para establecer los
requisitos especficos indicados en la NTC 708. Bebidas alcohlicas, Vinos de
frutas.

ENSAYO
DETERMINACIN DEL GRADO
ALCOHOLIMTRICO
DETERMINACIN DE LA ACIDEZ TOTAL
DETERMINACIN DE LA
ACIDEZ VOLTIL
DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE
METANOL
DETERMINACIN DEL
CONTENIDO DE ANHDRIDO
SULFUROSO

MTODO
Se efecta de acuerdo con lo indicado en las
GTC 4, p. 13
Se efecta de acuerdo con lo indicado en la
GTC 4, p.133.
Se efecta de acuerdo con lo indicado en la
GTC 4, p. 39
Se efecta de acuerdo con lo indicado en la
GTC 4, p. 138
Se efecta de acuerdo con lo indicado en la
GTC 4, p. 60.

DETERMINACIN DEL
CONTENIDO DE AZCARES TOTALES

Se efecta de acuerdo con lo indicado en la


GTC 4, p. 69.

DETERMINACIN DEL
CONTENIDO DE CIDO SRBICO

Se efecta de acuerdo con lo indicado en la


GTC 4, p. 50.
Se efecta de acuerdo con lo indicado en la
GTC 4, p. 81
Se determina el extracto seco total y se calcula
el reducido

IDENTIFICACIN DE COLORANTES
DETERMINACIN DEL
EXTRACTO SECO REDUCIDO

Se efecta de acuerdo con lo indicado en la


GTC 4, p. 61.
Se calcula mediante la siguiente ecuacin:
ESR = EST - (AF + AzT)
Donde:
ESR = extracto seco reducido
Determinacin del extracto seco reducido EST = extracto seco total
AF = acidez fija expresada como cido tartrico
AF = acidez total - acidez voltil
Az T = azcares totales expresados como
glucosa
DETERMINACIN DEL CONTENIDO
Se efecta de acuerdo con lo indicado en
DE SULFATOS
la GTC 4, p. 78.
DETERMINACIN DEL CONTENIDO
Se efecta de acuerdo con lo indicado en la
DE CLORUROS
GTC 4, p. 76
Se efecta de acuerdo con lo indicado en la
DETERMINACIN DEL
GTC 4, p. 140 o por espectrofotometra de
CONTENIDO DE HIERRO
absorcin atmica.
Se efecta de acuerdo con lo indicado en la
DETERMINACIN DEL
GTC 4, p. 140 o por espectrofotometra de
CONTENIDO DE COBRE
absorcin atmica
Se efecta directamente sobre le producto
DETERMINACIN DEL pH
terminado, empleando un medidor de pH
quepermita leer 0,1 unidades de pH
Determinacin del extracto seco total

1.3. DIAGNOSTICO ANLISIS DOFA DEL PROYECTO DE FORMACIN.

En el proyecto de formacin es necesario realizar un anlisis DOFA que permita


identificar las debilidades, oportunidades, fortalezas y amenazas para as mismo
tomar medidas y realizar las correcciones necesarias para el desarrollo del
proceso. A continuacin se muestra la matriz DOFA del proyecto y los objetivos
estratgicos que surgen a partir del DOFA.

OPORTUNIDADES

AMENAZAS

Innovacin en el sabor del producto

Fuerte competencia en el mercado de


licores.

Darle un valor agregado a una fruta que en


Colombia no se explota de la mejor manera

Poca disponibilidad de tiempo en el


laboratorio para realizar los ensayos.

Exportar el producto a nuevos mercados

Condiciones climticas que afectan la


produccin de mango de azcar.

DEBILIDADES
Mal administracin del tiempo dedicado al
proyecto
Poca solvencia econmica para una
produccin al nivel industrial.
Poca disposicin de informacin acerca del
proceso fermentativo del mango de azcar.

Rpida descomposicin -de la materia prima.

FORTALEZAS

Disposicin de la materia prima durante todo el


ao.
Insumos necesarios para la produccin del
aperitivo.
Comunicacin asertiva entre los miembros del
grupo.
Excelente apoyo tcnico por parte de los
instructores.
Se implementa un proceso sencillo, productivo,
y eficaz en la obtencin del aperitivo de mango.

Programar en agenda semanal las actividades a desarrollar con respecto


al proyecto, asignando funciones a cada persona.

Corto plazo
0-6 meses

Gestionar el plan semilla para obtener los recursos necesarios en la


produccin de la bebida alcohlica.
Realizar ensayos para caracterizar la bebida alcohlica y establecer una
mejora continua.
Realizar campaas publicitarias que permitan mostrar el producto y su
calidad.

Mediano plazo
6 meses 1
ao

Programar los ensayos necesarios para el producto terminado en un


laboratorio certificado.
Implementar una correcta refrigeracin y almacenamiento para extender
el periodo de vida del mango de azcar.
Establecer contratos con los agricultores para suplir la demanda de
mango de azcar durante todas las temporadas del ao.

Largo plazo
2 aos en
adelante

Distribuir el producto en almacenes de cadena en la ciudad de Bogot.


Promocionar y distribuir el producto en las principales ciudades de
Colombia.

2. ESTABLECIMIENTO DE LAS ACTIVIDADES PARA LA EJECUCIN DE LOS


ENSAYOS Y EL PROCESO QUMICO.
2.1 PLANEACIN ESTRATGICA
Dentro del proyecto de formacin SENA se realiza una propuesta a planta
piloto con lo cual se busca simular el proceso productivo de una empresa, por
esta razn se desarrolla una misin, visin las cuales se presentan a
continuacin.
2.1.1 Misin
La empresa Manguiluck se dedica a la elaboracin, produccin y distribucin de
vinos con sabor a mango garantizando la calidad del proceso para la satisfaccin
del cliente, innovando tanto en la industria biotecnolgica como en la tecnificacin
del proceso, buscando siempre la efectividad a travs de la honestidad y la
responsabilidad consiguiendo as ser una industria lder en el sector licorero.

2.1.2 Visin.
Ser una empresa lder en el sector licorero e innovar en el mercado de bebidas
alcohlicas tanto nacional como internacionalmente, implementando altos
estndares de calidad.
2.2 MANUAL DE CALIDAD
Para el proceso de obtencin de la bebida alcohlica es necesario
implementar los manuales de calidad de planta y de laboratorio los cuales
poseen los parmetros, equipos y ensayos que se realizan a cada rea con
sus respectivas etapas.

2.3 PLAN DE MUESTREO


TERMINADO.(MUESTREO)

DE

MATERIA

PRIMA

PRODUCTO

A continuacin se presenta el plan de muestreo implementado en la materia prima


mango de azcar (Mangifera indica L) con el fin de realizar los respectivos anlisis
presentados en la 1.2.1 Anlisis de la materia prima.
PLAN DE MUESTREO PARA EL MANGO DE AZUCAR (Mangifera Indica L)
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Obtener muestras de carcter representativo del mango de azcar (Mangifera
Indica L) destinadas a anlisis fisicoqumico.
OBJETIVOS ESPECFICOS.
Establecer el lugar de la toma de la muestra
Establecer el tipo de muestra a recolectar que cumpla las caractersticas
necesarias para su posterior anlisis.
Identificar los protocolos necesarios para llevar a cabo el muestreo tiendo en
cuenta los parmetro in situ.
Establecer las condiciones de conservacin y preservacin de la muestra.

MUESTREO
Tipo de muestra: muestra aleatoria
Naturaleza de la muestra: Solido
Fruta: mango de azcar
Especie: Mangifera Indica L
Parmetro a analizar: Porcentaje de azucares, porcentaje de carbohidratos,
porcentaje de fibra
Normatividad vigente: Normas NTC 1266-1,-2,-3,-4.

Equipos:
Hielera porttil
Documentacin requerida:
Sellos
Etiquetas
Libro de campo
Cadena de custodia
Hoja de remisin
Materiales:
Gafas de proteccin
Bata
Guantes de nitrilo
Tapa bocas
cofia
Parmetros in situ:
Olor
Color
Dimetro
Tamao
Masa en gramos
Forma
Reconocimiento del lugar
Para realizar el muestreo se debe especificar el lugar para tomar la muestra que
en este caso es el abastecimiento de alimentos (Corporacin de Abastos S.A
CORABASTOS).
Imagen 1: Ubicacin del sitio

Google Earth Bogot 11, de marzo de 2011


Para llegar a la Corporacin de Abastos S.A CORABASTOS desde cualquier
punto de la ciudad, la alternativa ms fcil es a travs del Sistema de transporte
masivo TRANSMILENIO, por la ruta de la Avenida de las Amricas hasta el
portal Intermedio de Banderas.
Despus se hace necesario tomar la ruta alimentadora Corabastos 8-4 que le
ofrece la posibilidad al visitante de ingresar tanto por la entrada 3 (Av. Agoberto
Meja con Calle 35 sur), como por la entrada 4 (Av. Agoberto Meja con Calle 36
Sur).
Si el visitante se transporta en vehculo propio puede tener en cuenta las
siguientes avenidas como gua para llegar a Corabastos.
Avenida
Ciudad
de
Cali
(Avenida
Carrera
86)
Avenida
Agoberto
Meja
(Avenida
Carrera
80)
Avenida de las Amricas
Avenida Primera de Mayo
(Ubicacin obtenida en la paginahttp://www.corabastos.com.co en la cual se indica
los diferentes mtodos de llegada a este sitio de abastecimiento de alimentos)
Tipo de muestra
El tipo de muestra debe ser una que sea representativa debido a que cualquier
fruta debe tener las mismas caractersticas que las dems, un valor representativo
es de 10 unidades. Por cada unidad a muestrear se realizara una muestra
aleatoria la cual es la representacin de cada punto de muestreo.
Conservacin de la muestra
Para conservar la muestra se debe mantener refrigerada a una temperatura que
no altere sus caractersticas esto se pude realizar a una temperatura entre 1 y 4
grados Celsius (lo recomendable es no llevar a temperaturas menores a las
dichas anteriormente) y mantener cada muestra en bolsas Zip dentro de la hielera.
Transporte
Para transportar la muestra se debe establecer que la fruta no sufra golpes,
contacto con microorganismos o que sufra perdidas fsicas ya que estos factores
alteran los analitos a determinar. Para esto el transporte se realiza en una hielera
porttil en la cual hay bolsa Zip cada una con su muestra correspondiente.

Entrega al laboratorio
La muestra se debe entregar con la documentacin requerida, los sellos, los
rtulos, el libro de campo, la Cadena de custodia y esencialmente la hoja de
remisin. Adems la muestra debe ser entregada mximo un da despus de la
toma de la muestra. En el laboratorio la muestra se debe dejar hasta que ella
adquiera la temperatura ambiente para un buen anlisis de los analitos.
Tipo de recipientes
Bolsas plsticas Ziploc
Tiempo mximo de preservacin:
La muestra se debe preservar mximo por 24 horas ya que la refrigeracin no
tiene temperaturas medianamente bajas.
Tcnicas de preservacin:
La preservacin de las muestras se debe realizar a temperaturas entre 1 a 4
grados Celsius.
3.

MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS.

3.1
IDENTIFICACIN DE MATERIALES Y EQUIPOS DE ANLISIS QUMICO.
(MATRIZ
DE
LOS
MISMOS,
ALISTAMIENTO)
(INFORME
DE
RECONOCIMIENTO DEL LABORATORIO, VERIFICACIN DE BALANZAS Y
MANEJO DE MATERIAL- INFORME DE MANEJO DE MONTAJES Y
CALIBRACIN DE MATERIAL VOLUMTRICO).
Para la realizacin de los ensayos y la fermentacin es necesario el uso de
material y equipos de laboratorio, para esto es preciso realizar un previo
reconocimiento de este material lo cual se hizo mediante el reconocimiento de los
laboratorios, la verificacin de balanzas, el manejo y calibracin del material
volumtrico. Cuyos informes se muestran en el anexo A.

3.2
CARACTERIZACIN
DE
EQUIPOS
DE
ANLISIS
QUMICO
(ASEGURAR)(DESCRIPCIN DE LOS MISMOS) (INSTRUCTIVOS DE ENSAYO,
INSTRUCTIVOS DE MANEJO DE EQUIPOS BSICOS DE LABORATORIO,
INFORME DE VERIFICACIN DE FUNCIONAMIENTO DE EQUIPOS E
INSTRUMENTOS DE ANLISIS).
Para la realizacin de ensayos se utilizaron los siguientes equipos.
Cromatografo de gases

OBJETIVO: Describir el proceso de utilizacin apropiada del equipo


CROMATOGRAFO DE GASES en muestras de inters qumico, bioqumico,
farmacutico y alimenticio.

MATERIALES Y REACTIVOS: Columnas, gas de arrastre, patrones, muestra


problema, jeringas, impresora.

CROMATOGRAFO DE GASES
1-Verificar que las conexiones de los gases estn bien instaladas.
2- Identificar los diferentes componentes del CG (Unidad analizadora, hornos
para las columnas, panel neumtico, unidad electrnica, el teclado, teclas
numricas, teclas de funciones, teclas programables, unidad de video,
detectores y registradores).
3- Dejar la puerta del horno ligeramente abierta e introducir el gas portador a 60
psi aproximadamente.
4-Encender el instrumento. En el video aparece el titulo PERKIN ELMER. Esto
mientras se establece un diagnostico (30 s).
5-Verificar que la temperatura de la columna no exceda la mxima temperatura
de la misma, pues puede causar daos en ella.
Al encender aparece una de dos posibles pginas:
-Datos y forma del ltimo mtodo utilizado.
-Pagina de control, esto a causa del no uso por ms de 6 meses.
-Si aparece la segunda pagina, se acepta tal configuracin con F8 o se puede
cambiar si se desea.
IMPORTANCIA DE LA CONFIGURACION
La configuracin del equipo esta dada por las condiciones y accesorios
instalados y de acuerdo a esto se realiza un anlisis.
En el caso de aparecer la pagina de control presione la tecla INST/TERM dos
veces para ingresar a la pagina de funciones. Una vez se encuentre en esta
pagina oprima la tecla programable a la funcin configuracin.
Existe la funcin (modif. Config) con esta se cambian los parmetros necesarios
para la nueva configuracin, (temperatura del horno, temperatura del inyector,
temperatura de la columna, flujo, tipo de detector, velocidad de incremento de
temperatura, tiempo de incremento, tiempo de la corrida, sensibilidad, imprimir
etc.). Los parmetros a cambiar aparecen en video inverso, los nuevos valores
se ingresan con el teclado numrico seguido de la tecla programable con la
funcin ENTER F8.
Para el FID utilizar gas de arrastre H2/aire - nitrgeno y para el HWD y DCE
nitrgeno.

RECOMENDACIONES
1- Verificar conexiones del gas de arrastre
2- Al encender el equipo deje la puerta del horno ligeramente abierta, de este
modo el horno no calienta.
3- Usar una velocidad de gas portador segn el dimetro de la columna ( 1/8 =
20 a 30 ml/min o = 60 a 80 ml/min).
4- Mantener una presin de 20 psi para el gas portador. Igualmente para el
mtodo a desarrollar se debe evaluar.
5-La preparacin de los parmetros para un anlisis se hace en modo Terminal.
6-La muestras deben ser voltiles y se debe tener unos patrones de referencia.
7- Para apagar el instrumento se deben modificar (bajar valores de temperatura)
los parmetros trmicos y de esta forma si se puede finalizar.
8- Llene el formato de registro de hoja de vida del instrumento.

TECLADO
Teclas de funciones
1-INST/TERM. Pasa del modo Terminal al modo instrumento o viceversa. Acepta
el mtodo.
2-PAGE: En el modo instrumento cambia la pantalla entre pagina de control y
pagina de estatus. En el modo Terminal pasa de la pagina uno a la dos y as
sucesivamente.
3-SCROLL KEYS: Teclas de avance, para avanzar de la lnea presente de
teclas programables en la pantalla siguiente.
4_^: En el modo instrumento incrementa la atenuacin ATTN del cromatograma
por un factor de dos, En el modo Terminal desplaza el cursor.
5- V: En el modo instrumento disminuye la atenuacin ATTN del cromatograma
por un factor de dos. En el modo Terminal desplaza el cursor.
6-SET ZERO: Activa el modo de control, hace que actualice la lnea base del
detector.
7-CLEAR: Borra cualquier entrada numrica que este en proceso. Borra
mensaje de error.

8-RUN: Para iniciar un anlisis. Debe presionarse simultneamente con la


inyeccin de la muestra, una vez aparezca en la pantalla READY.
9-GOTO: nicamente se activa durante la corrida. Sirve para detener una corrida
o calentar el horno a la mxima temperatura.
Teclas programables
Su funcin cambia durante la operacin del instrumento y se muestra en una fila
de ocho recuadros en la parte inferior de la pantalla.
Son las teclas F1( acepta el mtodo), F2, F5(guarda el mtodo, se le coloca el
nombre del anlisis) F8 (trae el mtodo)
Teclas numricas: Son diez teclas del 0 al 9, un signo menos y un punto.
METODO DE OPERACIN
El cromatgrafo opera de dos modos: El modo Terminal y el modo instrumento.
a- Modo Terminal. En este modo el cromatgrafo es enlazado al mtodo
apropiado para ejecutar un anlisis. Las funciones disponibles en el modo
Terminal varan dependiendo de las operaciones con que venga el
instrumento. Hay ciertas funciones disponibles en cada instrumento, estas
funciones son :
- Mtodo: Para generar el mtodo analtico dentro de los rangos de
temperatura y tiempo.
-

Desviaciones de la corrida: Lista cualquier desviacin del mtodo durante


una corrida, incluyendo aquellas que fueron entradas a travs del teclado.
Reloj. Sistema de reloj, calendario y cronometro.
Configuracin. Muestra la configuracin fsica del cromatgrafo.
Pre/post. Comandos que se utilizan para la calibracin y compensacin
automtica de la lnea base.

b- Modo Instrumento (corrida analtica). Es usado cuando el instrumento esta


ejecutando un anlisis. Los parmetros analticos se presentan en la pantalla
y si el cromatgrafo tiene opcin grafica instalada, es posible ver el
cromatograma en tiempo real.

Potencimetro
OBJETIVO: Determinar la concentracin de oxigeno disuelto con un Ion
selectivo en muestras de aguas.

MATERIALES Y REACTIVOS: Equipo y muestras de agua.


1. Sature la esponja con agua en el calibrador e inserte la sonda tan lejos
como se pueda.
2. Conecte el equipo a una fuente de 110 V.
3. Encienda el equipo con el interruptor ON/OFF que se encuentra en el
panel trasero y conecte la sonda al conector de oxigeno. Espere a que se
polaricen los electrodos de 10 a 20 min.
4. Oprima y sostenga MODE hasta que el cursor de la pantalla aparezca
CAL
5. Presione rpidamente MODE. La pantalla mostrar 3 lneas centrales,
verifique que el valor que aparece en la pantalla sea entre 0,7 y 1,2, y as
podr calibrar y trabajar en la medicin. Si no se logra, consultar al profesor
o al asistente de laboratorio sobre la solucin de llenado y la membrana
semipermeable.
6. Retire el electrodo del tubo de reserva e introdzcalo dentro de la muestra a
analizar, asegurndose que el termistor de acero inoxidable este
completamente sumergido. ( 250 mL)
7. Oprima MODE y escoja las unidades de medida.
8. Tome la lectura de la concentracin de oxigeno disuelto y la temperatura.
cuando se estabilice.
9. Repita las mediciones.
10. Limpie el electrodo de Ion selectivo con bastante agua, apague y registre
sus datos en la hoja de control del equipo.
11. Para ampliar la informacin lea el manual del equipo.

Espectrofotmetro de absorcin atmica

OBJETIVO:
Describir el proceso
de
utilizacin
apropiada
espectrofotmetro de absorcin atmica para el anlisis de metales.

del

MATERIALES Y REACTIVOS: Equipo de absorcin atmica


Manual de operacin del equipo
Muestra problema, patrones.

1.
2.
3.
4.

Observe las condiciones iniciales de cmo se encuentra el instrumento.


Prenda el estabilizador del equipo
Encienda el equipo. oprima el botn naranja POWER
Coloque la (s) lmpara (s) en el compartimiento respectivo (lado izquierdo)
teniendo de gua los orificios y la orientacin de cada una.
5. Ajuste el amperaje segn lo indicado en la caja de la lmpara.
6. Espere 10 minutos. dando tiempo a la estabilizacin de las lmparas
7. La lmpara que no va a utilizarse debe mantener el amperaje en 0.
8. Ajuste el control de ancho de banda espectral, la rejilla segn tabla
propuesta por el fabricante.
9. Verifique altura del quemador graduando con la rejilla, segn tabla.
10. Centre el haz de luz colocando la rejilla o el aditamento para este fin,
asegurando que el haz de luz pase por toda la mitad.
11. Ajuste la longitud de onda en nm (TABLA), bajando el seguro, registrando
el dato y luego asegurando hacia arriba la palanca. Igualmente el botn de
scan en posicin de apagado o con la perilla hacia abajo.
12. Pase el botn SIGNAL PROCESSING a INTEG y programe el equipo.
13. En el teclado de integracin oprima ITG (se sugiere mnimo 2) y de el valor
con el teclado numrico y oprima E.
14. Oprima la tecla C1 y digite el valor de concentracin (definido en el
manual), el estndar 1 debe ser el de menor concentracin, pulse dos
veces E para ingresar el dato.

15. Oprima la tecla C2 y digite el valor de concentracin (definido en el manual),


el estndar 2, debe ser el de mayor concentracin, pulse dos veces E.
(Recuerde que debe ser el doble de la concentracin del primero.)
16. Oprima RPT y digite el nmero de repeticiones, seguido de E.
17. En emisin, direct y off ajuste el mayor valor de absorcin (todos los
controles a la izquierda).
18. Prenda la campana extractora.
19. Abra la vlvula del aire y ajuste la presin de salida a 2,5 bares. Presin
interna del equipo 1,5 Kg/cm2 y su rata de flujo sea 8-10 L/s.
20. Abra la bomba del acetileno (Vlvula izquierda) y verifique con el
manmetro izquierdo del tanque. Presin interna 20-25 Kg/cm2, ajuste la
presin de salida 0,8-1,0 Kg/cm2 y verifique presin interna del equipo 0,5
Kg/cm2, rata flujo 2,0-2,5L/min.
21. Verifique la entrada de los gases y su flujo oprimiendo el botn FLOW

CHECK.

22. Ajuste el botn MODE a HCLAMB, el SIGNAL PROCESSING a DIRECT y


AUTOCALIBRACION en ON.
23. Oprima el botn IGNITION para encender la llama en el quemador.
24. Introduzca la cnula blanca en un vaso con agua destilada presionando
ZETO SET y espere que el equipo marque 0,000.
25. Agite fuertemente la solucin 1 que se va a utilizar.
26. Introduzca la cnula en el recipiente que contenga el estndar de menor
concentracin, deje que absorba 5 segundos y oprimir STD 1, espere que el
equipo marque la absorbancia y repita segn el numero de repeticiones que
defini en la calibracin.
27. Espere que el equipo marque la concentracin.
28. Si desea omitir algn dato de absorbancia, pulse el botn OMIT y el numero
del dato seguido de la tecla E dos veces.
29. Si no desea omitir ningn dato, oprimir OMIT seguido de dos veces la tecla
E.
30. Repita el procedimiento con el STD 2.
31. Ya calibrado el equipo se procede con la muestra problema, oprimiendo el
botn MEASURE, espere que imprima el dato de absorbancia, y repita
segn las veces que se halla especificado del RPT.
32. Si no se va a realizar mas determinaciones extinga la llama cierre la
vlvula primero del acetileno (oprima el botn flow check hasta que la
aguja marque cero) y luego la del aire hasta que se, luego oprima FLOW
CHECK, para sacar los gases del equipo. Las agujas de lo medidores
deben quedar en cero - cero.
33. Apague la lmpara, desconctela y gurdela en la caja en posicin vertical.
Apague el equipo y el estabilizador, djelo enfriar, tpelo y apague la
campana extractora.
34. Llene la hoja de control de manejo del equipo.
Recomendaciones
Leer el manual de operacin del instrumento.
Asesorarse del instructor o del asistente del laboratorio en todo momento.
No manipular el instrumento cuando la presin del acetileno este por debajo
de 4 Bar.
En lo posible corra una muestra patrn de concentracin conocida y alta
pureza para asegurarse que el instrumento esta funcionado muy bien.

Espectrofotmetro infrarrojo
OBJETIVO: Describir el proceso de utilizacin apropiada del equipo Infrarrojo
FTIR Nicolet Impact 410 a muestras de referencia slidas, liquidas o en fase de
vapor.
MATERIALES Y REACTIVOS:
Equipo infrarrojo
Celda para lquidos o prensa para slidos.
Bromuro de potasio seco y grado espectroscpico.
1. Encienda el computador y espere que cargue Windows.
2. En la pantalla aparece un cuadro de dialogo, seleccione el modo de
operacin OMNIC, de clic dos veces en l o bien de OK.
3. En el cuadro de dialogo siguiente confirme la operacin dando OK.
4. Al desplegar la pantalla seleccione la opcin COLLECT.
5. Elegir COLLECT BACK GROUND, no se debe tener muestra. Observe la
forma de la grafica y su significado. Luego coloque un patrn de poliestireno
(collect sample) para apreciar las bandas de absorcin caractersticas y el
comportamiento del equipo.
6. La pantalla nos muestra un espectro blanco y luego aparecen las del
compuesto aromtico.
7. Proceda a realizar la pastilla de la muestra (totalmente seca, anhidra, hacer
prueba con CuSO4) con KBr o ensamble la celda para lquidos. Seguir
procedimiento de las guas del fabricante.
8. Introduzca el porta muestras al I.R.
9. Hacer clic el COLLECT y luego en COLLECT SAMPLE.
10. La pantalla nos muestra el espectro de la muestra problema.
11. Para ver el espectro en absorbancia o transmitancia cambiamos en la
funcin PROCESS.
12. Para suavizar la lnea de trazado hacer clip en PROCESS y luego en AUTO
SMOOTH. Coloque los nombres de la muestra y el usuario. Asigne los
valores de absorcin a las bandas ms representativas.
13. Para imprimir el espectro hacer clip en FILE y luego en PRINT.
14. Ya teniendo el espectro, proceder a sacar la muestra del porta muestras,
limpiar y entregar.
15. Para salir del programa se sale como cualquier programa Windows.

OJO NOTAS:
El equipo NUNCA DEBE APAGARSE. Asegurarse que el estabilizador
este prendido (encendido y en rojo)

La proporcin para empastillar es 1 de muestra por 3 de bromuro (1 a


50), tomando la medida con una micro esptula. Secos
Grabe o almacene sus ensayos con cuidado. Elimine los ***
Lave siempre las celdas con acetona y algodn, nunca con agua.
Controle la humedad y el color de la silica gel.
Registre en la hoja de control del instrumento las determinaciones,
nombre del estudiante y algunas observaciones pertinentes.

Colormetro

OBJETIVO: Describir el proceso de utilizacin apropiada del equipo


COLORIMETRO SPECTRONIC 20 para la cuantificacin de sustancias en el
rango visible.
MATERIALES Y REACTIVOS: Colormetro Spectronic 20.
Manual del colormetro spectronic 20 y las muestras coloreadas.

1. Observe las condiciones de cmo encuentra el equipo.


2. Encienda el estabilizador y el equipo (botn izquierdo inferior) y deje
calentarlo por 15 minutos.
3. Ajuste la longitud de onda a trabajar, con el botn de mando de longitud de
onda (dial superior derecho).
4. Ajuste el control de 0,0 con el botn de encendido en la escala de
transmitancia.
5. Colocar en el porta muestras el blanco o disolvente segn la tcnica, cerrar
bien la cubierta.
6. Llevar la aguja hasta el 100% en la escala de transmitancia (botn derecho
de la parte inferior).
7. Coloque cada uno de los patrones en el porta muestras y anote la
respectiva lectura en % de transmitancia.
8. Coloque la muestra problema y lea el valor en transmitancia, anote la
lectura y haga los clculos correspondientes.
9. Para realizar una curva espectral defina un patrn de concentracin
conocida y vari el rango de longitud de onda ajustando todas las veces el
0 y 100 % de T. Con mucho cuidado mueva estos botones y tenga
tranquilidad para no ir a daar el equipo.
10. Apagar el equipo y el estabilizador, lavar los tubos y tapar el equipo.
11. Registre sus datos en la hoja de control del equipo.

3.3
DESCRIPCIN DEL PROCESO PARA LA OBTENCIN DEL PRODUCTO
QUMICO (A NIVEL EXPERIMENTAL)
A nivel laboratorio se llevo a cabo la obtencin de vino de mango, en base a esto
se realizo un diagrama de flujo, se estimaron los balances de materia y energa los
cuales se realizaron con los equipos que se van a utilizar a nivel planta piloto y el
diagrama de distribucin en planta del proceso de vino de mango
3.3.1 Diagrama de flujo del proceso qumico
El proceso para la elaboracin de vino de mango a nivel planta se describe
mediante 14 etapas, las cuales se distribuyen en 5 reas productivas. Cada rea
tiene un propsito especfico y cada etapa incluye ciertas entradas y salidas que
controladas adecuadamente optimizan el proceso.

La primera rea del proceso se denomina Supervisin de la materia prima (color


violeta claro en el diagrama), que tiene como propsito entregar al proceso una
materia prima que cumpla con los requisitos de calidad especficos para que sta
sea considerada apta para la elaboracin del vino de mango. Esta primera rea
consta de dos etapas; recepcin y seleccin, en la etapa de recepcin se recibe la
materia prima por parte del proveedor autorizado y se verifica que la fruta
corresponda a la especie de inters, a continuacin se almacena y se preserva en
bodega a 4C durante mximos 4 das. La segunda etapa es la de seleccin, en
donde se clasifica la materia prima almacenada de acuerdo a grado de
maduracin y caractersticas fsicas para definir los mangos aptos que entran al
proceso.
Los mangos seleccionados entran a la segunda rea del proceso, denominada
pretratamiento de la materia prima (color naranja claro en el diagrama) que tiene
como propsito entregar un sustrato listo a partir del mango para empezar la
fermentacin, esto se lleva a cabo mediante 5 etapas; lavado, escaldado,
descortezado, despulpado y finalmente licuado dilucin. La etapa de lavado se
realiza con el fin de retirar tierra, ltex y dems residuos que pueda contener la
fruta que son indeseables para el proceso, los mangos lavados entran a la
siguiente etapa, el escaldado, cuyo fin es ablandar la corteza y eliminar
microorganismos patgenos, esto se logra mediante un tratamiento trmico con
agua caliente y vapor a 60 C por 10 minutos, los mangos escaldados continan
a la etapa de descortezado, en donde de forma manual se retira la corteza del
mango, estos siguen a la etapa de despulpado, cuyo fin es retirar la semilla de la
fruta y permitir que la pulpa del mango entre a la etapa final del pretratamiento, un
licuado-dilucin, el cual busca como primera medida, reducir el tamao de la fibra
presente en la pula, y adems, preparar un sustrato o mosto, de composicin
20% pulpa de mango y 80% agua, que es la concentracin optima para que se
lleve a cabo la fermentacin.
El mosto preparado en el rea de pretratamiento entra a la tercera rea del
proceso, denominada Fermentacin (color azul en el diagrama), que tiene como
propsito realizar la adecuacin del microorganismo en el sustrato de trabajo, para
posteriormente llevar a cabo el proceso qumico y transformacin de la materia,
dando como resultado la bebida fermentada. Esto se logra por medio de dos
etapas; Preparacin del inoculo y fermentacin. En la preparacin del inoculo se
adecua el microorganismo de trabajo en un porcentaje del mosto preparado, y a
continuacin este se mezcla con el porcentaje restante de mosto, para que el
mosto o sustrato ya inoculado entre a la siguiente etapa de fermentacin, la cual

busca transformar los azucares fermentables en etanol, para as obtener en


aproximadamente ocho das una bebida fermentada con sabor a mango.
La bebida fermentada contina a la cuarta atapa, Separacin y purificacin (color
verde en el diagrama) que tiene como propsito darle transparencia y brillo a la
bebida fermentada retirando slidos, fibra presente, biomasa producida y
partculas coloidales. Esto se lleva a cabo mediante tres etapas; Filtracin,
clarificacin, y filtracin centrifuga. En la filtracin se busca retirar la mayor
cantidad de las partculas grandes presentes en la bebida, como la fibra y parte
de biomasa, la bebida filtrada continua a la siguiente etapa, la clarificacin, que
tiene como objetivo retirar las partculas ms finas que no fueron removidas en la
filtracin, esto se logra con la adicin de un agente coagulante que aglomera estas
partculas facilitando su posterior remocin, lo cual se realiza con la filtracin
centrifuga, de este modo se obtiene una bebida translucida y brillante,
denominada vino de mango.
El vino de mango contina a la quinta y ltima rea del proceso, Empaque (color
rosa en el diagrama) cuyo objetivo es entregar un vino de mango listo para ser
consumido, esta rea consta de dos etapas, embotellado y pasteurizacin. En la
etapa de embotellado, se dosifica el vino en botellas de vidrio de 750 mL, las
cuales continan a la ltima etapa de pasteurizacin, donde se busca eliminar
microorganismos patgenos en el vino, esto se logra a travs de un tratamiento
trmico con vapor caliente y agua fra aplicados directamente en cada botella. De
este modo finaliza el proceso y se obtiene un vino de mango con estndares de
calidad apto para el consumo humano.
El diagrama de bloques que ilustra las etapas que hacen parte del proceso de
obtencin de vino de mango con sus respectivas entradas y salidas se muestra a
continuacin:

3.3.2 Diagrama de bloques y balance de materia del proceso qumico


Al determinar las reas y las etapas para la obtencin del vino de mango, se
realizaron los balances de materia y energa para la obtencin de vino de mango
de azcar que se presentan a continuacin.
En el balance de materia se encuentran las entradas de las materias primas a
utilizar y sus cantidades para una produccin de un lote de 250 litros de vino de
mango, tambin se muestran los residuos generados durante el proceso y sus
respectivas cantidades.
Para el proceso de produccin de vino de mango se necesitan 84,75 Kg de mango
de azcar de los cuales una parte sale como de material de rechazo, a
continuacin la materia prima entra al rea de pre tratamiento donde se utilizan
aproximadamente 10 litros de agua por minuto para lavado y sale agua residual,
en la siguiente operacin, escaldado, entra agua caliente y como residuo se
obtiene agua en forma de vapor y agua residual, posteriormente se realiza un
descortezado donde sale un 8% de corteza del peso total que equivale a 6,78 Kg,
despus se realiza un despulpado, donde sale el 17 % de semillas equivalente a
14,4075 Kg, en la siguiente rea de fermentacin, entran 63,56 Kg de pulpa de
mango a la etapa de licuado y dilucin, y se utilizan 254, 25 litros de agua para
bajar la concentracin de la pulpa y llevarlo a una proporcin de 80% agua y 20%
de pulpa, de esta operacin se obtienen 317,81 litros de jugo que entran a un
tanque de almacenamiento, en este punto se divide el jugo en dos partes un 40%
sale a la etapa de inoculacin, en la cual se utilizan 15,890 litros de levadura en
medio liquido, la otra parte del jugo que es el 60% sale como sustrato para
inocular, posteriormente en la etapa de fermentacin se unen el inoculo y el
sustrato donde salen 333, 70 litros de fermentado que luego entran al rea de
separacin y purificacin, en la primera etapa de esta rea, filtracin, entra el jugo
fermentado a una filtro prensa donde se retiran un 20 % del total de slidos de
fibra y biomasa que contiene la bebida, el fermentado que sale de esta operacin
entra a una clarificacin donde se adiciona un 2% de agente clarificante respecto a
la cantidad total de fermentado que sale de la filtracin, a continuacin pasa la
bebida fermentada a una filtracin centrifuga donde se elimina un 5% de slidos
en suspensin que no han sido retirados en la primera filtracin, luego el vino de
mango entra al rea de empaque, donde se embotellan 250,2773 litros en botellas
de 750 ml, y finalmente el producto embotellado se somete a una pasteurizacin
donde se eliminan microorganismos patgenos y el producto queda listo para ser
distribuido.

Consolidado de balance de materia


Kg DE MANGO
Kg PULPA DE MANGO
L AGUA POTABLE
L JUGO TOTAL
L CALDO MALTA
L INOCULACION
ENTRADAS
L FERMENTACION
L FILTRACION
L CLARIFICACION
L FILTRACION 2
L FILTRACION SIN BORRA
L PASTEURIZACION
Kg CORTEZA DE MANGO
Kg SEMILLA
KG PULPA DE MANGO
SALIDAS L JUGO TOTAL
L INOCULACIN
L SUSTRATO
L FERMENTACION

84,75
63,5625
254,25
317,8125
15,890625
190,6875
333,703125
333,703125
5,33925
272,30175
250,2773438
250,2773438
6,78
14,4075
63,5625
317,8125
190,6875
127,125
333,703125

Consolidado de balance de energa


Para realizar la produccin de un lote de 250 litros de vino de mango el cual tarda
una semana en llevarse a cabo, es necesario la implementacin de una serie de
equipos, los cuales consumen una cantidad de energa dependiendo del tiempo
que estos operen, en este caso la energa total consumida se divide en dos:
energa en forma de calor, la cual es aprovechada por equipos como la
escaldadora que se opera 0,16 horas y consume una energa 102,6585 Kcal,
una caldera la cual trabaja durante todo el proceso es decir 192 horas semanales
y consume
1478282,524 Kcal, un pasteurizador
que funciona 1 hora
consumiendo 172,0813 Kcal. La energa en forma de potencia la cual engloba
equipos como: bombas centrifugas las cuales consumen 16 HP por un tiempo de
4 horas, un fermentador el cual funciona durante 8 das o 192 horas y que
requieren 230,4 HP. Estos son algunos de los ejemplos de los equipos que se
encuentran en la siguiente tabla, en la cual se observa el nmero de equipos, el
tiempo de trabajo y la cantidad de energa consumida, adems de la cantidad de
energa total neta, las prdidas de energa por friccin en tuberas de
aproximadamente un 30% , el total de energa consumida por semana y el costo
de esta en pesos colombianos para la obtencin de la bebida fermentada de
mango de azcar.

ENERGIA NETA POR SEMANA


PERDIDAS DE ENERGIA POR SEMANA
ENERGIA TOTAL POR SEMANA
ENERGIA EN FORMA MECANICA EN HP
ENERGIA EN FORMA DE CALOR EN KCAL
COSTO TOTAL DE ENERGIA EN $ POR
SEMANA

Energa en
HP
2581,38
774,41
3355,80

Energa en KW
1924,94
577,48
2502,42

276,95
1478557,26
$ 443.981,30

Energa en forma de potencia


Equipo

Energa
por equipo
en HP/H

Nmero
de
equipos

Tolva (energa en forma mecnica)


Banda transportadora
Despulpadora
Tornillo sin fin
Licuadora
Tanque de almacenamiento
Bomba centrifuga
Fermentador
Filtro prensa
Tanque de agitacion
Filtro centrifugo
Embotelladora

0,5
1
2
1,4751
1
0,4425
1
1,2
2,0115
0,4425
0,75
0,5

1
3
1
1
1
2
4
1
1
2
1
1

Energa
equipos
totales en
HP/h
0,5
3
2
1,4751
1
0,885
4
1,2
2,0115
0,885
0,75
0,5

horas gastadas
por equipos para
cochada de 250 L
de vino
2
5
0,2
1
3
1
4
192
2
2
2
3

Energa total gastada


en HP/semana
(cochada de 250 L de
vino)
1
15
0,4
1,4751
3
0,885
16
230,4
4,023
1,77
1,5
1,5

Energa en forma de calor


Equipo
Escaldadora (energa en forma de
calor)
Caldera
Pasteurizador

Energa
por equipo
en HP/H

Nmero
de
equipos

Energa
equipos
totales en
HP/h

horas gastadas
por equipos para
cochada de 250 L
de vino

Energa total gastada


en HP/semana
(cochada de 250 L de
vino)

Energa total gastada


en Kcal/semana
(cochada de 250 L de
vino)

0,160

0,16

102,6585086

12
0,2682

1
1

12
0,2682

192,000
1,000

2304
0,2682

1478282,524
172,081325

3.3.3 Descripcin de especificaciones tcnicas de equipos para el proceso en


planta.
Para llevar a cabo el proceso productivo del vino de mango a nivel planta piloto se
requieren una serie de equipos con caractersticas y especificaciones las cuales
estn detalladas en el manual de planta seccin.

4.

EJECUCIN DE ENSAYOS Y ANLISIS FSICOS, QUMICOS Y


MICROBIOLGICOS

4.1
PLAN DE MANEJO Y DISPOSICIN DE RESIDUOS GENERADOS EN EL
PROCESO QUMICO (ANEXO DE REGISTRO DE CLASIFICACIN DE
DISPOSICIN FINAL DE RESIDUOS GENERADOS EN LOS ENSAYOS.
ALISTAMIENTO)
A continuacin se muestra la matriz de residuos, donde se identifica el tipo de
residuo, la cantidad generada y los anlisis previos a realizar a cada uno para su
previa disposicin, es importante resaltar que la matriz se realiza con el fin de
determinar los residuos generados en el proceso, siendo esto necesario para el
proyecto de formacin.
Esta matriz se muestra a travs de dos tablas las cuales estn divididas en las 5
reas de proceso establecidas para la obtencin de vino de mango, en la primera
tabla se encuentra el tipo de residuo, una breve descripcin, los anlisis a realizar
y la disposicin final que se les dar. En la segunda se determina el tipo de
residuo generado en cada rea (solido, liquido o gas), el riesgo que puede
presentar que se divide en peligroso y ordinario, la descripcin y la cantidad de
residuo generado por lote que se basa en el balance de materia realizado para el
proceso. La matriz se controla y verifica por medio de los supervisores de cada
rea de proceso, los cuales son los encargados de inspeccionar que los
parmetros establecidos se estn cumpliendo de la mejor manera posible, dando
solucin a las fallas que se pueden presentar a lo largo de la obtencin del vino de
mango.

4.2
.DESCRIPCIN DE TOMA DE MUESTRA (REGISTROS DEL PROCESO
DE TOMA DE MUESTRA.
Tanto para la elaboracin del vino de mango como para realizar los ensayos de
caracterizacin y control de calidad del mango de azcar, previamente se realiza
una toma de la muestra siguiendo un plan de muestreo descrito en la seccin 2.3,
la ejecucin de este plan de muestreo y la toma de la muestra
PASO 1: se ubico el lugar donde se
tomo
la

muestra teniendo en cuenta la calidad


del producto.

PASO 2: se
representativa.

PASO 3: Posteriormente se peso la


muestra.

PASO 4: se empaco la muestra


siguiendo el debido proceso.

tom

la

muestra

PASO 5: se sell bien la bolsa donde se deposit la muestra.

4.3
REFERENCIA DEL PRINCIPIO DE ANLISIS (ANEXOINSTRUCTIVOS DE
ENSAYO)
Determinacin de nitrgeno y de protenas por el mtodo kjeldhal
Para realizar la determinacin de este parmetro en una muestra de mango, se
llevo a cabo una digestin en la cual se utiliza acido sulfrico concentrado en
presencia de un catalizador para oxidar hasta dixido de carbono y agua el
hidrogeno, oxigeno y carbono proteico en presencia de calor, despus de esto el
residuo generado se destila con hidrxido de sodio al 40% para la liberacin del
amoniaco y este es recogido en vapor de agua para que se genere el hidrxido de
amonio que posteriormente es recolectado en acido brico y titulado con acido
clorhdrico previamente estandarizado. De este modo se puede conocer la
cantidad de nitrgeno presente y por medio de un factor se calcula la cantidad de
protena contenida en la muestra.
Determinacin de hierro y cobre por espectrofotometra de absorcin
atmica en el vino de mango.
La determinacin de estos metales de realizo hallando la densidad de la bebida
para as saber
cuanto volumen corresponda a un gramo del fermento, la
alcuota tomada se le efectuo una dilucin , posteriormente se realizo la lectura en
el equipo de absorcin atmica con los respectivos patrones de calibracin para
hallar la concentracin en la muestra, en el equipo por medio de una llama

compuesta por un oxidante que es el aire y un combustible que es el acetileno se


llevan los metales presentes a un estado elemental, al irradiar la nube atmica
generada con una luz monocromtica se presentan transiciones electrnicas de
los niveles atmicos de energa del estado basal a uno excitado , de esta forma
se determino la concentracin de hierro y cobre en la bebida alcohlica.
Determinacin del porcentaje de etanol y metanol en el vino de mango por
cromatografa de gases.
Para la determinacin del porcentaje de etanol y metanol se prepararon patrones
de metanol, etanol y propanol, este ultimo se utilizo como patrn interno. Para
realizar la cuantificacin de los alcoholes se empleo una columna capilar y como
gas portador hidrogeno, en la columna se realizo la separacin por pesos
moleculares de los compuestos a estudiar dando como resultado un 0.56% de
etanol y 0% de metanol. Estos valores se compararon con los parmetros en la
NTC 708, Vinos de frutas, dando como resultado que la bebida obtenida no se
consideraba un vino de frutas por su bajo porcentaje alcohlico.

4.4
DESCRIPCIN
MICROORGANISMO

DEL

AISLAMIENTO

IDENTIFICACIN

DEL

En el proceso de obtencin del vino del mango se realiza una fermentacin


alcohlica, esta fermentacin es mediada por microorganismos los cuales se
deben aislar e identificar.
En este caso el aislamiento fue realizado con una muestra solida y una muestra
liquida, la muestra solida, un mango de azcar y la muestra liquida, una muestra
de banano que fueron adecuadas para realizar diluciones y posteriores siembras
en cajas de Petri con PDA. De estas siembras se seleccionaron aquellas cajas
que al realizar la identificacin macroscpica y microscpica presentaron
desarrollo y crecimiento de levaduras
A las colonias seleccionadas por aislamiento, se le realizaron
pruebas
bioqumicas para determinar cul era la ms optima en el proceso fermentativo.
De dichas pruebas se defini que el microorganismo que se adecuara a medio
lquido seria la muestra a partir de banano, pues de esta se obtuvieron resultados
ms contundentes comparados con los obtenidos por la muestra de mango.
Los microorganismos provenientes de la muestra de banano fueron
implementados en el proceso de fermentacin para la obtencin del vino de
mango.
Para mayor informacin acerca del aislamiento e identificacin del microorganismo
dirjase al anexo B.

4.5

RUTA BIOQUMICA PARA LA OBTENCIN DEL METABOLITO

Dentro del proceso de obtencin de vino de mango intervienen microorganismos,


los cuales son los encargado de transformar los azucares presentes en la materia
prima en etanol por medio de la ruta metablica de glucolisis.
Esta ruta comprende una secuencia de reacciones catablicas intermediadas por
enzimas que convierten la glucosa en piruvato. Esta conversin de una molcula
de glucosa a dos molculas de piruvato se acompaa de la conversin neta de
dos molculas de ADP en ATP, que se obtiene por medio de 10 reacciones.
El piruvato producido por glucolisis tiene varios destinos posibles, en condiciones
anaerobias el piruvato es convertido a lactato, pero tambin con la implementacin
de varios microorganismos es posible la obtencin de productos diferentes.
Para el caso del proyecto donde se implementan levaduras que convierten el
producto obtenido de la glucolisis (piruvato) en etanol se necesitan condiciones
anaerobias, es decir en ausencia de oxigeno, para que se obtenga de esta manera
el metabolito de inters vino de mango.
4.6

DIAGRAMA DE FLUJO DEL PROCESO BIOTECNOLGICO

Para la obtencin del vino del mango se implementa un proceso biotecnolgico


para este caso una fermentacin alcohlica mediada por microorganismos dicho
proceso se desarrolla en dos grandes etapas. Por un lado se tiene la preparacin
del sustrato y por el otro se tiene el aislamiento del microorganismo.
Se empieza entonces con la preparacin del sustrato, para ello es importante
establecer la concentracin exacta que se va a utilizar en el proceso, ello se
realiza mediante pruebas de concentracin para este caso se realizaron dos, una
de ellas con una concentracin de 100g en un litro de agua y la otra de 200g en un
litro de agua, por literatura consultada y recomendacin del instructor se estableci
que la concentracin con la cual se desarrollara el proceso seria de la de 200g en
un litro.
Al haber sido establecida la concentracin se procedi entonces a la preparacin y
adecuacin del sustrato, ello se hace pesando 200g de pulpa de mango que se
licuan en un litro de agua y se transfieren a un frasco de dilucin de 1000mL que
ha sido previamente esterilizado. Para este caso no fue necesario modificar las
condiciones del sustrato como pH ni adicin de macronutrientes y micronutrientes
pues se encuentra dentro de parmetros establecidos en la literatura para correcto
desarrollo de la fermentacin.
Finalmente se realiza entonces una esterilizacin del sustrato en ciclo de
autoclave por quince minutos con la tapa del frasco semi abierta.
Paralelamente a la preparacin del sustrato se realiza el aislamiento del
microorganismo el cual empieza con la toma de 10mL de una muestra de banano

en descomposicin que se transfiere a un frasco de dilucin de 90m el cual es


llevado a volumen. A partir de la anterior se realizaron tres diluciones y de estas se
tomo 0,1mL para sembrar en cajas con PDA siendo incubadas a 27C durante
cuatro das.
Pasados los cuatro das se realizo la identificacin macroscpica y microscpica
escogiendo de todas ellas la colonia que mayor cantidad de levaduras en
reproduccin presentara; a dicha colonia se le realizo el aislamiento por estra,
despus de realizado el aislamiento se procedi con pruebas bioqumicas para
establecer si el microorganismo metaboliza azucares y los convierte en etanol.
Como resultado de estas pruebas se pudo comprobar que el microorganismo
utiliza como fuente de carbono la glucosa con la cual realiza el proceso de
fermentacin.
Con la certeza de que el microorganismo metaboliza azucares se procede
entonces a llevar medio liquido para este caso caldo malta. Cuando se realiza esta
adecuacin se contina con la generacin de biomasa aproximadamente 120mL
de la misma.
A este punto ya est todo listo para proceder a inocular el sustrato, este se realiza
tomando 120mL de biomasa que son adicionados a 600mL de sustrato de mango,
el sustrato ya inoculado es dejado en Shaker a 27C y 135 rpm durante 24 horas.
Pasadas las 24 horas se adiciona 280mL de sustrato de mango hasta llegar a un
volumen final de 1000mL, se deja nuevamente en Shaker a 27C y 130 rpm
durante 8 das.
Al cabo de los 8 das se procedi a realizar filtracin al vacio y se envaso en
recipientes de vidrio de 250mL previamente esterilizados y rotulados.
Finalmente se realizo una pasteurizacin la cual consiste en poner la botella de
vino a bao mara durante 5 minutos a una temperatura de 80C, pasados los 5
minutos se transfiere la botella de vino a bao frio durante otros 5 minutos y se
deja en nevera para posteriores anlisis.
A continuacin se presente el diagrama de flujo el cual sintetiza el proceso de
obtencin de vino de mango a nivel experimental (laboratorio).

FLUJOGRAMA DEL PROCESO BIOTECNOLGICO

Alistamiento sustrato

1. Alistamiento de cepas
Cultivo de la levadura en medio
solido

Realizacin de pruebas de
concentracin

Adecuacin del
microorganismo a medio
lquido

Preparacin y adecuacin del


sustrato

Esterilizacin del sustrato

Generacin de biomasa

Inoculacin del
sustrato
Desarrollo de la fermentacin, llevar a temperatura de 27c a
130 rpm
Supervisin y control de variables
involucradas

Inactivacin de la fermentacin

Filtracin

Embotellado

Pasteurizacin

5.
IMPLEMENTACINDEL PROCESO QUMICO Y/O BIOTECNOLGICO
TENIENDO EN CUENTA CONTROL DE ENSAYOS Y SUPERVISIN DE
VARIABLES.
5.1

DESCRIPCIN DEL PROCESO CON DIAGRAMA PFD

A partir del diagrama de bloques se genero un diagrama de equipos con la


distribucin en planta para la obtencin de la bebida; de color morado se
encuentra el rea de supervisin de materia prima en la cual se observan
equipos como una tolva y una banda transportadora, en el rea de pretratamiento
de materia prima la cual se denota de color naranja se encuentran las duchas de
aspersin, la despulpadora, el tornillo sin fin el cual realiza el transporte de la
pulpa de mango, la licuadora y un tanque en donde se almacena el sustrato
generado en el licuado, el rea tres que se resalta de color azul esta constituida
por bombas las cuales realizan el transporte del fluido, un tanque en el cual se
desarrolla la inoculacin de una parte del sustrato y dos tanques en lo que se
lleva a cabo la fermentacin, en el rea de separacin y purificacin de color verde
se utiliza un filtro prensa, un tanque clarificador y un filtro centrifugo para la
remocin de los slidos presentes en el fermento y por ultimo de color rojo se
encuentra el rea de empaque la cual
posee una embotelladora y un
pasteurizador, al final de todo este proceso se logra el producto deseado; vino de
mango.

5.2
PROGRAMA DE SUPERVISIN DEL PROCESO QUMICO QUE
IDENTIFIQUE LAS REAS Y PERSONAL RESPONSABLE DE CADA UNA DE
LAS ACTIVIDADES (FORMATOS PARA LA RECOLECCIN DE INFORMACIN
DEL PROCESO QUMICO ANEXOS)
Las listas de verificacin del proceso de obtencin de vino de mango, estn
diseadas para cada una de las reas del proceso ( supervisin de la materia
prima, pre tratamiento, fermentacin, separacin y purificacin y empaque) y sus
respectivas etapas, e incluyen el objetivo de cada rea, y los indicadores de cada
etapa con el fin de comprobar que las variables presentes se controlen y se
cumplan de acuerdo a la operacin que se realiza, siguiendo la documentacin
que se requiere en cada etapa, como son formatos, registros, fichas de
caracterizacin, y normas relacionadas con la operacin que se est verificando,
se encuentra tambin el personal que se encarga de supervisar lo anteriormente
mencionado.
6.
EVALUACIN Y MONITOREO DEL PROCESO QUMICO
6.1
DESCRIPCIN DE NO CONFORMIDADES O CORRECCIONES
RESULTANTES DE LA EVALUACIN
Al realizar el proceso la separacin y purificacin de la bebida fermentada se
presentan dificultades en algunas de las etapas que comprenden este proceso,
tanto las causas como las posibles soluciones de esta problemtica en la
elaboracin del vino de mango se evalan y sintetizan en la siguiente matriz.

PROBLEMATICA

Debido a la cantidad de
slidos presentes en la
bebida fermentada, a la
hora de realizar la
filtracin se provoco la
obstruccin del medio
filtrante demorando el
proceso de separacin
de la biomasa y fibra
afectando directamente
todo el proceso.

ETAPAS

Filtracin.

CAUSA

SOLUCIN

Las dos posibles


La fibra
soluciones pueden
procedente del ser; retirar la fibra del
mango de azcar sustrato de mango
y la biomasa
generado en el
generada en la
licuado antes de
fermentacin
iniciar el proceso de
causa la demora
fermentacin, o
en el proceso
utilizar un equipo con
aumentando el
un medio filtrante de
tiempo en esta
mayor capacidad
etapa.
para disminuir el
tiempo en el rea de

separacin y
purificacin.
La eleccin del
El objetivo de la
agente y su dosis
separacin y
ptima se
purificacin es obtener
determina con un
una bebida traslucida y
test de jarras, el
brillante, lo cual no se
cual implica el uso
logro despus de
de 6 litros de
realizar las etapas que clarificacin
bebida
se plantean para este
fermentada,
fin, por esto se
debido a que se
establecen causas y
elabora tan solo 1
posibles soluciones
litro fue imposible
para optimizar el
determinar el
proceso.
agente coagulante
y su dosis ptima.
El filtro membrana
es empleado para
Debido a la baja
separaciones con
capacidad del equipo la
baja cantidad de
filtracin centrifuga no
slidos, al haber
se realizo por esta
presente fibra y
razn se empleo un
filtracin biomasa genero el
filtro de membrana de
taponamiento del
0,2 micrmetros
filtro, adems
aumentando la cantidad
provoco que la
de tiempo en la etapa.
bebida filtrada
fuese de bajo
volumen.

Se recomienda
producir mayor
volumen de
fermentado
(alrededor de 7
litros) para
determinar dosis de
agente coagulante
mediante el ensayo
de test de jarras.

La solucin mas
efectiva y
correspondiente a la
etapa es utilizar un
filtro centrifugo que
tenga una capacidad
requerida para el
proceso,
minimizando el
tiempo.

6.2
ACCIONES CORRECTIVAS Y DE MEJORA, SEGN LOS RESULTADOS
OBTENIDOS EN EL PROCESO QUMICO.
En el proceso de obtencin de la bebida alcohlica se presentaron inconvenientes
que se dieron en el rea de separacin y purificacin, dentro de las etapas de esta
rea se proponen soluciones con el fin de mejorar el proceso.
En la etapa de filtracin la cantidad de slidos presentes en el fermento provoco la
obstruccin del medio filtrante del equipo y por esta razn se proponen dos
posibles soluciones, las cuales son: emplear un medio filtrante de mayor
capacidad o retirar la fibra antes de iniciar la fermentacin, al presentarse este
inconveniente en la etapa de filtracin se vio afectado directamente el proceso ya
que provoco demora en la operacin.
En la etapa de clarificacin la produccin de un bajo volumen de fermento fue la
causa del problema, ya que no se pudo realizar el ensayo para determinar la
dosis optima de coagulante, en este caso si se realiza una produccin de mayor
volumen se solucionara la falla en esta operacin.
Por ultimo en la etapa de filtracin centrifuga, el equipo que se utilizo fue de baja
capacidad y el tiempo que requera esta etapa aumento, la mejor y nica opcin
es evitar la utilizacin de equipos de baja capacidad del lecho filtrante y as no
provocar demoras y posibles cuello de botella en el proceso.

BIBLIOGRAFIA
NTC 2322; VIDRIO. MATERIAL DE VIDRIO PARA LABORATORIO.
BALONES VOLUMTRICOS DE UN SOLO TRAZO.
NTC 2175: 1986, Material de vidrio para laboratorio. Buretas. Requisitos
generales.
NTC 2198: 1986, Material de vidrio para laboratorio. Pipetas graduadas.
NTC 2052: 1985, Material de vidrio para laboratorio. Pipetas aforadas (de un solo trazo).

NTC 2321: 1987, Material de vidrio para laboratorio. Probetas graduadas.


http://www.uhu.es/gem/docencia/fisica-amb-ita/fis-amb-2.pdf 18/02/2011
http://tplaboratorioquimico.blogspot.com/2008/08/bureta.html 17/02/2011
http://concurso.cnice.mec.es/cnice2005/93_iniciacion_interactiva_materia/c
urso/materiales/propiedades/volumen.htm 18/02/2011
http://tplaboratorioquimico.blogspot.com/2008/09/probeta.html 18/02/2011
http://www.monografias.com/trabajos34/instrumentallaboratorio/instrumental-laboratorio.shtml
http://www.utu.edu.uy 17/02/2011
http://tplaboratorioquimico.blogspot.com/2008/08/matraz-de-aforo.html
19/02/2011
http://es.quimica.wikia.com/wiki/Matraz_aforado 19/02/2011
http://es.scribd.com/doc/5203044/Medios-de-Cultivo-y-PruebasBioquimicass
http://www.uamenlinea.uam.mx/materiales/licenciatura/diversos/AQUIAHUA
TL_RAMOS_MARIA_DE_LOS_ANGELES_Manual_de_practicas_de.pdf

ANEXOS
ANEXO A.
LABORATORIO NO 6
Calibracin del material volumtrico
Fecha: 30-Marzo-2011
OBJETIVOS
Objetivo General:
Verificar adecuadamente la calibracin del material volumtrico siguiendo los
parmetros establecidos y las indicaciones de las normas NTC.
Objetivos Especficos:
Determinar mediante los ensayos de calibracin la precisin y exactitud del
material volumtrico.
Realizar adecuadamente y con las debidas precauciones la verificacin de la
calibracin del material volumtrico.
Lograr una buena prctica de laboratorio con la ayuda de las instrucciones del
profesor, las normas NTC y los conocimientos previos.

MARCO TEORICO:
BALONES VOLUMTRICOS DE UN SOLO TRAZO
Tomando como referencia y documento de consulta la norma tcnica colombiana
NTC 2322; VIDRIO. MATERIAL DE VIDRIO PARA LABORATORIO. BALONES
VOLUMTRICOS DE UN SOLO TRAZO. Se aplican varios conceptos que se
deben tener en cuenta para realizar una correcta verificacin de la calibracin de
un baln volumtrico o baln aforado.
Unidad de volumen: La unidad de volumen tomada es el cm 3, aunque tambin se
puede utilizar el nombre de mililitro (ml).

Temperatura de referencia: Es la temperatura estndar de referencia a la que el


baln volumtrico debe contener du capacidad nominal, esta temperatura es
generalmente 20 C.

Series de capacidades y Precisin: La capacidad de un baln volumtrico se


define como el volumen de agua a 20 C, expresado en mililitros, contenido por el
baln a 20 C cuando est lleno hasta la lnea de graduacin.
Las series de capacidades para los balones volumtricos de un solo aforo, en
mililitros, son las siguientes:
5 - 10 -25 - 50 - 100 - 200 - 250 - 500 - 1 000 y 2 000.
La capacidad del baln no diferir de su capacidad nominal ms que en el error
mximo permitido, indicado en la Tabla 1. Existen dos clases de precisin; A para
grado alto y B para grado bajo.
Capacidad Nominal

Error mximo permitido


Clase A

5
10
25
50
100
200
250
500
1 000
2 000

0,025
0,025
0,04
0,06
0,10
0,15
0,15
0,25
0,40
0,60

Tabla 1. Error mximo permitido en capacidad


mililitros

Clase B
0,05
0,05
0,08
0,12
0,20
0,30
0,30
0,50
0,80
1,20

valores en

Lnea de graduacin: La lnea de graduacin ser ntida, permanente y uniforme,


con un espesor que no exceda de 0,4 mm, situada en un plano paralelo a la base
del baln y ser trazada sobre toda la circunferencia del cuello.

*Construccin
Material: Los balones volumtricos sern construidos con vidrio que posea
propiedades qumicas y trmicas adecuadas y que en lo posible est libre de
defectos visibles y razonablemente libre de tensiones internas. Los balones
volumtricos tendrn una construccin robusta para asegurar su uso normal y el
espesor de pared ser de preferencia uniforme.

Forma: El cuerpo del baln tendr preferiblemente la forma indicada en la imagen


1, de manera que posea una base amplia sobre la cual se mantenga
verticalmente, sin oscilar.

Capacidad nominal

Altura sin tapn

Dimetro del bulbo

Dimetro de la base

Imagen 1.

Cuello: El cuello del baln ser aproximadamente cilndrico con excepcin del el
esmerilado (si los hay), sin variaciones excesivas en su dimetro interno y espesor
de pared. El eje del cuello ser perpendicular a la base del baln. El extremo del
cuello de un baln de cuello liso terminar en un reborde reforzado.
Tapn: Si el baln est provisto de tapn, ser adecuado al cuello del baln y
podr fabricarse de vidrio o de un material plstico inerte.
Dimensiones: Los balones volumtricos cumplirn con las dimensiones indicadas
en la Tabla 2. Las dimensiones recomendadas en la Tabla 3 son nicamente
aproximadas, pero sirven de orientacin para casos prcticos de uso. La lnea de
graduacin estar ubicada en el segundo tercio inferior del cuello del baln y la
distancia mnima desde la lnea de graduacin hasta cualquier punto donde
cambie el dimetro interno del cuello, ser la especificada en la Tabla 2.
Tabla 2. Dimensiones

Capacidad
nominal (ml)

Dimetro interno del cuello en la lnea


de graduacin
Clase A

5
10
25
50
100
200
250
500
1 000

Clase

6 a 10

6a8
8 a 10
10 a 12
12 a 14
14 a 17
14 a 17
17 a 21
21 a 25

Distancia mnima desde la lnea de


graduacin hasta cualquier punto
donde cambie el dimetro interno del
cuello
5
5
5
10
10
10
10
15
15

5
10
25
50
100
200
250
500
1 000
2 000

70
90
110
140
170
210
220
260
300
370

22
27
40
50
60
75
80
100
125
160

15
18
25
35
40
50
55
70
85
110

Tabla 3. Dimensiones recomendadas

Dimensiones en milmetros

Inscripciones: En todos los balones volumtricos se marcarn en forma indeleble


las siguientes inscripciones:
a) El nmero que indica la capacidad nominal
b) El smbolo "cm3" o el smbolo "ml" para indicar la unidad de volumen
c) La inscripcin "20 C" para indicar la temperatura estndar de referencia
d) Una abreviatura apropiada para indicar que el baln ha sido ajustado para
contener la capacidad indicada. Con el fin de evitar dificultades de lenguaje, se
recomienda utilizar las letras "In"
e) La letra "A" o (cuando se considere necesario) "B" para indicar la clase de
precisin del baln volumtrico
f) El nombre del fabricante o la marca

g) En el caso de balones con tapn intercambiable, se marcar sobre el cuello y


sobre
el tapn el nmero de la junta.
BURETA:
Son tubos largos graduados, de dimetro interno uniforme en toda su extensin,
se usan para emitir cantidades variables de lquido con gran exactitud y precisin,
y por lo tanto, presentan varias subdivisiones las cuales permiten realizar una
descarga controlada del lquido que est contenido en ella.
Mayores especificaciones en la NTC 2175: 1986, Material de vidrio para
laboratorio. Buretas. Requisitos generales.

Imagen 2
PIPETA GRADUADA:
Es un elemento de vidrio que es utilizado para dar volmenes exactos con bastante
reproducibilidad, con esta pipeta, se pueden medir distintos volmenes de lquido, ya que lleva
una escala graduada.
Las especificaciones en cuanto a los parmetros establecidos para una pipeta graduada y calibrada
se encuentra en la NTC 2198: 1986, Material de vidrio para laboratorio. Pipetas graduadas.

Imagen 3

PIPETA VOLUMTRICA:

Es un elemento de vidrio, que posee un nico valor de medida, por lo que slo puede medir un
volumen especfico, esto aparentemente es una desventaja pero en cuanto a precisin y exactitud
es un instrumento bastante competitivo.
Las pipetas graduadas permiten medir volmenes intermedios, pues estn graduadas, mientras
que las pipetas volumtricas slo miden el volumen que viene indicado en ellas.
Las especificaciones con respecto a este material se encuentran en la NTC 2052: 1985, Material de
vidrio para laboratorio. Pipetas aforadas (de un solo trazo).

Imagen 4
PROBETAS:
Tubo de cristal o borosilicato alargado y graduado, cerrado por un extremo, usado
como recipiente de lquidos o gases, el cual tiene como finalidad medir el volumen
de los propios. Cabe denotar que este instrumento por sus caractersticas clasifica
en el material volumtrico de contencin.
Las especificaciones referentes a este instrumento se encuentran consignadas en
la NTC 2321: 1987, Material de vidrio para laboratorio. Probetas graduadas.

Imagen 5

DIAGRAMA DE FLUJO

Inicio

Coja un baln aforado de 100 ml


prguelo con una solucin de
alcohol etlico y acetona.

En una balanza analtica pese el


baln sin lquido y bien seco.

Agregue agua destilada hasta el


afore.

Pese el baln con el lquido hasta


el afore en una balanza analtica y
registre el dato obtenido.

Desocupe el baln y agregue


una o dos chorros de alcohol
etlico y uno o dos chorros de
acetona.

Deseche la solucin de acetona


y alcohol etlico presente en el
baln.

Seque el baln con el calor


corporal de su mano.

Realice el mismo procedimiento


establecido en los pasos 3, 4, 5,
6 y 7 hasta obtener 5 datos en la
balanza.

Fin

MATERIALES
Pipeta graduada
Baln aforado de 100 mL
Pipeta volumtrica de 20 mL
Probeta de 100 mL
Pipeta aforada de 2 mL
Bureta de 50 mL
Balanza analtica
Erlenmeyer
Gotero
Reactivos
Acetona
Agua des ionizada
Alcohol etlico

DATOS, RESULTADOS Y ANLISIS DE RESULTADOS.

Grupo 1: PIPETA GRADUADA TABLA 1


ANALISIS DE RESULTADOS
Segn los datos obtenidos de la pipeta graduada se puede deducir que la pipeta
es bastante reproducible porque su porcentaje de precisin es considerablemente
alto, por otro lado se puede decir que la medida 5 tuvo un valor bastante
aproximado al valor terico y un error porcentual bajo, de esto se deduce que la
medida fue muy exacta. Si se observa la incertidumbre porcentual del dato numero
9 se observa que se obtuvo un valor muy elevado, por lo tanto su precisin estuvo
muy lejos del valor que se esperaba. Al notar los datos consignados en la tabla de
las medidas podemos inferir en que posiblemente las medidas 9 y 10 al momento
de recolectar los datos no se realizo de forma correcta lo que altero los resultados.
Por los porcentajes de exactitud, precisin y dems datos presentados en la tabla
podemos decir que este instrumento se encuentra descalibrado lo que hace que el
volumen se vea afectado a la hora de medir cantidades que requieran de una alta
exactitud y precisin.
Grupo 2: BALON AFORADO
Tabla 2: baln aforado de 100 ml a 19C
ANALISIS DE RESULTADOS, grupo 2.
Al pesar el agua contenida en un baln aforado de 100 mL, y este peso convertirlo
matemticamente a volumen con el dato de la densidad del agua a 19 C (0,9982),
la precisin calculada fue 99,8854, lo que nos indica que los valores en un ensayo
de repetitibilidad, la desviacin estndar va a tender a cero, con esto concluimos
que es un instrumento con bastante precisin. Al calcular la exactitud, nos dio un
resultado de 99,8665, el cual no est muy alejado del valor terico; que debera
ser 100 mL, por ende es un valor que presenta muy poco error porcentual, por
esto podemos decir, que el instrumento es tambin muy exacto.
Si comparamos la exactitud con la precisin, el baln aforado, tiene un pequeo
grado ms de precisin que de exactitud, un 0,01994 ms exactamente. Aunque
desde los dos puntos de vista, podemos afirmar que este instrumento esta
calibrado.
Grupo 3: PIPETA AFORADA (20 ml)
Tabla 3.1: Datos de la pipeta aforada A (20 mL) de forma individual
Tabla 3.2: Datos de la pipeta aforada B (20 mL) de forma individual.
ANLISIS DE RESULTADOS. Grupo 3
Despus de conocer e interpretar los datos tomados por nuestros compaeros del
peso del agua contenida en dos pipetas aforadas de 20 mL, y este dato, dividido
sobre la densidad del agua a 19C (0,99849) nos da el resultado del volumen
exacto hallado matemticamente, de agua destilada que contenan cada una de
las pipetas aforadas, con estos datos determinamos la precisin y exactitud con

gota y sin gota de estos valores comparados con el valor terico que es 20 mL. Y
luego comparamos las dos pipetas aforadas en cuanto a su calibracin.
Con la pipeta aforada A, al calcular el volumen con gota y con este calcular los
datos, obtuvimos una precisin y una exactitud de 99,5565 y 99,1829, que
comparado con el volumen calculado sin gota y sus respectivos datos de precisin
y exactitud, que fueron 99,8973 y 99,5592, concluimos que para tomar la medicin
de un volumen de 20 mL mas exacto y preciso, lo ideal es realizarlo sin tener en
cuenta la gota que queda en la punta de la pipeta, esto es debido a que algunas
pipetas son calibradas descontando esta gota desde el momento de su
fabricacin.
Con la pipeta aforada B, al calcular la precisin y exactitud del volumen contenido
teniendo en cuenta la gota, obtuvimos 91,8389 y 94,3843 respectivamente, estos
valores nos indican que esta pipeta, a diferencia de la anterior est bastante
descalibrada, pero esto puede deberse a que a la hora de llenar la pipeta con
agua, el menisco no estaba tangente a la lnea de afore, lo que a la hora de pesar
esta cantidad de agua, vara significativamente. Analizando ahora los datos de
precisin y exactitud obtenidos sin tener en cuenta la gota, los valores son
93,1116 y 94,75255 respectivamente, que al igual que los datos obtenidos con
gota, son bastante imprecisos e inexactos, pero aun as, la incertidumbre
porcentual y el error porcentual son un poco ms bajos que al momento de hacer
la medida teniendo en cuenta la gota.
Si comparamos la pipeta aforada A, con la pipeta aforada B, segn los datos
reportados y calculados, podemos asumir que la pipeta aforada A es mucho ms
precisa y exacta que la B, o vindolo desde otro punto de vista podemos inferir
que la pipeta aforada A esta bien calibrada, mientras que la pipeta B no. Esta
conclusin nos lleva a decir que esto se debe a que probablemente la
descalibracin se deba al trato y al tiempo de uso que ha tenido este material,
aunque lo ms seguro es que a la hora de realizar la prctica, los datos del peso
del agua contenida en la pipeta aforada B, fueron mal tomados por la persona
encargada, esto lo concluimos analizando los datos y lo distantes que estuvieron
unos con otros y lo alejados frente al valor terico esperado.

Grupo 4: PROBETA DE 100 (ml) Tabla 4


ANALISIS DE RESULTADOS: Grupo 4
Segn los datos obtenidos podemos afirmar y corroborar con la tabla all
planteada que la probeta es un instrumento el cual es poco reproducible debido a
que su precisin es bastante baja, obteniendo como precisin ms alta un
resultado de 98,94417583 frente a otros instrumentos ms precisos que se pueden
implementar en el laboratorio; este instrumento a la hora de llevar a cabo una medicin

no es el ms apropiado ya que su desviacin oscila entre 0,4 y 1,3, otro dato que nos
corrobora esta afirmacin es el margen de error que presenta ya que es muy elevado
frente a otros instrumentos ms competitivos a la hora de observar su margen de error.
Con esto concluimos inicialmente que la probeta al ser un instrumento de contencin mas
no de transferencia no es el ms indicado para realizar medidas que requieran una alta
precisin y exactitud, puesto que segn los resultados obtenidos no es la ms confiable,
tambin nos indica que el material esta descalibrado lo que nos impide realizar medidas
reproducibles. Otro factor que pudo haber influido en los resultados fue mala toma de los
datos por parte del personal encargado.
Grupo 5: PIPETA AFORADA 2(ml)
ANALISIS DE RESULTADOS: Grupo 5
Al analizar los datos recolectados, podemos observar que la pipeta, se
aproxima al valor terico esperado, pero aun as mirando la proporcin de la
medida sin gota varia relativamente el valor que nos arroja el instrument frente
a la medida en la cual se tiene en cuenta la gota, con esto podemos decir que la
medida que no tiene en cuenta la gota es ms precisa pero menos exacta con
respecto a la medida en la cual se tiene en cuenta la gota la cual es ms exacta
y menos precisa que la anterior. Con lo cual concluimos que si necesitramos
realizar una medida con mayor precisin escogeramos la pipeta en la cual no
se tiene en cuenta la gota, pero si necesitramos una medida con mayor
exactitud requeriramos la pipeta en la cual se tiene en cuenta la gota.
Grupo 6: BURETA DE 50(ml) tabla 6
ANALISIS DE RESULTADOS: Grupo 6
Tras realizar una serie de ensayos con la bureta y un numero de pesadas
podemos observar que este instrumento presenta una serie de datos que al ser
vistos desde un ngulo critico no es bastante reproducible, ya que presenta una
precisin baja y una incertidumbre alta. podemos ver en la tabla que en ciertos
datos aumenta y luego se reduce significativamente lo que nos indica que los
datos no son constantes lo que hace que se alteren los resultados, haciendo que
en ciertos casos que requieran exactitud no lo haga de la forma ms adecuada y
fiable, con lo que concluimos, que la bureta al ser un instrumento de transferencia
no est dando la precisin y la exactitud que se espera hacia un material
volumtrico lo que nos indica finalmente que la bureta esta descalibrada.

CONCLUSIONES
Se determino mediante los ensayos de calibracin la precisin y exactitud del
material volumtrico.
Se realizo adecuadamente y con las debidas precauciones la verificacin de la
calibracin del material volumtrico.
Se Logro una buena prctica de laboratorio con la ayuda de las instrucciones
del profesor, las normas NTC y los conocimientos previos.
Se observaron los datos tomados por los dems grupos y se les realizo los
respectivos clculos y anlisis para verificar la calibracin de dichos
instrumentos.
ANEXO B
INFORME DE MICROBIOLOGA
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE UN MICROORGANISMO CAPAZ DE
FERMENTAR LA GLUCOSA PARA OBTENER UNA BEBIDA ALCOHOLICA
A PARTIR DEL MANGO DE AZCAR (MANGIFERA INDICA L)
RUBEN DARIO CANRO FARIAS
JEISSON FERNANDO CRUZ MENDOZA
JENNY ANDREA PERALTA BARRETO
VILMA ROCIO CASTAEDA ESPINOSA
HERNAN DARIO PEREZ SANTOS
ALEXANDRA MONTEALEGRE TOVAR
INSTRUCTORA:
Etna Milena Snchez Castelblanco
SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE - SENA
CENTRO DE GESTIN INDUSTRIAL
TECNOLOGA EN QUMICA APLICADA A LA INDUSTRIA
BOGOT, D.C.
2011

RESUMEN
Para la realizacin del aislamiento de levaduras se ejecutaron ciertas prcticas
las cuales se presentan en este informe, el cual contiene en su estructura una
secuencia de contenidos, conceptos y metodologa que permite que se siga un
procedimiento adecuado para llegar a unos resultados y posteriormente su
respectivo anlisis.
El orden de los contenidos presenta un orden lgico comenzando por las
tcnica de esterilizacin que se le realizaron, seguido por la preparacin del
medio de cultivo, la realizacin de la respectiva siembra donde se obtuvo el
microorganismo que ms adelante fue definido mediante identificaciones
macro y microscpicas de la colonia que se obtuvo, para luego realizar las
tcnicas de frotis y tincin de Gram, para poder definir el tipo de
microorganismo que se est trabajando.
Luego del aislamiento de los microorganismos se comprob el metabolismo de
estos, lo cual se logr utilizando las diferentes pruebas bioqumicas para las
levaduras, en este caso se utilizaron kliger, rojo de metilo y TSI, con el fin de
comprobar si el microorganismo fermenta azucares para la implementacin en
el proyecto de formacin cuyo objetivo es la obtencin de una bebida
alcohlica a partir de la fermentacin del mango de azcar (mangifera Indica
L).
2. INTRODUCCIN
El proyecto de formacin Sena tiene como fin la obtencin de una bebida
alcohlica a partir de la fermentacin del mango de azcar (Mangifera Indica
L) mediado por la levadura sacchromyces cerevisiae, para lograr este objetivo
es de vital importancia realizar un aislamiento del microorganismo de inters lo
cual se ha ejecutado durante tres sesiones de formacin del rea de
microbiologa.
Esto agiliza y facilita la asimilacin del proyecto que se va a llevar a cabo
proporcionando teora y principios bsicos del tema, adems posibilita la
aplicacin de estos conceptos y contenidos, teniendo en cuenta los diferentes
cuidados que se deben tener a la hora de la realizacin de las prcticas y
tambin un logro de los objetivos propuestos despertando un sentido crtico y
analtico basado en el marco de investigacin seria y responsable que se
realiz.
El informe que se presentar a continuacin contiene la informacin sobre las
practicas realizadas (siembra, aislamiento por agotamiento y pruebas
bioqumicas) el modo en el cual fueron llevadas a cabo, los resultados y el
anlisis realizado a cada uno de ellos. Para as determinar que medio de
cultivo es el adecuado para extraer el microorganismo de inters.
3. OBJETIVOS
3.1. OBJETIVO GENERAL

1. Aislar e identificar una levadura capaz de fermentar el mango de azcar


(Mangifera indica l ). para la obtencin de una bebida alcohlica.
3.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS
2. Adquirir el conocimiento bsico sobre los microorganismos, en especial las
caractersticas morfolgicas y microscpicas.
3. Controlar y adquirir las habilidades necesarias para la manipulacin en el
laboratorio de los microorganismos.
4. Establecer posibles medios de cultivo donde se puede encontrar el
microorganismo de inters.
5. Aplicar las tcnicas de esterilizacin de materiales de vidrio para facilitar y
permitir la posterior siembra del microorganismo de manera asptica.
6. Preparar los medios de cultivo y hacer su respectiva siembra.
7. Realizar la identificacin macroscpica de las diferentes colonias obtenidas
en la siembra.
8. Llevar a cabo el recuento en placa para verificar las unidades formadoras
de colonia.
9. Realizar la identificacin microscpica de las colonias implementando
tcnicas de tincin diferencial (tincin de gram).
10. Ejecutar las tcnicas de aislamiento en medios de cultivo solido para la
obtencin de un cultivo puro, aplicando la tcnica de agotamiento superficial.

11. Desarrollar pruebas bioqumicas en medios de cultivo con sustratos


especficos con el fin de demostrar actividades metablicas de la levadura
aislada.
12. Concluir a partir de los resultados obtenidos la efectividad del
microorganismo aislado para la aplicacin en nuestro proyecto de formacin.
4. MARCO TEORICO
Los microorganismos tienen una gran capacidad de sobrevivencia y
diversidad, debido a esto se han podido adaptar a diferentes cambios

ambientales incluyendo condiciones extremas de tipo fsico y qumico. Estos


sobreviven gracias a su forma, velocidad de reproduccin y cambios
genticos. En el caso de las levaduras (unicelulares) las cuales son
eucariotas, es decir tienen un ncleo definido se caracterizan por su gran
tamao 10-100 mm, crecen a temperaturas de 20- 26 C, en condiciones de
pH de 6,5-4,5 y son microorganismos aerobios facultativos lo cual indica que
pueden crecer en ausencia o presencia de oxigeno. La obtencin de energa y
fuentes de carbono la realizan por medio de materia orgnica
(quimiorgantrofo), reproducindose por gemacin donde se forma una yema
de la clula madre que ms adelante se separa como clula individual.
Generalmente los microorganismos son inoculados en medios de cultivo los
cuales contienen todos los elementos indispensables que requieren para
crecer, estos pueden ser lquidos o slidos (agar) para que se d su
propagacin, conservacin y as poder estudiar sus caractersticas de
crecimiento. Para que se de este crecimiento se utilizan tcnicas de
esterilizacin para obtener cultivos totalmente puros (que se encuentren
microorganismos de una sola especie) y no se d ninguna clase de
contaminacin, esto se logra trabajando cerca del mechero o en cabina de
flujo laminar. La esterilizacin con calor seco (mechero) que destruye los
microorganismos y hmedo (auto clave) que se aplican para esterilizar medios
de cultivo, soluciones en el que se utiliza vapor de agua a presin para
alcanzar temperaturas de 121 C durante 15 minutos para asegurarse de la
destruccin de endosporas las cuales son muy resistentes al calor, estos son
los procedimientos ms utilizados en microbiologa, esto se realiza en las asas
y en todo el material de vidrio que se va a utilizar durante la prctica.
Como se sabe los microorganismos forman colonias, las cuales son formadas
por una clula madre que es visible al ojo del ser humano (morfologa
macroscpica) all se observa la forma, superficie, consistencia, elevacin,
color y tamao donde tambin se puede realizar un recuento en placa para
determinar las unidades formadoras de colonias (UFC) inoculadas en el agar.
En la morfologa microscpica es necesario utilizar un microscopio ptico
debido al pequeo tamao de los microorganismos, para esto se utiliza la
tcnica de frotis que se prepara haciendo una extensin del microorganismo
sobre un portaobjetos fijndolos con calor y posteriormente la tincin de gram
utilizando reactivos como los son el cristal violeta, el lugol, alcohol-acetona y
fucsina, los cuales se dejan durante un tiempo determinado y se enjuaga
luego de la aplicacin de cada uno de ellos, para que as los microorganismos
puedan ser observados de una manera ms fcil al microscopio y all
determinar qu clase de microorganismos fueron los que se obtuvieron en el
medio de cultivo.

Las tcnicas de aislamiento permiten la obtencin de microorganismos a partir


de medios de cultivo en las que hay una gran diversidad de microorganismos
agrupados (colonias) as como para comprobar la pureza de los cultivos
obtenidos. Este aislamiento se puede dar en cultivos slidos por estra para
que se d un agotamiento del microorganismo, es decir cada microorganismo
se separa y da origen a una poblacin que formara una colonia caracterstica.
Cuando se tenga el microorganismo aislado se debe comprobar si fermenta
glucosa, lactosa y/o sacarosa y produce cidos, para esto se inoculan los
microorganismos en diferentes tipos de medios de cultivos para conocer las
actividades metablicas, para este caso en kliger, rojo de metilo y TSI para
que se d su diferenciacin e incluso su identificacin, se toma la muestra de
la colonia aislada con un asa de siembra recta previamente esterilizada y
enfriada se pica en el fondo del tubo que contiene kliger y se incuban a 35-36
C durante 24 horas, se realiza este mismo procedimiento para TSI y para
MRVP se le agregan 4 a 5 gotas de rojo de metilo se agita y se observan los
resultados.
PRUEBAS BIOQUMICAS
Prueba de kliger
Medio de cultivo frecuentemente usado en microbiologa para la diferenciacin
de enterobacterias y levaduras en base a la fermentacin de la glucosa,
lactosa y la produccin de acido sulfhdrico.
Instrucciones: Suspender 54.8g del polvo en un litro de agua destilada.
Mezclar bien y calentar con agitacin frecuente, hervir 1 o 2 minutos hasta
disolucin total. Llenar hasta la tercera parte de los tubos de ensayo.
Esterilizar a 121 oC por 15 minutos. Dejar enfriar con pico de flauta.
Fundamento:
1. El rojo de fenol es el indicador de pH y el cloruro de sodio mantiene el
balance osmtico. El agar es el agente solidificante.
2. Por fermentacin de azcares se producen cidos, que se detectan por
medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en menor cido.
3. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrogeno el que reacciona
luego con una sal de hierro proporcionando el tpico sulfuro de hierro color
negro.
Resultados
1. Pico alcalino / fondo acido (pico rojo / fondo amarillo): El microorganismo
fermenta solamente glucosa
2. Pico acido / fondo acido ( pico amarillo/ fondo amarillo): el microorganismo
fermenta glucosa y lactosa

3. Pico alcalino / fondo alcalino (pico rojo /fondo rojo): el microorganismo no es


fermentador de azucares.
4. La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el
microorganismo produce gas.
5. El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce acido
sulfhdrico.
TSI (TRIPLE SUGAR IRON)
Introduccin
El agar triple azcar hierro es un medio nutriente y diferencial que permite
estudiar la capacidad de produccin de cido y gas a partir de glucosa,
sacarosa y lactosa en un nico medio. Tambin permite la deteccin de la
produccin de H2S. Es un medio til para la identificacin de enterobacterias.
Principio
El agar se prepara en forma de pico de flauta. Esto determina que existan dos
cmaras de reaccin dentro del mismo tubo. La porcin inclinada (pico)
expuesta en toda su superficie al oxgeno es aerobia y la porcin inferior
(fondo) est protegida del aire y es relativamente anaerobia. Al crecer un
microorganismo en el TSI, el pico tiende a virar al pH alcalino (color rojo por el
rojo fenol) por la produccin de aminas, debido a la utilizacin aerobia de las
peptonas. En el fondo del tubo -donde no hay oxgeno- la degradacin de
peptonas es menor y no se generan aminas, de manera que se pueden
detectar la produccin de pequeas cantidades de cido (color amarillo por el
rojo fenol). Si se inoculan microorganismo no fermentadores no se formarn
cidos, pero por la produccin de aminas en el pico, todo el medio quedar
rojo. La glucosa en el TSI est en una proporcin 10 veces menor que la
lactosa y la sacarosa. Si el TSI es inoculado con una bacteria fermentadora de
glucosa pero no de lactosa ni de sacarosa, la cantidad de cido producida por
fermentacin ser baja (porque la cantidad de glucosa inicial es baja
Procedimiento
Inocular los tubos de TSI con punta (alambre recto). Para eso introducir la
punta hasta 3 a 5 mm del fondo del tubo. Tras retirar la punta del fondo, estriar
el pico con un movimiento hacia uno y otro lado. Incubar a 35 C durante 1824 hrs, pero no ms de 24 hrs.
Interpretacin de resultados
Para el TSI siempre se informa el resultado en el siguiente orden: pico, fondo,
produccin de gas y H2S.
1. Pico alcalino/fondo alcalino (Alc/Alc/gas-/H2S-) No hay fermentacin de
azcares. Pico alcalino/fondo cido (Alc/Aci/gas/ H2S)
2. Glucosa fermentada, ni lactosa ni sacarosa fermentadas. No hay produccin
de gas ni de H2S.

3. Pico alcalino/fondo cido (Alc/Aci/gas/ H2S) Glucosa fermentada, ni lactosa


ni sacarosa fermentadas. No hay produccin de gas, si de H2S.
4. Pico alcalino/fondo negro (Alc/Aci/gas/H2S) Glucosa fermentada, ni lactosa
ni sacarosa fermentadas, produccin de gas y produccin de cido sulfhdrico
5. Pico cido/fondo cido (Aci/Aci) Glucosa y lactosa y/o sacarosa
fermentadas. Puede producirse H2S o (A/A/H2S) a estos resultados se les
agrega el resultado de la produccin de gas. Ej. Aci/Aci/gas/H2S.
ROJO DE METILO - VOGES-PROSKAUER (RM VP)
Principio
Una de las caractersticas taxonmicas que se utilizan para identificar los
diferentes gneros de enterobacterias lo constituyen el tipo y la proporcin de
productos de fermentacin que se originan por la fermentacin de la glucosa.
Se conocen dos tipos generales: la fermentacin cido-mixta y la fermentacin
del 2,3 butanodiol. En la fermentacin cido mixta se forman
fundamentalmente lctico, actico y succnico, adems de etanol, H2 y CO2.
En la va del butanodiol se forman cantidades menores de cido (acetato y
succinato) y los principales productos son el butanodiol, etanol, H2 y CO2. El
rojo de metilo es un indicador de pH con un intervalo de viraje entre 6,0
(amarillo) y 4,4 (rojo), que se utiliza para visualizar la produccin de cidos por
la va de fermentacin cido mixta. El acetil-metil-carbinol (o acetona) es un
producto intermediario en la produccin de butanodiol. En medio alcalino y en
presencia de oxgeno la acetona es oxidada a diacetilo. Este se revela en
presencia de alfa-naftol dando un color rojo-fucsia.
Procedimiento
Inocular el caldo RMVP con un cultivo puro de no ms de 24 horas del
microorganismo en estudio. Incubar a 35C durante 48 horas. Luego de
finalizado el tiempo de incubacin transferir 1 mL del caldo a un tubo limpio
para VP. En el caldo restante revelar RM agregando unas 4 - 8 gotas del
indicador rojo de metilo. Para revelar VP agregar 0,6 ml (10 gotas) de alfanaftol al 5% y 1 gota de KOH al 40%. Agitar cuidadosamente para exponer el
medio al oxgeno atmosfrico y dejarlo reposar durante 10 a 15 minutos.
Interpretacin de resultados
6. La prueba RM es positiva si se desarrolla un color rojo estable. Esto indica
que la produccin de cido es suficiente para producir el viraje del indicador y
el microorganismo ferment la glucosa por la va de cido mixta. Un color
anaranjado, intermedio entre el rojo y el amarillo no es considerado como
positivo.
7. La prueba VP es positiva si se desarrolla un color rojo-fucsia luego de 15
minutos, que indica la presencia de diacetilo, producto de oxidacin de la
acetona.

5. METODOLOGA
PREPARACIN DEL CULTIVO PDA (CONDICIONES ASPTICAS)
Para garantizar el crecimiento de microorganismos se prepararon medios de
cultivo que contienen los nutrientes necesarios ptimos para el desarrollo de
colonias microbianas.
INICIO
De acuerdo a los clculos, se pesaron 7.8g de PDA.
Se disolvieron en 100 ml de agua destilada, en un frasco de dilucin y luego
se llevo a volumen. (200ml)
Se calent la solucin hasta punto de ebullicin por un minuto.
La solucin se esterilizo en el autoclave.
Se agregaron los 200 ml en las cajas de petri, previamente esterilizadas,
adicionando 25 ml en cada caja.
FIN
Se dejo solidificar, se envolvi en papel vinipel y se llevo a la nevera.
PROTOCOLO PREPARACION DE AGUA PEPTONADA
El agua peptonada se uso para realizar las diluciones ya sea a partir de medio
slido o lquido para luego proceder a la siembra en las cajas de Petri con el
medio de cultivo que en este caso fue PDA.
Se disolvieron 3.51 de agua peptonada en 234 ml de agua destilada.
INICIO
Se fracciono el agua en tubos taparosca, 9 ml en cada uno.
Se calent hasta punto de ebullicin por 2 minutos
FIN
Se realizo el ciclo de auto clave para esterilizar
PREPARACIN DE DILUCIONES DE LA MUESTRA (CONDICIONES
ASPTICAS)
Las diluciones se realizaron con el fin de disminuir la concentracin de la
muestra, como consecuencia de esto se obtienen colonias microbianas mas
separadas unas de la otras.
INICIO
Se tomaron 10 ml de cada muestra (Banano y mango), se adicionaron en los
frascos de dilucin de 90 ml cada uno.
Para la muestra slida (mango) se realizo una previa maceracin
Se agito y se dejo reposar por cinco minutos
Posteriormente se realizaron las diluciones (10-2,10-3,10-4) partiendo de los
frascos de 90 ml que contenan las muestras.
Se sembraron en los medios previamente preparados, tomando 0.1 ml de las
diluciones.
Se llevaron a la incubadora a una temperatura de 27 C.

FIN
SIEMBRA DE LAS MUESTRAS EN LAS CAJAS DE PETRI (CONDICIONES
ASPTICAS)
La siembra en cajas de Petri se lleva a cabo de forma asptica con el fin de
que solo crezca el microorganismo de inters y no de lugar para que otros
microorganismos contaminen el cultivo, generando as un cultivo axnico.
Posteriormente se rotularon las cajas en la base de acuerdo a la muestra y
dilucin.
Se tomaron las diluciones de cada muestra y se sembraron en las respectivas
cajas de petri, utilizando el asa de vidrio previamente esterilizada.
INICIO
Se llevaron las cajas a la incubadora a una temperatura de 27 grados Celsius.
Se envolvieron en papel vinipel y luego se llevaron a la nevera.
FIN
PREPARACIN DEL FROTIS (CONDICIONES ASPTICAS)
El frotis y la tincin diferencial de Gram se realizan para identificar ms fcil y
efectivamente microorganismos al microscopio.
INICIO
Se coloco una gota de agua en el portaobjetos.
Se pincho la colonia con el asa recta, previamente esterilizada y se
homogenizo en la gota de agua.
Se dejo secar la muestra en el portaobjetos, y posteriormente se fijo
flamendola en el mechero.
Se agrego cristal violeta por un minuto y se lavo con agua.
Se agrego lugol por un minuto y se lavo con agua
Se agrego alcohol-acetona por medio minuto y se lavo con agua
Se agrego fucsina por un minuto y se lavo con agua, se dejo secar.
Se llevo la muestra al microscopio.
FIN
TCNICA DE AISLAMIENTO POR ESTRIA (CONDICIONES ASPTICAS)
Las tcnicas de aislamiento, permiten la obtencin de microorganismos a
partir de muestras complejas (Suelo, agua, alimentos etc.) en las que hay gran
diversidad microbiana, as como para comprobar la pureza de los cultivos
obtenidos.
FIN
Se envolvieron las cajas en papel vinipel y se llevaron a la nevera.
Se distribuyo la muestra de la colonia en el agar en forma de estras.
Se coloco la muestra de cada colonia en el medio de cultivo. (PDA)
Se pincho la colonia ms aislada para el aislamiento en cada muestra.
INICIO
REALIZACIN DE PRUEBA BIOQUMICA TSI

Las pruebas bioqumicas se realizan para la diferenciacin de


microorganismos, basadas en el comportamiento metablico de los mismos.
FIN
Se llevaron los tubos a la incubadora durante 24 horas y se observaron los
cambios.
Se pincho la colonia ms aislada de cada una de las muestras y se coloco en
los tubos de ensayo que contenan la prueba (TSI)
Se realizaron replicas de la prueba para cada muestra.
Se disolvieron en 100 ml de agua y se llevaron a un volumen de 210 ml.
Se inclinaron los tubos con el fin de formar picos.
Se agregaron 10 ml en cada tubo, y se dejo solidificar.
Se llevo hasta punto de ebullicin.
Segn los clculos realizados para 21 tubos de ensayo se pesaron 13.63 g de
TSI.
INICIO
REALIZACION DE PRUEBA BIOQUIMICA KLIGER
INICIO
Se pincho la colonia representativa de cada muestra, con el asa recta
previamente esterilizada.
Se coloco en los tubos de ensayo sin tocar el fondo y luego se realizo una
estra en la superficie.
Se llevaron los tubos a la incubadora durante 24 horas y se observaron los
cambios.
FIN
REALIZACIN DE LA PRUEBA BIOQUMICA MRVP (ROJO DE METILO)
INICIO
FIN
En este caso la prueba es liquida.
Se llevaron los tubos a incubadora durante 24 horas y se observaron los
cambios.
Se introdujo en los tubos de ensayo y se homogenizo.
Se pincho la colonia representativa de cada muestra.
6. RESULTADOS:
Resultados con muestra slida: (mango de azcar)
*Resultados de la siembra De la muestra slida se pesaron 10 g, los cuales
se maceraron completamente para as realizar una dilucin en 90 ml de agua
peptonada (dilucin 10-1), posteriormente se hicieron 3 diluciones, cada una
en 9 ml de agua peptonada (dilucin 10-2, y 10-4). Cada dilucin fue
sembrada en las cajas de petri debidamente rotuladas y posteriormente
llevadas a la incubadora a 27.6 C durante 36 horas para luego ser

trasladadas a la nevera. Al cabo de 4 das en la nevera se obtuvieron los


siguientes resultados:

CONCLUSIONES
Se obtuvo una bebida de mango con 0,56% de etanol, que de acuerdo
a la NTC 708, no se considera un vino de frutas.
Se defini como proceso biotecnolgico una fermentacin alcohlica
mediada por una levadura capaz de fermentar glucosa y sacarosa
produciendo etanol.
Se dise el diagrama de proceso para la produccin a nivel piloto del
vino de mango, con un total de 5 reas y 14 etapas de proceso,
contando con un total de 28 equipos.
Se identificaron las variables a modificar para optimizar la fermentacin,
estas son cantidad de oxgeno disuelto y concentracin de azcares
fermentables en el sustrato.

You might also like