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1, 2 e 3
Bruno Azevedo
Mrcia Attias
Narcisa Cunha e Silva
Prescilla Emy Nagao
Biologia Celular II
Volume nico
Biologia Celular II
Volume nico - Mdulos 1, 2 e 3
Bruno Azevedo
Mrcia Attias
Narcisa Cunha e Silva
Prescilla Emy Nagao
Apoio:
Material Didtico
Departamento de Produo
ELABORAO DE CONTEDO
Bruno Azevedo
Mrcia Attias
Narcisa Cunha e Silva
Prescilla Emy Nagao
EDITORA
PROGRAMAO VISUAL
Tereza Queiroz
Renata Borges
Sanny Reis
COORDENAO EDITORIAL
COORDENAO DE DESENVOLVIMENTO
INSTRUCIONAL
Jane Castellani
REVISO TIPOGRFICA
DESENVOLVIMENTO INSTRUCIONAL
E REVISO
COORDENAO DE
PRODUO
Jorge Moura
ILUSTRAO
Equipe CEDERJ
CAPA
Jefferson Caador
PRODUO GRFICA
COORDENAO DE LINGUAGEM
Marta Abdala
A994b
Azevedo, Bruno.
Biologia celular II. v. nico / Bruno Azevedo et al. Rio de
Janeiro : Fundao CECIERJ, 2009.
261p.; 19 x 26,5 cm.
ISBN: 85-7648-134-0
1. Ciclo celular. 2. Ncleo interfsico. 3. Funes celulares. 4.
Matriz extracelular. 5. Clula nervosa. 6. Clula muscular.
7. Clulas-tronco. 8. Clula apoptptica. I. Attias, Mrcia. II.
Silva, Narcisa Cunha e. III. Nagao, Prescilla Emy. IV. Ttulo.
CDD: 571.6
2009/1
Referncias Bibliogrficas e catalogao na fonte, de acordo com as normas da ABNT.
Governador
Srgio Cabral Filho
Universidades Consorciadas
UENF - UNIVERSIDADE ESTADUAL DO
NORTE FLUMINENSE DARCY RIBEIRO
Reitor: Almy Junior Cordeiro de Carvalho
Biologia Celular II
SUMRIO
Volume nico
Mdulo 1
Aula 1 - O ciclo celular _____________________________________________ 7
Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva
Mdulo 2
Aula 5 - Junes celulares 1: Junes ocludentes _______________________ 77
Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva / Prescilla Emy Nagao
Mdulo 3
Aula 10 - A clula nervosa ________________________________________ 145
Mrcia Attias / Narcisa Cunha e Silva
Gabarito ____________________________________________247
objetivos
AULA
O ciclo celular
Pr-requisito
Sinalizao celular
(Aulas 13 e 14
de Biologia Celular I)
INTRODUO
O ciclo celular, que voc estudar agora do ponto de vista celular, j foi
estudado na disciplina Gentica.
Ao longo de toda a vida de um organismo, mesmo depois de terminado
o perodo de crescimento, vrias de suas clulas continuaro se dividindo,
seja para renovao de tecidos, como o epitlio intestinal e as clulas
sangneas, seja para reparo de leses, como um corte na pele ou a
fratura de um osso.
A etapa de diviso celular, que voc estudar na Aula 2, compreende a
mitose, na qual o DNA dividido em duas cpias idnticas, e a citocinese,
quando a membrana plasmtica se estrangula, dividindo o citoplasma,
suas organelas e estruturas, entre as clulas-filhas. Cada clula-filha entra
ento no perodo de intrfase. O nome intrfase induz idia de que
esse perodo apenas o intervalo entre duas divises celulares. Quando os
perodos do ciclo celular foram denominados, os pesquisadores realmente
consideravam a intrfase apenas como o intervalo entre duas divises,
porque eram as divises celulares que mais chamavam a ateno, eram
mais fceis de observar, por isso mais estudadas. Com o tempo, ficou claro
que durante a intrfase que a clula desempenha todas as suas funes.
Nesse perodo, ocorre a sntese de componentes celulares citoplasmticos
e a duplicao do DNA. Uma diviso sempre precedida de uma intrfase
e aps a intrfase muitas vezes sobrevm uma diviso. Essa , em essncia,
a dinmica do ciclo celular (Figura 1.1).
8 CEDERJ
MDULO 1
AULA
CEDERJ 9
Figura 1.2: Em A, a representao do ciclo celular de uma clula epitelial; em B, de um hepatcito. Embora clulas
epiteliais se dividam a cada 24 horas, aproximadamente, e clulas hepticas apenas uma vez a cada dois anos, o tempo
gasto pelos diferentes tipos celulares nas fases S, G2 e M aproximadamente igual. O que varia a durao de G1.
Figura 1.3: No incio de seu desenvolvimento, o zigoto sofre sucessivas clivagens, um tipo
de ciclo celular no qual a intrfase curta e no ocorre crescimento das clulas-filhas.
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MDULO 1
AULA
C E D E R J 11
Injeo de extrato
Injeo de extrato
de citoplasma de
zigoto na fase M
Ncleo
de citoplasma de
Formao de
clula em intrfase
fuso mittico
Ovcito no se divide
12 C E D E R J
MDULO 1
AULA
Figura 1.7: A concentrao citoplasmtica da ciclina disparadora da mitose aumenta gradativamente durante a intrfase, caindo abruptamente ao final da mitose. A concentrao da quinase
promotora da mitose constante ao longo de todo o ciclo celular, apenas sua atividade varia.
C E D E R J 13
Quinase dependente
de ciclina (Cdk)
14 C E D E R J
MDULO 1
AULA
Figura 1.9: Ao longo do ciclo celular existem trs pontos de checagem: em G1, G2 e em M. Em cada um
desses pontos, so checados os itens correspondentes s perguntas contidas nas caixas. Se todos estiverem corretos, a clula passa etapa seguinte, cumprindo a ordem inserida na caixa sombreada.
C E D E R J 15
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MDULO 1
M-ciclina
Quinase
inibitria
Fosfato
inibidor
AULA
MPF inibido
Fosfato
ativador
M-Cdk
Quinase
ativadora
M-Cdk
Fosfatase
ativadora
MPF ativado
C E D E R J 17
fosforilao
das
laminas,
filamentos
Ciclina mittica
Cdk
MPF
Substratos a serem
Quinase start
Ciclina de G1
Substratos a serem
fosforilados
fosforilados
na mitose
em START
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Cdk
MDULO 1
AULA
M-ciclina
M
M-Cdk
G-Cdk
G2
G1
G-ciclina
G- Ciclina degradada
em proteassomas
Iniciar duplicao do DNA
Figura 1.12: Em cada etapa do ciclo celular, diferentes Cdks so ativadas por ciclinas especficas. Finda a etapa, as ciclinas so destrudas em proteassomas. No esquema, esto
representados apenas a ativao da duplicao do DNA e o disparo da diviso celular.
C E D E R J 19
p53 inativa
leso no DNA
Ativao
da
p53
p53 ativa
A p53 ativada liga-se regio
reguladora do gene p21
p21 gene
Transcrio
mRNA p21
Traduo
p21 (protena
inibidora de Cdk)
ATIVO
complexo ciclina-Cdk
de fase S
INATIVO
complexo ciclina-Cdk
p21 de fase S
Figura 1.13: Mecanismo de inibio da atividade do complexo ciclina-Cdk provocado por uma leso no DNA.
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MDULO 1
AULA
C E D E R J 21
Dividir at quando?
Cada tipo celular que compe um organismo parece j ter uma
programao intrnseca de quantas vezes vai se dividir antes de morrer.
Tomando como exemplo um fibroblasto humano: se ele for retirado
de um embrio e mantido em cultura de clulas em condies ideais
de nutrio e espao, vai se dividir cerca de 80 vezes; j um fibroblasto
humano retirado de um adulto de 40 anos, mantido nas mesmas
condies, vai se dividir cerca de 40 vezes apenas. Essa observao coloca
em evidncia uma possvel relao entre o controle do ciclo celular e o
envelhecimento e a longevidade.
Procurando o mecanismo de controle do nmero de divises que
uma clula capaz de realizar, os achados apontam para a replicao do
genoma. A cada replicao, a ponta do cromossomo, o telmero, precisa
ser restaurada por uma enzima, a telomerase. Nas clulas humanas,
o gene que codifica a telomerase no expresso em clulas somticas do
adulto. Por isso, a cada diviso celular, o telmero fica mais curto, at
que no mais possvel replicar o cromossomo corretamente. Clulas
podem se manter nessa situao, denominada senescncia celular, por
longo tempo realizando perfeitamente suas funes antes de morrer.
A manuteno das propores corporais depende da
entrada e sada, no ciclo celular, de cada clula do organismo
no momento exato.
Alm da velocidade com que as clulas se dividem, outro fator
importante no controle do nmero de clulas de um organismo
a apoptose ou morte celular programada, que ser discutida na
Aula 14 de Biologia Celular II.
22 C E D E R J
MDULO 1
O ciclo celular constitudo por uma intrfase, subdividida em G1, S e G2, e uma
fase de diviso, denominada M.
O controle interno do ciclo celular exercido por molculas citoplasmticas: as
ciclinas, que vo se acumulando em cada fase do ciclo, e as quinases dependentes
de ciclina (Cdk), presentes em quantidades constantes por todo o ciclo.
Quando as ciclinas atingem concentraes reativas numa fase, elas se combinam
com as quinases, promovendo a passagem para a prxima fase.
O complexo formado pela M-Cdk e a M-ciclina se chama MPF e dispara a mitose,
fosforilando vrias protenas, dentre elas as que compactam os cromossomos, as
que desmontam o envoltrio nuclear e as que levam os microtbulos a formar
o fuso mittico.
No final de cada fase do ciclo, as ciclinas so degradadas em proteassomas.
O ciclo celular tambm tem um controle externo, dado pela disponibilidade
de nutrientes, de espao e de fatores de crescimento.
Em conjunto, os controles interno e externo formam os pontos de checagem:
no final de G1, a clula precisa ter o volume suficiente e o ambiente favorvel
para entrar em S. No final de G2, alm do ambiente e do volume favorveis,
preciso que o genoma esteja correta e completamente duplicado. Na metfase,
os cromossomos precisam estar todos alinhados para que a diviso prossiga.
Clulas bastante diferenciadas, como neurnios e msculos, escapam do ciclo
celular em G1 e permanecem num estado de quiescncia chamado G0, a partir
do qual podem at voltar ao ciclo em algum momento.
C E D E R J 23
AULA
RESUMO
EXERCCIOS
1. O que e quais so as fases que compem o ciclo celular?
2. O que so ciclinas? Como atuam?
3. O que so Cdks? Como atuam?
4. O que MPF?
5. O que acontece com as ciclinas de uma determinada fase do ciclo quando
a mesma se encerra?
6. Como feito o controle externo do ciclo celular?
7. O que so pontos de checagem?
8. O que G0?
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objetivos
AULA
A clula em diviso
Pr-requisito
Microtbulos (Aula 23 de Biologia Celular I).
INTRODUO
FASES DA MITOSE
A mitose inclui uma seqncia de eventos que, embora nem
sempre possam ser claramente delimitados, foram divididos em fases.
Provavelmente, esses nomes so seus velhos conhecidos:
1. Prfase
2. Prometfase
3. Metfase
4. Anfase
5. Telfase
citocinese
26
CEDERJ
MDULO 1
2
AULA
S/G2
Citocinese
G1
Metfase
Incio da prfase
Prfase
Figura 2.1: Aspecto do ncleo e centrossomos nas diferentes fases do ciclo celular. A duplicao dos cromossomos e
dos centrolos precede a fase M propriamente dita. Esta tem incio com a prfase, em que os cromossomos comeam a
se condensar, individualizando-se. Na metfase, cada centrossomo ocupa um plo da clula e dele partem microtbulos que formam o fuso mittico. Os cromossomos se encontram alinhados no plano mdio da clula, eqidistantes
dos dois plos. Na anfase, o material gentico (cromossomos) dividido igualmente, migrando em sentidos opostos para os dois plos da clula. A ltima fase da mitose a citocinese, ou seja, a separao das duas clulas-filhas.
CEDERJ
27
C
B
A
(b)
(a)
Figura 2.2: (a) Um par de centrolos observado ao microscpio eletrnico. Note que um centrolo sempre est posicionado a 90 graus em relao ao outro. (b) Esquema da estrutura do centrolo composta por nove trios de microtbulos, designados como A, B e C. Cada centrolo mede cerca de 100nm.
(Foto: M., McGill, D.P., Highfield, T.M., Monahari e B.R. Brinkley, J. Ultrastr. Res. 57: 43-53,1976).
G1
G2
G1
Figura 2.3: Apenas um dos centrolos de um par est ligado matriz pericentriolar. Na fase S, os centrolos de um par se
distanciam e cada um d origem a um novo centrolo. O centrolo mais antigo ser sempre o dominante no novo par.
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CEDERJ
MDULO 1
AULA
PRFASE
Na prfase, o envoltrio nuclear ainda se encontra intacto.
nesta etapa que os cromossomos duplicados se condensam
e assumem sua forma caracterstica de dois bastes, as cromtides-irms,
ligados pelo centrmero (Figura 2.4).
Figura 2.4: Cromossomo na forma condensada e duplicada observado ao microscpio eletrnico de varredura. O estrangulamento que mantm as cromtides
unidas o centrmero (seta). (Foto: Terry Allen)
1m
CEDERJ
29
ATP
ATP
Cromtides-irms
(a)
Figura 2.5:
(a) Tanto as
Hlice de DNA
(c)
(b)
ligarem-se s hlices de DNA, aproximando-as. A coesina (b) aproxima as duas cromtides-irms, enquanto
a condensina (c) ajuda na espiralizao da cadeia de DNA, resultando na condensao do cromossomo.
PROMETFASE
Nas descries mais antigas da prometfase, dizia-se que nessa
fase do ciclo celular o envoltrio nuclear desaparecia. Na verdade, o
envoltrio nuclear, o retculo endoplasmtico e o complexo de Golgi no
so visveis nessa fase porque se fragmentam em vesculas, permitindo
que alguns microtbulos do fuso acromtico se liguem ao cinetcoro
dos cromossomos, j totalmente condensados.
O cinetcoro um complexo de protenas que se liga
aos cromossomos na regio do centrmero (Figura 2.7).
30
CEDERJ
MDULO 1
Cromossomo
Centrmero
Cinetcoro
AULA
condensado
Microtbulos
cinetocoriais
Cromtide
Cent
rosso
mo
nt
ro
sso
mo
Figura 2.8: Na prometfase, os cromossomos so puxados pelos microtbulos do fuso. A maior fora
exercida pelos microtbulos mais longos (cromossomo da parte superior da figura). No plano mdio,
as foras se equilibram (cromossomo da parte inferior da figura) e o cromossomo permanece alinhado.
CEDERJ
31
METFASE
Na metfase, o fuso acromtico j est plenamente desenvolvido e
os cromossomos se alinham no plano equatorial da clula, eqidistantes
dos dois plos. Alm dos microtbulos astrais isto , que compem o
ster , e dos microtbulos cinetocoriais que se ligam ao cinetcoro
dos cromossomos , o fuso possui microtbulos que desempenham uma
terceira funo. Trata-se de microtbulos que partem dos plos opostos
e se interpenetram no plano equatorial da clula. Podemos cham-los
microtbulos interpenetrantes (Figura 2.9). Os trs tipos de microtbulos
so altamente dinmicos, polimerizando-se e despolimerizando-se mais
rapidamente que os microtbulos das clulas interfsicas e formam o
fuso acromtico ou fuso mittico (Figura 2.9). Conforme as foras
exercidas pelos microtbulos cinetocoriais ligados a cada uma das
cromtides-irms se equilibram, encolhendo de um lado e alongandose do outro, os cromossomos vo se dispondo na placa equatorial.
Esta a fase mais demorada da mitose e a diviso s prossegue quando todos
os cromossomos se encontram alinhados.
Microtbulos astrais
Cinetcoro
Microtbulos
Microtbulos
cinetocoriais
interpenetrantes
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CEDERJ
MDULO 1
AULA
ANFASE
Na anfase, as cromtides-irms se separam e cada uma delas
puxada pelos microtbulos cinetocoriais em direo a plos opostos.
Voc pode estar se perguntando: como as cromtides-irms se
separam se elas esto ligadas pela coesina?
Boa pergunta! A resposta bastante simples: a enzima
separase se encarrega de cortar as pontes formadas pela coesina.
Assim, cada cromtide puxada para um plo pelos microtbulos
cinetocoriais respectivos.
A migrao dos cromossomos para plos opostos resulta no
apenas do encolhimento dos microtbulos cinetocoriais. Protenas
motoras associadas aos microtbulos interpenetrantes tambm
contribuem para que haja entre eles um deslizamento que aumenta
a distncia entre os plos (Figura 2.10).
Ainda no foi possvel explicar como subunidades de tubulina
podem se soltar da extremidade do microtbulo voltada para o cinetcoro
sem que a ligao entre a cromtide e o microtbulo se desfaa.
O distanciamento provocado pelo deslizamento entre microtbulos
do fuso o prenncio da ltima fase da diviso celular, a telfase.
(a)
(b)
Protenas motoras
Zona de crescimento
dos
microtbulos
Figura 2.10: O afastamento das cromtides resulta de duas foras complementares. (a) Os microtbulos cinetocoriais se despolimerizam e (b) os microtbulos que se superpem crescem. Alm disso, protenas motoras
promovem o deslizamento entre eles.
CEDERJ
33
TELFASE
A telfase corresponde ao final da mitose. Nessa etapa,
os cromossomos j se encontram segregados em plos opostos
da clula e distanciados pelos microtbulos que se superpem
(Figura 2.11). Esse distanciamento fundamental para que ocorra a
distribuio do citoplasma e das organelas entre as duas clulas-filhas.
Esse processo chamado citocinese.
Os microtbulos astrais tambm exercem fora de separao
entre as clulas-filhas deslizando sobre protenas motoras ligadas
membrana plasmtica (Figura 2.12).
Regio central de
Regio de
superposio dos
Plo
microtbulos
Plo
Microtbulos
superposio
do plo
reduzida
2m
Figura 2.11: Na clula esquerda, a sobreposio dos microtbulos maior que na da direita. Isso resulta
em que os cromossomos esto mais afastados na segunda. (Foto: Jeremy D. Pickett-Heaps em Molecular
Biology of the Cell, Garland Publ. Co.,3rd ed.)
(a)
Afastamento pelo deslizamento
entre microtbulos superpostos
(b)
Figura 2.12: A interao com protenas motoras leva os microtbulos a se afastarem no plano equatorial da clula (a), ou a empurrar a membrana plasmtica por ao de protenas motoras acopladas a ela (b).
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CEDERJ
MDULO 1
AULA
Anel contrtil
Figura 2.13: A separao entre as clulas-filhas se d pelo estrangulamento resultante do deslizamento do anel de constrio, formado por filamentos de actina e
molculas de miosina. (Foto: Mrcia Attias)
CEDERJ
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Complexo de Golgi
G2
G1
Telfase
Banda de microtbulos
O fragmoplasto formado na telfase
pelos microtbulos sobrepostos. Vesculas derivadas do complexo de Golgi carreando precursores da parede celular se
associam a esses microtbulos, acumulando-se na regio equatorial e fundindo-se
para formar a placa crivada primordial.
Microtbulos do fuso
Citocinese
Microtbulos associados ao fragmoplasto
se formam na periferia da placa crivada
primordial. Novas vesculas derivadas do
Golgi so recrutadas para essa regio,
fundindo-se com a borda da parede celular,
estendendo-se para fora. Os microtbulos impedem a total fuso dessas memPlaca crivada primordial
Microtbulos ligados
ao fragmoplasto
G1
A membrana da placa crivada em expanso funde-se membrana plasmtica
da clula-me, completando a nova
parede celular. O arranjo cortical de
microtbulos interfsicos restaMicrotbulos corticais
Plasmodesmas
36
CEDERJ
MDULO 1
AULA
CEDERJ
37
Cromossomo
Bactrias
Cromossomos-filhos aderidos
membrana plasmtica so separados
pelo crescimento da mesma.
Membrana plasmtica
Dinoflagelados tpicos
Vrios feixes de microtbulos passam
atravs de tneis no envelope nuclear
intacto, estabelecendo a polaridade
da diviso. Os cromossomos se movem
associados membrana nuclear interna,
Cromossomo
Envoltrio nuclear
intacto
Outros protozorios
Um nico feixe de microtbulos forma o
fuso que atravessa o envoltrio nuclear,
formando um tnel. Os cromossomos
Centrolos
Microtbulos
Microtbulos
polares
cinetocoriais
38
CEDERJ
microtbulos cinetocoriais.
MDULO 1
Microtbulos
cinetocoriais
polares
Microtbulos cinetocoriais
Clulas de animais
Centrolos
RESUMO
Quando a fase M (mitose) se inicia, os cromossomos e os centrossomos j foram
duplicados, nas fases S e G2.
Na prfase, os dois centrossomos se separam e comeam a se dirigir para
plos opostos da clula. Os cromossomos tambm iniciam o processo de
individualizao.
A prometfase a fase em que o envoltrio nuclear se fragmenta e alguns
microtbulos do fuso capturam os cromossomos.
Os cromossomos duplicados permanecem unidos pelo centrmero. Um complexo
de protenas ao redor do centrmero constitui o cinetcoro. Os cromossomos se
ligam ao fuso sempre pelo cinetcoro.
Foras antagnicas, exercidas pelos microtbulos que partem dos plos, levam os
cromossomos para o plano equatorial da clula, formando a placa metafsica.
A enzima separase corta a ligao entre as cromtides-irms e cada uma delas
se dirige a um dos plos. Essa separao essencial para a anfase.
Na anfase, dois mecanismos levam ao afastamento das cromtides-irms: a
despolimerizao dos cromossomos cinetocoriais e o deslizamento, mediado por
protenas motoras, entre os cromossomos sobrepostos.
Na telfase, novo envoltrio nuclear se forma em torno de cada ncleo-filho e
o citoplasma se contrai no plano equatorial. Os microtbulos do fuso predizem o
local onde o anel contrtil, formado por actina e miosina, se formar, levando
separao das clulas-filhas.
CEDERJ
39
AULA
Microtbulos
EXERCCIOS
1. Qual o principal objetivo da diviso celular?
2. Quais so as fases tradicionalmente estabelecidas para descrever a diviso
celular?
3. Em que etapa do ciclo celular ocorre:
a) Duplicao dos cromossomos?
b) Condensao dos cromossomos?
c) Duplicao dos centrossomos?
d) Formao do fuso mittico?
e) Migrao dos cromossomos para o equador da clula?
f) Formao da placa metafsica?
g) Migrao dos cromossomos para os plos?
h) Desagregao e reorganizao do envoltrio nuclear?
4. Qual o papel das seguintes protenas que participam da diviso celular?
Coesina:
Condensina:
Separase:
5. Como os microtbulos podem participar da mitose?
6. O que a citocinese?
40
CEDERJ
objetivos
AULA
Ncleo interfsico
Pr-requisitos
Compartimentalizao celular (Aula 15 de Biologia Celular I).
Controle do ciclo celular (Aula 1 de Biologia Celular II).
Diviso celular (Aula 2 de Biologia Celular II).
INTRODUO
Flagelos
a
Miofibrila
Ncleos
IMPORTNCIA EVOLUTIVA
Voc aprendeu em Biologia Celular I (Aula 15) que a compartimentalizao foi um grande avano evolutivo porque permitiu que as diferentes funes
celulares pudessem ser distribudas em diferentes locais, onde as molculas
envolvidas em determinada atividade celular esto prximas. Esse raciocnio
se aplica perfeitamente ao compartimento nuclear, mas h outras vantagens
que tornaram o aparecimento do ncleo evolutivamente to importante.
42
CEDERJ
MDULO 1
3
AULA
2mm
Ncleo
DNA
Transcrio
RNA
Processamento
mRNA
Protena
Citoplasma
CEDERJ
43
44
CEDERJ
MDULO 1
AULA
Envoltrio nuclear
Complexo do poro
Lmina nuclear
Cromatina aderida
Matriz nuclear
1m
Cromatina
Ncleo
Retculo endoplasmtico
Centrossomo
Filamentos intermedirios
Microtbulos
Lmina nuclear
Poro
1m
Membrana externa
Membrana interna
Envoltrio nuclear
CEDERJ
45
ORGANIZAO DA CROMATINA
Voc est estudando a organizao do DNA e seu metabolismo
em Biologia Molecular, por isso aqui s vamos abordar alguns aspectos
da organizao do DNA de eucariotos, especialmente na intrfase.
Como acabamos de ver, o genoma dos eucariotos muito grande,
e esse tamanho torna difcil sua acomodao dentro do ncleo.
necessrio que as molculas de DNA estejam compactadas.
O grau de compactao do DNA varia no ciclo celular, como j
foi mencionado nas duas ltimas aulas, atingindo seu mximo na fase
M, quando possvel individualizar, contar e classificar as molculas
de DNA, ali chamadas cromossomos. Existem regies do cromossomo
essenciais para a manuteno de sua integridade e para que possa
haver replicao. Essas regies so o centrmero, os telmeros e as
origens de replicao (Figura 3.6). Nos eucariotos, as molculas de
DNA esto compactadas com protenas, formando o arranjo que ns
chamamos cromatina.
Telmero
Origem de
replicao
Centrmero
Origem de
replicao
Telmero
Bolha de replicao
Cinetcoro
Cromossomos duplicados
em clulas
CEDERJ
MDULO 1
3
AULA
Histonas do
nucleossomo
DNA de ligao
Nucleossomos
liberados
11nm
H2B
H3
H4
47
Histona H1
Octmero
de histomas
b
50nm
1
6
4
30nm
5
3
3
4
a
48
CEDERJ
MDULO 1
AULA
RNA
Regies condensadas
da cromatina
DNA
degradado
CEDERJ
49
Cromossomo metafsico
1400nm
inteiro
Segmento de cromossomo
na forma condensada
700nm
Segmento de cromossomo
300nm
na forma estendida
30nm
nucleossomos compactados
Colar de contas de
nucleossomos
11nm
hlice de DNA
50
CEDERJ
MDULO 1
3
AULA
5 m
DOENAS
DOENAS
AUTO-IMUNES
So causadas por
falhas do sistema
imune, que no elimina
clulas produtoras
de anticorpos que
reconhecem as
molculas do prprio
indivduo (self). Os
pacientes dessas doenas
possuem na circulao
anticorpos que
conhecem e atacam suas
prprias clulas.
CEDERJ
51
NUCLOLO
Ainda reparando nas micrografias do ncleo interfsico, voc diria
que h outra regio eletrondensa, que, portanto, deve corresponder
heterocromatina: o nuclolo. Nesse caso, no entanto, a correlao no
se aplica. O nuclolo eletrondenso por outro motivo. Na verdade, seria
injusto dizer que o nuclolo heterocromatina. Se heterocromatina o
estado compactado, aquele inacessvel a enzimas, portanto, quiescente,
o nuclolo tudo menos isso! Talvez voc j tenha ouvido antes que o
nuclolo uma fbrica de ribossomos. Como tal, uma das regies do
ncleo que mais trabalha! Na verdade, no nuclolo esto os genes que
codificam para os RNA ribossomais (rRNA) e para as protenas que
fazem parte dos ribossomos. Se o nuclolo fosse mesmo uma fbrica,
ela teria o certificado ISO9001 de qualidade total!
Sabendo que os genes que codificam
para os rRNA esto no nuclolo, voc
poderia pensar que esses genes esto no
Partes de cromossomos que
Nuclolo isolado
contendo pedaos
Envoltrio
52
CEDERJ
Nuclolo
de cromossomos
MDULO 1
AULA
Gene de
DNA
rRNA
Transcrio
rRNA precursor
Protenas
ribossomais
sintetizadas
RNA e protenas
no cito-
envolvidas
plasma
no processamento
Nuclolo
Subunidade
maior imatura
Subunidade
menor
Nuclo
Citoplasma
Transporte e
maturao ativa
dos ribossomas
18S
rRNA
40S
5.8S
5S
2.8S
rRNA
60S
CEDERJ
53
Heterocromatina perifrica
Envoltrio
nuclear
Nuclolo
rea
densa
rea
granular
Centro
fibrilar
2m
1m
CEDERJ
MDULO 1
3
Mitose
G1
AULA
G2
Nuclolo
Envoltrio
nuclear
Desassociao
Reassociao
10m
Figura 3.19: Aspecto do nuclolo visto por microscopia ptica de contraste de fase. As clulas da esquerda esto em final de diviso celular; a do
meio, no incio de G1; a da direita, em G2. Fotos: E. G Jordan e J. McGovern.
CEDERJ
55
CONCLUSO
O ambiente nuclear , portanto, altamente organizado, com
compartimentos formados pela associao de macromolculas que se mantm
unidas sem estarem cercadas por uma membrana. Apenas o envoltrio nuclear
formado por duas bicamadas lipdicas, como veremos na prxima aula.
RESUMO
Nos eucariotos, o genoma fica dentro de um compartimento especfico,
o ncleo.
A maioria das clulas eucariticas possui apenas um ncleo, mas existem
clulas binucleadas, como alguns protozorios; multinucleadas, como as fibras
musculares e clulas anucleadas, como os eritrcitos de mamferos.
A presena do ncleo faz com que os eventos de transcrio e traduo ocorram
em compartimento separados, possibilitando o processamento do RNA.
Nucleossomos so arranjos octamricos de histonas em torno dos quais se
enrola a dupla fita de DNA com cerca de 200 pares de bases. O DNA entre os
nucleossomos chamado DNA de ligao.
A cromatina corresponde ao DNA compactado por protenas e pode estar
alternadamente na forma de eucromatina, em processo de transcrio, ou de
heterocromatina, estado mais compactado em que no h transcrio.
O nuclolo corresponde regio em que esto sendo sintetizados
os ribossomos, por isso apresenta-se mais denso que o resto da eucromatina.
56
CEDERJ
MDULO 1
AULA
EXERCCIOS
1. Quais as vantagens evolutivas do aparecimento do ncleo?
2. Construa um esquema com a organizao geral do ncleo interfsico.
3. Qual a importncia da compactao do DNA?
4. O que um nucleossomo?
5. O que DNA de ligao?
6. Qual o papel da histona H1?
7. Diferencie eucromatina de heterocromatina.
8. O que vem a ser a heterocromatina aderida ao envoltrio nuclear de clulas
interfsicas?
9. O nuclolo heterocromatina? Por qu?
10. Podemos dizer que os genes que codificam os ribossomos ficam todos em um
mesmo cromossomo?
CEDERJ
57
objetivos
AULA
Transporte ncleo-citoplasma
Pr-requisitos
Compartimentalizao celular (Aula 15 de Biologia Celular I).
Filamentos Intermedirios (Aula 22 de Biologia Celular I).
Controle do ciclo celular (Aula 1 de Biologia Celular II).
Diviso celular (Aula 2 de Biologia Celular II).
INTRODUO
Membrana nuclear
interna
Membrana nuclear
externa
Membrana do
retculo
Lmen do retculo
Ncleo
Lmina nuclear
Espao perinuclear
Poros nucleares
60
CEDERJ
MDULO 1
AULA
CEDERJ
61
1 m
TRANSFECTAR
UM GENE
coloc-lo,
usando recursos
de laboratrio, em
uma clula de outro
organismo, ou mesmo
em uma clula do
mesmo organismo,
com o objetivo de
forar sua expresso.
DELETAR UM GENE
retir-lo do genoma
de uma clula, usando
recursos de laboratrio,
substituindo-o por
outro no relacionado,
que poder at ajudar
na seleo das clulas
que realmente tiveram
o gene deletado.
J existem tcnicas
de laboratrio que
impedem que um gene
seja expresso sem que
seja necessrio
delet-lo. Voc vai
aprender em Biologia
Molecular.
62
CEDERJ
MDULO 1
AULA
CEDERJ
63
100nm
(b)
(a)
atravs do envoltrio nuclear em preparao convencional para microscopia eletrnica. Fotos: Fahrenkrog & Aebi, Nature Rev Mol Cell Biol, 4: 757, 2003.
Fibrilas
100nm
Membrana externa
(c)
Anel citoplasmtico
CITOPLASMA
Estacas radiais
Anel nuclear
do envoltrio nuclear
com dois complexos
do poro inseridos.
Anel distal
Lmina
nuclear
NCLEO
Membrana interna
Cesta
CEDERJ
MDULO 1
AULA
CEDERJ
65
demais para passar pelo complexo do poro por difuso. A protena ntegra
ou parcialmente digerida foi marcada com fluorocromo, microinjetada no
citoplasma e observada em microscpio de fluorescncia (Figura 4.7).
A nucleoplasmina formada por vrios domnios, uma cabea
globular e vrias caudas lineares, iguais entre si. Quando essa protena
injetada no citoplasma de uma clula interfsica, em poucos minutos
de incubao ela entra no ncleo. Se a nucleoplasmina for submetida
a uma digesto com enzimas proteolticas, de modo a separar a cabea
das caudas, e depois estas forem injetadas separadamente, observa-se
que as cabeas permanecem no citoplasma, enquanto as caudas entram
no ncleo. Esse experimento mostrou que as caudas da nucleoplasmina
possuem algum sinal especfico que permite a entrada no ncleo.
Protelise parcial
Cauda
Cabea
Nucleoplasmina
Cabeas
Caudas
Microinjeo no citoplasma
Incubao a 37C
Entram
Ficam no
Entram
no ncleo
citoplasma
no ncleo
CEDERJ
MDULO 1
AULA
CEDERJ
67
(a)
Ouro coloidal
(b)
protena-ouro
passam
apenas
pelos
coloidal
Caudas de
nucleoplasmina
complexos
Microinjeo
mitocndria
(M)
indi-
Incubao a 37
met
Citoplasma
E a sada do mRNA?
Para estudar o transporte de mRNA, foram realizados experimentos
equivalentes aos realizados com protenas nucleares, j esquematizados na
Figura 4.8. Partculas de ouro coloidal foram acopladas a molculas de
mRNA e microinjetadas no ncleo de uma clula. Depois de alguns minutos
de incubao a 37oC, a preparao foi fixada, processada, e observada em
microscpio eletrnico de transmisso. O resultado que as molculas de
mRNA saem do ncleo exclusivamente atravs de complexos do poro.
68
CEDERJ
MDULO 1
AULA
DEPLETAR
Diminuir,
extinguir, no caso,
o estoque celular
de ATP.
CEDERJ
69
depois
Microinjeo
70
CEDERJ
MDULO 1
AULA
O bichinho do Ran-ran
Ran, a GTPase envolvida no transporte entre ncleo e citoplasma,
pertence mesma famlia de GTPases monomricas cujo representante
mais famoso Ras, que atua na sinalizao celular (Aula 14 de Biologia
Celular I), e que tambm abriga as Rab, que trabalham no controle
do trfego intracelular de vesculas (Aula 25 de Biologia Celular I).
Como todas as GTPases, Ran pode estar ligada a GTP ou a GDP.
A forma Ran-GDP mais abundante no citoplasma e a forma Ran-GTP
mais abundante no ncleo. Essa distribuio conseqncia da ao
de outras protenas sobre as Ran (Figura 4.10). No citoplasma existem
protenas que estimulam a atividade enzimtica de Ran, fazendo com
que ela hidrolise o GTP, enquanto no ncleo protenas associadas
cromatina roubam o GDP de Ran, que logo substitudo por GTP.
Supe-se que Ran-GTP tenha tendncia a sair do ncleo, enquanto
Ran-GDP tenha tendncia a entrar.
Ran-GDP
p
GDP
Figura 4.10:
O ciclo de
Ran-GAP
Ran
Citoplasma
GDP
GTP
Cromatina
GTP
Ran-GTP
71
Figura
Importina
Carga com NLS
4.11:
Uma
protena
no
cito-
Ran-GDP
Citoplasma
Ncleo
Ran-GTP
Importina+Ran
Carga j
importada
Exportina
Carga j no
Ran-GDP
citoplasma
Citoplasma
Ncleo
Ran-GTP
Exportina+carga+Ran-GTP
72
CEDERJ
VESICULAO
A vesiculao de
um compartimento
diferente do
brotamento.
A vesiculao
um processo mais
dramtico, no
qual TODO o
compartimento se
fragmenta, formando
inmeras vesculas.
Lmina nuclear
Cromossomo
P
P
Prfase
Cromatina
P
P
P
P
Lamina B fosforilada
P
Desfosforilao
Figura 4.13: O envoltrio nuclear se
Incio da telfase
73
MDULO 1
MPF (reveja na Aula 1), que nessa ocasio fosforila muitos substratos,
AULA
CONCLUSO
Vimos que o envoltrio nuclear uma estrutura altamente
complexa e dinmica. Os complexos do poro regulam a passagem de
protenas do citoplasma para o ncleo e dos mRNA na direo oposta.
Como em muitas clulas, o envoltrio se desorganiza durante a
mitose, protenas de localizao nuclear ficam dispersas no citoplasma
durante essa fase, mas so capazes de reentrar no ncleo (de uma das
clulas-filhas) passando atravs de um complexo de poro graas presena
de uma seqncia de localizao nuclear (NLS) no meio de sua cadeia
peptdica.
74
CEDERJ
MDULO 1
4
AULA
RESUMO
O envoltrio nuclear formado por duas membranas concntricas separadas
pelo espao perinuclear e sustentadas no lado nuclear pela lmina nuclear.
Os filamentos da lmina so formados por protenas chamadas laminas.
As laminas tm um papel importante na manuteno da forma
e do tamanho do ncleo.
O envoltrio nuclear possui complexos do poro estruturados que atravessam
as duas membranas nucleares, estabelecendo uma comunicao direta entre
os ambientes citosslico e nuclear.
A estrutura de cada poro formada por trs anis (citoplasmtico, mediano
e nuclear), longas fibrilas envolvidas com o reconhecimento das molculas que
podero atravessar o poro e outros filamentos que se prendem ao anel distal,
formando a cesta nuclear.
Os complexos do poro mantm abertas passagens diretas entre os ambientes
citoplasmtico e nuclear. Existem mecanismos de transporte especializados,
tanto para promover a passagem de molculas maiores do que o poro quanto
para barrar a passagem de molculas menores.
A seqncia de localizao nuclear (NLS) corresponde menor seqncia de
aminocidos necessria e suficiente para a entrada no ncleo. Entretanto, em cada
protena nuclear, h variaes na seqncia e esta no est na ponta da cadeia.
Protenas de localizao citoplasmtica, como a actina, possuem uma
seqncia de excluso nuclear (NES).
As protenas atravessam o complexo do poro em sua conformao nativa.
Os mesmos poros so utilizados para a entrada de protenas e a sada de RNA.
A entrada de protenas no ncleo e tambm a sada de RNA dependem
de GTP e de sua associao com co-fatores as carioferinas e as Ran que
respectivamente ligam e hidrolisam o GTP.
Durante a mitose, a fosforilao de laminas e protenas do complexo do poro
leva ao desmonte do envoltrio nuclear: as laminas do tipo A ficam solveis no
citoplasma, mas as do tipo B continuam presas ao seu receptor nas vesculas de
membrana nuclear interna. O complexo do poro tambm se desassocia.
A recomposio do envoltrio nuclear depende da desfosforilao das
protenas envolvidas. As protenas de localizao nuclear so reconduzidas ao
novo compartimento nuclear graas s seqncias NLS.
CEDERJ
75
EXERCCIOS
1. Quais so os componentes do envoltrio nuclear?
2. Quais so as caractersticas da membrana nuclear externa?
3. Quais so as caractersticas da membrana nuclear interna?
4. O que lmina nuclear? Qual a sua funo?
5. O que so complexos do poro?
6. O que seqncia de localizao nuclear?
7. Por onde as protenas que tm seqncia de localizao nuclear entram
no ncleo?
8. Por onde as molculas de mRNA saem do ncleo?
9. Por que se pode dizer que o transporte entre ncleo e citoplasma vetorial?
10. O transporte entre ncleo e citoplasma consome energia?
76
CEDERJ
objetivos
AULA
Junes celulares 1:
Junes ocludentes
Pr-requisitos
Aulas 7, 8, 9 e 12 (Biologia Celular I).
INTRODUO
Tecido conjuntivo
O QUE SO JUNES
Num epitlio, o espao entre as clulas vizinhas precisa estar
bem selado, impedindo que o fluido extracelular extravase. Tambm
importante que a unio entre essas clulas suporte tenses sem se romper.
Por ltimo, j que as clulas de um tecido atuam de modo integrado,
importante que haja comunicao e cooperao metablica entre elas.
As junes celulares so reas especializadas da membrana plasmtica
que so classificadas em trs grupos, de acordo com a funo que
desempenham: junes ocludentes, junes aderentes ou de ancoragem e
junes comunicantes.
78
CEDERJ
MDULO 2
AULA
!
Junes, como e por qu?
Os epitlios, que revestem os diversos rgos, e os endotlios, que revestem a parede dos
vasos sanguneos, so os melhores modelos para estudo dessas junes. Por qu? Porque
as clulas que constituem esses tecidos dependem das junes aderentes para se manterem
unidas umas s outras. Da mesma forma, cabe aos epitlios formar um revestimento contnuo,
impedindo o vazamento de substncias e fluidos do meio extracelular para o intracelular e
vice-versa. Essa funo desempenhada pelas junes ocludentes ou oclusivas. Finalmente,
o bom funcionamento de um tecido depende da cooperao e sincronia entre as clulas que
o constituem, sendo, portanto, necessria a comunicao entre elas. Essa comunicao se d
pelas junes comunicantes.
JUNES OCLUDENTES
Nesta aula, vamos nos deter no estudo das junes ocludentes,
tambm chamadas tight (apertadas, em ingls). Quando determinadas
substncias eletrondensas (que barram a passagem do feixe de eltrons
do microscpio eletrnico) eram injetadas na superfcie basal de um
epitlio, observava-se que o corante penetrava por entre as clulas at
determinado ponto. Nessa regio, a distncia entre as membranas das
duas clulas era menor, o que poderia explicar a barreira passagem do
corante (Figura 5.2). Quando o corante era injetado na superfcie apical
do epitlio, ele descia at o mesmo ponto e tambm ficava retido, ou
seja, as junes tight formavam em torno das clulas um cinturo que
impedia o vazamento de fluidos e solutos entre elas. muito importante
que a passagem de substncias por entre as clulas seja barrada, pois isso,
a princpio, obriga praticamente todas as substncias presentes no tubo
digestivo a passar pelo processo seletivo de permeabilidade da bicamada
lipdica, ou pelas protenas transportadoras (Aulas 7 a 12 de Biologia
Celular I). Essa passagem de substncias atravs das clulas chamada
transporte transcelular, enquanto a passagem por entre as clulas tem o
nome de transporte paracelular.
CEDERJ
79
(a)
(b)
0,5 m
0,5 m
Figura 5.2: (a) As junes ocludentes formam um cinturo que impede a passagem de substncias por entre as clulas. Em (b) vemos duas micrografias
eletrnicas mostrando que no importa se a substncia injetada na parte apical ou na basal do epitlio, a juno ocludente forma um cinturo que impede
o seu extravasamento para o outro lado do epitlio. (Fotos: Daniel Friend)
Quando as clulas puderam ser observadas pela tcnica da criofratura (Aula 3 de Biologia Celular I), ficou mais fcil entender como as
junes ocludentes se organizavam e funcionavam. Na regio onde as
membranas de duas clulas vizinhas se aproximavam, existem protenas
transmembrana que formam verdadeiros labirintos em ambas, entrecruzando-se e formando uma espcie de costura entre as duas membranas,
o que impede a passagem de substncias nesses pontos (Figura 5.3).
(a)
(b)
Figura 5.3: Em (a), uma imagem da membrana de uma clula epitelial onde se vem
as microvilosidades da poro apical e as linhas formadas pelas partculas intramem branosas que selam o espao entre duas clulas, conforme esquematizado em (b).
80
CEDERJ
MDULO 2
AULA
Espao intercelular
0.6 m
Cadeias de protenas
formando a juno
Citoplasma da clula 1
Citoplasma da clula 2
Figura 5.4: As protenas que formam a juno de ocluso formam cadeias que se ligam
a cadeias semelhantes na membrana adjacente. Isso limita a mobilidade dessas protenas
no plano da membrana e tambm impede que outras protenas ultrapassem essa barreira.
CEDERJ
81
Superfcie apical
Glicose
Juno ocludente
Uniporte de glicose
Poro basolateral
Sangue
Voc deve estar achando a Figura 5.5 familiar, e tem razo! Quando estudamos transporte atravs da membrana (Aulas 8 a 12 de Biologia
Celular I), vimos que o transporte de glicose na poro basolateral do
epitlio intestinal era feito por uniporte e na poro apical por simporte
com o sdio. Sugerimos que voc volte a consultar essas aulas para reforar como fundamental para o correto funcionamento do organismo
que esses dois domnios de membrana sejam mantidos.
No so apenas os transportadores de glicose que tornam
diferentes os dois domnios de membrana do epitlio intestinal, outras
protenas tambm se distribuem de maneira diferente e, como voc pode
observar nos esquemas e micrografias, apenas a superfcie apical possui
microvilosidades. O fenmeno de uma clula como a epitelial apresentar
diferenas entre uma regio e outra chamado polarizao tecidual,
e essas clulas so ditas polarizadas.
82
CEDERJ
MDULO 2
AULA
Claudinas em interao
heteroflica
Ocludinas
Clula 1
Clula 2
Claudinas em interao
homoflica
Figura 5.6: As claudinas e as ocludinas so as principais protenas formadoras de junes de ocluso. Enquanto
duas claudinas de tipos diferentes podem se reconhecer e se ligar, apenas duas ocludinas idnticas se reconhecem.
CEDERJ
83
Transcelular
Paracelular
Juno tight
Figura 5.7: Esquema das vias de transporte transcelular e paracelular. Este ltimo,
quando acontece, sempre obedece ao gradiente de concentrao das molculas envolvidas.
84
CEDERJ
MDULO 2
AULA
(b)
Superfcie basolateral
Figura 5.8: Clulas que formam o epitlio de glndulas secretoras como o pncreas e as glndulas
mamrias (a) tambm dependem da barreira formada pelas junes para garantir que a secreo se
d sempre na superfcie apical. Na poro basolateral, so realizadas outras funes, como a absoro de nutrientes e molculas necessrias sntese. Em (b), vemos uma dessas clulas em destaque.
CEDERJ
85
RESUMO
Em tecidos organizados, as clulas so conectadas atravs de junes
celulares, as quais so estruturas especializadas constitudas primariamente
por protenas.
Junes oclusivas ou tight selam a passagem de fluidos entre os dois lados
da camada celular e definem dois domnios na membrana plasmtica: as
regies apical e basolateral.
A composio das junes tight ainda no est totalmente esclarecida.
Entretanto, duas protenas descritas (claudinas e ocludinas) tm sido bastante
estudadas. Existem diferentes tipos de claudinas e ocludinas. Cada epitlio
apresenta um conjunto prprio dessas protenas.
86
CEDERJ
MDULO 2
AULA
EXERCCIOS
1. Quais so as duas formas bsicas de associao entre clulas?
2. Quais os trs tipos de junes celulares e qual a funo bsica de cada um?
3. Por que as junes de ocluso receberam os seguintes nomes:
Juno tight Cinturo de ocluso 4. Por que o cinturo de adeso forma uma barreira?
5. O que um domnio de membrana?
6. Quais so as protenas que formam a juno de ocluso?
7. O que transporte transcelular? Exemplifique.
8. O que transporte paracelular? Exemplifique uma situao em que ele ocorra.
CEDERJ
87
objetivos
AULA
Junes celulares 2:
Junes ancoradouras
e junes comunicantes
Pr-requisitos
Aulas 7 e 8 de Biologia Celular I (Estrutura da Membrana).
Aulas 9 a 12 de Biologia Celular I (Permeabilidade e Transporte).
Aulas 21 a 24 de Biologia Celular I (Citoesqueleto).
INTRODUO
Na aula anterior, procuramos deixar claro que medida que constituem tecidos,
as clulas passam a fazer parte de um contexto social em que necessrio que
haja unio e cooperao entre elas. Tambm vimos que os epitlios formam
folhetos que separam dois ambientes, por exemplo, o interior e o exterior dos
vasos sanguneos ou do tubo digestivo (Figura 6.1).
Figura 6.1:
JUNES ANCORADOURAS
As junes ancoradouras so abundantes em tecidos submetidos
a grande estresse mecnico, como o msculo cardaco e o epitlio da
pele, ocorrendo sob trs formas funcional e estruturalmente diferentes:
(1) cinturo de adeso, (2) desmossomas e (3) hemidesmossomas.
Clulas que se aderem matriz extracelular tambm formam com ela
um tipo de juno de adeso: so os contatos focais. Em invertebrados,
existe ainda um tipo especial de juno ancoradoura: a juno septante.
Todas as funes ancoradouras possuem em sua organizao bsica
trs tipos de protena: uma protena transmembrana, um tipo de
filamento do citoesqueleto e protenas adaptadoras que ligam a protena
transmembrana ao citoesqueleto (Figura 6.2).
90
CEDERJ
MDULO 2
Filamentos do citoesqueleto
Clula 1
Protenas adaptadoras
intermedirias
Protenas
transmembrana
AULA
Membrana plasmtica
Clula 2
Matriz extracelular
Figura 6.2: Algumas junes de adeso ancoram as clulas entre si, enquanto
outras ancoram a clula matriz extracelular. Todas so formadas por uma protena
transmembrana que, atravs de protenas adaptadoras, se liga a filamentos do citoesqueleto.
Matriz extracelular
A matriz extracelular (MEC) ser estudada de forma mais
detalhada na Aula 7. Basicamente, a MEC composta
por um conjunto de protenas e glicoprotenas que so
produzidas e lanadas para o meio extracelular onde exercem
vrias funes importantes.
CEDERJ
91
CINTURO DE ADESO
Conforme j comentamos, as junes de ocluso formam
um cinturo na poro lateral superior das clulas epiteliais, muito
eficiente na impermeabilizao do espao intercelular. Logo abaixo
desse cinturo de ocluso, posiciona-se um cinturo de adeso
(Figura 6.3), formado por protenas transmembrana da famlia das
caderinas. As caderinas pertencem a uma grande famlia de molculas de
adeso clula-clula que so dependentes de Ca+2 para manter sua estrutura
e funcionalidade (Figura 6.5).
Lmen
Microvilosidades
Juno de ocluso
Caderinas
Microfilamentos
Cinturo
Membranas adjacentes
de adeso
92
CEDERJ
MDULO 2
AULA
(b)
NH2
Ca2+
Ca2+
Ca2+
Bicamada lipdica
Citoplasma
COOH
Y
X
Protenas
adaptadoras
Actina
10mm
caderina e pelo lado citoplasmtico a protenas adaptadoras que, por sua vez, se ligaro a microfilamentos de actina.
CEDERJ
93
Invaginao do folheto
epitelial por contrao
Cinturo de
progressiva do cinturo de
adeso com
feixes de actina
associados
O epitlio tubular se destaca
do folheto sobre ele
CEDERJ
MDULO 2
Caderinas
Caderinas
intermedirios
AULA
Filamentos
Placa de protenas
adaptadoras
Espao intercelular
Membranas das
Filamentos
(a)
duas clulas
intermedirios
(b)
Figura 6.7: (a) Os desmossomas se distribuem como botes pelas laterais das clulas
epiteliais, ligando-se a uma rede de filamentos intermedirios. Em (b), vemos em detalhe
a organizao de um desmossoma. As caderinas se ligam umas s outras pelo lado
extracelular.
Pelo
lado
citoplasmtico
se
ligam
uma
placa
formada
por
diversas
(a)
(b)
Figura 6.8: (a) Uma seqncia de trs desmossomas une duas clulas adjacentes. (b) Maior
aumento de um desmossoma, onde se pode observar claramente a placa citoplasmtica de onde
partem os filamentos intermedirios e a densidade intercelular que corresponde s caderinas.
Fotos: (a) N.B. Gilula, (b) D. E. Kelly.
CEDERJ
95
AS JUNES SEPTANTES
Em invertebrados, o papel do cinturo de adeso desempenhado pelas junes septantes, amplamente distribudas nos seus tecidos.
Estas possuem vrias caractersticas em comum com os cintures de
adeso. As junes septantes tambm formam uma banda contnua ao
redor da borda apical das clulas epiteliais e parecem ajudar a manter
as clulas unidas, bem como servem como stios de ligao para os
filamentos de actina. Elas possuem morfologia bastante distinta, sendo
formadas por protenas pouco caracterizadas que esto dispostas em
fileiras paralelas com periodicidade regular unindo as membranas citoplasmticas das clulas vizinhas (Figura 6.9).
96
CEDERJ
MDULO 2
AULA
HEMIDESMOSSOMAS NO SO DESMOSSOMAS
PELA METADE
Embora o nome e o aspecto ultra-estrutural sugiram que os
hemidesmossomas so exatamente a metade de um desmossoma
(da seu nome), no podemos esquecer que nos desmossomas a protena transmembrana sempre uma caderina e esta s se liga a outra
caderina. Como a lmina basal no uma membrana e, muito menos,
possui caderinas, no hemidesmossoma, a protena transmembrana
sempre uma integrina, que reconhece uma protena da lmina basal,
como a laminina. Alm disso, a placoglobina, uma das protenas que
formam a placa citoplasmtica dos desmossomas, no encontrada nos
hemidesmossomas. No mais, os hemidesmossomas so bem semelhantes
aos desmossomas, com protenas intermedirias formando uma placa que
as liga a filamentos intermedirios. Na prtica,
desmossomas e hemidesmossomas se interligam
Desmossomas
Filamentos intermedirios
Hemidesmossomas
Lmina basal
97
A BOLHA
Uma experincia que quase todo mundo j deve ter tido a de
usar um sapato novo que, por roar ou apertar continuamente o p,
acaba causando uma bolha dgua. Isso mostra bem a importncia
das junes de adeso: nossa pele formada por diversas camadas de
clulas epiteliais unidas por muitos desmossomas. As camadas superiores
so formadas por clulas mortas, das quais resta principalmente a
rede de filamentos de queratina. Essa cobertura impermevel nos
protege tanto dos agentes ambientais (chuva, sol) quanto suporta
a tenso exercida pelos fluidos extracelulares. O atrito contnuo
do calado sobre essas camadas protetoras acaba provocando seu
desgaste; assim, o fluido extracelular acaba preenchendo a epiderme afinada, resultando na incmoda bolha. Para nossa felicidade,
as clulas da pele esto em constante renovao (como vimos na
Aula 2) e em poucos dias a camada protetora de clulas mortas
se recompe (Figura 6.11).
Clula queratinizada
descamando
Clulas mortas
queratinizadas
Lmina basal
Tecido conjuntivo
Clula basal subindo
98
CEDERJ
MDULO 2
AULA
CONTATOS FOCAIS
Clulas capazes de migrar, como os fibroblastos, estabelecem
com o substrato (o equivalente ao cho celular) pontos de adeso,
chamados contatos focais, onde protenas transmembrana da famlia
das integrinas se ligam a molculas da matriz extracelular. Pelo lado
citoplasmtico, as integrinas se ligam a protenas como alfa-actinina,
talina e vinculina e, finalmente, a filamentos de actina (Figura 6.12). A actina
se organiza em feixes paralelos, constituindo as fibras de tenso, estudadas na aula de microfilamentos, de Biologia Celular I.
Filamentos de actina
Protenas acessrias
Integrina
Contato focal
Lmina basal
CEDERJ
99
Novos contatos
Contatos focais
focais se formam
A clula se desloca
Contatos focais se
desfazem em uma regio
AS JUNES COMUNICANTES
A necessidade de comunicao e de cooperao metablica entre
as clulas de um organismo pluricelular faz com que as primeiras junes
comunicantes se formem quando o embrio animal atinge o estgio de
apenas oito clulas! Essas junes so denominadas junes em fenda ou
Gap (espao em ingls). A existncia das junes Gap foi intuda muito
antes de elas haverem sido visualizadas.
Experimentos de Eletrofisiologia mostravam que a estimulao
eltrica de uma clula causava a despolarizao no apenas desta, mas
tambm das clulas vizinhas, evidenciando
algum tipo de comunicao entre elas
(Figura 6.14). J clulas isoladas umas das
outras no apresentavam essa resposta,
indicando que a passagem do estmulo ocorria
(a)
atravs do citoplasma.
(b)
100 C E D E R J
MDULO 2
AULA
MW
100
1000
5000
20,000
Espao
intermembrana
Juno
Gap
(a)
200mm
(b)
C E D E R J 101
JUNES COMUNICANTES
Junes comunicantes medeiam a passagem de sinais eltricos
ou qumicos de uma clula para outra. Elas podem ser visualizadas
atravs da microscopia eletrnica como um aglomerado de partculas homogneas intramembrana associadas exclusivamente face
citoplasmtica (Figura 2.6).
Existem dois tipos de junes comunicantes: (1) junes tipo fenda
ou Gap e (2) plasmodesmata apenas em plantas.
As partculas observadas nas rplicas de criofratura correspondem aos conexons, verdadeiros poros moleculares formados por seis
conexinas, protenas especficas das junes comunicantes
(Figura 6.17). Os conexons projetam-se de cada superfcie celular,
segurando a membrana plasmtica a uma distncia fixa entre elas da
o termo tipo fenda. As seis conexinas de uma membrana se ligam a outras
seis na membrana adjacente e estabelecem assim o canal de comunicao.
Em contraste com as junes oclusivas, nas quais as membranas plasmticas parecem estar em contato direto, as junes comunicantes tipo
fenda mantm a membrana plasmtica a uma distncia fixa entre elas.
Citossol
3
4
Membrana alfa-hlices
transmembrana
(b)
102 C E D E R J
MDULO 2
AULA
CONEXONS EM AO
As junes tipo fenda podem ter propriedades distintas nos diferentes tecidos. A permeabilidade dos canais pode variar devido a diferenas
nas conexinas que formam as junes. Existem pelo menos 11 conexinas
diferentes, cada uma codificada por um gene em separado e tendo uma
distribuio tecidual distinta. Alguns tecidos possuem mais de um tipo
de conexina, mas, apesar das diferenas entre as vrias conexinas, suas
funes e sua estrutura bsica foram altamente conservadas durante a
evoluo.
Como os canais inicos convencionais, os canais tipo fenda no
esto constantemente abertos. A permeabilidade das junes tipo fenda
rpida e pode ser aberta ou fechada atravs da alterao de pH do
citossol ou concentrao citosslica de Ca+2 livre. O papel fisiolgico
do pH na permeabilidade dessas junes ainda no est esclarecido, mas
acredita-se que possa ser uma defesa das clulas vizinhas para o caso de
uma clula romper-se ou sofrer autlise.
C E D E R J 103
Plasmodesmatas
A organizao dos tecidos de plantas diferente dos existentes em
animais porque as clulas vegetais possuem parede celular rgida, rica em
celulose. As paredes celulares eliminam a necessidade de junes oclusivas
para manter as clulas unidas, mas a necessidade de comunicao direta
entre as clulas permanece. Assim, em contraste com as clulas animais,
as clulas vegetais possuem apenas uma classe de junes celulares, que
so os plasmodesmatas.
Os plasmodesmatas, assim como as junes tipo fenda, ligam
diretamente os citoplasmas de clulas vizinhas. Cada clula viva
de um vegetal (com raras excees) est ligada s clulas vizinhas
pelos plasmodesmatas, que formam finos canais citoplasmticos (0,1m) capazes de atravessar a parede celular entre duas
clulas adjacentes (Figura 6.18).
104 C E D E R J
MDULO 2
6
AULA
Plasmodesmata
Lamela mdia
100mm
CONCLUSO
No incio da Aula 5, comentamos que algumas clulas se associam
atravs de junes enquanto outras se mantinham distantes, porm
coladas, por meio da matriz extracelular, assunto das prximas aulas
de nossa disciplina.
C E D E R J 105
RESUMO
Os principais tipos de junes ancoradouras presentes nos tecidos de
vertebrados so junes aderentes, desmossomas e hemidesmossomas.
Junes aderentes so stios de ligao para filamentos de actina, enquanto
os desmossomas e hemidesmossomas so stios de ligao para filamentos
intermedirios.
Junes tipo fenda ou Gap so junes comunicantes formadas por conjuntos
de protenas que permitem a passagem direta de molculas menores de 1.000
daltons de uma clula para o interior da clula adjacente.
Junes Gap esto envolvidas no transporte de pequenas molculas, bem
como nas sinapses eltricas.
Os plasmodesmatas so as nicas junes celulares em plantas e, apesar
de possurem estrutura completamente diferente, funcionam como
as junes tipo fenda.
EXERCCIOS
106 C E D E R J
objetivos
AULA
Matriz extracelular
Pr-requisitos
Aulas 7, 8, 16 e 17 de Biologia Celular 1.
INTRODUO
Epitlio
Lmina basal
Fibra de colgeno
Macrfago
Capilar
Tecido
conjuntivo
Fibroblasto
Fibra elstica
Mastcito
Glicosaminoglicanas,
proteoglicanas e glicoprotenas
50m
Figura 7.1: Nos epitlios, as clulas ficam bem prximas umas das outras e aderem
lmina basal. J no tecido conjuntivo, diferentes tipos celulares se distribuem numa matriz
composta por diversos tipos de fibras proticas e outras molculas secretadas pelos fibroblastos.
108 C E D E R J
MDULO 2
AULA
Tecido conjuntivo
a
Figura 7.3: Tanto o sangue (a) quanto os ossos (b) e o tecido conjuntivo (c) so formados
por clulas dispersas numa matriz acelular. Imagens cedidas pelo LABMEL da Universidade
do Estado do Rio de Janeiro.
110 C E D E R J
MDULO 2
AULA
cido idurnico
Sulfato de N-acetil-galactosamina
!
D UMA PARADINHA...
Uma das principais caractersticas das GAGs a sua capacidade de reter
uma grande quantidade de gua, conferindo regio onde so liberadas
resistncia a foras de compresso. Um bom exemplo disso a cartilagem
que reveste a articulao do joelho, muito resistente a presses, graas a
esse mecanismo. Quando ocorre perda de GAGs (particularmente cido
hialurnico) nas articulaes do joelho, elas perdem a sua lubrificao
e ficam expostas ao atrito, o que acarreta dores intensas.
C E D E R J 111
o beb fofinho.
MDULO 2
AULA
Eixo protico
Proteoglicana
AS HIALURONAS
As hialuronas, tambm chamadas cido hialurnico ou
hialuronato, no formam proteoglicanas porque possuem algumas
diferenas em relao s demais GAGs (veja Tabela 7.1).
Tabela 7.1: Diferenas entre hialuronas e demais GAGs.
Hialurona
Demais GAGs
molculas de acar
molculas de acares
C E D E R J 113
AS PROTEOGLICANAS
As proteoglicanas, assim como as glicoprotenas, so formadas
por protenas e acares. Contudo, elas se diferenciam pela quantidade e
disposio das cadeias laterais de acares (Figura 7.6). As proteoglicanas
podem possuir at 95% do seu peso em carboidratos, enquanto as
glicoprotenas contm de 1%-60% de seu peso em carboidratos
(veja o boxe). No fcil classificar as proteoglicanas, pois so formadas
por longas cadeias no ramificadas de acares bastante heterogneas.
Atualmente, elas so definidas como um grupo diverso de glicoprotenas
altamente glicosiladas cujas funes so mediadas pelo ncleo protico
e pela cadeia de GAG.
Como j foi dito, todas as GAGs com exceo da hialurona
fazem ligaes covalentes com protenas, formando as proteoglicanas
(Figura 7.6). A cadeia de GAGs se liga a uma serina do ncleo protico
atravs de um tetrassacardeo formado por uma molcula de xilose,
seguida por duas de galactose e uma de cido glicurnico (Figura 7.7).
Xilose
Galactose
Galactose
cido
Glucurnico
Tetrassacardeo de ligao
114 C E D E R J
MDULO 2
7
AULA
Eixo protico
Cadeia de oligossacardeos
curta e ramificada
Polipeptdeo
GAG
Decorina
Ribonuclease
C E D E R J 115
Betaglicana
Decorina
Perlecan
Sindecana
116 C E D E R J
GAGs componentes
Sulfato de condroitina
Localizao
Funo
Suporte mecnico.
Cartilagem
+ sulfato de queratana
Sulfato de condroitina
Superfcie celular e
+ sulfato de dermatana
matriz
mento TGF-
Sulfato de condroitina +
Distribuda em tecidos
Liga-se a fibras de
sulfato de dermatana
conjuntivos
Sulfato de condroitina +
sulfato de heparana
Sulfato de heparana
Lmina basal
Epitlios
Funo estrutural e de
filtrao na lmina basal
Adeso celular. Liga-se a
fatores de crescimento
MDULO 2
AULA
Agregado de agrecana
Eixo protico
Hialurona
Protenas de ligao
Sulfato de condroitina
Figura 7.9: (a) Fotografado ao microscpio eletrnico, um agregado de agrecana pode chegar a medir vrios micrmetros; (b) cada uma dessas centopias ,
na verdade, formada por vrias proteoglicanas ligadas a um eixo de hialurona.
Podemos comparar essa organizao da folha composta que aparece em (c);
(Foto: Cortesia de Lawrence Rosenberg para Molecular Biology of the Cell 3a ed.)
C E D E R J 117
RESUMO
A matriz extracelular auxilia na ligao das clulas para formao dos tecidos
e serve como reservatrio para muitos hormnios, controlando o crescimento e
a diferenciao celular.
A lmina basal uma fina matriz extracelular que serve como suporte para
clulas epiteliais, endoteliais e musculares.
Glicosaminoglicanas (GAGs) so componentes da matriz extracelular que
conferem resistncia compresso pelo fato de serem carregadas negativamente
e, conseqentemente, seqestram ctions que acabam atraindo grande
quantidade de gua.
A maioria das GAGs, com exceo das hialuronas, encontra-se conjugada com
protenas, formando as proteoglicanas.
As proteoglicanas possuem vrias funes importantes para as clulas,
como: regular a atividade de molculas sinalizadoras; controlar o trfego
de clulas e molculas; atuar como co-receptores e interagir com protenas
fibrosas da matriz.
EXERCCIOS
1. Que tipos de tecido se caracterizam por ter matriz extracelular?
2. Onde a matriz produzida?
3. Quais so os principais componentes da matriz extracelular?
4. Diferencie glicosaminoglicanas de proteoglicanas.
5. Diferencie proteoglicanas de glicoprotenas.
6. Quais as principais propriedades das GAGs e das proteoglicanas que
tornam a matriz resistente compresso?
7. Alm da funo estrutural, que outros papis desempenham as
proteoglicanas e GAGs?
118 C E D E R J
objetivos
AULA
Matriz extracelular:
as protenas da matriz
Pr-requisitos
Aulas 7, 8, 16 e 17
de Biologia Celular I
e Aulas 6 e 7 de
Biologia Celular II.
INTRODUO
OS COLGENOS
No, no estranhe o plural, os colgenos so uma grande famlia
de protenas fibrosas presente em todos os animais pluricelulares. Os
colgenos so as protenas mais abundantes nos mamferos (~25% da
massa protica) e so secretados tanto pelas clulas do tecido conjuntivo
como outros tipos celulares. Tecidos como a pele e os ossos so ricos
em colgeno, e a principal funo dessas protenas contribuir para a
integridade estrutural da matriz e manter as clulas ancoradas a ela.
A molcula de colgeno formada por uma tripla hlice de cadeias
polipeptdicas enroladas umas nas outras, constituindo uma estrutura
bastante tpica (Figura 8.1). Essa tripla hlice se forma espontaneamente
porque as cadeias so ricas nos aminocidos prolina e glicina. Enquanto
a estrutura em anel da prolina estabiliza a tripla hlice, a glicina, por ser o
menor aminocido, permite que as trs cadeias de colgeno se aproximem,
formando a estrutura final do colgeno.
Figura 8.1: (a) Cada uma das trs cadeias
Cadeia peptdica
alfa de colgeno
MDULO 2
8
Fibrila colgena
1,5nm
Molcula de colgeno
b
Figura 8.3: (a) Fibras de colgeno so
formadas por feixes de fibrilas colgenas,
vistas em (b) em corte longitudinal e transversal em torno de um fibroblasto. (Foto:
Molecular Biology of the Cell, 3rd ed.)
Tipo IX
Tipo II
C E D E R J 121
AULA
10-300nm
Figura 8.5: O colgeno associado s fibrilas pode formar feixes paralelos, como em
!
RECORDAR E COMPARAR
Lembra da aula sobre microfilamentos em Biologia Celular I? Pois , os filamentos de
actina podem formar feixes paralelos muito resistentes (as fibras de tenso) ou redes
entrecruzadas, de acordo com as protenas que os conectam (respectivamente alfa-actinina
e filamina). Embora as fibrilas de colgeno estejam do lado de fora da clula e sejam
muito maiores (e mais fortes) que os filamentos de actina, o princpio de formar feixes
e aumentar a resistncia o mesmo. Observe a Figura 8.4 e compare com as da Aula 24.
MDULO 2
AULA
Formadores de
fibrilas
Associados
a fibrilas
Formadores
de rede
Tipo
Forma polimerizada
Distribuio tecidual
Fibrila
II
Fibrila
III
Fibrila
XI
IX
Associao lateral
Cartilagens
XII
Associao lateral
IV
Lmina basal
VII
Fibrilas ancoradouras
AS DOENAS DO COLGENO
Mutaes que afetam a sntese de colgeno, ou outros componentes da matriz,
resultam em vrios tipos de anomalias, em geral bastante severas. Dentre as mais
importantes, podemos citar:
osteognese imperfeita: causada por mutao do gene para colgeno do
tipo I. um trao dominante, pois, apesar de um dos alelos ser normal, o produto do
gene defeituoso impede a correta formao das fibras colgenas;
nanismo: algumas formas so causadas por deficincias do colgeno do tipo II;
sndrome do homem-elstico: causada por mutaes do gene do colgeno
tipo I. O indivduo afetado tem juntas, tendes e pele hiperextensveis. Alguns se exibem
em feiras de curiosidades e circos;
sndrome de Ehlers-Danlos: causada por mutaes do colgeno tipo III.
Os pacientes correm o risco de sofrer rompimento das artrias intestinais;
sndrome de Alport: a maioria dos casos envolve mutaes para o gene de uma
das cadeias do colgeno do tipo IV localizado no cromossomo X. Assim, a herana tem
o padro tpico da herana ligada ao X. Outros casos dessa sndrome tm origem em
genes autossmicos que codificam outras cadeias do colgeno IV. Os pacientes geralmente
apresentam leses nos glomrulos renais, o que causa a eliminao de sangue na urina.
Curiosamente, muitos deles tambm perdem a audio;
hrnias de disco: algumas famlias possuem mutaes no gene para cadeia alfa
do colgeno IX, um dos componentes da matriz extracelular dos discos intervertebrais.
Esses indivduos tm grande tendncia a desenvolver hrnia de disco.
Entretanto, nem todas as anomalias ligadas ao colgeno tm origem gentica:
escorbuto: causado pela deficincia de vitamina C. A falta dessa vitamina
impede a hidroxilao da prolina para converso em hidroxiprolina, um dos aminocidos
fundamentais na cadeia de colgeno. O indivduo com escorbuto apresenta amolecimento
dos dentes, sangramento gengival e infeces bucais pelo enfraquecimento que a falta
de colgeno causa aos tecidos;
sndrome de Goodpasture: uma doena auto-imune em que o indivduo
desenvolve anticorpos contra suas prprias molculas de colgeno do tipo IV. Como esse
colgeno participa da adeso dos epitlios lmina basal, esta termina por ser lesada.
124 C E D E R J
MDULO 2
AULA
1
2
COOH
0.5-3m
10-300
nm
Figura 8.6: O colgeno formado por trs cadeias polipeptdicas que se entrelaam e formam uma
estrutura em tripla hlice no interior do RE. Contudo, a clula no forma essa estrutura de uma vez,
ela sintetiza por partes: (1) a clula sintetiza cada cadeia separadamente no RE; (2) cada cadeia recebe
hidroxilas e resduos de oligossacardeos; (3) ainda no RE essas cadeias se entrelaam, formando a tripla hlice
de pr-colgenos; (4) esse pr-colgeno transportado em vesculas secretoras para o complexo de Golgi;
(5) os pr-colgenos so liberados para o meio extracelular, tendo os pr-peptdeos clivados; (6) passando a
se associar uns aos outros, formando as fibrilas de colgenos, que, por sua vez (7), agregam-se e formam as
fibras de colgenos. O empacotamento das molculas apresenta estriaes a intervalos regulares de 67nm.
C E D E R J 125
Extenso
Relaxamento
Molcula de elastina
126 C E D E R J
MDULO 2
AULA
Auto associao
Ligao de
colgeno
Ligao a
clulas
C E D E R J 127
LMINA BASAL
Na Aula 7, comentamos que existem dois tipos bsicos de
matriz extracelular: a do tecido conjuntivo e a lmina, ou membrana,
basal. At agora nos detivemos nos aspectos bsicos da MEC do tecido
conjuntivo e pouco comentamos sobre a membrana basal.
A membrana basal um tipo de matriz extracelular especializada.
Fina e flexvel, ela embasa todos os epitlios, formando uma interface
entre estes e o tecido conjuntivo propriamente dito (reveja a Figura 7.1).
Clulas individualizadas (musculares, adipcitos, clulas de Schwann)
tambm so envoltas por uma membrana basal (Figura 8.9).
128 C E D E R J
MDULO 2
AULA
Lmina basal
Msculo
Membrana da clula
Tecido conjuntivo
Lmina basal
Capilares
Clula endotelial
Clula epitelial
Epitlio
a
Lmina basal
Urina
Figura 8.10: No glomrulo renal (a), a membrana basal compartilhada pelo endotlio do vaso
capilar e pelo epitlio glomerular (b).
C E D E R J 129
Cadeia gama
Cadeia alfa
Domnio globulares
Cadeia beta
130 C E D E R J
de
protenas
integrais
MDULO 2
AULA
1mm
Figura 8.13: Dois fibroblastos de embrio de pinto migram um em direo
ao outro sobre um feixe de fibras colgenas organizado por eles mesmos.
(Foto: D. Stopak & A. AK. Haris, Dev. Biol. 90:383-398, 1082 Academic Press)
C E D E R J 131
e 3 agora
Orientao do citoesqueleto
As clulas 2
da clula 1 orienta
as clulas 2 e 3
e orienta
de matriz secretadas
em torno dela.
citoesqueleto propagada s
clulas vizinhas ( 4 e 5 ).
Figura 8.14: O esquema ilustra como a matriz pode propagar a orientao de uma
clula para as demais a fim de formar uma estrutura orientada, como os tendes.
CONCLUSO
A cada dia novas descobertas so feitas a respeito da participao da matriz extracelular em processos biolgicos. Essas
molculas atuam tanto na sntese como na degradao de estruturas
(como a absoro da cauda do girino) e, da mesma forma que so
secretadas as protenas da matriz, nessas ocasies, os fibroblastos
produzem enzimas, como a colagenase, que degradam a matriz e
conferem enorme plasticidade aos tecidos conjuntivos. Graas a
essas propriedades, possvel o realinhamento da arcada dentria,
a regenerao de fraturas, a regresso do tamanho do tero aps o
parto e muitas outras, pequenos milagres sem os quais nossas vidas
seriam, certamente, muito mais limitadas.
132 C E D E R J
MDULO 2
8
AULA
RESUMO
Alm das proteoglicanas e glicosaminoglicanas, a matriz extracelular possui
protenas fibrosas, os colgenos e a elastina; e protenas adesivas, a fibronectina
e a laminina, esta ltima na lmina basal.
O colgeno formado por trs hlices de um polipeptdeo rico em
prolina e glicina.
Existem diversas formas de colgeno, que podem ser classificadas em: fibrilares,
associados a fibrilas e formadores de rede.
O colgeno sintetizado pelas clulas e secretado na forma de pr-colgeno.
Depois de clivada a extremidade da cadeia, formam-se espontaneamente
as fibrilas.
A elastina outra protena fibrilar que forma redes que podem se distender
pelo maior ou menor enrolamento das molculas de elastina.
O colgeno confere ao tecido resistncia tenso e a elastina confere
ao tecido elasticidade, isto , aps sofrer a tenso ele pode se distender
e voltar forma original.
A fibronectina uma protena dimrica que possui stios de reconhecimento
para vrias molculas: colgeno, integrinas, outras fibronectinas, heparina.
A lmina basal um tipo especial de matriz, secretada pelas clulas que
sobre ela se apiam. As protenas mais caractersticas da membrana basal so
o colgeno tipo IV, formador de redes, a laminina, protena trimrica que se
liga a integrinas, e o colgeno do tipo VII, que faz pontes entre a lmina basal
e a matriz abaixo dela.
A lmina basal determina a polaridade celular, influencia o metabolismo
celular e organiza protenas em membranas plasmticas adjacentes, atuando na
migrao e diferenciao celular.
C E D E R J 133
EXERCCIOS
1. Quais as principais protenas encontradas na matriz extracelular?
2. Qual a principal caracterstica estrutural dos colgenos?
3. Como se dividem os colgenos?
4. Por que as fibrilas colgenas no se associam ainda dentro da clula?
5. Como a molcula de elastina? Como so suas redes?
6. Qual o papel do colgeno e da elastina?
7. Qual a importncia da fibronectina?
8. O que a lmina ou membrana basal?
9. Alm do papel estrutural, qual a importncia da lmina basal?
134 C E D E R J
objetivos
AULA
Parede celular
Pr-requisito
Aulas 5, 6, 7 e 8.
INTRODUO
136 C E D E R J
MDULO 2
AULA
Plasmodesma
Clula companheira
Xilena
a
Feixe vascular
b
Floema
c
Figura 9.2: Os tecidos vegetais se diferenciam pela forma, tamanho, espessura e composio da parede
celular. No exemplo (b), vemos um feixe vascular e em torno dele clulas do parnquima. Nos detalhes (a)
e (c), clulas do xilema, com parede espessa reforada por anis de lignina, formando tubos ocos por onde
circula a seiva bruta. J as clulas do floema permanecem vivas e se comunicam com as vizinhas pelos plasmodesmata e tambm com as clulas companheiras. Nesse caso, as paredes celulares so mais delgadas.
138 C E D E R J
MDULO 2
AULA
C E D E R J 139
Lamela mdia
Pectina
Parede celular
Microfibrila de
primria
celulose
Membrana
plasmtica
Glicana
50nm
Figura 9.5: Modelo da parede celular primria mostrando seus principais componentes:
camadas de fibrilas de celulose ligadas entre si por glicanas e uma rede de molculas
de pectina. Enquanto as microfibrilas de celulose suportam foras de tenso, a pectina responde pela resistncia compresso.
!
D UMA PARADINHA
Na presena de ons Ca++, a pectina forma um gel. Essa propriedade
utilizada na confeco de gelias. Aproveite a paradinha para
ir cozinha e conferir o rtulo daquela gelia que voc comprou
(e, talvez, fazer um lanchinho com ela!).
140 C E D E R J
relao s seguintes.
Fotos: Mrcia Attias
FORMA E CRESCIMENTO
O crescimento de uma clula depende de dois fatores: expanso
decorrente da presso de turgor e remodelao da parede celular.
Como observado em todas as clulas (Aulas 10 a 12 de Biologia
Celular I), o meio intracelular hipertnico em relao ao meio extracelular;
assim, as clulas esto constantemente absorvendo gua por osmose.
O aumento do volume celular leva a uma presso hidrosttica, de modo que
a gua contida na clula empurra a parede celular. Isso chamado presso de
turgor e essencial tanto para que as clulas se expandam durante o crescimento
quanto para manter a rigidez natural (Figura 9.7).
C E D E R J 141
MDULO 2
eletrnica de varredura
AULA
142 C E D E R J
MDULO 2
9
AULA
Fibras de celulose
Meio extracelular
Citossol
Microtbulo ligado
membrana plasmtica
CONCLUSO
Muitas analogias e comparaes so possveis entre a matriz
extracelular das clulas animais e a parede celular dos vegetais. Ambas so
estruturas relacionadas adeso entre clulas e sua estrutura resistente
compresso e tenso. Enquanto os animais podem se dar ao luxo
de sintetizar fibras proticas como o colgeno, as plantas contam com
uma matria-prima barata e abundante, a celulose. Em contrapartida, as
GAGs e a pectina possuem muitas caractersticas em comum. A parede
celular uma estrutura plstica e importante, servindo para orientar
o crescimento celular e apresentando, de acordo com molculas que a
ela se integram, diferentes graus de permeabilidade e resistncia.
C E D E R J 143
RESUMO
Os tecidos vegetais, mais rgidos que os das clulas animais, formam-se e
se mantm coesos atravs de um tipo especfico de matriz: a parede celular.
Ela formada por componentes fibrilares que conferem planta resistncia tanto
tenso quanto compresso.
Novas clulas vegetais surgem a partir de mitoses que ocorrem na regio dos
meristemas. Entre as clulas-filhas forma-se uma parede primria fina e extensvel,
permitindo o crescimento posterior das mesmas.
Completado o crescimento e definida a forma da clula, forma-se, pela
deposio de novas camadas por baixo da parede primria, a parede secundria;
conseqentemente, o espao disponvel para a clula propriamente dita
diminui. A parede secundria comumente impregnada por molculas que
aumentam sua rigidez.
As molculas formadoras da parede celular so basicamente carboidratos:
celulose, glicanas, pectina e lignina.
A celulose sintetizada em complexos de celulose sintase na membrana
plasmtica.
A disposio das fibrilas de celulose acompanha o sentido dos microtbulos
corticais.
EXERCCIOS
1. O que diferencia a parede primria da secundria?
2. A que estrutura so anlogas a parede celular e a lamela mdia,
respectivamente?
3. Quais os componentes fibrilares da parede celular?
4. Quais os componentes da parede celular que conferem resistncia tenso?
5. E compresso?
6. Como so sintetizadas as molculas de celulose?
7. O que orienta a deposio das fibrilas de celulose?
144 C E D E R J
objetivos
10
AULA
A clula nervosa
Pr-requisitos
Aulas de transporte atravs da membrana plasmtica,
de Biologia Celular I (7, 8, 9 e 10).
Aula de endocitose, de Biologia Celular I (20).
Aulas de citoesqueleto, de Biologia Celular I (21 a 24).
Aula de trfego de vesculas, de Biologia Celular I (25).
INTRODUO
Axnio
Ramificaes
Corpo celular
Dendritos
Figura 10.1: O neurnio motor uma clula dotada de muitos prolongamentos. Os mais curtos so os dendritos, por onde o estmulo inicial geralmente chega; depois conduzido atravs de um longo axnio. Prximo
clula efetora (vide boxe), o axnio se ramifica, distribuindo o sinal por vrios pontos simultaneamente. As setas
indicam o sentido de propagao do estmulo nervoso.
146 C E D E R J
MDULO 3
10
BRADICARDIA),
VASOCONSTRIO
Contrao da
musculatura lisa que
envolve os vasos,
causando diminuio
do seu calibre
e conferindo palidez
pessoa.
VASODILATAO
Efeito oposto ao
da vasoconstrio.
O relaxamento da
musculatura lisa leva
ao aumento do
calibre dos vasos;
a pessoa fica com
a pele avermelhada.
TAQUICARDIA
Taqui, do grego
tachos, no sentido de
batimentos cardacos
rpidos, acelerados.
BRADICARDIA
O oposto
taquicardia. Tambm
do grego, bradi, lento.
C E D E R J 147
AULA
148 C E D E R J
MDULO 3
10
AULA
Figura 10.2: As clulas primitivas (A) tendiam a absorver osmoticamente grande quantidade de gua, podendo
romper-se. A bomba de sdio/potssio (B) expulsa ativamente ctions do meio intracelular, impedindo que a clula
arrebente pela absoro excessiva de gua.
Este um canal
diferente dos que
estudamos na
Aula 11, pois fica
sempre ABERTO, sem
depender de ligante
ou voltagem.
Meio extracelular
ATP
Membrana plasmtica
ADP+Pi
Meio intracelular
2 K+
Figura 10.3: A membrana do neurnio se mantm polarizada graas atividade da bomba de Na+/K+ e
presena de canais vazantes de K+.
C E D E R J 149
++++++++++++++++++++
_______________
Meio extracelular
MEMBRANA
Meio intracelular
POLARIZADA
________________
++++++++++++++++++++
DESPOLARIZADA
Figura 10.4: Distribuio de cargas nos meios intra e extracelular nos estados de repouso (polarizada) e atividade
(despolarizada) da membrana plasmtica.
150 C E D E R J
MDULO 3
10
AULA
Na+
ATP
K+
Membrana
plasmtica
ADP+Pi
Meio intracelular
2 K+
1
Figura 10.5: A despolarizao da membrana ocorre quando abrem-se os canais de Na+ 1 que entram, tornando
o meio intracelular positivo em relao ao exterior. Em seguida, 2 abrem-se canais que permitem a sada de K+
e iniciam a repolarizao da membrana. Por fim, 3 a bomba de Na+/K+ restabelece o potencial de repouso. Para
simplificar o esquema, os canais vazantes de K+ no foram representados.
C E D E R J 151
50
- 50
Figura 10.6: (a) O canal de Na+, inicialmente fechado, abre-se, disparando (t = 0) a despolarizao da membrana
(pico da curva). Rapidamente (t = 1) o canal de Na+ passa ao estado inativado, enquanto os canais de K+ no
mostrados na figura abrem-se e iniciam a repolarizao da membrana (curva descendente). Na ltima fase
(t = 2), o canal j voltou ao estado de repouso e pode ser reestimulado. (b) O perodo refratrio (em que o canal
est inativo) garante que apenas os canais ainda no abertos entrem em atividade, propiciando a progresso do
estmulo ao longo da membrana do axnio. A rea sombreada corresponde regio em que a membrana est
despolarizada, com canais inativados na retaguarda e canais se abrindo frente. As setas apontam o sentido
de deslocamento do estmulo.
Certamente voc conhece muitos neurotransmissores. Talvez voc no saiba que alguns estimulam o neurnio que
os recebe (so os estimulatrios), outros inibem (so os inibitrios). Para inibir um neurnio, o neurotransmissor,
ao se ligar ao receptor, abre canais de K+ ou de Cl-, tornando a membrana ainda mais difcil de despolarizar.
152 C E D E R J
MDULO 3
(mas no apenas sobre elas). Falaremos com mais detalhe sobre a acetilcolina mais
adiante. Outros neurotransmissores so:
O glutamato medeia a maior parte dos sinais excitatrios no crebro dos
vertebrados.
A adrenalina um dos neurotransmissores secretados pelos neurnios do
sistema nervoso autnomo. Entre outros efeitos, provoca a acelerao do ritmo cardaco
e a vasoconstrio.
O cido gama aminobutrico (GABA) o neurotransmissor inibitrio mais
importante do sistema nervoso central.
A dopamina um dos neurotransmissores produzidos por neurnios do sistema
nervoso central. Doenas como o mal de Parkinson esto relacionadas diminuio dos
nveis de dopamina.
A serotonina outro neurotransmissor excitatrio secretado apenas no crebro.
Atua sobre neurnios associados a sensaes de prazer.
As endorfinas tambm so neurotransmissores que induzem a uma sensao de
euforia. O bem-estar relatado aps a prtica de exerccios como ginstica e corrida est
relacionado liberao de endorfinas proporcionada por essas prticas.
10
AULA
1mm
Bainha de mielina
Camadas
Ndulos de Ranvier
Axnio
Ncleo da clula
de Schwann
b
1mm
Figura 10.7: (a) As clulas de Schwann se enrolam, formando a bainha de mielina em torno do axnio, o que
confere isolamento eltrico a essa membrana. (b) Microscopia eletrnica de transmisso da bainha de mielina,
formando uma espcie de rocambole em torno do axnio (foto: Atlas digital da UERJ).
MDULO 3
10
AULA
Figura 10.8: (a) Nas sinapses eltricas, o sinal eltrico passa diretamente do citoplasma de um neurnio para
o vizinho por junes comunicantes. (b) Nas sinapses qumicas, o estmulo eltrico trafega ao longo do axnio
(seta longa), um neurotransmissor exocitado na extremidade (seta espessa) e a clula seguinte o recebe atravs
de receptores de superfcie especficos.
VOC SABIA?
Que o peixe eltrico da Amaznia, ou poraqu, pode chegar a medir 1,5m e pode
gerar descargas eltricas de 200 volts? Essa corrente pode matar uma criana e provocar
o desmaio de um adulto. O nome cientfico do poraqu Electrophorus electricus e ele
tambm conhecido como enguia eltrica. 2/3 do comprimento de seu corpo so ocupados
por um tipo especfico de tecido, os rgos eltricos. Sendo quase cego, o poraqu
emite descargas eltricas de baixa intensidade para sondar o ambiente e, para ataque
ou defesa, descargas mais intensas.
Que, alm do poraqu, o Torpedo marmorata, uma espcie de raia de gua salgada,
tambm muito utilizada em estudos da transmisso sinptica colinrgica?
Que o curare, usado pelos ndios para envenenar flechas, uma molcula que se liga
ao receptor de acetilcolina na membrana das clulas musculares? Sob seu efeito, a musculatura
se relaxa, isto , o animal fica paralisado e pode ser facilmente capturado.
C E D E R J 155
A SINAPSE COLINRGICA
A contrao voluntria dos msculos esquelticos resulta da exocitose
de acetilcolina nos terminais nervosos dos neurnios motores, da sua rpida
difuso pelo espao entre estes e a membrana da clula muscular e de seu
reconhecimento pelos receptores localizados na membrana das clulas
musculares (Figura 10.9).
Axnio
Vescula sinptica
Fenda sinptica
Receptor
Clula muscular
Figura 10.9: Na sinapse qumica, um neurotransmissor exocitado na fenda sinptica, sendo reconhecido
por um receptor na membrana ps-sinptica.
156 C E D E R J
MDULO 3
10
AULA
Despolarizao da membrana
Canal de Ca++
ativado por voltagem
Axnio
Neutransmissor
Entrada de Ca++
Acetilcolina
Figura 10.10: A exocitose de acetilcolina depende da entrada de Ca++ atravs de canais ativados por voltagem
no terminal sinptico.
C E D E R J 157
Vescula
sinaptobrevina
Sinaptotagmina
Citoplasma
Membrana plasmtica
Sintaxina
Ca++
Vescula
Membrana plasmtica
Figura 10.11: Mecanismo de exocitose de uma vescula sinptica mediado por sinaptotagmina, sensvel ao
aumento de clcio, a v-SNARE sinaptobrevina e a t-SNARE sintaxina (esquema adaptado de Tucker & Chapman,
Biochemical Journal 366: 1-13, 2002).
VOC SABIA
Que a sinaptotagmina o alvo da toxina botulnica? Ao se ligar sinaptotagmina,
ela impede a exocitose das vesculas sinpticas, paralisando o msculo inervado por
aquele terminal. Isso pode ser fatal em grandes quantidades, se estivermos tratando do
diafragma, cuja paralisia leva morte por asfixia, como no botulismo; mas tambm pode
ser bom! Como? Com pequenas quantidades da toxina injetadas em locais estratgicos,
com fins teraputicos, no tratamento do excesso de suor nas axilas e nas mos, ou com
finalidade esttica, amenizando rugas de expresso. Isso mesmo, estamos falando do
famoso botox!
158 C E D E R J
MDULO 3
10
AULA
Depois de liberado na fenda sinptica, o neurotransmissor ligase ao seu receptor. No caso, o receptor um canal ativado por ligante,
a acetilcolina. Ao abrir-se o canal, a afinidade do receptor pela acetilcolina
diminui e ela se desliga, sendo rapidamente hidrolisada por uma enzima
especfica, a acetilcolinesterase, em acetato e colina. A acetilcolinesterase
tambm hidrolisa todo excesso de acetilcolina que possa estar presente
na fenda sinptica, de modo que os receptores no msculo no fiquem
sendo estimulados sem que haja outro impulso nervoso (j pensou se
voc mandasse o msculo da sua perna contrair uma vez e ele ficasse
contraindo vrias vezes at acabar o excesso de acetilcolina na fenda?!).
Os produtos de hidrlise voltam para o citoplasma do boto sinptico
e os componentes da membrana da vescula sinptica (SNAREs inclusive)
so endocitados em vesculas recobertas por clatrina (coated vesicles,
reveja Aula 20 de Biologia Celular I).
Esse mecanismo duplamente interessante, primeiro porque
impede que o terminal sinptico aumente demasiadamente sua rea pela
contnua fuso de vesculas; e tambm porque o acetato e a colina podem
ser reciclados, no prprio terminal, por uma enzima especfica que os
rene novamente, dando origem acetilcolina. Novas vesculas sinpticas
se formam a partir do endossoma inicial, em que seus componentes de
membrana tinham sido incorporados pelas coated vesicles, e so em
seguida preenchidas com a acetilcolina recm-formada a partir de colina
e acetato (Figura 10.12), ficando prontas para nova exocitose quando
outro impulso nervoso aumentar a concentrao de clcio.
Achou difcil? Que nada! Difcil seria se nossos neurnios motores
tivessem de esperar novas vesculas sinpticas virem l do corpo
celular, que pode estar a mais de um metro de distncia! Talvez voc
tivesse de esperar algumas horas para mexer de novo o dedo do p!
C E D E R J 159
Figura 10.12: As vesculas de acetilcolina se originam primariamente no corpo celular, trafegam pelo axnio (1) e
so exocitadas no terminal sinptico. No terminal tambm ocorre a endocitose dos componentes da membrana
da vescula (2), que se incorporam ao endossoma inicial. Do endossoma brotaro novas vesculas (3) que sero
preenchidas com acetilcolina (4) formada a partir de acetato e colina recuperados da fenda sinptica. As vesculas
sinpticas esto agora prontas para nova secreo (5).
O RECEPTOR DE ACETILCOLINA
Repetindo: molculas de acetilcolina so liberadas pelo neurnio
motor e se ligam a receptores especficos existentes na membrana da
clula muscular. O receptor para acetilcolina uma protena integral
da membrana do tipo canal (Figura 10.13). Quando duas molculas de
acetilcolina se ligam a esse receptor, o canal se abre, deixando entrar ons
sdio e desencadeando a abertura de outros canais (estes ativados por
voltagem) que propagam o impulso por toda a membrana. Dessa maneira,
a membrana da clula muscular excitada, mas, diferente do neurnio,
a resposta da clula muscular a contrao de filamentos de actina de seu
citoesqueleto. Esse movimento envolve tambm a participao da protena
motora miosina e de outras, que voc vai conhecer na Aula 11.
Stio de ligao
da acetilcolina
Canal
Bicamada lipdica
4nm
Passagem
Figura 10.13: O receptor de acetilcolina um canal ativado por ligante composto por cinco subunidades proticas transmembrana. As duas subunidades alfa contm o stio de ligao para acetilcolina. direita, uma viso em corte do canal.
Podem passar ctions pequenos o bastante para no ficarem retidos pelas cargas negativas do interior do canal.
160 C E D E R J
MDULO 3
10
EXERCCIOS
1. O que so neurnios?
2. Que particularidades possui o citoesqueleto do neurnio?
3. O que so sinapses? Como se classificam?
4. O que a polaridade da membrana?
5. O que garante que o estmulo seja propagado?
6. Como a membrana volta ao estado de repouso?
7. Qual o papel do clcio na transmisso sinptica?
C E D E R J 161
AULA
RESUMO
objetivos
AULA
A clula muscular
11
Pr-requisito
Aulas de transporte atravs da membrana
plasmtica, de Biologia Celular I (7, 8, 9
e 10). Aulas de citoesqueleto, de Biologia
Celular I (21 a 24). Aula de clula nervosa
(10), de Biologia Celular II.
INTRODUO
Ncleo
Miofibrilas
Juno entre
duas clulas
Figura 11.1: Os trs tipos de clulas musculares: as
lisas (a) so alongadas e uninucleadas; (b) as cardacas
tambm so uninucleadas, mas comunicam-se por junes Gap e possuem aspecto estriado em seu interior.
As fibras estriadas esquelticas (c) possuem vrios
Clula
Interior de duas clulas
164 CEDERJ
MDULO 3
11
AULA
ORIGEM
O msculo esqueltico formado por clulas multinucleadas, ou
seja, o que chamamos sinccio. Estas clulas so alongadas, sendo, por isso
mesmo, chamadas fibras musculares (Figura 11.1.c). Originam-se a partir de
clulas embrionrias chamadas mioblastos. Durante o desenvolvimento do
organismo, os mioblastos se fundem, dando origem s fibras musculares.
Sendo uma clula altamente diferenciada, a fibra muscular,
a princpio, no se divide, porm novas fibras podem se formar pela fuso
de mioblastos. De fato, os seres humanos j nascem com o nmero de
clulas musculares definido. Entretanto, aps o nascimento, essas fibras
aumentam de tamanho. O alongamento da fibra muscular depende
da incorporao de mioblastos s fibras j existentes, aumentando,
assim, o nmero de ncleos em cada fibra. Em contrapartida, o crescimento
que se observa em praticantes de musculao e halterofilismo conseqncia
tanto do aumento da espessura da fibra pelo acrscimo de fibrilas contrteis
quanto pela fuso de mais mioblastos a cada clula muscular.
No adulto, persistem alguns mioblastos em estado quiescente, que
so chamadas clulas- satlite (ou mioblastos-satlite). Em caso de leses,
muito comuns em atletas, essas clulas so estimuladas a se proliferar
e a se fundir, dando origem a novas fibras musculares. Atualmente h
grande investimento em pesquisas que visam a estimular a multiplicao e
a diferenciao de mioblastos para regenerao de msculos que tenham
sido gravemente lesados (veja a Aula 12).
CEDERJ 165
Miofibrilas
Retculo
endoplasmtico
Tbulo transverso
Miofibrilas
Membrana plasmtica
(sarcolema)
Trade
Entrada do tbulo
166 CEDERJ
MDULO 3
11
AULA
Retculo sarcoplasmtico
Tbulo T
Retculo sarcoplasmtico
AS MIOFIBRILAS
Observe atentamente as Figuras 11.1 e 11.2. Note que em ambas
apenas um fragmento da fibra muscular esqueltica foi representado.
Na Figura 11.4, voc pode ver que essas clulas so extremamente
longas, se comparadas a hepatcitos, linfcitos ou outras clulas animais.
Portanto, na Figura 11.2, est representada apenas uma fatia da clula,
isto , a clula muscular esqueltica longa e relativamente volumosa
quando comparada a outros tipos celulares.
CEDERJ 167
corte longitudinal.
(1) Bandas escuras
(2) Bandas claras
(3) Ncleo perifrico
A imagem original pode ser observada em maiores aumentos no site http://www2.uerj.br/~micron/
2
2
atlas/Muscular/Musc0.htm
(cortesia: Atlas Digital do Lab. Microscopia Eletrnica UERJ).
168 CEDERJ
MDULO 3
11
AULA
b
Sarcmero
Banda escura
Banda clara
Banda clara
Disco Z
Disco Z
Miosina
actina
Figura 11.6: (a) Miofibrilas em corte longitudinal observadas ao microscpio eletrnico de transmisso. (b)
O sarcmero, ou unidade de contrao, constitudo por dois discos Z de onde partem microfilamentos de
actina. Esses microfilamentos interpenetram feixes de molculas de miosina, formando a banda escura, como
mostrado no esquema em (c). (Fotos de Thais Souto Padrn)
Actina
Miosina
Disco Z
Figura 11.7: Na contrao muscular, os filamentos de actina deslizam sobre os feixes de miosina. H seis filamentos
de actina ao redor de cada feixe de miosina. Os sarcmeros encolhem, como os gomos de uma sanfona.
CEDERJ 169
Actina
Actina
Disco Z
Disco Z
2 nm
Regio flexvel
150 nm
Figura 11.9: A molcula de miosina do tipo II possui duas cadeias pesadas compostas de uma cabea globular e uma cauda. Essas caudas se entrelaam. As cadeias leves se posicionam prximo s cabeas globulares.
As cabeas globulares possuem atividade ATPsica e um stio de ligao com a molcula de actina. A regio
entre a cauda e as cabeas globulares flexvel.
Caudas
MDULO 3
AULA
Cadeia leves
11
Cabea globular
Cabeas de miosina
Figura 11.10: As molculas de miosina se agregam pelas caudas, formando feixes onde metade das molculas
est orientada num sentido e a outra metade no sentido oposto. As cabeas globulares ficam expostas na
superfcie de todo o feixe e so excludas apenas da regio central, onde s h caudas.
CEDERJ 171
Feixe de miosina
Disco Z
Filamento de actina
Cap Z
Tropomodulina
Titina
Cap Z
a
Nebulina
b
Figura 11.11: (a) Esquema representando a posio das protenas cap Z e tropomodulina, que
estabilizam as extremidades dos filamentos de actina, evitando que sofram despolimerizao.
(b) As protenas titina e nebulina contribuem, respectivamente, para manter esticados os filamentos de actina e para facilitar o retorno do sarcmero ao estado relaxado.
172 CEDERJ
MDULO 3
AULA
11
CEDERJ 173
Cabea da miosina
Actina ()
1 LIgao de ATP
ATP
Miosina e actina
dissociadas
A cabea da miosina
se move e se liga a
uma nova molcula
de actina
2 Hidrlise do ATP
ADP+P
A cabea da miosina d
um "puxo" brusco no
filamento de actina
3 O Pi liberado
P
ADP
Sentido do
deslocamento
4 O ADP liberado
ADP
Figura 11.12: Etapas da contrao muscular. Repare que, para cada ATP hidrolisado, o filamento de actina
caminha no sentido do centro do sarcmero. Inicialmente, a cabea da miosina estava ligada subunidade
preta da actina. Ao fim do ciclo de contrao, o filamento havia caminhado e a mesma miosina estava presa
subunidade cinza. Embora ambos se localizem na cabea globular, o stio cataltico para hidrlise de ATP
um, e o stio de ligao actina-miosina, outro.
174 CEDERJ
MDULO 3
11
CEDERJ 175
AULA
No corra!
Axnio
Boto sinptico
176 CEDERJ
MDULO 3
11
AULA
DHPR
Tbulo T
polarizado
CITOSSOL
Potencial de ao
Retculo sarcoplasmtico
Ca2+
Figura 11.14: Os tbulos T possuem uma protena voltagem dependente que fica em contato com o canal de Ca2+ da membrana do
retculo sarcoplasmtico, podendo abri-lo.
CEDERJ 177
Tropomiosina
Ligao do Ca
+2
Actina
Figura 11.15: A molcula de tropomiosina encobre o stio de ligao para miosina na molcula de
actina. Esse stio s fica exposto quando a troponina se liga ao Ca+2.
178 CEDERJ
Troponina
MDULO 3
11
AULA
Despolarizao do neurnio
1
3
Canal de Na+ Voltagem dependente
Ca2+
2
Na+
Receptor de acetilcolina
6
Ca2+
Ca2+
ATP
Tbulo T
Na+
ADP
5
Ca2+
Ca2+
Ca2+
Ca2+
2+
Ca2+ Ca
Ca2+
Ca2+
Retculo sarcoplasmtico
Figura 11.16: A chegada da onda de despolarizao ao terminal sinptico leva abertura de canais de Ca2+ voltagem
dependentes 1 . A entrada de clcio no terminal sinptico desencadeia a exocitose do neurotransmissor acetilcolina, que se liga a seu receptor 2 , um canal voltagem dependente que inicia a despolarizao da membrana
da fibra muscular. A despolarizao do sarcolema prossegue pela abertura sucessiva de canais de Na+ voltagem
dependentes 3 . Ao atingir os tbulos T, a onda de despolarizao faz com que a protena DHPR 4 provoque
a abertura dos canais de Ca2+ presentes na membrana do retculo sarcoplasmtico 5 . Quando o potencial de
membrana for restabelecido, a Ca2+ ATPase da membrana do retculo sarcoplasmtico bombear o Ca2+ de volta
para a luz do retculo 6 .
CEDERJ 179
180 CEDERJ
MDULO 3
11
AULA
182 CEDERJ
MDULO 3
11
CEDERJ 183
AULA
CONCLUSO
Vimos na aula de hoje como a organizao estrutural da clula muscular
e como ela se presta sua funo contrtil especfica. Surpreendentemente (ou
no), a musculatura voluntria dos invertebrados (caranguejos, gafanhotos,
minhocas etc.) muito semelhante dos vertebrados e muitos dos estudos sobre
a contrao muscular voluntria foram, e continuam a ser, feitos nesses animais.
Se considerarmos que o sucesso evolutivo (= sobrevivncia) de um animal depende,
em grande parte, de sua capacidade de correr atrs de suas presas e escapar das
espcies predadoras, isso muito justificvel, no acham?
Navegar preciso...
Vrios sites tratam desse assunto. Selecionamos alguns para
voc visitar. Apesar da maioria dos textos estar em ingls, as imagens
so auto-explicativas e vrias animaes e filmes esto disponveis.
cs.southwesternadventist.edu/.../ sk_muscle/- a interao actinamiosina. O papel do clcio, do ATP e a participao da troponina e da
tropomiosina no processo regulador.
Para uma bela combinao de microscopia eletrnica e animao.
V ao site http://www.bio.davidson.edu/misc/movies/musclcp.mov
184 CEDERJ
MDULO 3
11
CEDERJ 185
AULA
RESUMO
EXERCCIOS
1. Qual a origem das clulas musculares esquelticas? Como crescem?
2. Quais so e quais as principais caractersticas dos outros tipos de msculo?
3. Defina:
a) sarcmero
b) sarcolema
c) retculo sarcoplasmtico
d) tbulo T- ou tbulo transverso
e) trade
4. Qual a funo das seguintes protenas acessrias:
a) alfa-actinina
b) Cap Z
c) tropomodulina
d) troponina
e) tropomiosina
f) nebulina
g) titina
5. Por que nos referimos a filamentos de actina e a feixes de miosina?
6. Como, uma vez no estado contrado, o sarcmero volta ao estado relaxado?
7. Por que ocorre a rigidez cadavrica?
186 CEDERJ
objetivos
AULA
As clulas-tronco
12
Pr-requisito
Aula 4 de Biologia Celular I
Aulas 5, 6, 7, 8, 9, 10 e 11
de Biologia Celular II
INTRODUO
A aula de hoje repleta de perguntas, muitas ainda sem resposta. Esperamos que
ela seja instigante e aguce sua curiosidade e seu interesse pela Biologia Celular.
Poucos assuntos tm gerado tanta polmica nos dias de hoje quanto a
descoberta das clulas-tronco. Sua potencial utilizao na cura de leses
decorrentes de acidentes e enfermidades como cncer e mal de Alzheimer
abre um fascinante leque de possibilidades. Por outro lado, aspectos ticos
envolvendo a manipulao de embries, a clonagem e outras questes delicadas
tambm precisam ser bem analisados. Mas, afinal, o que so clulas-tronco?
H apenas um tipo de clula-tronco? Como podem ser obtidas? Qual seu
papel natural? Como seu potencial pode ser aproveitado para melhorar nossa
vida? Antes de tomar partido, seja pr ou contra, conhea um pouco sobre
este assunto.
O QUE SO CLULAS-TRONCO?
As clulas-tronco so clulas no especializadas capazes de
renovar-se continuamente. Quando uma clula-tronco se divide, as
clulas-filhas tanto podem continuar sendo clulas-tronco quanto
ingressar numa via de proliferao (novas divises) e progressiva
diferenciao, dando origem aos diversos tipos celulares que compem
o indivduo (clulas cardacas, pancreticas, sangneas, neurnios etc.).
Essa diferenciao passa por tipos celulares intermedirios, tambm
capazes de se multiplicar. Os tipos intermedirios daro origem a um
ou mais tipos celulares especficos (Figura 12.1).
188 CEDERJ
MDULO 3
12
AULA
Clula-tronco
Tipo intermedirio
Clula diferenciada
Figura 12.1: Ao se dividir, uma clula-tronco tanto pode dar origem a outra clula-tronco quanto a tipos
celulares mais diferenciados, mas tambm capazes de proliferar, tanto gerando clulas ainda pouco
diferenciadas quanto clulas que resultaro num tipo especfico. A clula totalmente diferenciada no
mais se divide.
CEDERJ 189
vulo
fertilizado
(zigoto)
1 12 dia
2 clulas
4 dias
blastocisto
visto em corte
2 12 dias
3 dias
mrula de 8
16 clulas
clulas compactao
corpo polar
Zona
pelcida
Proncleos
materno e paterno
Massa interna
de clulas
Trofoectoderma
Blastocele
190 CEDERJ
MDULO 3
12
AULA
CLULAS-TRONCO EMBRIONRIAS
Quando clulas da massa interna de um blastocisto so implantadas
sob a pele de um camundongo nude (veja o boxe), desenvolve-se uma
massa tumoral chamada teratoma. Nesse tumor coexistem clulas que
permanecem indiferenciadas e clulas diferenciadas dos mais diversos tipos
(glandulares, epiteliais, sseas, musculares etc.), embora sem nenhuma
organizao funcional.
Os camundongos nude receberam este nome por no apresentarem plos. Entretanto, mais surpreendente do que isso
o fato de nascerem sem a glndula timo. Esta caracterstica
determinada por um gene recessivo, denominado nu. Por no
possuir timo, estes camundongos so incapazes de constituir
linfcitos T, essenciais para muitas respostas imunolgicas.
Como so incapazes de reconhecer e rejeitar enxertos de
clulas derivadas de outros organismos, so muito utilizados
no estudo de tumores em geral.
CEDERJ 191
Alm de aminocidos,
glicdios e lipdeos,
as clulas dependem
de vrios peptdeos
sinalizadores do
meio extracelular
para permanecerem
saudveis
so os fatores,
de crescimento,
de diferenciao
e outros. Vrias
dessas molculas
j so conhecidas,
e sua importncia
para a clula j est
determinada. O LIF
(fator inibidor da
leucemia), mencionado
no texto, uma
dessas molculas.
Caso ele deixe de ser
produzido, por algum
motivo, o indivduo
desenvolver leucemia,
o que mostra que, para
que nossas clulas se
mantenham saudveis,
preciso que elas
sejam constantemente
guiadas em seu
comportamento por
esses sinais externos.
A ao conjunta e
coordenada do LIF
e dos demais fatores
garante a manuteno
e renovao saudvel
dos diversos tipos
celulares que compem
um organismo.
192 CEDERJ
Blastocisto
Remoo da camada
externa de clulas
MDULO 3
AULA
Placa de cultura
de clulas
12
Blastocisto em cultura
Massa interna
de clulas
Camada de
clulas suporte
Massa interna
de clulas
Desagregao das
clulas
Adio de fatores
de diferenciao
especficos
Disperso das clulas
em novas colnias
Novas colnias
formadas
Grupos de clulas
Fatores de
diferenciao
Colnias de
clulas-tronco
embrionrias
Transferncia
das clulas para
tecidos lesados
Clulas musculares
cardacas
Clulas pancreticas
Cartilagem e tendes
Figura 12.3: Resumo das etapas do cultivo de clulas-tronco embrionrias. Embora a metodologia de obteno
e manuteno de clones de clulas-tronco j esteja dominada, a induo de diferenciao e real transferncia
dessas clulas para pessoas ainda est em fase experimental. Em princpio, a adio de fatores de diferenciao
especficos levar diferenciao das colnias de clulas-tronco embrionrias em virtualmente qualquer tipo
celular (adaptado de Scientific American, 1999. Roger Pedersen).
CEDERJ 193
TELMERO
Extremidade do
cromossoma na
qual o DNA possui
uma seqncia
caracterstica que
replicada de forma
diferente.
QUIESCENTE
TELMEROS
dos cromossomos
194 CEDERJ
MDULO 3
12
AULA
Doadora
do ovcito
Ovcito
Doadora
do ncleo
Remoo do
ncleo
Ovcito
enucleado
Ncleo do
doador
nova clula
(embrio)
Injeo do
ncleo doado
Dolly
Figura 12.4: A ovelha Dolly foi produzida a partir de um processo de clonagem pioneiro.
CEDERJ 195
Clula
intermediria
Amplificao
Clula diferenciada
terminal
Figura 12.5: Quando uma clula-tronco se divide, uma das clulas-filhas fica comprometida para diferenciao, enquanto a outra idntica clula-tronco primordial. A clula comprometida se dividir vrias vezes,
gerando tipos intermedirios cada vez mais especializados, at a formao de clulas totalmente diferenciadas, que no mais se dividiro.
196 CEDERJ
MDULO 3
12
AS CLULAS-TRONCO HEMATOPOITICAS
AULA
HEMATOPOITICAS,
HEMATOPOITICO
De hemato: sangue
+ poese: formao;
relativo formao do
sangue.
Neutrfilo
Clula precursora
mielide
Clula precursora
linfide
Clula-tronco
hematopoitica
Clula hematopoitica
multipotente
Linfcito T
Linfcito B
Hemcias
Clula precursora
eritride
Figura 12.6: Ao se dividir, uma clula-tronco da linhagem hematopoitica pode dar origem a clulas multipotentes que, de acordo com os estmulos recebidos, diferenciam-se em precursores de clulas mielides, clulas
linfides ou hemcias. Cada um desses tipos celulares intermedirios capaz de se dividir, amplificando a
prognie da clula-tronco que lhes deu origem; entretanto, linfcitos, neutrfilos e eritrcitos so clulas muito
diferenciadas e no se dividem mais.
CEDERJ 197
O QUE DETERMINA SE, AO SE DIVIDIR, UMA CLULATRONCO HEMATOPOITICA DAR ORIGEM A OUTRA
CLULA-TRONCO HEMATOPOITICA OU ENTRAR EM
ROTA DE DIFERENCIAO (CLULA PROGENITORA
MULTIPOTENTE)?
Essa uma questo complexa que comea a ser respondida.
As clulas-tronco hematopoiticas (CTH) expressam em sua superfcie
a protena notch. Por sua vez, um outro tipo de clula-tronco que
tambm reside na medula, as clulas-tronco estromais (CTE), possuem
um receptor para notch. Quando h o reconhecimento (adeso) entre a
protena notch da CTH e o seu receptor em CTE, a primeira permanecer
como clula-tronco aps a diviso. Na ausncia desse reconhecimento,
a clula entrar em rota de diferenciao ou ento morrer (Figura 12.7).
A protena notch no o nico fator envolvido na deciso sobre o futuro
das CTH que se dividem. O sistema bem mais complexo, envolvendo
o mtuo reconhecimento de outras protenas sinalizadoras.
notch
Clula-tronco
hematopoitica
Receptor de notch
Clula-tronco
estromal
Figura 12.7: A sinalizao resultante da interao com outras clulas resguarda a CTH no seu estado primitivo.
As clulas-filhas no ligadas a uma CTE entram na rota de diferenciao em clula progenitora.
198 CEDERJ
MDULO 3
12
AULA
CEDERJ 199
CLULAS-TRONCO NERVOSAS
A descoberta de clulas-tronco no crebro causou grande euforia,
pois abriu a perspectiva de cura para doenas degenerativas, como os
males de Alzheimer e de Parkinson, alm de possibilitar a recuperao
de seqelas causadas por acidentes. Apesar disso, no crebro adulto essas
clulas do origem apenas a clulas da glia (astrcitos e oligodendrcitos),
embora se saiba que durante o desenvolvimento embrionrio as clulas
das cristas neurais resultem tanto em clulas da glia como em neurnios
e, conforme suas rotas de migrao no embrio, em msculo liso e
melancitos. A induo da diferenciao dessas clulas em neurnios
funcionais ainda no foi estabelecida.
Entretanto, continua havendo a possibilidade de que sejam
descobertos fatores que induzam proliferao e migrao de clulastronco do sistema nervoso central para reas lesadas. Essa esperana
provm da observao de que, em roedores, clulas-tronco provenientes
do hipocampo foram cultivadas in vitro e reimplantadas prximo ao
bulbo olfatrio no crebro do animal doador, onde formaram sinapses
e passaram a se comportar como neurnios olfatrios.
200 CEDERJ
MDULO 3
12
AULA
CEDERJ 201
202 CEDERJ
MDULO 3
AULA
12
Vilosidade intestinal
(no h diviso celular)
Vista da cripta
intestinal em corte
Clulas epiteliais
Cripta
Vista da vilosidade
intestinal em corte
Clulas diferenciadas
(no se dividem)
Direo da
migrao celular
Clulas progenitoras
que se dividem a cada
2 horas
Clulas de Paneth
(no se dividem)
Clulas-tronco
(se dividem a cada
24 horas)
Figura 12.8: (a) A renovao do epitlio intestinal depende de clulas-tronco residentes em criptas. A rpida
diviso dessas clulas d origem a outras clulas, chamadas progenitoras, que ao alcanar a superfcie das
vilosidades geram os diferentes tipos celulares. As clulas de Paneth tambm se originam a partir das clulastronco, mas migram na direo do fundo da cripta. (b) Corte histolgico do intestino delgado. Esto apontadas
(1) as clulas caliciformes (secretoras de muco) e (2) as clulas absortivas. Imagem cedida do Atlas digital do
Laboratrio de Microscopia eletrnica da UERJ http://www2.uerj.br/~micron/atlas/Menu.htm.
CEDERJ 203
MULTIESTRATIFICADA
Em muitas camadas,
ou estratos.
204 CEDERJ
MDULO 3
12
AULA
!
A descamao das clulas queratinizadas um dos principais constituintes do p que se
acumula sobre os mveis de nossa casa. caros microscpicos costumam se alimentar dessas clulas. Esses caros so poderosos alrgenos para diversas pessoas. Portanto, se voc
alrgico poeira, temos uma novidade para voc: sua alergia causada por caros que se
alimentam de sua prpria pele morta!
Clula queratinizada
descamando
Clula mortas
queratinizadas
Clulas granulosas
Clulas espinhosas
Clulas basais
Lmina basal
Tecido conjuntivo
a
Clula basal
subindo
Clula basal
em diviso
Figura 12.10: (a) Representao esquemtica das diversas camadas da pele. (b) Corte histolgico de pele apontando (1) a camada de clulas mortas e queratinizadas e (2) as diversas camadas do epitlio. Imagem cedida do
Atlas digital da UERJ retirada do site http://www2.uerj.br/~micron/atlas/menu.htm.
CEDERJ 205
CONCLUSES
A terapia celular, utilizando clulas-tronco, vem avanando rapidamente.
As limitaes decorrentes da proibio da utilizao de embries humanos em
quase todos os pases, inclusive o Brasil, vm sendo superadas pelos avanos obtidos
no conhecimento das potencialidades de diferenciao das clulas-tronco adultas.
A mdio prazo essa tecnologia dever substituir em larga escala, e com muitas
vantagens, os transplantes de rgos.
Para que esse objetivo seja atingido, fundamental tornar rotineiros os seguintes
processos:
coleta e proliferao extensiva de clulas-tronco, a fim de gerar quantidades
suficientes de clulas;
domnio das etapas de induo da diferenciao em tipos celulares
predeterminados;
integrao anatmica e funcional das clulas transplantadas ao tecido
adjacente.
Um procedimento j disponvel em alguns hospitais e centros de pesquisa a
preservao, por congelamento, de clulas-tronco do cordo umbilical. Assim,
o indivduo disporia de uma fonte de clulas-tronco do tipo e do doador ideais
(embrionrias e autlogas) para utilizao em caso de necessidade.
206 CEDERJ
MDULO 3
CEDERJ 207
AULA
12
RESUMO
EXERCCIOS
1. O que caracteriza uma clula-tronco?
2. O zigoto uma clula-tronco?
3. O que o blastocisto?
4. De onde so retiradas as clulas-tronco embrionrias?
5. Como se pode produzir um animal clonado, como a ovelha Dolly?
6. Qual a principal desvantagem da clonagem de animais?
7. O que so clulas-tronco do adulto?
8. Que tipos de clulas-tronco existem na medula ssea?
9. Que tipos celulares podem originar-se a partir deles?
10. O que determina se, ao se dividir, uma clula-tronco vai entrar em diferenciao
ou permanecer indiferenciada?
11. Onde se localizam as clulas-tronco do epitlio intestinal?
12. Onde se localizam as clulas-tronco do tecido muscular esqueltico?
13. Em que aplicaes teraputicas as clulas-tronco j esto sendo utilizadas?
14. Quais as perspectivas de uso dessas clulas para outras doenas?
208 CEDERJ
objetivos
AULA
A clula apoptptica
13
Pr-requisito
Para acompanhar melhor esta aula,
voc dever rever as Aulas 13 e 14
de Biologia Celular I (Receptores de
membrana e princpios de sinalizao
celular I e II) e tambm a Aula 1 de
Biologia Celular II
(O ciclo celular).
INTRODUO
MORTE CELULAR
PROGRAMADA
morte celular.
As clulas podem morrer de duas maneiras: acidental ou programada. Os
processos de morte no-acidental so promovidos e finamente regulados por
protenas sintetizadas pela prpria clula que ir morrer. Tal suicdio celular
chamado de
APOPTOSE
Tipo de morte
celular programada
caracterizada
por mudanas
morfolgicas
especficas. O nome
vem do grego
antigo e significa
queda de folhas ou
ptalas. A apoptose
observada em clulas
de metazorios,
incluindo plantas
e animais, com
genes especficos
responsveis pela
expresso de protenas
essenciais para o
processo.
APOPTOSE,
que apresenta um
210 C E D E R J
MDULO 3
13
AULA
CARL VOGT
(1817-1895)
Naturalista suo,
rduo defensor das
idias de Darwin,
foi o primeiro reitor
da Universidade
de Genebra, onde
trabalhou com
histologia animal
comparada, geologia,
entre outros assuntos.
Foi o primeiro
a descrever os
sifonforos. Saiba
mais sobre Vogt
e sua obra no site
www.darse.org/
images/ portrait_
vogt.jpg
consideramos
ANDREW WYLLIE
Patologista
australiano,
chefe do
Departamento
de Patologia da
Universidade
de Cambridge
(Inglaterra), criador
do termo apoptose.
NECROSE
Tambm conhecida
como morte celular
acidental, fruto
de um dano externo
leso por agente
qumico ou fsico
clula. No ocorre
a expresso de
molculas especficas
para este processo.
AUGUST WEISMANN
(1834-1914)
Bilogo alemo,
trabalhou
principalmente com
embriologia de
insetos e crustceos.
Foi um dos
primeiros cientistas
a discordar das
idias de Lamarck,
mostrando que os
caracteres adquiridos
no so herdados.
Saiba mais no site
www.nceas.ucsb.edu/
~alroy/lefa/
Weismann.html
C E D E R J 211
212 C E D E R J
MDULO 3
13
AULA
RESPOSTA
do organismo.
RESPOSTA
INFLAMATRIA
Resposta imune local de
um tecido a um dano
ou infeco, causada
geralmente por leuccitos
ou macrfagos, ao
lanarem no local
mediadores (como a
histamina) que causam
dor no organismo.
BLEBBING
(borbulhamento),
BLEBBING DE
MEMBRANA
Tambm conhecido
como zeiose, a intensa
movimentao do
citoplasma, fruto de
uma atividade ainda
no muito conhecida
das protenas do
citoesqueleto. Em
videomicroscopia,
observa-se uma
frentica formao de
bolhas na clula. Estas
bolhas, por sua vez,
estaro carregadas de
pedaos de organelas e
ncleo com cromatina
fragmentada. Este
evento, mesmo sendo
violento, garante que
no ocorra rompimento
das membranas da
clula. Para ver um
interessante vdeo de
zeiose, viaje pela Internet
em www.cellsalive.com/
apop.htm
C E D E R J 213
214 C E D E R J
MDULO 3
13
AULA
Imagem: Fernando Real
!
O parasita esperto - a translocao de fosfatidilserina do folheto interno para o folheto
externo da membrana um importante passo para a eliminao dos corpos apoptticos,
j que este fosfolipdio no folheto externo chama a ateno de macrfagos, que logo
fagocitaro estes corpos. Parasitas do gnero Leishmania, que necessitam viver dentro
de macrfagos para sobreviver e dividir-se, expressam fosfatidilserina na sua superfcie
para estimular a sua internalizao pelos macrfagos.
C E D E R J 215
LINFCITOS T
CITOTXICOS
So um tipo de
leuccito responsvel
pela resposta imune
adaptativa capaz
de interagir com
clulas infectadas
por vrus,
protozorios ou
bactrias,
destruindo-as.
LINFCITOS
CITOTXICOS
216 C E D E R J
MDULO 3
13
AULA
b
a
Ligante de Fas
Fas
Propagao
Modulao por
outros fatores
Ampliao
Divergncia para
alvos mltiplos
Apoptose
C E D E R J 217
Figura 13.5: Na via externa, a protena adaptadora FADD se liga, por um lado,
protena Fas; pelo outro, a uma pr-caspase.
218 C E D E R J
CASPASES
E eu tenho isso? Tem
sim, e ao contrrio do
que o nome sugere,
elas no so protenas
cabeludas.
O nome caspase vem
de cysteine-protease
with aspartate
specificity, ou seja,
uma protease que
possui o aminocido
cistena em seu stio
ativo, e apresenta a
capacidade de clivar
protenas nas regies
que o aminocido
cido asprtico.
As caspases atuam
na degradao de
protenas, como as
laminas nucleares,
na ativao da
DNAse, (ativando
a degradao do
DNA), de protenas
citoplasmticas
e outros eventos
relacionados morte
celular programada.
Figura 13.6: (a) Ativao das caspases: cada enzima fabricada como uma proenzima inativa (procaspase) que
ser ativada por clivagem feita por outra caspase. Uma caspase ativa composta por dois fragmentos clivados
da procaspase. (b) Cascata das caspases: uma caspase ativa capaz de ativar diversas outras caspases, que por
sua vez podem ativar muito mais caspases. Alm disso, estas enzimas estaro degradando substratos celulares.
C E D E R J 219
13
MDULO 3
AULA
Figura 13.7: O estmulo externo ativa, via FADD, a caspase 8 que, por sua vez, ativar a caspase 3, ou caspase
efetora. A partir da, cada caspase capaz de ativar diversas outras, gerando uma reao em cascata que
se amplifica rapidamente. Alm disso, estas enzimas estaro degradando substratos celulares.
220 C E D E R J
MDULO 3
13
AULA
C E D E R J 221
Clula-alvo
Agregao
e clivagem de
molculas de
procaspase-8
Procaspase-8
inativa
Caspase-8
ativada
Clula-alvo
apopttica
Cascata de
caspases
Citocromo c no
espao intermembranas
Protena
adaptadora (APaf-1)
Caspase-9
ativada
Agregao de Apaf-1
e ligao procaspase-9
Ativao do
procaspase-9
Liberao de
citocromo c
e ligao a
Apaf-1
Mitocndria
rompida
Cascata de
caspases
Procaspase-9
inativa
222 C E D E R J
MDULO 3
13
AULA
nucleares)
degradao do DNA genmico (resultado da ao de
DNAase)
fragmentao de pedaos celulares envoltos por membrana
(blebbing), devido despolimerizao de protenas do
citoesqueleto
externalizao de fosfatidilserina na membrana plasmtica
(pela inativao de enzimas que as mantm viradas para o
folheto interno da membrana).
Figura 13.10: A via externa de induo de apoptose converge para ativao da protena Bid, um dos componentes
da via interna de estimulao.
!
Listamos abaixo algumas das protenas clivadas na cascata apopttica:
- GELSOLINA: protena que se liga a microfilamentos, responsvel pela estabilizao
destes filamentos.
- FODRINA: protena que tambm se liga a microfilamentos, responsvel por manter
os feixes de actina paralelos entre si.
- PARP (Poli ADP Ribose Polimerase): enzima responsvel por reparar danos causados
no DNA.
- ICAD (inibidor da DNAse ativada por caspases): protena que inibe o funcionamento
de uma enzima que quebra DNA (a CAD). A fragmentao de DNA causada por esta
enzima especfica, fragmentando DNA em mltiplos de 200 pares de bases.
C E D E R J 223
224 C E D E R J
MDULO 3
13
AULA
C E D E R J 225
226 C E D E R J
Ao fim da
lactao, clulas
do epitlio
mamrio morrem
quando privadas
de hormnio
Mais de 95%
das clulas
T imaturas
morrem ainda
no timo
MDULO 3
13
Em alguns gnglios,
cerca de 80% dos
neurnios morrem
Clulas morrendo
(sombra clara)o
No homem,
clulas dos dutos
mullerianos
morrem
Quando privadas
de hormnio,
clulas da
prstata morrem
Clulas das
membranas
interdigitais
morrem por
apoptose
Figura 13.11: Tipos de clulas que podem sofrer processos de morte celular programada ( esquerda). Ao centro,
micrografias eletrnicas de varredura da formao dos dedos em uma pata de camundongo. direita, microscopia
de fluorescncia marcando as clulas apoptticas.
C E D E R J 227
AULA
Clulas epiteliais
precisam morrer para
que ocorra a fuso
do palato
RESUMO
228 C E D E R J
MDULO 3
13
- A renovao dos epitlios, o desaparecimento da cauda dos girinos, a morte
de neurnios que no se conectam corretamente e a eliminao de clulas
contaminadas por vrus ocorrem por apoptose.
- Outros tipos de morte celular programada so a autofagia, a parapoptose e a
morte celular negra.
EXERCCIOS
1. Defina morte celular programada.
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
2. Qual(is) seria(m) a(s) funo(es) primordial(ais) da morte celular
programada?
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
C E D E R J 229
AULA
230 C E D E R J
MDULO 3
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
C E D E R J 231
AULA
13
objetivos
14
AULA
A clula cancerosa
INTRODUO
O QUE O CNCER?
Num organismo saudvel, cada clula se encontra comprometida
com o bem-estar geral do indivduo e a proteo das clulas germinais,
a fim de garantir a prognie. Afinal, o tempo de vida de um indivduo
extremamente limitado e, aps a sua morte, apenas o cdigo gentico
234 C E D E R J
MDULO 3
14
AULA
Cpsula fibrosa
Tbulos invasivos
Tecido normal
Neoplasia
C E D E R J 235
Carcinoma
Sarcoma
Leucemias
Adenoma
Adenocarcinoma
Condroma
Condrossarcoma
236 C E D E R J
MDULO 3
14
AULA
C E D E R J 237
Barreira seletiva
Barreira seletiva
Clula cancerosa
238 C E D E R J
MDULO 3
14
AULA
C E D E R J 239
240 C E D E R J
MDULO 3
14
AULA
C E D E R J 241
242 C E D E R J
MDULO 3
14
AULA
C E D E R J 243
RESUMO
No tumor benigno, as clulas permanecem juntas formando uma massa nica; ali se
pode obter a cura completa atravs de remoo cirrgica. Um tumor s considerado
um cncer se for maligno, ou seja, so clulas que adquiriram a capacidade de invadir
e colonizar tecidos vizinhos processo denominado metstase.
Muitos tipos de cncer so originados de uma nica clula que sofreu mutao;
contudo, a prognie dessa clula necessita de mutaes futuras, requerendo
numerosas mutaes adicionais para iniciar um cncer.
O fenmeno de progresso de um tumor requer muitos anos, demonstrando o
processo de evoluo por mutao e seleo natural atravs das clulas somticas.
As principais alteraes das clulas cancerosas incluem diminuio da expresso
de protenas adesivas da matriz extracelular (MEC), como a fibronectina e a
244 C E D E R J
MDULO 3
14
e trombospondina; diminuio da expresso de caderinas; sntese de colagenase,
que degrada o colgeno e liberao de fatores angiognicos.
As modalidades teraputicas mais utilizadas atualmente so: cirurgia,
quimioterapia, radioterapia e terapia biolgica.
A imunoterapia, os alvos moleculares da terapia do cncer e estudos de
antiangiognese so tcnicas em estudo para tratamento do cncer no futuro.
SITES RECOMENDADOS
http://www.inca.gov.br/conteudo_view.asp?id=469
http://www.orientacoesmedicas.com.br/oqueepapanicolau.asp
C E D E R J 245
AULA
Gabarito
Biologia Celular II
Aula 1
248 C E D E R J
Aula 2
citocinese
C E D E R J 249
Aula 3
250 C E D E R J
Aula 4
C E D E R J 251
Aula 5
252 C E D E R J
Aula 6
5. As clulas vegetais so revestidas por uma parede celulsica que as protege das
tenses e compresses, alm de promover a adeso entre elas, por isso so desnecessrias
junes de adeso ou ocluso. Por outro lado, continua havendo necessidade de
comunicao e cooperao metablica, o que feito pelas plasmodesmatas.
C E D E R J 253
Aula 7
254 C E D E R J
Aula 8
C E D E R J 255
Aula 9
1. A primria formada por um arranjo mais frouxo de fibrilas de celulose, sem uma
orientao definida. A parede secundria se forma por dentro da primria e cada
camada de fibrilas de celulose tem uma orientao definida e ortogonal em relao
camada anterior.
2. A parede celular a matriz da clula vegetal. A lamela mdia corresponde
membrana basal.
3. Microfibrilas de celulose, pectina, glicanas associadas celulose.
4. As microfibrilas de celulose.
5. As pectinas e glicanas.
6. A partir de complexos enzimticos existentes na membrana plasmtica.
7. As fibrilas seguem a mesma direo dos microtbulos subpeliculares da clula.
256 C E D E R J
Aula 10
C E D E R J 257
Aula 11
258 C E D E R J
Aula 12
10. As interaes que ela fizer, ou deixar de fazer, com molculas do meio extracelular
(por exemplo, a -integrina da membrana das clula-tronco da pele, que reconhece
molculas da lmina basal) ou com clulas vizinhas (como no caso das clulas
hematopoiticas e estromais, que se reconhecem pela protena notch).
11. Em criptas, invaginaes que no se expem na superfcie das vilosidades.
As clulas se diferenciam apenas quando vo chegando superfcie das vilosidades,
exceto pelas clulas de Paneth, que permanecem nas criptas.
12. So as clulas-satlite, que existem em pequeno nmero dispersas entre as
fibras contrteis.
13. Tratamento de queimados (pele), leucemias e tratamento de enfartados.
14. Tratamento de leses nervosas, substituio de articulaes desgastadas,
regenerao funcional do fgado e do pncreas.
Aula 13
260 C E D E R J
6. Existem duas vias possveis de ativao da apoptose. Uma delas, conhecida por via
externa, geralmente fruto de uma interao receptor-ligante. Neste caso particular,
as protenas receptoras da superfcie celular so chamadas receptores de morte. Estes
receptores de morte ligam-se a molculas (ligantes) que se encontram na superfcie
de outras clulas, e o resultado a apoptose da clula que os expressa em sua
superfcie. A outra via, conhecida por via interna, no ativada por uma interao
receptor-ligante. So estmulos internos, certas condies de estresse e dano celular,
como aqueles que resultam do efeito de radiaes, toxinas e drogas.
7. A diferena entre estas vias est no tipo de molculas que so ativadas. A via
externa ativa molculas adaptadoras e caspases diferentes da via interna, que possui,
por exemplo, o papel essencial da mitocndria.
8. As protenas adaptadoras so fundamentais para transformar o estmulo em uma
complexa via de ativao enzimtica (via das caspases), que leva a clula morte.
9. Eles so importantes na manuteno do nmero de clulas do indivduo adulto, no
processo de desenvolvimento embrionrio e na defesa do organismo contra infeces
virais.
10. No, apoptose um tipo de morte celular programada, mas existem outros.
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Servio grfico realizado em parceria com a Fundao Santa Cabrini por intermdio do gerenciamento
laborativo e educacional da mo-de-obra de apenados do sistema prisional do Estado do Rio de Janeiro.
Volume nico
9 788576 481348