CROMATOGRAFIA DE GASES

DEFINICION:
Mtodo de anlisis que permite la separacin de gases de una mezcla
por adsorcin selectiva, produciendo manchas diferentemente
coloreadas en el medio adsorbente; est basado en la diferente
velocidad con la que se mueve cada fluido a travs de una sustancia
porosa.

FUNDAMENTO TEORICO:
La separacin de los diferentes componentes de una mezcla que se
encuentran en un lquido o gas es el resultado de las diferentes
interacciones de los solutos a medida que se desplazan alrededor o
sobre una sustancia lquida o slida (la fase estacionaria). Las
diversas tcnicas para la separacin de mezclas complejas se
fundamentan en la diversidad de afinidades de las substancias por un
medio mvil gas o lquido y un medio adsorbente estacionario (papel,
gelatina, almina o slice) a travs del cual circulan.
La fase estacionaria puede ser un slido o un lquido dispuesto sobre
un slido que acta como soporte, de gran rea superficial. La fase
mvil es un fluido (puede ser gas, lquido o fluido supercrtico) que se
usa como portador de la mezcla.
En la cromatografa ocurren dos fenmenos muy importantes y que
son prcticamente los rectores del proceso de separacin: la
adsorcin y la absorcin.
La adsorcin es la retencin de una especie qumica en los sitios
activos de la superficie de un slido, quedando delimitado el
fenmeno a la superficie que separa las fases o superficie interfacial.
Esta retencin superficial puede ser fsica o qumica. La adsorcin
depende de la naturaleza de la substancia adsorbida, de la
temperatura, de la naturaleza y estado de subdivisin del adsorbente,
y de la concentracin.
La absorcin es la retencin de una especie qumica por parte de una
masa y depende de la tendencia que tiene sta a formar mezcla o
reaccionar qumicamente con la misma.

CLASIFICACION:

La cromatografa gas - slido se basa en una fase estacionaria slida

en la cual se produce la retencin de los analitos como consecuencia
de la adsorcin fsica. La cromatografia gas - slido ha tenido una
aplicacin limitada debido a la retencin semipermanente de las
molculas activas o polares y a la obtencin de picos de elucin con
colas (una consecuencia del carcter no lineal del proceso de
adsorcin), de modo que esta tcnica no ha encontrado una gran
aplicacin excepto para la separacin de ciertas especies gaseosas de
bajo peso molecular.
La cromatografa gas - lquido se basa en la distribucin del analito
entre una fase mvil gaseosa y una fase lquida inmovilizada sobre la
superficie de un slido inerte.

DESCRIPCION DEL EQUIPO:

Los componentes fundamentales de un cromatgrafo de gases son:

Fuente de gas
Sistema de inyeccin
Horno y columna cromatogrfica
Sistema de deteccin
Sistema de registro

En cromatografa de gases la muestra se volatiliza y se inyecta en la

cabeza de una columna cromatogrfica. La elucin se produce por el
flujo de una fase mvil que es un gas inerte, y a diferencia de la
mayora de los tipos de cromatografa, la fase mvil no interacciona
con las molculas del analito; su nica funcin es la de transportar el
analito a travs de la columna.
Respecto a la cromatografa lquida, la cromatografa de gases tiene
la ventaja de disponer de detectores mucho ms universales (por
ejemplo, el de ionizacin de llama). Adems, para numerosas
aplicaciones, los mtodos son ms simples, ms rpidos y ms
sensibles que los correspondientes a la cromatografa lquida de alta
resolucin. La instrumentacin requerida para cromatografa de gases
tambin es mucho ms sencilla y econmica que la empleada en
HPLC. Sin embargo, en cromatografa de gases, la influencia de la
temperatura sobre la distribucin del equilibrio es considerable, a
diferencia de la cromatografa lquida. Por ello, la cromatografa de
gases presenta limitaciones en tres casos:

compuestos poco voltiles, generalmente los de peso molecular

superior a 300 u.m.a.
compuestos sensibles a una elevacin de la temperatura
incluso moderada (determinados compuestos de inters
biolgico)
compuestos que se encuentran en forma inica (puesto que son
e n general poco voltiles)

Por esta razn, la cromatografa de gases se emplea cuando los

componentes de la mezcla problema son voltiles o semivoltiles y
trmicamente estables a temperaturas de hasta 350-400C. En
cambio, cuando los compuestos a analizar son poco voltiles y/o
termolbiles, la tcnica separativa adecuada suele ser la
cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC).

A menudo la cromatografa de gases se emplea para confirmar de la

presencia o ausencia de un compuesto en una muestra determinada.

CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS
DEFINICION
Es el grupo de tcnicas utilizadas para en la determinacin de la identidad
de sustancias, en la separacin de componentes de una mezcla y en la
purificacin de compuestos.

FUNDAMENTOS
Las muestra se disuelven en una fase mvil (FM) lquida que se hace pasar a
travs de una fase estacionaria (FE) inmiscible, la cual se mantiene fija en
una columna o lecho cromatogrfico. Los componentes de la muestra se
distribuyen de modo distinto entre la FM y FE dependiendo de la afinidad
por ambas fases, desplazndose a velocidad distinta. Debido a la distinta
movilidad, los componentes se separan en bandas discriminadas que
pueden analizarse cualitativamente y/o cuantitativamente.

CLASIFICACIN
Los diferentes tipos de cromatografa lquida se pueden clasificar de
diferentes maneras, pero la forma ms habitual de clasificacin es la
realizada en base a la naturaleza de la fase estacionaria, ya que es sta la
que impone fundamentalmente el mecanismo de separacin; de este modo,
se pueden enumerar cuatro tipos de tcnicas:
- Cromatografa de adsorcin (lquido-slido).
La fase estacionaria es un adsorbente y la separacin se basa en repetidas
etapas de adsorcin-desorcin.

-Cromatografa de reparto/adsorcin (fases ligadas qumicamente).

La separacin en este caso, se basa en un reparto del soluto entre la fase
mvil y la fase estacionaria.
- Cromatografa de intercambio inico.

Este tipo de cromatografa se da cuando la fase estacionaria presenta en su

superficie grupos ionizados capaces de retener selectivamente a iones de
signo contrario que circulan en la fase mvil.
- Cromatografa de exclusin molecular.
La fase estacionaria, en este caso, es un material poroso de tamao de poro
controlado, que permite la entrada de ciertas molculas de manera
selectiva, dejando fuera otras de mayor tamao.
El mecanismo de retencin en los dos primeros casos es similar, variando
nicamente el tipo de interacciones que se producen y cual de ellas es la
predominante; por esta razn, en la prctica se realiza otra divisin de los
dos primeros tipos de cromatografa atendiendo a polaridad de la fase
estacionaria:
- Cromatografa de fase normal:
La fase estacionaria presenta puntos activos de alta polaridad y las
interacciones que se producen con el soluto son especficas del grupo
activo. La fase estacionaria puede ser un slido adsorbente (slice o
almina), o bien, un soporte al que se unen qumicamente molculas
orgnicas que presentan grupos funcionales de alta polaridad (ciano, amino,
etc).
-Cromatografa de fase reversa (inversa):
La fase estacionaria tiene una naturaleza apolar (cadenas hidrocarbonadas,
grupos fenilo) y las interacciones que se producen son inespecficas (efecto
solvfobo).

EQUIPO
Igual al utilizado en cromatografa de gases.