Professional Documents
Culture Documents
UNIDAD VI
Espectrofotometra
Qumica analtica
La espectrofotometra
materia.
Radiacin Electromagntica
muy altas.
Qumica analtica
Qumica analtica
Unidades de longitud de onda () para algunas regiones del espectro elctromagntico
Regin
Unidad
Definicin
Rayos X
Angstrom ()
10-10 m
Ultravioleta visible
Nanmetros (nm)
10-9 m
Infrarrojo
Micrometros (m)
10 -6 m
Frecuencia ( )
Velocidad ( V )
Amplitud
Campo elctrico
Campo Magntico
Reflexin
Qumica analtica
B) Propiedades de partculas:
Cuando una muestra absorbe radiacin electromagntica experimenta un cambio de energa.
E h. h
h.c.v
Qumica analtica
En espectrofotometra
Reflexin, refraccin,
dispersin, interferencia
y difraccin.
Las interacciones
ms importantes
son las que dan lugar a
Transiciones electrnicas,
Vibracionales y rotacionales
en especies moleculares o
Iones poliatmicos
Normalmente
no implican
transiciones
entre diferentes
niveles de energa.
Transiciones electrnicas
en especies atmicas
Qumica analtica
TRANSICIONES ENERGTICAS
Una molcula lineal de n
tomos puede girar
alrededor de 2 ejes y
tiene 3n-5 modos
vibracionales
Qumica analtica
Na: (1S2)(2S2)(2P6)(3S1)
4p
3d
330,0 nm
4S
Energa
3p
589,0 nm
3S
Qumica analtica
Molcula del N2 (N N)
Qumica analtica
Qumica analtica
ESPECIES
MOLECULARES
Transiciones
electrnicas
puras
Transiciones
electrnicas,
vibracionales
y rotacionales
simultneas
Qumica analtica
MEDICIN DE LOS FOTONES COMO SEAL
Muestra
Energa calorfica
Electricidad
Radiacin electromagntica
Reaccin qumica
El analito est
predominantemente
en su estado ms
bajo de energa
o estado fundamental
Espectrofotometra de
emisin
Espectrofotometra de
absorcin
Espectrofotometra de
fotoluminiscencia
Resultado
Se induce alguna (s)
Transicin (s) del analito
presente en la muestra por
ganancia de un cantidad
de energa.
La radiacin
electromagntica emitida
La radiacin
electromagntica absorbida
La radiacin electromagntica
luminiscente
Para obtener
informacin que
permita cuantificar al
analito se puede
medir
Qumica analtica
Espectrofotometra de emisin
E2,1
1
Muestra
E1,0
E2,0
Energa trmica
Energa elctrica
Energa Qumica
0
Excitacin por la energa
absorbida
Espectro de Emisin
Radiacin
electromagntica
emitida, P
Energa
no radiante
2 ,0
1,0
2,1
Qumica analtica
Espectrofotometra de absorcin
Radiacin
Muestra
electromagntica
incidente
Po
Radiacin
electromagntica
transmitida
muestra
E2
1
E1
0
Se mide la radiacin electromagntica
absorbida
Longitud de onda
Qumica analtica
Radiacin
electromagntica
transmitida
Muestra
muestra
Po (1)
Radiacin
electromagntica
emitida
(1)
PL (2)
2 > 1
Luminiscencia
2
1
Energa no radiante
0
Radiacin absorbida
para excitarse
Radiacin emitida
(luminiscencia) que se
mide
Qumica analtica
Qumica analtica
Frecuencias caractersticas
de absorcin infrarroja
m = moderada
v = variable
Modos de vibracin
de una molcula
Qumica analtica
N de onda (cm-1) = 1 / (cm)
1-octeno
Bromuro de isopropilo
n-butilbenceno
Qumica analtica
Alcohol secbutilico
Alcohol benclico
Qumica analtica
cido proponico
cido o-tolico
Qumica analtica
n-butiraldehido
Acetofenona
Qumica analtica
Isobutilamina
n-metilanilina
Qumica analtica
Acetato de
metilo
benzamida
Qumica analtica
Di-n-propileter
Fenil-etil-eter
Qumica analtica
Radiacin
Transicin
(nm)
electromagntica
Ejemplo
<200
UV
100-260
UV
200-500
UV o Visible
250-600
UV o Visible
CH3NO2 ; CH3COOH;
C4H9NO ( n-butil-nitroso)
La presencia de grupos Cromforos (-NH2 ; -OH; C=O) en las molculas hacen que la
absorcin se desplace a la regin visible de la radiacin electromagntica.
Qumica analtica
A) Los iones complejos coloreados de los metales de transicin como Ej: Fe,
Cu, Cr, Mn, Zn, V, TI, Cd, etc, son coloreados, debido a que el ion metlico
absorbe radiacin de la zona viisible, dando lugar a las transiciones
electrnicas de los electrones de valencia en los orbitales d.
dz2
dx2-y2
ION METLICO
LIBRE
dxy
dxz
dyz
ION COMPLEJO
Qumica analtica
400
500
700
(nm)
Complejo Fe(Fen)3+2
(rojo)
350
Absorbancia
Absorbancia
Absorbancia
Azul de Bromotimol
(verde)
750
(nm)
380
580
620
Sulfato Cprico
(azul)
(nm)
730
Qumica analtica
Qumica analtica
Disolucin
Po
Transmitancia
(T)
Absorbancia
(A)
P
Po
%T
P
*100
Po
Qumica analtica
Ley de la absorcin
Ley de Beer
A=a.b.C
C (Unidades fsicas)
A=.b.C
C (Molaridad)
c=Concentracin (mg/L)
= Absortividad molar (L/mol . cm)
Ideal
A=a.b.c
y=mx
A
Pendiente = a.b
a partir de la pendiente .
Conc.
a ( absortividad )
Qumica analtica
Absortividad molar ()
en soluciones
diluidas es
constante
[]
Qumica analtica
Qumica analtica
Absorbancia
Forma GRFICA
A = Absorbancia de la muestra
C = Concentracin de la muestra
Concentracin patrones
Forma ANALITICA
Para encontrar la concentracin del analito en las muestras se puede utilizar el
mtodo de los mnimos cuadrados para deducir la ecuacin de la lnea recta.
Asignando los datos de las concentraciones de las soluciones patrn al eje X y
sus respectivas absorbancias al eje Y, se encuentran los valores de la pendiente
(b) y del intercepto (a):
Al establecer la ecuacin de la lnea recta, se puede calcular la concentracin
del analito en cualquier muestra, a la cual se le haya medido su absorbancia:
Y =
absorbancia
+ bX
concentracin
X = Y-a
b
Qumica analtica
La ley de Beer y muestras con mltiples componentes:
Atotal
i n
A
i 1
A1 A2 A3 An
Qumica analtica
-4
-3
1.2
1.2
Absorbancia
Absorbancia
1.4
Absorbancia
Absorbancia
1.4
0.8
0.6
0.4
0.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
380
400
420
440
460
480
500
520
Longitud
Longitud de de
Onda onda
(nm)
540
560
580
600
380
400
420
440
460
480
500
520
540
560
580
600
Longitud de Ondade
(nm) onda
Longitud
K2Cr2O7 y KMnO4
Absorbancia
1.5
Cr2O72- 470 nm
1
KMnO4 515 nm
0.5
0
407
457
507
557
607
Qumica analtica
La Fuente
Produce
radiacin en
la regin de
inters. Debe
ser estable y
reproducible.
En
muchos
casos
la
fuente puede
emitir ms de
un
Lentes/ El
rendijas/ monocromador La muestra
en su
colimado (selector de
compartimien
res afinanlongitudes de
y alinean onda) dispersa la to absorbe
el haz
radiacin incidenteuna cantidad
en un continuo de caracterstica
componentes de de cada
longitud de
longitudes de
onda examinados onda
o seleccionados incidente
individualmente
El detector
convierte la
radiacin
transmitida
en una
seal
elctrica
amplificada
La
computad
ora
convierte la
seal en
datos
visuales
Qumica analtica
Qumica analtica
Qumica analtica
Qumica analtica
1.024
diodos
Qumica analtica
Fuente
Utilidad
Lmpara de H2 y D2
Fuente continua
160-380 nm
Absorcin molecular UV
Lmpara de tungsteno
Fuente continua
320-2400 nm
Lmpara de tungstenohalgeno
Fuente continua
240-2500 nm
Lser
Fuente Lineal
UV- Visible
Qumica analtica
2.- Selector de longitud de onda
Permite el paso de una estrecha banda de radiacin caracterizada por una longitud de onda
nominal, una amplitud de banda efectiva y una cantidad mxima de radiacin.
Espectrofotmetros
30-250 nm
Interferencia
10-20 nm
Qumica analtica
Rejilla de
difraccin
Rendija de
entrada
b) Prismas
Rendija de
Salida
La que sale de un
monocromador puede
variar en forma
continua en un gran
intervalo del espectro.
Qumica analtica
Celdas estndar y
con abertura
Microcelda y
celda de flujo
Material de la celda
Regin de trabajo
Caractersticas
Visible
UV- Visible
Alto costo
Qumica analtica
4.- Detectores: Son transductores o dispositivos que convierten los fotones en una
seal elctrica.
Rango de
Seal emitida
200-1000 nm
Corriente
Fotomultiplicadores 110-1000 nm
Corriente
Diodos
Corriente
Fototubos
Detectores de fotones
200-1000 nm
Estos detectores poseen una superficie fotosensible que absorbe radiacin UVVisible, produciendo una corriente elctrica proporcional al # de fotones que llegan
al transductor.
Qumica analtica
Qumica analtica
Aplicaciones
Los analitos que no absorben en la regin visible pueden determinarse, hacindolos
reaccionar con cromforos (reactivos especficos), a fin de obtener productos que s absorben.
Analito
Mtodo
(nm)
Aluminio
535
Arsnico
Reducido a AsH3 con Zn y hacerlo reaccionar con dietilditiocarbamato para producir un complejo
rojo.
535
Cromo
Oxidar a Cr(VI) y hacer reaccionar con difenilcarbazina en disolucin cida, para obtener un
complejo rojo-violeta.
540
Mercurio
Extraccin con CHCl3 despus de acomplejar con ditizona a pH cido; complejo naranjado.
492
Cinc
520
Cloro residual
592
Nitrato
Reduccin a NO2- por Cd. Se forma un colorante azo por reaccin con sulfanilamida y N-(1-naftil).
etilendiamina.
543
Fosfato
Reaccin con molibdato amnico seguida de reduccin con cloruro de estao para formar azul de
molibdeno.
690
Fenol
460
Surfactantes
Formacin de par inico azul entre el surfactante aninico y el colorante catinico azul de
metileno, que se extrae en CHCl3.
652
Qumica analtica
Qumica analtica
tomos gaseosos
Radiacin
Radiacin
Electromagntica
incidente
(Po)
Electromagntica
transmitida
Estado
fundamental
Estado
excitado
E. Calorfica
o
(P)
Seal: absorbancia
Radiacin
E. electrca
Estado
fundamental
Estado
excitado
Electromagntica
emitida
Decaimiento
(P)
Seal: intensidad
de emisin
Qumica analtica
Na: (1S2)(2S2)(2P6)(3S1)
4p
3d
E = 330,0 nm
4S
Energa
3p
E = 589,0 nm
3S
Qumica analtica
Qumica analtica
Espectro de
lneas atmicas
Qumica analtica
Qumica analtica
Qumica analtica
2.4
Qumica analtica
Fuente de energa
para atomizar
Cantidad
medida
Esp. de absorcin
atmica con llama
llama
1700-3200 C
radiacin
absorbida
Esp. de absorcin
atmica electrotrmica
horno elctrico
1200-3000 C
radiacin
absorbida
Esp. de emisin
atmica con llama
Esp. de emisin
Atmica con plasma
acoplado inductivamente
llama
1700 3200 C
radiacin
emitida
plasma de argn
6000 8000 C
radiacin
emitida
Qumica analtica
Qumica analtica
P
(llama)
Qumica analtica
ESPECTROFOTMETRO DE ABSORCIN
ATMICA CON LLAMA
Qumica analtica
Al
Qumica analtica
La muestra es succionada
continuamente
M+ + A--
Iones en solucin
1) Nebulizacin
M+ + A--
2) Desolvatacin
MA(s)
3) Liquefaccin
MA(l)
Sal lquida
4) Vaporizacin
MA(g)
Sal gaseosa
5) Atomizacin
Mo + A o
6) Absorcin de
radiacin
continua
Iones en aerosol
Sal slida
tomos gaseosos
Radiacin
M*
Qumica analtica
Qumica analtica
Oxidante
Aire
xido nitroso
Oxgeno
Temperatura (C)
2.400
2.800
3.150
Hidrgeno
Aire
2.050
Propano
Aire
1.950
Qumica analtica
Instrumentacin
Espectrofotmetro de
absorcin atmica
con horno de grafito
La muestra es
Inyectada con
una micro jeringa
Qumica analtica
Secuencia de calentamiento
1) Ciclo de secado: ~ 110 C
Ocurre la evaporacin del solvente y
componentes voltiles de la matriz.
2) Ciclo de calcinacin: 200 1.500 C
Volatilizacin de los componentes menos
voltiles y pirolisis de algunas sustancias.
3) Ciclo de atomizacin: 2.000 2.500 C
Generacin de tomos neutros gaseosos
que absorben radiacin.
4) Ciclo de limpieza: 2.700 3.000 C
Desalojo del tubo de grafito de
residuos de analito y muestra.
3000
2500
Temp. (C)
2
1000
500
1
Se obtienen seales
de absorbancia
discontinuas
0
Tiempo (s)
Qumica analtica
Abs.
Abs.
solvente
solvente
tiempo
Llama
3 inyecciones
Horno de grafito
A = abC
Altura de
pico
Absorbancia
Concentracin
Llama
Ley de Beer :
Concentracin
Horno de grafito
Qumica analtica
Tipos de
Interferencias
Matriz*
Qumicas*
Componentes que
reaccionan con analito
Efectos causados
Mtodos de correcciones
Modifica Velocidad de
Aspiracin y la eficiencia de
la nebulizacin
Ionizacin*
Absorcin de
fondo
Qumica analtica
LCH
LCD
LCH
LCD
Electrnicamente
Qumica analtica
Intensidad de
la radiacin
de la lmpara
de ctodo
hueco
(LCH)
-0,02
0 +0,02
Qumica analtica
Ley de Beer :
A = abC
Absorbancia
Concentracin
Qumica analtica
Muestra+
agua
Muestra+
Patrn 1
Muestra+
Patrn 2
d
Muestra+
Patrn 3
Qumica analtica
Vaso
Conc (mg/L)
Absorbancia
AM
Patrn 1
AMP1
Patrn 2
AMP2
Patrn 3
AMP3
Llama
mg/L
> 5 mL
1 2 % DER
menor
moderado
Horno de grafito
g/L
5 100 L
5 10 % DER
mayor
alto
Qumica analtica
Qumica analtica
Mtodos comunes
utilizados para la
generacin de
tomos gaseosos
excitados.
Atomizacin + excitacin
Qumica analtica
llama
MA(s)
2) Liquefaccin
MA(l)
3) Vaporizacin
MA(g)
4) Atomizacin
Mo + Ao
5) Excitacin
M*
Mo + Radiacin Emitida
Qumica analtica
Qumica analtica
Qumica analtica
Fuente de plasma
Qumica analtica
Instrumentos
Los ms econmicos son los secuenciales, que miden las intensidades de lnea
una por una, parando el tiempo suficiente (unos pocos segundos) para obtener
una respuesta satisfactoria. Por otra parte los instrumentos multicanal se disean
para medir simultneamente las intensidades de las lneas de emisin de un gran
nmero de elementos ( a veces tantos como 50 o 60).
Qumica analtica
Qumica analtica
Qumica analtica
Qumica analtica
Tratamiento de la muestra
Muestras lquidas
Muestras slidas
Muestras gaseosas