RANSPORTE ACTIVO DIRIGIDO POR ATP

El tipo paradigmtico de este tipo de transporte se denomina de transportadores

ABC o ATPasas de trfico, y se conocen muchos ejemplos en eubacterias y arqueas.
Vamos a describir el caso de un sistema ABC en enterobacterias (como E. coli). Se trata de
un sistema de varios componentes, en el que existen protenas periplsmicas que captan el
sustrato con gran afinidad, y lo llevan hasta unas protenas de membrana, las cuales acoplan
el paso de dicho sustrato hasta el citoplasma (sin alteralo qumicamente) con la hidrlisis de
ATP.
La denominacin de "transportadores ABC" se debe a que en todos ellos existe una o dos
protenas perifricas de membrana citoplsmica que poseen un dominio (de unos 200
aminocidos) conservado evolutivamente, denominado "cassette de unin a ATP" (las iniciales de
ATP-binding cassette generan la sigla "ABC"). Al parecer este dominio ABC conservado es muy
antiguo, y parece que ya exista antes de la divergencia evolutiva entre procariotas y eucariotas.
Existen muchos ejemplos de protenas ABC, tanto en procariotas como eucariotas (de hecho
constituyen la mayor familia de protenas filogenticamente relacionadas de todo el mundo vivo).
Los primeros ejemplos de esta gran familia estaban implicados en transportar sustancias a uno u
otro lado de la membrana. En otro tema veremos ejemplos de transportadores ABC que funcionan
"al revs" de los de este tema: son "exportadores" de protenas recin sintetizadas que deben
insertarse en las envueltas bacterianas o ser excretadas al medio. Pero se ha descubierto que la
gran familia de protenas ABC est implicada en otros procesos (regulacin gentica, reparacin de
ADN, patogenicidad, etc).

Elementos de este tipo de sistema:

Porinas u otras protenas de membrana externa para lograr la difusin del
sustrato desde el medio hasta el espacio periplsmico.
Protena(s) solubles de espacio periplsmico que se unen al sustrato con gran
afinidad.
Un heterodmero formado por dos protenas integrales de membrana (cada una
de ellas posee 5 o 6 trechos en -hlice que atraviesan la membrana
citoplsmica), que son la permeasa propiamente dicha del sistema (el canal por
donde pasa el sustrato).
Dos protenas perifricas de membrana citoplsmica, adosadas al lado
citoplsmico, que incluyen el mdulo conservado ABC que acopla la hidrlisis
de ATP con el transporte unidireccional del sustrato a travs de la membrana.
Modelo del mecanismo de este sistema:

1. El sustrato exgeno normalmente entra al periplasma a travs de algn canal

inespecfico o porina de membrana externa (por ejemplo, en enterobacterias se pueden
usar las porinas generales conocidas como OmpF y OmpC).
2. La protena periplsmica especfica, antes de su unin al sustrato tiene una determinada
configuracin (denominada abierta), con dos grandes lbulos globulares unidos
formando un ngulo (la forma recuerda una almeja a medio abrir). Cuando el sustrato
pasa al periplasma, la correspondiente protena de unin periplsmica se une a l con
gran afinidad (0.1-1 M), y al unirse cambia de conformacin. En esta configuracin,
llamada cerrada, el sustrato se encuentra enterrado entre los dos lbulos de la
protena (almeja cerrada).
3. Mientras tanto, el dmero de protenas integrales de membrana (antes de la unin con la
protena periplsmica) se encuentra en un estado energizado pero incapaz de transportar
sustrato. En esta situacin, puede unirse (por la parte que da al periplasma) al complejo
formado por la protena periplsmica (en configuracin cerrada) ligada al sustrato. Al
hacer esto, el heterodmero de membrana cambia de conformacin, de modo que ahora
muestra mayor afinidad hacia la protena periplsmica y se abre su canal para dejar
entrar el sustrato.
4. Entonces, el complejo de membrana alcanza su estado de mnima energa, y con ello
descarga el sustrato en el citoplasma y se logra la separacin de la protena periplsmica
(que vuelve a su configuracin abierta).
5. Finalmente, la hidrlisis de ATP catalizada por las protenas perifricas ABC (adosadas
a la membrana y asociadas a las protenas integrales) suministra la energa para que el
heterodmero de membrana vuelva a su estado energizado inicial, preparado as para
otro ciclo de transporte.

El sistema ABC de bacterias Gram-negativas, queda puesto de manifiesto cuando lo

impedimos por algn procedimiento que altere o elimine la membrana externa (conversin a
esferoplastos): Por ejemplo: tratemos E. coli con el quelante EDTA en una solucin tamponada
isotnica (con un 20% de sacarosa). Centrifugamos y el sedimento de clulas lo
resuspendemos en una solucin de MgCl2 en fro (0C). El resultado es que las protenas del
periplasma escapan al medio externo. Esto es un caso de tratamiento por choque osmtico
que origina prdida de contenidos del periplasma. Se comprueba que ciertos sistemas de
transporte quedan inutilizados, debido a que requieren para su funcionamiento, amn de
protenas de membrana citoplsmica, otras especficas del espacio periplsmico. Por
contra, este sistema no se ve afectado por los agentes ionforos. Por esta razn, a este
sistema en Gram-negativas se le ha llamado durante mucho tiempo transporte activo
sensible a choque osmtico.

Los sistemas ABC de bacterias Gram-positivas estn menos estudiados, pero en general se
parecen a los de Gram-negativas, salvo que carecen del transportador libre periplsmico. En
su lugar existe una protena con funciones equivalentes (captar el nutriente del exterior),
pero que est anclada al lado externo de la membrana citoplsmica, cerca del heterodmero
integral de membrana (la unin es mediante su cistena N-terminal, que se une a un
fosfolpido).
Existen muchos ejemplos de transportadores procariticos de tipo ABC, y cada uno
de ellos est especializado en transportar un sustrato especfico o varios sustratos parecidos.
Ejemplo de sustratos transportados de esta forma:
Monosacridos como arabinosa, galactosa, maltosa, ribosa, xilosa, etc.
Oligosacridos

Iones orgnicos e inorgnicos

Aminocidos como histidina, glicina, leucina, etc.
Oligopptidos
Algunas vitaminas y metales.
Siderforos con hierro