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EVALUACIN DE LA EFICACIA DE LA
FAGOTIPIA COMO MARCADOR
EPIDEMIOLGICO COMPLEMENTARIO PARA
CEPAS DE SALMONELLA ENTERITIDIS
AISLADAS EN LA CIUDAD DE LUJN
2012
AGRADECIMIENTOS
INDICE
Pgina
INTRODUCCIN
11
11
1.1.1. Historia
11
1.1.2. Ecologa
14
15
16
16
1.2.2. Prevalencia
17
19
21
21
1.3.2. Aislamiento
22
23
23
1.3.3.2. Serotipo
25
1.3.3.3. Fagotipia
26
1.3.3.4. Antibiorresistencia
27
28
28
29
30
30
32
33
34
35
37
37
43
44
45
46
OBJETIVOS
48
MATERIALES Y MTODOS
50
51
51
57
4. Confirmacin
57
58
59
60
61
9. Tcnica de fagotipia
61
62
62
62
63
RESULTADOS
65
66
66
66
66
66
66
66
75
76
80
81
82
3. Fagotipificacin
83
4. Grupos de especificidad
83
94
95
DISCUSIN
98
CONCLUSIONES
105
BIBLIOGRAFA
107
FOTOGRAFAS
123
NDICE DE FIGURAS
Figura 1. Salmonella Enteritidis: aumento porcentual en las
infecciones humanas, Europa y EEUU, 1981-2000 (OMS)
17
20
20
33
36
36
41
42
42
43
45
95
NDICE DE TABLAS
Tabla 1. Especies y subespecies del gnero Salmonella
y subgrupos correspondientes
14
26
53
54
54
55
56
56
57
69
78
79
82
84
86
87
89
90
91
92
93
INTRODUCCIN
43 54 de lat. Sur,
10
1.1.1. Historia
11
13
subgrupos
1. Salmonella enterica
1.1 Salmonella enterica subesp. enterica
1.2 Salmonella enterica subesp. salamae
1.3 Salmonella enterica subesp. arizonae
1.4 Salmonella enterica subesp. diarizonae
1.5 Salmonella enterica subesp. houtenae
1.6 Salmonella enterica subesp. indica
2. Salmonella bongori
(subgrupo I)
(subgrupo II)
(subgrupo IIIa)
(subgrupo IIIb)
(subgrupo IV)
(subgrupo VI)
(subgrupo V)
Los principales reservorios son los animales de abasto (tanto de carne roja como
aves), y en menor medida las aves silvestres, roedores, insectos, peces, moluscos,
tortugas y otros. En general, todo alimento es susceptible de ser contaminado por
efluentes fecales. Salmonella se disemina en el medio natural a travs de excreciones
humanas y animales, sin multiplicarse de forma significativa, aunque puede sobrevivir
durante semanas en agua y durante aos en suelo en condiciones favorables de
temperatura, humedad y pH (Acha y col., 2001, Betancor y col., 2010, Janda y col.,
2006).
de dolor abdominal con vmito y diarrea en cantidad moderada, con sangre, moco y
tenesmo rectal, acompaado de fiebre y/o cefaleas y mialgias. Normalmente se
autolimita al cabo de 4-8 das. Ocasionalmente requiere rehidratacin parental y
hospitalizacin (Abe y col., 2004, Grisaru-Soen y col., 2004).
Amrica del Sur y Asia (Galanis y col., 2004). En la Argentina, al igual que en el resto
de Latinoamrica y el Caribe, los serotipos ms frecuentes son Enteritidis (39%) y
Typhimurium (17%) (WHO, 2000-2005).
1.2.2. Prevalencia
17
pollo, huevo crudo o parcialmente cocido, o alimentos preparados con estos (Lax y
col., 1995).
19
20
Los miembros del gnero Salmonella, si bien acordes con las caractersticas
que definen la familia a la que pertenecen, se caracterizan por no formar butilenglicol,
producir cido y eventualmente gas a partir de la fermentacin de la glucosa, de
manitol y casi siempre de sorbitol. Tambin por ser ureasa y fenilalanina desaminasa
negativos, aunque positivos para lisina y ornitina descarboxilasas. Son indol negativo
y citrato positivo, y no fermentan ni la sacarosa ni el adonitol. En medio TSI (Triple
Sugar Iron) Salmonella produce normalmente H2S. No crece en medio con cianuro de
potasio y salvo pocas excepciones (S. Gallinarum, S. Pullorum) Salmonella es mvil
por disponer de flagelos pertricos, mostrando la mayora de las cepas variacin
difsica de los antgenos flagelares (Madigan y col., 1996).
21
1.3.2. Aislamiento
22
Salmonella (Davies y col., 2001, Hoofar y col., 2000, Nollet y col., 2001, Voogt y col.,
2001).
Los medios slidos selectivos y/o diferenciales para Salmonella, se basan tanto
en la inhibicin del crecimiento de otras bacterias entricas, como en la discriminacin
visual de las colonias. A menudo se utilizan tanto la produccin de H 2S como la no
fermentacin de lactosa como caractersticas diferenciales para dicha discriminacin
visual. Dentro de este grupo, existe una variedad de medios, con mayor o menor
especificidad para aislar cepas de Salmonella. Podemos destacar los siguientes como
los ms comnmente utilizados: agar MacConkey, xilosa-lisina-desoxicolato (XLD),
xilosa-lisina-tergitol 4 (XLT4), Hektoen-Enteric (HE), Rambach (Ra), SalmonellaShigella (SS), agar verde brillante novobiocina-glicerol-lactosa (NBGL), identificacin
de Salmonella SM-ID (SM), CHROMagar (CAS), ABC mdium, o COMPASS
Salmonella agar, entre otros.
23
1.3.3.2. Serotipo
nmeros arbigos, aunque hoy los nuevos antgenos se representan con letras
(Popoff y col., 2001). Los antgenos flagelares pueden presentarse de forma
monofsica en algunas cepas, de manera que no expresan la segunda fase flagelar y
se representa con el signo -. Existen cepas monofsicas que pueden presentar
ocasionalmente la segunda fase flagelar, opcionalmente en la frmula figura el signo
- bien el antgeno entre corchetes. Aunque el serotipado no es una tcnica
rutinaria en los laboratorios de diagnstico, es una referencia obligada en los estudios
de salmonelosis.
H1
Frmula Antignica
H2
S. Paratyphi A
1,2,12
[1,5]
S. Paratyphi B
1,4,[5],12
1,2
S. I
1,4,[5],12:b:1,2
S. Typhimurium
1,4,[5],12
1,2
S. I
1,4,[5],12:i:1,2
6,7
1,2
S. I
6,7:r:1,2
9,12,[Vi]
S. I
9,12,[Vi]:d:-
S. Enteritidis
1,9,12
g,m
[1,7]
S. I
1,9,12:g,m:- 1,9,12:g,m:[1,7]
S. Pullorum(2)
1,9,12
S. I
1,9,12:-:-
S. Virchow
S. Typhi
(1)
(2)
serotipo inmvil
1.3.3.3. Fagotipia
1.3.3.4. Antibiorresistencia
29
31
Esta tcnica fue estandarizada por el CDC (Centers for Disease Control and
Prevention) en el ao 1996, para el programa de vigilancia conocido como PulseNet,
The National Molecular Subtyping Network for Foodborne Disease Surveillance, por
su capacidad en la obtencin de patrones de restriccin, su alta especificidad y
reproducibilidad entre los distintos laboratorios permitiendo caracterizar prcticamente
la totalidad de cepas patgenas estudiadas con gran poder de discriminacin
(Swaminathan y col., 2001). Actualmente, se establece como el mtodo de eleccin
para los estudios epidemiolgicos de patgenos, y entre ellos, de Salmonella
Baggesen y col., 2000, Eriksson y col., 2005, Garaizar y col., 2000, Gerri y col.,
2004, Kariuki y col., 1999, Lailler y col., 2002, Lawson y col., 2004, Lindstedt y col.,
2000, Liu y col., 2003, Ridley y col., 1998, Threlfall y col., 1996).
The next morning, on opening the, I experienced one of those moments of intense emotion which
reward the research worker for all his pains: at the first glance I saw that the culture which the night
before had been very turbid, was perfectly clear: all the bacteria had vanished, they had dissolved away
like sugar in water. As for the agar spread, it was devoid of all growth and what caused my emotion was
that in a flash I had understood: what caused my clear spots was in fact an invisible microbe, a filterable
virus, but a virus which is parasitic on bacteria.
Figura 4. Flix dHerelle. Science News 14:4459, 1949
33
35
1. Adsorcin
2. Penetracin
3. Sntesis de protenas tempranas
4. Replicacin del material gentico
5. Maduracin
6. Liberacin de los viriones maduros
1. Adsorcin
Los receptores son molculas que suelen estar situadas a nivel de la pared
celular, aunque tambin hay receptores para fagos situados en apndices, como
flagelos y fimbrias.
37
Los receptores fgicos para la adsorcin varan entre los diferentes grupos de
fagos. Las colas suelen ser los rganos de adsorcin (ms concretamente, las fibras
de la cola).
2. Penetracin
Este proceso ha sido muy estudiado en los fagos de la serie Tpar. Una vez que
se produce la adsorcin de las fibras de la cola, se produce la fijacin de las espculas
de la placa basal a la superficie de la clula bacteriana. Se produce la contraccin de
la vaina y el tubo es empujado hacia abajo.
Ms tarde, se transcriben y traducen otros genes del fago, que originan las
protenas de la cpsida, del tubo, de la cola, etc., adems de ciertas enzimas lticas.
La replicacin del fago depende del tipo de cido nuclico que posea (ADN o
ARN, lineal o circular, bicatenario o monocatenario). En la mayora de los casos, los
ADN lineales se circularizan al entrar en la clula. Esto se logra gracias a la existencia
de extremos cohesivos o por repeticin terminal.
38
o del crculo
rodante. Se origina una molcula de doble cadena que puede ser mucho ms larga
que el cromosoma viral (concatmeros).
Posteriormente una terminasa corta por las secuencias cos y los cromosomas
vricos se empaquetan en las cpsidas.
En el caso de fagos cuyo material gentico est constituido por ARN, una vez
que ste ha penetrado al interior celular, se copia formando una molcula de doble
cadena (forma replicativa).
5. Maduracin
40
41
42
Los fagos temperados pueden llevar a cabo, adems del ciclo ltico, el
fenmeno de la lisogenia (Figura 9). Estos fagos, una vez inyectado el ADN en el
interior de la clula hospedadora, pueden integrar su material gentico en el
cromosoma de la bacteria, replicndose en sincrona con el hospedador, el cual
sobrevive y se divide normalmente. En este caso los genes vricos integrados en el
cromosoma bacteriano, estn reprimidos y no se expresan. El ADN fgico integrado
en el cromosoma bacteriano recibe el nombre de profago. En circunstancias
adecuadas, se produce la desrepresin de los genes vricos y se produce un ciclo
ltico.
En una clula infectada por un fago temperado ocurren tres procesos muy
ligados en el tiempo:
1. Transcripcin y traduccin del genoma vrico. Esta fase origina la sntesis de
protenas tempranas, entre las cuales hay uno o ms tipos de represores que inhiben
la replicacin y la expresin gnica de los virus, lo que permite el ciclo lisognico.
2. Comienzo de la replicacin del virus.
3. Entrada en estado de profago de uno de los genomas replicados.
El que una clula hospedadora sufra un ciclo ltico o un ciclo lisognico depende del
pulso entre el represor y el proceso de maduracin del fago. Si se producen viriones
43
maduros (y lisozima fgica) antes de que el represor pueda actuar, la clula se lisar.
Si por el contrario, se acumula el represor bloqueando la expresin gnica y la
replicacin del virus, la clula quedar Lisogenizada (Figura 10).
Pennsula ibrica. PT8 pareca ser ms comn entre los viajeros que vuelven de los
pases europeos centrales (Nygrd y col., 2004).
47
OBJETIVOS
48
OBJETIVO GENERAL
marcador
epidemiolgico
OBJETIVOS COMPLEMENTARIOS
2. Determinar los ttulos de los bacterifagos a travs de Routine Test Dilution (RTD)
49
MATERIALES
Y
MTODOS
50
51
de
la
Universidad
Nacional
de
Lujn,
con
sintomatologa
Ao aislamiento
Sitio de muestreoa
12988
1987
13088
1987
42188
1988
42288
1988
47088
1988
47188
1988
84788
1988
175588
1988
175688
1988
176688
1988
176788
1988
176888
1988
176988
1988
180988
1988
174790
1989
175390
1989
177290
1990
32195
1989
32495
1989
53
32595
1989
40995
1989
Arroyo El Haras
41195
1989
Arroyo El Haras
49195
1989
Ao aislamiento
Origen muestra
Brote
177088
1988
Vescula biliar
Tambo U.N.Lu.
177188
1988
Vescula biliar
Idem
177288
1988
Vescula biliar
Idem
177388
1988
Vescula biliar
Idem
177488
1988
Vescula biliar
Idem
177588
1988
Vescula biliar
Idem
N cepa
Ao aislamiento
Origen muestra
Brote
60490
1990
Heces asintom. 1
Comedor escolar
60590
1990
Heces asintom. 1
Idem
60690
1990
Heces asintom. 2
Idem
60790
1990
Heces asintom. 2
Idem
60890
1990
Heces enf. 3
Idem
60990
1990
Heces enf. 4
Idem
61090
1990
Heces enf. 5
Idem
61190
1990
Heces enf. 6
Idem
54
61290
1990
Heces enf. 7
Idem
61390
1990
Canilla bao
Idem
61490
1990
Canilla bao
Idem
61590
1990
Inodoro
Idem
61690
1990
Inodoro
Idem
61790
1990
Freezer
Idem
61890
1990
Freezer
Idem
61990
1990
Mesada cocina
Idem
62090
1990
Mesada cocina
Idem
62190
1990
Mesa cocina
Idem
62290
1990
Mesa cocina
Idem
62390
1990
Mesa comedor
Idem
62490
1990
Mesa comedor
Idem
62590
1990
Helado c/envoltorio
Idem
62690
1990
Helado c/envoltorio
Idem
62790
11990
Idem
62890
1990
Idem
N cepa
Ao aislamiento
Origen muestra
Brote
183490
1990
Jamn cocido
Panaderia
183590
1990
Jamn cocido
dem
183690
1990
Mayonesa casera
dem
183790
1990
Mayonesa casera
dem
183890
1990
dem
55
183990
1990
dem
184090
1990
dem
184190
1990
dem
N cepa
Ao aislamiento
Origen muestra
Brote
230791
1991
Inodoro
Rotiseria
230891
1991
Inodoro
Idem
230991
1991
Inodoro
Idem
231091
1991
Vaso Licuadora
Idem
231191
1991
Vaso Licuadora
Idem
231291
1991
Vaso Licuadora
Idem
231391
1991
Idem
231491
1991
Idem
231591
1991
Heces enf. 1
Idem
231691
1991
Heces enf. 1
Idem
231891
1991
Heces enf. 2
Idem
231991
1991
Heces enf. 3
Idem
232091
1991
Heces enf. 3
Idem
N cepa
Ao aislamiento
Origen muestra
Brote
182693
1993
Clara de huevo
Familiar
182793
1993
Clara de huevo
Idem
182893
1993
Heces enf. 1
Idem
56
182993
1993
Heces enf. 1
Idem
183093
1993
Heces enf. 2
Idem
183193
1993
Heces enf. 2
Idem
N cepa
Ao aislamiento
Origen muestra
Casos
espordicos
706
2009
Heces enf. 1
Lujn
756
2009
Heces enf. 2
Lujn
6182
2010
Heces enf. 3
Lujn
508091
2010
Heces enf. 4
Lujn
194110
2010
Heces enf. 5
Lujn
58
- SEGUNDO PASE: se toc con un asa de rulo una placa de lisis bien aislada del
pase anterior, se descarg en 10 mL de PAB, se agit en vortex, luego se dej 10 min
59
- TERCER PASE: se realiza de igual forma que el pase anterior, partiendo de una
placa de lisis aislada del segundo pase y as sucesivamente, tantos pases como
fueran necesarios hasta conseguir el aislamiento del bacterifago. Generalmente, tres
o cuatro pases fueron suficientes.
Routine Test Dilution (RTD) es la mayor dilucin del bacterifago que produce
una lisis confluente o completa sobre su cepa propagadora. Su uso minimiza la
aparicin de reacciones cruzadas confusas.
60
9. Tcnica de fagotipia
62
g/L
0,2
0,05
Agua destilada
1000
0,15
Preparacin:
Disolver las cantidades arriba indicadas en 1 litro de agua destilada. Disolver por
agitacin. Autoclavar 15 minutos a 121C.
PAB slido
Frmula
Medio PAB y 1,3% de agar-agar (Merck)
Preparacin:
Se calienta hasta la ebullicin con agitacin suave para disolverlo por completo. Se
esteriliza en autoclave 15 minutos a 121C se deja enfriar hasta 45 + 2C y se reparte
en placas de Petri en cantidades de 20 mL por placa.
PAB blando
Frmula
Medio PAB y 0,7% de agar-agar (Merck)
Preparacin
Se calienta hasta la ebullicin con agitacin suave para disolverlo por completo. Se
reparte en cantidades de 5 mL en tubos de ensayo de 15 x 150 mm con tapa a rosca
y se esteriliza en autoclave 15 minutos a 121C.
Frmula
(g/L)
Extracto de carne
Peptona
Hisopo de Moore
Los hisopos se preparan plegando o enrollando una tira a lo largo de gasa de 90 a
120 cm de largo por 15 cm de ancho atando firmemente el centro con hilo resistente a
la esterilizacin.
Se colocan en frascos de vidrio de boca ancha y tapa a rosca de 350 mL de
capacidad teniendo la precaucin que el extremo del hilo salga del frasco por un
borde de su tapa. Se esteriliza en autoclave a 121C, 30 minutos.
64
RESULTADOS
65
De las 120 muestras de agua, 60 (50%) dieron resultado positivo las que
constituyeron la base para el aislamiento de este tipo de bacterifagos. La
temperatura del agua oscil desde 11 a 29C. Cada muestra se enfrent a cepas de
los grupos primero al sexto, aislndose en este primer paso 600 bacterifagos con
morfologa de placa de lisis diferente.
66
Para esta primera seleccin se usaron las 36 cepas de los grupos primero al
sexto.
Criterios de seleccin
67
En un principio, al enfrentar las tres muestras de agua a las cepas del Grupo
Primero, se aislaron y posteriormente purificaron un total de 30 bacterifagos con
placas de morfologa diferente. Muchos de ellos procedentes de la misma cepa y
muestra de agua.
Para facilitar la exposicin del largo proceso que condujo a la primera seleccin
de bacterifagos aislados, se tom como modelo los aislamientos obtenidos al
enfrentar la cepa del primer grupo 174790 en el mes de julio de 2008.
68
BACTERIFAGO
RTD
CEPA
PROPAGADORA
10-5
12988
10-5
12988
10-5
175588
10-6
180988
10-5
180988
10-8
180988
10-6
47088
10-5
177088
10-9
47088
10
10-5
84788
11
10-7
60490
12
10-8
175588
13
10-6
175588
14
10-5
84788
15
10-7
176688
16
10-8
60690
17
10-8
40995
69
18
10-8
42188
19
10-8
42188
20
10-7
42188
21
10-7
42288
22
10-5
42288
23
10-5
42288
24
10-4
47188
25
10-4
47188
26
10-9
174790
27
10-5
174790
28
10-8
42188
29
10-8
61190
30
10-9
176688
31
10-5
175390
32
10-8
175390
33
10-8
175390
34
10-8
175688
35
10-9
175688
36
10-9
175688
37
10-8
32495
38
10-8
177290
39
10-8
177290
40
10-8
177290
41
10-9
32495
42
10-9
32495
43
10-8
32195
70
44
10-8
32195
45
10-9
176788
46
10-8
176788
47
10-8
32195
48
10-9
32595
49
10-8
32595
50
10-8
32595
51
10-9
40995
52
10-5
176788
53
10-8
176888
54
10-8
40995
55
10-8
176888
56
10-8
183490
57
10-9
49195
58
10-8
184190
59
10-5
49195
60
10-9
176988
61
10-8
176988
62
10-8
176988
63
10-7
62790
64
10-8
62790
65
10-9
62890
66
10-8
230791
67
10-9
231391
68
10-8
62890
69
10-8
62890
71
70
10-8
41195
71
10-8
42195
72
10-9
232091
73
10-5
183093
74
10-5
84788
75
10-4
176688
AISLAMIENTO
BACTERIFAGO
PRIMER PASE
DE
PURIFICACIN
PLACAS DE
LISIS
AISLADASa
CARACTERES
MORFOLGICOS
DE LAS PLACAS
DE LISIS
710a
Grande,
confluente, no
halo
Cepa
174790 Placa de lisis
710b1
Pequea,
confluente, no
halo
+
Muestra de
agua de
julio de
2008
710b2
72
Grande,
semiconfluente,
halo
Los bacterifagos estn rotulados de la siguiente forma: la primera parte del nmero
corresponde al mes, seguido por el nmero de muestra. Ejemplo: el fago 710 significa
que la muestra se tom en julio de 2008 y dio positivo la muestra 10.
PLACAS DE
LISIS PRIMER
PASE
SEGUNDO
PASE DE
PURIFICACIN
NUEVAS
PLACAS DE
LISIS
AISLADAS
CARACTERES
MORFOLGICOS
DE LAS PLACAS
DE LISIS
710a1
Grande,
confluente, no
halo
710a
710a2
710b1
Pequea,
confluente, no
halo
710b1
Pequea,
confluente, no
halo
710b21
Grande,
semiconfluente,
halo
710b2
710b22
73
Pequea,
confluenteno halo
PLACA DE LISIS
SEGUNDO PASE
TERCER PASE
DE
PURIFICACIN
NUEVAS
PLACAS DE
LISIS
AISLADAS
CARACTERES
MORFOLGICOS DE
LAS PLACAS DE LISIS
710a11
Grande, confluente, no
halo
710a12
Pequea, confluente, no
halo
710a1
74
PRIMER PASE
DE
PURFICIACIN
SEGUNDO
PASE DE
PURIFICACIN
TERCER PASE
DE
PURIFICACIN
710a11
710a1
710a12
710a
710a2
710a2
710b1
710b1
710b21
710b21
710b22
710b22
Cepa
+
Placa de lisis
Muestra
(Bacterifago)
710b1
de
agua
710b2
Las cepas usadas en esta seleccin fueron las pertenecientes a los Grupos
Primero al sexto.
75
Criterios de seleccin
76
Las cepas usadas en este paso fueron de los Grupos Primero al sexto.
Criterios de seleccin
Para poder realizar un mejor estudio comparativo entre ellos se decidi reunir
los bacterifagos en grupos homogneos. Finalmente, se establecieron tres grupos:
77
SUBGRUPOS
BACTERIFAGOS
1, 2, 47, 50, 63
6, 51, 54, 59
9, 10, 12
13, 64
26, 65, 68
27, 28, 30
32, 38
78
El nmero final de bacterifagos que qued tras esta tercera seleccin fue de
39, estando formado por 26 bacterifagos del grupo A y 13 del grupo C. El grupo B
fue enteramente rechazado. La tabla 12 muestra los bacterifagos seleccionados.
TABLA
12.
TERCERA
SELECCIN
DE
BACTERIFAGOS
SALVAJES.
BACTERIFAGOS SELECCIONADOS
BACTERIFAGO
RTD
CEPA
PROPAGADORA
10-5
12988
10-5
12988
10-6
180988
10-8
180988
10-9
47088
10
10-5
84788
12
10-8
175588
13
10-6
175588
15
10-7
176688
17
10-8
40995
19
10-8
42188
24
10-4
47188
25
10-4
47188
26
10-9
174790
27
10-5
174790
28
10-8
42188
30
10-9
176688
32
10-8
175390
35
10-9
175688
79
37
10-8
32495
38
10-8
177290
39
10-8
177290
40
10-8
177290
41
10-9
32495
43
10-8
32195
46
10-8
176788
47
10-8
32195
48
10-9
32595
49
10-8
32595
50
10-8
32595
51
10-9
40995
53
10-8
176888
54
10-8
40995
59
10-5
49195
60
10-9
176988
63
10-7
62790
64
10-8
62790
65
10-9
62890
68
10-8
62890
Criterios de seleccin
Todos estos bacterifagos quedaron eliminados del juego final por no aportar
mayor discriminacin al grupo.
81
NMERO
ANTERIOR
NMERO ACTUAL
RTD
CEPA
PROPAGADORA
10-5
12988
II
10-5
12988
III
10-8
180988
IV
10-9
47088
10
10-5
84788
12
VI
10-8
175588
13
VII
10-6
175588
26
VIII
10-9
174790
27
IX
10-5
174790
28
10-8
42188
30
XI
10-9
176688
32
XII
10-8
175390
40
XIII
10-8
177290
41
XIV
10-9
32495
43
XV
10-8
32195
47
XVI
10-8
32195
50
XVII
10-8
32595
51
XVIII
10-9
40995
54
XIX
10-8
40995
82
59
XX
10-5
49195
63
XXI
10-7
62790
64
XXII
10-8
62790
65
XXIII
10-9
62890
68
XXIV
10-8
62890
3. Fagotipificacin
4. Grupos de especificidad
83
12988
13088
42188
42288
47088
47188
84788
175588
175688
176688
176888
176788
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
84
DE
S.
ENTERITIDIS
DEL
GRUPO
PRIMERO
Fago
176988
180988
174790
175390
177290
32195
32495
32595
40995
41195
49195
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
85
177088
177188
177288
177388
177488
177588
II
III
IV
VI
VII
VIII
IX
XI
XII
XIII
XIV
XV
XVI
XVII
XVIII
XIX
XX
XXI
XXII
XXIII
XXIV
86
60490
60590
60690
60790
60890
60990
61090
61190
61290
61390
61490
61590
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
87
TABLA
16.
FAGOTIPIA
DE
S.
ENTERITIDIS
DEL
GRUPO
TERCERO
(CONTINUACIN)
Fago
61690
61790
61890
61990
62090
62190
62290
62390
62490
62590
62690
62790
62890
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
88
183490
183590
183690
183790
183890
183990
184090
184190
II
III
IV
VI
VII
VIII
IX
XI
XII
XIII
XIV
XV
XVI
XVII
XVIII
XIX
XX
XXI
XXII
XXIII
XXIV
89
230791
230891
230991
231091
231191
231291
231391
231491
231591
231691
231891
231991
232091
II
III
IV
VI
VII
VIII
IX
XI
XII
XIII
XIV
XV
XVI
XVII
XVIII
XIX
XX
XXI
XXII
XXIII
XXIV
90
182693
182793
182893
182993
183093
183193
II
III
IV
VI
VII
VIII
IX
XI
XII
XIII
XIV
XV
XVI
XVII
XVIII
XIX
XX
XXI
XXII
XXIII
XXIV
91
706
756
6182
508091
194110
II
III
IV
VI
VII
VIII
IX
XI
XII
XIII
XIV
XV
XVI
XVII
XVIII
XIX
XX
XXI
XXII
XXIII
XXIV
92
Grupo 1
Grupo 2
Grupo 3
Grupo 4
Total
ol
ol
ol
84
II
cl
ol
ol
cl
86
III
ol
ol
ol
84
IV
ol
ol
ol
84
ol
ol
ol
84
VI
ol
ol
ol
84
VII
ol
ol
ol
84
VIII
cl
cl
cl
84
IX
ol
ol
ol
84
ol
ol
ol
84
XI
ol
ol
ol
84
XII
<scl
<scl
<scl
84
XIII
ol
ol
ol
84
XIV
ol
ol
scl
84
XV
scl
scl
cl
XVI
<scl
<scl
<scl
84
XVII
<scl
<scl
<scl
84
XVIII
<scl
scl
<scl
84
XIX
scl
scl
ol
84
XX
scl
ol
ol
84
XXI
ol
ol
XXII
cl
XXIII
ol
ol
XXIV
cl
N de cepas
patrones
81
86
Tipo de lisis: lisis semiconfluente scl; lisis confluente cl; Lisis menor que
semiconfluente <scl; lisis menor que confluente <cl; lisis opaca ol.
93
Grupo 1
Cepa 47088
Grupo 2
Cepa 32195
Grupo 3
Cepa 62790
Grupo 4
32195
62790
47088
231591
95
DISCUSIN
96
como Salmonella
Typhi (Craigie y col., 1938; Parry y col., 2002) y Salmonella Typhimurium (Anderson y
col., 1977; Callow, 1959; Liebana y col., 2002). Si bien en la actualidad ya existe una
coleccin de fagos estndares para Salmonella Enteritidis (Ward y col., 1987),
lamentablemente todava estn solo disponibles para los organismos nacionales e
internacionales por su elevado costo.
97
Con respecto a la tabla 15, las 6 cepas de Salmonella Enteritidis del Grupo
Segundo (Anselmo y col., 1991c), el 100,0 % sigui un mismo patrn es decir con
resultados negativos para los fagos XV; XXI; XXII; XXIII y XXIV; coincidiendo con el
87,0 % de las cepas de Salmonella del Grupo Primero.
101
102
CONCLUSIONES
103
104
BIBLIOGRAFA
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Enteritidis
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Detection
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and
enumeration
of
10705-4
(2001):
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117
118
120
FOTOGRAFAS
121
Hisopo de Moore
122
123
Sitio de muestreo 1
124
Sitio de muestreo 2
125
Sitio de muestreo 3
126
Sitio de muestreo 4
127
128
129
130
131