Posgrado en INGENIERA DEL AGUA

Y DEL TERRENO.

CURSO: INSTRUMENTACIN Y
MTODOS DE ANLISIS QUMICO

TEMA: EL ESPECTRO
ELECTROMAGNTICO. ABSORCIN
VISIBLE-ULTRAVIOLETA
Jos Luis Serrano Martnez

1. EL ESPECTRO ELECTROMAGNTICO. MTODOS ESPECTROSCPICOS.

Definicin de espectroscopia
La espectroscopia estudia la interaccin entre la radiacin y la materia. Se ocupa por tanto
del estudio de los "espectros": la forma de obtenerlos, la forma de medirlos y su aplicacin
al anlisis qumico.
El espectro se define como una representacin grfica de la distribucin de intensidades de
la radiacin electromagntica emitida o absorbida por la materia, en funcin de la longitud
de onda de dicha radiacin. Los espectros son debidos a transiciones entre estados de
energa caractersticos de la materia.
Los espectros pueden ser de emisin, que se obtienen excitando adecuadamente la materia
para que emita radiacin electromagntica y de absorcin, obtenidos sometiendo a la
materia a una radiacin electromagntica continua y representando la proporcin de
radiacin absorbida por la misma en funcin de la frecuencia o longitud de onda.
2. ORIGEN DEL ESPECTRO DE ABSORCIN
Puesto que los procesos de absorcin tienen su origen en la interaccin de la
radiacin electromagntica con la materia, a continuacin se repasa brevemente la
naturaleza de la radiacin y la estructura energtica de la materia.
2.1. La radiacin electromagntica
Recordemos que la descripcin de la radiacin electromagntica requiere
adjudicarle por una parte una naturaleza ondulatoria para describir su movimiento, y
describir estas ondas con parmetros tpicos como frecuencia(s-1), longitud de onda(cm),
nmero de ondas (cm-1), amplitud (cm) y velocidad (cm/s).
c = 3 x 1010 cm/s
No obstante, para explicar los fenmenos asociados con la absorcin o emisin es
necesario considerar la radiacin electromagntica como un flujo de partculas discretas de
energa llamadas fotones. La energa de un fotn es proporcional a la frecuencia de la
radiacin segn la ecuacin E = h, donde h es la constante de Planck (h = 6.63 x 10-34 J.
s.). As, las radiaciones de mayor frecuencia del espectro electromagntico (rayos X o rayos
), son ms energticas que las de baja frecuencia (radiofrecuencia o microondas), y en su

interaccin con la materia provocaran alteraciones ms importantes en cuanto al cambio

energtico asociado. El espectro electromagntico cubre un amplio rango de frecuencias, y
por tanto de energas. Dentro de l, y en intervalos limitados de frecuencias, operan las
diferentes tcnicas espectroscpicas, dependiendo de los procesos y cambios energticos
implicados. (Figura 1).

2.2. La materia
Por otra parte, los resultados de la mecnica cuntica nos dicen que slo ciertos
estados o niveles energticos son posibles en un sistema molecular. Si asumimos que la
energa de una molcula se puede expresar como la suma de tres componentes E = Erotacional
+ Evibracional + Eelectrnica, (la diferencia en magnitud de las energas involucradas permite
separar la energa de una molcula en contribuciones individuales) se observa que para
cada estado de Eelectrnica hay varios estados vibratorios posibles y a su vez, para cada uno de
estos existen numerosos estados rotatorios. Adems, la separacin entre los niveles
rotacionales es muy pequea, es mayor entre niveles vibracionales y mucho mayor entre
niveles electrnicos (Figura 2). La separacin energtica entre dos niveles contiguos
cualesquiera ser la diferencia E = E2-E1, y cada uno de ellos vendr identificado por unos
nmeros cunticos determinados.
A continuacin se profundiza algo ms en los tipos de energa en un sistema atmicomolecular
2

 Energa electrnica. Es la energa que poseen las molculas y los tomos debido
a la energa potencial y cintica de sus electrones; la primera se origina en la
interaccin entre el electrn con el ncleo y otros electrones y la segunda como
resultado del movimiento. Dentro de un tomo, los niveles de energa de los
electrones se definen por medio de cuatro nmeros cunticos.
n (principal) = 1,2,3,...
l (momento angular) = 0,1,2,....,(n-1)
m (magntico) = (-l)...0...(+l)
s (espn) = (1/2)
En las molculas, los niveles de energa electrnicos se corresponden con los
orbitales moleculares que se originan a partir de la interaccin de los orbitales
atmicos de los tomos que forman la molcula. Los orbitales s de dos tomos
dan lugar a dos orbitales moleculares, uno de menor energa y otro de mayor
s

energa , que los orbitales s originales. El nmero cuntico electrnico se

s

denomina con la letra n.

Energa vibracional. Es la energa cintica y potencial que poseen las molculas
debido al movimiento de vibracin. Los tomos, en una molcula, se encuentran
unidos entre s por medio de los enlaces que actan como muelles; al no ser
rgidas las molculas, la flexibilidad de las mismas da como resultado el
movimiento vibratorio. El nmero cuntico vibracional se denomina con la letra
v.
Energa de rotacin. Es la energa cintica que poseen las molculas debido a la
rotacin de su centro de gravedad alrededor de un eje. El nmero cuntico
rotacional se denomina con la letra J.
Energa nuclear de orientacin de espn. Est asociada a la orientacin de las
partculas nucleares en un campo magntico exterior.
Como se ha comentado, el orden y magnitud de estas energas son muy diferentes, por lo
que las radiaciones electromagnticas absorbidas o emitidas debidas a cambios energticos,
son muy distintas en longitud de onda y frecuencia, pudindose obtener espectros

caractersticos segn la zona afectada. Una clasificacin de los mtodos espectroscpicos,

en consonancia con lo anterior, sera:
a) Mtodos espectroscpicos moleculares, basados en espectros de
absorcin, obtenidos como resultado de cambios en los niveles energticos
de las molculas (Espectroscopia Visible-Ultravioleta, Infrarroja).
b) Mtodos espectroscpicos atmicos, debidos a cambios energticos en
el tomo, que pueden ser de absorcin o de emisin tales como Absorcin
Atmica, Espectroscopia de Emisin, Rayos X.
Desde el punto de vista espectroscpico es importante considerar la distribucin de
poblacin en los distintos niveles, puesto que slo los que tengan una poblacin
significativa podrn verse implicados en procesos de absorcin o emisin. Adems, a la
hora de obtener un espectro debe haber una diferencia notable entre la poblacin de los
niveles involucrados, del mismo modo en que el flujo de un lquido entre dos contenedores
conectados slo tiene lugar cuando hay diferencia de niveles.

transicin electrnica

t. vibracional
t. rotacional

FIGURA 2

2.3. Interaccin radiacin-materia

Cuando la radiacin electromagntica atraviesa una capa transparente de un slido,
lquido o gas, interacciona con ella dando lugar a fenmenos de transmisin, dispersin y
absorcin de la radiacin. A causa de este ltimo proceso pueden ser eliminadas
selectivamente ciertas frecuencias, de modo que la radiacin emergente ya no es continua.
En estos casos la energa electromagntica se transfiere a los tomos o molculas de la
muestra y como resultado estas partculas pasan del estado de ms baja energa (estado
fundamental) a estados de mayor energa o estados excitados. As, para que se produzca
absorcin de radiacin, la energa del fotn excitante (E = h, y segn el valor de
hablaremos de radiacin IR, Visible-UV o rayos X) debe igualar la diferencia de energa
entre el estado fundamental y uno de los estados excitados de la especie absorbente. Como
estas diferencias de energa son nicas para cada especie, un estudio de las frecuencias de
radiacin absorbidas con un instrumento adecuado, ofrece un medio de caracterizar a los
constituyentes de una muestra.
El aspecto general de los espectros de absorcin vara dependiendo de la
complejidad, el estado fsico y el medio en que se encuentre la especie absorbente, aunque
es fcil diferenciar los espectros asociados con la absorcin atmica y los resultantes de la
absorcin molecular. As, al pasar radiacin policromtica ultravioleta o visible a travs de
un medio formado por partculas monoatmicas se produce absorcin slo en unas pocas
frecuencias bien definidas, que lgicamente generan espectros con pocos picos y muy
estrechos. Esto se debe a que el nmero de posibles estados energticos es pequeo.
La absorcin por molculas poliatmicas, particularmente en estado condensado, es un
proceso ms complejo porque como se ha comentado antes, aumenta mucho el nmero de
estados de energa. Idealmente una transicin espectroscpica ocurrir entre un nico
estado inicial bien definido y el estado de alta energa ms cercano con un incremento de
una unidad en el nmero cuntico implicado. Con frecuencia no es este el caso, bien porque
exista ms de un estado de baja energa suficientemente poblado, o porque sea posible la
excitacin a ms de un estado de alta energa. As por ejemplo, las transiciones electrnicas
que dan lugar a los espectros visible-UV, van acompaadas de transiciones rotacionales y
vibracionales, y las vibracionales suelen ir acompaadas de absorciones rotacionales. En
este ltimo caso, cuando la muestra es gaseosa y el equipo lo permite, en un pequeo rango

de energa se observan varias absorciones conocidas como estructura fina. En ella se

pueden observar tres juegos de picos: uno central correspondiente a la transicin
vibracional pura (banda Q, prohibida en muchas molculas pequeas por la regla de
seleccin rotacional que requiere J = 1) y a mbos lado de ste varios picos en los que
hay un cambio en el nmero cuntico rotacional de +1 (Rama R) o -1 (Rama P)(Figura 3)

Figura 3a.Transiciones permitidas en un espectro rotacional vibracional

Figura 3b. Estructura fina de un espectro rotacional-vibracional tpico

Adems de los requerimientos poblacionales comentados, el uso de la mecnica

cuntica impone algunas limitaciones para que las transiciones tengan lugar. Las reglas de
seleccin indican qu transiciones tienen probabilidad de ocurrir (permitidas) y cuales no
(prohibidas), y, aunque varan entre las diferentes tcnicas, en general se cumple que las
transiciones entre dos estados de energa en los que un nico nmero cuntico cambia en
1 (v: nmero cutico vibracional, por ejemplo) son transiciones permitidas. La transicin
entre el estado ms bajo y el primer estado excitado (v = 0 v = 1) se llama transicin
fundamental. En ocasiones se observan transiciones prohibidas por las reglas de seleccin
(por ejemplo transiciones v = 0 v = 2,3, que se denominan sobretonos) aunque con
menor intensidad que las permitidas.
Otro fenmeno importante es la emisin de radiacin por parte de la materia cuando se la
somete a excitacin por bombardeo electrnico, por tratamiento trmico o por exposicin a
una chispa elctrica y posteriormente vuelve al estado fundamental de energa. Si las
partculas estn separadas entre s, como en el estado gaseoso, se obtiene un espectro de
pocas lneas espectrales (espectro discontinuo) que sirven para identificar especies.
Por contra, la materia en estado slido o lquido, tiene los tomos tan prximos que son
incapaces de un comportamiento independiente, por lo que al ser excitada se obtiene un
espectro continuo en el que todas las longitudes de onda estn representadas. Esta
propiedad de los slidos y lquidos permite utilizarlos como fuente de radiacin en varias
tcnicas instrumentales.
Los tomos excitados producen generalmente lneas espectrales, muy valiosas para realizar
identificaciones con fines analticos. Las molculas excitadas producen bandas espectrales.

3.-ESPECTROSCOPIA VISIBLE-ULTRAVIOLETA
Como se ha comentado, al interaccionar la radiacin electromagntica con la
materia se produce absorcin, siempre que la energa de la radiacin coincida con la
energa necesaria para que el sistema pase a un nivel energtico superior permitido. La
apariencia de un espectro visible-ultravioleta tpico y el rango de estudio se recogen en la
Figura 4:

A
(nm)
UV lejano
o de vacio

Rayos X

(nm)

10

UV cercano

200

Visible

400

IR
780

UV lejano o de vaco < 200 nm

UV cercano : 200-400 nm
Visible : 400-780 nm
Figura 4

3.1 Aspectos cuantitativos de las medidas de absorcin. Terminologa.

Las dos leyes fundamentales que rigen el comportamiento de la fraccin de radiacin
absorbida al pasar a travs de la materia son la ley de Lambert que se refiere al espesor de
muestra y al efecto sobre la radiacin que se absorbe, y la ley de Beer que est relacionada
con el efecto de la concentracin de la muestra sobre la absorcin.
La Figura 5 permite ver un haz de radiacin paralelo antes y despus de pasar por una
celda de espesor b que contiene una disolucin absorbente de concentracin c, teniendo

lugar la atenuacin de la intensidad de la radiacin; (P0>P) como consecuencia de la

interaccin entre los fotones y las partculas absorbentes.

Figura 5.-Atenuacin de un haz de radiacin por una solucin absorbente.

En esta figura se presentan tambin las magnitudes de uso ms frecuente en espectroscopia.
Transmitancia (T) es la fraccin de radiacin incidente transmitida por la solucin,
T=P/P , expresada en tanto por uno.
0

Absorbancia (A) es A=-log T=-log (P/P )

10

Para minimizar el efecto de otros procesos que atenan un haz de radiacin al pasar por una
disolucin, y que se recogen en la Figura 6, se compara la potencia del haz transmitido por
la disolucin que nos interesa con la potencia que atraviesa un recipiente idntico
conteniendo slo el disolvente de la muestra. (aparatos de doble haz)

Figura 6

Ley de Lambert-Beer: unificando estas dos leyes se obtiene la ley fundamental que rige la
absorcin de todos los tipos de radiacin electromagntica, aplicable a disoluciones y
tambin a gases y slidos. Nos dice que la absorbancia de radiacin electromagntica
producida por una especie absorbente es directamente proporcional a la trayectoria de la
radiacin a travs de la disolucin y a la concentracin en sta de la sustancia que produce
la absorcin.

A=a b c
log (P /P)=a b c=-log(P/P )=-log T
0

-a b c

P/P =10
0

a=constante de proporcionalidad, absortividad, es una propiedad intensiva

de la materia y por tanto relacionada nicamente con la naturaleza de la
misma.
b=trayectoria de la radiacin a travs de la muestra (cm)
c=concentracin (g/l) , entonces a tiene unidades de lg-1cm-1
La absortividad pasa a denominarse absortividad molar y se expresa con el smbolo ,
cuando la concentracin est en (moles/litro) y b en (cm), siendo sus unidades lmol-1cm-1.
Recta de calibrado: La ley de Lambert-Beer permite la determinacin de concentraciones
de disoluciones problema, a partir de una recta de calibrado obtenida midiendo las
absorbancias de disoluciones patrn de concentraciones conocidas. Para hacer las
determinaciones cuantitativas se elige, en general, la longitud de onda correspondiente a un
mximo, pues el error de medicin es mnimo y la sensibilidad mxima (Figura 7). Si es
vlida la ley de Beer para esa sustancia a esas concentraciones, la relacin debe ser una
recta que pase por el origen de los ejes cartesianos (Figura 7). A menudo se observan
desviaciones debidas a diversos factores.

10

Figura 7-Ley de Lambert-Beer. Recta de calibrado

Mezclas de absorbentes: Asimismo, la ley de Lambert-Beer se puede aplicar a

disoluciones que contengan varias especies absorbentes. La absorbancia total, a una
determinada longitud de onda, para un sistema de varios compuestos, viene dada por:
A1 = A

11

+A

21

+ ... + A

n1

= a .b.c + a .b.c + ... + a .b.c

11

21

n1

Para poder aplicar con xito la ley de Lambert-Beer a la determinacin de concentraciones

de mezclas, es necesario que cada compuesto presente un mximo de absorbancia en el
espectro ultravioleta-visible a longitudes de onda diferentes. Supongamos que tenemos dos
compuestos X e Y que presentan mximos de absorbancia a y respectivamente. En una
1

mezcla de ambos compuestos, mediramos la absorbancia a las dos longitudes de onda,

A1 = A

X1

A2 = A

X2

+A

=a

+A

=a

Y1
Y2

X1
X2

.b.c + a
X

.b.c + a
X

Y1
Y2

.b.c
.b.c

Y
Y

Las absortividades de cada compuesto a cada longitud de onda se conocen midiendo las
absorbancias de disoluciones de concentraciones conocidas de cada compuesto aislado.
Una vez conocidas las absortividades, tenemos un sistema de dos ecuaciones con dos
incgnitas: las concentraciones de cada compuesto en la mezcla.

11

Limitaciones de la ley de Lambert-Beer: No se conocen excepciones a la generalizacin

que la absorbancia est relacionada linealmente a la longitud del camino ptico. En cambio,
las desviaciones de la proporcionalidad directa entre la absorbancia medida y la
concentracin, para b constante, son ms frecuentes. Algunas de estas desviaciones son tan
fundamentales que representan limitaciones reales de la ley, otras ocurren como una
consecuencia de la manera en que se hacen las mediciones de absorbancia (desviaciones
instrumentales), o como un resultado de cambios qumicos asociados con cambios en la
concentracin(desviaciones qumicas). A continuacin se describen los principales factores
que limitan la aplicabilidad de la ley de Beer.
-2

La concentracin. Slo es aplicable a disoluciones diluidas (<10 M); en

disoluciones concentradas la distancia entre partculas absorbentes es tan
pequea que se produce una modificacin en la distribucin de cargas de las
mismas, lo que se traduce en una alteracin en la capacidad de absorcin a
una longitud de onda determinada. Este efecto se puede eliminar mediante
dilucin.
Desviaciones instrumentales por el uso de radiacin no
monocromtica, puesto que la ley est definida para radiaciones con una
sola longitud de onda. Sin embargo, si la calidad del equipo no es buena, se
obtienen bandas de radiaciones con un estrecho intervalo de longitudes de
onda. Tambin provoca desviaciones la presencia de radiacin dispersa.
Falta de uniformidad de la muestra o especie absorbente, o presencia
de impurezas.
Desviaciones qumicas, debidas a reacciones del absorbente con el
disolvente, como en el caso del dicromato en disoluciones no amortiguadas.
Para cualquier longitud de onda la absortividad molar del ion dicromato y
del cromato son muy diferentes, de modo que la absorbancia total depende
de la razn de concentraciones entre las formas dimricas y monomricas.
Esta razn cambia notablemente con la dilucin y provoca una desviacin de
la linealidad entre la absorbancia y la concentracin total de cromo(VI).

3.2 Aplicaciones de las medidas de absorcin de radiacin ultravioleta y visible.

La absorcin de radiacin UV-visible se puede producir como consecuencia de la
excitacin de los electrones de enlace, siendo en este caso una a herramienta til para
correlacionar la longitud de onda de los picos de absorcin con los tipos de enlace
existentes en la especie que se estudia (anlisis cualitativo). Tambin proporciona un

12

mtodo bastante selectivo para el anlisis cuantitativo de compuestos que produzcan

absorcin en esta regin del espectro electromagntico. Resulta interesante considerar tres
tipos de transicin electrnica en este rango y clasificar las especies qumicas que pueden
dar lugar a cada una de ellas. As se habla de 1) transiciones que involucran electrones, ,
y n; 2) transiciones relacionadas con electrones d y f; 3) transferencia de carga.
Especies absorbentes que contienen electrones, , y n. Comprenden principalmente
molculas e iones orgnicos y varios aniones inorgnicos relevantes en el anlisis de aguas,
como son nitrato (313 nm) y nitrito (360 y 280 nm) que presentan picos de absorcin en el
ultravioleta como consecuencia de transiciones n. En principio todos los compuestos
orgnicos contienen electrones que pueden ser excitados a niveles de energa ms altos. Las
energas de excitacin asociadas a electrones que forman enlaces sencillos () suelen
ser altas y caen en la regin ultravioleta en el vaco (<185 nm), cuyo estudio presenta
grandes dificultades experimentales. Es por esto que la regin ms estudiada es la de
>185 nm, en la que absorben un nmero limitado de grupos funcionales con electrones
ms fcilmente excitables. En la Figura 8 se representan los distintos niveles de energa en
los que puede encontrarse un electrn y las transiciones comnmente encontradas.

Orbitales Moleculares
*
n

Antienlazantes

*
n

No enlazantes

Enlazantes

Figura 8. Diagrama de niveles energticos para diferentes orbitales moleculares y

las transiciones posibles entre stos.

Los compuestos saturados con tomos que poseen pares solitarios de electrones
pueden presentar transiciones n por absorcin de radiacin entre 150 y 250 nm. Las
absortividades molares asociadas con este tipo de absorcin son intermedias en magnitud
(100-3000 lmol-1cm-1). Sin embargo, la mayora de las aplicaciones de la espectroscopia
13

de absorcin a compuestos orgnicos se basan en transiciones de electrones n o al estado

excitado , porque las energas requeridas en estos procesos producen picos en una regin
espectral conveniente (200-700 nm). En ambos casos es necesaria la presencia de un grupo
funcional insaturado que proporcione orbitales , que recibe el nombre de cromforo. Las
diferencias principales entre estos dos tipos de absorciones radican en que las transiciones
-1

-1

n presentan absortividades molares bajas (10-100 lmol cm ) y sus picos de

absorcin son desplazados a longitudes de onda ms cortas al aumentar la polaridad del

disolvente (cambio hipsocrmico o azul), mientras que para las transiciones los
valores de estn entre 1000 y 10000 lmol-1cm-1 y el aumento de polaridad del disolvente
produce un desplazamiento inverso (batcromico o al rojo) de los mximos de absorcin.
En la siguiente tabla se muestran algunos cromforos orgnicos comunes y la localizacin
aproximada de sus mximos de absorcin.

Cromforo
Alcano
Alquino
Alqueno
Alcohol
Eter
Cetona
Aldehido
Amina
Acido
Ester
Amida
Tiol
Nitro
Azo

Transicin

max

log()

135
170
175
180
180
180
280
190
290
190
205
205
210
210
271
340

--3.0
3.0
2.5
3.5
3.0
1.5
2.0
1.0
3.5
1.5
1.5
1.5
3.0
<1.0
<1.0

Como se ha comentado, la posicin de los mximos se ve afectada tanto por el

disolvente como por los detalles estructurales, y los picos suelen ser anchos debido a los
efectos vibratorios. Adems, la conjugacin de cromforos produce un importante efecto en
los mximos de absorcin, desplazndolos a longitudes de onda ms largas.

14

Por su parte los sistemas aromticos se caracterizan por tres bandas originadas en
transiciones que son afectadas de manera importante por los sustituyentes en el
anillo. Se habla de grupos auxocromos para referirse a grupos funcionales que no absorben
en la regin ultravioleta pero producen el efecto de desplazar los picos de los cromforos a
longitudes de onda ms largas y aumentar sus intensidades. Por ejemplo los grupos OH y
NH2 tienen efecto auxocrmico respecto al benceno.
Absorciones relacionadas con electrones d y f. La mayora de los iones de los metales de
transicin absorben en la regin ultravioleta o visible del espectro electromagntico. En el
caso de iones lantnidos y actnidos, y en contraste con la mayora de especies absorbentes,
sus espectros presentan picos de absorcin estrechos y bien definidos que adems se
afectan poco por el tipo de ligando unido al in metlico. En las transiciones asociadas a
estas absorciones participan los electrones que ocupan orbitales internos 4f y 5 f.
Por su parte, los iones y complejos de los 18 elementos de las dos primeras series de
transicin son coloreados en al menos uno de sus estados de oxidacin, aunque sus bandas
de absorcin son anchas y estn muy influidas por el entorno. Por ejemplo, el ion cobre(II)
en su forma acuosa es azul plido pero cuando forma complejo con el amoniaco es de color
azul oscuro. Las transiciones electrnicas asociadas a estas absorciones estn relacionadas
con los distintos niveles energticos de los cinco orbitales d.
Absorcin por transferencia de carga: Este es el tipo de absorcin ms importante con
fines analticos de las especies inorgnicas, puesto que las absortividades molares de los
picos son muy grandes ( > 10000). Muchos complejos inorgnicos, como el hierro(III)tiocianato, exhiben este tipo de absorcin y se denominan complejos de transferencia de
carga. En estos complejos es necesario que un componente tenga carcter dador de
electrones y el otro de aceptor, por lo que la absorcin implica la transicin de un electrn
del dador a un orbital asociado con el aceptor. El estado excitado es por tanto el producto
de un proceso interno de oxidoreduccin.
Tambin los compuestos orgnicos forman complejos de transferencia de carga interesantes
como la quinhidrona (complejo 1:1 de quinona-hidroquinona).

15

Aplicaciones al anlisis cualitativo. Las aplicaciones cualitativas de la espectroscopia

UV-visible son limitadas debido al nmero relativamente escaso de mximos y mnimos y
la anchura de las bandas, que en conjunto suelen hacer imposible la identificacin
inequvoca de una sustancia. No obstante, s se puede poner de manifiesto por esta tcnica
la presencia de ciertos grupos funcionales que actan como cromforos. As, una dbil
banda entre 280-290 nm que se desplaza a longitudes de onda ms cortas con el aumento de
la polaridad del disolvente es una indicacin de que un grupo carbonilo puede estar
presente, o una dbil banda en torno a 260 nm con atisbos de estructura fina vibratoria
indica la presencia de un anillo aromtico. Por otra parte, al escoger un disolvente hay que
tener en cuenta su transparencia y sus posibles efectos en el sistema absorbente. Por
ejemplo en disolventes polares como agua y alcoholes no suele observarse la estructura fina
producida por los efectos vibratorios. Puesto que las posiciones de los mximos se ven
influidas por la naturaleza del disolvente, es importante utilizar disolventes idnticos para
fines identificativos. En la siguiente Tabla aparecen algunos disolventes comunes y la
longitud de onda aproximada por debajo de la cual no pueden utilizarse.

En cuanto a la representacin grfica, para los estudios de tipo cualitativo se suelen preferir
grficas de log A log frente a la longitud de onda por ser ms convenientes en la
comparacin de espectros.
Aplicaciones al anlisis cuantitativo: La espectroscopia de absorcin es uno de los
instrumentos ms tiles de que dispone un qumico para realizar anlisis cuantitativo A
continuacin se enumeran las caractersticas ms importantes de los mtodos
espectrofotomtricos:
1. Amplio campo de aplicacin: Como ya se ha mencionado, son muchas las especies que
son activas en la regin del ultravioleta y visible, y por ello susceptibles de cuantificacin.

16

Son muchas ms las que con un tratamiento adecuado son capaces de formar especies
coloreadas.
2. Alta sensibilidad: Las absortividades molares de 10000-40000 son habituales,
especialmente para los complejos de transferencia de carga. En consecuencia, es posible el
anlisis para concentraciones dentro del intervalo de 10-4- 10-5 M o incluso ms bajas.
3. Selectividad moderada-alta: Aunque no es muy comn (se suele encontrar una longitud
de onda en la que el nico componente absorbente de una muestra sea la sustancia que se
determina) s es posible tener interferencias en UV-Visible. Cuando esto ocurre, es posible
emplear los mtodos para anlisis de multicomponentes, omitiendo as en muchos casos la
separacin de los interferentes.
3. Buena precisin: En estas tcnicas espectroscpicas es normal tener errores relativos del
1 al 3 %, por lo cual se puede considerar que se tendrn resultados analticos con una
incertidumbre mnima si se procede en la forma correcta.
4. Facilidad y Conveniencia: Aunque existen instrumentos altamente sofisticados
acoplados a computadoras y con sistemas pticos y electrnicos de alta precisin, es
posible obtener resultados muy aceptables para anlisis de rutina, con espectrofotmetros
ms sencillos a un costo muy accesible.
Procedimiento general: Los primeros pasos en un anlisis espectrofotomtrico consisten
en establecer las condiciones de trabajo y preparar una curva de calibracin que relacione
concentracin y absorbancia.
La eleccin de la longitud de onda es crucial y debe corresponder a un pico de absorcin,
porque el cambio de la absorbancia por unidad de concentracin es mayor en este punto y
se obtiene la sensibilidad mxima, adems de esperarse una buena adhesin a la ley de
Beer.
Es tambin importante conocer los efectos de variables como el pH, temperatura, naturaleza
del disolvente y escoger un conjunto de condiciones analticas adecuadas para que su
influencia sea minimizada. Una vez elegidas estas condiciones hay que preparar una curva
de calibracin a partir de disoluciones patrn. Estos patrones de deben aproximar a la
composicin de las muestras reales y abarcar una escala razonable de concentracin de las
especies a determinar. Por ltimo, la limpieza y manejo adecuado de las celdas es
fundamental en cualquier anlisis cuantitativo.

17

A continuacin se recoge un resumen de los mtodos instrumentales aplicados al anlisis de

aguas, en el que se aprecia la importancia de las determinaciones por medidas de absorcin.
En un documento anexo se presenta el mtodo para la determinacin de fsforo total por
espectrofotometra.

Mtodos instrumentales empleados en anlisis de aguas

+

2+

2+

2+

2+

ELECTRODOS SELECTIVOS H , NH , Cd , Ca , Cu , Pb , K , Ag , Na , iones

-

totales monovalentes, iones totales divalentes, Br , Cl , CN , F , I , NO , ClO , S

3

ESPECTROFOTOMETRIA Aniones, slice, nitrgeno Kjeldahl, cido sulfhdrico,

fsforo, flor, hierro, manganeso, cobre, cinc, aluminio, cromo, amonio, cloro residual,
fenoles, tensioactivos, DQO
FOTOMETRIA DE LLAMA Sodio, potasio, litio, estroncio
ABSORCION ATOMICA Metales
ICP Metales
-

CROMATOGRAFIA IONICA Br , Cl , NO , NO , SO , PO
3

3-

CROMATOGRAFIA DE GASES CG, CG-EM o HPLC Plaguicidas, hidrocarburos

aromticos

Otras aplicaciones:
Adems del anlisis de mezclas ya mencionado, la espectroscopia de absorcin presenta
algunas aplicaciones interesantes, como son la determinacin de la constante de equilibrio o
el estudio de puntos isosbsticos. Con frecuencia una especie absorbente, X, se convierte en
otra especie absorbente, Y, durante el curso de una reaccin qumica. Esta transformacin
implica un comportamiento caracterstico, muy obvio, que se muestra en la figura siguiente.
Si los espectros de los componentes puros X e Y se cruzan a una longitud de onda,
cualquier espectro registrado durante esta reaccin pasar por ese mismo punto, que se
llama punto isosbstico. La observacin de ste durante una reaccin qumica es una
buena prueba de que slo existen dos especies principales

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Tambin son de gran aplicacin las valoraciones espectrofotomtricas y el anlisis por

inyeccin en flujo. ste se basa en inyectar una muestra a una corriente de lquido en
movimiento que contiene los reactivos, y se caracteriza por ser un anlisis rpido y
fcilmente repetitivo. Despus de un tiempo la muestra que ya ha reaccionado llega al
detector, que suele ser una celda espectrofotomtrica. Este mtodo se usa mucho en anlisis
de aguas, anlisis mdicos y farmacuticos, as como en control de procesos industriales.
La siguiente figura muestra patrones y muestras analizadas por triplicado para medir el
contenido de etanol en bebidas, utilizndose una reaccin enzimtica que genera un
producto coloreado.

Bibliografa
Hollas, M. J. "Modern Spectroscopy" Ed. J. Wiley, New York (1987).
Harris, D. C. . " Anlisis Qumico Cauntitiativo" Ed. Revert, Barcelona (2001).
Olsen, E. D. "Mtodos Opticos de Anlisis" Ed. Revert, Barcelona (1986).
Skoog, D. A. y West, D. M. "Anlisis Instrumental" Ed. Interamricana, Mxico
(1989).

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