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ABSORCIN Y EMISIN ATMICA

Introduccin
Mientras que la mayora de las tcnicas espectroscpicas se
utilizan para el estudio y caracterizacin de molculas o iones
en su entorno cristalino, la espectroscopa de emisin y
absorcin atmica se usa casi exclusivamente para el anlisis de
tomos. Por consiguiente, la tcnica resulta casi insuperable
como mtodo de anlisis elemental de metales. En principio, la
espectroscopa de emisin puede utilizarse para la identificacin
y para la determinacin cuantitativa de todos los elementos de
la tabla peridica.
Cuando la transicin se produce desde el estado fundamental
hasta un estado excitado del tomo mediante la absorcin de
radiacin de una determinada frecuencia (caracterstica para
cada tomo), estamos en el caso de las tcnicas de absorcin.
En el caso en que los tomos se lleven previamente a un estado
excitado y se mide la intensidad de la radiacin emitida a la
frecuencia caracterstica correspondiente a la transicin desde el
estado excitado al estado fundamental, hablamos de tcnicas
espectrofotomtricas de emisin. A continuacin se tratan las
tcnicas espectrofotomtricas de absorcin atmica, de
fotometra de llama y de emisin por plasma.
Pueden identificarse tres clases diferentes de procesos de
emisin que difieren en cmo la sustancia alcanza el estado
excitado previo a la emisin.
a) Emisin a partir de una excitacin electromagntica.
b) Emisin a partir de excitacin trmica.
c) Emisin a partir de excitacin elctrica.

Los tipos ms importantes de espectros de emisin se basan


en la utilizacin de energa no electromagntica para llevar a un
tomo o a una molcula al estado excitado, a partir del cual se
miden las emisiones de radiacin. El proceso puede describirse
segn:
X + (energa elctrica o trmica) X* (excitacin)
X* X + hv

(emisin)

Fotometra de llama
Es una tcnica de emisin que utiliza una llama como fuente
de excitacin y un fotodetector electrnico como dispositivo de
medida. Se trata principalmente de un mtodo de anlisis
cuantitativo y es uno de los mtodos ms sencillos y precisos
para el anlisis de metales alcalinos, la mayor parte de los
metales alcalinotrreos y algn otro elemento metlico. Tambin
es posible realizar un anlisis cualitativo examinando todas las
longitudes de onda del espectro de emisin (espectrofotometra
de llama o fotometra de llama). Su aplicacin es limitada si se
compara con la espectroscopa de emisin ordinaria, ya que la
energa de la llama permite excitar nicamente de 30 a 50
elementos, siendo este nmero funcin del tipo de llama
utilizada. La muestra debe estar disuelta.

Espectrofotometra de absorcin
atmica
Es una tcnica muy relacionada con la fotometra de llama ya
que se utiliza una llama para atomizar la disolucin de la
muestra de modo que los elementos a analizar se encuentran en
forma de vapor de tomos. Ahora bien, en absorcin atmica
existe una fuente independiente de luz monocromtica,
especfica para cada elemento a analizar y que se hace pasar a

travs del vapor de tomos, midindose posteriormente la


radiacin absorbida.
En la siguiente figura se compara un esquema de
espectrofotmetro de emisin de llama (a) y l de absorcin
atmica (b).

Dada la estrecha relacin existente entre absorcin atmica y


fotometra de llama es inmediata una comparacin entre ellas.
En fotometra de llama la sensibilidad es proporcional al nmero
de tomos que se han excitado, mientras que, en absorcin
atmica la sensibilidad depende del nmero de tomos que se
encuentran en el estado fundamental. Normalmente, tan slo un
pequeo porcentaje de tomos se encuentran en estado
excitado en la llama. Por lo tanto, la absorcin atmica da lugar,

en general, a una mayor sensibilidad que la fotometra de llama


para un gran nmero de elementos.
Adems, la absorcin atmica es una tcnica que presenta
menos interferencias y es ms simple que la fotometra de
llama, lo que explica el espectacular desarrollo de la tcnica en
los ltimos aos. Hay que sealar que a pesar de ello, la
absorcin atmica no ha eliminado el uso de la fotometra, sino
que ambos mtodos deben considerarse complementarios,
siendo la sensibilidad de cada uno de ellos superior a la del otro
para determinados elementos.
Las ventajas fundamentales de la utilizacin de la llama como
fuente de excitacin son que los espectros son muy sencillos y
que los resultados cuantitativos tienden a ser ms reproducibles.
Los espectros son sencillos debido a la baja energa de
excitacin de la llama que da lugar a pocas lneas de emisin.
Este hecho hace disminuir el problema de las interferencias
espectrales a partir de lneas y bandas de otros elementos y
adems no implica la necesidad de un monocromador de
elevada resolucin. La mayor reproducibilidad de estos mtodos
se debe al mejor control de las variables en una excitacin por
llama.
Las dos desventajas ms importantes de los mtodos de
emisin en llama son que la energa de excitacin es demasiado
baja para la mayora de los elementos y que la muestra debe
estar disuelta. En absorcin atmica la baja energa no es una
desventaja tan importante ya que la misin de la llama, en ese
caso, es nicamente atomizar la muestra y formar un vapor de
tomos sin excitar; por esta razn es aplicable a un mayor
nmero de elementos que la fotometra de llama.

Instrumentacin

La diferencia entre fotometra de llama y absorcin atmica


radica principalmente en los distintos mtodos de medida de las
seales.
Un espectrofotmetro de absorcin atmica es bsicamente
un espectrofotmetro de llama al que se le ha aadido una
fuente de radiacin. Para conseguir eliminar la seal de
fotometra de llama y recoger nicamente la de absorcin se
modula la fuente de ctodo hueco.
a) Fotmetros de llama
Existe una gran variedad de equipos que van desde los
fotmetros de filtro de haz nico a los espectrofotmetros de
multicanal con correccin automtica del ruido de fondo.
b) Espectrofotmetros de absorcin atmica
En los ltimos aos se han desarrollado a gran velocidad los
espectrofotmetros de absorcin atmica y en el mercado
existen desde los instrumentos muy sencillos de haz simple
hasta diseos complejos automatizados. La mayora de los
instrumentos se disean de modo que puedan utilizarse en
fotometra de llama. En la siguiente figura se recoge el diagrama
de bloques de espectrofotmetros de absorcin atmica.

Funcin y condiciones de las llamas


La llama tiene tres funciones bsicas: permite pasar la
muestra a analizar del estado lquido a estado gaseoso;
descompone los compuestos moleculares del elemento de
inters en tomos individuales o en molculas sencillas y excita
estos tomos o molculas.

Las condiciones que debe cumplir una llama para considerarla


satisfactoria es que tenga la temperatura adecuada y que en
ella se forme un ambiente gaseoso que permita las funciones
mencionadas. Adems, el ruido de fondo de la llama no debe
interferir las observaciones a efectuar.
Una llama tpica consta de: cono interno, cono externo y zona
entre conos como podemos observar en la siguiente figura.

El cono interno es la zona en que tiene lugar, generalmente,


una combustin parcial, es decir sin equilibrio trmico. Esta zona
se calienta por conduccin y radiacin a partir de la regin ms
caliente que se encuentra sobre ella. En ella se forman los
productos de oxidacin intermedios, se produce una gran
emisin de luz (a partir del combustible y no de la muestra), una
elevada ionizacin y una gran concentracin de radicales libres.
Es muy poco utilizada para trabajo analtico.
Inmediatamente encima de la regin del cono interno se
encuentra la zona interconal Es la llamada parte caliente de la
llama y en ella tiene lugar una combustin completa y se
alcanza casi un equilibrio termodinmico. Esta llama es la que se
utiliza prcticamente en anlisis por fotometra de llama y
espectroscopa de absorcin atmica. La altura de esta zona
sobre el quemador vara considerablemente con el tipo de
quemador, la naturaleza de los gases utilizados y su velocidad
de flujo.
La regin del cono externo es una zona de combustin
secundaria en la que los productos parcialmente oxidados como
el monxido de carbono pueden completar su combustin. Esta
regin se enfra por el aire circundante y es, en general, una
regin poco til.

Fenmenos que tienen lugar en la


llama
1. - Se evapora el agua o los otros disolventes dejando como
residuo diminutas partculas de sal seca.
2. - La sal seca se vaporiza, es decir, pasa al estado gaseoso.
3. - Las molculas gaseosas, o una parte de ellas, se disocian
progresivamente dando lugar a tomos neutros o radicales.
Estos tomos neutros son las especies absorbentes en

espectroscopa de absorcin atmica y son las especies


emisoras en fotometra de llama.
4. - Parte de los tomos neutros se excitan trmicamente o se
ionizan. La fraccin excitada trmicamente es importante en
anlisis por fotometra de llama ya que el retorno al estado
fundamental de los electrones excitados es el responsable de la
emisin de la luz que se mide.
5. - Parte de los tomos neutros o de los radicales que se
encuentran en la llama pueden combinarse para formar nuevos
compuestos gaseosos. La formacin de estos compuestos
reduce la poblacin de los tomos neutros en las llamas y
constituye las llamadas interferencias qumicas que se
presentan en los mtodos de anlisis que utilizan llamas.
La eficacia con que las llamas producen tomos neutros tiene
mucha importancia. La llama de xido nitroso-acetileno, que es
ms caliente que la de aire acetileno, parece ser ms efectiva
para la formacin de tomos neutros. Los metales alcalinos son
una excepcin, probablemente debido a que la ionizacin es
apreciable en la llama caliente. En cualquier caso, estos dos
tipos de llama son los ms adecuados para fotometra de llama
y absorcin atmica.
A las temperaturas ordinarias de llamas es relativamente baja
la fraccin de tomos del estado fundamental que se excita.
nicamente si la temperatura de la llama es muy elevada la
fraccin de tomos excitados empieza a ser apreciable. Este
hecho pone de manifiesto la necesidad de controlar la
temperatura de la llama cuidadosamente para fotometra de
emisin. Por el contrario, la fraccin de tomos en el estado
fundamental es muy elevada y, por lo tanto, pequeas
fluctuaciones en la temperatura de la llama no son importantes
para el anlisis por absorcin atmica.

La ionizacin que tiene lugar en las llamas produce


normalmente la prdida de un slo electrn y se puede
representar:
A A+ + eA = tomo neutro
A+ = su ion positivo
e- = electrn libre
Este proceso de disociacin depende de la concentracin o de
la presin, ya que una especie se disocia en dos. Al aumentar la
presin parcial de los tomos en la llama, el porcentaje de
ionizacin disminuye tal como debe esperarse de la aplicacin
de la ley de Le Chtelier.
A la temperatura de la llama acetileno-oxgeno la mayor parte
de los elementos se encuentran apreciablemente ionizados. El
grado de ionizacin del elemento a analizar puede disminuirse
por adicin de una elevada concentracin de otro elemento que
sea ms fcilmente ionizable (tampn de radiacin o supresor
de ionizacin).
Es preferible, por lo general, suprimir de este modo la
ionizacin a utilizar temperaturas de llama ms bajas que hacen
aumentar las interferencias qumicas.

Espectroscopia de emisin por


plasma
En 1920 Langmuir y Tonks introducen la palabra PLASMA para
designar un gas, ionizado, elctricamente neutro, confinado en
tubos de descarga. Puede considerarse que el plasma es un
cuarto estado de la materia cuyas propiedades derivan de las

fuerzas culombianas por la interseccin entre partculas


cargadas.
En su aplicacin espectroscpica se da el nombre de plasma a
un gas parcialmente ionizado, elctricamente neutro en su
conjunto y confinado en un campo electromagntico. Sus
temperaturas (4.000-10.000 o K) son notablemente superiores a
las de las llamas qumicas, lo que constituye la base del inters
de su aplicacin como fuente de emisin en espectroscopa,
donde deben disociarse las combinaciones qumicas, incluidas
las ms refractarias. Un sistema tpico de anlisis elemental por
espectroscopa con un plasma como fuente de excitacin y
atomizacin, est constituido por: el plasma, el generador
elctrico, el sistema de introduccin de la muestra, el sistema de
alimentacin de gas, el sistema ptico y el sistema de
tratamiento de la seal.

El plasma de acoplamiento inductivo ICP (inductively coupled


plasma) se obtiene por la accin de una corriente de alta
frecuencia que genera un campo magntico oscilante hasta el
que se lleva el gas que va a sustentar el plasma.
Estos campos magnticos provocan la aparicin de iones y
electrones que se mueven siguiendo trayectorias anulares
acelerados por efecto de alternancia de los campos magnticos,
producindose por efecto Joule una liberacin de energa
calorfica que permite alcanzar temperaturas de hasta 10.000 K
en el interior de las zonas de mxima corriente circular. De esta
forma se consigue una configuracin toroidal del plasma
confinado en el campo magntico con una fuerte intensidad
luminosa radiante que se denomina, por semejanza, llama.
Fsicamente el plasma se confina en un conjunto de 3 tubos
concntricos (generalmente de cuarzo) abiertos por un extremo
a la presin atmosfrica. El tubo interior denominado inyector,
se utiliza para hacer llegar el aerosol a la muestra hasta el
interior de la llama del plasma. Los otros dos tubos forman
una corona cilndrica a travs de la cual se transporta el argn
que sustenta el plasma en rgimen de turbulencia. Este argn
tiene la doble misin de mantener el plasma y de refrigerar las
paredes del tubo exterior, a fin de evitar su fusin por las
elevadas temperaturas alcanzadas en la llama.
Sistema de introduccin de muestras: El espectro de
emisin se produce introduciendo la muestra en el seno del
plasma en cualquiera de los estados de la materia (S, L, G). Esta
afirmacin es correcta, pero es necesario matizar, ya que por
razones operativas (reproducibilidad, facilidad para disponer de
patrones de calibracin, homogeneidad, etc.) el mtodo ms
difundido de introduccin de la muestra es en forma de solucin
a travs de la nebulizacin, que tiene por misin formar un
aerosol hmedo, finamente dividido, con un tamao de partcula
homogneo y lo ms reducido posible a fin de facilitar el trnsito

de la muestra en el seno del plasma y conseguir una excitacin


homognea y reproducible.
Caractersticas fundamentales del anlisis por
espectroscopia de emisin ICP
Excitacin de las lneas ms sensibles para casi todos los elementos.
Carcter nico de la excitacin para todos ellos.
Linearidad en un intervalo de 6 rdenes de magnitud.
Mnimos efectos de matriz.
Posibilidad de correccin de interferencias.
Posibilidad de introduccin de muestras en diferentes estados.
Rango analtico que comprende constituyentes mayoritarios,
minoritarios, trazas y ultratrazas.

Espectrometra como instrumento analtico


A menudo es de inters conocer no slo la composicin qumica de una muestra
dada, sino tambin las concentraciones relativas de varios compuestos de una
mezcla. Para hacer esto debe construirse una escala, o curva de calibracin, usando
varias concentraciones conocidas para cada compuesto de inters. El grfico que
resulta de la concentracin respecto a la absorbancia se hace a mano o usando un
software de ajuste de curvas apropiado, que usa una frmula matemtica para
determinar la concentracin en la muestra. La repeticin de este proceso para cada
compuesto en una muestra da un modelo de varios espectros de absorcin que en
conjunto reproducen la absorcin observada. De esta manera es posible, por
ejemplo, medir la composicin qumica de los cometas sin tener muestras de ellos
en la Tierra.

Un ejemplo simple: un cianuro estndar a 200 partes por milln da una absorbancia
con un valor arbitrario de 1540. Una muestra desconocida da un valor de 834. Ya que
esta es una relacin lineal y pasa por el origen, el valor desconocido se calcula
fcilmente como 108 partes por milln. Con este mtodo de proporcin no es
necesario conocer los valores de los coeficientes gobernantes, o cromforos, o la
longitud de clula experimental.
En la prctica, el uso de una curva de calibracin, ms que un solo punto de
comparacin, reduce la incertidumbre en la medida final por exclusin de la
interferencia aleatoria (ruido) en la preparacin de los estndares.

El empleo de la espectroscopia de emisin por llama (FES), es de gran aplicacin en anlisis elemental.
Puede ser usada para anlisis cuantitativo y cualitativo y es un mtodo de elemento simple. Sus usos ms
importantes son la determinacin de sodio, potasio, litio y calcio en fluidos biolgicos y tejidos.
La muestra debe ser convertida a tomos libres, comnmente en una fuente de excitacin de altas
temperaturas, por ejemplo, una llama. Las muestras lquidas son nebulizadas y llevadas a la llama por el flujo
de gas. La fuente de excitacin debe disolver, atomizar y excitar los tomos de la sustancia a analizar. La
llama provee energa suficiente para promover los tomos a niveles de energa altos.

A medida que los tomos vuelven al estado estable, la radiacin emitida pasa a travs del monocromador que
asla la longitud de onda especificada para el anlisis requerido. Un fotodetector mide la fuerza de la radiacin
seleccionada la cual es luego amplificada y enviada a un dispositivo de lectura.

La potenciometra es una de las tantas tcnicas abarcadas por la electroanaltica para la determinacin de
la cantidad de esa sustancia presente en una solucin. Antes de referirnos a ella en detalle, es importante
conocer en qu consiste efectivamente un mtodo electroanaltico, que por otra parte, no presenta
caractersticas unvocas sino que pueden subdividirse en diferentes sistemas o procedimientos.
Los mtodos de rasgos electroanalticos son procesos instrumentales empleados para distintos anlisis.
Asimismo, utilizan todas las propiedades electroqumicas con las que cuenta una determinada solucin para

precisar debidamente la concertacin que sta posee de un analito. Por otra parte, las tcnicas que se
emplean son vastas y comprenden las siguientes: electrogravimetra, polarografa, conductimetra,
amperometra,
voltametra,
cronoamperometra,
culombimetra,
cronoculombimetra y
la potenciometra. Adems de esto, toda la amplia gama de magnitudes electroqumicas que pueden ser
empleadas o que pueden relacionarse con los mtodos electroanalticos tambin son muchas, de los cuales
podemos destacar el grado de intensidad de la corriente elctrica, el potencial de electricidad con el que se
cuenta, la carga elctrica, la resistencia elctrica, la masa que se puede acumular en un determinado
electrodo y, asimismo, el tiempo, que es un factor que hay que tener siempre en cuenta.
Funcin primordial de la potenciometra
Esta tcnica es utilizada para determinar la concentracin de una especie electroactiva o de una disolucin,
empleando dos elementos fundamentales. Por un lado, utiliza un electrodo de referencia. Con este nombre
se indica al electrodo que posee de manera inherente un potencial constante y conocido en relacin con el
tiempo. As mismo se requiere de la presencia de un electrodo de trabajo. Este tipo de electrodo se
caracteriza por contar con una gran sensibilidad en relacin con la especie electroactiva. Estos electrodos de
trabajo presentan una amplia gama de variedades, los podemos encontrar con distintos modelos y clases.
En esta tcnica tambin entra en juego otro factor indispensable. Se trata de los electrodos selectivos. Los
mismos, como su nombre lo adelanta, se encargan de la seleccin de los iones ( por eso se los conoce
con la sigla ESI ) y tambin son denominados como electrodos de membrana. Adems de esta opcin
hay otra ms que se emplea en la potenciometra:los electrodos de pH, que son elaborados a travs de un
material de fibra de vidrio. Cabe mencionarse que stos comenzaron a ser empleados a comienzos del siglo
XX y evolucionaron tanto que actualmente se constituyen en el modelo ms requerido a la hora de emplear
la tcnica electroanaltica. Otros electrodos que son considerados como apropiados para aplicar la
potenciometra son, por mencionar algunos ejemplos, los electrodos de membrana de cristal, los electrodos
confeccionados en vidrio, los que cuentan con una membrana en estado lquido, los que tienen una
membrana polimrica y aquellos que son metlicos.
Existen dos mtodos principalmente para realizar mediciones potenciomtricas. El primero es hacer una
sola medicin de potencial de la celda, se llama potenciometra directa y se utiliza principalmente para
calcular el pH de solucin acuosa. En el segundo, el in se puede titular y el potencial se mide en funcin
del volumen del titulante y se le llama titulacin potenciomtrica la cual utiliza la medicin de un potencial
para detectar el punto de equivalencia de una titulacin. El nico requisito es que la reaccin incluya un
aumento o disminucin de un in sensible el electrodo. En una titulacin potenciomtrica directa el punto
final de la reaccin se detecta determinando el volumen en el cual ocurre un cambio de potencial
relativamente grande cuando se adiciona el titulante.
Para determinar el punto de equivalencia, podemos utilizar el potencimetro, el cual nos permite generar la
curva de titulacinpotenciomtrica de la reaccin cuya grfica resulta de la medicin del pHdel
sistema contra el volumen de cido o de base agregados en la titulacin (Umland, 2000, p.602).
Entonces podra entenderse como final de la titulacin al momento en que el pH llegase a 7, sin
embargo esto NO siempre es ciento, esto ms bien,est en funcin de la fuerza del cido o la base que
se est titulando.
As cuando la neutralizacin se produce entre un cido fuerte y una base fuerte. El pH en el punto de
equivalencia es 7 ya que todos los iones han sido neutralizados.

Por otra parte, cuando la reaccin ocurre entre una base fuerte y un cido dbil, el
anin del cido sufre una hidrlisis,por lo que el pH al que ocurre la
neutralizacin es mayor que 7. Y en la situacin contraria, entre cido fuerte y
unabase dbil, el catin de la base sufre una hidrlisis producindose iones
hidrnio, por lo que el pH es menor que 7.ste ltimo caso es el estudiado
experimentalmente con el HCl y Na2CO3[1], y presentar una posible curva de
titulacincon una grfica como la siguiente:

Como se observa, la concentracin de los iones hidrnio, antes de agregar el cido y comenzar la titulacin
corresponde a la concentracin de iones hidrnio de la solucin de la base dbil. A medida que se agrega el
cido, la base dbil se transforma en su sal, la solucin contiene la base dbil y la sal del cido fuerte, y por
consiguiente est amortiguada.
El primer punto de equivalencia corresponde a un volumen agregado de cido, el cual ha neutralizado
nicamente una parte de todo el carbonato, y es hasta el segundo punto, donde el carbonato de sodio pierde
sus propiedades. Est totalmente! neutralizado. Aqu existe una vertical que contiene el punto de

equivalencia, correspondiente al equilibrio.determinacin que se realiza mediante la utilizacin de la


primera derivada. La valoracin del carbonato sdico no puede realizarse con la exactitud que exige una
normalizacin; por ello se valora siempre el segundo equivalente de hidrgeno (Ayres, 1970, p 334)
Para llevar a cabo sta reaccin, es indispensable comprender que las normalidades de los reactivos y el
volumen de stos son proporcionales entre un cido y una base. Hblese as de la frmula:
NA VA = NB VB
Y si en ste proyecto experimental, se utilizara una base 0.1N, en un volumen de 50 mL, y
sta fuese neutralizada con 25mL de cido. Por lo tanto, a manera de hiptesis, se establece que la
normalidad del cido es 0.2 N al reaccionar en ste sistema.

INSTRUMENTOS
Los instrumentos que se requieren para hacer medidas potenciomtricas se
llaman electrodos. Se usan por pares: uno, que se llama de referencia, se
construye de modo que su potencial de semicelda permanezca esencialmente
constante durante la medida; el otro, denominado indicador, se introduce en la
la disolucin que contiene el ion y es realmente el que mide su concentracin.
Para ello se emplea un potencimetro (o voltmetro de alta impedancia), que
mide el potencial de la pila formada con ambos electrodos, aplicando
internamente la ecuacin de Nernst para calcular la concentracin inica que
justifica el valor de potencial medido.

USOS Y APLICACIONES DE LAS


TCNICAS POTENCIOMTRICAS

Determinacin cuantitativa de gases cidos y bsicos

Determinacin cuantitativa de productos de reaccin enzimtico

Aplicaciones Comunes:

Determinacin de electrolitos en fluidos fisiolgicos para anlisis clnicos


Determinacin

de

iones

constituyentes

en

muestras

de agricultura,

medio

ambiente y farmacia
Determinacin cuantitativa de productos de reaccin enzimtico

Determinacin de pH
Anlisis de iones de procesos industriales batch o continuos
Determinacin de monitoreo continuo de la calidad de aire y gases contaminantes

ELECTROFORESIS

INTRODUCCION
La electroforesis es una tcnica de separacin que puede ser utilizada con fines
analticos y que fue introducida por el qumico sueco Arne Tiselius. El inters
principal de este investigador fue la qumica de las protenas sricas. Por su
trabajo pionero en este campo, Tiselius recibi el Premio Nobel en 1948.

Es una tcnica de separacin que consiste en el transporte de iones a travs de


una disolucin por accin de un campo elctrico.
Los mtodos electroforticos son de alta sensibilidad, eficacia, poder de
resolucin y versatilidad.
Mtodo de separacin de:

Protenas

cidos nucleicos

Otras biomolculas

Permite determinar:
Peso molecular de una protena
Punto isoelctrico
Distinguir molculas por su carga neta o su forma

La velocidad de migracin en un sistema electrofortico es:


Inversamente proporcional a la viscosidad del medio.
Proporcional a la fuerza aplicada al campo.
Proporcional a la carga neta de la molcula
Inversamente proporcional al tamao de la molcula.
Inversamente proporcional al coeficiente de friccin.

TIPOS DE ELECTROFORESIS
Electroforesis de frente mvil
Electroforesis de zona

Electroforesis de frente mvil


Aquella en la cual las partculas se mueven de forma libre en el medio en el
que se encuentran dispersas.
Las sustancias a separar se introducen en un tubo en forma de U, disueltas en
un tampn de pH y fuerza inica adecuados. Se colocan los electrodos en
sendos brazos del dispositivo, entre los que se crea un campo elctrico,
provocando que las molculas de la muestra (por ejemplo: protenas) cargadas
emigren hacia los electrodos de polaridad opuesta.

Electroforesis de zona
La disolucin a tratar se aplica como una mancha, o como una banda, y las
partculas migran a travs de un disolvente, utilizando adems un medio
soporte inerte y homogneo, tal como el papel o ciertos tipos de geles. Esta
tcnica es utilizada para analizar mezclas, para determinar la pureza de una
muestra, para detectar cambios de movilidad o de conformacin de sustancias.

Medios de soporte usados en electroforesis de zona

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