Asignatura de BIOLOGIA

3er Semestre
LABORATORIO

Escuela Militar de Ingeniera

Unidad Acadmica Cochabamba
Carrera de Ingeniera Agroindustrial

PRACTICA No 10
Reconocimiento de glcidos, LIPIDOS y PROTEINAS

1. RECONOCIMIENTO DE GLCIDOS
MATERIALES

Tubos de ensayo
Gradilla
Pinzas
Mechero
Pipetas
Solucin de Lugol
Solucin de Fehling A y B
Solucin alcalina (sosa, potasa, bicarbonato, etc.)
ClH diluido
Soluciones al 5% de glucosa, maltosa, lactosa, fructosa, sacarosa y almidn.

1.1. ESTUDIO DE AZCARES REDUCTORES

FUNDAMENTO
Los monosacridos y la mayora de los disacridos poseen poder reductor, que deben al grupo
carbonilo que tienen en su molcula. Este carcter reductor puede ponerse de manifiesto por medio de una
reaccin redox llevada a cabo entre ellos y el sulfato de Cobre (II). Las soluciones de esta sal tienen color
azul. Tras la reaccin con el glcido reductor se forma xido de Cobre (I) de color rojo. De este modo, el
cambio de color indica que se ha producido la citada reaccin y que, por lo tanto, el glcido presente es
reductor.

TCNICA
Poner en los tubos de ensayo 3ml de la solucin de glucosa, maltosa, lactosa fructosa o sacarosa (segn
indique el profesor).
Aadir 1ml de solucin de Fehling A (contiene CuSO 4) y 1ml de Fehling B (lleva NaOH para alcalinizar
el medio y permitir la reaccin)
Calentar los tubos a la llama del mechero hasta que hiervan.
La reaccin ser positiva si la muestra se vuelve de color rojo y ser negativa si queda azul o cambia a un
tono azul-verdoso.
Observar y anotar los resultados de los diferentes grupos de prcticas con las distintas muestras de
glcidos.

Gua de laboratorio

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Glcido

Glucosa

Maltosa

Lactosa

Fructosa

Sacarosa

Reductor

1.2. HIDRLISIS DE LA SACAROSA

FUNDAMENTO
La sacarosa es un disacrido que no posee carbonos anomricos libres por lo que carece de poder
reductor y la reaccin con el licor de Fehling es negativa, tal y como ha quedado demostrado en
el experimento 1. Sin embargo, en presencia de ClH y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es
decir, incorpora una molcula de agua y se descompone en los monosacridos que la forman,
glucosa y fructosa, que s son reductores. La prueba de que se ha verificado la hidrlisis se realiza
con el licor de Fehling y, si el resultado es positivo, aparecer un precipitado rojo. Si el resultado
es negativo, la hidrlisis no se ha realizado correctamente y si en el resultado final aparece una
coloracin verde en el tubo de ensayo se debe a una hidrlisis parcial de la sacarosa.
TCNICA

Tomar 3ml de solucin de sacarosa y aadir 10 gotas de ClH diluido.

Calentar a la llama del mechero durante unos 5 minutos.
Dejar enfriar.
Neutralizar aadiendo 3ml de solucin alcalina.
Realizar la prueba de Fehling como se indica en el experimento 1.
Observar y anotar los resultados.

1.3. INVESTIGACIN DE POLISACRIDOS (ALMIDN)

FUNDAMENTO

El almidn es un polisacrido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la

amilopectina. La primera se colorea de azul en presencia de yodo debido no a una reaccin
qumica sino a la adsorcin o fijacin de yodo en la superficie de la molcula de amilosa, lo cual
slo ocurre en fro. Como reactivo se usa una solucin denominada lugol que contiene yodo y
yoduro potsico. Como los polisacridos no tienen poder reductor, la reaccin de Fehling da
negativa.

TCNICA

Colocar en un tubo de ensayo 3ml de la solucin de almidn.

Aadir 3 gotas de la solucin de lugol.
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Observar y anotar los resultados.

Calentar suavemente, sin que llegue a hervir, hasta que pierda el color.
Enfriar el tubo de ensayo al grifo y observar cmo, a los 2-3 minutos, reaparece el color azul.

RESULTADOS Y ANOTACIONES

2. RECONOCIMIENTO DE LPIDOS
MATERIALES
-

Tubos de ensayo
Gradilla
Varillas de vidrio
Mechero
Vasos de precipitados
Pipetas

Solucin de NaOH al 20%

Solucin de Sudn III
Tinta china roja
Eter, cloroformo o acetona
Aceite de oliva

2.1. SAPONIFICACIN
FUNDAMENTO
Las grasas reaccionan en caliente con el hidrxido sdico o potsico descomponindose en los dos
elementos que las integran: glicerina y cidos grasos. stos se combinan con los iones sodio o
potasio del hidrxido para dar jabones, que son en consecuencia las sales sdicas o potsicas de los
cidos grasos. En los seres vivos, la hidrlisis de los triglicridos se realiza mediante la accin de
enzimas especficos (lipasas) que dan lugar a la formacin de cidos grasos y glicerina.
TCNICA

Colocar en un tubo de ensayo 2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%.

Agitar enrgicamente y colocar el tubo al bao Mara de 20 a 30 minutos.

Pasado este tiempo, se pueden observar en el tubo 3 fases: una inferior clara que contiene la
solucin de sosa sobrante junto con la glicerina formada, otra intermedia semislida que es el jabn
formado y una superior lipdica de aceite inalterado.

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2.2. TINCIN
FUNDAMENTO
Los lpidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudn III.
TCNICA

Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2ml de aceite.

Aadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solucin alcohlica de Sudn III.

Al otro tubo aadir 4-5 gotas de tinta roja.

Agitar ambos tubos y dejar reposar.

Observar los resultados: en el tubo con Sudn III todo el aceite tiene que aparecer teido,
mientras que en el tubo con tinta, sta se ir al fondo y el aceite no estar teido.
2.3. SOLUBILIDAD
FUNDAMENTO
Los lpidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequesimas
gotas formando una emulsin de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por
reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sita sobre el agua.
Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes orgnicos, como el ter, cloroformo, acetona,
benceno, etc.
TCNICA

Poner 2ml de aceite en dos tubos de ensayo.

Aadir a uno de ellos 2ml de agua y al otro 2ml de ter u otro disolvente orgnico,

Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar.

Observar los resultados: Se ver cmo el aceite se ha disuelto en el ter y, en cambio no lo

hace en el agua y el aceite subir debido a su menor densidad.
CUESTIONES
1.
Qu son los jabones?
2.
Cmo se pueden obtener los jabones?
3.
Por qu en la saponificacin la glicerina aparece en la fase acuosa?
4.
Qu enzima logra en el aparato digestivo la hidrlisis de las grasas?
5.
Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudn III y aceite-tinta y explica a qu se debe la
diferencia entre ambos resultados.
6.
Qu ocurre con la emulsin de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo?Y con
la de benceno y aceite?A qu se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones?
RESULTADOS OBTENIDOS

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3. RECONOCIMIENTO DE PRTIDOS
MATERIALES
-

Tubos de ensayo
Gradilla
Mechero
Vasos de precipitados
Pipetas

Solucin de HCl concentrado

Alcohol etlico
Solucin de SO4Cu al 1%
NaOH al 20%
Clara de huevo o leche
Solucin de albmina al1-2%

3.1. COAGULACIN DE LAS PROTENAS

FUNDAMENTO
Las protenas debido al gran tamao de sus molculas forman con el agua soluciones coloidales que
pueden precipitar formndose cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70C o al ser
tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc.
La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los
agentes indicados que al actuar sobre la protena la desordenan por destruccin de sus estructuras
secundaria y terciaria.
TCNICA

Colocar en tres tubos de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo (puede diluirse en
un poco de agua para obtener una mezcla espesa) o 2-3ml de leche.

Calentar uno de los tubos al bao Mara, aadir a otro 2-3ml de HCl concentrado y al tercero
2 3ml de alcohol etlico.

Observar los resultados.

3.2. REACCIONES COLOREADAS ESPECFICAS (BIURET)

FUNDAMENTO
Entre las reacciones coloreadas especficas de las protenas, que sirven por tanto para su
identificacin, destaca la reaccin del Biuret. Esta reaccin la producen los pptidos y las protenas,
pero no los aminocidos ya que se debe a la presencia del enlace peptdico CO-NH que se destruye
al liberarse los aminocidos.
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El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre(II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se
coordina con los enlaces peptdicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad
de color depende de la concentracin de protenas.
TCNICA

Colocar en un tubo de ensayo 3ml de solucin de albmina al 1-2%.

Aadir 4-5 gotas de solucin de SO4Cu al 1%.

Aadir 3ml de solucin de NaOH al 20%.

Agitar para que se mezcle bien.

Observar los resultados.

CUESTIONES
1.
Cmo se manifiesta la desnaturalizacin de la clara de huevo?
2.
Cul de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalizacin?
3.
Cmo podramos saber que una sustancia desconocida es una protena?
4.
Qu coloracin da la reaccin del Biuret?
5.
Una protena coagulada podra dar la reaccin del Biuret?
6.
Si se realiza la reaccin del Biuret sobre un aminocido como la Glicina es positiva o
negativa? Por qu?

RESULTADOS OBTENIDOS

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