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Exame de DNA
(Paternidade, identificao de pessoas, etc)
Nmero de repeties varia de pessoa para pessoa...
Eletroforese em gel
Como vimos no item anterior, os fragmentos de DNA formados com a ao das
enzimas de restrio possuem tamanhos diferentes. A tcnica de separao
dos fragmentos de DNA mais utilizada a eletroforese atravs de gis de
agarose.
A agarose um polissacardeo (como gar e pectina) que dissolve em gua
fervente e ento gelifica quando esfria como a gelatina. Para realizar uma
eletroforese, um gel de agarose preparado, o DNA introduzido em pequenos
poos de gel, e ento uma corrente eltrica aplicada atravs do gel. Como
oDNA negativamente carregado, ele atrado pelo eletrodo
positivo. Entretanto, para chegar ao eletrodo positivo, o DNA deve migrar
atravs do gel de agarose.
Os fragmentos de DNA menores podem migrar atravs de um gel de agarose
mais rapidamente que os fragmentos de DNA maiores. A velocidade de
migrao de fragmentos de DNA lineares atravs da agarose inversamente
proporcional a log10 de seus pesos moleculares.
possvel calcular o tamanho exato de um dado fragmento com base na sua
razo de migrao.Aps a eletroforese em gel, os fragmentos de DNA
normalmente so corados com brometo de etdeo, que possui afinidade pelo
DNA e fluorece (torna-se visvel) vivamente em contato com a luz ultravioleta.
Dessa forma pode-se localizar as bandas que correspondem ao DNA. Os
fragmentos de DNA podem, ento, ser isolados e purificados a partir dos gis
de agarose