UNJFSC

INGENIERA AMBIENTAL

BIOQUMICA

PRACTICA N 02
INFORME DE LABORATORIO:
HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

DOCENTE

Lic. Hctor H. Toledo Acosta.

INTEGRANTES

Dmazo Glvez, Lizbeth N.

Martnez Gil, Fiorella
Ogura Esteban, Josselyn
Medina Quiroz, Mishell
Taipe Arone, Fortunato
Bulln Guzmn, Danny
Gonzales Chvez, Frank
Lucas Romn, Virna

E.A.P.

INGENIERA AMBIENTAL

GRUPO

II.

FECHA

13 de Mayo del 2014.

HUACHO - PER
2014

HIDRLISIS DEL ALMIDN POR LA AMILASA SALIVAL

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BIOQUMICA

1. RESUMEN
En el presente informe se da conocer los resultados de la Segunda Sesin de
laboratorio de Bioqumica, la cual trata acerca de la HIDRLISIS DEL ALMIDN

POR LA AMILASA SALIVAL.

Para estudiar la hidrlisis del almidn (desdoblamiento), por accin de la amilasa,
se aprovechara el hecho de que el lugol (especficamente el yodo que contiene el
lugol), se incorpore a la fraccin helicoidal del almidn dando un color azul y a
medida que la hidrlisis progresa, el color azul va desapareciendo y cambia a rojizo
o caf claro. La baja temperatura inhibe el proceso hasta ser capaz de detenerlo.
Un pH muy cido o muy alcalino, tambin puede inhibir el proceso.
Es importante que conozcamos la estructura y propiedades qumicas de los
compuestos que se van a utilizar, por lo que es recomendable acudir a notas de
clase o a un libro de texto de bioqumica general para un mejor entendimiento y
aprovechamiento de la prctica y para presentar y discutir los resultados
obtenidos en el cuaderno de prcticas.

2. OBJETIVOS
2.1.

Objetivo General

Demostrar la accin de la amilasa salival sobre el almidn.

2.2.

Objetivos Especficos

Identificar de forma cualitativa las propiedades de la amilasa salival.

Identificar la accin de la amilasa de la saliva sobre el almidn.
Demostrar que el pH y la temperatura influyen en la accin de la amilasa.

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3. MARCO TERICO

ENZIMAS
3.1. DEFINICIN GENERAL:
Las enzimas son protenas que efectan
una accin cataltica, es decir,
favorecen el que se produzca una
reaccin determinada.
La presencia de las enzimas dentro del
cuerpo de los animales, permite que
muchas reacciones puedan llevarse a
cabo bajo condiciones de temperatura
constante, y un pH con poca variacin.
Existiendo en el cuerpo una gran
cantidad de enzimas y de acorde a la prctica detallaremos de la enzima
amilasa a continuacin:
a.

LA AMILASA

Es una enzima que acta en los procesos de digestin de carbohidratos,

especficamente acta sobre el almidn, es una enzima glucoltica.
i. FUNCIN:
Es hidrolizar los enlaces glucosdicos del tipo alfa 1,4 de la fraccin
amilosa de la molcula de almidn. La cual acta desdoblando el almidn
hasta alfa dextrinas, y luego estas hasta maltosa (aunque predominan las
alfa dextrinas), en cierto punto de la hidrlisis, se producen
eritrodextrinas (llamadas as porque se tien de rojo si se usa lugol).
ii. PRODUCCIN

Principalmente en el pncreas, y en el caso del hombre y del cerdo,

se produce en cantidad mucho menor en las glndulas salivales.
Fuera del cerdo, el resto de los animales domsticos, nicamente
producen amilasa de origen pancretico.
iii. MEDIOS PTIMOS PARA LA ACTIVIDAD ENZIMTICA
La accin de la amilasa se efecta mejor a un pH cercano a neutro.
Adems de la diferencia en concentracin, esta es otra de las causas por
las que la amilasa pancretica es ms activa que la salival, ya que en el
estmago el pH es muy cido, pero a nivel del intestino delgado es
alcalino ligero.
La temperatura que permitir la accin de la amilasa es de 37 C.

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4. MATERIALES
4.1.
INSTRUMENTOS Y REACTIVOS DE LABORATORIO
4.1.1. Instrumentos:
1 Cocina elctrica.

2 Vasos de precipitado
de 100 ml.

1 Gradilla
4 Pipetas de 5 y 1 ml (2
de cada uno).

1 Pizeta.

4 Tubos de ensayo.

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4.1.2. Reactivos:
10 gts. (1 ml) de H2SO4
(diluido al10%).

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10 gts. (1 ml) de NaOH

(diluido al 5 %).

H2SO4

20 gts. de
(solucin).

LUGOL

8 ml. de SOL. ALMIDN

(diluido al 2 %).

4.2.
INSUMOS Y MATERIALES ADQUIRIDOS POR LOS ESTUDIANTES
4.2.1. Insumos:
15 cubitos de hielo.
10 ml de saliva.

1 cojn
destilada.

de

4.2.2. Materiales:
1 lpiz marcador.
1 cinta masketein.

agua
Gasa mdica.

Toallas de papel.
Cmara
fotogrfica.

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5. PROCEDIMIENTO
5.1. Preparar la solucin de almidn:

2 PASO
Aadir 40 ml de agua .

5.2.

4 PASO

1 PASO

3 PASO

En una vaso de precipitado

de 10 ml aadiir 25 gr de
maizena.

Homogenizar la
muestra.

una vezz homeginazada

esta lista para utilizar.

Obtencin de muestra de saliva

PASO 1:
Colocar la pieza de gasa
sobre el vaso de precipitado.

PASO 2:
Adicionar la muestra de
saliva. La cual pasara a
trves de la gasa y ser
recepcionada en el vaso
de precipitdo.

PASO 3:
Complete los 10 ml de
saliva. Siemprre teniendo
en cuenta que no se forne
espuma.

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5.3. Preparar un bao Mara a una temperatura de 40 C.

1 PASO

2 PASO

3 PASO

4 PASO

Coger un
vaso de
precipitado
de 50 ml.

Adicionar
agua de grifo.

Poner a
hervir.

Entibiar a
temperatura
de 40 C.

5.4. Rotule los cuatro tubos y proceda segn el siguiente esquema:

ROTULE 4 TUBOS
DE ENSAYO

PROCEDA SEGN
EL ESQUEMA

TUBO

Sol. Almidn

2 ml.

2 ml.

2 ml.

2 ml.

Lugol

3 gts.

7 gts.

3 gts.

3 gts.

Sol. H2SO4

1 ml.

----

----

----

Sol. NaOH

----

3 gts.

----

----

Saliva

1ml

1ml

1ml

1ml

SOLUCIN

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5.4.1.

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Tubo 1
PASO 1
Aadir 2 ml de sol. de almidn.

PASO 2
Adicionar 4 gts. de lugol.

PASO 3
Adicionar 1 ml de H2SO4.

PASO 4
Por ultimo adicionar 1 ml. de saliva.

PASO 5
Llevar a bao Mara a 40 C.

OBSERVAR Y ANOTAR

OBSERVACIONES:
Se torn color azul con mayor intensidad, esto se debe a que el lugol en
presencia del almidn cambia de color. Por lo tanto la amilasa fue
desnaturalizada.
5.4.2.

Tubo 2

PASO 1
Aadir 3 ml de sol. de almidn.

PASO 2
Adicionar 8 gts. de lugol.

PASO 3
Adicionar 1 ml de NaOH.

PASO 4
Por ultimo adicionar 1 ml. de saliva.

PASO 5
Llevar a bao Mara a 40 C.

OBSERVAR Y ANOTAR

OBSERVACIONES:
A este tubo se adiciono: 4 gts. de lugol y 2 ml. de sol. NaOH (ms de
lo indicado). Si se decoloro a causa de que la sol. NaOH no estaba
concentrada. Por lo tanto si hubo reaccin enzimtica.

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5.4.3.

BIOQUMICA

Tubo 3

PASO 1
Aadir 2 ml de sol. de
almidn.

PASO 2
Adicionar 4 gts. de lugol.

PASO 3
Por ultimo adicionar 1
ml. de saliva.

PASO 4
Llevar a bao Mara a 40 C.

OBSERVAR Y ANOTAR

OBSERVACIONES:
Se decoloro rpido y la intensidad del color fue media. Por lo tanto se
realiz la actividad enzimtica ptima y rpida.

5.4.4.

Tubo 4

PASO 4
Colocar en una vaso
con precipitado de
hielo picado.

PASO 2
Adicionar 3 gts.
de lugol.

PASO 1
Aadir 2 ml de
sol. de almidn.

PASO 3
Por ultimo
adicionar 1 ml. de
saliva.

OBSERVAR Y
ANOTAR

OBSERVACIONES:
Si decoloro pero la intensidad fue nfima, pero al aadir la saliva. Por
lo tanto se realiz la actividad enzimtica, pero lentamente por la
baja temperatura.

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6. RESULTADOS

INTENSIDAD DEL
COLOR AZUL
Mayor

ACTIVIDAD
ENZIMTICA
No

nfima

Si

Lenta

Pequea

Si

Rpida

nfima

Si

Lenta

TUBO

HIDRLISIS
Inicial.

7. CUESTIONARIO GENEROSO
Cmo acta la amilasa sobre el almidn?
RPTA:
La enzima amilasa degrada el almidn
Cmo est formado el almidn qumicamente?
RPTA:
El producto formado por la polimerizacin de miles de monmeros de
glucosa es el almidn.
Qu es la amilasa desde el punto de vista qumico?
RPTA:
Una enzima encargada de degradar el almidn.
Cul es el papel que desempea el almidn en los animales?
RPTA:
Los polisacridos que ingerimos son de dos tipos principales: almidn
amilosa y amilo pectina, de vegetales y granos, y glucgeno del tejido
animal. Los polisacridos de la dieta menos la celulosa se hidroliza en la
boca mediante una reaccin catalizada por la enzima amilasa salival. La
velocidad de la hidrlisis catalizada por esta enzima, disminuye en el
estmago por los iones H+1. La glucosa es el principal producto de la
hidrlisis del almidn y glucgeno. Alrededor de un tercio de la glucosa de
la dieta a va los msculos esqueltico y cardiaco para la produccin y
almacenamiento de energa; cerca de otro tercio va al cerebro; el tercio
restante va al hgado para almacenarse en forma de glucgeno. La glucosa
de la dieta que se distribuye en los tejidos se utiliza en la biosntesis de
otros carbohidratos.
Por qu es necesario para los animales que la amilasa acte sobre el almidn?
RPTA:
Porque si la amilasa no actuara sobre el almidn, el almidn no podra ser
degradado en molculas simples, la glucosa, y no podra ser absorbida por
las clulas.

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8. RECOMENDACIN

Sustituir el HCl por el H2SO4.

Ser muy cuidadosos al momento de utilizar el H2SO4.
Por no haber obtenido
Al realizar el experimento con el TUBO 4, colocarlo en un vaso de precipitado con
hielo picado, retirar del vaso a la hora de observar y dar las conclusiones.
Sera conveniente realizar otra prueba con el procedimiento del TUBO 2, para
saber con certeza la coloracin que toma la muestra, la actividad y velocidad
enzimtica.
Se debera realizar una prueba tomando en cuenta la velocidad de la reaccin de
las enzimas con el sustrato.
9. CONCLUSIN
La amilasa degrada el almidn, segn los factores y medios en donde se da la actividad
enzimtica. A continuacin detallamos su accin en diferentes medios y factores que
intervienen en la amilasa salival:

TUBO N 1
El color de la muestra se torna de color azul intenso,
se debe a que el almidn en presencia del lugol se
torna de color azul violeta. Entonces la pregunta es:
Por qu la amilasa salival no degrado al almidn?
RPTA: Porque la misma fue desnaturalizada por el
H2SO4, por lo tanto no se produjo la degradacin del
almidn.
Concluimos que el pH ptimo para que la amilasa
realice su actividad enzimtica, est dentro del rango
5-7, siendo de 6,5 para el alfa-amilasa bacteriana y
pancretica. La explicacin es concreta: La amilasa
fue desnaturalizada por el medio cido donde se
encontraba.

TUBO N 2
El color de la muestra se decoloro en segundo como
en el Tubo 3.
La pregunta es: Porque no permaneci el color azul en
la muestra, si el medio es bsico (por la adicin de la
solucin de NaOH)? RPTA: Porque, la solucin del NaOH
no se encontraba concentrada como del H2SO4, ya que
el NaOH se encontraba bien diluido. Por lo tanto la
amilasa sobrevivi al medio y degrado al almidn.
Concluimos que el NaOH bien diluido, no influye en un
100% en la actividad enzimtica. La explicacin es
concreta: Se requiere de una mayor cantidad de NaOH
concentrada, para poder desnaturalizar a la amilasa
presente en las muestras.

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TUBO N 3
En pocos segundos la muestra se decoloro. La
pregunta es:
Por qu se decoloro rpido la muestra?
RPTA: Porque la amilasa se encontraba en las
condiciones adecuadas para degradar el
almidn.
Concluimos que la amilasa en un medio con
temperatura clida (37C) y con pH casi neutro
(5 - 7 aprox.), realiza adecuadamente su
actividad enzimtica. La explicacin es concreta:
Las enzimas dependen de dos factores
importantes para su actividad enzimtica,
siendo estas la temperatura y el pH del medio
en que reaccionan.

TUBO N 4
Cambio de color la muestra por la existencia del
almidn y al adicionar la saliva el color azul de la
muestra se torn claro.
Las preguntas son:
Por qu hubo tal cambio de coloracin? RPTA:
Porque la amilasa que se est presente en la saliva,
degrado al almidn existente en la muestra. Sin
embargo la actividad enzimtica que realizo la
amilasa fue lenta.
Por qu la actividad enzimtica de la amilasa fue
lenta? RPTA: Simple y llanamente por la baja
temperatura del medio donde se desarroll la
actividad enzimtica.
Concluimos que la temperatura baja disminuye o
influye en la actividad de la amilasa. La explicacin es
concreta: La amilasa requiere de una temperatura
clida (37 C) para realizar una ptima actividad
enzimtica.

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