Universidad Nacional Mayor de San Marcos

(Universidad del Per, DECANA DE AMRICA)

Facultad de Farmacia y Bioqumica
Proyecto de Tesis de Pregrado
I. Informacin General de la Tesis
1.1 Ttulo
Estudio del efecto diurtico del extracto hidroalcohlico de Spartium junceum L. en ratas sanas.

II. Participantes de la Tesis

A. TESISTA (S)
Nombres
Mara Isabel
Nombres
Mauricio
Nombres
Victor David
Nombres
Cristina
Nombres
Silvia
Nombres
Carlos

Apellidos
Collachagua Saldaa
Fecha
15 de Octubre del 2013
Apellidos
Galiano La Rosa
Fecha
15 de Octubre del 2013
Apellidos
Linares Capristn
Fecha
15 de Octubre del 2013
Apellidos
Reao del Valle
Fecha
15 de Octubre del 2013
Apellidos
Salamanca Rodriguez
Fecha
15 de Octubre del 2013
Apellidos
Yauri Cruz
Fecha
15 de Octubre del 2013

N de Matrcula
Firma
N de Matrcula
Firma
N de Matrcula
Firma
N de Matrcula
Firma
N de Matrcula
Firma
N de Matrcula
Firma

B. Director de la Tesis.
Nombres
Apellidos
Francisco Javier Mara
Ramrez Cruz
Cdigo Docente
Ttulo profesional
0A0347
Qumico-Farmacutico
Especialidad
Departamento Acadmico
Farmacol., Bromatol. y Toxicol

Categora
Clase
Auxiliar
T.C.
Grados Acadmicos
Magister
Firma

Proyecto de Tesis de Pregrado

III. Descripcin del Estudio

A. Antecedentes y fundamentacin cientfica, tcnica o humanstica.
El tratamiento herbario ha estado en prctica desde tiempos remotos y el Per es uno de
los pioneros en esta praxis. sta es una de las razones por las cuales existe una extensa
lista de plantas con propiedades curativas y mltiplos usos, dentro de sta se encuentra la
retama (Spartium junceum), la cual cuenta con una mencin extensa de actividades
teraputicas y la mayora cuenta con evidencia cientfica, como por ejemplo, la actividad
antioxidante, analgsica, antiinflamatoria, citotxica y anti ulcerosa no siendo las nicas
propiedades de esta planta, ya que, su uso popular le atribuye propiedades diurticas y
sedativas aunque acerca de estas ltimas las investigaciones cientficas an estn en
desarrollo(1).
Debido al limitado estudio de algunas propiedades teraputicas de spartium junceum, es
muy poco conocido cientficamente como un potente diurtico. Sin embargo, muchas de
las especies de retama han sido ya comprobadas ampliamente como diurticos, sobre todo
las especies de territorio europeo, de esta manera se tiene una referencia de estudio (2).
Como patrn comn entre las especies de retama se tiene a la flor, a la cual se le atribuye
la mayora de propiedades teraputicas que posean debido al alto contenido de alcaloides y
flavonoides. Respecto a lo cual, los flavonoides han sido identificados como los
metabolitos que le otorgan la actividad diurtica, un ejemplo de flavonoide de actividad
diurtica es el chrisyn e isoquertricin aisladas de retama raetam y Tropaeolum majus L.
respectivamente (3).
El aumento de la diuresis podra ser una herramienta til en el tratamiento de la
hipertensin (4). Las plantas medicinales se utilizan comnmente para el tratamiento
tradicional de algunas enfermedades renales (5). Muchas investigaciones han demostrado el
efecto hipotensor de varias plantas con una actividad diurtica (6-9). Por lo tanto el uso de
plantas diurticos en el tratamiento de la hipertensin puede ser beneficioso en la
reduccin de la presin arterial y el dao renal asociada a la hipertensin.
La hipertensin se considera una de las principales y peligrosas complicaciones para otras
enfermedades cardiovasculares o diabetes. Dado que los diurticos son una opcin de
tratamiento para los pacientes hipertensos, nuestro propsito en este estudio fue evaluar el
efecto diurtico de spartium junceum en ratas normales.

B.

Justificacin.

La revalidacin del conocimiento ancestral acerca de las propiedades teraputicas de distintos

especmenes botnicos es de gran importancia en un pas megadiverso como el nuestro, en el
que las diferentes especies son una casi ilimitada fuente de compuestos qumicos cuya
investigacin podra finalizar en la formulacin de nuevos medicamentos ms seguros y
eficaces.
En esa bsqueda de nuevos agentes teraputicos, es de vital importancia el conocimiento pasado
de generacin en generacin por las poblaciones nativas de nuestro pas, el cual atribuye
distintas propiedades teraputicas a las especies naturales y que han sido usadas por ellos por
muchos aos ejerciendo la misma accin beneficiosa.
Con los avances de la tecnologa de hoy es posible la comprobacin cientfica de las
propiedades teraputicas que se le atribuyen a la Retama como diurtico para el tratamiento
principalmente de edemas. As, al revalidar el conocimiento etnofarmacolgico, se armoniza la
medicina tradicional con la teraputica moderna existente.
Proyecto de Tesis de Pregrado

Por lo que justificamos el llevar a cabo este estudio cientfico y as elucidar la existencia de
propiedades diurticas en la Retama (Spartium junceum L.)
C. Hiptesis
El extracto hidroalcohlico de las flores de Spartium junceum L. posee actividad diurtica.

D. Objetivos.

Determinar la actividad diurtica del extracto hidroalcoholico de flores de Spartium

junceum L. mediante pruebas de funcionamiento renal.

Evaluar el efecto diurtico del extracto hidroalcoholico de flores de Spartium junceum L.

mediante un estudio comparativo.

Validar el conocimiento tradicional etnofarmacogico sobre las propiedades diurticas

atribuidas a Spartium junceum L .

Proyecto de Tesis de Pregrado

E. Metodologa de trabajo.
Materiales
Se realizar un estudio preclnico para evaluar la actividad diurtica atribuida a Spartium
junceum L. (Retama) usada en la medicina tradicional peruana, en el laboratorio de
Farmacologa de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la Universidad Nacional Mayor de
San Marcos.
Para ello se utilizar los siguientes materiales:
Material Botnico
Flores de Spartium junceum L. (Retama)
Material Biolgico

Ratas albinas Cepa Holtzman

Reactivos Qumicos

Etanol 70
Cloroformo
Hidrxido de amonio al 5%
Furosemida 10mg/kg de peso
Suero fisiolgico (NaCl 0,9%)

Equipos y Aparatos

Estufa de aire circulante

Jaulas de diuresis
Cnula intragstrica
Balanza de animales de sensibilidad 0,1g
Pinzas
Cronmetro

METODOLOGA
A. Estudio Farmacognstico
Adquisicin, seleccin y acondicionamiento de la especie vegetal objeto de estudio:
Se realizar la adquisicin de Spartium junceum L., conocida comnmente como
Retama de olor, en el mercado La parada; dicha especie procedente de la ciudad de
Huancayo- Junn.
La determinacin taxonmica ser llevada en el Museo de Historia Natural de la
UNMSM.
Se seleccionarn las flores que se encontrasen en condiciones ptimas, siendo esta parte
area el objeto de trabajo del presente proyecto.
Se llevar a sequedad en estufa alrededor de dos das, luego de ello se recogern las
muestras secas de y se procedi a pesarlas
Se proceder a la molienda en una licuadora hasta un tamao de partcula grosero que
permita la correcta extraccin, posteriormente se proceder a rotular.
Proyecto de Tesis de Pregrado

Preparacin del extracto:

Se utilizar para la extraccin hidroalcohlica (70%), 500 gramos de material seco y
pulverizado; y un volumen aproximado de 1000mL del solvente, dejndose en maceracin por
07 das; se filtrar y concentrar a sequedad en estufa de aire circulantea 40C.
Ensayos fitoqumicos
Con el extracto concentrado y seco se realizar una prueba de solubilidad y un
screening fitoqumico.
Extraccin de alcaloides*
Debido a que por referencias bibliogrficas se conoce que esta especie presenta alcaloides
txicos (como la espartena), se proceder a la extraccin y separacin de alcaloides totales
utilizando la extraccin alcalina, para conservar la fraccin restante, por atribuirle la actividad
diurtica principalmente a flavonoides y otros compuestos.
Extraccin por un solvente orgnico en medio alcalino
La droga concentrada y secada se mezclar con una solucin alcalina que desplazar los
alcaloides de sus combinaciones salinas (aproximadamente 1 Kg de droga con un litro de
solucin de hidrxido de amonio al 5% durante aproximadamente 4 horas); las bases liberadas
sern enseguida solubilizadas en un solvente orgnico como cloroformo.
El solvente orgnico conteniendo los alcaloides bases ser separado y concentrado, luego se
agitar con una solucin acuosa cida, donde los alcaloides se solubilizan en su forma de sales,
mientras que otras sustancias que se encuentren en el extracto como pigmentos, esteroles y
otras impurezas restan en la fase orgnica.
Las soluciones acuosas de las sales de alcaloide sern nuevamente alcalinizadas y extradas con
cloroformo; el solvente orgnico ser deshidratado sobre una sal anhidra, filtrado y
concentrado, el residuo que queda son los alcaloides totales (AT)
Se conservar la fraccin no alcaloidea.
Preparacin final del extracto
La fraccin no alcaloidea se volver a llevar a sequedad para ser trabajado en el ensayo
farmacolgico.
Estudio Farmacolgico

Para el estudio comparativo de extracto de flores de retama se utilizarn 30 ratas albinas

de la cepa Holtzman divididas aleatoriamente en 3 grupos experimentales con 10
animales cada uno, de la siguiente forma:
GRUPO CONTROL NEGATIVO
GRUPO CONTROL POSITIVO
GRUPO MUESTRA

Solucin de NaCl 0,9%

Furosemida 10mg/kg de peso
Extracto obtenido por maceracin de
Spartium junceum L.

Los animales estarn sin comida (ayuno) y agua 18 horas previas al inicio del
experimento, as mismo durante las 6 horas de recoleccin de la orina.
Todas las administraciones sern por va oral usando una cnula intragstrica rgida y
recibirn un volumen total de hidratacin de 25ml/kg de peso corporal. Todas las
disoluciones se prepararn en cloruro de sodio al 0,9%.

Proyecto de Tesis de Pregrado

Se marcarn las ratas para su identificacin, se pesarn y se colocarn en las jaulas de

diuresis a razn de un animal por jaula, teniendo en total 10 animales por dosis a fin de
asegurar su repetibilidad.
Se recolectar la orina post administracin de los 3 grupos, durante 30, 60, 90, 180, 270
y 360 minutos. Se registrar el volumen urinario.
Frmulas para el clculo de las variables relacionadas con la diuresis:

Orina producida
x 100
Solucin fisiolgica administrada
Excrecinurinaria grupo tratado
Accin diurtica=
Excrecin urinaria grupo control

Excrecin urinaria=

Accin diurtica( AD )=

Accin diurtica
Accin diurtica frmaco dependencia

Escala: Alta: AD0,9 Moderada: AD(0,89 0,70) Baja: Ad: (0,69 0,50) Nula: AD<0,50

F. Fecha de realizacin de la Tesis.

a) Inicio:
b) trmino:

15 de AGOSTO del 2013

Noviembre 2013

Proyecto de Tesis de Pregrado

G. Calendario de actividades.
Actividad

Meses
M A M J

01 Elaboracin del proyecto de tesis

02 Estudio Farmacognstico
03 Estudio Farmacolgico
04 Resultados
05 Discusin
06 Presentacin de Informe a la Facultad
de Farmacia.

A S O N D
X
X X
X
X X
X
X X

H. Referencias Bibliogrficas
1. Mitra, S. Herbal drug used as diuretics. Department of pharmaceutical
technology.India. 3(2)p.1-10. 2012
2. Cerchiara T.Biological activity of spartium junceum L. aromatic water. Italia.4 (1)
229-234. 2013
3. Antri A. Flavone glycosides from Calycotome Villosa subsp. Intermedia. Morocco.
9,568-573. 2004
4. Maghrani M. Acute diuretic effect of aqueous extract of Retama raetam in normal
rats. Francia. 99, 31-35.2005
5. Nadaf M. identification of nonpolar chemical composition spartium junceum
flower growing in iran by GC-MS. Iran. 11(2):221-224, 2012.
6. Ranju G. Evaluation of diuretic activity of Platycladus Orieantalis leaves extract.
Garai Ranju: India,2(3) 117-120. 2011
7. Venkatesh K. Phytochemical screening and evaluation of diuretic activity of
ethanolic and chloroform extracts of Mussaenda Erythrophylla in rats. International
Journal of biological and pharmaceutical research: India. 4(1),8-10.2013
8. Yesilada E. Isolation and characterization of free radical scavenging flavonoid
glycosides from the flowers of Spartium junceum by activity guided fractionation.
Journal of ethnopharmacology: Japon. 73, 471-478. 2000
9. Zeggwagh N. Acute hypotensive and diuretic activities of Chamaemelum nobile
aqueous extract in normal rats.Faculty of medicine Xavier Bichat: Francia. 2(3),
140-145,2007
10. Zeggwagh N. Cardiovascular effect of Capapris spinosa Aqueous extract in rats.
Part II: furosemide-like effect of Capapris spinosa Aqueous extract in normal
rats.Faculty of medicine Xavier Bichat: Francia. 2(3), 130-134,2007
11. Gasparotto A. Diuretic and potassium-sparing effect of isoquercitrin- an active
flavonoid of tropaeolum majus L. Journal of ethnopharmacology: Brazil. 134,210215.20

Proyecto de Tesis de Pregrado

ANEXOS

Ilustracin 1: Separacin de flores de retama secas de sus respectivos tallos

Ilustracin 2: Secado de flores de retama

Ilustracin 3: Reduccin de tamao de flores de retama secas

Proyecto de Tesis de Pregrado

Ilustracin 4:
hidroalcohlica de
secas y molidas

Maceracin
flores de retama

Ilustracin 5: Filtrado de extracto hidroalcohlico

Ilustracin 6: Obtencin del extracto hidroalcohlico seco

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