Captulo 1

1. CRECIMIENTO MICROBIANO Y CINTICA DE

FERMENTACIONES.
1.1. INTRODUCCION.
En la actualidad una gran variedad de productos son elaborados por va fermentativa o
microbiana. En un principio, los microorganismos se aislaban y seleccionaban de una
gran variedad de fuentes (suelos de distintos tipos, materiales orgnicos en
descomposicin, aguas, etc.), sin embargo, gracias al extraordinario avance de la
microbiologa, la bioqumica y la gentica, existen ahora Colecciones Microbianas que
se encargan de preservar, por tiempos prolongados, las caractersticas de produccin de
microorganismos de inters industrial. El avance ha llegado a grado tal que se cuenta con
microorganismos mejorados o producidos genticamente, en manera tal que los
rendimientos y capacidades de produccin en los bioprocesos se han incrementado
notablemente.
Definiremos como fermentacin a todo aquel proceso a travs del cual, algn gnero
microbiano, transforma una materia prima orgnica en un producto de inters industrial.
As, la transformacin de azcares disueltos a etanol por accin de las levaduras
(transformacin anaerbica) o la produccin de antibiticos por la accin de hongos sobre
almidones y otras materias primas disueltas, se consideran procesos de fermentacin y
especficamente de fermentacin sumergida. No es el objetivo de la presente obra
abarcar el campo de las fermentaciones en sustrato slido, sino exclusivamente las
sumergidas.
Un proceso de fermentacin consta de tres etapas principales que son: a) preparacin de
las materias primas; b) transformacin microbiana de la materia prima a producto; c)
separacin, recuperacin y purificacin de producto(s).
La primera etapa concluye con la preparacin de un medio de cultivo acuoso que sea
capaz de sostener la vida y la capacidad productiva del microorganismo de inters a la
mayor velocidad posible. Dicho medio deber contener los elementos necesarios e
indispensables para el crecimiento y produccin, por lo que deber disearse
respondiendo a estas caractersticas. En esta etapa debern considerarse los efectos
que las variables fisicoqumicas de los medios tales como densidad, pH, fuerza inica,
etc., presentan sobre el crecimiento y produccin microbiana.
La transformacin de la materia prima se refiere a la accin microbiana sobre el medio
de cultivo para elaborar el producto de inters. En esta etapa, adems de los aspectos
fisicoqumicos del proceso de transformacin, cobran importancia los aspectos fsicos o
de ndole ambiental, tales como velocidades de transferencia de masa y de calor,
valores de pH y temperatura, etc.
La transformacin de la materia prima se lleva a cabo en recipientes adecuados
denominados fermentadores, biorreactores o simplemente reactores. Existen
multitud de formas, tipos y tamaos; los hay de pocos litros de volumen hasta de cientos

de metros cbicos, construidos en materiales tales como vidrio, acero al carbn, acero
inoxidable, etc. Cuentan con dispositivos para agitacin del medio de cultivo. Operan en
rgimen por lote, continuo o semicontinuo. Se puede adicionar al medio de cultivo, en
forma asptica, aire, cidos, antiespumante u otros lquidos.
La principal funcin de un fermentador es proporcionar y mantener las condiciones
ambientales impuestas por el sistema biolgico para la transformacin ptima y
econmica de las materias primas a productos.
La fermentacin se inicia con la inoculacin del medio de cultivo con el microorganismo
de inters. El inculo consiste de un volumen determinado de medio de cultivo en el que
se ha crecido previamente dicho microorganismo. La relacin del volumen de inculo a
volumen de fermentacin oscila normalmente entre el 5 y 10% v/v. En un proceso por
lote, la fermentacin termina hasta que la casi totalidad de la materia prima es
transformada a producto, el cual puede ser la biomasa misma, un metabolito primario o
uno secundario. El objetivo de toda fermentacin industrial es maximizar dicha
transformacin en el menor tiempo posible. En una fermentacin ocurren distintas
reacciones bioqumicas complejas.
La caracterizacin de cualquier proceso de fermentacin en el que los microorganismos
consumen las materias primas para reproducirse, mantenerse y formar productos,
requiere necesariamente del conocimiento de la estequiometra del proceso, de la
relacin entre las materias primas y energa involucradas y de los rendimientos celulares.
En consecuencia, es necesario determinar, entre otras cosas, las distintas velocidades
que ocurren en el proceso (de crecimiento celular; de consumo de sustrato; de sntesis
del producto; de produccin de calor; etc.), de tal forma que sea posible tanto la
prediccin del comportamiento celular con fines de control, como el diseo, construccin
o implementacin del equipo de fermentacin.

1.2. CRECIMIENTO MICROBIANO.

La evolucin de una poblacin microbiana en pleno crecimiento se ajusta a las leyes de la
cintica clsica de evolucin poblatoria. Antes de describir dicha cintica, se explicar el
concepto "crecimiento celular". Como todo ser vivo, los microorganismos nacen, crecen,
se reproducen y mueren. Para que un microorganismo d origen a otro, debe crecer
individualmente hasta llegar a un estado de madurez fisiolgica que le permita la
reproduccin. Desde este punto de vista, debe distinguirse entre "crecimiento individual" y
"crecimiento poblacional", este ltimo es consecuencia del primero.
En un cultivo microbiano debe distinguirse el crecimiento "sincrnico" del "asincrnico", el
primero indica una divisin o reproduccin de todos los individuos de una poblacin a un
mismo tiempo y el segundo a una divisin o reproduccin azarosa, con respecto al
tiempo, de los individuos que componen a la poblacin. El crecimiento sincrnico se da
bajo ciertas condiciones especiales de cultivo. Otro concepto igualmente til es el
denominado crecimiento "balanceado" o "desbalanceado", en aqul ocurre que las
velocidades de formacin de los componentes celulares (carbohidratos, lpidos,
protenas, etc.) conservan una proporcionalidad mantenida con respecto al tiempo,
mientras que en el desbalanceado, al menos un componente no conserva dicha
proporcionalidad1. En una fermentacin industrial, el crecimiento usualmente es evaluado
como "crecimiento poblacional asincrnico" y generalmente ocurre en forma balanceada
(adems del detrimento en la economa, es irrelevante cuantificar el crecimiento
individual, lograr una sincrona y desbalancear el crecimiento).
Los requisitos fundamentales para que se de el crecimiento son dos: i) la existencia de un
medio de cultivo que aporte los elementos nutritivos en todas sus formas (fuentes de C,
2

N, S, P, O, etc.); ii) el establecimiento y mantenimiento de las condiciones fisicoqumicas

o ambientales necesarias (temperatura, pH, fuerza inica, potencial redox, etc.). Con
base en estos requisitos se puede establecer una clasificacin de los distintos tipos de
microorganismos. As por ejemplo, desde el punto de vista en que los microorganismos
obtienen la energa para su crecimiento se pueden clasificar en auttrofos y hetertrofos;
los auttrofos la obtienen a partir de fuentes de carbono inorgnicas (CO, CO2,
carbonatos, etc.) y los hetertrofos a partir de fuentes orgnicas tales como
carbohidratos, lpidos, aminocidos, etc. Otra clasificacin se basa en el consumo de un
nutriente especfico; el oxgeno: los microorganismos que lo consumen durante y para su
crecimiento se denominan aerobios, mientras que los que crecen en su ausencia se
denominan anaerobios. Desde el punto de vista de las condiciones ambientales, los
microorganismos pueden clasificarse de acuerdo a su temperatura y pH ptimos de
crecimiento (psicrfilos, mesfilos y termfilos; acidfilos, neutros o alcalinfilos)2.
Desde un punto de vista industrial y con base en los distintos tipos de productos
obtenidos por va fermentativa (bebidas alcohlicas, alimentos fermentados en todas sus
variedades, antibiticos, enzimas, bioplagicidas, interfern, insulina humana, etc.), los
microorganismos ms importantes y con mayores perspectivas econmicas son los
hetertrofos, aerbicos, mesfilos, aunque los que han repercutido mayormente en
beneficio de la humanidad han sido sin duda los hetertrofos, anaerbicos mesfilos.
1.2.1. LAS FUENTES NUTRICIAS.
La seleccin de las fuentes nutricias componentes de un medio de cultivo para la
produccin de un metabolito de inters, depender, entre otras cosas, del tipo de
microorganismo; de la finalidad de la produccin (fines comerciales o no); de si se
requiere de una rpida velocidad de crecimiento; del valor agregado del producto; etc.
Por esta razn, solo se har breve mencin de las distintas fuentes que se han utilizado a
escala industrial, sin entrar en detalle de las particularidades establecidas por la
investigacin bsica para la seleccin de sus materias primas.
1.2.1.1. FUENTE DE CARBONO.
Todas las fuentes nutricias son importantes, sin embargo, debido a la naturaleza orgnica
del proceso fermentativo, la fuente de carbono (FC) es la ms relevante. El carbono
contenido en la biomasa, en el producto o productos y en el bixido de carbono
producido, provienen de dicha fuente. De aqu su importancia. Puesto que las materias
primas representan del 30 al 50% del costo de produccin3, es muy importante la
seleccin adecuada de la FC. Entre las ms comnmente usadas se encuentran los
carbohidratos en sus distintas formas: hexosas (glucosa, fructosa, galactosa, etc.);
pentosas (xilosa, arabinosa y ribosas); disacridos (sacarosa, lactosa, maltosa, etc.) y
polisacridos (almidones, celulosas, hemicelulosas, etc.). Una fuente muy importante de
carbohidratos es la melaza (de caa o de remolacha), la cual contiene cantidades
significativas de vitaminas, factores de crecimiento, micronutrientes y cantidades
pequeas de nitrgeno orgnico; por estas caractersticas y por ser un subproducto de la
industria azucarera, las melazas son una muy buena opcin para la industria de
fermentaciones. Algunos otros subproductos utilizados como fuentes de carbono son:
suero de leche, licores sulfticos, vinazas, etc. Entre las caractersticas ms importantes
que debe reunir una FC para utilizarse en un proceso fermentativo a escala industrial, se
encuentran las siguientes: i) abundante; ii) disponible; iii) de bajo costo; iv) de produccin
centralizada; v) alta miscibilidad en agua; vi) parcialmente oxidado; vii) de fcil
degradacin por parte del microorganismo; viii) que muestre altos rendimientos de
producto.
3

1.2.1.2. FUENTE DE NITROGENO.

Despus del carbono, el nitrgeno es el elemento que normalmente se encuentra en
mayor concentracin en el medio de cultivo . Se utiliza en la sntesis de aminocidos, de
protenas, de purinas y pirimidinas (constituyentes de los cidos nucleicos), etc. Las
fuentes de nitrgeno (FN) generalmente se pueden clasificar en orgnicas e inorgnicas.
Entre las orgnicas sobresalen el agua de cocimiento de maz, harinas de pescado y de
soya, hidrolizados de protenas, etc.; mientras que en las inorgnicas sobresalen la urea,
nitratos, nitritos, sales de amonio y amoniaco lquido o gaseoso (en ciertos casos el
amoniaco, al usarse como FN, sirve como agente controlante del pH de fermentacin). La
seleccin de esta fuente sigue los mismos criterios establecidos para la FC.
1.2.1.3. FUENTES DE MACRO Y MICROELEMENTOS.
Los dems elementos necesarios para el crecimiento se pueden clasificar en macro y
microelementos, los primeros comprenden al fsforo, azufre, calcio, magnesio, hidrgeno
y oxgeno. Estos dos ltimos muy particulares, el hidrgeno, por ejemplo, generalmente
es tomado por el microorganismo con la fuente de carbono, mientras que el oxgeno,
necesario para la respiracin, tiene que ser adicionado al medio con el aire. Entre los
microelementos o micronutrientes (los que se requieren en muy pequeas
concentraciones) se encuentran el fierro, zinc, manganeso, cobre, vitaminas, etc. Los
rendimientos de varios metabolitos primarios y secundarios se ven afectados por los
microelementos. Estos son importantes por distintas razones, entre las que se pueden
mencionar las siguientes: i) regulan las propiedades electrolticas y osmticas del interior
de las clulas; ii) actan como cofactores de algunas enzimas importantes; etc. A
diferencia de un medio de cultivo preparado en el laboratorio y a utilizar en la
investigacin bsica, en el que normalmente se utiliza agua destilada (o bidestilada) y
sales qumicamente puras, en la preparacin de un medio de cultivo industrial,
frecuentemente se requiere la adicin de los macronutrientes pero no la de los
micronutrientes, ya que estos pueden ser satisfechos a travs del agua de proceso (de la
red municipal, pozos, manantiales, lagos o ros) o a travs de las materias primas que no
son qumicamente puras.
1.2.1.4. FUENTE DE OXIGENO.
Este nutriente es muy importante para las fermentaciones aerbicas. A diferencia de los
dems, el oxgeno se tiene que estar suplementando continuamente en el medio por dos
razones principales: I) por el consumo por parte de los microorganismos (un cultivo en
pleno desarrollo puede consumir en pocos segundos 14 mg de oxgeno por litro); II) por
su baja solubilidad en medios de cultivo (no mayor a 14 ppm). La fuente comn de
oxgeno en una fermentacin es el aire, que por lo general se burbujea en el medio de
cultivo desde el fondo del fermentador. La transferencia de oxgeno desde las burbujas
del aire hasta el microorganismo, es una de las principales limitantes de la productividad
en una fermentacin, por lo que el biorreactor debe ser diseado para satisfacer la
mxima demanda por parte del m.o.

1.3. RENDIMIENTOS Y COEFICIENTES DE MANTENIMIENTO.

Uno de los parmetros indicativos de la eficiencia de conversin en una fermentacin es
el "rendimiento", el cual es una relacin "masa/masa" de dos variables. El rendimiento
celular con base en el sustrato (Yx/s) representa la cantidad total de masa celular que se
produce por unidad de masa total de sustrato que se consume. En una fermentacin en
la que los nutrientes del medio de cultivo son transformados a biomasa, productos o
simplemente "quemados" por el microorganismo, se pueden establecer distintos
rendimientos: celular con base en el sustrato (Yx/s); de producto con base en el sustrato
(Yp/s); celular con base en el oxgeno (YO2); etc.
Yx/s = g de clulas producidas/g sustrato consumido = x/s.
Yp/s = g de producto sintetizado/g sustrato consumido = p/s.
YO2 = g de clulas producidas/g de oxgeno consumido = x/O2.
El trmino s representa la cantidad total de sustrato consumido, el cual es la suma de
la cantidad de sustrato que se utiliza para el crecimiento celular (s)x, la cantidad de
sustrato que se utiliza para el mantenimiento celular sin que exista crecimiento (s)m y la
cantidad de sustrato que se utiliza para la formacin de producto (s)p. Desde este punto
de vista y con fines de distincin, los rendimientos anteriores se denominarn como
rendimientos globales.

en la que:

Yx/s = (x, O2 o p)/(s)

(1)

(s) = (s)x + (s)m + (s)p

(1a)

Cuando el producto solo es la biomasa crecida y el consumo de sustrato para

mantenimiento es cero, la relacin x/s se denomina como "rendimiento celular para
crecimiento verdadero" (Yx/s)g. La relacin entre ambos rendimientos se muestra en la
siguiente ecuacin:

1
1
m

s
( Yx / s ) g

Yx / s

(2)

en la que "ms" es el coeficiente de mantenimiento celular (que representa la cantidad de

sustrato que debe ser consumido por unidad de masa celular por unidad de tiempo, para
fines de mantenimiento celular sin que exista crecimiento) y "" es la velocidad especfica
de crecimiento4. Arreglando la ecuacin (2) se puede llegar a:

Yx / s

Qs

(Yx / s ) g

ms

(2a)

En la que Qs es la velocidad especfica de consumo de sustrato.

As como existe el coeficiente de mantenimiento y el rendimiento para crecimiento
verdadero para el sustrato, existir igualmente uno para cada uno de los nutrientes [para
el oxgeno, por ejemplo, "mO2" y "(YO2)g".
En la literatura se pueden encontrar valores de rendimientos y de coeficientes de
mantenimiento para distintos microorganismos, creciendo en distintas fuentes de carbono
y bajo distintas formas de cultivo1,4,5,6,8,17.
Otros rendimientos de importancia en algunos procesos fermentativos son el rendimiento
celular con base en los electrones disponibles en el sustrato (Yav.e) y el rendimiento
celular basado en la energa total disponible (Ykcal).
5

a) Yav.e .Rendimiento celular con base en los electrones disponibles en el sustrato (el
subndice "av" se refiere al trmino disponible traducido del ingls).
Para determinar el nmero de electrones disponibles en un sustrato dado, se determina
la cantidad de oxgeno necesaria para su combustin y se multiplica por 4 (4 electrones
requeridos para la reduccin de una molcula de oxgeno): este valor se denomina Yav.e/s,
por lo tanto:

Yav.e

Yx / s
Yav.e / s

Ejemplo:

(3)
C6H12O6 + 6O2

6CO2 + 6H2O

Para oxidar la glucosa se requieren de 6 moles de oxgeno, por lo que el Yav.e/s ser de 6
x 4 =24 av.e/mol de glucosa. Y si el rendimiento celular (Yx/s) de Penicillium chrysogenum
en glucosa es de 0.43 g/g, entonces:
Yav.e = 0.43x180/24 = 3.22 g clulas/av.e
b) Ykcal. Rendimiento celular basado en la energa total disponible en el medio, el cual
queda definido como:

Yk c a l

x
H a * x H c

en la que:

(4a)

Ykcal

1
H c
H a
x

(4b)

Ykcal = g biomasa producida/kcal disponible

Ha = calor de combustin de la biomasa = 5.3* kcal/g de clulas.
Hc = calor generado por el catabolismo [=] kcal/l.
*) De acuerdo con los anlisis calorimtricos se ha propuesto el valor de

Ha mostrado.
El denominador de la ecuacin "4b" es la energa total disponible, es decir, la incorporada
al material celular y la gastada por el catabolismo.
El valor de Hc para procesos totalmente aerbicos en medios complejos y en ausencia
de formacin de productos, puede calcularse multiplicando el oxgeno consumido"O2"
por la cantidad de energa disponible por la reduccin del oxgeno "HO" (106 kcal/mol).
Hc = O2 * HO

Ykcal

1
H a H O / YO 2

en la que:

(5)
(6)

HO = generacin de calor basada en el consumo de oxgeno

(106 kcal/mol de O2).
YO2 = rendimiento celular con base en el oxgeno [=] g cel/mol de O2.

Al tomar un valor de 1.0 g cel/g O2 (valor tpico) o 32 g cel/ mol O2, se obtiene un valor de
Ykcal = 0.1161 g cel/ Kcal disponible.
En la Tabla 1 se muestran valores de algunos rendimientos, mientras que en la Tabla 2
se muestran valores tpicos del coeficiente de mantenimiento celular con base en el
sustrato ms.

Tabla 1 Valores tpicos de rendimientos.

MICROORGANISMO

SUSTRATO

INDISTINTOS

Glucosa
Hidrocarburos
Glucosa
Glucosa

Candida utilis
P. chrysogenum
Saccharomyces cerevisiae

Glucosa
Candida utilis
Acetato
Candida utilis
Etanol
Klebsiella sp.
Metanol
Methylococcus sp.
Metano
*) Valores promedios de microorganismos.

Yx/s
(g/g)
0.5*
1.0*
0.53
0.43

Yo2
(g/g)
1.0*
0.5*
1.37
1.35

Ykcal
(g/kcal)
0.126
0.107

0.5
0.36
0.68
0.38
1.01

0.97
0.7
0.61
0.56
0.29

0.123
0.092
0.112
0.081
0.104

Tabla 2. Valores tpicos del coeficiente de mantenimiento celular ms.

MICROORGANISMO
Aerobacter cloacae
Saccharomyces cerevisiae.
Saccharomyces cerevisiae.
Klebsiella aerogenes
Klebsiella aerogenes

CONDICIONES DE CRECIMIENTO.

ms
(g/g/h).

Aerbico. Limitado por glucosa.

Anaerbico.
Anaerbico + NaCl (1.0 Mol)
Aerbico
Anaerbico

0.094
0.036 -0.04
0.36
0.04
0.5

1.4. ESTIMACION DEL CALOR METABOLICO.

Como toda reaccin bioqumica, el crecimiento celular ocurre en forma exotrmica, con
generacin de calor, el cual debe ser eliminado para mantener la temperatura constante y
evitar rendimientos y productividades bajas. En teora, la evolucin del calor metablico
puede calcularse de la diferencia entre el calor de combustin del sustrato consumido y la
suma de los calores de combustin del o los productos obtenidos (incluyendo la
biomasa). Cuando slo existe produccin de biomasa, dicha estimacin resulta
relativamente simple ya que el calor de combustin de las clulas toma valores entre 5.8
y 3.6 kcal/g clulas5,6 (este ltimo valor muy apropiado para levaduras).
La cantidad de calor que debe ser removida en un proceso de produccin de levaduras
cuya productividad es de 8 g cel/l/h, ser de 8 x 3.6 = 28.8 Kcal/l/h.
Otra forma de estimacin puede efectuarse considerando que la produccin de calor es
proporcional a la velocidad de consumo de oxgeno7:
QH = 0.124 QO2

(7)

QH [=] kcal/l/h.
QO2 [=] mMol O2/l/h.
Para el mismo proceso anterior, si el rendimiento celular con base en el oxgeno
consumido es de 1.2 g de clulas por cada gramo de oxgeno consumido, la QO2 ser de
227.3 mMol O2/l/h, por lo que el calor metablico generado ser de 28.2 Kcal/l/h, cantidad
muy cercana a la obtenida con la otra forma de clculo.
en la que:

1.5. ESTEQUIOMETRIA DEL CRECIMIENTO MICROBIANO.

El crecimiento microbiano puede expresarse como una reaccin qumica en la que los
reactivos son las fuentes de carbono, nitrgeno y oxgeno principalmente. As, puede
escribirse la reaccin general siguiente:
CasHbsOcsNds + NH3 + O2 CaxHbxOcxNdx + CapHbpOcpNdp + CO2 + H2O
(8)
Sustrato

Nitrgeno

Clulas

Producto

ecuacin en la que los caracteres griegos representan los coeficientes estequiomtricos y

los subndices a, b, c y d el nmero de tomos de carbono, hidrgeno, oxgeno y
nitrgeno en el sustrato (s), clulas (x) y producto (p) respectivamente. Dicha ecuacin,
es la base para la estimacin de los rendimientos generales tericos de fermentacin.
As, al conocer los valores de los coeficientes estequiomtricos de un determinada
ecuacin, se pueden calcular fcilmente los valores de Yx/s, Yp/s, YO2, etc., en la forma
especificada en el punto 1.3. La ecuacin 8 puede modificarse y/o simplificarse para los
siguientes casos: i) cuando la fuente de nitrgeno es diferente al amoniaco y ii) para
cuando no hay producto. Con fines didcticos se desarrollar la metodologa para estimar
la cantidad de oxgeno necesaria para formar una unidad de masa celular cuando no hay
formacin de producto (solo clulas) y cuando el sustrato tiene frmula estructural
"CxHwOz". Desde este punto de vista, la ecuacin 8 se reduce y simplifica a:
aCxHwOz + bO2 + dNH3 Clulas + eCO2 + fH2O

(9)

puesto que las clulas producidas contienen un determinado porcentaje de carbono,

nitrgeno, hidrgeno y oxgeno, al realizar los balances elementales para cada
componente se establecen las siguientes ecuaciones:
CARBONO

12ax = (g cel) %C/100 + 12e

(10)

NITROGENO

14d = (g cel) %N/100

(11)

wa + 3d = (g cel) %H/100 + 2f

(12)

16az + 16 bO2 = (g cel) %O/100 + 32e + 16f

(13)

HIDROGENO
OXIGENO

Estas ecuaciones estn expresadas en unidades de masa.

Para facilitar el desarrollo matemtico se multiplica a la ecuacin 10 por 16/6; a la 11 por
48/28; a la 12 por 16/2 y a la 13 por 16/16; resultando:
(10)

32 e = 32 ax - 16 (g cel) C%/600

(14)

(11)

24 d = 48 (g cel) N%/2800

(15)

(12)

24 d = 16 (g cel) H%/200 + 16 f - 8 wa

(16)

(13)

16 az + 16 bO2 = 16 (g cel) O%/1600 + 32 e + 16 f

(17)

combinando 15 y 16 y sustituyendo 14 en 17 se obtienen respectivamente:

48 (g cel) N%/2800 = 16 (gcel) H%/200 + 16 f - 8 wa

(18)

16 az + 16 bO2 = 16 (g cel) O%/1600 + 32 ax - 16 (g cel) C%/600 + 16 f

(19)

despejando el trmino "16 f" de 18, sustituyendo el resultado en 19, arreglando y

simplificando se obtiene:
16 bO2 = a (32x + 16w/2 - 16z) + (g cel) 16 O%/1600 - 16 C%/600 + 48 N%/2800 - 16 H%/200

(20)

Al aplicar a la ecuacin 9 el concepto de rendimiento celular con base en el sustrato

consumido y despejar a se obtiene:
a = g cel/(Yx/s Ms)

(21)

en la que Ms es el peso molecular del sustrato. Sustituyendo 21 en 20 y arreglando se

obtiene:
2 x w / 2 z O% C % 3 N % H %

16 bO2 16 ( gCel )

Yx / s Ms
1600 600 2800 200

de la que finalmente se obtiene:

2 x w / 2 z O% C % 3 N % H %
1
16

YO 2
1600 600 2800 200
Yx / s Ms

(22)

en la que el inverso del YO2 es la cantidad de oxgeno necesaria por unidad de masa
celular expresada en gramos de oxgeno por gramo de clulas. Esta ecuacin fue
establecida por Mateles8 para calcular los requerimientos de oxgeno en una
fermentacin en la que se utilizan sustratos con frmula estructural "CxHwOz", en
ausencia de formacin de productos y con amoniaco como fuente de nitrgeno. La
ecuacin 23 es la correspondiente a cuando se utiliza nitrato (NO3-) como fuente de
nitrgeno. Con estas dos ecuaciones, es posible calcular la cantidad de oxgeno
requerido por unidad de masa conociendo la composicin elemental del microorganismo
y del sustrato. Sin embargo, hay que recordar que el resultado es meramente terico y
que bien podr alejarse de la realidad.

2 x w / 2 z O% C % 3N % H %
1
16

YO 2
1600 600 1400 200
Y x / s Ms

(23)

1.6. DISEO DE MEDIOS DE CULTIVO.

La seleccin de las distintas materias primas (fuentes de C, N, P, H, S, etc.) y la
optimizacin de la composicin del medio de cultivo que garantice la mxima
transformacin a producto en el menor tiempo posible (mxima economa) no es un
asunto sencillo, ya que, en teora, involucra buena parte de desarrollo experimental.
Existen ciertas metodologas para la seleccin de las materias primas y la optimizacin
de la composicin de medios de cultivo como la de Box y Wilson9, el mtodo del factor
simple de Pilat y colaboradores10 y la de cultivo continuo empleada por Mateles y Battat11
y Goldberg y colaboradores12, a las cuales se remite al lector. No obstante, si se
considera que la composicin elemental de los microorganismos no vara
significativamente durante el crecimiento (valores tpicos de C, H, O, N y S como
porcentaje de materia seca son de 45, 7, 33, 10 y 2.5 respectivamente), se puede obtener
una primera aproximacin de la composicin de los medios tomando en cuenta las
siguientes recomendaciones13:
1. Determinar experimental o bibliogrficamente, la composicin elemental para la
biomasa.
2. Seleccionar las materias primas que aportarn el nitrgeno, los macro y
microelementos.
3. Calcular el rendimiento para las materias primas seleccionadas, dividiendo el
porcentaje contenido en la materia prima del elemento que aportan, entre el
porcentaje contenido en las clulas.
9

4. Establecer la concentracin celular que se desee alcanzar.

5. Estimar la cantidad de la materia prima dividiendo la concentracin celular que se
desea alcanzar entre el rendimiento de dicha materia prima.
Ejemplo: Se desea crecer un microorganismo que contiene 6% de nitrgeno hasta
alcanzar una concentracin celular de 10 g/l. Se selecciona el sulfato de amonio
[(NH4)2SO4] como fuente de nitrgeno. Esta materia prima contiene 21.2% de nitrgeno,
por tanto, su rendimiento ser: Y = 21.2/6 = 3.5 g cel/g de sulfato de amonio. Por lo que la
cantidad de sulfato de amonio necesaria ser de: 10/3.5 = 2.85 gramos de (NH4)2SO4 por
litro de medio. Esta cantidad aporta la cantidad mnima de nitrgeno necesaria para
alcanzar los 10 gramos de clulas por litro que se especificaron.
El sulfato de amonio adems de funcionar como fuente de nitrgeno, puede funcionar
tambin como fuente de azufre. Por tal motivo, en el ejemplo anterior se tendr que
verificar si con la cantidad calculada para aportar el nitrgeno necesario se satisfacen las
necesidades de azufre. De ser positiva la respuesta, entonces el sulfato de amonio
satisface a la vez las necesidades de nitrgeno y azufre. De ser negativa, tendr que
seleccionarse y calcularse la cantidad de otra materia prima que complemente las
necesidades de azufre que no cubri el sulfato de amonio.
En la tabla 3 se muestran rendimientos celulares para algunas materias primas, con la
consideracin de una composicin elemental particular de un microorganismo.
Conviene aclarar que el valor mostrado para la glucosa en dicha tabla, se multiplic por
0.6 al considerar que en un proceso aerbico el 60% del carbono es incorporado a
biomasa y el otro 40% es liberado como CO2 para la captacin de energa (prcticamente
en todas las fermentaciones industriales la fuente de carbono proporciona la energa para
crecimiento y el carbono para sntesis de material celular y productos).
Esta primera aproximacin tiene el inconveniente de considerar como constantes la
composicin del microorganismo, del medio y de las condiciones ambientales, lo cual no
es totalmente cierto.
Tabla 3. Ejemplos de rendimientos celulares de distintas materias primas.
Elemento
1) C
2) N
3) P
4) S
5) Mg
6) Ca
7) Fe
8) Cu
9) Mn
10) Mo

% del elemento en las

clulas. (promedio).
48
6
2.5
0.3
0.2
0.5
0.2
0.01
0.005
0.0002

Materia prima
seleccionada.
glucosa
(NH4)2SO4
K2HPO4
(NH4)2SO4
MgSO4
CaCl2.2H2O
FeSO4
CuSO4
MnSO4
NaMoO4

Rendimiento Y.
g cel/g mat. prima.
0.5
3.5
7.1
80.7
100
54.4
100.5
2540
6500
219000

1.7. MODELOS PARA EL CRECIMIENTO MICROBIANO.

Los estudios necesarios para investigar el efecto que sobre el crecimiento microbiano
presentan las condiciones ambientales, el tipo y concentracin de las fuentes nutritivas y
las caractersticas de transferencia de masa del sistema, se podran realizar en una forma
totalmente emprica a travs de un sinnmero de condiciones experimentales que cubran
todas las combinaciones posibles, presentndose los resultados como una serie de
10

correlaciones mediante las cuales sea posible predecir los efectos con un nuevo juego de
condiciones de operacin. Este procedimiento, an cuando es lgico, implica gran
cantidad de experimentacin (con el consecuente consumo de materias primas, energa y
mano de obra) y lo que es peor, solo da informacin escasa y de baja calidad para la
comprensin real del fenmeno de crecimiento.
El modelamiento es una herramienta poderosa mediante la cual se puede describir el
comportamiento actual y probable del crecimiento microbiano mediante una teora bien
establecida que, cuando es descrita en trminos matemticos, representa un modelo de
trabajo del proceso. Para el establecimiento de un modelo, el modelador debe conocer la
naturaleza de todos los parmetros importantes del proceso, sus efectos sobre el mismo
y cmo pueden ser definidos en trminos cuantitativos (debe identificar las variables
importantes y sus efectos por separado sobre el proceso, tomando en consideracin
efectos sinergsticos, etc.). La expresin matemtica del modelo constituye un factor
determinante para la concepcin bsica y real del proceso. Una vez que se ha formulado
el modelo matemtico, tiene que ser resuelto y comparado o validado con datos
experimentales bajo las mismas condiciones establecidas en el modelo. Cualquier
diferencia debe ser investigada para redefinirlo o mejorarlo hasta que posea exactitud en
la prediccin de los datos experimentales. As, el modelo servir para el diseo,
optimizacin y control de procesos y para predecir el comportamiento bajo nuevas
condiciones de experimentacin.
Un primer paso en el modelado del crecimiento microbiano, es la formulacin apropiada
de las ecuaciones de balance de masa y energa, lo cual implica el establecimiento de las
ecuaciones cinticas para las velocidades de crecimiento, consumo de sustrato,
formacin de producto y de transferencia de masa, calor y momento. La formulacin de
tales ecuaciones puede ser desde lo ms simple hasta lo ms compleja posible, dando
origen a distintas "categoras" de modelos cinticos14.
La naturaleza biolgica del crecimiento microbiano es, por necesidad, de una complejidad
tal que puede dar origen a modelos cinticos tan complicados que realicen una
descripcin detallada del proceso de crecimiento (estos contarn con un gran nmero de
parmetros experimentales y de ecuaciones de balance), por tal razn, entre las
preguntas a contestar en el modelado cintico sobresalen las siguientes: qu nivel de
descripcin se requiere? y que ventajas representa un modelo altamente complejo
respecto de uno sencillo?. Estas preguntas deben contestarse en funcin de la precisin
y/o exigencias que se requieran para el modelo.
Se sabe que los individuos que componen una poblacin microbiana, salvo raras
excepciones, son completamente heterogneos en cuanto a su tamao celular, edad,
velocidad de crecimiento, composicin celular y otras caractersticas que dan origen a las
distintas clasificaciones de los modelos de crecimiento. Un modelo en el se represente al
total de la poblacin como un "microorganismo promedio" , en el que su estado fisiolgico
se describa en funcin de su velocidad de crecimiento, sin considerar variaciones en las
estructuras internas que lo componen, se clasifica como no segregado y no
estructurado. Si en dicho modelo se tomaran en cuenta las estructuras internas, sus
relaciones y variaciones con el tiempo, se clasificara como "no segregado y
estructurado".
Los modelos que no consideran las variaciones entre los individuos de una poblacin se
llaman "no segregados" y segregados a los que s consideran las variaciones. De
acuerdo a esto, los modelos segregados sern de mayor precisin que los no
segregados, sin embargo, la precisin de estos ltimos est en funcin directa del
tamao de la poblacin. Como en una poblacin microbiana la densidad de poblacin
11

comnmente oscila por arriba de 107 individuos por ml, los modelos no segregados se
vuelven muy precisos.
A pesar de las distintas clasificaciones de los modelos matemticos que describen el
crecimiento microbiano, en esta seccin solo se vern los modelos "no estructurados y no
segregados", quedando fuera del alcance de los objetivos de este trabajo establecer
modelos complejos como los estructurados y segregados, ya que los no estructurados
son precisos para casos de crecimiento balanceado e imprecisos para los no
balanceados.
En la tabla 4 se muestra en forma esquemtica la clasificacin de los distintos modelos
cinticos de crecimiento microbiano.
Tabla 4. Perspectivas de representacin de los modelos cinticos del crecimiento
microbiano.
NO ESTRUCTURADOS.
El caso ms idealizado.
La poblacin celular se trata como
un solo componente.
Se considera solo un componente
con variaciones entre los individuos.

No segregados

Segregados

ESTRUCTURADOS.
Se considera que la clula promedio
consta de varios componentes.
Se consideran varios componentes con
variaciones entre los individuos.

En la literatura existe una diversidad de modelos cinticos no estructurados.

Comnmente estos modelos son empricos y relacionan la velocidad especfica de
crecimiento () con una funcin relativamente sencilla de la composicin del medio de
cultivo (concentracin de sustrato, oxgeno disuelto, inhibidores, etc.), como se ve en la
tabla 5. El modelo de Monod es el ms ampliamente utilizado en razn de su naturaleza
relativamente sencilla. En el se expresa que la de un microorganismo es una funcin de
la concentracin del sustrato limitante (la fuente de carbono), dndose por hecho que los
dems se encuentran en exceso o por arriba de las mnimas necesidades del
microorganismo, como se ve en la siguiente ecuacin:

= max

s
s ks

(24)

en la que "max" es la velocidad especfica de crecimiento mxima, "ks" la constante de

saturacin del microorganismo por el sustrato y "s" la concentracin del mismo. Las
constantes max y ks son funcin del microorganismo, del sustrato y de las condiciones
ambientales en las que se efecta el crecimiento (Ks es la concentracin de sustrato que
da como resultado que el microorganismo tenga una velocidad especfica de crecimiento
igual a la mitad de su mxima). Entre ms pequeo sea el valor de ks se dice que el
microorganismo es ms afn al sustrato. De esta manera, cuando dos microorganismos
distintos elaboran un producto a partir de un mismo sustrato, se eligir aquel que
presente los mayores valores de max y los menores valores de ks.
Una de las formas linealizadas de la ecuacin de Monod es:

max

ks 1
max s

(25)

con la cual se pueden obtener los valores de las constantes mencionadas cuando se
grfica 1/ VS 1/s.
Otra forma linealizada es la siguiente:

12


max k s

(26)

la diferencia entre una y otra ecuacin radica en la precisin de los valores de las
constantes obtenidas, sobre todo, al sustituir valores pequeos de concentracin de
sustrato residual s.
Tabla 5. Modelos cinticos no estructurados ms comnmente utilizados.
Modelo de Monod.

= max

s
s ks

Modelo de Tessier.
max 1 exp( s / k )

Modelo de Konak.

Modelo de Contois.

d
K ( max ) p
ds

= max

Modelo de Powel.

Modelo de Moser.

= max

s
r
s ksr

s
Ax s

m ax

s
s ks k

Modelo logstico.
dx
m a x x (1 x / x m a x )
dt
m a x (1 x / x m a x )

Inhibicin por Producto.

= max

kp
s
s ks p k p

Inhibicin por sustrato.

s
m ax
s ks kis2

Doble limitacin.

m ax

s
CL
s ks C L kO 2

Tabla 6. Constante de saturacin de la ecuacin de Monod para algunos

microorganismos y materias primas.
MICROORGANISMO
E. coli.
Candida utilis.
Candida utilis.
Saccharomyces cerevisiae.

SUSTRATO
Glucosa
Glicerol
Oxgeno
Glucosa

Ks
(mg/l).
0.068 a 4.0
4.5
0.45 a 0.042
25

1.7.1. CINETICA DE CRECIMIENTO.

La cintica clsica de evolucin poblatoria establece que la velocidad instantnea de
crecimiento (dN/dt) es proporcional al nmero de individuos presentes:
dN/dt N

(27)

al eliminar la proporcionalidad de la ecuacin anterior se obtiene:

dN/dt = N
en la que:

(28)

N = nmero de individuos presentes.

dN/dt = velocidad instantnea de crecimiento.
= velocidad especfica de crecimiento.

En esta ecuacin, el trmino N puede ser sustituido por su sinnimo "X" para el caso del
crecimiento microbiano (masa total microbiana). La definicin de se obtiene de dicha
ecuacin:

13

1 dX
X dt

(29)

En una fermentacin en lote, la biomasa total X evoluciona con el tiempo como se

observa en la Figura 1 (es fcil demostrar que, para este caso particular, la concentracin
celular "x", definida como la relacin X/V, evoluciona con el mismo perfil).
La razn de que en dicha figura (1) no se muestre la fase de adaptacin o "lag" ni gran
parte de la "estacionaria", es porque van en contra de la productividad. En las
fermentaciones industriales debe garantizarse que el inculo del fermentador de
produccin debe estar perfectamente adaptado al medio de cultivo y a las condiciones
fisicoqumicas y ambientales establecidas en dicho fermentador.
Figura 1. Curva de crecimiento
microbiano
en
una
fermentacin sumergida y en
lote, en la que se muestra la
velocidad
instantnea
de
crecimiento a tiempos distintos.

tiempo

Observando detalladamente la figura anterior, en las etapas tempranas de la

fermentacin, en la que la masa o concentracin celular es baja y en la que el "alimento"
disponible para el microorganismo es suficientemente grande (bajo condiciones
favorables para la divisin celular), el crecimiento celular no tiene barreras que lo limiten,
por tal razn, se puede considerar que la velocidad especfica de crecimiento es
constante y mxima en esta etapa. Bajo esta consideracin (o bajo aquellas
circunstancias que impongan que sea constante), se puede resolver la ecuacin 29
obtenindose:
ln (x/x0) = max t

ln (x/x0) = t

(30)

Esta es la razn por la cual cuando el crecimiento de un cultivo por lote se grfica en
papel semilogartmico se pueda calcular la "max" con la pendiente de la parte recta
obtenida con los primeros tiempos de fermentacin. Con ayuda de este tipo de grfica se
puede establecer, de manera aproximada, la duracin de la fase de crecimiento
exponencial.
14

De acuerdo a la cintica clsica de evolucin poblatoria, despus de un tiempo dado, la

velocidad de crecimiento de una poblacin disminuye continuamente con el tiempo hasta
llegar a cero. Las cuestiones fundamentales a contestar son bsicamente dos: cul es el
intervalo de tiempo durante el cual la poblacin crece a su mxima velocidad? y cul o
cuales son las razones de dicha disminucin?.
Cuando se crecen microorganismos en medios con una sola fuente de carbono y energa,
ambas preguntas estn estrechamente relacionadas, teniendo una misma explicacin.
Las causas por las que la velocidad disminuye de su valor mximo son bsicamente dos:
el agotamiento del sustrato y la naturaleza de la forma de cultivo (por lote), en la que el
medio ambiente va cambiando con el tiempo (p. ej. la acumulacin continua de detritos
en el medio producidos por el m.o.).
A pesar de los comentarios anteriores, la velocidad especfica de crecimiento puntual a
cualquier tiempo de un cultivo por lote, puede ser calculada mediante la ecuacin 29,
como se observa en la figura 2.
La ecuacin 30 sirve para definir el concepto de tiempo de duplicacin (td), que es el
intervalo de tiempo en el que se alcanza el doble de la masa celular que se tena a un
tiempo dado:
td = ln 2/max

td = ln 2/

(31)

Existe un trmino semejante al td, el tiempo de generacin (tg), solo que este no se refiere
a la duplicacin de la masa celular sino al nmero de individuos. Ambos tiempos pueden
considerarse iguales cuando la naturaleza del crecimiento es asincrnica.
1.7.1.1. EFECTO DE LAS CONDICIONES AMBIENTALES (TEMPERATURA Y pH)
SOBRE LA VELOCIDAD ESPECIFICA DE CRECIMIENTO .
Los efectos que presentan la temperatura (T) y el pH sobre la son muy semejantes. Tal
comportamiento se aprecia en la Figura 3. En ambos casos se observa que existe una
meseta o intervalo de T y pH en el que la es mxima y constante, y fuera de dicho
intervalo la velocidad disminuye hasta llegar a cero (para los extremos). Para el caso de
la temperatura, las zonas fuera de la meseta se pueden denominar como de "activacin"
y de "inactivacin", esta ltima solo es importante durante la esterilizacin de un medio.
Para la zona de activacin la dependencia entre y la temperatura es del tipo de la
ecuacin de Arrhenius:

Ea / RT

A e

(32)

Con base a lo anterior, el microbilogo elige la temperatura y el pH ptimos para el

microorganismo, pero el Ingeniero debe tomar en consideracin otras caractersticas
como son el consumo de energa, la cantidad de calor metablico que se generar,
probabilidades de contaminacin, etc.
1.7.2. CINETICA DE FORMACION DE PRODUCTO.
De acuerdo a Gaden15, las fermentaciones se pueden clasificar en tres tipos distintos de
acuerdo a la formacin de producto: i) asociada al crecimiento; ii) no asociada al
crecimiento; iii) parcialmente asociada al crecimiento (Figura 4).
El modelo ms ampliamente utilizado para describir la cintica de formacin de producto,
es el de Luedeking y Piret16,17, el cual matemticamente establece lo siguiente:
dp/dt = dx/dt + x

(33)

15

ecuacin que al ser multiplicada por "1/x" y al sustituir en ella las definiciones de la
velocidad especfica de crecimiento y de formacin de producto, da origen a:
qp = +

(34)

esta ltima ecuacin representa una lnea recta al graficar qp (la velocidad especfica de
formacin de producto) VS , cuya pendiente y ordenada al origen son y
respectivamente (figura 5). Los valores de estas constantes son los que darn origen a
las distintas clasificaciones de las fermentaciones respecto a la formacin de producto:
asociada al crecimiento = 0 y 0; no asociada al crecimiento = 0 y 0;
parcialmente asociada y distintos de cero.

Figura
2.
Representacin
grfica del crecimiento y de la
velocidad
especfica
de
crecimiento
en
una
fermentacin por lote.

Figura 3. Efecto de la
temperatura y del pH sobre la
velocidad
especfica
de
crecimiento
de
un
microorganismo
creciendo
sobre un sustrato determinado.

16

Figura 4. Clasificacin de
Gaden
de
los
procesos
Fermentativos. a) Formacin de
producto
asociada
al
crecimiento; b) Formacin no
asociada al crecimiento; c)
Formacin
parcialmente
asociada al crecimiento.

Figura 5. Modelo de Luedeking

y Piret.

1.7.3. CINETICA DE CONSUMO DE SUSTRATO.

Puesto que el sustrato se utiliza para la sntesis de material celular (crecimiento), para el
mantenimiento de las funciones vitales del microorganismo (mantenimiento) y para la
sntesis del producto (produccin), al efectuar un balance de masa para el sustrato se
obtiene:

17

(- ds/dt)tot =

dx
1 dp
ms x
(Yx / s ) g dt
Yp / s dt

(35)

en la que (- ds/dt)tot es la velocidad instantnea de consumo de sustrato y el trmino "ms"

es el consumo de sustrato para mantenimiento celular sin que exista crecimiento (ya
definido en la seccin 1.3). Si se multiplica la ecuacin anterior por "1/x" se obtiene:
qs =

1
(Yx / s ) g

ms

1
q
Yp / s p

(36)

en la que qs es la velocidad especfica de consumo de sustrato. Para obtener los

parmetros de la ecuacin 36, basta con linearizar la misma y de la pendiente y la
ordenada se calculan dichos parmetros. As, al graficar (qs - qp/Yp/s) VS se pueden
obtener "(Yx/s)g" y "ms".
Cuando no hay formacin de producto el clculo es ms sencillo, como puede observarse
en la figura 6.
Figura
6.
Representacin
grfica del balance de masa
para el sustrato: a) con
formacin de producto y Yp/s
conocido; b) sin formacin de
producto.

18

1.8. BIBLIOGRAFIA
1. Aiba, S. A., E. Humphrey, and N. F. Millis. 1973. Biochemical Engineering. 2nd. Ed.
Academic Press, New-York.
2. Moat, A. G. 1979. Microbial Physiology. John Wiley & Sons. New-York. Chichester.
Brisbane. Toronto.
3. Moo-Young, M. 1977. The economics of SCP production. Process Biochem.
12(4):6-10.
4. Pirt, S. J. 1975. Principles of Microbe and Cell Cultivation. Blackwell Scientific
Publications.
5. Crueger, W. and A. Crueger. 1989. Biotechnology: A Textbook of Industrial
Microbiology. 2nd. Edition. Sinauer Asociates, Inc. Sunderland, Ma.
6. Atkinson, B. and F. Mavituna. 1983. Biochemical Engineering and Biotechnology
Handbook. The Nature Press.
7. Wang, D. I. C., C. L. Cooney, A. L. Demain, P. Dunnill, A. E. Humphrey and M. D.
Lilly. 1979. Fermentation and Enzyme Technology. John Wiley & Sons, Inc. NewYork. U. S. A.
8. Mateles, R. I. 1971. Calculation of oxygen required for cell production. Biotech.
Bioeng. 13:581-582.
9. Box, G. E. P. and K. B. Wilson. 1951. On the experimental attainment of optimum
conditions. J. Royal Statistical Society. 13(1):1-45.
10. Pilat, P., J. Votruba, P. Dobersky and A. Prokop. 1976. Application of mathematical
optimization methods in microbiology. Folia Microbiol. 21:391-405.
11. Mateles, R. I. and E. Battat. 1974. Continuous culture used for media optimization.
Appl. Microbiol. 28:901-905.
12. Goldberg I. and Z. Er-el. 1981. The Chemostat: An efficient technique for medium
optimization. Process Biochem. 16 (Oct-nov):2-8.
13. Dostalek, M., L. Haggstrom, and N. Molina. 1972. Optimization of biomass
production from methanol. IN: Fermentation Technology Today. G. Terui Ed. Soc.
of Ferment. Tech. Japan.
14. Russell, T. W. F. and M. M. Denn. 1972. Introduction to Chemical Engineering
Analysis. Wiley, New-York.
15. Gaden, E. L. 1959. Fermentation process kinetics. J. Biochem. Microbiol. Technol.
Eng. 1:413-429.
16. Luedeking, R. and E. L. Piret. 1959. J. Biochem. Microbiol. Technol. Engng. 1:393.
17. Bailey, J. E. and D. F. Ollis. 1986. Biochemical Engineering Fundamentals. 2nd.
Ed. Academic, Press.

19

1.9. Nomenclatura
A=

Constante cintica del modelo de Contois [=] M/M o contante de Arrenuis.

C% =

Porcentaje en peso de carbono de un microorganismo.

CL =

Concentracin de oxgeno disuelto [=] ML-3

Ea =

Energa de activacin para el crecimiento celular [=] KcalMol-1

FC =

Fuente de carbono

FN =

Fuente de nitrgeno

H% =

Porcentaje en peso de hidrgeno de un microorganismo.

Ha =

Calor de combustin de la biomasa [=] kcalM-1

Hc =

calor generado por el consumo de oxgeno [=] KcalMol-1

HO=

calor generado por el consumo de oxgeno [=] KcalMol-1

K=

Constante cintica del modelo de Konak o de Tessier

kO2 =

Constante de saturacin de oxgeno [=] ML-3

kp =

Constante de inhibicin por producto [=] ML-3

ks =

Constante de inhibicin por sustrato [=]ML-3

mO2=

Velocidad especfica de consumo de sustrato para mantenimiento [=] M/M/t

Ms =

Peso molecular del sustrato.

ms =

Velocidad especfica de consumo de sustrato para mantenimiento [=] M/M/t

N=

Nmero de individuos

N% =

Porcentaje en peso de nitrgeno de un microorganismo.

O% =

Porcentaje en peso de oxgeno de un microorganismo.

p=

Concentracin de producto o constante cintica del modelo de Konank

ppm=

partes por milln

QH =

calor metablico [=]KcalL-3t-1

QO2 =

velocidad de consumo de oxgeno [=]ML-3t-1

qp =

Velocidad especfica de formacin de producto

qs =

Velocidad especfica de consumo de sustrato [=] MM-1L-3

Coeficiente estequiomtrico de la ecuacin (8), o constante cintica de la ec. 33

r=

Constante cintica del modelo de Moser

R=

constante universal de los gases [=] 1.9872 Kcal/Mol K

s=

concentracin de sustrato [=] ML-3

(s)m=

Sustrato consumido para mantenimiento [=] M

(s)p =

Sustrato consumido para formacin de producto [=] M

(s)tot=

Sustrato total consumido [=] M

20

(s)x=

Sustrato consumido para crecimiento [=]M

T=

Temperatura de crecimiento [=] K

td =

Tiempo de dilucin [=] t

tg =

Tiempo de generacin [=] t

V=

Volumen de cultivo [=] L3

w=

Nmero de tomos de oxgeno de un sustrato dado.

x=

Concentracin celular y nmero de tomos de carbono de la frmula CxHwOz

para un sustrato dado.

X =

Biomasa total [=] M

Yav.e=

Rendimiento celular Con base en los electrones disponibles

Ykcal=

Rendimiento celular Con base en la energa total disponible [=] M kcal-1

YO2 =

Rendimiento celular Con base en oxgeno [=] M/M

Yp/s=

Rendimiento celular de producto Con base en el sustrato [=] M/M

Yx/s=

Rendimiento celular Con base en el sustrato [=] M/M

(Yx/s)g = Rendimiento celular en base sustrato, para crecimiento verdadero [=] M/M
z=

Nmero de tomos de oxgeno de un sustrato dado.

1.9.1. Griegas

Coeficiente estequiomtrico de la ecuacin (8), o constante cintica de la ec. 33

Coeficiente estequiomtrico de la ecuacin (8), o constante cintica de la ec. 33

Coeficiente estequiomtrico de la ecuacin (8)

Coeficiente estequiomtrico de la ecuacin (8)

Coeficiente estequiomtrico de la ecuacin (8)

Coeficiente estequiomtrico de la ecuacin (8)

Velocidad especfica de crecimiento [=] t-1

max =

Velocidad especfica de crecimiento mxima [=] t -1

21

1.

CRECIMIENTO MICROBIANO Y CINTICA DE FERMENTACIONES. ................... 1

1.1. INTRODUCCION.............................................................................................................. 1
1.2. CRECIMIENTO MICROBIANO. ..................................................................................... 2
1.2.1.
LAS FUENTES NUTRICIAS. ..................................................................................... 3
1.3. RENDIMIENTOS Y COEFICIENTES DE MANTENIMIENTO. .................................... 5
1.4. ESTIMACION DEL CALOR METABOLICO. ................................................................. 7
1.5. ESTEQUIOMETRIA DEL CRECIMIENTO MICROBIANO. ......................................... 8
1.6. DISEO DE MEDIOS DE CULTIVO. .............................................................................. 9
1.7. MODELOS PARA EL CRECIMIENTO MICROBIANO. .............................................. 10
1.7.1.
CINETICA DE CRECIMIENTO. .............................................................................. 13
1.7.2.
CINETICA DE FORMACION DE PRODUCTO...................................................... 15
1.7.3.
CINETICA DE CONSUMO DE SUSTRATO............................................................ 17
1.8. BIBLIOGRAFIA .............................................................................................................. 19
1.9. NOMENCLATURA............................................................................................................... 20
1.9.1.
Griegas ..................................................................................................................... 21

22