Gentica Clase 1 Solemne II

Clulas Eucariontes
Ciclo clulas proliferativo Dos etapas Interfase y Etapa M
Interfase:
G1: Parte de la generacin de una clula por divisin hasta la fase S
S: Duplicacin del DNA
G2: Parte desde la duplicacin del DNA hasta la etapa de divisin celular
La mayora de las clulas sale del ciclo celular en G1 hacia G0 que se conoce como receso
proliferativo en donde la clula se diferencia y cumple su funcin en algn tejido. La mayora de
las clulas nunca regresa al ciclo aunque pueden ser inducidas a regresar a G1 SLO en cultivos in
vitro. La nica clula que no puede regresar es el eritrocito.
Algunos Conceptos
c Contenido de DNA
n Nmero de Cromosomas (2n quiere decir condicin diploide)
Clula diploide en G1 2n = 46 y 2c
Clula diploide en S 2n = 46 y 4c
Clula en Anafase 4n = 92 y 4c
Los cromosomas slo es posible verlos durante la divisin clulas, principalmente en Metafase
donde observamos cromosomas con dos cromtidas. En esta etapa los cromosomas alcanzan el
mayor estado de condensacin. Por el contrario, en un ncleo interfsico encontramos cromatina y
nuclolo.
El transporte a travs del ncleo se realiza por un complejo de poros que permiten el ingreso de
protenas desde el citosol y que el ncleo enve RNAs al citosol. En una clula normal existe entre
3000 y 4000 complejos de poros.
Nuclolo
El nuclolo sigue siendo cromatina pero se tie distinto por la presencia de muchas protenas
ribosomales. En l se encuentran la mayor parte de los genes para rRNA repetidos en tndem, es
decir, uno al lado del otro repetidos cientos de veces.
A partir de un gen Sintetiza Pre RNA ribosomal Procesa y se corta para dar origen:
rRNA de 28S y 5,8S: subunidad mayor del ribosoma
rRNA de 18S: subunidad menor del ribosoma
El nico rRNA que no se sintetiza en el nuclolo es el rRNA de 5S. En el nuclolo adems, se
ensamblan las subunidades mayor y menor del ribosoma que saldrn del ncleo por los complejos
de poros.
Aquellas clulas secretoras de protenas, tienen un nuclolo grande ya que necesitan grandes
cantidades de ribosomas para cumplir su funcin sintetizadora.
Lmina Nuclear
Malla de subunidades proteicas interconectadas llamadas lamininas nucleares compuesta de
filamentos intermedios. Da forma y estabilidad a la envoltura nuclear, se uno a los complejos de
poro y a las protenas integrales de la membrana interna. Tambien interacta directamente con la
cromatina

El resto de la cromatina:
Heterocromatina: Es cromatina ms compacta, ms condensada, se tie fuertemente y no es
transcripcional (no se expresa).
Heterocromatina Constitutiva: Cromatina sin genes y normalmente existe DNA repetido
(cromatina que constituye a los centrmeros)
Heterocromatina Facultativa: Se pueden encontrar genes que no se estn transcribiendo
como por ejemplo los cuerpos de Barr. Estos genes pueden activarse y volver a la cromatina
Eucromatina (Corpsculo de Barr en Meiosis.
Eucromatina: Cromatina ms laxa, se tie dbilmente y es transcripcional (se expresa). En ella se
encuentran todos los genes que se transcriben en una clula.
Una clula posee alrededor de 2 metros de DNA que debe estar eficientemente empaquetado y
asociado a protenas para formar la cromatina para que de esta forma pueda introducirse en el
ncleo que posee un dimetro de 0,006 mm.
Organizacin de DNA
DNA + Histonas: El DNA se une a un core de Histonas, que corresponde a un octmero, es
decir, 8 histonas, 2 de cada una: H2A, H2B, H3 y H4. El DNA da dos vueltas y media a
cada core de histonas que corresponden aproximadamente a 146 pares de bases. El core de
histonas ms el DNA forma Ncleosoma que posee un dimetro de 11 nm.
DNA Linker o de Unin: DNA que va desde un ncleosoma a otro y esta formado
aproximadamente de 54 pares de bases. La extensin total entre el ncleosoma y el DNA
Linker es de 200 pares de bases.
Histona H1: No forma parte del ncleosoma sino que se asocia al DNA Linker a la salida
del ncleosoma y al hacerlo forma una estructura de 6 ncleosomas que se conoce como
Fibra Solenoide o Solenoidal que posee un dimetro de 30 nm. De esta forma se
encuentra la cromatina en ncleos interfsicos.
Modificacin Post Traduccionales de Histonas: Pueden ser modificadas por metilacin,
acetilacin y fosforilacin, estas modificaciones se relacionan con la existencia de
Eu/Heterocromatina. La acetilacin promueve la expresin gnica, es decir, produce
Eucromatina, mientras que la metilacin o desacetilacin promueven la no expresin
gnica, es decir, producen heterocromatina.
Clula en Divisin: La fibra solenoide se condensa para formar los cromosomas. Esta
condensacin es dirigida por protenas no histnicas que constituyen el Scaffold o
Andamiaje (Sc1 y Sc2 o condensina). Las regiones del genoma que se unen a estas
protenas son ricas en A/T, flanquean genes y a menudo se asocian con sitios ORI. De esta
manera, se forma una fibra de 300 nm de dimetro la cual se vuelve a plegar sobre s misma
para constituir una estructura de 700 nm de dimetro que corresponde a una cromtida de
cada cromosoma.
Como en el periodo S, cada cromosoma tendr dos cromtidas, el ancho promedio de cada
cromosoma es de alrededor de 1400 nm.
El nmero de cromosomas es propio, pero no exclusivo de cada especie. Todos los individuos de
una especie poseen el mismo 2n (mismo nmero cromosmico). Este nmero no es exclusivo,
porque dos o ms especies pueden tener el mismo nmero cromosmico. Lo que s es exclusivo de
cada especie es el Cariotipo, el cual considera el 2n, el tamao y la forma de los cromosomas.

Cromosomas Metafsicos
Siempre se observarn cromosomas con sus cromtidas duplicadas. stos, presentan un
adelgazamiento del cromosoma denominado constriccin primaria que es el lugar donde se ubica
el centrmero. Algunos cromosomas pueden tener una constriccin secundaria llamada satlite.
El largo de los brazos de cada cromtida es determinado por la posicin del centrmero. Por
convencin el brazo P es el pequeo y se orienta hacia arriba y el Q es el brazo largo que se orienta
hacia abajo. Los tipos de cromosomas son:
Metacntricos: P y Q son del mismo largo
Submetacntricos: El brazo P es un poco ms pequeo que Q
Acrocntricos: El brazo P es muy corto con respecto al brazo Q
Telocntricos: El centrmero se ubica en un extremo y no se distingue brazo P
En el cariotipo humano solo encontramos cromosomas metacntricos, submetacntricos y
acrocntricos. El en ratn, en cambio, todos sus cromosomas son telocntricos.
Centrmero
Formado por heterocromatina constitutiva. El DNA de esta zona es altamente repetido y no hay
genes. Existe una secuencia de 170 pares de bases que se repite en tndem hasta abarcar incluso
extensiones de 1 milln de pares de bases dependiendo de la especie. Esta secuencia es rica en A/T.
Telmero
Tambin posee una secuencia repetida en tndem de 2 a 15 kb (en humanos es TTAGGG). En los
pices de los telmeros se evidencia DNA de hebra simple, con la secuencia repetida que adems,
se dobla generando apareamientos ilegtimos entre guaninas. Esto genera una especie de sello para
que las DNAsas citoplasmticas no puedan degradar los cromosomas (en la mitosis, cuando no hay
ncleo). Los telmeros tienen un rol de proteccin en el extremo de los brazos cromosmicos.
Al ocurrir duplicacin del DNA, en el extremo 3 de la hebra retrasada, no existe accin de la
polimerasa ya que requiere de un partidor para comenzar su accin quedando un trozo sin relleno.
Dicho trozo puede ser rellenado por la Telomerasa encargadas de sintetizar los telmeros, alargando
la cadena de modo que quede menos hebra simple libre en los extremos. Esta enzima es muy poco
abundante en las clulas somticas pero abundantes en clulas embrionarias y cancerosas. Cada vez
que una clula somtica se divide, se acortan los telmeros hasta que se vuelven tan cortos que la
clula entra en apoptosis. Por esto se dice que los telmeros tienen que ver con el envejecimiento
celular.
Constitucin de un Cromtida
Telmeros
Regin Subtelomrica Distal: Se encuentra la TTAGGG repetida varias veces pero
comenzando a degenerar.
Regin Subtelomrica Proximal: En algunos cromosomas es posible encontrar genes, como
en el caso del brazo P de los cromosomas 13, 15, 21 y 22.
Secuencia nica: Se hallan regiones de eucromatina y heterocromatina a lo largo de ambos
brazos. Los genes de ubican en orden lineal y siempre en los mismos cromosomas en un
individuo de una especie determinada. Esta secuencia se extiende hasta el centrmero.
Centrmero

Obtencin de Cromosomas
Obtencin de clulas de tejidos que se encuentren en constante divisin (mdula sea).
Muchas veces los cromosomas se obtienen desde antes del nacimiento (Diagnstico
Prenatal a partir de amniocitos (muestra de liquido amnitico a partir de vellosidades
coriales) que es muy riesgoso. Tambin se pueden usar linfocitos del cordn umbilical para
detectar anormalidades cromosmicas. Tambin se puede realizar un anlisis de restos de
abortos espontneos para determinar si fue causado por anomalas cromosmicas.
Cariograma: En seres humanos se hace a partir de linfocitos de sangre perifrica que se
cultiva in vitro. Se toma una muestra de sangre (5ml), se separan los componentes por
centrifugacin, se recolectan los linfocitos y se llevan a cultivos que incluyen un
componente que les induzca a entrar en divisin durante 3 das. Este compuesto se
denomina Fitohematoaglutina.
Para detener la divisin de los linfocitos en metafase se agrega colchicina, que impide la
polimerizacin de los microtbulos con lo que no se forma el huso mittico, y con ello se
evita que la clula pase de metafase.
La colchicina tambin se usa como anti inflamatorio en enfermedades como la Gota,
producida por acumulacin de cristales de cido rico en las articulaciones, generando
inflamacin. Este compuesto destruye los microtbulos de los glbulos blancos para as
impedir que se movilicen y generen inflamacin.
Luego la clulas se coloca en una solucin hipotnica, que las hincha de agua por
osmosis pero evitando que las clulas revienten.
Las clulas se fijan para detener los procesos biolgicos y evitar la descomposicin. Como
fijador se usa una mezcla de metanol cido actico en proporcin 3:1.
Las preparacin se extiende sobre un portaobjetos, las clulas revientan y se utiliza el
colorante Giemsa para observar la plata metafsica al microscopio.
De esta forma se puede construir un Cariograma para determinar si existen anomalas
estructurales o numricas en el cariotipo.
Bandeos Cromosmicos
Bandeo C: Tie esencialmente el centrmero, con lo que se evidencia que el centrmero no
es el mismo en todos los cromosomas sino que esta determinado por el nmero de
repeticiones de la secuencia de 170 kb
Bandeo N: Tie la regin NOR (regin organizadora del nuclolo), en humanos se ubica en
los pares 13, 14, 15, 21 y 22 los cuales presentan satlites.
Bandeo G: Permite la identificacin de cromosomas homlogos, puesto que otorga un
patrn de bandas claras (G/C) y oscuras (A/T) a lo largo del cromosoma. Permite detectar
anomalas numricas. Estos bandeos se realizan mientras la muestra est en el portaobjetos
Orden en el Cariotipo
Grupo A (Cr1 Cr3): 1 y 3 son metacntricos y 2 submetacntrico
Grupo B (Cr4 Cr5): Submetacntricos
Grupo C (Cr6 Cr12): Existen metacntricos y submetacntricos medianos
Grupo D (Cr13 Cr15): Acrocntricos medianos con satlite.
Grupo E (Cr16 Cr18)
Grupo F (Cr19 Cr20)
Grupo G (Cr21 Cr22): Acrocntricos pequeos con satlite.
Par Sexual: X (Grupo C) e Y (grupo G, pero sin satlite)

Hibridacin In Situ Fluorescente (FISH): Permite pintar todos los cromosomas a travs de
fluorforos especficos que dan un color distinto. Es carsimo y no muy resolutivo. Permite
detectar translocaciones.