OBTENCIN DE DISTINTOS TIPOS DE MUESTRAS:

Suero: Se obtiene por coagulacin de la sangre. Se produe a mayor velocidad si

el proceso se realiza a 37 C. Para ello colocaremos el tubo conteniendo la
sangre sin anticoagulante, en un bao termostatado.
La cantidad de suero obtenida por coagulacin espontanea, es a menudo
insuficiente ; por tanto despus de la coagulacin se suele centrifugar durante
5- 10 min. Tras la separacin de coagulo y suero, guardaremos este
perfectamente etiquetado y refrigerado (4-5 C), si se va a tardar ms de 4
horas en utilizarlo lo congelaremos.
Sangre desfibrinada:
Es aquella desprovista de los factores de la coagulacin, para su obtencin se
coloca en un matraz erlenmeyer el mismo nmero de perlas de vidrio que ml
de sangre se vaya a desfibrinar. A continuacin se imprime al matraz un
movimiento de rotacin sobre su base. Al cabo de 2-3 minutos se puede
observar que el ruido que las perlas hacian al chocar contra las paredes del
matraz, deja de oirse, eso se debe a que la fibrina que se va formando en el
proceso de la coagulacin, se deposita sobre ellas, atrapndolas. A partir de
ese momento se prosigue el movimiento rotatorio durante 10 minutos. A partir
de sangre desfibrinada , se puede obtener suero por centrifugacin.
Plasma: Para su obtencin centrifugaremos la sangre entera anticoagulada 3-4
minutoa a 2000-3000 r.p.m. El sobrenadante obtenido es el plasma que al igual
que el suero debe estar transparente, limpio y no contener restos de hemlisis,
a diferencia del suero contiene factores de la coagulacin.
Si queremos plasma libre de plaquetas es necesarios una centrifugacin a ms
velocidad y ms tiempo que la anterior. Al igual que el suero tras la
centrifugacin, separaremos el plasma de los elementos formes sanguneos
para evitar efectos metablicos. En caso de no utilizarlos inmediatamente, lo
conservaremos como el suero.
Suspensiones de hemates: En primer lugar procederemos al lavado de
hemates, para ello mezclaremos la sangre anticoagulada con suero fisiolgico
en un tubo de hemlisis en proporcin 1/5 centrifugaremos 3-4 minutos a
3000rpm, tras lo cual separaremos el sobrenadante con la ayuda de una pipeta
pasteur. Seguidamente aadiremos al tubo de centrifuga suero fisiolgico,
homogenizamos y repetimos el proceso anterior. El lavado finaliza cuando el
sobrenadante aparece limpio y transparente.

A partir de estos hemates lavados, prepararemos las suspensiones mezclando

un determinado volumen de ellos en suero fisiolgico o tampn fosfato.

Muestras desproteinizadas: Generalmente se desproteiniza suero o plasma.

MUESTRAS
An. Quim. Eduardo Ortigoza Medrano
La sangre es el fluido ms utilizado con fines analticos. Para las tcnicas
hematolgicas, es fundamental obtener muestras de sangre adecuadas, atenindose
a una tcnica muy precisa. La tcnica utilizada para la obtencin de muestras de
sangre es fundamental para mantener su integridad; de otra forma los resultados
obtenidos no podrn ser confiables.
Para casi todo el trabajo hematolgico y para muchos anlisis bioqumicos se
requiere sangre sin coagular. Existen numerosos anticoagulantes. La mayor parte
de ellos impiden que el calcio intervenga en la coagulacin, bien sea precipitndolo
como sal ( oxalatos) o fijndolo en forma no ionizada ( citrato y sequestrene). La
heparina acta como agente antitrombnico, o sea, neutraliza la trombina.
Finalmente, puede obtenerse sangre no coagulada (lquida) removiendo la fibrina
que se va formando (sangre desfibrinada) .
El empleo de cristalera cubierta de silicn no impide la coagulacin, sino que la
retrasa impidiendo la activacin del factor XII ( de Hageman ) y la adherencia de
las plaquetas a las paredes del tubo ; en otras palabras, se retrasa la produccin de
tromboplastina. El empleo de cristalera tratada con silicn es indispensable en el
estudio de los trastornos de la coagulacin.