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QUEBRA DE DORMNCIA EM SEMENTES DE BIXA

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ORELLANA
Lourdes I. V. Amaral2, Maria de Ftima A. Pereira3 e Angelo L. Cortelazzo4
Departamento de Fisiologia Vegetal, Universidade Estadual de Campinas, CP
6109, 13081-970, Campinas, SP.
RESUMO- Sementes maduras de Bixa orellana (urucum)
so dormentes quando recm-colhidas. Investigou-se o
mecanismo da dormncia e os tratamentos mais adequados
para quebr-la. Foi verificado que a dormncia causada
por impermeabilidade do tegumento gua. Os tratamentos
mais eficientes para a quebra de dormncia foram a
escarificao mecnica e qumica. A escarificao qumica
causou rupturas na densa camada palidica presente no
tegumento, criando a possibilidade para uma fcil entrada
de gua nas sementes. A escarificao trmica foi ineficaz
na promoo da germinao e, em alguns casos, causou a
perda de viabilidade das sementes.
Termos adicionais para indexao: urucum, tegumento,
escarificao.

DORMANCY BREAK IN SEEDS 0F BIXA

ORELLANA
ABSTRACT- Mature seeds of Bixa orellana (annatto) are
dormant when just harvested. It was investigated the
mechanism of dormancy and the best ways of breaking it. It
was verified that dormancy is caused by impermeability of
the tegument to water. Mechanical and chemical scarification
broke dormancy efficiently. Chemical scarification caused
rupture in the dense palisade which occurs in the tegument,
creating an efficient way of water entrance in the seeds.
Thermal scarification was inneffective in promoting seed
germination and in some cases it caused loss of viability of
the seeds.
Additional index terms: annatto, tegument, scarification

INTRODUO
Existem sementes que mesmo viveis no
germinam, embora as condies de gua, gases
(O2) e temperatura estejam aparentemente
adequadas. Estas sementes so denominadas
dormentes e precisam de tratamentos especiais para
germinar. A dormncia pode ser devida a vrios
1Recebido em 10/03/1995 e aceito em 27/07/1995.
2M.S. em Cincias Biolgicas, UNICAMP.
3Professor Titular, IB, UNICAMP.
4Professor Doutor, Departamento de Biologia Celular, IB, UNICAMP.

fatores, tais como impermeabilidade do tegumento

gua e a gases, imaturidade do embrio, presena
de inibidores ou ausncia de promotores de
germinao, ou exigncias especiais de luz ou
temperatura (Bewley & Black, l982).
Entre os vrios tipos de dormncia, a
impermeabilidade do tegumento gua bastante
comum. Em relao quebra da dormncia de
sementes impermeveis, vrios tratamentos podem
ser utilizados. frequente o uso de solventes
orgnicos (lcool e acetona), que removem a
camada cerosa da semente de muitas leguminosas,
ou cidos fortes, como o cido sulfrico concentrado,
que efetivo para sementes de testa rgida, tais
como, Sesbania punicea e S. bispinosa (Graaff &
Gledtschia triacantos,
Van
Staden,
1983),
Tetrapleura tetraptera (Odoemena, 1988). O
mecanismo de ao destes cidos no est ainda
muito claro. Estudos estruturais e anatmicos so de
vital importncia para a identificao desta ao.
Tambm bastante comum a utilizao de gua
fervente, pois oferece bons resultados para
leguminosas como Sesbania punicea (Graaf & Van
Staden, 1983) e Gledtschia triacantos (Heit, 1942
citado por Liu et al, 1981). Aquecimento a seco,
tambm adequado para reduzir impermeabilidade
de muitas sementes como Rhus javanica (Washitani,
1988). Existe ainda um terceiro mtodo, tambm
muito utilizado - a escarificao mecnica - que
consiste na abraso da testa das sementes. Este
mtodo tem sido empregado em sementes de vrias
espcies, como por exemplo, Halimium halimifolium
(Pea et al., 1988), Avena fatua (Raju et al., 1988),
Tetrapleura tetraptera (Odoemena, 1988), Sesbania
punicea e S. bispinosa (Graaf & Van Staden, 1983)
e Sida spinosa (Egley, 1976). Exciso de partes da
unidade
de
disperso

eficaz
para
monocotiledneas como em Hordeum vulgaris
(Lenoir et al., 1986) e Paspalum notatum (West &
Marousky, 1989).

Bixa orellana um a espcie economicamente

importante com alto potencial para a indstria
farmaceutica e de alimentos. Suas sementes
possuem um arilo pastoso rico em carotenides,

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entre os quais -bixina, -bixina, -norbixina e

-norbixina (Reith, 1971).Estes carotenides podem
se constituir em substitutos interessantes para os
corantes sintticos, sendo este o enfoque da maioria
dos trabalhos sobre a espcie. Por outro lado,
poucos trabalhos tm sido realizados com as
sementes propriamente ditas, especialmente em
relao fisiologia da germinao. Rolston (1978)
mostrou que, durante o desenvolvimento das
sementes desta espcie, o tegumento interno se
espessa muito, apresentando, nas sementes
maduras, um
padro semelhante ao das
leguminosas arbreas.

Para escarificao mecnica, o tegumento das

sementes maduras e secas foi cortado lateralmente
com bisturi ou lixado com lixa grossa para madeira.
Nos dois casos o tratamento foi feito de modo a
interromper o tegumento.

O presente trabalho teve como objetivo verificar,

nas sementes maduras recm colhidas de Bixa
orellana (urucum), qual o mecanismo de
dormncia e quais os tratamentos mais adequados
para quebr-la.

As sementes que no germinaram com os

tratamentos de escarificao qumica foram
seccionadas lateralmente e submetidas ao teste do
tetrazlio.

MATERIAL E MTODOS
Foram utilizadas, neste trabalho, sementes
maduras de Bixa orellana (urucum), fornecidas pela
Seo de Fumo e Aromticas do Instituto
Agronmico da Campinas.
A determinao da viabilidade das sementes foi
feita utilizando-se o teste do tetrazlio (Delouche et
al. 1962). As sementes foram cortadas lateralmente e
imersas
em
soluo
de
cloreto
de
2,3,5,trifeniltetrazlio (TTC) a 1%. Os frascos
contendo a soluo com as sementes foram
mantidos no escuro, a 30C, durante 24 horas. Foram
analisadas
4 repeties de 25 sementes por
tratamento.
A absoro de gua pelas sementes foi estimada
atravs do aumento de massa aps embebio por
diferentes perodos, com base na massa fresca
inicial, determinado em balana analtica. As
sementes foram pesadas em 4 grupos de 25.
O aumento da permeabilidade gua tambm foi
avaliado atravs de observao visual do aumento
de volume das sementes submetidas a tratamentos
de escarificao trmica e qumica.
Para estudos de germinao utilizaram-se placas
de Petri de 90 mm de dimetro, com 2 folhas de
papel de filtro umedecido, esterilizadas em estufa a
105oC por 3 horas. As sementes foram colocadas
para germinar nestas placas, contendo soluo de
nistatina (2,0x10-8 M) e mantidas em cmara de
germinao sob luz contnua (3,20 W.m-2) e
temperatura constante de 25oC, exceto nos
experimentos em que foi necessrio alterar estas
condies. Para cada experimento foram utilizadas 4
repeties de 25 sementes.

A escarificao qumica foi processada colocando

as sementes em cido sulfrico concentrado por 5,
10, 15 e 20 minutos, com agitao ocasional. Os
recipientes contendo o cido com as sementes foram
colocados em banho de gelo para evitar o
aquecimento, pois os carotenides reagem com o
cido liberando calor. A seguir estas sementes foram
lavadas em gua corrente, durante 24 horas.

Para a escarificao trmica vrios procedimentos

foram utilizados:
As sementes foram imersas em gua quente
(98.2oC) por 30, 60 e 90 segundos, resfriadas com
gua a 18.2oC e colocadas para germinar;
Sementes embebidas foram colocadas em estufa,
a 80oC por 15 minutos, sendo ento transferidas
para geladeira a 10oC por 30 minutos. A seguir as
sementes foram colocadas para germinar;
Sementes secas foram colocadas em estufa a
100oC por 1, 3, 5, 10 e 15 minutos. A seguir foram
esfriadas temperatura ambiente (20-25oC) e
finalmente colocadas para germinar;
Sementes embebidas, cortadas ou intactas foram
colocadas em estufa, temperatura de 50oC por 1 e
2 horas, sendo ento transferidas para cmara de
germinao onde foram mantidas at o final do
experimento.
Os resultados foram submetidos anlise de
varincia, para comparao entre mais de duas
mdias, o teste t para comparao entre duas
mdias e anlise fatorial para duas ou mais variveis
(Pimentel Gomes, 1982). As diferenas significativas,
a nvel de 5%, foram obtidas pelo teste de Tukey e
so representadas nas figuras e tabelas com letras
diferentes.
Sementes submetidas a escarificao qumica
foram fixadas em FAA 50 durante 24 horas para
anlise microscpica do tegumento. Aps a fixao,
as sementes foram desidratadas em lcool butlico
tercirio com concentraes crescentes, segundo
Johansen (1940), com algumas modificaes no que
diz respeito aos tempos de permanncia do material
em cada soluo alcolica. As sementes
permaneceram em lcool butlico a 70% por 3
meses. No restante do processo de desidratao

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foram necessrias 48 horas de intervalo entre cada

troca de lcool. As sementes foram ento incluidas
em parafina e seccionadas em micrtomo rotativo "R.
Jung Heidelberg" em cortes transversais ou
longitudinais com espessura de 8 m.
A desparafinizao das lminas seguiu os
mtodos usuais, sendo os cortes corados com
safranina e azul astra. A desidratao processou-se
em srie crescente de etanol-xilol durante 10
minutos e montadas em blsamo do Canad
(Johansen, 1940).

RESULTADOS
Os resultados da figura 1 mostram que no
ocorreu a embebio das sementes intactas,
enquanto nas sementes escarificadas houve uma
embebio rpida, nas primeiras 6 horas. Das 6 at
s 24 horas praticamente no houve mais nenhuma
embebio.
A germinao nas sementes seccionadas
lateralmente ou lixadas foi promovida em relao
das sementes intactas. Contudo, comparando-se os
dois tratamentos de escarificao mecnica,
verifica-se que no houve diferena significativa
entre elas (figura 2).
Quando se analisou o efeito da escarificao
qumica sobre a germinao (figura 3A) verificou-se
que os tempos de imerso em cido sulfrico
concentrado mais efetivos foram 15 e 20 minutos.
Exposio por 10 minutos resultou em valores de
germinao
intermedirios,
no
diferindo
significativamente do controle e nem dos tratamentos
mais efetivos. O tempo de 5 minutos de imerso no
foi efetivo na quebra da dormncia em relao ao
controle. Com 15 e 20 minutos houve um aumento
significativo na permeabilidade das sementes.
Contudo a eficincia, em nenhum dos tratamentos,
foi mxima (figura 3B). A viabilidade das sementes
no foi afetada pelo aumento do tempo de imerso
no cido dentro dos limites de tempo estudados
(figura 3C).
O efeito do tratamento com gua fervente (30, 60
e 90 segundos) foi analisado verificando-se que no
houve diferena significativa na germinao entre os
tratamentos de 30 e 60 segundos e entre estes e o
controle. Mas o tempo de 90 segundos causou uma
reduo drstica na porcentagem de germinao
(figura 4A). Houve um aumento significativo na
permeabilidade das sementes, com o aumento do
tempo de tratamento (figura 4B). A viabilidade foi
alterada nos tratamentos de 60 e 90 segundos,
ocorrendo reduo significativa em relao ao
controle (figura 4C).

FIGURA 1- Absoro de gua por sementes escarificadas

manualmente e intactas de Bixa orellana, durante 24
- Sementes cortadas, - Sementes intactas.
horas.

FIGURA 2- Efeito da escarificao mecnica na germinao

de sementes de Bixa orellana, mantidas a 25oC e luz
contnua. - Cortada,
- Lixada,
- Controle.

O choque trmico no teve efeito significativo na

germinao das sementes. Houve, no entanto, uma
reduo significativa na viabilidade, assim como um
aumento na permeabilidade
das sementes
submetidas ao choque trmico (tabela 1).
Em sementes intactas a temperatura de 50oC no
teve qualquer efeito na germinao nos dois tempos
de exposio testados (figura 5). Em sementes
escarificadas mecanicamente o tratamento de 1
hora a 50oC no alterou a germinao. Entretanto, o

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FIGURA 3- Efeito da escarificao qumica (cido sulfrico conc.) na germinao (A), permeabilidade (B) e viabilidade (C) de
sementes de Bixa orellana, aps 10 dias a 25oC e luz contnua.
FIGURA 4- Efeito da
escarificao trmica com
gua fervente na germinao
(A), permeabilidade (B) e
viabilidade (C) de sementes
de Bixa orellana, aps 10 dias
a 25oC e luz contnua.

tratamento de duas horas causou uma forte inibio

da germinao (figura 5).
No tratamento de sementes secas submetidas
temperatura de 100oC, exposies por 1, 3 e 5
minutos no afetaram a germinao (figura 6A). No
entanto, a exposio por 10 minutos causou uma
reduo significativa na porcentagem de germinao
(figura 6A), decorrente da perda da viabilidade das
sementes (figura 6C). A permeabilidade das

sementes gua no foi alterada por este

tratamento mesmo na exposio mais prolongada
(figura 6B).
TABELA 1- Efeito do choque trmico (80/10C) na
germinao, permeabilidade e viabilidade de sementes de Bixa orellana, aps 10 dias a 25C e luz
contnua.
tempo de exposio

germinao permeabilidade

viabilidade

min

(%)

(%)

(%)

00/00

25a

28b

70a

30/15

19a

41a

41b

A figura 7A ilustra a estrutura da testa em

sementes intactas de Bixa orellana. Na figura 7B
est ilustrada a testa de sementes imersas em cido
sulfrico por 15 minutos, as quais apresentaram
rupturas na regio superior das clulas palidicas,
com desgastes laterais. Alm disso o lmen
tornou-se exposto e ocorreram algumas rupturas na
poro basal das mesmas quando comparadas s
do controle.
FIGURA 5- Efeito da temperatura de 50oC, durante 1 ou 2
horas, na germinao das sementes de Bixa orellana
escarificadas e intactas, mantidas posteriormente a 25oC e
luz contnua. Letras maisculas: efeito da escarificao. Letras
-1 hora a 50oC,
minsculas:efeito da exposio a 50oC.
o
- 2 horas a 50 C, - controle. Simbolos claros sementes cortadas, Simbolos escuros - sementes intactas.

DISCUSSO
As sementes que apresentam impermeabilidade
do tegumento absoro de gua, no mostram
nenhum aumento de massa fresca quando
colocadas em contato com a mesma. A absoro
ocorrer aps a quebra de sua dormncia.

R.Bras.Fisiol.Veg., 7(2):151-157, 1995.

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FIGURA 6- Efeito da escarificao trmica (100oC a seco) na germinao (A), permeabilidade (B) e viabilidade (C) de sementes
de Bixa orellana, aps 10 dias a 25oC e luz contnua.

FIGURA 7- Cortes transversais da testa de sementes de Bixa orellana corados com SA. Aumento: 460X. A - Testa da
semente intacta. B - Testa da semente escarificada com cido sulfrico, com rupturas, desgastes laterais e lmen exposto
( ).

Sementes maduras recm-colhidas de Bixa

orellana praticamente no embebem, mas o fazem
quando escarificadas. Pode-se afirmar assim, que
estas sementes apresentam dormncia imposta pela
testa.
Em outras espcies como Halimium hamilifolium
(Pea et al. 1988), Ricinus communis cv Guarani
(Laga e Pereira, 1990), Rhus javanica (Washitani,
1988), Tetrapleura tetraptera (Odoemena, 1988),
Sesbania punicea e S. bispinosa (Graaff & van
Staden, 1983) o tegumento tambm funciona como
barreira ao fluxo de gua e tratamentos de
escarificao eliminam este impedimento.

A escarificao mecnica tem sido efetiva para

quebrar a dormncia de muitas sementes
impermeveis, como foi mostrado, por rxemplo, para
Sesbania punicea e S. bispinosa (Graaff & Van
Staden, 1983), Tetrapleura tetraptera (Odoemena,
1988), Paspalum notatum (West & Marouski, 1989),
Avena fatua (Raju et al. 1988). Em todos estes casos
a promoo da germinao est relacionada com a
entrada de gua na semente.
Em B. orellana a escarificao mecnica foi efetiva
na quebra da dormncia. A entrada de gua foi
positivamente associada escarificao. Assim,

R.Bras.Fisiol.Veg., 7(2):151-157, 1995.

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nestas sementes, a testa constitui-se numa barreira

fsica ao fluxo de gua.

Em B. orellana ocorrem rupturas na regio da

paliada, desgastes na poro superior desta
camada e rupturas em direo regio basal destas
clulas, expondo o seu lmen.

Vrios tratamentos trmicos tem sido utilizados

com sucesso para promover a germinao de muitas
sementes, cuja testa impermevel gua. Em B.
AGRADECIMENTOS
orellana foram testados vrios tratamentos de
escarificao trmica, mas nenhum foi efetivo na
Ao Dr. Odair Bovi da Seo de Fumo e Aromticas
promoo da germinao nesta espcie. Entretanto,
do Instituto Agronmico de Campinas pelo
estes tratamentos tiveram efeito na viabilidade e
fornecimento das sementes utilizadas neste trabalho.
permeabilidade das sementes de urucum. H uma
tendncia perda de viabilidade e aumento de
REFERNCIAS
permeabilidade associados com a exposio ao
calor, pois mesmo perodos de tempos curtos BEWLEY,J.D. & BLACK, M. Physiology and
biochemistry of seeds in relation to germination.
causaram alteraes na permeabilidade e viabilidade
Berlin, Springer-Verlag, 1982. v.2.
das sementes. Exposies mais prolongadas
causaram perda de viabilidade de sementes. Este DELOUCHE,J.C.,
STILL,T.W.,
RASPPERT,M. &
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fato deve estar associado com inativao trmica ou
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danos ao embrio (Givelberg et al., 1984).
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Em outras espcies a escarificao trmica
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(Washitani, 1988) e Sesbania punicea (Graaff & Van
nigrum seeds. Journal of Experimental Botany,
Staden, 1983).Porm em outras os tratamentos
35:588-598,1984.
trmicos so deletrios como por exemplo em
sementes de S. bispinosa. Nesta espcie h uma GRAAFF,J.L. & VAN STADEN,J. The effect of different
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grande sensibilidade ao calor, pois praticamente
structure and seed germination of Sesbania species.
todas as sementes perdem a viabilidade e no
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sulfrico no atingiu as regies abaixo da testa e por
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