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EDITORES:
Jos Antonio Castilla Alcal
Ana Isabel Nez Cepeda
Unidad de Reproduccin, HU Virgen de las Nieves, Granada.
Introduccin
Un embrilogo es la persona que estudia los gametos, zigotos y embriones.
Cuando a esta definicin aadimos el adjetivo de clnico, adquiere unas
dimensiones diferentes. De entrada, nos referimos a las mismas entidades anteriores
pero en humanos, y adems, aplicado al diagnstico y tratamiento de diversas
patologas. Estas ltimas actividades las desarrollar el embrilogo clnico formando
parte de equipos multidisciplinares (gineclogos, andrlogos, enfermera, psiclogos,
etc) lo que le obligar a conocer aunque sea escasamente dichas reas de
conocimiento con las cuales interaccionar en su quehacer diario. Adems su
actividad va a estar limitada por aspectos legales y bioticos que deber conocer.
Un embrilogo clnico al contrario que un embrilogo a secas no solo debe
conocer la fisiologa de los gametos sino tambin la fisiopatologa de los rganos que
lo producen. No slo debe saber cultivar zigotos y embriones sino qu causas clnicas
influyen en su desarrollo. No slo debe calcular su tasa de fecundacin o de divisin
embrionaria, debe de compararla con sus propios resultados o con la de otros centros
para lo cual necesitar conocer los mtodos estadsticos adecuados. No slo debe
preocuparse de si se contamina su cultivo de embriones, debe de saber que grmenes
son los ms frecuentes en el aparato genital e interpretar los resultados que le remitan
del laboratorio de microbiologa. Debe de participar activamente en la investigacin
que se desarrolle en su centro, conociendo y diseando los estudios y experimentos
oportunos. El embrilogo clnico debe de preocuparse de la calidad de su trabajo, para
lo cual deber conocer los principios del control y la gestin de la calidad, y por
ltimo y ms importante, el embrilogo debe centrar su trabajo sobre el paciente, es
decir, debe de procurar (aunque son pocas las oportunidades que tiene: a la hora de
recibir una muestra de semen, o de informar sobre el resultado de una FIV/ICSI o del
nmero de embriones a transferir) obtener y dar la mxima informacin al paciente
sobre su trabajo.
Somos muchos los embrilogos clnicos que procedemos de otras reas del
laboratorio clnico, y tenemos la experiencia de que conforme la automatizacin y
comercializacin avanzan en la actividad del laboratorio, aspectos de nuestra
actividad cotidiana que ahora parecen de segundo nivel van creciendo en importancia.
As, hace unos aos era clave realizar adecuadamente medios de cultivo o
micropipetas de ICSI, hoy da, sin embargo, cada vez ms grupos adquieren este
material en casas comerciales, y empiezan a preocuparse ms de controlar la calidad
del aire del laboratorio o de comprobar la firma de consentimientos informados,
actividades impensables para un embrilogo clnico hace unos aos.
Los objetivos con que iniciamos esta serie de publicaciones bajo el epgrafe de
Aula de formacin en Embriologa Clnica son: repasar diferentes temas de la
embriologa clnica incluidos en el temario de la especialidad realizado por ASEBIR,
facilitar a los jvenes profesionales que quieran sumergirse en el campo de la
embriologa clnica la adquisicin de nuevos conocimientos, y hacer una llamada
sobre la amplitud de nuestra especialidad, cuyo futuro depender de la capacidad que
tenga el embrilogo clnico de centrar su actividad en el paciente y no en ser un mero
cuidador de gametos y embriones.
Jose Antonio Castilla
CONTENIDOS.
CAPTULO 1:
Anatoma y fisiologa del aparato reproductor masculino.
Biologa del gameto masculino.
Durn I, Ardoy M, Nez AI, Luceo F, Yoldi A.............................................1-50
CAPTULO 2:
Anatoma y fisiologa del aparato reproductor femenino.
Mecanismos de accin hormonal.
Surez I, Cuadros A, Expsito AI, Fernndez M,
Clavero A, Martnez L, Snchez C......................................................................51-105
CAPTULO 3:
Fisiologa de la fecundacin y primeras divisiones embrionarias.
Nez AI, Surez I, Expsito A, Expsito AI, Vergara F Jr.............................106-160
CAPTULO 4:
Esterilidad clnica para embrilogos.
Fontes J, Yoldi A, Martnez L, Mendoza N, Molina R.....................................161-210
CAPTULO 5:
Laboratorio de androloga.
Ramrez JP, lvarez C, Castilla JA, Clavero A, Durn I, Mar C.....................211-270
CAPTULO 6:
Laboratorio de FIV.
Luceo F, Expsito A, Nez AI, Surez I,Vergara F Jr, ,
Ramrez JP, Castilla JA.
Consideraciones generales e instrumentacin........................................271-291
Recuperacin de ovocitos e inseminacin.............................................292-307
Zigotos y embriones..............................................................................308-328
Hatching, biopsia y crioconservacin....................................................329-347
CAPTULO 7:
Gentica y biologa molecular para embrilogos.
Ardoy M, Esparza C, Luceo F, Nez AI, Expsito A..................................348-403
CAPTULO 8:
Microbiologa e inmunologa de la reproduccin.
Gil MT, Carrin M, Castilla JA, Expsito A,
Gonzalvo MC, Garcia-Pea ML.......................................................................404-449
CAPTULO 9:
Miscelnea
Molina R, lvarez C, Castilla JA, Gil MT, Esparza C.
Legislacin espaola y biotica.............................................................450-474
Bioestadstica.........................................................................................475-486
Qumica..................................................................................................487-500
AUTORES:
Carmen lvarez, Clnica Avicena, Jan; flechuga@promojaen.es
Manuel Ardoy, Laboratorio FIV, Hospital Universitario La Paz, Madrid;
ardoy@lettera.net
Magdalena Carrin, Laboratorio CEIFER, Granada; ceifer@nexo.es
Jose Antonio Castilla, Unidad de Reproduccin, HU Virgen de las Nieves,
Granada; jcastilla@hvn.sas.cica.es
Ana Clavero, Servicio de Anlisis Clnicos, HU Virgen de las Nieves, Granada;
SLEGAZA@terra.es
ngela Cuadros, Servicio de Obstetricia y Ginecologa, HU Virgen de las Nieves,
Granada;
Ignacio Durn, Unidad de Reproduccin, Hospital Virgen del Mar, Almera-FIV,
Almeria; iduran@cajamar.es
Clara Esparza, Servicio Anlisis Clnicos, HU Virgen de las Nieves, Granada.
Antonia Expsito, Unidad de Reproduccin, Hospital de Cruces, Barakaldo, Bizkaia;
antonia_tra@hotmail.com
Ana Isabel Expsito, Unidad de Reproduccin, HU Virgen de las Nieves, Granada.
Miguel Fernndez, Servicio de Obstetricia y Ginecologa, HU Virgen de las Nieves,
Granada;
Juan Fontes, Unidad de Reproduccin, HU Virgen de las Nieves,
jfontes@hvn.sas.cica.es
Granada;
A Paco Vergara,
Maestro y Amigo,
que siempre respet nuestro trabajo y
nos ense el camino para ser embrilogos clnicos y
no los chicos/as del laboratorio.
CAPTULO 1.
ANATOMA Y FISIOLOGA DEL APARATO
MASCULINO. BIOLOGA DEL GAMETO MASCULINO.
REPRODUCTOR
Durn I*, Ardoy M**, Nez AI***, Luceo F****, Yoldi A*****.
*Unidad de Reproduccin, Hospital Virgen del Mar, Almera-FIV, Almeria
**Laboratorio FIV, Hospital Universitario La Paz, Madrid
***Unidad de Reproduccin, HU Virgen de las Nieves, Granada
****Conceptum, Institut de Fertilitat i Reproducci Humana, Reus, Tarragona
*****Laboratorio CEIFER, Granada
Prstata y testculo.
Prstata, testculo y uretra anterior.
Epiddimo y testculo.
Epiddimo, conducto deferente y vesculas seminales.
Conducto deferente y prstata.
17 - Hidroxilasa.
17 - Deshidrogenasa.
3 - Hidroxideshidrogenasa.
11 - Hidroxilasa.
5 - Reductasa.
Testculo.
Testculo y epiddimo.
Vescula seminal.
Prstata.
Glndula bulbouretral.
Epiddimo.
Epiddimo y conductos deferentes.
Rete testis.
Vescula seminal.
tero.
Epiddimo.
Conducto deferente y ampolla deferencial.
Vescula seminal.
Prstata.
Glndula bulbouretral.
Vescula seminal.
Conducto eyaculador.
Epiddimo en su tercio posterior.
Conducto eferente.
Conducto deferente.
Orquitis.
Anorquia.
Criptorquidia.
Fibrosis qustica.
Agenesia de tbulos seminferos.
d) Testculo.
e) Ampolla seminal.
12.-El hipogonadismo secundario se caracteriza por la alteracin de los
siguientes parmetros:
a)
b)
c)
d)
e)
FSH , LH , Testosterona .
FSH , LH , Testosterona .
FSH , LH , Testosterona .
FSH , LH , Testosterona .
Ninguna de las anteriores.
Dihidrotestosterona.
Activina.
Folistatina.
Inhibina B.
Testosterona.
37 C.
35C, aproximadamente 2C por debajo de la temperatura corporal.
Dentro de un rango de 2C entorno a la temperatura basal.
36,5 C en verano y 35,5 C en invierno.
36 C.
Tbulos seminferos.
Tbulos seminferos y epiddimo.
Citoplasma de las clulas de Sertoli.
Conducto de Wolf.
Todas las respuestas son correctas.
a) Espermatogonia A,
espermatogonia B,
espermatocito, espermtida,
espermatozoide.
b) Espermatogonia A, espermatogonia B, espermatocito, espermtida elongada,
espermtida redonda, espermatozoide.
c) Espermtida A, espermtida B, espermatocito, espermatogonia, espermatozoide.
d) Espermatocito A, Espermatocito B, espermatogonia, espermtidas y
espermatozoide.
e) Ninguna.
18.- Cul de estas clasificaciones de espermtidas es correcta?
a)
b)
c)
d)
e)
Adrenarquia-espermarquia-gonadarquia.
Adrenarquia-gonadarquia-espermarquia.
Espermarquia-adrenarquia-gonadarquia.
Espermarquia-gonadarquia-adrenarquia.
Gonadarquia-adrenarquia-espermarquia.
S. de Morris.
S. de Kennedy.
S. de Reifenstien.
S. de Kallman.
Todos los anteriores se deben a defectos en el receptor de andrgenos.
Longitudinal.
Transversal.
Helicoidal.
En zigzag.
Visceral.
Hialuronidasa.
Acrosina
Neuraminidasa
Slo a) y b).
Todos.
Fructosa.
-glucosidasa neutra.
Ac. ctrico.
Fosfatasa cida.
Ninguno.
40.-Qu funcin
espermatognesis?
desempea
la
barrera
hematotesticular
en
la
10
Secretan inhibina B
Secretan factor inhibibor mulleriano.
Se localizan en la rete testis, junto al intersticio.
Se localizan en la zona intersticial del testculo, situadas de forma adyacente a los
tbulos seminferos que se encuentran entre el estado VI y el VIII (estadios
dependientes de la concentracin de testosterona) en el ratn.
e) Ninguna es correcta.
42.-Ante un varn con astenozoospermia total sospechamos una anomala del
axonema espermtico, solicitando un estudio de microscopa electrnica de
transmisin y recibiendo el siguiente resultado: configuracin del axonema
espermtico 9+1, qu debemos pensar?
a)
b)
c)
d)
e)
11
Flujo de Ca++.
Incremento de la actividad de la adenilato ciclasa.
Generacin de ROS (especies reactivas del oxgeno).
Fosforilacin de protenas.
Todas las anteriores.
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RESPUESTAS
CAPTULO
1.
ANATOMA
Y
FISIOLOGA
DEL
APARATO
REPRODUCTOR MASCULINO. BIOLOGA DEL GAMETO MASCULINO.
1: d).
Durante el desarrollo embrionario el testculo fetal controla la formacin de los
conductos deferentes, vesculas seminales y epiddimo mediante la activacin del
Factor Inhibidor Mulleriano (FIM) y la testoterona. El FIM es una protena que
elimina los conductos de Mller impidiendo la formacin de las trompas de Falopio y
de parte del cuerpo uterino. La testosterona estimula los conductos de Wolff,
formando epiddimos, conductos deferentes y vesculas seminales, gracias a la
existencia de un receptor especfico para la tetosterona que se mantiene en los
conductos de Wolff tan slo hasta la 12 semana de gestacin (Vanrell et al., 1992).
2: a).
El factor inhibidor Mulleriano (MIF o MIS) se detecta en varones y mujeres adultas,
producido por clulas de Sertoli y clulas de la granulosa, respectivamente. Entre sus
funciones destacan: regulacin del descenso testicular, inhibicin del crecimiento de
clulas transformadas, maduracin pulmonar, maduracin de clulas germinales y
morfognesis gonadal y regresin del conducto de Mller (Lee y Donahoe, 1993).
3: e).
En los tejidos diana de la testosterona puede existir conversin perifrica en
dihidrotestosterona por la enzima 5-reductasa (Vendrell, 1994).
4: c).
La vescula seminal es una estructura bilateral que provee al eyaculado de nutrientes
(fructosa), precursores de la coagulacin espermtica (fibringeno) y sustancias como
las prostaglandinas que reaccionan con el moco cervical transformndolo en un medio
acuoso ms receptivo a los espermatozoides (Guyton, 1989).
5: a).
Los espermatozoides que han salido de los tbulos seminferos son inmviles y sin
capacidad fecundante. Sin embargo, tras permanecer en el epiddimo un tiempo
comprendido entre 18 horas y 10 das adquieren cierta movilidad, su cromatina se
compacta por la formacin de puentes de disulfuro entre las protaminas y su
membrana sufre cambios moleculares con la adquisicin de componentes
epididimarios. Los espermatozoides sufren una evolucin en su movilidad, pasando
de un movimiento circular a su paso por la cabeza del epiddimo, a un movimiento
progresivo tras recorrer la cola epididimaria. Esta adquisicin de movilidad
progresiva ocurre como consecuencia del aumento del AMPc intracelular (Mortimer,
2000).
6: b).
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34: e).
Todos son componentes del acrosoma siendo la acrosina y la hialuronidasa los
enzims ms conocidos. La neuraminidasa se encuentra en la membrana interna del
acrosoma, y acta sobre el cido neuramnico presente en la zona pelcida (Baccetti,
1979).
35: b).
Las inhibinas A y B son heterodmeros resultantes de la combinacin de las
subunidades con las A y B respectivamente. Las clulas de Sertoli secretan
inhibina B. La ausencia de espermtidas est asociada a una disminucin de la
produccin de inhibinas por las clulas de Sertoli, y por tanto a un aumento de la
FSH. Las activinas A y B son homodmeros de las subunidades A y B
respectivamente, son secretadas por las clulas de Leydig y estimulan la produccin
de FSH. Las activinas A y B estimulan la proliferacin de espermtidas en cocultivos
de clulas espermatognicas y de Sertoli (Kierszenbaum, 1994).
36: a).
El plasma seminal humano es el resultado de la mezcla de fluidos procedentes de la
prstata, vesculas seminales, testculos, epiddimos, ampolla deferencial y glndulas
bulbouretrales y uretrales. De entre todas, el 90% procede de las vesculas seminales y
de la prstata, con un 60% y 30% respectivamente. No obstante, existen grandes
variaciones entre individuos sanos (Eliasson y Johnsen, 1986).
37: a).
La membrana plasmtica del espermatozoide se caracteriza por su elevado contenido
de cidos grasos poliinsaturados (PUFA). Los componentes lipdicos de las
membranas derivan de las espermatogonias. Varios tipos de PUFA son sintetizados
por las clulas germinales y tambin por las clulas de Sertoli bajo control hormonal,
indicando un metabolismo lipdico activo en el testculo, incluyendo la desaturacin y
elongacin de los cidos grasos esenciales. Durante el paso por el epiddimo se
produce una reestructuracin de la membrana, aumentando en ella la fluidez y la
proporcin de PUFAs. La membrana del espermatozoide es muy susceptible a las
agresiones externas, principalmente a procesos de peroxidacin causados por las
especies reactivas de oxgeno (Lenzi et al., 2000).
38: b).
El plasma seminal es una mezcla de componentes que se originan en el testculo,
epiddimos, vesculas seminales, prstata, etc. Muchos de estos componentes se
producen exclusivamente en lugares determinados, pudindose utilizar como
marcadores e indicadores de la integridad y funcionalidad del sistema reproductor
masculino. Uno de los componentes secretados en el epiddimo es la -glucosidasa
neutra, que puede ser utilizada como marcador para el diagnstico de una obstruccin
a este nivel. La Fructosa y las protenas responsables de la coagulacin proceden de
las vesculas seminales. La prstata es responsable de la secrecin de fosfatasa cida,
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La capacitacin est considerada como el evento durante el cual los sistemas celulares
alcanzan un nivel especfico de activacin, que ser necesario para la reaccin
acrosmica, hiperactivacin y la unin a la zona pelcida. Cuando los
espermatozoides no han sido todava eyaculados, poseen una baja concentracin de
AMPc, calcio y con la capacidad para generar ROS suprimida. En los primeros pasos
de la capacitacin, estas condiciones cambian totalmente: las concentraciones
intracelulares de calcio y AMPc se incrementan y cambia el estado redox del gameto
(por la produccin de ROS). Molecularmente, todos estos eventos se asocian a la
fosforilacin de tirosn quinasa habindose comprobado que con inhibidores de esa
enzima se bloquea el proceso de capacitacin. El perxido de hidrgeno juega un
papel muy importante en la fosforilacin, ya que podemos impedir la fosforilacin, y
por tanto la capacitacin, con catalasa (Aitken, 1997).
47: e).
Los prostasomas son vesculas membranosas de origen prosttico que aparecen
normalmente en lquido seminal, habindose implicado en diferentes funciones:
mejora de la movilidad espermtica, licuefaccin del lquido seminal,
inmunomodulacin y proteccin frente al estrs oxidativo. Tienen un tamao de 30500 nm, que permite su visin microscpica, y contienen altos niveles de colesterol,
esfingomielina, calcio, y algunas enzimas que les permiten interaccionar con la
membrana espermtica, regulando su permeabilidad (Sez et al., 2000).
48: a).
Los cambios en la movilidad espermtica que conlleva la hiperactivacin en
espermatozoides humanos, al contrario que en otras especies, ocurren de manera
sincrnica en un 20% de los espermatozoides. En otras especies como el hmster,
conejo o rata dicho proceso ocurre de manera sincrnica en el 80% de los
espermatozoides. Diversos factores influyen en su aparicin in vitro: calcio, potasio,
sodio, albmina, bicarbonato y glucosa del medio. Entre los inductores in vitro
tenemos la pentoxifilina, extracto de cmulo ovocitario y lquido folicular. Aunque la
mayora de autores coinciden en que la hiperactivacin es un fenmeno asociado a la
capacitacin, al igual que ocurre con la reaccin acrosmica podemos observar
algunos espermatozoides en condiciones no capacitantes que sufren la reaccin
acrosmica o se hiperactivan (Kay y Robertson, 1998)
49: b).
La hiperestabilidad espermtica hace referencia a la resistencia a la descondensacin
mediante agentes qumicos (SDS+EDTA) que adquiere la cromatina espermtica
varias horas despus de la eyaculacin, lo que se debe a que al eliminarse el cinc de
las protaminas espermticas por la accin de agentes quelantes presentes en el lquido
seminal se forman numerosos puentes de disulfuro en las protaminas. Este estado no
depende de la capacitacin espermtica ya que se produce en presencia y en ausencia
del lquido seminal (Kvist y Eliasson, 1980).
50: e).
24
25
BIBLIOGRAFA.
CAPTULO
1.
ANATOMA
Y
FISIOLOGA
DEL
APARATO
REPRODUCTOR MASCULINO. BIOLOGA DEL GAMETO MASCULINO.
Aitken RJ. Molecular mechanisms regulating human sperm function. Hum Reprod
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1994, pp 540-44.
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En: Pomerol JM, Arrondo JL editores. Prctica androlgica.1 ed. Barcelona: MassonSalvat Medicina; 1994, pp 3-13.
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reproductive medicine. New York: Parthenon Publishing; 1999 pp 271-95.
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penetration assay. En: Acosta AA, Swanson RJ, Ackerman SB, Kruger TF, van Zyl
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Williams & Wilkins 1990; 4: 119-137.
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Gandini L, Lombardo F, Paoli D, Caponecchia L Familiari G, Verlengia C et al.
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Guyton, AC. Tratado de Fisiologa Mdica. Mxico: Mcgraw-Hill; 1989.
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Cambridge University Press; 2000 .
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Mtodos de anlisis. Teora, anlisis y correlacin. Buenos Aires: Mdica
Panamericana; 1988.
Kay VJ, Robertson L. Hyperactivated motility of human spermatozoa: a review of
physiological function and application in assisted reproduction. Hum Reprod Update
1998;4:776-786.
26
27
28
Captulo 2.
ANATOMA Y FISIOLOGA DEL APARATO REPRODUCTOR FEMENINO.
MECANISMOS DE ACCIN HORMONAL.
Surez I, Cuadros A, Expsito AI, Fernndez M, Clavero A, Martnez L,
Snchez C.
Unidad de Reproduccin, HU Virgen de las Nieves, Granada
29
a)
b)
c)
d)
e)
30
Ovulacin.
Tumores.
Eliminacin de las clulas T autorreactivas del timo.
Mantenimiento de la homeostasis en el nmero de clulas de los tejidos.
Desarrollo de los tractos genitales femeninos durante el desarrollo embrionario.
p53.
Fas.
ICE.
Bax.
SOD.
31
Son receptores por los que las clulas se unen a la matriz extracelular.
Estn formados por dos subunidades, una alfa y otra beta.
Fibronectina, laminina y vitronectina son algunos de sus ligandos.
Cada integrina reconoce a un ligando de modo especfico.
Todas son correctas.
Placentacin.
Fecundacin.
Implantacin.
Las respuestas b) y c) son correctas.
Todas.
32
66.-En el folculo ovrico existen clulas inmunes que pueden actuar como
moduladores de la funcin ovrica. Entre las funciones de los leucocitos en el
folculo ovrico, seale qu respuesta es incorrecta:
a)
b)
c)
d)
e)
Secrecin de citoquinas.
Estimulacin de la esteroidognesis.
Inhibicin de la degradacin del colgeno.
Facilitan el proceso inflamatorio durante la ovulacin.
Todas son correctas.
Conducto de Mller.
Conducto uterino.
Conducto mesonfrico.
Seno urogenital.
Himen.
30 minutos.
2 horas.
<5 minutos.
1 hora.
15 minutos.
Estrona.
Estradiol.
Estriol.
Andrgenos.
Todas se producen en el ovario.
33
La fase menstrual.
La fase proliferativa.
La fase secretora temprana.
La fase secretora tarda.
La fase premenstrual.
Aumento de L-DOPA.
Sueo.
Estimulacin del pezn.
Aumento de TRH.
Aumento de LH-FSH.
77.-El tamao y la forma del tero varan segn la edad y el estado del
desarrollo. As, es falso que:
34
a) El tero fetal aumenta de tamao durante la etapa intrauterina por la accin de las
hormonas maternas.
b) En la recin nacida, el crvix es de menor tamao que el cuerpo.
c) En la pubertad, el tero mide de 5 a 8 cm.
d) En el 30% de las recin nacidas, se observa lquido en la cavidad uterina.
e) Las modificaciones dependientes del ciclo menstrual se observan sobre todo en el
endometrio.
78.-Cuando hablamos de la esteroidognesis folicular; en que consiste la
hiptesis del sistema de dos clulas ideado por Falck en 1959?
a) La accin combinada de las clulas de la teca y las de la granulosa en la
produccin de esteroides sexuales.
b) La accin del sistema hipotlamo-hipofisario sobre el ovario.
c) La accin del sistema suprarrenal sobre el ovario y el endometrio.
d) Las respuestas a) y b) son verdaderas.
e) Ninguna es verdadera.
79.-Respecto a la diferenciacin sexual intratero seale la afirmacin falsa:
a) A las 5 semanas de gestacin las gnadas estn indiferenciadas.
b) Cuando el embrin presenta una dotacin cromosmica XX no es necesario uno
de estos cromosomas para el desarrollo normal de los ovarios.
c) La ausencia del factor inhibidor de Mller determinar que el feto desarrolle
tero.
d) Los conductos de Wolff darn lugar al epiddimo.
e) Sin los conductos mesonfricos se producira una alteracin en el desarrollo de los
genitales internos femeninos y sistema renal.
80.-En el ovario, dnde se hallan los folculos primordiales?
a)
b)
c)
d)
e)
En la mdula.
En la corteza interna del ovario.
En la regin hiliar.
En la corteza externa del ovario.
En el mesovario.
b)
c)
d)
e)
35
En folculos primordiales.
En folculos preantrales.
En folculos preovulatorios.
En folculos ovulatorios.
En folculos antrales medianos.
Etapa de maduracin.
Etapa de crecimiento.
Etapa de reclutamiento.
Etapa de seleccin.
Etapa de dominancia.
Corteza adrenal.
Testculos.
Ovario.
Placenta.
Todas las respuestas anteriores son verdaderas.
Receptores nucleares.
Receptores citoplasmticos.
Receptores de membrana.
Receptores extracelulares.
Ninguna opcin es vlida.
88.-Los dominios de los receptores son estructuras de la molcula que pueden realizar
funciones concretas. La estructura espacial de los dominios de los receptores de
estrgenos se puede alterar por la interaccin con:
a)
b)
c)
d)
e)
36
La hormona.
El DNA.
Otras protenas.
Por el estado de fosforilacin del receptor.
Todas las respuestas anteriores son verdaderas.
37
Monmeros.
Homodmeros.
Heterodmeros.
a y b son correctas.
Todas las anteriores son correctas.
38
Receptores nucleares.
Receptores de membrana.
Receptores de membrana y nucleares.
La progesterona slo acta sobre el espermatozoide en presencia de estrgenos.
La progesterona no tiene efecto sobre el espermatozoide.
97.-El orden de las etapas involucradas en las vas o cascadas de los segundos
mensajeros en regulacin de la funcin celular es:
a) Seal externa receptor generacin de mensajes modulacin enzimtica
funciones efectos intracelulares.
b) Seal externa efectos intracelulares receptor mecanismos de
transduccin activacin de enzimas citoplasmticos generacin de mensajes
efectos intracelulares funciones.
c) Seal externa receptor modulacin enzimtica mecanismos de
transduccin generacin de mensajes efectos intracelulares funciones.
d) Seal externa receptor mecanismos de transduccin modulacin
enzimtica generacin de mensajes activacin de enzimas citoplasmticos
efectos intracelulares funciones.
e) Seal externa receptor mecanismos de transduccin generacin de
mensajes activacin de enzimas citoplasmticos modulacin enzimtica
efectos intracelulares funciones.
98.-El camino principal que usan los segundos mensajeros de las hormonas LH y
FSH en la regulacin de la funcin celular es:
a) Tres caminos o cascadas principales que pueden utilizar indistintamente para
regular la funcin celular con extensos cruces entre cascadas.
b) Dos cascadas de regulacin de la funcin celular, la del AMPc y la del Inositol
trifosfato clcico diacilglicerol respectivamente.
c) Cascada del AMPc.
d) Cascada del AMPc y la de la tirosn kinasa.
e) No dan lugar a segundos mensajeros ya que forman parte de las hormonas que
interactan con los receptores nucleares.
99.-Los anlogos agonistas de la hormona liberadora de gonadotrofinas GnRH:
a) Tienen un efecto de estimulacin hipofisaria inicial (flare-up).
b) Compiten con los receptores de membrana de la GnRH suprimiendo las
gonadotrofinas.
c) Provocan un intenso hipoestrogenismo.
d) Las respuestas a) y c) son correctas.
39
Fosforilacin.
Metilacin.
Acetilacin.
Metilacin y fosforilacin.
La actividad transcripcional de los receptores de estrgenos no se ve afectada por
ninguno de los procesos anteriores.
103.-El principal mecanismo de accin de la GnRH depende del calcio y utiliza como
segundo mensajero para estimular la actividad de la protenquinasa:
a)
b)
c)
d)
e)
40
41
RESPUESTAS
Captulo 2. ANATOMA Y FISIOLOGA DEL APARATO REPRODUCTOR
FEMENINO. MECANISMOS DE ACCIN HORMONAL.
51: b).
El dimetro ovocitario en folculos primordiales es aproximadamente de 30 m,
creciendo hasta 50 en la etapa de folculo preantral. Cuando se incrementa de manera
significativa el tamao ovocitario, convirtindola en la clula de mayor tamao en la
especie humana, es en el paso del folculo preantral a antral, alcanzando 150 m; en
esta etapa se sintetiza tambin la zona pelcida (Greenwald y Roy, 1994).
52: c).
Hasta folculos antrales medianos. El paso de folculos primordiales a preantrales es
un proceso que puede realizarse sin gonadotrofinas, como ha quedado demostrado por
su persistencia en ratones mutantes con deficiencias en gonadotrofinas o en fetos
anenceflicos humanos. No obstante, no se puede descartar que las gonadotrofinas, en
caso de estar presentes, tengan algn papel activo en esta etapa del desarrollo
folicular. Se desconocen las molculas responsables de este fenmeno, pero se ha
postulado el papel principal de los niveles citoplasmticos en clulas de la granulosa y
en ovocitos del factor de crecimiento epidrmico, c-myc, c-kit y el gen supresor de
tumor de Wilms. El paso de folculo preantral a antral necesita un nivel basal o tnico
de gonadotrofinas sin el cual este paso no ocurre. El nivel basal de gonadotrofinas de
la mujer embarazada es suficiente para que este paso ocurra alcanzando los foliculos
unos 4 mm de dimetro. El siguiente paso en el desarrollo folicular sera la seleccin
folicular para el cual es necesario el incremento en los niveles de FSH que tiene lugar
al final de un ciclo menstrual y durante los primeros das del siguiente ciclo, dicho
aumento no se produce en la mujer embarazada, por lo que los folculos antrales
medianos degenerarn (Greenwald y Roy, 1994)
53: d).
La reanudacin de la meiosis parece ser debida a la reactivacin del factor promotor
de la maduracin (MPF) (Flament et al., 1997). MPF es un complejo formado por una
subunidad cataltica (p34cdc2) y una subunidad reguladora (Ciclina B). MPF presenta
dos estados, un estado inactivo (preMPF) y otro activo (MPF kinasa). Cuando la
subunidad p34cdc2 de preMPF es fosforilada en Thr 161 y desfosforilada en
Thr14/Tyr15, MPF pasa a su forma activa. Estas fosforilaciones y desfosforilaciones
son reguladas por la subunidad de ciclina B. La activacin de MPF induce otra serie
de fosforilaciones en las protenas del ovocito que reinician los acontecimientos de la
meiosis.
54: b).
Las clulas de la granulosa evolucionan desde un aspecto cuboidal formando una capa
en los folculos primordiales, hasta millones de clulas en el folculo preovulatorio.
Durante este desarrollo secretan multitud de sustancias como VEGF, IGFs, inhibina
42
B, etc, que tendrn accin a niveles endocrino, paracrino y/o autocrinos. Aunque los
receptores de FSH aparecen primero en la superficie de las clulas de la granulosa,
siendo fundamentales para responder a la accin de sta, los receptores de la LH
aparecen en las clulas de la granulosa en la etapa de seleccin folicular, la cual, al
actuar sobre estas clulas, induce un aumento en las concentraciones intracelulares de
AMPc que provocan aromatizacin y mitosis. Los niveles intracelulares de AMPc son
claves pues un exceso de stos, en vez de estimular la mitosis, la frenan, quedando el
folculo parado a este nivel (teora del techo de AMPc intracelular, para explicar la
anovulacin en el SOP).
55: c).
La apoptosis ocurre en clulas que sufren dficits de factores trficos o que responden
a necesidades del desarrollo. Es una muerte celular programada, que ocurre en
relacin con el desarrollo y renovacin normal de los tejidos (Kerr et al., 1972),
mientras que la necrosis ocurre tras traumatismos o lesiones agudas. Una de las
diferencias con la necrosis es que en sta se produce inflamacin, mientras que la
apoptosis al ser un proceso fisiolgico no cursa con reaccin inflamatoria (Cohen,
1994). La apoptosis se caracteriza morfolgicamente por una condensacin de la
clula con reduccin del volumen citoplasmtico, presencia de ondulaciones
membranosas y condensacin de la cromatina, lo que finaliza con una desintegracin
de la membrana celular formando los llamados cuerpos apoptticos (Kerr et al.,
1972).
56: b).
La familia de genes bcl-2 es muy amplia, incluyendo genes que inhiben (bcl-2, bcl-xlong, bag-1, etc) o activan (bax, bcl-x-short, bad, bak, etc) la apoptosis. El p53 activa
la apoptosis mediante la regulacin de la transcripcin de los genes de la familia bcl-2
(Miyashita y Reed, 1995). Se ha demostrado que el estrs oxidativo es un elemento
clave en la induccin de la apoptosis, de modo que enzimas antioxidantes como la
catalasa y la SOD producen una inhibicin de este proceso (Tilly y Tilly, 1995). El
sistema Fas/FasL constituye una de las vas de activacin de la apoptosis mediante la
unin del receptor de membrana Fas a su ligando (Hakuno et al., 1996).
57: a).
La apoptosis es principalmente un mecanismo fisiolgico encargado de mantener la
homeostasis tisular al controlar el nmero de celulas. La mitosis y la apoptosis son
procesos complementarios que regulan y mantienen un nmero adecuado de clulas.
Por tanto, la apoptosis acta en situaciones fisiolgicas en las que es necesaria una
reduccin celular, como en la eliminacin de los linfocitos T autorreactivos y el
desarrollo de los tractos genitales. Adems, su alteracin puede producir patologas
como enfermedades tumorales, autoinmunes y Alzheimer (Vaux, 1993).
58: a).
El efecto de los andrgenos en el desarrollo folicular es la activacin de la apoptosis.
Los estrgenos y las gonadotropinas s inhiben la apoptosis al proteger frente al estrs
oxidativo. Se ha demostrado que en folculos preantrales y antrales los esteroides
43
44
45
46
47
48
84: e).
En la etapa de dominancia se produce un incremento de los niveles de LH
intrafoliculares, lo que provocar en todos los folculos seleccionados menos en uno
(folculo dominante) unos niveles inadecuados de LH. El folculo que soporte esos
niveles de LH (teora del techo de la LH) ser el dominante (Speroff et al., 2000).
85: a).
Existen numerosos ejemplos de que una hormona puede regular la sntesis de los
receptores de otras; as la sntesis de receptores de progesterona es inducida por
estrgenos en endometrio uterino y en clulas de cncer de mama en cultivo, los
receptores de andrgenos son inducidos por FSH en clulas de Leydig, el receptor de
estrgeno en hgado es inducido por estradiol, hormona de crecimiento, hormonas
tiroideas y glucocorticoides (Daz Chico y Navarro, 1996).
86: e)
Las hormonas esteroideas son molculas lipoflicas, derivadas del colesterol y
sintetizadas en la corteza adrenal (glucocorticoides, mineralocorticoides y andrgenos
adrenales), los testculos (andrgenos testiculares, estrgenos), y el ovario y placenta
(estrgenos y progestgenos o progesterona) (Beato y Klug , 2000).
87: a).
Las hormonas Esteroideas, Tiroideas, Vitamina D3 y cido retinoico, poseen los
mismos tipos de receptores que pertenecen a una misma familia molecular, debido a
la considerable homologa en sus secuencias de aminocidos que afectan a seis
regiones de las molculas respectivas, denominadas con las letras A a la F y que
hacen que estos receptores compartan mecanismos comunes de accin y tambin
comparten su localizacin nuclear (Ing y OMalley, 1995).
88: e).
Distintos estados de plegamiento suponen que el receptor exhiba superficies distintas
que le permiten ganar o perder afinidad por secuencias de DNA o por protenas. La
interaccin con la hormona supone que se generen nuevas superficies, que permiten
unir coactivadores al dominio de unin al ligando. La interaccin con el DNA, hace
que ste experimente una curvatura, alterando los nucleosomas y permitiendo la
fijacin de la RNA pol.II para iniciar la transcripcin. El receptor estrognico es
fosforilado en los aminocidos Serina y Tirosina, perdiendo la capacidad de fijar
estradiol (Beato y Klug, 2000).
89: e).
La fosforilacin es un proceso relevante en la regulacin de la actividad de los
diferentes miembros de la familia de receptores de hormonas esteroideas.
Eventualmente, los receptores nucleares pueden actuar como sustratos de
fosforilacin-defosforilacin, respondiendo a seales procedentes de otras rutas. El
estado de fosforilacin de los receptores nucleares los integra dentro del sistema de
49
50
51
enzima adenilato ciclasa. Pero aunque existe este consenso general de que el AMPc
es el segundo mensajero ms importante para la accin de las gonadotrofinas, tambin
parece posible que la LH y FSH puedan usar otros sistema de segundos mensajeros,
tal como el Inositol fosfato y el diacilglicerol, a parte de otras seales intracelulares
(como el in calcio) que estn involucradas en la transduccin y/o modulacin de la
accin de gonadotrofinas en clulas diana (Gupta, 1993).
99: d).
Se han sintetizado dos tipos de anlogos, los anlogos agonistas y los antagonistas,
ambos tienen mayor afinidad por los receptores de la GnRH y son de mayor potencia.
Ambos anlogos producen un intenso hipoestrogenismo, pero actan de manera
distinta.
Los anlogos de la GnRH que son agonistas, al unirse a los receptores de membrana,
producen una respuesta inicial por desensibilizacin y la respuesta sostenida se debe a
la prdida de receptores y a la falta de acoplamiento de los receptores de su sistema
efector. Los antagonistas de la GnRH se unen a los receptores e inhiben
competitivamente a la GnRH natural, produciendo el hipoestronismo deseado. Como
consecuencia de lo anterior, administracin de anlogos agonistas de la GnRH induce
a corto plazo una estimulacin de la liberacin y sntesis de gonadotrofinas (flare-up)
y supone la exposicin continuada de la hipfisis a la GnRH, por su alta afinidad de
unin al receptor de la misma y una vida media ms larga que la natural. Los anlogos
antagonistas no provocan el efecto inicial de estimulacin de los agonistas. Los
anlogos antagonistas compiten con la GnRH en la ocupacin de los receptores de
sta en las membranas celulares. Los anlogos antagonistas desde su descubrimiento
se han asociado a efectos secundarios relacionados con la liberacin de histamina
aunque las nuevas generaciones de antagonistas de la GnRH son molculas ms
potentes y que inducen una menor liberacin de histamina (Navarro et al., 2000;
Requena et al., 2000).
100: e).
No siempre los elementos de respuesta hormonal son palndromos perfectos o
hexmeros repetidos perfectos, basta con que uno de los hexmeros sea el que
corresponda al elemento de respuesta hormonal. La interaccin dmero de receptor y
ADN se produce de manera ordenada, el primer monmero de receptor interacta con
el primer hexmero del elemento de respuesta hormona, despus lo hace la segunda
molcula del dmero de receptor que se une al segundo pentmero (Beato and klug,
2000).
101: b).
La superfamilia de receptores hormonales esteroideos, est constituida por Receptores
de hormonas esteroideas, tiroideas y receptores hurfanos, receptores de cido
retinoico y de vitamina D3 ya que constituyen la familia de receptores nucleares por su
localizacin. Los receptores hurfanos son miembros de la superfamilia que han sido
clonados, no teniendo ligandos conocidos (Ing y OMalley, 1995).
102: a).
52
53
BIBLIOGRAFA
Captulo 2. ANATOMA Y FISIOLOGA DEL APARATO REPRODUCTOR
FEMENINO.
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54
55
56
CAPTULO 3.
FISIOLOGA DE
EMBRIONARIAS
LA
FECUNDACIN
PRIMERAS
DIVISIONES
Nez AI*, Surez I*, Expsito A**, Expsito AI*, Vergara F Jr***.
*Unidad de Reproduccin, HU Virgen de las Nieves, Granada
**Unidad de Reproduccin, Hospital de Cruces, Barakaldo, Bizkaia
***Laboratorio CEIFER, Granada
57
58
a)
b)
c)
d)
e)
59
La fertilidad.
La unin espermtica a la zona pelcida.
Ofrece informacin sobre la reaccin acrosmica.
Ofrece informacin sobre la fusin de las membranas.
Todo lo anterior.
Inferior a 10-20%.
Superior al 10-20%.
Inferior al 50-60%.
Superior al 50-60%.
Ninguna de las anteriores es correcta.
60
Electroforesis en gel.
Determinacin de la actividad proteoltica con sustrato de gelatina.
Tincin inmunohistoqumica.
Todas las anteriores.
Ninguna de las anteriores.
Testosterona.
Estrgenos.
Progesterona.
Todas las anteriores.
Ninguna de las anteriores.
61
Colchicina.
Ionomicina.
Ionforo del calcio.
Las respuestas b) y c) son correctas.
Las respuestas b) y d) son correctas.
62
20.
30.
9.
5.
1.
ZP1.
ZP2.
ZP3.
Los tres componentes son de alta especificidad y no estn conservados
evolutivamente entre las especies de mamferos.
e) Los tres componentes son similares en cuanto a su composicin, incluso entre
distintas especies.
136.- Dnde se produce la fecundacin del ovocito?
a)
b)
c)
d)
e)
63
Intraligamentario.
Tubrico.
Ovrico.
Abdominal.
En el cuello del tero.
Mitocondria.
Centriolo distal.
Aparato de Golgi.
Ribosomas.
Ninguna de las anteriores.
CD40.
CD42.
CD44.
CD46.
64
e) CD48.
142.-Con qu se induce la reaccin acrosmica en el test ARIC?
a)
b)
c)
d)
e)
Ionforo A23187.
ZP3.
Lquido folicular.
Progesterona.
GB24.
Reaccin acrosmica.
Cromatina espermtica
Capacitacin.
Hiperactivacin.
Unin a zona pelcida.
65
c) 50%.
d) 75%.
e) 5%.
148.- El blastocisto implantado y el no implantado, se comunican con el ovario
materno mediante la produccin de:
a)
b)
c)
d)
e)
LH.
FSH.
hCG.
Estradiol.
Progesterona.
Prolactina.
Estradiol.
Progesterona.
FSH.
LH.
Pinpodos.
Mucinas.
EGF.
TNF.
IL-1.
152.-La masa multinucleada que erosiona hacia el interior del endometrio para
facilitar la implantacin del blastocisto es:
a)
b)
c)
d)
e)
Sincitiotrofoblasto.
Saco vitelino.
Citotrofoblasto.
Ammios.
Masa celular interna.
66
8 y 13 despus de la fecundacin.
1 y 4 despus de fecundacin.
Despus del da 13.
4 y 8 despus de fecundacin.
Este tipo de gestacin no existe.
Monocorial-biamnitica.
Bicorial-biamnitica.
Bicorial-monoamnitica.
Las respuestas b) y c) son las correctas.
Monocorial-monoamnitica
Monocorial-monoamnitica.
Monocorial-biamnitica.
Bicorial-biamnitica.
Bicorial-monoamnitica.
Nada de lo anterior.
67
Monocigtica.
Bicigtica.
Monoamnitica.
Monocorial.
Nada de lo anterior.
68
RESPUESTAS
ESPERMATOZOIDE
106: b).
En los ltimos aos son muchas las ideas y mitos que han cambiado del DNA
mitocondrial, as aunque es verdad que el DNA mitocondrial muta ms rpidamente
que el DNA nuclear, no todo el DNA mitocondrial cumple con esta afirmacin ya que
hay regiones del DNA mitocondrial ms sensibles que otras. Otra idea que ha
cambiado es la ausencia de maquinaria de reparacin de DNA mitocondrial, ya que s
existe una maquinaria reparadora adecuada, pero a todas luces insuficiente por la gran
generacin de especies reactivas de oxgeno que tiene lugar en la mitocondria. La
mitocondria tiene el sistema enzimtico necesario para recombinar su DNA. El DNA
mitocondrial sintetiza 2rRNA, 22tRNA y 13 protenas implicadas en la cadena
respiratoria mitocondrial, que en caso de estar alterados se heredan por va materna,
pero el resto de protenas de la cadena respiratoria mitocondrial proceden de genes de
DNA cromosmico nuclear por lo que no siempre una alteracin de la cadena
respiratoria mitocondrial corresponde a mutaciones en el DNA mitocondrial
(Christodoulu, 2000).
107: a).
El espermatozoide introduce durante la fecundacin un nmero pequeo de copias de
DNA (70 copias por espermatozoide) comparado con las presentes en el ovocito
(100.000 copias). La eliminacin de estas copias de DNA mitocondrial parece ser un
proceso activo y no una simple cuestin de dilucin, habindose implicado
recientemente al sistema ubiquitina en la eliminacin de las copias de DNA
mitocondrial espermtico en el citoplasma ovocitario. Durante la espermatognesis
parecen existir mecanismos activos para regular el nmero de copias de DNA
mitocondrial, entre esos mecanismos estara implicado la protena Tfam (Factor A de
transcripcin mitocondrial). Dentro de las teoras que intentan explicar por qu no se
hereda el DNA mitocondrial paterno, estara la que achaca un mayor dao en el DNA
mitocondrial espermtico que en el ovocitario por una mayor exposicin a especies
reactivas de oxgeno, ya que la actividad de una mitocondria espermtica es mucho
ms elevada que la de una ovocitaria (Rantanen y Larsson, 2000; Cummins, 2000).
108: e).
El movimiento de hiperactivacin espermtico se caracteriza por una disminucin del
desplazamiento lineal y un aumento del movimiento lateral de la cabeza (Burkman,
1990).
109: d).
La mayora de las clulas estn equipadas tanto con sistemas antioxidantes de tipo
enzimtico (superxido dismutasa, glutation peroxidasa, catalasa) como por sistemas
que no lo son (vitaminas E y C, cido rico). En el eyaculado humano, las especies
69
70
De las molculas enumeradas slo el ionforo del calcio A23187 es capaz de inducir
la reaccin acrosmica en espermatozoides humanos, ya que permite la entrada de
calcio, incrementando sus niveles intracitoplasmticos, lo que desencadenar una
serie de eventos bioqumicos que llevarn a la fusin de la membrana acrosmica
externa y la membrana plasmtica espermtica, con la consiguiente salida del
contenido acrosmico (Aitken y Elton, 1986; Aitken et al., 1993).
116: b).
Las lectinas son molculas de origen vegetal que tienen avidez por restos glucdicos y
que se van a unir a stos. Uno de los mtodos para evaluar la reaccin acrosmica, es
usar PSA, una lectina que se va a unir a los restos de manosa de la membrana
acrosmica externa del espermatozoide. La forma de visualizar la unin es con
fluorescencia. Sin que se haya producido reaccin acrosmica, el acrosoma aparece
fluorescente debido a la integridad de su membrana. Cuando se produce la reaccin
acrosmica, fusionndose las membranas plasmtica y acrosmica externa del
espermatozoide, queda un resto de dichas membranas en la zona ecuatorial de la
cabeza y esa es la banda visible que determina que se ha producido recientemente la
reaccin acrosmica. Poco despus estos restos desaparecen, desapareciendo la banda
fluorescente en la zona ecuatorial de la cabeza del espermatozoide (Cross, 1995).
117: b).
En un intento por superar algunas de las limitaciones del test de hmster se ha
desarrollado una prueba para determinar la capacidad de unin de los
espermatozoides a la zona pelcida de ovocitos humanos no fecundados y no viables.
El test consiste en dividir microscpicamente, en dos hemisferios o hemizonas,
ovocitos humanos. Una de las dos hemizonas es incubada con los espermatozoides
problema y la otra con espermatozoides control. En cuanto a la respuesta a), no se
puede decir que esta prueba evale la fertilidad ya que sta slo se determina con el
estudio de la pareja. La respuesta d) se refiere a lo que se evala en el test de
penetracin espermtica con ovocitos de hmster, a los que se les ha quitado la zona
pelcida (Jeyendran. 2000).
118: c).
El resultado de la prueba de la hemizona se determina contando el nmero de
espermatozoides que se han unido a cada una de las hemizonas, determinando el
ndice de hemizona (n espermatozoides problema unidos / n espermatozoides
control unidos) x 100. Las condiciones experimentales de la prueba influyen
decisivamente sobre el resultado, por lo que la incorporacin de semen control y el
hecho de usar ovocitos humanos, incrementan el valor diagnstico de la prueba de la
hemizona y facilitan la comparacin de los resultados entre los distintos laboratorios
(Coddington et al.,1990).
119: c).
Si el ndice de hemizona es inferior al 50%-60%, debe sospecharse una alteracin de
la capacidad fecundante del semen (Oehninger et al., 2000).
71
120: e).
La acrosina es un enzima del acrosoma del espermatozoide, identificada como una
proteasa srica que se activa a pH 8. Su funcin fisiolgica es facilitar la unin del
espermatozoide a la zona pelcida y su posterior penetracin en el ovocito. La enzima
est presente como proacrosina o enzima inactiva, y su activacin tiene lugar durante
la reaccin acrosmica, cuando el espermatozoide se halla en contacto con el ovocito.
En el plasma seminal y en la propia membrana del acrosoma, hay inhibidores
naturales de la acrosina (Mata y Bassas, 1994).
121: d).
Los mtodos que se describen para el anlisis de la acrosina son: la electroforesis en
gel, la determinacin de la actividad proteoltica usando sustrato de gelatina y las
tinciones inmunohistoqumicas (Mata y Bassas, 1994).
122: c).
Hace algunos aos se descubri que los ovocitos de hmster, a los que se les haba
eliminado la zona pelcida, eran capaces de fusionarse con espermatozoides de otras
especies como la humana. As, se desarroll la prueba de penetracin espermtica
test de hmster, que proporciona la informacin indicada en la respuesta c), pero no
nos da a conocer la capacidad del espermatozoide de atravesar el cmulo celular ni la
zona pelcida (Mata y Bassas, 1994).
123: e).
La estandarizacin de la tcnica del test de hmster es muy importante. La
penetracin espermtica depende mucho de las condiciones en las que se realice la
prueba. Son especialmente importantes las indicadas en las respuestas. Estas variables
hacen que los valores de referencia difieran enormemente (Boada y Arn, 1994).
124: c).
La adicin de progesterona a suspensiones de espermatozoides humanos, produce un
incremento intenso y transitorio del calcio, encontrndose este esteroide en altas
concentraciones en el lquido folicular humano y en el cmulo. La incubacin de
suspensiones de espermatozoides en medios de cultivo suplementado con
progesterona, induce tanto la reaccin acrosmica e hiperactivacin, como un
aumento de la penetracin de la zona pelcida y de la fusin espermatozoide
ovocito (Aitken et al., 1996 ). La velocidad y magnitud de la respuesta del calcio a la
progesterona sugiere que el receptor de la progesterona debe ser un receptor
esteroideo no genmico creyndose que estos efectos de la progesterona estn
mediados por receptores localizados en la membrana plasmtica. Evidencias
experimentales sugieren que deben ser de tres tipos los receptores: un canal de calcio,
un receptor tipo GABA - A y una tirosn kinasa (Aitken, 2000). Por otra parte este
incremento transitorio del calcio intracelular inducido por progesterona tiene lugar,
tanto en espermatozoides capacitados, como en los no capacitados; pero slo los que
han sido capacitados y han sufrido un proceso espontneo de tirosn fosforilacin,
72
podrn tener reaccin acrosmica y fusionarse con los ovocitos (Calogero et al., 2000;
Ambhaikar y Puri, 1998 ).
125: e).
Como ya hemos comentado, son varios los receptores de membrana implicados en la
respuesta espermtica a la progesterona, por lo que los cambios moleculares sern
variados: aumento de la concentracin de calcio libre, activacin de la tirosn quinasa,
incremento del AMPc y despolarizacin de la membrana por flujo de sodio (Aitken,
2000).
126: d).
La reaccin acrosmica es un proceso de fusin de la membrana plasmtica y la
membrana acrosmica externa del espermatozoide por el que se libera el contenido de
la vescula acrosmica al exterior. La membrana interna del acrosoma queda expuesta
al contacto directo con las cubiertas del ovocito, al completarse la reaccin
acrosmica, y se une a la zona pelcida. La reaccin acrosmica requiere la entrada
de calcio, salida de H+ y una alcalinizacin del citoplasma (Plachot, 2000).
127: d).
Una vez producida la unin membrana plasmtica del ovocito-espermatozoide, el
ovocito sufre una serie de cambios morfolgicos y bioqumicos que permiten la
divisin y diferenciacin celular para la formacin del embrin. Los cambios ms
representativos son: la exocitosis de grnulos corticales y la continuacin de la
meiosis desde MII, dnde se haba quedado bloqueada (Dulcibella, 1996). La
exocitosis de grnulos corticales ocurre en respuesta a la oscilacin del Ca++
intracelular ms que al incremento mantenido del calcio (Taylor et al., 1993). Los
grnulos corticales contienen enzimas hidrolticos que son transportados al espacio
perivitelino por exocitosis. Esos enzimas modifican qumica y fsicamente las
caractersticas de la zona pelcida hacindola impenetrable a los espermatozoides. El
fallo de la exocitosis de grnulos corticales permite la polispermia (Wassarman,
1994).
128: d).
Entre los inductores in vitro de la activacin ovocitaria se encuentran los mencionados
ionforo del calcio y la ionomicina (Battaglia et al., 1997). La colchicina sirve para
parar la mitosis celular en metafase y poder hacer cariotipos.
129: c).
El contacto inicial entre espermatozoide y ovocito es un proceso mediado por
receptores. La zona pelcida est compuesta por glucoprotenas secretadas por el
ovocito, llamadas ZP1, ZP2 y ZP3, de las cuales la ms abundante es la ZP3
(Shabanowitz y O`Rand, 1988) y es la principal molcula de unin para el
espermatozoide. La unin con ZP2 se produce despus de la reaccin acrosmica e
interviene en la reaccin de la zona para prevenir la polispermia. El gen de ZP3 se
expresa slo en los ovocitos en crecimiento. La similitud en la secuencia de ADN de
73
74
75
76
143: a).
El espermatozoide slo tiene dos centriolos: el distal y el proximal. El centriolo
espermtico implicado en las primeras divisiones embrionarias, es el proximal y se
encuentra situado en la pieza de conexin espermtica que une la cabeza con la pieza
intermedia. El distal no se implica en ese proceso ya que se encuentra en el flagelo, en
la pieza principal (Postius y Bargall, 1994).
144: a).
La tincin con azul de anilina sirve para estudiar la madurez de la cromatina
espermtica, observndose tres patrones: Negativo: Corresponde a una cromatina
espermtica madura (protaminas), aunque se observa la membrana plasmtica teida
el ncleo no lo est. Intermedio: corresponde a una cromatina ligeramente inmadura.
Se observa el ncleo teido ligeramente de azul y la banda ecuatorial aparece teida
de azul intenso. Positivo: Cromatina espermtica inmadura (histonas), el ncleo
aparece teido de forma intensa, as como la membrana plasmtica (Mortimer, 1994).
La expresin de protenas que captan manosa (protenas lectin-like) se incrementa en
la membrana plasmtica espermtica tras la capacitacin (Benoff et al., 1994).
145: b).
La tincin con el fluorocromo naranja de acridina sirve para distinguir
espermatozoides con DNA nativo de doble cadena (fluorescencia verde) de
espermatozoides con DNA de cadena simple (fluorescencia naranja) (Mortimer,
1994).
146: c).
La duracin de la fase folicular es la que determina la duracin del ciclo menstrual.
Lafase ltea dura generalmente de 14 a 16 das, estando este proceso autolimitado y
regulado por el propio cuerpo lteo, en el que juega un papel clave la apoptosis
celular. La duracin de la fase folicular, y por tanto del ciclo menstrual, se ha
relacionado con: la edad de la mujer, los niveles de FSH y de inhibina B (Speroff et
al., 2000).
147: a).
En la especie humana y bajo unas condiciones normales, slo un tercio de los ciclos
que son considerados frtiles acaban en embarazo y una de las principales causas es la
baja tasa de implantacin embrionaria, ya que aproximadamente slo el 30% de los
embriones se implantan. Las causas de esta baja tasa de implantacin son tanto de
origen embrionario, como de origen endometrial (Miller et al.,1980).
148: c).
La gonadotrofina corinica humana, es una glicoproteina sintetizada por el
sincitiotrofoblasto y es detectable en plasma entre los das 8 y 10 tras el pico de LH.
Su funcin es estimular la produccin de 17- progesterona y estrgenos necesarios
77
78
El 30% de las gestaciones gemelares naturales se producen por la divisin precoz del
embrin. El 25% de estas gestaciones es gemelar monocigtica bicorial-biamnitica y
se produce por la divisin de un embrin en estadio de mrula entre el 1 y 4 da
despus de la fecundacin, ocasionalmente se pueden fusionar las placentas, pero an
as rara vez se produce anastmosis entre la circulacin de ambos, por lo que el
desarrollo del embarazo suele ser como el del gemelar bicigtico (Ezcurdia et al.,
1999).
155: d).
Aunque raro, ocurre a veces que tras transferir un embrin, ste se divide produciendo
un embarazo gemelar monocigtico, siendo lo ms frecuente (75%) la divisin de un
embrin en fase de blastocisto, entre el 4 y 8 da despus de la fecundacin. Cada
embrin forma su cavidad dando lugar a una gestacin monocorial y biamnitica
(Ezcurdia et al, 1999).
156: b).
Si se identifica con claridad la existencia de dos placentas con reas de implantacin
separadas, se puede establecer el diagnstico de gestacin bicorial. La gestacin
bicorial monoamnitica no existe (Ezcurdia et al., 1999).
157: c).
Al determinar el sexo de los gemelos, si se trata de gemelos de distinto sexo, podemos
asegurar que se trata de una gestacin bicorial y biamnitica. Por el contrario, si no
puede diagnosticarse o son del mismo sexo el diagnstico debe basarse en otros
criterios ya que la gestacin puede ser monocorial o bicorial (Ezcurdia et al., 1999).
158: e).
No podemos asegurar nada pues lo ms probable es que fuera una gestacin bicigtica
por transferencia de dos embriones del mismo sexo, pero no podemos descartar que
un embrin no implantara y que el otro se dividiera dando una gestacin gemelar
monocigtica pudiendo ser monocorial (monoamnitica o biamnitica), o bicorial
biamnitica (Ezcurdia et al., 1999).
159: a).
Una zona pelcida adelgazada, puede afectar el proceso de Hatching, as por ejemplo
si el blastocisto sobresale en ms de un sitio se esperan mltiples sitios de zona de
lisis. En la concepcin natural, el nico factor que afecta de manera constante en la
frecuencia de gemelos monocigticos es la edad materna (Abusheika et al., 2000).
160: c).
Slo existe un riesgo aumentado de gemelos monocigticos tras ser sometidos a
tcnicas de reproduccin asistida con Hatching artificial, ya que la ruptura mecnica o
qumica de la arquitectura de mucopolisacridos de la zona pelcida, o sntesis
anormal de mucopolisacridos, pueden ser la causa de este mayor porcentaje de
79
80
BIBLIOGRAFA.
CAPTULO 3. INTERACCIN OVOCITO
PRIMERAS DIVISIONES EMBRIONARIAS.
ESPERMATOZOIDE
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Esterilidad Clnica
CAPTULO 4.
ESTERILIDAD CLNICA PARA EMBRILOGOS.
Fontes J*, Yoldi A**, Martnez L*, Mendoza N*, Molina R***.
*Unidad de Reproduccin, HU Virgen de las Nieves, Granada
**Laboratorio CEIFER, Granada
***Centro de Reproduccin Humana, Granada
85
Esterilidad Clnica
86
161.-Segn la OMS, cul es el tiempo mnimo que debe esperarse una pareja
que busca embarazo, antes de empezar un estudio de esterilidad?
a)
b)
c)
d)
e)
6 meses.
12 meses.
18 meses.
24 meses.
30 meses.
Endometriosis.
Esterilidad de causa desconocida.
Patologa tubrica.
Anomalas en la ovulacin.
Factor inmunolgico
Esterilidad Clnica
87
Sndrome de Turner.
Sndrome de Klinefelter.
Sndrome adrenogenital.
Disgenesia gonadal mixta.
Pseudohermafroditismo masculino.
Utero bicorne.
Utero didelfo.
Atresia vaginal.
Himen imperforado.
Atresia cervical.
Hiperinsulinismo.
Hipersecrecin de LH.
Hiperandrogenismo.
Niveles bajos de progesterona.
Niveles bajos de leptina.
Esterilidad Clnica
88
CA 125.
Sntomas.
Ecografa.
Laparoscopia.
Tacto bimanual.
Esterilidad Clnica
a)
b)
c)
d)
e)
89
Cimetidina.
Sulfasalazina.
Nitrofurantoina.
Espironolactona.
Nifedipino.
Sndrome de Turner.
Sndrome de varn XX.
Cariotipo XYY.
Cariotipo XXY.
Ninguna de las anteriores.
179.-Un paciente refiere a la hora de la recogida de semen que el tiene los testculos
muy grandes de siempre, cul de las siguientes afirmaciones es falsa?
a) La macrorquidia bilateral es rara y se define por testculos de tamao superior a 35
ml.
b) La macrorquidia bilateral se asocia a sndrome de X frgil.
c) Tendr un seminograma con un elevado nmero de espermatozoides.
d) A veces se asocia a pubertad precoz.
e) La causa ms frecuente es desconocida o idioptica.
180.-Sealar cundo debemos sospechar una posible eyaculacin retrgrada:
Esterilidad Clnica
a)
b)
c)
d)
e)
90
Esterilidad Clnica
b)
c)
d)
e)
91
Papaverina.
Bromocriptina.
Son correctas a) y b).
Son correctas b) y c).
Concentracin espermtica.
Movilidad espermtica.
Morfologa espermtica.
Slo a) y c).
Ningn parmetro seminal influye en el resultado de la ICSI.
Esterilidad Clnica
92
a)
b)
c)
d)
Factor masculino.
Endometriosis.
Obstruccin tubrica bilateral.
Esterilidad de origen desconocido.
En todas est indicado.
Factor tubrico.
Tras MESA o TESA.
Endometriosis grado IV.
Factor masculino leve.
En todos los casos est indicado FIV-TE.
194.-Cul sera su consejo a una pareja (ella tiene 33 aos y el 37) que se ha hecho en
otra clnica dos ciclos de inseminacin artificial conyugal por esterilidad sin causa?:
a) Que intenten adoptar un nio.
Esterilidad Clnica
93
b) Microinseminacin.
c) Inseminacin con semen de donante.
d) Realizar 2 ciclos ms de Inseminacin artificial conyugal y si no se consigue
gestacin, FIV y/o ICSI.
e) FIV.
195.-Una pareja en la que el varn est diagnosticado de azoospermia secretora y la
mujer de un factor tubrico definitivo, qu actitud es la correcta?
a) Inseminacin con semen de donante.
b) Microinseminacin con espermatozoides de tejido testicular sin realizar
estudios diagnsticos.
c) Estudio previo de mutaciones de la fibrosis qustica en el varn.
d) Las respuestas a) y b).
e) Ninguna de las anteriores.
ms
Esterilidad Clnica
94
Recto-sigma.
Vejiga urinaria.
Arteria ilaca interna.
Vena ilaca interna.
Nervio obturador.
Esterilidad Clnica
95
208.-Qu caractersticas
debe poseer una aguja de puncin para la
recuperacin ovocitaria de una paciente?
a)
b)
c)
d)
e)
Esterilidad Clnica
96
Megaloespermatocitos focales.
Presencia de infiltrados inflamatorios intersticiales y peritubulares.
Presencia de un 30% de tubos con hialinizacin.
Presencia de un 60% de tubos con slo clulas de Sertoli
Todos son signos de mal pronstico.
Esterilidad Clnica
97
RESPUESTAS
CAPTULO 4. ESTERILIDAD CLNICA PARA EMBRILOGOS.
161: b).
Una pareja se considera que padece esterilidad primaria si tras 12 meses de relaciones
sexuales sin mtodos anticonceptivos no queda gestante. Presentndose
aproximadamente en el 15% de las parejas aunque existen variaciones nacionales
(Juul, 1997). Existen casos donde no es necesario esperar un ao para empezar el
estudio bsico de esterilidad, como por ejemplo casos de edad avanzada de la mujer,
amenorrea primaria o de amenorrea secundaria de larga duracin, donde las pruebas
diagnsticas pueden solicitarse antes (WHO, 1993).
162: d).
Los trastornos de la ovulacin llegan a suponer un 40% de las causa femeninas de la
esterilidad. (Speroff te al., 2000)
163: d).
La alteracin del ciclo menstrual es una de las caractersticas principales del sndrome
de ovarios poliqusticos, tanto en el tiempo (opsomenorreas, baches amenorreicos)
como en la cantidad (hipermenorrea). El resto de las disfunciones expuestas suelen
cursar con ciclos habitualmente normales.
164: e).
Aunque es raro, algunos dficit enzimticos parciales, como el de la enzima 17, 20desmolasa, impiden la sntesis adecuada de estradiol, por lo que al someter a estas
mujeres a estimulacin de la ovulacin sus niveles de estradiol permanecern bajos,
siendo necesario la administracin de un estrgeno exgeno para un adecuado
desarrollo folicular mltiple junto a GnRHa y gonadotropinas (Pellicer et al., 1991;
Pellicer y Cano, 1995). La determinacin de estradiol se hace generalmente por
mtodos de inmunoanlisis por lo que puede verse afectada su determinacin por la
presencia de anticuerpos heteroflicos (Kaimero et al., 1999). Un cambio brusco en
los niveles de estradiol durante un desarrollo folicular no tienen por qu ser siempre
culpa del laboratorio puede asociarse a una desensibilizacin de los receptores de FSH
por parte de la LH o a una mala administracin de la FSH.
165: b).
En la elevacin de los niveles de androstendiona, testosterona y
17dihidroprogesterona participan ovario y glndula suprarrenal aunque tienen un
origen fundamentalmente ovrico. Es cierto que a pesar de que el ovario no secreta
grandes cantidades de estrgenos, existe un hiperestrogenismo dependiente de la
estrona debido a la conversin perifrica de la androstendiona. La elevacin de los
niveles de LH surge como consecuencia de una especial sensibilidad de la hipfisis a
la estimulacin de GnRH, lo que origina un aumento de la amplitud y la frecuencia de
sus pulsos de secrecin. Se cree que esto es debido a la elevacin de los niveles de
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99
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100
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102
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103
187: d)
No slo los individuos con agenesia bilateral de deferentes tienen una mayor
frecuencia (90%) de mutaciones en el gen CFTR, sino que tambin los individuos con
afectacin unilateral tienen incrementada dicha frecuencia (40%). La obstruccin
congnita de conductos eyaculadores con los conductos deferentes conservados y
agenesia renal tambin se asocian a mutaciones en dicho gen. Por todo esto, en
varones con agenesia bi- y unilateral de conductos deferentes, varones con
azoospermia obstructiva especialmente si se acompaa de volumen seminal bajo y
varones con agenesia renal se aconseja realizar estudio del gen CFTR (Bassas et al.,
2001).
188: a).
La presencia de hidrosalpinx se ha asociado a un peor resultado en la fertilizacin in
vitro. Cohen et al. (1999) en un programa de donacin de ovocitos, encuentran una
disminucin estadsticamente significativa de gestaciones en las pacientes con
hidrosalpinx, as como una mayor tasa de embarazos ectpicos y abortos. Strandell et
al. (2000), en un estudio sobre 192 pacientes encuentran una mejora significativa en
las tasas de embarazos clnicos, 47,7 vs 22,5%, y partos, 40 vs. 17,5%, en aquellas
pacientes que padecan hidrosalpinx visibles ecogrficamente y que se sometieron a
salpinguectoma previa a FIV-TE. Si bien la presencia de hidrosalpinx bilaterales
ecogrficamente visibles no obligar a cambiar la tcnica a realizar, s se aconseja
actuar previamente, bien mediante salpinguectoma o por oclusin tubrica proximal,
evitando la llegada de los fluidos tubricos a la cavidad endometrial.
189: e).
Si con el inicio del tratamiento con gonadotrofinas en 3 da se produce una seleccin
excesiva de folculos antrales grandes, deberemos reducir la dosis administrada o bien
retrasar la administracin para inducir una mayor atresia (Teora del Umbral de FSH).
Ambas medidas quizs sean excesivas y no consigan el efecto de estmulo de la
ovulacin que vamos buscando con el tratamiento. La reconversin de un ciclo de
inseminacin intrauterina en FIV debe ser siempre una medida orientada a evitar el
sndrome de hiperestimulacin ovrica o el ltimo recurso teraputico en pacientes
con dificultad para conseguir un ciclo con desarrollo de menos de 4 folculos, pero
nunca el objetivo por tratarse de una tcnica con mayor coste econmico y con mayor
ndice de riesgos.
190: c)
Las indicaciones de inseminacin artificial intrauterina son: factor masculino leve,
endometriosis con trompas permeables, siempre que se tenga una trompa normal y la
esterilidad de origen desconocido. El factor tubrico definitivo impide el contacto entre
ovocito y espermatozoide, por lo que la inseminacin artificial no tiene utilidad.
191: e)
Aunque no hay unos criterios uniformes en el nmero de espermatozoides obtenidos en
el test REM, necesario para llevar a cabo inseminaciones artificial, la mayora de autores
Esterilidad Clnica
104
estn de acuerdo en que cuando hay menos de 2 millones no es lgico llevar a cabo esta
tcnica, y as mismo si ya se han realizado 4 ciclos y no se ha conseguido una gestacin
el seguir intentando nuevos ciclos tiene una tasa de gestaciones muy baja. La
teratozoospermia reduce considerablemente la tasa de xitos de la inseminacin
artificial, por lo que en casos severos (<4% de formas normales) se recomienda realizar
ICSI. La posibilidad de realizar inseminacin artificial en parejas con factor masculino
inmunolgico va a depender de la morfologa y nmero de espermatozoides progresivos
que obtengamos tras el REM (WHO, 2000).
192: e).
En parejas con azoospermia y que en la biopsia de testculo no aparezcan
espermatozoides se pueden inseminar con semen de donante lo mismo que en aquellos
casos en que al utilizar el semen del marido se pueda transmitir una enfermedad gentica
o infecciosa. En mujeres solteras slo se puede utilizar semen de un banco. En casos de
globozoospermia se debe realizar una ICSI, obtenindose buenos resultados con la
utilizacin simultnea de activadores del ovocito (Battaglia et al., 1997).
193: b).
En todos los casos mencionados el tratamiento de eleccin es una fecundacin in vitro,
excepto tras la microaspiracin espermtica epididimaria (MESA) o con
espermatozoides de testculo (TESA) donde lo indicado es realizar una ICSI.
194: d).
En esta pareja no hay an indicacin para realizar ni microinseminacin ni Inseminacin
con semen de donante puesto que no se ha llevado a cabo los 4 ciclos de inseminacin
artificial con semen del marido, si stos no tienen xito entonces sera lgico pasar a
Fecundacin in vitro y/o microinseminacin.
195: e).
Al tener la mujer una obstruccin tubrica no se le puede realizar inseminacin artificial
con semen de donante. Ante la asociacin de azoospermia secretora con
microdelecciones del cromosoma Y y con anomalas cromosmicas, conviene realizar
los estudios genticos correspondientes, PCR y cariotipo, respectivamente. El estudio de
Fibrosis qustica se realizar principalmente en el caso de agenesia bilateral de
deferentes. En un elevado porcentaje, 30-60%, de azoospermias secretoras,
encontraremos focos aislados de espermatognesis que nos permitirn obtener
espermatozoides testiculares para realizar ICSI con ellos.
196: a).
Todos estos tratamientos se han intentado para solucionar la esterilidad por factor
masculino inmunolgico. El tratamiento in vitro con proteasas va dirigido a
neutralizar los anticuerpos antiespermatozoide mediante su digestin enzimtica,
siendo un tratamiento experimental. La FSH recombinante tiene un papel dudoso en
el tratamiento del varn estril en general. Kamischke y Nieschlag (1999)
demostraron tras un exhaustivo meta-anlisis la ineficacia del tratamiento con
Esterilidad Clnica
105
corticoides y el alto riesgo de complicaciones que presenta. Por todo lo anterior son
varios los autores que aconsejan reproduccin asistida directamente a estas parejas
estriles, dependiendo de la tcnica de reproduccin asistida de cada grupo, ya que
unos autores proponen empezar con inseminaciones, otros con FIV y otros ir
directamente a la ICSI (Kamischke y Nieschlag, 1999; OMS, 2000).
197: c).
La imagen ecogrfica de triple lnea endometrial mayor de 7mm se relaciona con un
endometrio periovulatorio ptimo para la transferencia embrionaria. Su aparicin se
debe a la proliferacin endometrial. Teniendo en cuenta la imagen o textura del
endometrio y siguiendo la clasificacin de Smith et al. (1984), se distinguen tres tipos
diferentes de endometrio: uno tipo A que se caracteriza por presentar un patrn de
triple lnea, una intermedia que es la interfase entre las dos capas endometriales y dos
externas que representan las interfases endometrio-miometrio, adems la
ecogenicidad endometrial es menor que la del miometrio; el tipo B tambin presenta
una triple lnea, pero la lnea central es menos ntida; y el tipo C en el que el
endometrio se visualiza como una imagen homognea. Los trabajos de Gonen y
Casper (1990) encuentran mejor pronstico para el endometrio tipo A que para los
tipos B y C (Callen, 1995).
198: b).
La culdocentesis es la puncin y aspiracin del fondo de saco de Douglas, regin
anatmica formada por la repleccin del peritoneo visceral, tras cubrir la cara
posterior de la vagina y anterior del recto. Su aplicacin ms frecuente es el
diagnstico de embarazo ectpico, puncin de quistes benignos, tratamiento de
enfermedad inflamatoria plvica y diagnstico de tumoraciones ovricas malignas. La
complicacin ms frecuente de esta tcnica es la puncin rectal (1/400 en la serie de
Crews) (Kser et al., 1997).
199: c).
La transferencia transmiometrial de embriones es una tcnica sencilla, relativamente
inocua, en la que no se han descrito complicaciones graves. Est indicada cuando la
paciente presenta lesiones en el crvix que dificultan su canalizacin. La zona de
abordaje se establece en el espacio comprendido entre el crvix y la vejiga,
pudindose lesionar sta. Cuando el catter est prximo al fondo uterino, se sueltan
los embriones previa liberacin de suero para asegurarnos de su correcta localizacin
(Kato, 1993).
200: b).
La HCG, (obtenida a partir de la orina de mujeres embarazadas y de tejido
placentario), se usa para simular el pico ovulatorio de LH de la mitad del ciclo, por su
similitud estructural y biolgica con la LH. En breve se dispondr de HCG
recombinante y de LH recombinante. La prolongada vida media de la HCG es de
aproximadamente 24 horas frente a la de la LH, que es de 2 horas. La HCG, al igual
que la LH, est compuesta por dos subunidades llamadas y , unidas por uniones no
covalentes mediante puentes disulfuro. La subunidad de estas hormonas
Esterilidad Clnica
106
Esterilidad Clnica
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Esterilidad Clnica
108
207: d).
Los ovocitos humanos pueden ser fertilizados in vitro con un 60-80% de eficiencia, y
desarrollarse dentro de 48h pareciendo morfolgicamente normales. Sin embargo,
despus de la seleccin para la transferencia, incluso transfiriendo 3 embriones, el
resultado de embarazos raramente excede el 50%, siendo lo habitual entre un 20-50%
(Weima, 1996).
208: d).
La aguja de puncin debe tener una longitud aproximada de unos 35 cm y 16G; debe
tener un bisel de 60 grados, ser rgida y estar fija al transductor por medio de una gua
de puncin (Muoz et al,1999).
209: b).
Todas las dems respuestas son ciertas y debemos tenerlas presentes cuando en un
informe anatomo-patolgico de una biopsia testicular se nos informa de la presencia
de espermatogonias dislocadas. Estas se observan en testculos normales en la zona de
transicin entre los tbulos seminferos y los conductos rectos (Nistal et al., 2001).
210: a).
Los megaloespermatocitos son espermatocitos de primer orden de gran tamao que se
encuentran detenidos en la etapa de leptotene de la profase meitica. La anomala
meitica consiste en una asinapsis de los cromosomas. Estn presentes en el 64% de
la biopsia de ancianos y ocasionalmente se observan en biopsia de pacientes estriles.
Probablemente representen clones de clulas germinales que degeneran de forma
sincrnica. A medida que degeneran se fusionan las membranas plasmticas. Su
presencia si es focal no es signo de mal pronstico (Nistal et al., 2001).
Esterilidad Clnica
109
BIBLIOGRAFA
CAPTULO 4. ESTERILIDAD CLNICA PARA EMBRILOGOS.
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Esterilidad Clnica
111
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112
CAPTULO 5.
LABORATORIO DE ANDROLOGA.
Ramrez JP*, lvarez C**, Castilla JA***, Clavero A***, Durn I****, Mar
C*****.
*Laboratorio CEIFER, Granada
**Clnica Avicena, Jan
***Unidad de Reproduccin, HU Virgen de las Nieves, Granada
**** Unidad de Reproduccin, Hospital Virgen del Mar, Almera-FIV, Almeria
*****Servicio de Anlisis Clnicos, Galdakaoko Ospitalea, Galdakao, Bizkaia
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AB.
0.
A.
B.
AB, A B.
A -.
A+.
0 -.
B -.
A, B AB; independientemente del rh de los padres.
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114
2000.
1987.
1992.
1999.
1980.
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224.-El eyaculado contiene otras clulas, que la OMS define como clulas
redondas:
a) Un eyaculado es normal cuando tiene menos de 1 milln/mL de clulas redondas.
b) Un eyaculado es normal cuando tiene menos de 5 millones/mL de clulas
redondas siempre que los leucocitos no supongan ms de 1 milln/mL de las
clulas redondas.
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de
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a) Para observar la celularidad se debe hacer con objetivo 100x y ocular 10x
b) La mxima calificacin (3) se da al no observar ninguna clula
c) El valor ptimo de pH oscila entre 7,0 y 8,5, aunque entre 6,0-7,0 tambin podran
penetrar los espermatozoides
d) Una infeccin bacteriana producira mocos muy cidos.
e) Habra que cuidar que el moco no se contamine con las secreciones vaginales, que
son muy cidas.
243.-El test postcoito evala la penetracin de los espermatozoides in vivo dentro
del moco cervical del cervix. Que afirmacin es la incorrecta?
a) Se realiza en periodo preovulatorio lo ms cercano posible a la ovulacin.
b) Debera guardarse una abstinencia de al menos 2 das.
c) Se toma una muestra del canal endocervical y se sita entre porta y cubre para
examinarla.
d) Examinar el fluido vaginal para confirmar que el semen ha sido depositado en la
vagina carece hoy da de inters.
e) El indicador ms importante de funcin cervical normal es la presencia de
espermatozoides con movilidad progresiva rpida.
244.-En el apndice XXII del manual OMS-99 de describen los requerimientos
mnimos para un laboratorio de androloga. Qu requerimiento no est
descrito?
a)
b)
c)
d)
e)
Manual OMS-99.
Pipetas automticas.
Neubauer Improved.
Hipoclorito Sdico.
Analizador automtico de semen.
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122
0,01 mm.
0,05 mm.
0,10 mm.
0,15 mm.
0,20 mm.
253.- El grfico que representa (con un intervalo de confianza del 95%) las
diferencias entre dos recuentos espermticos, cada uno de una dilucin diferente
de una misma muestra, en funcin de la suma de dichos recuentos es una curva.
Donde debe de caer el punto de interseccin entre la suma de los recuentos (eje
X) y la diferencia entre estos (eje Y), para que las diferencias observadas entre
ambos recuentos las podamos considerar debido al azar?:
a) Por encima de la curva.
b) Por debajo de la curva.
c) Si la suma de los recuentos es <100 por encima y si es igual o mayor que 100 por
debajo.
d) Si la suma de los recuentos es <100 por debajo y si es igual o mayor que 100 por
encima.
e) Si la diferencia es <25 por encima y si es mayor o igual que 25 por debajo.
254.-En relacin con los valores de referencia de los parmetros seminales dados
por la OMS en su ltimo manual de semen, qu afirmacin es falsa:
a)
b)
c)
d)
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Propilenglicol.
DMSO.
Glicerol.
Formol.
Propanediol.
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a)
a)
b)
c)
d)
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0 C.
40 C.
196 C.
216 C.
105 C.
6 meses de observaciones.
Un ao de observaciones.
3 meses de observaciones.
2 aos de observaciones.
No importa el nmero de observaciones cuando el laboratorio es pequeo.
Un error sistemtico.
Un error aleatorio.
Un error estndar.
Un error de imprecisin.
Un error de precisin.
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Chlamydias y hepatitis.
Herpes simplex y mycoplasma.
Hepatitis y HIV.
HIV.
Para todos los anteriores.
Problemas de precisin.
Problemas de exactitud.
El valor verdadero de la magnitud.
Ningn problema.
La repetibilidad de los resultados.
Sistemtico.
Aleatorio.
Ambos.
Ninguno.
Inexactitud.
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RESPUESTAS
CAPTULO 5. LABORATORIO DE ANDROLOGA.
211: b).
Aunque el anlisis del fluido obtenido tras masaje prosttico es una prctica habitual,
el estudio de ste no es recomendado por la falta de estandarizacin a la hora de
interpretar los resultados (WHO, 2000). La mayora de autores sitan en 15 leucocitos
por campo x40 la cifra que define un lquido prosttico purulento. La determinacin
de espermatozoides y parmetros bioqumicos en lquido prosttico carece de inters.
Sin embargo, el estudio microbiolgico del masaje prosttico y de la orina previa al
masaje prosttico y tras masaje prosttico es fundamental para la localizacin de
infecciones en el aparato genital masculino (WHO, 2000). El masaje prosttico est
contraindicado expresamente en la prostatitis aguda a causa del grave peligro de
septicemia (Del Portillo, 1994)
212: a).
Con objeto de preservar el anonimato de los hijos nacidos de donante la Ley de
Reproduccin Asistida espaola establece que el donante debe tener la mxima
similitud fenotpica e inmunolgica y las mximas posibilidades de compatibilidad
con la mujer receptora y su entorno familiar. Normalmente, los test de determinacin
de grupos sanguneos convencionales determinan el fenotipo sanguneo. Por ello,
empleando este tipo de test, no podemos saber si el genotipo de la mujer B es
homocigoto (BB) o heterocigoto (Bb). Atendiendo al fenotipo de la pareja de la
pregunta, sus descendientes naturales tendran grupos sanguneos tipo AB B. Nunca
podra darse el caso de un hijo con grupo 0 (salvo muy raras excepciones). El mismo
problema se plantea con los donantes; no sabemos si tienen genotipos homocigotos o
heterocigotos en los casos de grupos A y B. Por ello solo podremos enviar un donante
que sea AB, ya que es el nico caso en el que podemos estar seguros de que la
descendencia no dar lugar a un hijo con grupo 0, lo cual sera incompatible con el
grupo de los padres.
213: c).
En este caso la descendencia natural de esta pareja podra ser A (Aa) o B (Bb); es
decir heterocigotos. Al ser la mujer AB, no se le podra facilitar un donante A, B,
AB dada la posibilidad de descendencia de tipo AB, que sera del todo incompatible
con lo esperado de esta pareja de forma natural. Al ser la mujer rh y para evitar
problemas de incompatibilidad sangunea va materno-fetal, como la eritroblastosis
fetal e independientemente de que la mujer sea sensibilizada por el equipo
ginecolgico que le monitorice el parto, el donante ms adecuado para este caso sera
un 0-.
214: a).
La reciente disponibilidad de inmunoanlisis basados en anticuerpos monoclonales
que reconocen la inhibinas dimricas A (A ) y B (B ), y no presentan reaccin
cruzada con las formas libres de la subunidad o sus precursores (pro-C) ha
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224: e).
Las clulas redondas son una categora de clulas, en las que la OMS incluye clulas
epiteliales del tracto genitourinario, clulas prostticas, clulas de la espermatognesis
inmaduras y leucocitos. Un eyaculado no debera tener ms de 5 millones/mL de
clulas redondas, ni los leucocitos deben de superar 1 milln/mL de las clulas
redondas, ya que en este caso no sera un semen normal.
225: d).
La presencia de aglutinaciones en un eyaculado sugieren, pero no son suficientes para
afirmar que existan anticuerpos antiespermatozoides. Por otra parte existen tres tipos
de aglutinaciones: cabeza-cabeza; flagelo-flagelo y cabeza-flagelo. Las aglutinaciones
son evaluadas a la vez que la movilidad.
226: d).
Las tcnicas de vitalidad evalan si los espermatozoides permanecen vivos. Un
espermatozoide puede estar vivo, pero permanecer inmvil (por ejemplo por falta de
brazos de dineina), pero un espermatozoide muerto nunca puede adquirir movilidad.
Por lo tanto el resultado de vitalidad para ser coherente debe ser igual o mayor al
porcentaje de vitalidad.
227: e).
El hemocitmetro de eleccin de la OMS para el clculo de la concentracin
espermtica es la cmara de Neubauer Improved, que est dividida en su parte central
en 25 cuadros grandes, subdivididos a su vez estos en 16 cuadros pequeos. Otras
cmaras como la Microcell o la Makler slo deberan usarse previa estandarizacin de
resultados con la Neubauer Improved. Aunque el manual de la OMS 99 dice
textualmente al final del segundo prrafo de la pgina 17 The Makler chamber is not
recomended, la OMS rectific dicha frase en el sentido de que la cmara Makler
debera ser considerada como otras cmaras y para su uso se deberan validar sus
resultados con los obtenidos con la Neubauer Improved. Dicha rectificacin se
public en las pginas de publicidad de la revista Human Reproduction en los
primeros meses del 2000.
228: d).
La OMS indica en su manual que la dilucin debe hacerse por duplicado y contar
cada una de las diluciones.
229: b).
El tamao normal de un espermatozoide es considerado por la OMS-99 como 4-5
micras de longitud y 2,5-3,5 micras de anchura, cuando la medicin se realiza sobre
una muestra teida con Papanicolau. Como quiera que cualquier valor fuera de estos
lmites hara considerar el espermatozoide como anormal habr que instalar un ocular
micrmetro para medir exactamente la cabeza.
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230: a).
La pieza media de un espermatozoide debera tener menos de 1 micra de ancho.
231: d).
La Globozoospermia se caracteriza por ausencia de acrosoma, por lo que las cabezas
de los espermatozoides son redondas. Los espermatozoides carecen de la capacidad
in vitro de penetrar al ovocito. Por otra parte, se ha comprobado mediante ICSI (se
salva el anterior problema) una muy baja capacidad in vitro de activacin
ovocitaria, parece que por falta del factor de activacin oscillina.
232: c).
Las clulas germinales inmaduras no se incluyen en el contaje diferencial de la
morfologa. Estn incluidas en la categora de Clulas redondas que tienen un contaje
independiente.
233: c).
En el plasma seminal se encuentran dos isoformas de alfa-glucosidasa. La isoforma
neutra es exclusiva de las secresiones del epiddimo, mientras la isoforma cida se
excreta principalmente con las secresiones prostticas.
234: c).
El nico considerado como test estndar es la determinacin de anticuerpos
antiespermatozoide (MAR test o IBT), por lo que habr que realizarlo como prueba de
rutina. Los dems tienen categora de test opcionales.
235: b).
OMS-99 advierte en su manual que el producto PERCOLL ha sido contraindicado
para uso en aplicaciones clnicas humanas, como alternativa tenemos productos como
PURESPERM o SUPRASPERM o IXAPREP.
236: a).
Con respecto a la movilidad una muestra de semen es considerada normal en el
supuesto de la afirmacin 1, pero tambin puede serlo si la suma de grado a y grado b
es igual superior al 50%, es decir, una muestra puede ser considerada normal
presentando 10% de espermatozoides con movilidad tipo ay 45 % con movilidad
tipo b.
237: c).
Los valores de referencia estn actualmente siendo estudiados a travs de un estudio
multicntrico. Provisionalmente se aporta la cifra del 15% (realizada en estudios de
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cuadrados grandes iguales cada cuadrado grande tendr de lado 0,2 mm. Por otra
parte, cada cuadrado grande se divide en 16 cuadrados pequeos, por lo que cada
cuadrado pequeo tendr de lado 0,05 mm. Con estos datos podemos calcular la
superficie de cada cuadrado. Un cuadrado pequeo tendr de superficie 0,05 x
0,05=0,0025 mm2, como un cuadrado grande tiene 16 pequeos, un cuadrado grande
tendr 0,0025 x 16= 0,04 mm2 y dado que la zona central de la cmara de Neubauer
improved tiene 25 cuadros grandes toda esta rea tendr una superficie de 0,04 x 25=
1 mm2.
252: c).
La altura es 0,1 mm, y dado que la superficie de la zona central de la cmara de
Neubauer improved es 1 mm2 (ver contestacin anterior), el nmero de clulas que
hayamos contado en dicha superficie habr que multiplicarlo por 10 para expresar la
concentracin de clulas en mm3, y a continuacin por 1000 si se quiere expresar la
concentracin de clulas por mL. No debemos olvidar multiplicar por el factor
dilucin si hemos realizado alguna.
253: b).
El rea comprendida debajo de la curva es el intervalo de confianza al 95% de las
diferencias entre dos recuentos, cada uno de una dilucin diferente de una misma
muestra, en funcin de la suma de dichos recuentos, es decir que toda diferencia entre
dos recuentos que al enfrentarse con la suma de los recuentos caiga debajo de la curva
debe de considerarse producida por el azar, por lo que aceptaremos como vlido la
media de dichos recuentos. En caso contrario debemos rechazar las diluciones
realizadas pues las diferencias observadas se deben a errores sistemticos (mala
calibracin de pipetas, falta de homogeneidad en la muestra, etc), debiendo realizar
dos nuevas diluciones.
254: e).
La OMS recomienda que cada laboratorio determine sus propios valores de referencia
pero reconoce la dificultad de obtener individuos de referencia adecuados. Dado que
el manual de la OMS de anlisis de semen no solo se dirige a laboratorios dedicados
al tratamiento de la esterilidad, sino que tambin a laboratorios de investigacin sobre
la regulacin de la fertilidad masculina o de toxicologa reproductiva, los valores de
referencia recogen datos de estudios de poblaciones de varones frtiles sanos. Estos
valores no aportan informacin sobre cules son los parmetros necesarios para
considerar a un varn frtil ya que para obtener esta informacin se debera comparar
los parmetros seminales en individuos frtiles con los obtenidos en varones
subfrtiles, lo cual no ha sido realizado por la OMS.
255: e).
Entre las normas de seguridad descritas por la OMS se recomienda desinfectar todo
frasco de recogida de semen que nos entreguen manchado por fuera con una solucin
desinfectante (5,25 g/L hipoclorito sdico). No se debe intentar apurar mediante
golpes enrgicos las ltimas gotas de semen de los frascos de recogida pues esto
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139
Laboratorio de Androloga
140
Laboratorio de FIV
141
CAPTULO 6.
LABORATORIO DE FIV.
Luceo F*, Expsito A**, Nez AI***, Surez I***, Vergara F Jr****,
Ramrez JP****, Castilla JA***.
*Conceptum, Institut de Fertilitat i Reproducci Humana, Reus, Tarragona
**Unidad de Reproduccin, Hospital de Cruces, Barakaldo, Bizkaia
***Unidad de Reproduccin, HU Virgen de las Nieves, Granada
****Laboratorio CEIFER, Granada
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1980.
1981.
1982.
1983.
1984.
Laboratorio de FIV
143
Laboratorio de FIV
144
componentes
Laboratorio de FIV
145
c.HidroxiEtil PiruvatoEtlicoSulfhdrico.
c.HidroxiEtanol PropanoSulfxido.
c.HidroxiEtil PiperazinaEtanoSulfnico.
c.HidroxiEtilFostoEtanoSulfxido.
Ninguna de las anteriores es correcta.
Menezo.
IVF-Scandinavian.
G-2.
PVP.
Gamete.
Porcentaje de fertilizacin.
Tasa de divisin embrionaria.
Nmero de ovocitos recuperados.
Tasa de implantacin embrionaria.
Porcentaje de embriones que evolucionan hasta blastocistos.
Laboratorio de FIV
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Obtener ms de 15 ovocitos.
Obtener muchos ovocitos inmaduros.
Observar lquidos foliculares oscuros.
Observar lquidos foliculares con grandes cogulos.
Ninguna de las anteriores.
Laboratorio de FIV
147
297.-Una vez que los ovocitos ya estn preparados para ser inseminados
mediante FIV, con qu cantidad de espermatozoides se insemina?
a)
b)
c)
d)
e)
299.-Cunto tiempo tiene que transcurrir para observar los proncleos despus
de una ICSI?
a)
b)
c)
d)
e)
De 5-7h.
De 8-10h.
De 10-15h.
De 15-20h.
Ms de 20h.
80.000 UI/ml.
8.000 UI/ml.
800 UI/ml.
80 UI/ml.
8 UI/ml.
301.-Qu ovocitos son los ms adecuados para llevar a cabo el proceso de ICSI?
a) M I.
b) M II.
c) M I y M II.
Laboratorio de FIV
148
d) PI.
e) Todos.
302.-En el proceso de la ICSI el CP del ovocito se suele colocar a las 12 6
horarias, para as inyectar el espermatozoide por aproximadamente las 3
horarias. Por qu?
a) Porque as se permite una mayor liberalizacin del Calcio intracelular del ovocito.
b) Para conseguir el descenso de pH necesario para que se lleve a cabo el proceso de
fecundacin.
c) Se hace as por comodidad del embrilogo que utiliza el micromanipulador.
d) Para no interaccionar con la placa metafsica.
e) Todas las anteriores son correctas.
303.-Para qu se fractura el flagelo espermtico durante una ICSI?
a)
b)
c)
d)
e)
Laboratorio de FIV
149
Menos de 3.
Entre 3-7.
Entre 7-15.
Ms de 15.
El nmero de nucleolos no es indicativo de una mayor tasa de embarazos.
Laboratorio de FIV
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En la fase de 2 proncleos.
En mrula.
En blastocisto hatching.
En blastocisto expandido.
En embrin de cuatro clulas tipo I.
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b)
c)
d)
e)
151
317.-Qu podemos pensar cuando nos encontramos con un ovocito con tres
proncleos tras una FIV/ICSI?
a) Tenemos que anotarlo en la historia de la paciente, y procedemos a su
transferencia como si de uno de dos proncleos se tratara.
b) Si ocurre tras una FIV, pensamos que se trata de una Diginia.
c) Si ocurre tras una ICSI, pensamos que se trata de una Diandria.
d) Que el ovocito ha comenzado su divisin muy tempranamente, por lo tanto
tenemos que fijarnos en su evolucin para ver si se transfiere o no.
e) Ninguna de las anteriores es correcta.
318.-Cul de las siguientes caractersticas no se ha asociado a un mejor
pronstico evolutivo en blastocistos in vitro al 5 da postinseminacin?
a)
b)
c)
d)
e)
Laboratorio de FIV
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Laboratorio de FIV
153
0-10%.
10-30%.
30-60%.
60-80%.
80-95%.
25-50.
50-100.
125-175.
175-225.
225-250.
>1%.
>10%.
>20%.
>30%.
>40%.
Laboratorio de FIV
154
331.-A veces es necesario llevar a cabo Hatching asistido por medio de una
abertura artificial de la zona pelcida para favorecer la implantacin
embrionaria en el endometrio:
a) Las proteasas como la Proteinasa K y la Pronasa E, producen aberturas en la zona
pelcida de dimetro definido, aunque este procedimiento es muy costoso.
b) La solucin de cido Tyrode, permite la disolucin gradual de la zona pelcida.
c) Con las tcnicas mecnicas se obtienen aberturas de tamao idntico.
d) Con el rayo lser se obtiene aberturas de tamao variable.
e) Con el rayo lser se obtiene resultados reproducibles, con una abertura de la zona
pelcida de dimetro definido o sea de tamao idntico.
332.-El grosor de la zona pelcida indicado por algunos autores para llevar a
cabo Hatching asistido es:
a)
b)
c)
d)
e)
12 m.
13m.
14m.
15m.
16m.
5-10 m.
10-20 m.
20-30 m.
30-40 m.
40-50 m.
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a)
b)
c)
d)
e)
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60-65 h.
40-45 h.
45-50 h.
50-55 h.
70-75 h.
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1,2-propilenglicol.
DMSO.
Glicerol.
Etilngicol.
Ninguno de los anteriores.
Laboratorio de FIV
158
RESPUESTAS
CAPTULO 6. LABORATORIO DE FIV.
271: e).
En Espaa la primera gestacin mediante un programa de FIV se public en 1984 por
la Unidad de Reproduccin Humana del Instituto Dexeus de Barcelona (Barri et al.,
1984).
272: e).
Los materiales necesarios son: tubos para puncin, placas Petri de gran dimetro (5-9
cm), placa calefactora, pipetas Pasteur, jeringas de insulina, agujas, filtros de 0,22
micras de dimetro, lupa y campana de flujo laminar horizontal (Cobo et al., 1999).
273: e).
Despus de la administracin de hCG para la induccin de la ovulacin, el
embrilogo debe examinar otra vez la tcnica indicada y preparar los protocolos para
la recuperacin ovocitaria con atencin a ciertos detalles: historia previa, realizando
modificaciones de la indicacin si lo cree conveniente; y estudio del ciclo actual
(nmero de folculos, parmetros endocrinos). Si bien en algn caso puede ser
interesante solicitar un cultivo seminal o cultivo vaginal, esto debe realizarse con la
suficiente antelacin (mnimo de 7 das) (Brinsden, 1999).
274: c).
La recuperacin ovocitaria normalmente se realiza a las 36h despus de la inyeccin
de hCG y se lleva a cabo de una forma ecoguiada. Una recuperacin ovocitaria ms
temprana conlleva la obtencin de ovocitos inmaduros, y una ms tarda conlleva el
riesgo de una ovulacin (Bongso, 1999).
275: b).
Las siglas PVP corresponden al polmero PoliVinilPirrolidona (Mnguez et al., 1999).
276: c).
En el proceso de microinyeccin la utilizacin del PVP al 10% es necesaria porque,
gracias a su alta viscosidad, provoca un enlentecimiento en el movimiento de los
espermatozoides y permite controlar mejor el microinyector, facilitando as la
inyeccin de la mnima cantidad de medio durante la microinyeccin (Mnguez et al.,
1999).
277: c).
La pipeta Holding es una pipeta roma con un dimetro interno de unas 20 micras
(Romero et al., 1999).
Laboratorio de FIV
159
278: d).
La pipeta de inyeccin es ms estrecha que la de sujecin (7 micras de dimetro
externo y 5 micras de luz), est biselada y acaba en un aguijn que nos permite entrar
en el ovocito fcilmente y con menor riesgo de degeneracin (Romero et al., 1999).
279: e).
Antes de colocar las pipetas en el micromanipulador debemos repasar el equipo y
asegurarnos que los sistemas de inyeccin tienen aceite suficiente y estn bien
purgados, es decir, sin burbujas en su interior y con los objetivos limpios.
Procederemos primero a la colocacin de la pipeta de sujecin. Antes de situarla en la
lanceta, dejaremos rebosar una gota de aceite por su extremo y, a continuacin, la
introduciremos con cuidado (Romero et al., 1999).
280: e).
Los materiales sugeridos son: pinturas no txicas, suelos con losetas, paredes con
losetas, no usar cortinas ni contraventanas de metal (Rabe et al., 2000).
281: c).
Se sugiere que para la bsqueda de ovocitos se usen batas de laboratorio, guantes sin
componentes txicos para los cultivos celulares ( por ejemplo talco). Por otra parte, el
pelo y la boca deben estar cubiertos (Rabe et al., 2000).
282: a).
Est demostrado que el nivel de compuestos orgnicos voltiles en el interior del
laboratorio de FIV es mayor que en el ambiente exterior. Cuando se restringe la
ventilacin, el nivel de VOC aumenta, de manera que la medicin de los niveles
ambientales externos es aproximadamente de 553 microgramos/metro cbico,
mientras que en el interior del laboratorio de FIV es mucho ms elevada, y todava
aumenta ms en el interior de los incubadores (hasta 5 veces ms) (Hall et al., 1997).
283: c).
La presencia de cogulos en el lquido de aspiracin es un detalle importante a tener
en cuenta, ya que a menudo stos contienen ovocitos, lo que se debe al rascado del
folculo durante la puncin. Para localizar ovocitos dentro de los cogulos, stos
deben lacerarse o desgarrarse con ayuda de dos agujas de insulina, procurando la
visualizacin del cmulo (si est presente), separando el conjunto, para lograr la
extraccin del ovocito
(Cobo et al., 1999).
284: d).
El Desarrollo Folicular Mltiple es llevado a cabo generalmente por la combinacin
de GnRHa y de gonadotropinas (Van Steirteghem, 2000).
Laboratorio de FIV
160
285: e).
Los micoplasmas no se detectan por inspeccin visual. Estos microorganismos no
revelan su presencia produciendo alteraciones macroscpicas de las clulas, o del
medio sino que alteran el metabolismo, disminuyendo el crecimiento celular. El
cultivo debe ser investigado por tcnicas como tincin de fluorescencia, orcena,
anlisis microbiolgico, etc (Mercader et al., 1999).
286: a).
Para evitar elevadas concentraciones de oxgeno que provoquen una formacin
excesiva de especies reactivas de oxgeno, algunos autores han propuesto el uso de
una mezcla de gases en vez de la habitual 5% CO2, donde la concentracin de
oxgeno es la habitual de la atmsfera (20%). Esta mezcla de gases estara compuesta
de 90% nitrgeno, 5% de oxgeno y 5% de CO2, respectivamente (Weima, 1996;
Rabe et al., 2000).
287: b).
La osmolalidad est determinada por la concentracin y el grado de disociacin de
varias sustancias en disolucin. La osmolalidad que deben tener los medios de cultivo
en el laboratorio de FIV/ICSI es de 285mOsm por kg de agua, lo que corresponde al
plasma sanguneo. Con cultivos prolongados en un sistema abierto es predecible que
la osmolalidad de los fluidos cambiar en funcin del tiempo y de la humedad
atmosfrica. Por ello, los ovocitos y los espermatozoides son generalmente cultivados
en incubadores de CO2 con un alto grado de humedad (Vries, 1996).
288: c).
Las siglas HEPES corresponden a cido N-Hidroxietilpiperazina-N-2-etanosulfnico.
Medios que contienen HEPES mantienen un pH estable, y pueden ser usados para la
preparacin del semen y la recogida y lavado de ovocitos. Sin embargo, HEPES altera
la actividad inica en la membrana plasmtica, y puede ser embriotxico. Los
gametos deben ser lavados despus en un medio de cultivo libre de HEPES antes de la
inseminacin y de su cultivo nocturno (Elder, 1999).
289: e).
Gamete es el nico medio de los expuestos que contienen HEPES (Elder, 1999).
290: d).
Los parmetros que debemos controlar para garantizar la calidad del laboratorio de
FIV se dividen en dos: los que toman como variable de xito las expectativas de la
paciente, es decir, gestacin (porcentaje de gestaciones por puncin o por
transferencia, tasa de implantacin, porcentaje de nios nacidos vivos) y los que
toman como variable de xito datos de laboratorio (tasa de fertilizacin, divisin y
desarrollo embrionario, recuperacin de ovocitos y espermatozoides). En nuestra
opinin todo nuestro trabajo debe centrarse en el paciente por lo que los parmetros a
analizar para asegurar la calidad de nuestro laboratorio deben ser los primeros. De lo
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161
291: e).
En un sistema de garanta de calidad de un programa de FIV deben tenerse en cuenta
los aspectos citados en cada una de las respuestas. Adems de los citados, podemos
mencionar otros como los factores ambientales, el material e instrumental, los
aspectos legales, la atencin al paciente y los procedimientos llevados a cabo en el
tratamiento de FIV (Belil y Veiga, 2001).
292: d).
Podra pensarse que la denudacin enzimtica o mecnica previa a la inseminacin
facilita la fecundacin, pero diferentes estudios han demostrado que no hay
diferencias significativas en la tasa de fecundacin mediante FIV entre ovocitos
intactos y ovocitos que han sido decumulados (Mahadevan y Trouson, 1985; Magier
et al.,1990).
293: a).
El sndrome del folculo vaco ocurre en 1-3% de las punciones, y se define como la
ausencia de ovocitos en los lquidos foliculares obtenidos durante un ciclo de FIV. Se
han propuesto varias teoras: sndrome espordico imprevisible, reflejo de una
foliculognesis alterada, dficit en la accin de la hCG y envejecimiento ovrico. El
hecho de que ocurra de nuevo en el 20% de las mujeres y que la mayora de las
mujeres con recurrencia tiene ms de 34 aos sugiere un envejecimiento ovrico en
estas pacientes, que le pueden hacer ms insensible a la hCG. Varios autores han
propuesto para estas mujeres que en la siguiente puncin se puncionen algunos
folculos y en caso de no encontrar ovocitos se supenda la puncin y se administre de
nuevo hCG, puncionndose posteriormente (Zreik et al., 2000).
294: c).
La aparicin de lquidos foliculares marrones oscuros o negros (achocolatados) es el
hallazgo ms caracterstico de la presencia de endometriomas en una paciente
sometida a puncin folicular. Este hallazgo es muy importante y debe de anotarse en
la historia clnica de la paciente.
295: b).
La clasificacin de Veeck (1986) es la clasificacin ms didctica para analizar los
complejos cmulo-corona-ovocito, basada en: estado del ncleo, caractersticas del
citoplasma, apariencia de la corona radiada, grado de expansin de la masa del
cmulo, y aspecto de las clulas de la granulosa. Divide a los complejos en: Maduro o
metafase II, Intermedios o metafase I, Inmaduro o Profase I, Postmaduro y
Degenerados o atrsicos. Los ovocitos postmaduros se producen por la luteinizacin
endgena espontnea y no aspiracin en el momento adecuado y en casos de demora
en la administracin de la hCG. Presentan un corpsculo polar intacto o fragmentado,
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Los linfocitos pequeos (con tamao inferior a 6 micras), muestran con frecuencia un
contorno de superficie lisa, un perfil nuclear interno liso, y a veces una gran gota
citoplasmtica. Por esta razn es posible identificarlos errneamente como
espermtides redondas. Sin embargo, una inspeccin cuidadosa muestra que el ncleo
es excntrico, ms denso y protuberante, mientras que el ncleo de la espermtide
redonda est localizado en posicin central, es completamente liso y aplanado. Los
otros leucocitos son ms grandes y no son diagnosticados errneamente como clulas
germinales ya que presentan superficies claramente irregulares, y el ncleo es
excntrico, irregular internamente, denso y protuberante (Sousa y Barros, 1999).
307: e).
Es imposible confundir un ncleo aislado de una clula de Sertoli con una
espermtide redonda pero para evitar cualquier duda, nunca debe inyectarse una
espermtide redonda sin haberla lavado en la gota de PVP. Esto permitir al
embrilogo diferenciarlas de detritus celulares ms grandes, de linfocitos pequeos y
de los ncleos aislados de clulas de Sertoli:
Los detritus celulares grandes estn desprovistos de un citoesqueleto
organizado y se colapsarn al colocarlos en una solucin de PVP.
Los linfocitos pequeos en PVP se hacen ms transparentes y muestran un
ncleo localizado en la periferia, denso y protuberante.
El ncleo de una clula de Sertoli, debido a la ausencia de un esqueleto
estructurado, tambin se colapsar en el PVP.
Una espermtide muerta o que est muriendo, se destruir durante la
manipulacin con el PVP ( Sousa y Barros, 1999).
308: b).
El nmero de nucleolos ideal sera entre 3 y 7 por proncleo, habiendo mostrado los
zigotos con estas caractersticas un desarrollo e implantacin mayor que zigotos con
menos nucleolos o con ms pequeos y puntuales (Scott, 2000).
309: b). postinseminacin) puede darse el caso aunque poco frecuente de que algunos
ovocitos a las 18 h postinseminacin an no hayan formado aproximadamente el 10%
de las pacientes sometidas a FIV sufren un fallo de fecundacin. La reinseminacin de
estos ovocitos, sin signo de fecundacin se propone como alternativa ante un fallo de
fecundacin, encontrando en la literatura tasas de fecundacin por FIV que rondan el
35% y tasas de fecundacin por ICSI entre el 60-70%. Sin embargo, estos buenos
resultados van acompaados de un alto grado de polispermia en los ovocitos
reinseminados, de embriones con pobre calidad y nulo potencial de implantacin (Cho
et al., 1996; Minaretzis et al., 1996). Por tanto, hoy da pocos grupos utilizan este
procedimiento. Debido a que la observacin de proncleos se realiza habitualmente a
las 16-18 horas postinseminacin y que el intervalo de aparicin de proncleos es
muy amplio (12-30 h proncleos o estos hayan desaparecido ya. La presencia de dos
corpsculos polares puede ser til en estos casos, no obstante no debemos olvidar que
a veces el primer corpsculo polar se fragmenta (Plachot, 2000). Por todo lo anterior
la actitud correcta sera cambiar de medio de cultivo y observar los ovocitos al da
siguiente, y en caso de observar divisin embrionaria transferir estos embriones. No
obstante, la divisin de estos ovocitos (zigotos) no garantiza que sean de dotacin
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166
pues obligara a una inspeccin la tarde del da que se investiga los signos de
fecundacin (Bongso, 1999).
315: a).
La reposicin de los embriones puede realizarse en la trompa o en el tero. La
transferencia intrauterina de embriones por va vaginal es la tcnica ms empleada. La
transferencia tubrica de embriones (TET), zigotos (ZIFT) o gametos (GIFT) slo se
realizan en pacientes con indicaciones clnicas muy especficas, ya que son ms
complejas y no aportan mayores tasas de gestacin, por lo que la mayora de los
pases europeos, prcticamente no se realizan transferencias tubricas (Bolton et al.,
1989).
316: b).
Las variaciones en la dinmica celular pueden ser debidas a la tcnica usada (FIV o
ICSI), a las propiedades intrnsecas de los gametos y a las condiciones de cultivo in
vitro. La duracin de cada fase puede diferir entre zigotos derivados de una cohorte de
ovocitos, as, la extrusin del segundo corpsculo polar en ovocitos de ICSI
normalmente ocurre de 1-8h tras la inyeccin. Los ovocitos fertilizados por ICSI
normalmente sufren el desarrollo de los proncleos y la primera divisin
aproximadamente 2-4h antes que los ovocitos provenientes de FIV (Plachot, 2000).
317: e).
Zigotos con tres Proncleos pueden resultar de diginia o de diandria. La dotacin
cromosmica extra de dignicos triploides tiene un origen materno, y puede resultar
de la fecundacin de un ovocito diploide (sin reduccin del nmero de cromosomas)
por un espermatozoide normal (haploide). La dotacin cromosmica extra en
triploides dindricos tienen un origen paterno y pueden resultar de la fertilizacin
disprmica. La mayora de los zigotos triploides observados tras una FIV resultan de
Diandria, mientras que los que se observan tras una ICSI se deben a Diginia, porque
un solo espermatozoide es el inyectado (Plachot, 2000). Por todo lo anterior, nunca
deben transferirse embriones resultantes de estos zigotos.
318: e).
Todas son caractersticas de buen pronstico en un blastocisto el 5 da
postinseminacin (Bongso, 2000).
319: d).
La variabilidad en el contenido cromosmico de embriones humanos in vitro es muy
amplia habindose descrito tanto embriones triploides procedentes de ovocitos con un
proncleo como embriones haploides procedentes de ovocitos con tres proncleos
(Staessen y Van Steirteghem, 1997). El porcentaje de embriones procedentes de
ovocitos con dos proncleos a las 16-18 horas postinseminacin que presentan
mosaicismos cromosmicos es elevado 15-90%, segn los autores y tipo de embrin
analizado (Munn et al., 1994; Evsikov y Verlinsky, 1998; Magli et al., 2000). Por
otra parte es relativamente frecuente observar en embriones procedentes de ovocitos
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El Hatching puede no producirse por falta de algunos componentes del fluido uterino
en la digestin de la zona pelcida, endurecimiento de la zona pelcida tras la
fecundacin y por engrosamiento de la zona pelcida (Cohen et al., 1990;
Lindenbergh et al., 1989; Dokras et al., 1991; De Felici y Siracusa, 1982).
331: e).
Las proteasas como la Proteinasa K y la Pronasa E, permiten la disolucin gradual de
la zona pelcida. Con solucin de cido Tyrode y las tcnicas mecnicas, se obtienen
aberturas de tamao variable. La ventaja del rayo lser sobre las tcnicas de Hatching
asistido mecnicas, qumicas o bioqumicas, es que se obtienen resultados
reproducibles, con abertura de la zona pelcida de dimetro definido, en pocos
milisegundos y por lo tanto el tiempo para manejar un embrin es significativamente
ms corto. Es un mecanismo eficiente para obtener aberturas de tamao idntico,
aunque es muy costoso (Germond et al., 1999).
332: d).
Slo un 15% de los embriones obtenidos en FIV son capaces de romper zonas
pelcidas con grosor medio mayor o igual a 15m de dimetro (Cohen et al., 1990).
333: e).
La extraccin de fragmentos citoplasmticos mejora significativamente el curso del
desarrollo para algunos embriones incrementando su implantacin potencial. Como
paso previo al diagnstico gentico preimplantacional, es necesario realizar Hatching
asistido y realizar biopsia de corpsculo polar, de blastmeras o de trofoectodermo
(Germond et al., 1999).
334: c).
Para la realizacin del Hatching asistido la micropipeta que contiene solucin de
cido tyrode, se coloca muy cercana a la zona pelcida y la solucin de cido es
expelida cuidadosamente sobre una pequea rea (aproximadamente 20-30 m), hasta
que la zona se disuelve. Despus, el embrin es lavado exhaustivamente en medio
limpio y cultivado hasta el momento de la transferencia (Selva, 2000).
335: a).
La biopsia de embriones es la extraccin de una o ms clulas del embrin antes de la
implantacin y es generalmente llevado a cabo a las 62-64 h post-inseminacin, en
este tiempo el inicio de la compactacin tiene lugar y el dao celular se origina si la
biopsia se ha intentado cuando las interacciones clula a clula comienzan a unirse
(Gianaroli, 2000).
336: a).
La situacin de la blastmera nucleada para ser aspirada en biopsia de embrin es la
posicin horaria de las tres en punto, ya que entonces es aspirada lentamente. A
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continuacin es suavemente liberada dentro del medio, con extremo cuidado para
evitar daos en las blastmeras de alrededor. El embrin biopsiado es entonces lavado
a fondo e incubado hasta la transferencia, mientras que la blastmera se somete a
anlisis gentico (Gianaroli, 2000).
337: d).
La extensin del perodo de cultivo previo a la transferencia del embrin, ha hecho
posible la monitorizacin del crecimiento del embrin y comparacin con la tasa de
divisin obsevada en embriones no biopsiados. El nmero de clulas observadas 24
horas despus de la biopsia es menor de lo esperado. No obstante, compactacin,
formacin de blastocisto y Hatching tienen lugar normalmente, siendo viable el
crecimiento normal del embrin, por lo que ni la reduccin en masa celular ni el
trauma asociado con el procedimiento en s puede tener efecto alguno en la tasa de
crecimiento embrionario (Gianaroli, 2000). No obstante, an se discute si el potencial
de implantacin de los embriones o blastocistos biopsiados est afectado (ESHRE,
2000).
338: b).
La compactacin del embrin puede ocurrir en el momento de la biopsia, pero esta
compactacin se puede invertir incubando el embrin en medio libre de magnesio y
calcio. Varios autores han recogido buenos resultados con este mtodo. Despus de la
incubacin del embrin es ms fcil la biopsia y no parece tener efectos adversos en
el desarrollo o potencial implantacin del embrin (Sermon y Liebaers, 2000).
339: e).
Inicialmente el diagnstico gentico preimplantacional fue desarrollado para
diagnstico gentico de enfermedades, o bien ligadas al sexo o bien autosmicas. Sin
embargo recientemente las posibilidades de DGP han sido ampliadas y ahora incluye
la deteccin de anormalidades cromosmicas en embriones de portadores de
reorganizaciones estructurales equilibradas, parejas con aborto recurrente, screening
de aneuploidas en mujeres de edad y parejas sometidas a ICSI por factor masculino
con severa oligozoospermia y/o anomalas meiticas (Egozcue et al., 2000).
340:d).
El primer embrin humano fue congelado a finales de los 70, el primer embarazo fue
conseguido en 1983 en Australia por Trounson y Mohr pero termin en aborto. El
grupo de Zeilmaker (1984) conseguira el primer nacimiento tras transferencia de
embriones humanos crioconservados.
341: c).
En ausencia de crioprotectores, las clulas estn sujetas, primero a un choque de fro
cuando est la temperatura por encima del punto de congelacin de la solucin, y en
segundo lugar a un aumento de la osmolaridad justo antes de que la solucin se
congele. Existe una relacin entre la viabilidad de las clulas post-congelacin y la
velocidad de congelacin para cada tipo celular dado. Cuanto ms deshidratadas estn
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Es el punto ms fro que alcanza cualquier medio o material biolgico antes del punto
de congelacin (Mazur, 1984).
346: c).
El protocolo de congelacin de blastocistos ms utilizado es el descrito por Mnzo et
al. (1992) que utiliza Glicerol y sacarosa.
347: e).
El mtodo ms eficiente respecto a la crioconservacin de tejido ovrico humano es
la inmersin de tiras de 1 mm de grosor de crtex ovrico durante 30 minutos a 4C
en una solucin de congelacin conteniendo 1.5M de etilenglicol o Dimetilsulfxido
con 0.1M de sacarosa (Newton, 1998; Newton et al., 1999). Sin embargo, en un
estudio reciente han conseguido mejorar la tasa de supervivencia de los ovocitos
cuando stos son crioconservados utilizando una mayor concentracin de sacarosa
(0.2 M 0.3M) (Fabbri et al., 2001).
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173
BIBLIOGRAFA
CAPTULO 6. LABORATORIO DE FIV.
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Laboratorio de FIV
178
CAPTULO 7.
GENTICA Y BIOLOGA MOLECULAR PARA EMBRILOGOS.
Ardoy M*, Esparza C**, Luceo F***, Nez AI****, Expsito A*****.
179
180
348.-Cul es el estado de un ovocito en las siguientes fases: ovocito de neonato ovocito de nia pber - ovocito de folculo preantral - ovocito ovulado?:
a)
b)
c)
d)
e)
2n - 2n - n - n.
2n - 4n - 4n - n.
2n - 4n - 2n - n.
n - 2n - 2n - n.
n - 2n - n - n.
Protoandrinas.
Diaminas.
Protafinas.
Protaminas.
Prominas.
a)
b)
c)
d)
e)
181
b)
c)
d)
e)
182
359.-Los nios nacidos tras ICSI presentan una mayor tasa de alteraciones
cromosmicas en comparacin con la poblacin general. Cmo se puede
justificar este hecho?:
a)
b)
c)
d)
e)
Teratozoospermia.
Astenozoospermia.
Oligozoospermia.
Hipospermia.
Oligoteratozoospermia.
Traslocacin insercional.
Traslocacin pericntrica.
Traslocacin robertsoniana.
Traslocacin recproca clsica.
Traslocacin paracntrica.
S. de Down.
S. de Turner.
S. de Patau.
S. de Cri du chat.
S. de Edwards.
183
Klinefelter clsico.
Traslocaciones.
Inversiones.
Alteraciones en la meiosis.
Microdelecciones del cr. Y.
184
a)
b)
c)
d)
e)
185
97% y 100%.
66% y 97%.
97% y 66%.
100% y 97%.
100% y 66%.
5T - 7T - 9T.
7T - 5T - 9T.
9T - 7T - 5T.
9T - 5T - 7T.
7T - 9T - 5T.
186
d) 25% con grave riesgo de padecer FQ, 25% con riesgo de FQ o CBAVD(agenesia
bilateral de vasos deferentes), 50% normales.
e) 25% con grave riesgo de padecer FQ, 50% con riesgo de FQ o CBAVD(agenesia
bilateral de vasos deferentes), 25% normales.
377.-A un varn oligozoosprmico severo se le evidencia una mutacin en el gen
del receptor de andrgenos. Dnde se localiza dicho gen, y qu se debe esperar
en la progenie?
a) Dicho gen se encuentra en el cr. 7. Al ser autosmico recesivo, es de esperar sus
hijos sean portadores si la madre es homocigota con alelos salvajes.
b) Se encuentra en el cr. Y. Es de esperar que sus hijos varones padezcan dicha
alteracin.
c) Se encuentra en el cr. X. Es de esperar que si la madre es homocigota con alelos
salvajes las hijas sean portadoras.
d) Se encuentra en el cr. 9. Al ser autosmica dominante, es de esperar que las hijas
sufran hiperfeminizacin, y los hijos estn afectos.
e) Se encuentra en el cr. 21. Al ser autosmica codominante, es de esperar que si la
madre es homocigota con alelos salvajes los hijos sean portadores, pero padezcan
una forma intermedia de enfermedad.
378.-El S. de X frgil es la causa principal de retraso mental por enfermedad
hereditaria en el cr. X. Concretamente se debe a:
a) Inestabilidad en la zona satlite del cr. X causada por hipermetilacin posterior a
la meiosis en el gen FRAXA.
b) Una secuencia altamente repetitiva de poli-A en el telmero del qX.
c) Inestabilidad en el centrmero del cr. X, dando lugar a la aparicin de dos
cromosomas acrocntricos.
d) Expansin de poli-CGG en el FMR1 y metilacin del promotor del gen.
e) Secuencia repetitiva de CTG en la zona codificadora del exn 5 del gen FRA-1.
379.-Si un nio con retraso mental es diagnosticado de S. X frgil, concretamente
en el sitio frgil FRAXA, con mutacin completa. Cul es la afirmacin falsa?
a) Sus futuros hermanos varones tienen riesgo de retraso mental por X frgil.
b) Si la madre es portadora de una mutacin completa, el 50% de las hermanas de
dicho nio sern portadoras sanas.
c) Los hijos de sus hermanas portadoras pueden padecer un mayor riesgo de retraso
mental.
d) Si la madre es portadora de mutacin completa, el 25% de las hermanas de dicho
nio pueden tener retraso mental.
e) Algunas de sus tas pueden ser portadoras.
380.-Hablando del S. de Prader-Willi, qu respuesta es la correcta?
a)
b)
c)
d)
187
Alteraciones en la meiosis.
Alteraciones cromosmicas numricas.
Mutaciones en el gen CFTR.
Microdelecciones del cr. Y.
Alteraciones cromosmicas estructurales.
S. de slo Sertoli.
Presencia mayoritaria de espermatogonias y espermatocitos primarios.
Elevada presencia de clulas germinales postmeiticas y oligozoospermia severa.
Frenado en espermiognesis con elevado nmero de espermtides, y escaso
nmero de espermatozoides en el lumen.
e) Presencia mayoritaria de clulas germinales premeiticas.
188
Genotipo.
Fenotipo.
Genoma.
Las respuestas a) o b) indistintamente.
Ninguna de las anteriores
Southern blot.
Northern blot.
Western blot.
Southwestern blot.
Las respuestas a) y c) son ciertas.
189
Biotina.
Digoxina.
Radioistopos.
Fluorocromos.
El tipo de marcaje de la sonda no influye en el tiempo de deteccin.
190
72C.
Entre 40C-60C.
94C.
100C.
Ninguna de las anteriores.
191
100%.
80%.
60%.
40%.
10%.
b)
c)
d)
e)
f)
30%.
50%.
70%.
100%.
192
193
RESPUESTAS
CAPTULO 7. GENTICA
EMBRILOGOS.
BIOLOGA
MOLECULAR
PARA
348: a).
Desde antes del nacimiento los ovocitos se encuentran meiticamente frenados en la
profase I. Ser slo con el impulso preovulatorio de LH cuando la meiosis se reinicie
hasta alcanzar la metafase II (Vanrell, 1992).
349: b).
En la determinacin del sexo intratero, la expresin del SRY activa una cascada de
eventos determinantes para el desarrollo de las gnadas indiferenciadas hasta
testculos. Estos secretan testosterona a travs de las clulas de Leydig, dando lugar a
la formacin de los genitales masculinos internos y externos. La ausencia de
expresin del SRY conlleva la diferenciacin a ovarios (Hilscher, 1999; Thielemans
et al., 1998; Mueller et al., 1998; Domenice et al., 1998; Hines et al., 1997).
350: c).
La meiosis I en la espermatognesis transcurre en el espermatocito 1. En cuanto al
ovocito, permanece en profase I hasta los estmulos preovulatorios (Veeck, 1999;
Bras et al., 1996).
351: c).
En la fase G-1 del ciclo celular cada cromosoma est representado por 1 cromtida,
por tanto la dotacin es 2n. Tras la sntesis de ADN, en la fase S, se duplica el
material gentico, pasando a 4n en 2n-2n pares de cromtidas hermanas. Cuando se
alcanza la metafase II el espermatocito posee 1 cromosoma homlogo con 2
cromtidas. Finalmente, el espermatozoide maduro ya es haploide (Jorde et al., 2000;
Lewin, 1989; Suzuki et al., 1989).
352: d).
Protoandrinas es un vocablo inventado a partir del trmino protoandrismo, referente a
los seres vivos hermafroditas. Diaminas son compuestos con dos grupos amino.
Protafinas es un vocablo inventado proveniente del trmino protafin, un pigmento
amarillo natural. Y promina es cierta sustancia promotora del crecimiento celular
(Hecht, 1998; Longo, 1997; Lolis et al., 1996; Holmes, 1985). Las protaminas son las
encargadas de sustituir a las histonas durante la espermiognesis y responsables de la
condensacin nuclear espermtica.
353: d).
Las protaminas presentan, a diferencia de las histonas, abundancia en Cistena que
dotan al conjunto de abundantes puentes disulfuro. Estas uniones proveen al ADN un
empaquetamiento ms compacto, reduciendo el espacio del ncleo, y aportando cierta
194
195
196
197
1
50
p = 1 1 50 = 49 50
La posibilidad de ser portador ser:
pq + qp 2 pq = 2 (1 50 49 50) = 0,98 25 1 25
373: c).
Aproximadamente el 97-98% de varones afectos con FQ padecen CBAVD(agenesia
bilateral de vasos deferentes). En el 60-66% de los pacientes con CBAVD se han
podido detectar alteraciones en el CFTR. De tal manera, el estudio del gen CFTR
estara indicado en pacientes con CBAVD (Kpker et al., 1999; Mueller et al., 1998b;
Lissens et al., 1996).
374: a).
La presencia de un nmero u otro de timinas provoca saltos en el splicing del ARN
mensajero con diferentes intensidades. La presencia de 5T provoca un salto en el
90% de los ARNm, siendo el que ms fallos provoca, la presencia de 7T en el 25%, y
9T en el 15% (Pallares-Ruz et al., 1999; Kpker, 1999; Lissens et al., 1996; Chu et
al., 1993).
375: b).
El mtodo de Tarkowski utiliza una solucin de fijacin compuesta por metanol y
cido actico glacial en proporcin 3:1 (Tarkowski, 1966).
198
376: a).
La progenie tiene las siguientes relaciones genotipo-fenotipo:
Mut. Severa
5T
Mut. Severa
Alelo salvaje
25% con gran
50% portadores
riesgo de FQ
con
fenotipo
25% con riesgo
normal
de CBAVD
377: c).
El gen codificador de los receptores de andrgenos se encuentra en el qX. Una
mutacin en l puede conllevar oligozoospermia o azoospermia (Kpker, 1999).
378: d).
El S. de X frgil se debe a expansin de secuencias repetitivas poli-CGG en el FMR1,
esta repeticin puede ser de variado tamao, generando diferentes mutaciones de
mayor intensidad cuanto mayor es la repeticin, y adems se puede deber a la
metilacin del promotor del gen FMR1 (Kunst et al., 1997; Moutou et al., 1997;
Mornet et al., 1996).
379: b).
El S. de X frgil, de herencia dominante ligada al X, est causado por zonas
repetitivas de CGG. Uno de dichos sitios es el FRAXA. La cantidad de repeticiones
se relaciona con la gravedad de la alteracin, as, una repeticin de 10-50 veces puede
ser normal, de 50-200 redundancias se considera premutacin, y si son de 200-2000
se considera mutacin completa. Dos caractersticas de este sndrome son la diferente
penetrancia segn el gnero, y el agravamiento de la mutacin sobre todo en la
meiosis femenina. As, para una mujer afecta de mutacin severa la penetrancia es del
50%, y adems si una mujer hereda de su padre una premutacin, sta puede
transmitir a sus hijos una mutacin completa. En el ejemplo citado, como el 50% de
las hermanas pueden heredar el X afecto, la mitad de ellas tienen riesgo de padecer la
enfermedad. (Jorde et al., 2000b; Mueller, 1998c).
380: d).
La respuesta a) sera correcta si se refiriera al 15 materno. b) y c) seran correctas si se
refirieran al padre. Las respuestas a), b), y c) son compatibles con el S. de Angelman.
Sin embargo, s est relacionada con el concepto de impronta gnica (Park et al.,
1998; Mueller et al., 1998b).
381: b).
El smbolo de la respuesta a) es un crculo con un hemicrculo de color negro. El
smbolo de la respuesta c) es un crculo de color negro indicado con una flecha. El
199
382: c).
En este grupo de varones la presencia de alteraciones cromosmicas y de
microdelecciones del Y es similar al de la poblacin general. Sin embargo, s asocia
la presencia de mutaciones en el gen CFTR (Kpker, 1999; Girardi et al., 1997;
Kremer, 1997; Engel, 1996; Jequier et al., 1985)
383: a).
La presencia de microdeleciones en las diferentes regiones AZF se relaciona
estadsticamente con diferentes hallazgos histolgicos. AZFa se relaciona con Slo
Sertoli; AZFb se relaciona generalmente con poblaciones de espermatogonias y
espermatocitos primarios, pero no con clulas postmeiticas; AZFc no posee una
relacin evidente (Kpker, 1999).
384: b).
El estudio de la variacin 5T se realiza con PCR. Si en esta determinacin se evalan
los corpsculos polares, un resultado positivo para 5T en el primero no es indicativo
de que las dos cromtidas del cr. 7 sean portadoras, ya que en el entrecruzamiento una
porcin de dicho cromosoma puede quedar inserta en el homlogo remanente en el
ovocito. Esto hace necesario el estudio del 2 corpsculo para determinar qu
cromtida ha permanecido tras la expulsin de dicho corpsculo (Bras, 1996).
385: e).
La utilizacin de FISH es preferencial al PCR en la determinacin del sexo debido a
la posibilidad del fallo en la amplificacin. Adems, se deben aadir sonda/s de
autosomas como control de ploida (Veiga, 1999; Coonen et al., 1998).
386: e).
En el anlisis de las traslocaciones recprocas balanceadas hay que recordar el
emparejamiento anmalo entre homlogos, origen de gametos dispares. En la
migracin adyacente tipo I, generadora de embriones anormales con tres copias de
una regin cromosmica, se observarn tres sondas para la regin telomrica de uno
de los cromosomas, v.g. q5, una de la regin telomrica de q10; y dos sondas
centromricas para cada par. Si la migracin es tipo adyacente 2, tambin con
embriones anormales, aparecern dos sondas para la regin telomrica del q5 y dos
para la regin telomrica del q10; pero con tres sondas para la regin centromrica de
uno de los cromosomas, v.g. del 5, y una para el 10. Con migracin alterna,
esperamos embriones viables, el 50% de ellos portadores de la traslocacin,
evidencindose dos sondas para cada regin telomrica, y dos para cada regin
centromrica. As, la adicin de sondas centromricas es necesaria para la distincin
entre embriones herederos de migracin adyacente 2 o alterna (Handyside et al.,
1998).
200
387: a).
El fenotipo es el conjunto de caractersticas de una clula u organismo, ya sea en el
mbito de protenas concretas o bien en funciones o aspectos morfolgicos o
comportamentales. El genoma es el conjunto de cromosmas o de DNA propio de una
clula u organismo. El genotipo se refiere exclusivamente a la informacin.
388: a).
Southern blot. El Northern blot es una tcnica utilizada para el anlisis de transcritos
de RNA, el Western blot para el anlisis de protenas y el Southwestern es un mtodo
de evaluacin de protenas especficas de unin a ADN (Coonen et al., 1998).
389: c).
Existen tres tipos de endonucleasas de restriccin: I,II,III. Las de tipo II son
herramientas imprescindibles en las tcnicas de biologa molecular. No estn
fsicamente asociadas a metilasas, no requieren ATP para la ruptura de DNA de doble
cadena que se produce dentro o muy cerca de la secuencia de reconocimiento,
usualmente una zona palindrmica) lo que produce fragmentos de tamao definido.
390. b).
La restructuracin de la doble hlice de DNA es consecuencia de su estabilidad bajo
condiciones fisiolgicas, es un proceso reversible y especfico. Cuando ninguna de las
cadenas est marcada el proceso se denomina annealing, cuando una de las hebras
est marcada esta se denomina sonda y el proceso hibridacin.
391: a).
FISH. El cariotipaje es un proceso largo, laborioso y bastante ineficiente debido a las
dificultades en obtener adecuadas preparaciones en metafase. En el caso de la PCR
existen dos desventajas que hacen preferible el uso de FISH, el posible fallo de la
amplificacin selectiva y el riesgo de amplificacin de material contaminante, junto
con el hecho de que esta tcnica no nos da idea sobre el nmero de cromosomas
presente. La actividad enzimtica medible en el estadio de implantacin ser
predominantemente materna (Coonen et al., 1998).
392: d).
Fluorocromos. El utilizar este tipo de marcaje, junto con la modificacin del proceso
de extensin y digestin ha permitido reducir el proceso a slo 2 horas. As la biopsia,
diagnstico y transferencia ocurre todo en el mismo da (Herper y Delhenty, 1995).
393: a).
Se puede producir el fenmeno de superposicin por la menor condensacin en
interfase, metafase es la fase de mayor condensacin cromosmica (Herper y
Delhenty, 1995).
201
394: d).
La mayor utilidad de las sondas especficas de secuencias repetitivas de DNA es en el
recuento cromosmico, aunque pueden reconocer aberraciones que impliquen dicha
secuencia repetitiva como puede ser el caso de las translocaciones Robersonianas. Las
sondas de cromosomas enteros tienen una aplicabilidad limitada en el anlisis de
embriones humanos ya que en interfase se forman dominios de fluorescencia
solapados sobre todo en blastmeros de embriones que muestran ms de dos
proncleos tras 16-18 horas post-fertilizacin.
395: d).
La especificidad de la unin de los primers depende tambin de su secuencia y de las
concentraciones inicas del buffer. La taq polimerasa tambin requiere para su
funcin la existencia de iones magnesio libres.
396: c).
Tpicamente la fusin de las hebras complementarias de DNA se consigue a 94C
durante 1 minuto; la hibridacin de primers se logra a temperaturas muy variables que
suelen ir desde 40C a 60C, segn su composicin de bases, durante 1 minuto;
finalmente la elongacin (polimerizacin) por Taq-polimerasa tiene lugar
normalmente a 72C entre 1 y 2 minutos.
397: d).
ADO hace referencia a la amplificacin de slo uno de los alelos, paterno o materno
indistintamente, que se observa en la amplificacin de celulas aisladas o un pequeo
nmero de clulas (Wells y Sherlock, 1998).
398: d).
Este tipo de error es caracterstico de la amplificacin por PCR de clulas individuales
o de un pequeo nmero de ellas, no sera causa de un error grave pues en el caso de
ser un embrin afectado al menos uno de los dos alelos mutados se detectara. En
condiciones de enfermedades autosmicas dominantes o en heterocigotos compuestos
autosmicos recesivos este tipo de error s que conllevara la transferencia de un
embrin afectado.
399: e).
La PCR fluorescente est demostrando ser una tcnica rpida para el screening de
mutaciones genticas en clulas aisladas. Puede llevarse a cabo en un solo paso, sin
necesidad de PCR anidada y requiere solamente 36 ciclos, se puede adaptar
fcilmente a una PCR multiplex ya que resuelve fragmentos que slo se diferencian
en 1-2 pb. No obstante por el momento los resultados no son excesivamente buenos
ya que el fenmeno de amplificacin diferencial de uno de los alelos es frecuente en
este tipo de material; de forma que el riesgo de error se ha cifrado en un 25%,
excesivamente elevado todava para ser aplicada clnicamente (Santal, 2001;
Sherlock et al., 1998)
202
400: c).
Multiplex ha sido un avance en las tcnicas de PCR y consiste en la amplificacin
de distintos fragmentos de ADN simultneamente. Esto permite disear estrategias
para la deteccin del alelo mutante para el anlisis de polimorfismos ligados a la
mutacin, descartar contaminaciones de ADN exgeno o determinar caractersticas
genticas del embrin para distintas anomalas simultneamente (Santal, 2001).
401: c).
La respuesta falsa se refiere al Microarrays, anlisis con chips de ADN, otra tcnica
desarrollada recientemente, como la Hibridacin Genmica Comparativa. La CGH es
una tcnica en la que el ADN que vamos a analizar es marcado con fluorocromos, se
requiere gran cantidad de ADN y, si no hay ningn desequilibrio en el ADN prueba,
la cantidad de ADN verde y rojo hibridado en la metafase es equivalente, pero cuando
hay un cromosoma o un fragmento de ms o de menos, la proporcin de verde o de
rojo aumenta respectivamente en el cromosoma de la metafase patrn, necesitndose
para su realizacin grandes cantidades de DNA y analizador de imgenes (Santal,
2001).
402: e).
Existen ya algunos datos sobre hijos de hombres con sndrome de Klinefelter, y
alrededor del 10% presentan alteraciones cormosmicas al nacer (Bourne et al., 1997;
Reubinoff et al., 1998; Moosani et al., 1999; Ron-El et al., 1999, 2000; Bielanska et
al., 2000; Levron et al., 2000).
403: c).
Las microdeleciones del brazo largo del cromosoma Y (Yq) se han observado en
hasta un 15% de los afectos de azoospermia secretora. Todo parece indicar que la
transmisin de la alteracin se da en todos los descendientes varones (50% del total de
descendientes) (Ken-First et al., 1996; Kamischke et al., 1999; Cram et al., 2000).
203
BIBLIOGRAFA
CAPTULO 7. GENTICA
EMBRILOGOS.
BIOLOGA
MOLECULAR
PARA
204
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207
208
Microbiologa e Inmunologa
209
CAPTULO 8.
MICROBIOLOGA E INMUNOLOGA DE LA REPRODUCCIN.
Gil MT*, Carrin M**, Castilla JA***, Expsito A**** ,Gonzalvo MC**,
Garcia-Pea ML***.
*Servicio Anlisis Clnicos, Hospital Ntra. Sra. del Prado, Talavera de la Reina,
Toledo
**Laboratorio CEIFER, Granada
***Unidad de Reproduccin, HU Virgen de las Nieves, Granada
****Unidad de Reproduccin, Hospital de Cruces, Barakaldo, Bizkaia
Microbiologa e Inmunologa
210
Linfocitos T.
Linfocitos B.
Macrfagos.
Linfocitos grandes granulares.
Mastocitos.
405.-En la base de la teora inmune del aborto est un desequilibrio entre una
respuesta inmune Th1/Th2 al nivel de placenta, que afirmacin es falsa:
a) Una respuesta tipo Th1 se caracteriza por secretar IL2, IL12, TNF-beta e
Interferon-gamma.
b) Una respuesta tipo Th2 se caracteriza por secretar IL-4, IL-6 e IL 10.
c) La respuesta inmune tipo Th1 es una respuesta eminentemente celular
d) La respuesta inmune tipo Th2 es una respuesta mediada por anticuerpos.
e) Una respuesta Th1 favorece el mantenimiento del embarazo.
Ig A + IgM.
Ig A + Ig G.
Ig A + Ig G+ Ig M.
Ig M.
Ig G + Ig M.
Alpha 1 antitripsina.
Beta-2-glicoprotena-I.
Alpha-2-macroglobulina.
Interleukina 2.
Ninguna, solo interaccionan con fosfolpidos.
Microbiologa e Inmunologa
a)
b)
c)
d)
e)
211
Microbiologa e Inmunologa
212
c) 1.000 o ms UFC/ml.
d) >100.000 UFC/ml.
e) Cualquier crecimiento se considera significativo.
Epiddimo.
Uretra.
Prstata.
Testculo.
Conducto deferente.
Semen.
Orina.
Fluido prosttico.
Exudado uretral.
La a) y d) son ciertas.
Microbiologa e Inmunologa
213
Tetraciclina.
Cefotaxima.
Azitromicicna.
Doxiciclina.
Penicilina G.
Serratia spp.
Klebsiella spp.
Enterobacter cloacae.
E.coli.
Pseudomona aeruginosa.
Microbiologa e Inmunologa
214
Neisseria gonorrheae.
Trichomonas vaginalis.
Gardnerella vaginalis.
Candida albicans.
Chlamydia trachomatis.
Agar V.
Agar Sabouraud.
Medio de Thayer-Martin.
Agar McConckey
Agar Schaedler.
Microbiologa e Inmunologa
215
431.-En la vagina de la mujer en edad frtil se encuentra, una flora variada, pero
con una preponderancia de uno de los siguientes microorganismos. Selelo:
a)
b)
c)
d)
e)
S. epidermidis.
E. coli.
Proteus mirabilis.
Enterococcus faecalis.
Lactobacillus (bacilos de Dderlein).
MHA.
FTA-ABS.
TPI
RPR
Ninguna de las anteriores, porque todos son pruebas treponmicas.
Microbiologa e Inmunologa
216
435.-En relacin con la infeccin genital por virus, seale la respuesta correcta:
a) El virus herpes simple es un RNA virus que produce infecciones de transmisin
sexual, sobre todo el tipo 2.
b) La serologa frente al VHS es especialmente til para establecer el diagnstico de
una infeccin actual.
c) Los papilomavirus (VPH) son virus DNA que infectan las clulas de las mucosas
(vulva, crvix y vagina), produciendo lesiones precancerosas con tendencia a
malignizar.
d) El virus del Molluscum contagiosum es un rabdovirus.
e) Las lesiones del Molluscum contagiosum son patognomnicas.
Neisseria gonorrhoeae.
Chlamydia trachomatis.
Mycoplasma hominis.
Ureaplasma urealyticum.
S. epidermidis.
Microbiologa e Inmunologa
217
Infeccin gonoccica.
Infeccin por Chlamydia trachomatis.
Infeccin por Trichomonas vaginalis.
Vaginosis bacteriana.
Infeccin por Candida albicans.
Ag p24
Carga viral mediante RT-PCR
ELISA anticuerpos VIH
Western blot anticuerpos VIH
Niveles de linfocitos CD4
443.-Cmo interpretara una serologa AgHBs (+); AgHBe (-); anti-HBc (+);
anti-HBs (-), en un donante de semen sin sntomas de hepatitis.
Microbiologa e Inmunologa
a)
b)
c)
d)
e)
218
444.-Ante una pareja estril cuya mujer presenta anticuerpos frente al virus de
la hepatitis C (VHC) qu afirmacin es correcta:
a)
b)
c)
d)
e)
446.- Diversos organismos (OMS, AFS) han publicado normas de seguridad para
evitar el contagio del personal de laboratorio de reproduccin, cual de estas
medidas no es verdad:
a)
b)
c)
d)
Microbiologa e Inmunologa
219
Virus de la parotiditis.
Herpes.
Coxsackie.
Solo a) y b).
Todos.
449.-Un paciente refiere al personal del laboratorio de FIV que tuvo verrugas en sus
genitales, qu debe tener en cuenta dicho personal?
a) Que el paciente padeci un condiloma acuminado provocado por el virus herpes
simple.
b) Debe tener cuidado especial en el manejo de esa muestra de semen por la alta
posibilidad de contaminacin.
c) Que padeci Molluscum contagiosum provocado por un Papilomavirus humano.
d) Que tuvo una infeccin por hongos, limpiando la incubadora despus de la FIV.
e) Nada de lo anterior.
Microbiologa e Inmunologa
220
INMUNOLOGA
LA
RESPUESTAS
CAPTULO 8. MICROBIOLOGA
REPRODUCCIN.
DE
404: d).
Los leucocitos del estroma endometrial pasan de ser menos del 10% en la fase
proliferativa y primeros dias de la fase secretora, a ser ms del 30% en las primeras
semanas del embarazo, este incremento se debe a los linfocitos grandes granulares
(LGL), no estando aclarado si es debido a una proliferacin de los LGL presentes en
la fase secretora o a la llegada de nuevos LGL de sangre perifrica. El fenotipo de
estas clulas es CD3-, CD16-, CD56+ teniendo actividad citotxica tipo natural killer,
siendo capaces de secretar citoquinas y lisar clulas de citotrofoblasto previa
activacin con interleukina-2. Estas caractersticas han implicado a estas clulas en el
control de la invasin trofoblstica y le asignan un papel clave en el mantenimiento
del embarazo (Johnson et al., 1999)
405: e).
Las contestaciones a y c describen perfectamente una reaccin inmune tipo Th1, y las
contestaciones b y d una tipo Th2. En mujeres abortadoras a nivel placentario se ha
descrito un predominio de respuesta inmune tipo Th1, y en mujeres con embarazos a
trmino un predominio de Th2, por lo que se piensa que debe de existir un patrn de
secrecin de citoquinas tipo Th2 para que el embarazo se mantenga. Hay que aclarar
que cuando hablamos de respuesta Th1 o Th2 no quiere decir que sean los linfocitos T
los responsables de ella sino que una serie de clulas de la placenta con capacidad de
segregar citoquinas (leucocitos maternos y fetales, epitelio uterino y trofoblasto fetal)
secreten principalmente un tipo u otro de citoquinas (Johnson et al., 1999)
406: d).
Los HLA no clsicos de clase Ib son HLA-E, -F y -G, y se diferencian de los clsicos
HLA de clase Ia (-A, -B y C), en la ausencia de un elevado polimorfismo.
Encontramos HLA-G en placenta en el citotrofoblasto extravelloso, endotelio fetal de
las vellosidades corinicas y clulas amniticas. Este HLA-G se ha relacionado con la
resistencia que tienen las clulas citotrofoblsticas extravellosas a la lisis mediada por
clulas natural killer, estando relacionado su expresin con un desarrollo adecuado del
embarazo (Le Bouteiller et al., 1999).
407: b).
El isotipo de anticuerpo antiespermatozoide encontrado ms frecuentemente en semen
es Ig G + Ig A, cuando aparece un isotipo aislado segn el autor ser ms frecuente la
Ig G o la Ig A. Los anticuerpos antiespermatozoide tipo Ig M aparece muy raramente.
En general, se acepta que cuando un eyaculado presenta anticuerpos
antiespermatozoides de isotipo Ig A lo ms probable es que tambien presente de Ig G,
pero cuando presenta Ig G no es seguro que presente Ig A. Por esto se recomienda que
se utilice la deteccin de anticuerpos antiespermatozoide isotipo Ig G como screening,
y en caso de dar positivo se investigue la presencia de Ig A. En caso de querer realizar
Microbiologa e Inmunologa
221
408: b).
Los anticuerpos antifosfolpidos son un conjunto de autoanticuerpos que incluyen el
anticoagulante lpico, anticardiolipina, antifosfatidilserina, antifosfatidilglicerol y
antifosfatidilinositol. Aunque como su nombre indica son antifosfolpidos hoy
sabemos que reaccionan tambien con protenas que se unen a fosfolpidos como la
anexina V, protena C y S , y la Beta-2-glicoprotena I. Esta ltima es un inhibidor de
la coagulacin por lo que su bloqueo por anticuerpos antifosfolpido inducira
trombosis. Actualmente muchos trabajos intentan correlacionar la presencia de
anticuerpos anti beta-2 glicoprotena I con cuadros clnicos clsicos de anticuerpos
antifosfolpidos (Caruso et al., 1999)
409: e).
Los APA se han asociado con patologa obsttrica: abortos, muertes fetales intratero
de segundo y tercer trimestre, crecimiento intrauterino retardado, preeclampsia, etc.
Tambien algunos autores han relacionado su presencia con fallos de implantacin en
FIV. Entre los mecanismos por los cuales estos APA afectan el embarazo dos son
considerados hoy los ms probables: un efecto directo sobre el embrin (Kaider et al.,
1999) y la produccin de una vasculopata en el mbito de decidua (Gleicher, 1998;
Caruso et al., 1999; Di Simone et al., 1999), con procesos de trombosis vascular e
infartos placentarios. Para explicar el efecto paradjico de la presencia de estos APA
in vitro/in vivo (prolongacin de las pruebas de coagulacin/trombosis), se postula
que los APA reaccionaran con los fosfolpidos de la pared plaquetaria, produciendo
una lesin celular, que aumentara la liberacin de tromboxano; al mismo tiempo los
APA interaccionaran con el complejo activador de la protrombina inhibindolo con
la consiguiente prolongacin de los test de coagulacin. Los APA tendran tambin un
efecto directo sobre las membranas de las clulas endoteliales que conducira a una
disminucin de la produccin vascular de prostaciclina. Todo ello producira un
predominio del tromboxano sobre la prostaciclina, que predispone a la
vasoconstriccin, agregacin plaquetaria y trombosis intravascular (Gleicher, 1998;
Caruso et al., 1999; Di Simone et al., 1999).
410: e).
Segn el manual de la OMS, 1999, para realizar un estudio microbiolgico de una
muestra de semen, han de transcurrir de 5 a 7 das de abstinencia sexual en la pareja y
ha de recogerse en un frasco estril, como en cualquier estudio bacteriolgico.
411: d).
Segn la OMS (1999), para realizar el estudio microbiolgico del semen, no deben
transcurrir ms de 3 horas desde que se obtiene la muestra hasta que se siembra en los
medios de cultivo pertinentes.
412: b).
Microbiologa e Inmunologa
222
Segn la OMS (1999) el cultivo de semen es una prueba opcional en el estudio de esta
muestra, y debe recogerse extremando las medidas para evitar las frecuentes
contaminaciones por grmenes no patgenos. Para ello, es preciso una miccin previa
a la recogida y lavado de manos y genitales. Segn OMS (1999) y Pomerol y Arrondo
(1994) es conveniente comparar el resultado del seminocultivo con el del cultivo de
otras muestras que puedan obtenerse del varn, como la orina, el fludo prosttico y el
exudado uretral.
413: a).
La respuesta correcta es la a, puesto que cualquiera de las opciones b, c, d y e son
indicaciones para realizar un estudio microbiolgico del semen. No as si el volumen
del eyaculado es normal, como refiere la primera opcin. Segn la OMS, el volumen
del eyaculado es normal cuando es 2 ml, por lo que en este caso no hay que realizar
el seminocultivo. Slo en casos de hipospermia (< 2 ml) estara indicado (Andolz y
Bielsa, 1995).
414: c).
Segn la OMS (OMS, 1992) para que un seminocultivo se considere positivo para
bacterias aerobias habituales, han de contarse 1.000 o ms colonias bacterianas por ml
de muestra. Si es <1.000, entonces el cultivo se considera negativo.
415: e).
Segn OMS (OMS, 1992) el crecimiento de ms de un tipo de bacteria en una placa
de cultivo de semen se considera como muestra contaminada y se debe aconsejar la
recogida de una nueva muestra de semen evitando en todo lo posible la contaminacin
de la muestra. No obstante, en la prctica diaria a veces se aconseja valorar
porcentaje de ambos tipos de colonias, y en especial, si una de ellas es un patgeno
per se.
416: a).
La respuesta correcta es la a) porque aunque puede afectar a otras partes de la va,
como la uretra, es la afectacin epididimaria la que se encuentra ms relacionada con
la afectacin seminal, habindose descrito alteraciones en la movilidad del
espermatozoide en los individuos con cultivos positivos para la C. trachomatis
(Diquelou et al., 1989).
417: d).
La respuesta correcta es la d), ya que el exudado uretral tomado de forma adecuada
con raspado de clulas epiteliales, en cuyo interior pueden encontrarse las chlamydias
(son bacterias intracelulares), es la muestra ideal para el aislamiento de este patgeno.
Las otras muestras no son tan ptimas para su aislamiento, aunque cada vez se est
avanzando ms en la bsqueda del ADN bacteriano directamente en las muestras
(semen,...) mediante tcnicas de biologa molecular (Andolz y Bielsa, 1995; Pomerol
y Arrondo, 1994; Finegold y Baron, 1992).
Microbiologa e Inmunologa
223
418: d).
La muestra ideal para el estudio de C. trachomatis es el exudado uretral (comentado
en la pregunta anterior). Es cierto que la prueba por excelencia para demostrar la
presencia de C. trachomatis en una muestra genital es el cultivo en clulas
heteroploides de ratn (clulas de McCoy), pero es una tcnica cara y no disponible
en todos los laboratorios. Adems suele tardar de 3-7 das en detectarse el crecimiento
del microorganismo en el interior de las clulas. Las pruebas de deteccin antignica
son las usadas ms frecuentemente en nuestros laboratorios, aunque su sensibilidad es
aun baja (70-90%). Las nuevas tcnicas de biologa molecular son las de mayor
sensibilidad (alrededor del 100%), pero an han de desarrollarse para implantarse en
los laboratorios (Cabero, et al, 1999). Sin embargo, el estudio rutinario de este germen
en muestras de semen no ha sido considerado como aconsejable en relacin a su
coste-beneficio y su baja tasa de prevalencia en parejas estriles en Espaa (0.6-1%)
(Miranda, 1994).
419: d).
La respuesta correcta es la d) (Mensa et al, 2000; Garca et al., 1999).
420: e).
Todas las respuestas son correctas. (Andolz y Bielsa , 1995; Finegold y Baron ,
1992).
421: d).
La E. coli es la enterobacteria que ms frecuentemente se aisla. La incidencia en
seminocultivos positivos de esta enterobacteria es del 26% para algunas casusticas
(Bartoov et al., 1991).
422: a).
El metronidazol es el tratamiento propuesto para la infeccin de este parsito (Mensa
et al. 2000; Cabero et al., 1999; Garca et al., 1999).
423: d).
La respuesta falsa es la d), ya que s que han sido propuestos una serie de mecanismos
que explican la asociacin entre infeccin de la va seminal y esterilidad, que en
muchos casos llega a ser del 15-30% de las parejas estriles. Estos mecanismos son:
lesiones obstructivas en algn nivel de la va; disfunciones secretoras y/o alteraciones
seminales, que hacen que los espermatozoides no presenten la funcionalidad adecuada
para conseguir la fecundacin (Pomerol y Arrondo , 1994).
424: e).
El agente productor de la blenorragia o gonococia es el gonococo, que presenta
morfologa de diplococos Gramnegativos, en forma de granos de caf y crece en el
Microbiologa e Inmunologa
224
425: c).
La G. vaginalis es el agente productor de la vaginosis bacteriana, que se caracteriza
por la produccin de un exudado vaginal en las mujeres infectadas pobre en
leucocitos y que desprende un olor a pescado cuando se aade KOH, por la
produccin de aminas voltiles. De todas formas tambin se han implicado otros
microorganismos en este cuadro del tipo de peptoestreptococcus, mobiluncus, etc.
(Lewis, 1992).
426: a).
La respuesta correcta es la a). El medio selectivo para la G. vaginalis es el agar V que
contiene sangre humana, que es degradada por la bacteria, generando colonias betahemolticas fcilmente distinguibles. El medio Sabouraud es el selectivo para
levaduras y hongos, el Thayer-Martin es para el gonococo, el medio McConckey para
el asilamiento de bacilos Gramnegativos y el medio de Schaedler para anaerobios
(Finegold y Baron , 1992).
427: e).
Todos estos mecanismos han sido descritos como producidos por los micoplasmas
que infectan la va seminal: teratozoospermia (colas enrolladas, cabezas afiladas,...),
alteracin en la penetracin ovocito-espermatozoide (efecto masking), alteraciones
cromosmicas en cultivos de linfocitos del tipo de delecciones (aunque no en gametos
directamente), (Gil et al., 2000)
428: a).
En los ltimos aos cada vez se le da mayor importancia a los aspectos inmunolgicos
de la endometriosis. En mujeres con endometriosis se ha demostrado una disminucin
de la actividad de las NK peritoneales posibles responsables de la eliminacin de los
implantes endometrisicos; esta disminucin podra estar causada por factores
presentes en el lquido peritoneal. El sistema monoctico-macrofgico tambin est
alterado, habiendo un aumento en su nmero y actividad, lo que podr facilitar tanto
la destruccin de las clulas endometriales como la implantacin y crecimiento de
estas clulas, debido a la gran cantidad de factores que segregan los macrfagos. Por
otra parte existe un aumento de niveles de autoanticuerpos que indican una actividad
policlonal de los linfocitos B. Estas alteraciones inmunolgicas no se relacionan con
los sntomas clnicos, pero s con la incidencia de la esterilidad y riesgo de prdida del
embarazo. La endometriosis presenta, adems otras caractersticas de las
enfermedades autoinmunes: asociacin familiar, lesiones tisulares y afectacin
multiorgnica. La investigacin del aspecto autoinmune de la enfermedad podra dar
lugar a una clasificacin funcional de la enfermedad, importante desde el punto de
vista de la esterilidad que no se relaciona, como hemos visto, con la intensidad de las
lesiones anatmicas. (Muoz et al., 1997)
429: a).
Microbiologa e Inmunologa
225
Segn recientes estudios (Merino et al., 1995), entre la flora que ms frecuentemente
se aisla en los seminocultivos que se realizan rutinariamente, son los estafilococos
coagulasa negativos, en especial el S. epidermidis , los predominates (63%), frente a
otros como el estreptococo grupo viridans (28%), las enterobacterias como la E. coli
(9%), los enterococcus faecalis (5%), otros esptreptococos (4%), y otros grmenes
ms especficos de ETS (<4%).
430: d).
El tratamiento de primera eleccin es la ceftriaxona a dosis de 250 mg IM, aunque
tambin puede administrarse ciprofloxacino 500 mg en dosis nica. Es falso que sea
la doxiciclina. Actualmente el 35% de las cepas del gonococo son resistentes a la
penicilina y a la ampicilina, por ello han sido desbancadas por las cefalosporinas de 3
generacin y las fluorquinolonas (Cabero, 1999; Mensa et al, 2000; Garca et al.,
1999).
431: e).
Aunque los dems microorganismos pueden tambin aislarse, es el bacilo de
Dderlein el que representa la flora bacteriana vaginal saprofita en estas mujeres
(Cabero , 1999; Finegold y Baron EJ, 1992; Lewis , 1992).
432: d).
La FTA-ABS, MHA y TPI son pruebas treponmicas, que se utilizan para la
confirmacin del diagnstico de les, sobre todo la primera. Sin embargo, el RPR es
una prueba de aglutinacin muy empleada en todos los laboratorios para realizar el
despistaje de sfilis. En el caso de que se obtuviera un resultado positivo o dudoso,
habra que confirmar con un FTA-ABS (Finegold y Baron EJ, 1992).
433: e).
(Cabero, 1999). Todas las opciones son ciertas y propias de las candidas, excepto el
tiempo en que tarda en crecer en medio de Sabouraud, que suele estar comprendido
entre 1 a 3 das.
434: d).
El T. vaginalis es un protozoo flagelado de distribucin universal que produce
vulvovaginitis y uretritis, y que se transmite nica y exclusivamente por contagio
sexual directo, debido a que slo presenta una forma vegetativa (trofozoito) y no una
qustica, por lo que no sale al medio ambiente para la transmisin de persona a
persona. El diagnstico suele realizarse mediante examen en fresco y a veces los
exudados pueden cultivarse en medios especiales como el de Roiron o de Diamond
(Cabero et al., 1999)
435: c).
Microbiologa e Inmunologa
226
Los papilomavirus son DNA virus que infectan las clulas existentes sobre todo en el
crvix y que se transmiten de forma sexual. Adems de los sntomas y molestias que
pueden producir, es importante por las lesiones precancerosas a las que da lugar. Las
dems respuestas son falsas. El VHS es un ADN virus, aunque es el tipo 2 el ms
frecuente en las infecciones genitales; pero no es la serologa la prueba ms til para
su diagnstico, sino la tincin de Tzanck de las lesiones o la deteccin del antgeno
por inmunoflorescencia. El virus del Molluscum contagiosum es un poxvirus y su
diagnstico se realiza por exclusin, porque sus lesiones no son patognomnicas y se
suelen parecer a las producidas por el VHS (Cabero et al. 1999).
436: e).
Los cuatro primeros son los que ms frecuentemente estn implicados en la
produccin de una EIP, aunque siempre existe un porcentaje de bacterias aerobias
habituales que pueden originarlo (Cabero et al. 1999).
437: b).
El principal mecanismo por el que la C. trachomatis genera esterilidad en las parejas
es la afectacin del aparato genital femenino, en donde suele dar lugar a obstruccin
tubrica. (Eggert-Kruse et al., 1990; Cabero et al., 1999).
438: a).
El tratamiento correcto en caso de infeccin genital para micoplasmas, es la
doxiciclina a 100 mg/12h/7 das. (Mensa et al., 2000; Garca et al., 1999).
439: d).
La vaginosis bacteriana, producida fundamentalmente por la Gardnerella vaginalis,
se diagnostica si se cumplen 3 de los 4 criterios siguientes: pH vaginal > 4.5; fluido
vaginal abundante, pero pobre en leucocitos; olor a pescado cuando se aade KOH
por la volatilizacin de aminas por el germen; y la presencia de clulas clue, que son
las clulas epiteliales tapizadas por los microorganismos (Lewis , 1992; Garca et al.,
1999; Finegold y Baron, 1992).
440: c)
Los estudios epidemiolgicos demuestran que numerosos pacientes con marcadores
de haber presentado una infeccin por virus de la hepatitis B (anti-HBc (+) y/o
antiHBs (+)) jams han tenido evidencia clnica de hepatitis aguda lo que sugiere que
la forma ms comn de la infeccin es la hepatitis inaparente o asintomtica que solo
se descubre al realizar estudios serolgicos. Dado que la donante es AgHBs (-)
podemos descartar que sea portadora asintomtica. Nuestra donante puede tambin
haber adquirido los anti-HBs por vacunacin frente al virus de la hepatitis B. La
presencia de anti-HBs indica proteccin frente al virus de la hepatitis B (Garca y
Gonzlez, 2000).
441: a)
Microbiologa e Inmunologa
227
Las situaciones ms probables al encontrarnos este perfil AgHBs (-); antiHBe (-);
anti-HBc (+); anti-HBs (-) son reaccin inespecfica o una repuesta inmuno
insuficiente frente a infeccin pasada por virus de la hepatitis B que lleva a perdida de
antiHBs. Esta positividad aislada de antiHBc no garantiza la inmunidad a la
reinfeccin, por lo que no debe tomarse como criterio de exclusin para la
vacunacin. No existe inconveniente para realizar la tcnica de reproduccin asistida
de rutina en este paciente (Garcia y Gonzlez, 2000)
442: c)
Las recomendaciones de la OMS para el empleo de las pruebas serolgicas en el
diagnstico de la infeccin por VIH-1 o VIH-2 indican que la prueba de screening en
la poblacin general debe ser la deteccin de anticuerpos anti-VIH-1 y VIH-2
mediante ELISA. Y la tcnica de confirmacin debe ser la deteccin de anticuerpos
mediante western blot (Fauci and Lane, 1998).
443: e)
La evolucin de la hepatitis B crnica es variable. Muchos pacientes son capaces de
limitar pronto la actividad replicativa del virus y se convierten en portadores sanos
que permanecen asintomticos y libres de enfermedad heptica durante mucho
tiempo, pero con capacidad de contagiar. En otros, la replicacin del VHB persiste y
da lugar a una hepatitis crnica casi siempre subclnica que se mantiene a lo largo del
tiempo y termina con el desarrollo de cirrosis. Esta infeccin persistente puede ser
debida al VHB salvaje (AgHBe (+)) o deberse a formas mutantes (antiHBe+; AgHBe). La presencia de mutantes determina una evolucin distinta de la enfermedad. Este
donante sera rechazado, recomendndole la realizacin de una determinacin de
antiHBe y de carga viral. (Garca y Gonzlez, 2000).
444: e)
Ningn estudio ha demostrado riesgo de transmisin de la infeccin del VHC a travs
de la lactancia (Lo y Fernndez, 2000). La hepatitis C no empeora con el embarazo ni
las gestaciones en mujeres con hepatitis C presentan ms complicaciones que en las
mujeres seronegativas. La transmisin vertical en mujeres seropositivas depende de la
carga viral y ocurre principalmente durante el parto (Gibb et al., 2000). En mujeres
con carga viral VHC RNA negativo la transmisin es <1%, en mujeres con menos de
un milln de copias es del 0-5% y con ms de un milln de copias del 10-20%
(Steyart et al., 2000). Por esto se recomienda que en caso de parejas estriles y la
mujer con anti-VHC (+) se determine la carga viral, y la tcnica de reproduccin
asistida se realice si la carga viral es < de 1.000.000 copias/mL y en los casos con ms
de un milln de copias por mL se debe consultar a un hepatlogo con la idea de
instaurar algn tratamiento que disminuya la carga viral (Lo y Fernndez, 2000), y
una vez conseguido este objetivo se realice la TRA. No existe vacuna frente al VHC.
445: c)
Ni el tratamiento con antibitico ni la realizacin sistemtica de seminocultivo a todo
varn asintomtico del programa de FIV han demostrado ser eficaces para la
disminucin de contaminacin de los medios de cultivo en estos programas. Sin
Microbiologa e Inmunologa
228
446: e)
El riesgo de infeccin del personal del laboratorio de reproduccin es 10 veces mayor
que la poblacin general y tres veces mayor que otros trabajadores sanitarios (Sewell,
1995). El riesgo de infeccin tras una puncin accidental es del 2-40% para la
hepatitis B, 3-10% para la hepatitis C y del 0,2-0,5 % para HIV (Gerberding, 1995).
Ante este panorama es lgico que se extreme la precaucin en el trabajo cotidiano y
no slo a la hora de tratar a pacientes seropositivos. Tanto la OMS (WHO, 1999)
como lo AFS (1992) han editado guas y recomendaciones para el manejo de material
biolgico reproductivo. Nos gustara destacar dos aspectos uno la necesidad de
vacunacin frente a la hepatitis B de todo el personal sanitario, y la prohibicin por
AFS y el Instituto Nacional para la Seguridad y Salud Laboral de Estados Unidos de
pipetear con la boca (Gerrity, 1993).
447: c)
La existencia de una vacuna frente a la hepatitis B facilita la actitud a tomar en parejas
estriles serodiscordantes a la hepatitis B en la que el varn es seropositivo, pues la
vacunacin prevendra la transmisin a la mujer. Adems, al contrario que en el caso
de infeccin por VIH y VHC donde el resultado de la serologa es de fcil
interpretacin (positiva o negativa), el estudio de anticuerpos frente al VHB es ms
complejo pudiendo encontrarnos con varios supuestos (hepatitis crnica, portador
asintomtico, inmunizacin, etc), por lo que ante un varn seropositivo a VHB se
debera de especificar el perfil serolgico exacto. En cuanto a la infeccin por
citomegalovirus es verdad que es fundamental valorar si es infeccin antigua o
reciente, asi como, valorar el estado de inmunizacin de la pareja (Liesnard, 1998;
Liesnard et al., 1998).
448: e)
La parotiditis solo tiene inters en la historia reproductiva del varn si se padece
despus de la pubertad y adems afecta al testculo, lo que ocurre en un 15-20% de los
casos, de no ser as no debe ni referirse en la historia clnica (Ruiz-Romero et al.,
1994). Las orquitis virales ms frecuentes son las producidas por el virus de la
parotiditis, herpes simple y Cosackie (WHO, 2000).
449: e).
El trmino condiloma acuminado hace referencia a la presencia de verrugas
genitales, estando producido por papilomavirus humano. El Molluscum Contagioso
lo produce un poxvirus y se caracteriza por ppulas umbilicadas 2-5 mm de dimetro
en genitales. Siempre debe manejarse una muestra de semen como material
contaminante independientemente de la historia clnica del paciente (WHO, 2000). La
infeccin genital por hongos ms frecuente es producida por Candida albicans y cursa
con uretritis aguda purulenta y a veces afectacin del glande con aparicin de
manchas blancas (Puigvert y Dalet, 1994).
Microbiologa e Inmunologa
229
INMUNOLOGA
LA
BIOGRAFA
CAPTULO 8. MICROBIOLOGA
REPRODUCCIN.
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Microbiologa e Inmunologa
231
Miscelnea
232
CAPTULO 9.
MISCELNEA:
LEGISLACIN
BIOESTADSTICA Y QUMICA.
ESPAOLA
BIOTICA,
Molina R*, lvarez C**, Castilla JA***, Gil MT****, Esparza C*****.
Miscelnea
233
Mayores de edad.
Buen estado de salud psicofsica.
No tener ms de 35 aos las donantes de vulos y 45 los de semen.
Todas las anteriores.
Las respuestas a) y b).
451.-Una mujer que necesita donacin de ovocitos, puede recibir los ovocitos de
su hermana que tiene 34 aos, que est casada y con 6 hijos?
a) S, siempre que la hermana y su marido quieran y den su consentimiento por
escrito.
b) S, porque al tener tantos hijos se sabe que sus ovocitos son de buena calidad.
c) La donacin de la hermana servir para otra pareja que traiga su donante y con
ello la donacin ser annima.
d) La hermana, por el nmero de hijos que tiene, no puede ser donante de ovocitos.
e) Si por que as se cumple una gran similitud fenotpica entre donante y receptora.
Francia.
Espaa
Reino Unido.
Alemania.
Miscelnea
234
Miscelnea
235
Miscelnea
236
b) Como han prestado su consentimiento para llevar a cabo dicha tcnica no se puede
impugnar la filiacin matrimonial del hijo nacido como consecuencia de la
inseminacin.
c) La madre tiene ms derecho al ser ella la madre gentica.
d) Depende de la Comunidad en que se llevara a cabo la inseminacin.
e) Las respuestas a) y c).
Miscelnea
a)
b)
c)
d)
e)
237
10 aos.
8 aos.
Plazo de tiempo variable acordado entre el banco y el donante.
5 aos.
Miscelnea
238
e) 2 aos.
Cariotipo.
Deteccin de marcadores de sfilis.
Deteccin de marcadores de VIH.
Screening de hepatitis.
Estudio clnico para la deteccin de Neisseria gonorrhoeae y Chlamydia
trachomatis.
BIOESTADSTICA.
475.-En un artculo reciente publicado en Human Reproduction han encontrado
un coeficente de correlacin muy significativo entre los niveles de leptina y
estradiol en lquido folicular (LF) en 20 mujeres con Sndrome de Ovario
Poliqustico (SOP); esto indica que:
a) Existe una relacin intensa entre las dos variables
mujeres con SOP.
b) La correlacin entre las dos variables en LF de
probablemente distinta de 1.
c) La correlacin entre las dos variables en LF de
probablemente distinta de 0.
d) La correlacin entre las dos variables en LF de
probablemente un nmero positivo prximo a 1.
e) La correlacin entre las dos variables en LF de
probablemente es igual a 1.
Miscelnea
239
S=231/258=0,90; E=54/86=0,63.
S=231/263=0,88; E=27/81=0,59.
S=258/344=0,75; E=86/344=0,25.
S=86/263=0,33; E=231/258=0,89.
S=32/86=0,37; E=27/258=0,10.
477.-En el caso anterior, cul es el valor predictivo positivo (VPP) y negativo (VPN)
de la nueva clasificacin?
a)
b)
c)
d)
e)
VPP=231/263=0,88; VPN=54/81=0,66.
VPP=32/263=0,12 ; VPN=27/81=0,33.
VPP=27/258=0,10 ; VPN=54/86=0,63.
VPP=81/263=0,31 ; VPN=263/344=0,76.
VPP=27/32=0,84 ; VPN=54/231=0,23.
Test chi-cuadrado.
Test de Welch.
Correlacin de Pearson.
Curva ROC.
Anlisis de la varianza.
Test de Student.
Test de la Chi-cuadrado.
Anlisis de la varianza.
Test de Welch.
Coeficiente de correlacin.
Miscelnea
a)
b)
c)
d)
e)
240
U de Mann-Whitney.
T de Student para muestras apareadas.
Test de Wilcoxon para muestras apareadas.
ANOVA.
Test para el coeficiente de correlacin no paramtrico de Pearson.
Miscelnea
241
Un ensayo clnico que obtiene un resultado (meta) positivo sobre lo que se evala.
Un ensayo clnico que utiliza el test de meta.
Un ensayo clnico randomizado y controlado.
Un estudio que intenta combinar datos de varios ensayos clnicos controlados
aleatorizados.
e) Un ensayo clnico con un significativo nmero de pacientes en el grupo control y
problema.
QUMICA.
487.-Dos caractersticas fundamentales de los medios de cultivo para FIV son pH
y osmolalidad. En cuanto al primero, la escala de pH normalmente utilizada es:
a)
b)
c)
d)
De 0 a 10.
De 0 a 14.
De 1 a 14.
De 1 a 14.
Miscelnea
242
e) De 1 a 10.
125 ml.
375 ml.
12.5 ml.
37.5 ml.
Ninguna de las anteriores es correcta.
Miscelnea
243
pH = pOH = 7.
pH>pOH , pH>7 , pOH<7.
pH>pOH , pH>7 , pOH>7.
pH<pOH , pH<7 , pOH>7.
pH<pOH , pH>7 , pOH<7.
% en peso.
Molaridad (M).
Normalidad (N).
Molalidad (m).
Todas las anteriores.
Cofactores.
Coenzimas.
Holoenzimas.
Apoenzimas.
Coadyuvantes.
Sialoenzimas.
Zimgenos.
Coenzimas.
Catalizadores.
Miscelnea
244
e) Holoenzima.
56 g/100 ml.
560 mg/l.
5,6 g/l.
56 mg/100 ml.
0,560 mg/l.
11,7 M.
0,548 M.
0,1 M.
1,6 M.
Ninguna es correcta.
10 mg.
0,013 mg.
1 mg.
77,3 mg.
1, 66 mg.
Miscelnea
245
RESPUESTAS
CAPTULO 9. MISCELNEA: LEGISLACIN ESPAOLA Y BIOTICA,
BIOESTADSTICA Y QUMICA.
450: e).
La ley 35/1988 indica claramente en su artculo 5 que el donante debe ser mayor de
edad con buen estado psicofsico y en el articulo 2 del Real Decreto 412/1996 aade
adems que los donantes de gametos masculinos deben tener menos de 50 aos no 45
como indica la respuesta c).
Ley 35/1988 de 22 de noviembre. BOE n 284 de 24 de Noviembre de 1988.
Real Decreto 412/1996 de 1 de marzo. BOE n 72 de 23 de marzo de 1999
451: d).
Una mujer que tenga 6 o ms hijos tanto por reproduccin asistida como no asistida,
ser excluida como donantes de gametos, articulo 6 del Real Decreto 412/1996. Las
respuestas a), b), e), no respetan el anonimato de la Ley, y la c) al tener ms de 6 hijos
la invalida.
Ley 35/1988 de 22 de noviembre. BOE n 284 de 24 de Noviembre de 1988.
Real Decreto 412/1996 de 1 de marzo. BOE n 72 de 23 de marzo de 1996
452: c).
Esta mujer, al no conocer los antecedentes familiares por ser adoptada, no debe ser
donante ya que el articulo 6 del Real Decreto 412/1996 refiere que sern excluidos
como donantes los que presente enfermedades genticas hereditarias o congnitas
transmisibles y en este caso no conocemos estos antecedentes. Al no tener marido, no
tiene que dar su consentimiento y los hijos tampoco tienen que darlo. Por la edad s
podra ser donante.
Real Decreto 412/1996 de 1 de marzo. BOE n 72 de 23 de marzo de 1996.
453: c).
La ley 35/88 en su articulo 2 dice que la mujeres que pueden realizarse tcnicas de
Reproduccin asistida tienen que tener mayora de edad y esta paciente con 17 aos
no la tiene. Ley 35/1988 de 22 de noviembre. BOE n 284 de 24 de Noviembre de
1988.
454: d).
La ley 13 de diciembre de 1990 de la Repblica Federal Alemana sobre proteccin de
embriones en el articulo 1 indica que ser sancionado quien emprenda la fecundacin
de un nmero superior de vulos de una mujer al de los vulos que se le pretenden
transferir en un mismo ciclo (Casabona, 1997).
455: d).
Miscelnea
246
456: a).
El apartado 2 del articulo 11 de la Ley 35/1988 indica claramente que no se autoriza
la crioconservacin de vulos con fines de reproduccin asistida, en tanto no haya
suficientes garantas sobre viabilidad de los vulos despus de su descongelacin. La
Comisin Nacional de Reproduccin Humana Asistida en su I informe anual dice que
existen diferentes razones cientficas y tcnicas parciales que aconsejan facilitar ya en
el momento actual la congelacin de ovocitos y tejido ovrico para su autorizacin en
reproduccin humana asistida, pero esto no es suficiente para modificar la ley.
Ley 35/1988 de 22 de noviembre. BOE n 284 de 24 de Noviembre de 1988.
I informe de la Comisin Nacional de Reproduccin Humana. Ministerio de Sanidad
y Consumo. Secretaria General Tcnica. Madrid, 1999
457: c).
El articulo 9 de la Ley 35/1988 indica que no se podr determinar legalmente la
filiacin ni reconocerse efecto o relacin jurdica alguna entre el hijo nacido y el
marido fallecido cuando el material reproductor de ste no se halle en el tero de la
mujer en la fecha de la muerte del varn, no obstante el marido podr consentir en
escritura publica o testamento que su material reproductor podr ser utilizado en los
seis meses siguientes a su muerte.
Ley 35/1988 de 22 de noviembre. BOE n 284 de 24 de Noviembre de 1988.
458: c).
Ser nulo de pleno derecho el contrato por el que se convenga la gestacin con o sin
precio, a cargo de una mujer que renuncie a la filiacin materna en favor del
contratante o de un tercero. La filiacin de los hijos nacidos en este caso ser
determinada por el parto. Articulo 10 de la Ley 35/1988.
Ley 35/1988 de 22 de noviembre. BOE n 284 de 24 de Noviembre de 1988.
459: d).
El articulo 5 del Real Decreto 413/1996 indica que los Bancos podrn distribuir
semen exclusivamente a centros autorizados para la aplicacin de Tcnicas de
reproduccin asistida.
Real Decreto 413/1996 de 1 de marzo BOE n 72 de 23 de marzo de 1996.
460: a).
El articulo 6 de las ley 35/88 dice que toda mujer puede ser receptora o usuaria de las
tcnicas de la presente ley, siempre que haya prestado su consentimiento a la
Miscelnea
247
461: e).
Para cualquier tcnica de Reproduccin asistida se necesita tener unos requisitos
tcnicos y funcionales para obtener la autorizacin y homologacin de los centros.
Real Decreto 413/1996 de 1 de marzo BOE n 72 de 23 de marzo de 1996.
462: d).
El articulo 2 de la Ley 35/1988 indica que la mujer receptora de estas tcnicas podr
pedir que se suspendan en cualquier momento de su realizacin, debiendo atenderse
su peticin. Real Decreto 413/1996 de 1 de marzo BOE n 72 de 23 de marzo de
1996.
463: e).
El articulo 6 de las ley 35/88 dice que toda mujer puede ser receptora o usuaria de las
tcnicas de la presente ley, siempre que haya prestado su consentimiento a la
utilizacin de aquellas de manera libre, consciente, expresa y por escrito. Si estuviera
casada se precisar adems el consentimiento del marido. El articulo 2 de la misma
Ley indica que en mujeres mayores de edad y en buen estado de salud psicofsica, si
la han solicitado y aceptado libre y conscientemente y han sido previas y debidamente
informadas sobre ellas. En el articulo 6 se dice que la mujer que desee utilizar estas
tcnicas de Reproduccin Asistida, deber ser informada de los posibles riesgos para
la descendencia y durante el embarazo derivados de la edad inadecuada.
Real Decreto 413/1996 de 1 de marzo BOE n 72 de 23 de marzo de 1996.
464: b).
En el articulo 8 de la Ley 35/1988 dice: " Ni el marido ni la mujer, cuando hayan
prestado su consentimiento, previa y expresamente a determinada fecundacin con
contribucin de donante o donantes, podrn impugnar la filiacin matrimonial del hijo
nacido por consecuencia de tal fecundacin". " Se considera escrito indubitado a los
efectos previstos en el articulo 49 de la Ley del Registro Civil, el documento
extendido ante el Centro autorizado en el que se refleje el consentimiento a la
fecundacin con contribucin del donante.
Real Decreto 413/1996 de 1 de marzo BOE n 72 de 23 de marzo de 1996.
465: c).
El semen criopreservado de donante y el obtenido para inseminacin artificial o
fecundacin "in vitro" de la pareja del varn, solo podr ser utilizado para fines de
investigacin cuando se haya manifestado conformidad expresa por escrito por parte
del varn.
Real Decreto 413/1996 de 1 de marzo BOE n 72 de 23 de marzo de 1996.
Miscelnea
248
466: e).
En las donantes de gametos femeninos y basndose en la actual imposibilidad de
crioconservacin de los ovocitos donados, se considerar suficiente la negatividad de
la donante en una nica prueba de marcadores VIH. Las mujeres receptoras de una
donacin de ovocitos debern ser especficamente informadas acerca de la limitacin
del estudio de la donante que la imposibilidad de conservacin del gameto femenino
comporta.
Real Decreto 412/1996 de 1 de marzo BOE n 72 de 23 de marzo de 1996.
467: c).
En el RD 413/96 donde se regula los requisitos tcnicos y funcionales precisos para la
autorizacin y homologacin de los centros y servicios sanitarios relacionados con las
tcnicas de reproduccin asistida, dice en su artculo 11.2.a) que, el responsable de la
actividad del centro de FIV, ser un mdico especialista en ginecologa y obstetricia, por
lo que un licenciado en ciencias biomdicas no puede ser el responsable legal de un
laboratorio de FIV y por tanto no puede obtener autorizacin administrativa para su
instalacin. La respuesta e) es falsa, pues no se incluyen muchos temas sobre laboratorio
de reproduccin en el temario de la especialidad de ginecologa y obstetricia.
468: d).
El RD 412/96 establece que el responsable legal de un banco de semen ser un
mdico experto en reproduccin, no obstante diversas Comunidades Autnomas
(Madrid, Catalua) al regular los bancos de semen permiten que el responsable del
banco de semen sea otro licenciado en ciencias biomdicas.
469: d).
En su artculo 18 el Convenio de Biotica del Consejo de Europa establece que
cuando la experimentacin con embriones in vitro est admitida por la ley, sta
deber garantizar una proteccin adecuada del embrin, y adems prohbe la
constitucin de embriones humanos con fines de experimentacin.
470: d).
Los elementos que componen el CI y que se incluyen en su definicin son: uno da CI
a una intervencin si es capaz de actuar, recibe informacin completa, comprende la
informacin, acta voluntariamente y consiente la intervencin. Existen varios tipos
de CI: expreso (oral y escrito), tcito, implcito y presunto. El hecho de que un
tratamiento se haya realizado brillantemente es irrelevante ante una reclamacin por
falta de CI, pudiendo el profesional sanitario ser acusado de un delito de agresin si el
tratamiento se ha realizado sin el CI. El artculo 5 del Convenio de Biotica del
Consejo de Europa establece que una intervencin en el mbito de la sanidad slo
podr efectuarse despus de que la persona afectada haya dado su libre e informado
consentimiento. El principio bsico que sustenta la doctrina del CI ha sido el principio
de autonoma que establece que todo ser humano es el agente moral primario y posee
el derecho a determinar lo que se vaya a hacer en su cuerpo y no puede ser forzado a
aceptar un tratamiento (Blanco, 2000).
Miscelnea
249
471: d).
Los principios fundamentales de la biotica son cuatro: autonoma, beneficencia , no
maleficencia y justicia. El primero y ms importante es el de autonoma que
establece que todo ser humano es el agente moral primario, el responsable de sus
propias decisiones. En principio nadie puede coartar la libertad moral de los
individuos y la primera obligacin moral de todos ellos es realizar su vida de un modo
responsable, respondiendo ante su conciencia de su particular proyecto de vida. Esto
es lo que suele denominarse felicidad, el objetivo vital de cada persona. Por esto
tambin algunos pueden considerar beneficiosos para el logro de ese proyecto de vida
que se han propuesto cosas que para otros pueden no serlo. Dicho de otra forma, la
autonoma define el horizonte de las cosas que son beneficiosas para m, lo que en
biotica se define como beneficencia. Estos dos son los principios en el mbito
privado e intransitivo. Existen otra moralidad que es pblica, y que hace referencia al
principio de igual consideracin y respeto de todos los seres humanos, y esto es lo que
definen los otros dos principios de la biotica el de no maleficencia (respeto a la
integridad fsica de las personas) y justicia (no discriminacin en la vida social)
(Gracia, 1991)
472: d).
El semen podr criopreservarse en el banco de gametos por un plazo mximo de 5
aos.
Ley 35/1988 de 22 de Noviembre sobre tcnicas de reproduccin asistida. Captulo
IV, artculo 11.1.
Real Decreto 413/1996 de 1 de Marzo, por el que establecen los requisitos tcnicos y
funcionales precisos para la autorizacin y homologacin de los centros y servicios
sanitarios relacionados con las tcnicas de reproduccin humana asistida. Captulo II,
artculo 7.
473: a).
Todas son obligatorias a excepcin del cariotipo.
(Real Decreto 412/96 de 1 de Marzo, sobre protocolos obligatorios de estudio de los
donantes y usuarios relacionados con las tcnicas de reproduccin humana asistida.
Captulo I, artculo 4.)
474: e).
La donacin de semen slo ser revocable cuando el donante por esterilidad
sobrevenida, precisara para s los gametos donados, siempre que en la fecha de
revocacin, aquellos se encuentren disponibles. A la revocacin proceder la
devolucin por el donante de los gastos de todo tipo originados al centro receptor.
Ley 35/1988 de 22 de Noviembre sobre tcnicas de reproduccin asistida. Captulo
III, artculo 5.2.
475: c).
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250
La fuerza con que dos variables estn ligadas se mide mediante el coeficiente de
correlacin poblacional, el cual se estima por el coeficiente de correlacin muestral
r. Este coeficiente es un nmero adimensional que no depende de las unidades de
medida, puede oscilar entre 1 y 1. El valor absoluto mide la fuerza de ligazn entre
las variables, cuanto ms se aproxime a 1 1 mayor es la fuerza, en tanto que el
signo indica el tipo (positiva o negativa) de ella. Un r >0 indica que a ms x, ms y; y
un r<0 indica que a ms x, menos y. Cuando r=0, x e y son independientes (relacin
nula). En nuestra pregunta nada sabemos del valor de r, solo que es muy significativo
lo que indica que es muy poco probable que en la poblacin el coeficiente de
correlacin sea r=0 (hiptesis nula). No debe confundirse con correlacin importante
porque el coeficiente de correlacin puede ser pequeo (prximo a 0) y, sin embargo,
ser muy significativo porque se ha estimado en una muestra muy grande (Martn y
Luna, 1989).
476: a).
La sensibilidad de una prueba diagnstica es la proporcin de resultados positivos (en
nuestro caso gestaciones=258) identificados correctamente por la prueba (test
positivo, en nuestro caso alta probabilidad de gestacin; 231), es decir los verdaderos
positivos, 231/258=0,90. Podemos interpretarla de la siguiente manera el 90% de los
embarazos son pronosticados correctamente por esta nueva clasificacin.
Especificidad es la proporcin de resultados negativos ( en nuestro caso no
gestaciones=86) que son identificados correctamente por la prueba (test negativo, en
nuestro caso baja probabilidad de gestacin; 54), es decir proporcin de verdaderos
negativos, 54/86=0,63. Podemos interpretarla de la siguiente manera el 63% de las
transferencias sin embarazo son pronosticados correctamente por la nueva
clasificacin.
477: a).
La informacin ms importante que interesa de una prueba diagnstica es poder saber
la probabilidad con que la nueva clasificacin embrionaria proporciona un pronstico
acertado. El valor predictivo positivo (VPP) es la proporcin de casos con test
positivo (en nuestro caso alta probabilidad de gestacin; 263) que dieron resultado
positivo (gestacin; 231), es decir VPP=231/263=0,88. Podemos interpretarlo as el
88% de las transferencias con alta probabilidad de gestacin quedan embarazadas. El
valor predictivo negativo (VPN) es la proporcin de casos con test negativo (en
nuestro caso baja probabilidad de gestacin; 81) que dieron resultado negativo (no
gestacin; 54), es decir VPN=54/81=0,66. Podemos interpretarla as el 66% de las
transferencias con baja probabilidad de gestacin no dan gestacin.
478: d).
Las curvas ROC (receiver operative curves o curvas de rendimiento diagnstico) se
utilizan para evaluar el comportamiento de una prueba diagnstica cuantitativa (p. ej.
concentracin de espermatozoides o porcentaje de formas normales) en predecir un
resultado dicotmico (frtil/estril, sano/enfermo), a travs de una representacin
grfica con diferentes puntos de corte en todo el rango de resultados observados. Los
pares de puntos corresponden a porcentaje de verdaderos positivos (sensibilidad;
abcisa) y porcentaje de falsos positivos (1-especificidad; ordenada) obtenidos con
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251
479: c).
El anlisis de la varianza de una va es una tcnica estadstica que sirve para realizar
un contraste de hiptesis para varias medias, y por tanto no compara caracteres
cualitativos, que se comparan a travs de porcentajes usando por ejemplo el test de
chi-cuadrado. El anlisis de la varianza se realiza a travs de la comparacin de la
varianza entre grupos con la varianza dentro de grupos, se usa para comparar ms de
dos medias. Como tal, es una generalizacin de la t de Student (que se usa solo para
comparar dos medias) y evita el incremento del error tipo I al comparar varias medias
mediante varias t de Student pues con una sola prueba estadstica se ve si todas las
medias son iguales o por contra hay al menos una que es distinta.
480: c).
Dado que la variable a analizar (dificultad en la biopsia de blastmeras) se mide
mediante una escala ordinal, la comparacin de distribuciones de la dificultad con una
micropipeta u otra ha de hacerse por un mtodo no paramtrico; por tanto la t de
Student y el ANOVA quedan descartados. As mismo, el coeficiente de correlacin de
Spearman (no de Pearson) no es el apropiado, pues sirve para saber si dos variables de
distribucin no normal estn o no asociadas. Por ltimo, decir que como las muestras
son apareadas (medida de la dificultad en dos embriones de igual calidad de una
misma pareja), el test oportuno sera el test de Wilcoxon para muestras apareadas y no
el test de Mann-Whitney que servira para comparar las distribuciones cuando las
muestras son independientes.
481: a).
Una de las aplicaciones del test de Chi-cuadrado es la comparacin de varias
poblaciones o tratamientos (a partir de las correspondientes muestras independientes)
cuando la variable utilizada para la comparacin es de tipo cualitativa. Y este es
nuestro caso. La tabla sobre la que se aplicar el test tendr tres filas (pues hay tres
tratamientos, es decir, catteres de transferencia) y dos columnas (pues la variable de
comparacin tiene dos categoras: gestacin, no gestacin) y como el nmero de
grados de libertad es (n de filas-1)x(n de columnas-1), en nuestro caso tendremos 2
grados de libertad.
482: d).
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252
483: c).
Un ensayo clnico controlado randomizado es un estudio que compara entre si los
resultados obtenidos al aplicar dos o ms tratamientos o intervenciones (uno puede ser
un grupo control sin tratamiento), siendo el mtodo de asignacin de los pacientes a
los grupos aleatorio (random), es decir que todos los sujetos que participen en el
estudio tengan la misma probabilidad de pertenecer a los dos grupos. Este tipo de
estudios son fundamentales para incorporar nuevos medicamentos o actuaciones a la
prctica mdica (Wingo et al., 1996).
484: c).
Se considera un ensayo con distribucin aleatoria (randomizado o aleatorizado)
cuando el mtodo de asignacin de los individuos a las intervenciones de que consta
el ensayo son aleatorios, es decir se pretende que todos los sujetos que participen en el
estudio tengan la misma probabilidad de pertenecer a los dos grupos. Los mtodos de
asignacin aleatoria pueden incluir el uso de tablas de nmeros aleatorios o
equivalentes informticos. Un estudio se denomina cuasi-randomizado cuando utiliza
mtodos de asignacin sujetos a errores, por ejemplo, lanzamiento de monedas al aire
o nmero par-impar ya que el personal que asigna los grupos de tratamiento puede
saber de antemano que tratamiento viene a continuacin, y por consiguiente, puede
decidir la idoneidad de una paciente a entrar en un grupo u otro, tentando al
investigador a intervenir. Adems estos ltimos mtodos no se pueden comprobar ni
reproducir (Wingo et al., 1996).
485: d).
Un meta-anlisis es un estudio que intenta combinar los resultados y datos obtenidos
en varios ensayos clnicos aleatorizados controlados, calculando un estadstico reflejo
de dichos resultados: la odds ratio combinada. Proporciona evidencia cientfica del
mximo nivel para la prctica clnica.
486: e).
Un ensayo clnico a simple ciego es aquel en el que la paciente no sabe a qu grupo
pertenece (control o estudio). Doble ciego es cuando nadie del personal clnico que se
relaciona con el paciente, ni la propia paciente sabe a qu grupo se ha asignado. Y
triple ciego es cuando ni el personal que procesa los datos obtenidos, ni el personal
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253
clnico que se relaciona con el paciente, ni la propia paciente sabe a qu grupos se han
asignado los pacientes.
487: b).
De la relacin pH + pOH = 14 vemos que los valores positivos de pH y pOH estn
limitados a un rango de 0 a 14. Por convenio no se expresan acideces o basicidades
fuera de este rango. Esto no quiere decir que no puedan existir valores de pH o pOH
inferiores a cero o mayores de 14, sino que no suelen utilizarse.
488: d).
La osmolalidad es una medida del n de partculas disueltas que no depende de la
naturaleza de las mismas. Una disolucin de osmolalidad uno, es aquella que tiene un
mol de un no-electrolito (pej.:glucosa) que contiene 6.023 1023 (n de Avogrado) de
partculas disuelto en un Kg de agua. La osmolaridad es un trmino distinto que se
define como un osmol de un no-electrolito en un litro de agua destilada. La
osmolalidad es preferible como unidad de medida al ser un relacin peso/peso,
mientras que la osmolaridad vara por el efecto de la temperatura sobre el volumen del
fluido y del efecto de expansin de volumen por la disolucin del soluto.
489: d).
Cuando preparamos una disolucin de este tipo, una regla de seguridad consiste en
verter siempre las disoluciones sobre el agua, ya que suele liberarse una gran cantidad
de calor que puede causar la vaporizacin de algunas gotas de agua lo que provocara
peligrosas salpicaduras de proceder en orden contrario.
490: a).
M1 V1 = M2 V2
500 ml 0.5M = 2 M V2
V2 = 125ml.
491: b).
La funcin de estas disoluciones es admitir la adicin de pequeas cantidades de
cidos o bases sin que se modifique de forma apreciable el valor de su pH, situacin
que slo se consigue con un cido o una base dbiles y sus conjugados que
proporcionan una reserva cida o una reserva alcalina responsables de neutralizar las
adiciones que slo se consigue o bien con un cido o una base fuerte moderadamente
concentradas en las que la capacidad de amortiguacin depender de la concentracin
inicial del cido o de la base.
492: b).
Teniendo en cuenta que el pH de una disolucin reguladora se puede calcular como
pH = pKa + p Ca/Cb, en condiciones normales la dilucin afectando igual a ambas
concentraciones de cido (Ca) y de base (Cb) no debe modificar la acidez de la
misma. Esto se cumplir siempre que el pH de la disolucin reguladora no sea ni muy
bajo (cido fuerte) o muy alto (base fuerte) o las concentraciones Ca y Cb sean
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493: d).
Teniendo en cuenta la relacin pH + pOH = 14, vemos que la situacin a)
corresponde a la neutralidad y la b) a la de un medio bsico.
494: e).
Todas son unidades de concentracin:
% en peso = g peso soluto/g peso disolucin 100
Molaridad = n moles de soluto/litro de disolucin
Molalidad = nmoles de soluto/ Kg disolvente
Normalidad = n equivalentes qumicos/l de disolucin
495: c).
En una reaccin redox, existe siempre una especie reductora, que se oxida cediendo
electrones a una especie oxidante que, a su vez, se reduce.
496: a).
Algunas enzimas estn en estado inactivo (apoenzima) y necesitan la presencia de un
componente qumico adicional o cofactor para actuar, si dicho cofactor es orgnico y
se une covalentemente a la enzima se denomina grupo prosttico, si es orgnico y no
se une covalentemente se denomina coenzima. Si el cofactor es inorgnico la enzima
se denomina metaloenzima. Una vez que la enzima inactiva se encuentra con su
cofactor esta se activa (holoenzima).
497: b).
Se dice que una enzima es un zimgeno cuando se sintetiza en forma inactiva para
luego activarse en un tiempo y lugar fisiolgicamente apropiado por proteolsis.
498: c).
Una concentracin en % es n de gramos por litro, ej. 100 g/L supone una solucin del
10%. En nuestro caso para obtener una concentracin del 0,56% deberamos aadir
5,6 g/l.
499: c).
Para calcular la Molaridad emplearemos la siguiente frmula Molaridad=(n gr / peso
molecular) / litros; en nuestro caso (0,137 g / 342,3)/ 0,004=0,1M.
500: c).
Como la molaridad es igual a =(n gr / peso molecular) / litros, en nuestro caso
tendremos 0,0036 M= (n gr/278,3)/litro por lo que ngr=0,0036 x 278.3 x 1 litro= 1
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gr. Asi 1 gr en 1 litro sera 3,6 mM, como la pregunta es en un 1 ml la cantidad sera 1
mgr (Henry, 1996).
501: c)
Miscelnea
256
BIBLIOGRAFA.
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