Interaccin gnica en cruces dihbridos en mutantes de Drosophila

melanogaster
Daniel A. Acosta, Catalina M. Ardila, Angie D. Gaona, Sara L. Guerrero, Daniela Quintero.

Introduccin
Drosophila melanogaster o ms conocida como la mosca de la fruta, ha sido un organismo
modelo para el estudio de la gentica de organismos pluricelulares. Esta ha permitido conocer
ms acerca del desarrollo animal en general, incluyendo los humanos, y los principales
mecanismos que lo regulan .

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Figura 1. Drosophila melanogaster silvestre, organismo modelo en estudios biolgicos, principalmente genticos.

Sistemticamente, D. melanogaster pertenece a la familia Drosophilidae, que comprende cerca

de 3000 especies conocidas, estas se distribuyen a nivel global con excepcin de los polos. Gran
parte de las especies de esta familia son especializadas en la alimentacin, sus larvas se
caracterizan por alimentarse de materia vegetal fresca o en descomposicin, la mayora de las
moscas de este gnero proliferan sobre las levaduras producidas en la fruta en descomposicin o
sustancias similares en fermentacin. Anatmicamente, las moscas (silvestres) son
verdaderamente pequeas, miden entre 1 y 8 mm, tienen los ojos rojo brillante y el cuerpo es
algo amarillo con franjas negras. Estas moscas se caracterizan por presentar dimorfismo sexual
ya que la hembra es ms grande que el macho, adems la hembra presenta en los ltimos dos
(de 7) segmentos del abdomen el ovopositor, mientras que estos segmentos en el macho estn
fusionados. Por los ltimos 100 aos esta especie se ha utilizado como sujeto de investigacin
biolgica principalmente en el campo de la gentica debido a que cuenta con ciertas
caractersticas que permiten utilizarla como organismo modelo.

Lo que convierte a D. melanogaster en un sujeto ideal para investigacin gentica es su facilidad

de manejo. El hecho que tengan un ciclo de vida tan corto (15-20 das) permite tener muchas
generaciones en poco tiempo, dado que su progenie es prolfica. Adems es realmente fcil
distinguir entre las fases de su desarrollo (huevo, 3 estadios larvales, pupa y mosca adulta).
Debido a que nicamente cuentan con 4 pares de cromosomas (2n=8) es realmente fcil conocer
gran parte, sino todo, su genoma. Para fines prcticos, es un organismo sencillo de manejar,
debido a que su manutencin requiere poco espacio y es de bajo costo, por lo tanto es suficiente
con ponerlas en un medio de harina con banano para que se mantengan vivas y reproduciendo.
Una de las ventajas ms importantes del uso de esta especie, es que cuentan con una alta tasa
mutacional lo que permite la realizacin de muchos estudios a nivel de variaciones genticas
puntuales.
Para esta prctica trabajamos dos mutaciones, una que involucra el color del cuerpo (black) y otra
que involucra cambios en la morfologa de las alas (vestigial). A partir de estos se realizan cruces
dihibridos para as conocer acerca de la interaccin gnica de ambos, tomando como objetivo de
estudio la primera y segunda generacin (F1 y F2) de estos cruces.
La mutacin black (b) es autosmica recesiva, se caracteriza por presentar coloracin negra en la
totalidad del cuerpo (Fig. 2). Esta coloracin se produce por una baja actividad del aspartato
decarboxilasa, lo que genera que no se produzca la protena DGAD2. Bien se sabe que el gen
black, en la posicin 48.5 del cromosoma 2, est involucrado en el proceso de mielinizacin y
dems procesos de la pigmentacin de la cutcula. Este gen presenta 218 alelos reportados, en
los cuales las mutaciones se dan principalmente por rayos gamma o U.V. En muchos casos las
mutaciones se dan por inserciones o deleciones que generalmente hacen que se cambie el marco
de lectura causando que la protena normal no sea traducida. Por ejemplo, la mutacin del alelo b 1
(espontnea) se da al cambiar (ATCC) por una insercin de 8 pares de base (TACCTACC) en la
posicin +530pb en la secuencia del ADN codificante, por lo que no es posible la traduccin de la
protena normal (DGAD2) presente en moscas silvestres. La mutacin black no presenta
asociacin con otro tipo de mutaciones en D. melanogaster, por lo que aunque las moscas
presentes esta mutacin, no se ven afectadas en otras estructuras como alas, patas, ojos, etc.
Por lo anterior los mutantes no se ven afectados a nivel sensorial y motriz, sin embargo podran
presentar problemas en cuanto a seleccin sexual a raz de su fenotipo.

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Figura 2. Mutacin black (b), presenta pigmento negro en todo el cuerpo.

La mutacin vestigial (vg), al igual que la black es autosmica recesiva. Fenotpicamente slo est
presente la parte basal del ala, por lo que las alas y balancines estn muy reducidos, como
resultado las moscas mutantes no pueden volar (Figura 3); en vida silvestre la no habilidad
afectara directamente la posibilidad de reproduccin de los mutantes y por ende su
supervivencia. Genotpicamente, el gen en el que ocurre la mutacin se encuentra en la posicin
67 del cromosoma 2, y est involucrado en la diferenciacin de las clulas que darn origen a las
alas y halterios. El gen cuenta con 431 alelos reportados, las mutaciones en estos alelos son
principalmente por exposicin a rayos x y gamma, o de manera espontnea; el alelo v 1
(espontnea) es mutado cuando se da una insercin de un elemento 412-transposon. Esta
mutacin es una de las ms estudiadas en Drosophila melanogaster.

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Figura 3. Mutacin vestigial (vg) alas atrofiadas, las moscas pierden la capacidad de volar.

Es importante identificar si estas dos mutaciones son homlogas a los genes encontrados en
humanos, para esto es necesario llevar a cabo un alineamiento de la protena codificada por
ambos genes y compararla con las protenas humanas. Para alinear protenas se lleva a cabo un
blastp con la secuencia de aminocidos de ambos genes (por separado), y se compara con las
bases de datos de todos los organismos en ncbi, a partir de esto se observa si existe alguna
coincidencia con Homo sapiens.
Para black, los resultados del alineamiento del transcrito de protenas mostr que existe una
coincidencia con humanos en: cistein sulfinic acid decarboxylase isoform X1. En la figura 4 se
observan los datos obtenidos luego del alineamiento. Con un porcentaje de 53% de identidad no
se puede afirmar concretamente si se trata de una homologa en los genes.

Figura 4. Blastp de la protena que transcribe el gen black con Homo sapiens, se encontr coincidencia.

Por otra parte, al realizar el blastp con el transcrito de vestigial no se encontr ninguna
coincidencia con humanos. Por lo que se puede decir que esta mutacin no es homloga a los
genes encontrados en H.sapiens
Referencias:
1. Davkova, L.N., Aleksandrova, M. V. & Aleksandrov, I. D. (2013). Radiation biology of structurally
different drosophila genes. Report IV. The black gene: sequencing of the "point" mutations and
recombination mechanisms of their processing. NCBI database. 53: 355-66.
2. Gene Dmel/b. FlyBase. Recuperado el 24.02.2015. En:
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Googlebooks. Recuperado el 24.02.2015. En: <https://books.google.com.co/books?
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Q_w&hl=es-419&sa=X&ei=tE7tVP6LsTCggT5m4D4Ag&ved=0CCcQ6AEwAg#v=onepage&q=como%20fueron%20descubiertas
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4. Mutantes. Instituto de Gentica- Universidad de Los Andes. Recuperado el 24.02.2015. En:
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6.
Phillips, A. M. et al. (2005). The Drosophila black enigma: the molecular and behavioral
characterization of the black mutant allele. Gene. 351, 131-142.