COLUMNA DE WINOGRADSKY.

1. OBJETIVOS.

Generar un ecosistema en el laboratorio donde aparezcan distintos

tipos de bacterias interrelacionadas metablicamente.

Identificar las diferentes etapas que ocurren durante el ciclo del

azufre.

2. MARCO TERICO.
Fue desarrollada por el microbilogo ruso Sergey Winogradsky (18531956), Es una representacin sencilla y a escala de cmo se encuentra
formado un ecosistema acutico natural, tambin permite conocer
cmo se constituyen los tapetes microbianos formados principalmente
por diferentes clases de microorganismos, la manera en que se
desarrollan sus ciclos, y la interaccin entre ellos que les permite
coexistir entre ellos. La columna representa un sistema completo y
autnomo. En la columna se pueden diferenciar claramente tres zonas
que son:
a. Zona aerobia o superficial.
Como su nombre lo indica se encuentra ubicada en la parte superior de
la columna y se caracteriza por contener una alta concentracin de
oxgeno y una muy baja de azufre, en ella se puede encontrar
abundantes poblaciones de bacterias de diferentes clases, que
generalmente se desarrollan en regiones acuticas ricas en materia
orgnica como arroyos poco profundos y estanques. Muchas especies
son flageladas lo que les permite moverse y establecerse en diferentes
zonas. Tambin se desarrollan gran cantidad de organismos fototrficos

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provenientes principalmente del lodo utilizado en el montaje de la

columna.
A pesar de ser una zona muy baja en concentracin de azufre, pueden
llegar pequeas cantidades de H2S que permite el desarrollo de
bacterias que se especializan en oxidar el azufre como
Beggiatoa y Thiobacillus, que adems sintetizan el CO2.
La formacin del tapete microbiolgico se puede observar en las zonas
superiores formada principalmente por cianobacterias dndole una
coloracin verde y su principal caracterstica es que realizan el proceso
de la fotosntesis.
b. zona microaerofilia.
Se caracteriza por presentar una concentracin parcial de oxgeno y de
azufre, en ella se desarrollan principalmente los organismos facultativos
y donde podemos encontrar algunas bacterias sulfatos reductores y
bacterias
fotohetertrofos
como
el
Rhodospirillum
y
rhodospseudomonas que no se desarrollan bien en concentraciones
altas de H2S, en la columna se identifican por su coloracin naranja.
c. Zona anaerobia o inferior
En esta zona se encuentra una muy baja concentracin de oxgeno y en
ella se desarrollan diferentes tipos de microorganismos que crecen en
condiciones anaerobias: los que presentan respiracin anaerobia y
fermentan la materia orgnica degradndola de manera incompleta.
En la parte inferior de la columna se desarrollan bacterias que necesitan
de una alta concentracin de H 2S formando una capa rosada o purpura
como el caso de la Amoebobacter, y luego de unas semanas bajo las
mismas condiciones del gnero Clostridium.
La coloracin negra denota la presencia de microorganismos sulfatos
reductores como por ejemplo el Desulfovibrio, Desulfotomaculum o
Desulfomonas. La coloracin es debida a la precipitacin de sulfuro de
metales pesados (hierro, manganeso), como se explica en la siguiente
reaccin:

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MATERIA ORGNICA REDUCIDA

MATERIA ORGNICA OXIDADA

(H+) PODER DE REDUCCION.

SO-24 ION SULFATO

H2S

Fe +2
FeS SULFURO DE HIERRO

La columna planteada para esta prctica permite describir cmo se

desarrolla el ciclo del azufre con las zonas bien diferenciadas. Fig 1.

Fig 1 Zonas de la columna de Winograsdky

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3. MATERIALES Y REACTIVOS

Esptula.
Botella plstica de 500 mL
Papel peridico.
Lodo rico en materia orgnica.
Sulfato de Calcio.
Carbonato de Calcio
Huevo
Carbonato cido de sodio
Cloruro de amonio
Balanza.

4. PROCEDIMIENTO
1. Para realizar la columna se utiliza una probeta de 100 ml o una
botella plstica de agua o gaseosa.
2. Aadir una fuente de carbono y energa para la cadena trfica
microbiana, en este caso es celulosa, que puede administrarse en
forma de tiras de papel de filtro o de peridico, hierba, serrn, etc.
Es importante que la celulosa permanezca en el fondo o en la zona
intermedia, pero no en la zona superficial, ya que las bacterias
que degradan la celulosa son anaerbicas. Deben evitarse los
sustratos fcilmente fermentables, que puedan producir una
formacin excesiva de gas.
3. Se llena la columna con lodo, de una charca o del fondo de un ro,
ricos en materia orgnica, hasta 1/3 de su volumen.
4. Se aade a la mezcla una fuente de sulfato (sulfato de calcio,
CaSO4 o yeso) y un agente tempanador del pH (carbonato de
calcio, CaCO3).
5. El lodo tambin puede mezclarse con el contenido de un huevo,
como fuente de azufre. Se aade tambin bicarbonato sdico
(NaHCO3), cloruro de amonio (NH4Cl) y tampn fosfato pH 7,3. La
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mezcla se compacta para forzar la salida de las burbujas de aire,

hasta obtener una capa de unos 10 cm.
6. Se aade agua, de la propia charca o ro donde se haya recogido
el fango, hasta rellenar casi completamente la columna (hay que
dejar con aire unos 5 cm de la misma). Si no se dispone de
suficiente agua de ro, se puede terminar de llenar la columna con
agua corriente.
7. Se tapa la columna, con parafina o con papel de aluminio con la
tapa del envase, para evitar la evaporacin. Se coloca cerca de
una ventana donde reciba luz solar atenuada, y se deja durante
varias semanas.
8. Se examinar la columna peridicamente, anotando los cambios
de color y grosor de las diferentes capas. Se tomarn muestras de
las capas para estudiar los diferentes tipos de microorganismos

CUESTIONARIO
1. Realice los dibujos correspondientes
observaciones realizadas.

cada

una

de

las

2. Investigar las principales reacciones de oxidacin y reduccin que

se presentan en las zonas de la columna indicando la clase de
microorganismos.
3. Investigar cmo
biogeoqumicos.

se

relaciona

la

prctica

con

los

ciclos

6. BIBLIOGRAFIA

Atlas, R.M.
microbiologa

R.

Bartha.

2001.

Ecologa

microbiana

ambiental. 4 edicin.Ed. Addison Wesley.

Madigan, M.T., J.M. Martinko y J. Parker. 1997. La Herencia de

Winogradsky. En Brock: Biologa de los microorganismos. 8
edicin. Prentice Hall. p. 493.

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Dur, A y J. Urmeneta. 2007. Manchas cromticas o diversidad

de microorganismos. Investigacin y Ciencia. n 366.

BI9BLIOIGRAFIA DE NOSOTROS
http://ecologiacasera.mejorforo.net/t3-el-compostaje
http://gavilan.uis.edu.co/~grinconc/docencia/21903/pdfs/material2
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http://redalyc.uaemex.mx/src/inicio/ArtPdfRed.jsp?iCve=92050311
http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioBiodiversidad.ht
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