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UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN. Anghy Plido, Paula Ruz, Gina Tejada, Andrs Torres.Toxicidad aguda en semillas de arveja y frjol .

Toxicidad aguda con semillas de arveja (pisun sativum) y frjol


(Phaseolus vulgaris)
Anghy Plido1, Paula Ruz2, Gina Tejada3, Andrs Torres4.
UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN

RESUMEN

ABSTRACT

Para este ensayo se evalu los


efectos
nocivos
de
distintas
concentraciones
de
sustancias
qumicas tales como 2 y 3
sobre semillas de frjol y arveja,
teniendo en cuenta el desarrollo del
hipocotilo y la radcula de las
plntulas en un periodo de 5 das
aproximadamente, basndose el
estudio de la toxicidad segn la
relacin dosis-respuesta, se pudo
establecer que las dosis a las que
fueron sometidas las semillas y las
condiciones de manipulacin y del
ambiente
adems de las
interferencias
con
el
blanco
estipulado para la prctica de
laboratorio, pudo haber modificado el
objetivo principal del estudio, dando
lugar a varias causas de error en el
procedimiento y por lo tanto este
anlisis de toxicidad no obtuvo el
alcance esperado, ya que no se
registr crecimiento significativo del
hipocotilo y la radcula en las
semillas, segn las dosis calculadas.

For this lab the harmful effects of


different concentrations of chemicals
such as 2 and 3 seed bean
and pea was evaluated , taking into
account the development of the
hypocotyl and radicle of seedlings in a
period 9 days or so, based on toxicity
studies depending on the dose response relationship was established
that the doses to which they were
subjected
seeds and
handling
conditions and environment in
addition to the interference with white
stipulated for practice laboratory ,
could have changed the primary
endpoint , leading to several sources
of error in the procedure and
therefore this analysis of toxicity did
not get the expected range, since no
significant growth of the hypocotyl
and radicle was recorded in the seeds
, calculated as the dose .
Palabras clave: concentracin
qumica, efecto nocivo, toxicidad,
hipocotilo, radcula, dosis.

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN. Anghy Plido, Paula Ruz, Gina Tejada, Andrs Torres.Toxicidad aguda en semillas de arveja y frjol .

I.

INTRODUCIN

Un bioensayo de toxicidad permite


evaluar los diferentes efectos agudos
o crnicos que genera una sustancia
qumica sobre un organismo vivo, de
igual
forma
cuantificar
las
concentraciones
letales
de
un
xenobitico en un organismo o
especie en particular, este valor tiene
por nombre Concentracin letal
media (CL50), la cual seala la
concentracin del toxico que causa la
muerte al 50% de la poblacin
experimental al cabo de un tiempo
determinado. Tambin existe una
prueba crnica la cual permite
obtener
la
concentracin-efecto
media (CE50) de la sustancia qumica
utilizada que causa un efecto al 50%
de la poblacin experimental en
determinado tiempo. (Rodrguez y
Esclaps, 1995). En esta prctica se
puede evaluar el efecto toxico de
diferentes
concentraciones
de
sustancias qumicas como 2 y
3 sobre las semillas de arveja y
frijol,
teniendo
en
cuenta
la
elongacin de la radcula y del
hipocotilo de las plntulas al pasar los
das, permitiendo analizar cmo estas
sustancias pueden retardar o inhibir
por completo los procesos de
crecimiento de la radcula o del
hipocotilo. Tambin es til para la
evaluacin de toxicidad en aguas
para consumos humano, aguas
domesticas e industriales, lixiviados
de suelos, lodos, aguas superficiales
y efectos txicos en vegetales.
Por tal razn en esta prctica se
requiere evaluar los efectos fito
txicos de compuestos como 2 y
3 , sobre un organismo vivo, en
este caso sobre semillas de Arveja
(Pisun sativum) y Frijol (Phaseolus
vulgaris), realizando una descripcin

da a da de su apariencia fsica,
crecimiento de las radculas e
hipocotleo y con esto analizar el
efecto que estas sustancias tienen
sobre organismos vivos.
II.
MONTAJE Y
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Se tomaron las sales de Cloruro de
Calcio y Cloruro de Aluminio.
Posteriormente se tomaron cajas de
Petri y se les incorpor al interior
algodn para situar de forma
adecuada 7 (siete) semillas 3 (tres de
frjol y 4 (cuatro) de alverja
dejndolas espaciadas unas de las
otras. El algodn fue humedecido en
las soluciones problema. Por cada
solucin se realizaron tres diluciones
y un solo blanco el cual estaba
embebido en agua.
El ensayo en laboratorio conto con
los siguientes pasos:

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ILUSTRACIN 1. DIAGRAMA DE
FLUJO DE PROCEDIMIENTO

Toallas de papel
Algodn
Pipetas volumtricas
de 1, 2, 5 y 10ml
Pinzas o palillos de
mesa
Bata
Semillas de frijol
Semillas de alverja

6 und
30 g
1 und c/u
1 und
4 und
18 und
24 und

TABLA 2: REACTIVOS ENSAYO DE


BIOTOXICIDAD
REACTIVOS
CONCENTRACIN
MADRE
Cloruro de
2M
Aluminio
( )
Cloruro de
0,96 M
Calcio ( )
TABLA 3: DILUCIN DE
SOLUCIONES
REACTIVOS
DILUCION DE
SOLUCIONES
CONCENTRACIONE
S
Cloruro de
Aluminio
( )
Cloruro de
Calcio ( )

III.
TABLA 1: MATERIALES ENSAYO
DE BIOTOXICIDAD
MATERIALES
CANTIDAD
Cajas de Petri de
6 und
100mm de dimetro
Agua destilada
1litro
Papel de filtro
6 und
Whatman N3 (o
equivalente), 90 mm
de dimetro
Balon aforado de 50
1 und
ml
Beaker 500ml
1 und

0,02M
(1%)

0,14M
(7%)

0,18M
(9%)

0,288
M
(30%)

0.38M
(40%)

0.48M
(50%)

RESULTADOS

Segn las preparaciones de los


diferentes
porcentajes
de
las
soluciones y la concentracin de
y se pudieron obtener
los siguientes clculos:
%
x mL

0.01 = 50 mL sln x mL =
50 mL sln 0.01 = ,
%
C1 V1 = C2 V2

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2M 0.5mL = C2 50mL
. =

%
x mL

0.07 = 50 mL sln x mL =
50 mL sln 0.07 = 3,5 mL
%
C1 V1 = C2 V2
2M 3.5mL = C2 50mL
. =

%
x mL

%
x mL

0.09 = 50 mL sln x mL =
50 mL sln 0.09 = 4,5 mL

PREPARACIN DE
m
d=
v
2,15g
xg
=
mL
50 mL sln
m = d. v
2,15g
m=
50mL = ,
mL
1 mol
107,5g
= 0,96 moles
110,986g
0.96moles
= ,
L
%

x mL

0.3 = 50 mL sln x mL =
50 mL sln 0.3 = 15 mL
%
C1 V1 = C2 V2
0.96M 15mL = C2 50mL
. =

0.5 = 50 mL sln x mL =
50 mL sln 0.5 = 25 mL
%
C1 V1 = C2 V2
0.96M 25mL = C2 50mL
. =
GRAFICA 1. DOSIS-RESPUESTA

RESPUESTA crecimiento semillas (mm)

%
C1 V1 = C2 V2
2M 4.5mL = C2 50mL
. =

x mL

0.4 = 50 mL sln x mL =
50 mL sln 0.4 = 20 mL
%
C1 V1 = C2 V2
0.96M 20mL = C2 50mL
. =

3,5
3

respuesta
PROMEDIO
CRECIMIENTO
ARVEJA

2,5
2
1,5

respuesta
PROMEDIO
CRECIMIENTO
FRIJOL

1
0,5
0
dosis CaCl2 a
0,288 M

CaCl2 a 0,38 M CaCl2 a 0,48 M

la grfica 1; muestra que el ndice


de crecimiento del frjol se estanc a
partir del tercer da, esta situacin
pudo estar influenciada por las
condiciones de manipulacin y la
poca luminiscencia entre otros
motivos causales de esta reaccin,
como por ejemplo, la temperatura
ambiente en los laboratorios donde
se realizaron las pruebas y la falta de
hidratacin debido a que las semillas
se
expusieron
a
diferentes
concentraciones de sales en este
caso especfico CaCl2, este tipo de

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN. Anghy Plido, Paula Ruz, Gina Tejada, Andrs Torres.Toxicidad aguda en semillas de arveja y frjol .

factores suponen que pueden ser la


causa de inhibicin en el crecimiento
de las semillas.

RESPUESTA crecimiento semillas (mm)

GRAFICA 2. DOSIS-RESPUESTA

Tablas de datos estadsticos de la


biotoxicidad en las semillas de
alverja y frjol y su impacto en el
crecimiento en milmetros de
hipocotilos y las radculas durante
una semana de observacin

2,5
2
respuesta
promedio
crecimiento
arveja

1,5
1

respuesta
promedio
crecimiento
frjol

0,5
0

DATOS
ESTADISTICOS
BIOTOXICIDAD
CON AlCl3 a
0,02 M

dosis dosis dosis


AlCl3 a AlCl3 a AlCl3 a
0,02 M 0,14 M 0,18 M

la grfica 2; muestra que el ndice


de crecimiento de la arveja se
estanc a partir del cuarto da, esta
situacin pudo estar influenciada por
las condiciones de manipulacin y la
poca luminiscencia entre otros
motivos causales de esta reaccin,
como por ejemplo, la temperatura
ambiente en los laboratorios donde
se realizaron las pruebas y la falta de
hidratacin debido a que las semillas
se
expusieron
a
diferentes
concentraciones de sales en este
caso especfico AlCl3, este tipo de
factores suponen que pueden ser la
causa de inhibicin en el crecimiento
de las semillas.

DATOS
ESTADISTICOS
BIOTOXICIDAD
CON AlCl3 a
0,14 M

DATOS
ESTADISTICOS
BIOTOXICIDAD
CON AlCl3 a
0,18 M

PROMEDIO CRECIMIENTO
PLANTULA EN ORGANISMO
ARVEJA AlCl3 a 0,02 M

0,25

DESVIACIN E. CRECIMIENTO
PLANTULA EN ORGANISMO
ARVEJA AlCl3 a 0,02 M

0,50

PROMEDIO CRECIMIENTO
PLANTULA EN ORGANISMO
FRIJOL AlCl3 a 0,02 M

0,33

DESVIACIN E. CRECIMIENTO
PLANTULA EN ORGANISMO
FRIJOL AlCl3 a 0,02 M

0,58

PROMEDIO CRECIMIENTO
PLANTULA EN ORGANISMO
ARVEJA AlCl3 a 0,14 M

2,00

DESVIACIN E. CRECIMIENTO
PLANTULA EN ORGANISMO
ARVEJA AlCl3 a 0,14 M

1,41

PROMEDIO CRECIMIENTO
PLANTULA EN ORGANISMO
FRIJOL AlCl3 a 0,14 M

0,67

DESVIACIN E. CRECIMIENTO
PLANTULA EN ORGANISMO
FRIJOL AlCl3 a 0,14 M

1,15

PROMEDIO CRECIMIENTO
PLANTULA EN ORGANISMO
ARVEJA AlCl3 a 0,18 M
DESVIACIN E. CRECIMIENTO
PLANTULA EN ORGANISMO
ARVEJA AlCl3 a 0,18 M
PROMEDIO CRECIMIENTO
PLANTULA EN ORGANISMO FRIJOL
AlCl3 a 0,18 M
DESVIACIN E. CRECIMIENTO
PLANTULA EN ORGANISMO FRIJOL
AlCl3 a 0,18 M

2,25
1,5
1
0

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PROMEDIO
CRECIMIENTO PLANTULA
EN ORGANISMO ARVEJA
CaCl2a 0,288 M

0,50

DESVIACIN E.
CRECIMIENTO PLANTULA
EN ORGANISMO ARVEJA
CaCl2 a 0,288 M

0,58

DATOS
ESTADISTICOS
BIOTOXICIDAD
PROMEDIO
CON CaCl2 a
CRECIMIENTO PLANTULA
0,288 M
EN ORGANISMO FRIJOL
CaCl2 a 0,288 M

DESVIACIN E.
CRECIMIENTO PLANTULA
EN ORGANISMO FRIJOL
CaCl2 a 0,288 M

DATOS
ESTADISTICOS
BIOTOXICIDAD
CON CaCl2 a
0,38 M

DATOS
ESTADISTICOS
BIOTOXICIDAD
CON CaCl2 a
0,48 M

PROMEDIO
CRECIMIENTO
PLANTULA EN
ORGANISMO ARVEJA
CaCl2 a 0,38 M
DESVIACIN E.
CRECIMIENTO
PLANTULA EN
ORGANISMO ARVEJA
CaCl2 a 0,38 M
PROMEDIO
CRECIMIENTO
PLANTULA EN
ORGANISMO FRIJOL
CaCl2 a 0,38 M
DESVIACIN E.
CRECIMIENTO
PLANTULA EN
ORGANISMO FRIJOL
CaCl2 a 0,38 M

PROMEDIO
CRECIMIENTO
PLANTULA EN
ORGANISMO ARVEJA
CaCl2 a 0,48 M
DESVIACIN E.
CRECIMIENTO
PLANTULA EN
ORGANISMO ARVEJA
CaCl2 a 0,48 M
PROMEDIO
CRECIMIENTO
PLANTULA EN
ORGANISMO FRIJOL
CaCl2 a 0,48 M
DESVIACIN E.
CRECIMIENTO
PLANTULA EN
ORGANISMO FRIJOL
CaCl2 a 0,48 M

0,33

0,58

0,75

0,96

3,33

2,89

1,75

0,96

IV.

DISCUSIN

Los principales factores abiticos que


limitan la germinacin de las semillas
se encuentran la temperatura, el
oxgeno, la cantidad de agua, la
acidez y la salinidad del suelo, estos
factores ambintales causan estrs
en las semillas inhibiendo su
actividad metablica, como se
observa en los resultados el efecto de
cloruro de calcio y el de cloruro de
aluminio
a
sus
diferentes
concentraciones fue la inhibicin del
crecimiento de ambas
semillas
(arveja y frijol ), sin embargo no
podemos argumentar que estos dos
compuestos fueron los factores
limitantes de su toxicidad debido a
que la muestra en blanco tampoco
germino. Siendo una de la causa las
condiciones ambientales que se
presentan en el laboratorio una como
por ejemplo la Luminosidad,
el
laboratorio pudo estar en tiempos
prolongados de oscuridad afectando
su desarrollo. Otra importante a
considerar es la temperatura pero
segn la literatura revisada las
temperaturas
mnimas
de
germinacin del frijol y de arveja es
de 10C (Gabriel Maria).
El efecto del cloruro de calcio
(CaCL2)
hasta
ciertas
concentraciones en las semillas
tienen un efecto positivo ya que en
las
membranas de las clulas
necesitan de estos iones para su
fortalecimiento incluso encontrndose
en fertilizantes agrcolas (Barrial H.
bioprocesos).
Segn (Barrial H.
bioprocesos)
la
concentracin
limitante para la germinacin de
semillas de juncus es de 10mM de
CaCL2, a partir de 20mM de CaCL2
su germinacin se ve afectada
drsticamente inhibiendo totalmente

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el crecimiento, estas sales afectan la


germinacin de las plantas debido
toxicidad de los iones, cambios en el
PH y reduccin del potencial de agua
( Mitsu Y.). Se puede observar en los
resultados que las semillas se
sacaron mostrndose arrugadas y sin
contenido de agua en ellas debido al
efecto de salinizacin del cloruro de
calcio.
El cloruro de aluminio (AlCl3) est
directamente relacionado con la
acidificacin del suelo, siendo un
parmetro
limitante
para
el
crecimiento vegetal, el aluminio tiene
su efecto directamente en el ncleo,
la divisin celular y la dinmica del
citoesqueleto (Idioleydis A), segn la
literatura a una concentracin de
30mol/L ya es toxica para la semilla
afectando la longitud de la radcula
(Idioleydis A).

V.

Conclusiones

No se diferenci el efecto del cloruro


de aluminio y el de cloruro de calcio
ya que ninguna semilla mostro un
grado considerable de crecimiento y
por qu la muestra en blanco
tampoco germino, se analiz los
posibles efectos que pueden tener
estos qumicos al estar presentes en
altas concentraciones en las semillas
siendo segn la literatura consultada
el de la inhibicin de su crecimiento
debido a la reduccin del potencial
del agua en el caso del cloruro de
calcio, y en el caso del cloruro de
aluminio su efecto en la facilidad que
tiene al entrar en el ncleo e inhibir la
divisin celular.

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Bibliografa

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APNDICE

Tablas de datos estadsticos (PROMEDIO Y DESVIACIN ESTNDAR) de la


biotoxicidad en las semillas de alverja y frjol y su impacto en el crecimiento
en milmetros de hipocotilos y las radculas durante una semana de
observacin

PRODUCTO

DIA

AlCl3

AlCl3

CONCENTRACIN

ORGANISMO

LONG.
HIPOCOTILO
mm

LONG.
RADICULA
mm

0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M

Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3
Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3
Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3
Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3

0
0
0
0
0
0
0
3
2
1
0
1
0
0
3
1
1
1
1
1
1
0
1
0
0
0
1
0

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN. Anghy Plido, Paula Ruz, Gina Tejada, Andrs Torres.Toxicidad aguda en semillas de arveja y frjol .

AlCl3

AlCl3

0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M

Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3
Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3
Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3
Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3
Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3
Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2

3
3
2
0
2
0
0
3
2
1
1
1
1
1
0
1
0
0
0
1
0
3
3
2
0
2
0
0
4
3
1
1
1
1
1
0
1
0
0
0
1

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN. Anghy Plido, Paula Ruz, Gina Tejada, Andrs Torres.Toxicidad aguda en semillas de arveja y frjol .

AlCl3

0,02 M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,02 M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,14M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M
0,18 M

Frijol 3
Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3
Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3
Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3
Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3
Arveja 1
Arveja 2
Arveja 3
Arveja 4
Frijol 1
Frijol 2
Frijol 3

0
3
3
2
0
2
0
0
4
3
1
1
1
1
1
0
1
0
0
0
1
0
3
3
2
0
2
0
0
4
3
1
1
1
1
1

0
0
0
0
0
0
0
0
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UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN. Anghy Plido, Paula Ruz, Gina Tejada, Andrs Torres.Toxicidad aguda en semillas de arveja y frjol .

PRODUCTO

DIA

CaCl2

CaCl2

CONCENTRACIN

ORGANISMO

LONG.
HIPOCOTILO
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RADICULA
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UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN. Anghy Plido, Paula Ruz, Gina Tejada, Andrs Torres.Toxicidad aguda en semillas de arveja y frjol .

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UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN. Anghy Plido, Paula Ruz, Gina Tejada, Andrs Torres.Toxicidad aguda en semillas de arveja y frjol .

REGISTRO FOTOGRFICO
DIA 1

OBSERVACINES: NO SE PRESENTA CRECIMIENTO, SE OBSERVA DESHIDRATACIN Y PRDIDA DE


COLOR

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN. Anghy Plido, Paula Ruz, Gina Tejada, Andrs Torres.Toxicidad aguda en semillas de arveja y frjol .

DIA 2

OBSERVACINES: SE PRESENTA CRECIMIENTO EN UNA SEMILLA DE ALVERJA CON 9% DE AlCl3, SE


OBSERVA DESHIDRATACIN Y PRDIDA DE COLOR POR CAUSA DE LAS SOLUCIONES DE LAS SALES.

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN. Anghy Plido, Paula Ruz, Gina Tejada, Andrs Torres.Toxicidad aguda en semillas de arveja y frjol .

DIA 3

OBSERVACINES: SE PRESENTA CRECIMIENTO EN UNA SEMILLA DE FRJOL CON 40% DE CaCl2, SE


OBSERVA DESHIDRATACIN Y PRDIDA DE COLOR POR CAUSA DE LAS SOLUCIONES DE LAS SALES.

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN. Anghy Plido, Paula Ruz, Gina Tejada, Andrs Torres.Toxicidad aguda en semillas de arveja y frjol .

DIA 4

OBSERVACINES: SE PRESENTA INHIBICIN EN CRECIMIENTO DE SEMILLAS DE FRJOL Y ALVERJA,


SE OBSERVA DESHIDRATACIN Y PRDIDA DE COLOR POR CAUSA DE LAS SOLUCIONES DE LAS
SALES.

UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN. Anghy Plido, Paula Ruz, Gina Tejada, Andrs Torres.Toxicidad aguda en semillas de arveja y frjol .

DIA 5

OBSERVACINES: SE PRESENTA INHIBICIN EN CRECIMIENTO DE SEMILLAS DE FRJOL Y ALVERJA,


SE OBSERVA DESHIDRATACIN Y PRDIDA DE COLOR POR CAUSA DE LAS SOLUCIONES DE LAS
SALES.

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