Obtencin de resultados:

El Rf se calcula dividiendo la distancia (mm) recorrida por la banda en cuestin,

entre la distancia recorrida por el colorante azul de bromofenol (u otro punto de
referencia arbitrario).
*Ejemplo: Cuadro 13.1: Determinacin del peso molecular de protenas mediante
SDS-PAGE. Las muestras fueron reducidas con 2-mercaptoetanol, y corridas en
un gel al 12% de concentracin.
Marcador
PM
Distancia (mm)
Rf (vs.70 mm)
________________________________________________________________________
Albmina bovina

66.000

6,5

0,092

Ovalbmina

45.000

13,0

0,186

Gliceraldeh-3-P-DH

36.000

18,0

0,257

Anhidrasa carbnica

29.000

25,0

0,357

Tripsingeno

24.000

28,5

0,407

Inhibidor de tripsina

20.100

38,0

0,543

a-Lactalbmina

14.200

50,0

0,714

*B. Lomonte, 2002. Electroforesis en Gel de Poliacrilamida. Extrado de

http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/lab-bioq-gen/archivos/Lomonte%20%20Cap13%20PAGE.pdf

Discusin:
La velocidad de polimerizacin viene determinada por la concentracin de
persulfato (catalizador) y TEMED (iniciador).
Una electroforesis nativa es la que somete a las protenas a migracin sin
desnaturalizacin. En esta situacin las protenas migran en funcin de su carga,
de su tamao y de su forma. Adems se mantienen en ciertos casos las
interacciones entre subunidades y entre protenas, separndose los complejos.
Los sistemas tampn (buffer) se emplearon en estos caso de 8.6 y un regulador.
SDS es un detergente de accin desnaturalizante que se une a las cadenas
polipeptdicas desnaturalizadas con una realcin de 1.4 g de SDS por g de
protena, unindose aproximadamente una molcula de SDS por cada dos
aminocidos de la cadena. Esta unin masiva de molculas de SDS bloquea la

carga propia de la molcula de protena y le confiere al complejo una carga neta

negativa proporcional a su masa, haciendo que todas las protenas acomplejadas
con SDS viajen hacia el nodo

Conclusin:
La electroforesis es una tcnica muy sensible y puede ser afectada por muchos
errores experimentales, esto se reflej en nuestra prctica.
El empleo de niveles bajos de catalizador provoca que la superficie del gel se
torne desigual y tienda a romperse con facilidad, pero el empleo de altas
concentraciones provoca que los geles tiendan a cuartearse. En este caso el gel
concentrador de nuestra prctica se tard en gelificar por las concentraciones
desiguales del gel concentrador. Por lo que el profesor nos explic cmo se
determina el peso molecular de las protenas de la muestra de leche.
Tambin se comprendi la separacin de las protenas en la electroforesis que es
la migracin de solutos inicos bajo la influencia de un campo elctrico; Estas
partculas migran hacia el ctodo o nodo (electrodos - y +), en dependencia de
una combinacin de su carga, peso molecular y estructura tridimensional.

Bibliografa:
-Lehninger, A. (1994) Principios de Bioquimica. 3rd ed.
-B. Lomonte, 2002. Electroforesis en Gel de Poliacrilamida. Extrado de
http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/lab-bioq-gen/archivos/Lomonte%20%20Cap13%20PAGE.pdf
-Campell MK. Bioquimica. 2 ed. Saunders:1995.