Agrupamento de Escolas de Terras de Bouro

Escola Bsica e Secundria de Rio Cado

Engenharia Gentica

Organismos geneticamente modificados

Disciplina: Biologia
Autora: Ana Rita Pereira Guedes
Ano: 12, N3, Turma: A
Professora: Glria Pereira
Ano letivo: 2014/2015
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ndice
Introduo:
- Engenharia Gentica.pg.3
- DNA recombinante. .pg.4
- DNA complementar e PCR. pg.5
Organismos geneticamente modificados:
- Terapia gentica..................pg 6 e 7
- Produo de protenas.. pg.7
- Plantas transgnicas... pg.7 a 9
- Animais transgnicos. pg.10
Concluso..... pg.11
Bibliografia...pg.12

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Introduo
Engenharia Gentica
A engenharia gentica baseia-se num conjunto de tcnicas e ferramentas que permite a
interveno no genoma de um organismo construindo novos genomas por recombinao
de segmentos genmicos de um mesmo ou diferentes cromossomas.
Estas tcnicas s foram possveis aps estudos genticos onde bactrias so capazes de
sintetizar enzimas que cortam o DNA do vrus que a invade, atuando como mecanismo
de defesa as endonucleases de restrio. Esta descoberta permitiu o incio da
manipulao do material gentico, pois passou a ser possvel cortar um fragmento
especfico de DNA.
Atualmente, as principais aplicaes da Engenharia Gentica so:
O estudo de mecanismos de replicao e expresso gnica;
A determinao da sequncia de um gene e protena codificada;
O desenvolvimento de organismos geneticamente modificados, capazes de
produzir substncias teis (como, por exemplo, enzimas);
O aperfeioamento e rentabilizao dos processos de produo de vinho, po,
queijo, e iogurte;
O aumento do rendimento de plantas com interesse agronmico, podendo em
alguns casos permitir reduzir o impacto ambiental da produo agrcola
intensiva;
O aumento da qualidade nutritiva de alguns alimentos;
A realizao de testes de paternidade e diagnsticos de doenas genticas e
infecciosas.
Existem duas tcnicas principais de recombinao gentica: o DNA recombinante e o
DNA complementar.

Fig. 1 - Engenharia Gentica.

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DNA recombinante (rDNA)
Para produzir uma molcula de rDNA necessrio extrair o DNA do organismo dador e
o vetor que transportar o DNA do dador. O procedimento para obter o vetor de DNA
depende da sua natureza.
Os plasmdeos so muito utilizados como vetores, sendo necessrio extra-los das
bactrias e separ-los dos cromossomas circulares de maiores dimenses, para tal
utiliza-se a centrifigurao, uma vez que os plasmdeos ligam-se a determinados
compostos, tornando-os mais densos.
As enzimas de restrio clivam o DNA em sequncias nucleotdicas muito especficas, e
de uma forma reprodutvel. O que as torna to importantes o facto de dois fragmentos
cortados pela mesma endonucleose possurem extremidades complementares e coesivas.
A ligao dos fragmentos est a cargo da ligase do DNA, uma enzima cuja funo
estabelecer uma ligao covalente entre nucletidos adjacentes dos dois fragmentos de
DNA, obtendo assim o DNA recombinante.
A replicao do fragmento de DNA de interesse inserido no vetor processa-se
frequentemente em bactrias, como, por exemplo, a Escherichia coli, ou em organismos
eucariontes unicelulares.

Fig. 2 - Processo de rDNA.

DNA complementar (cDNA)

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Os procariontes so organismos muito utilizados em Engenharia Gentica, uma vez que
so fceis de cultivar, tm um crescimento rpido e processos bioqumicos bem
conhecidos. Contudo, no processam o mRNA e, quando recebem genes com intres,
estes no so retirados e a protena produzida no funcional.
O cDNA permite resolver estes problemas uma vez que, obtido a partir do mRNA por
complementaridade de bases, um mRNA que j sofreu processamento (no contm
intres).
A produo de cDNA possvel por ao da enzima transcriptase reversa. O mRNA
funciona como molde para a sntese de uma cadeia de DNA, um processo inverso do
que se passa habitualmente na transcrio. Aps a formao da primeira cadeia de
cDNA, a DNA polimerase forma a cadeia complementar, constituindo-se uma molcula
estvel.
Por este processo, ao ser inserido num organismo procarionte, garante-se a produo de
uma protena normal.
PCR (Reao em Cadeia Polimerase)
A tcnica de reao em cadeia da polimerase (PCR) veio possibilitar novas estratgias
de analises de genes. De um modo geral, a tcnica PCR pode ser considerada como um
meio de clonagem e baseia-se na ampliao do DNA, replicando-o. O processo resumese em trs fases.
A fase de desnaturao, onde o DNA exposto a elevadas temperaturas, na ordem dos
95C, originado a separao das duas cadeias. De seguida vem a fase Hibridizao, onde
as temperaturas descem at ao 55C e so colocados os primers (iniciadores). Isto so
fragmentos de DNA que so ligados (hibridizados) no inicio de cada sequencia alvo, nas
cadeias originadas na primeira fase por complementao de bases, para na terceira fase
a enzima utilizada reconhecer uma cadeia dupla.
Numa terceira fase utilizada a DNA polimerase que identifica a zona onde se localiza
o primer e reconhece essa zona como dupla cadeia, e assim pode atuar, replicando o
resto da cadeia de DNA, ou seja, fazendo a elongao dos primers.
Numa reao de PCR, os ciclos so repetidos dezenas de vezes e sem interveno
manual. O processo rpido e o nmero de cpias de DNA cresce exponencialmente
em cada ciclo. Embora no final ainda existam vestgios do DNA inicial, a maior parte da
amostra composta pelo fragmento de interesse.
Uma das desvantagens do PCR a grande sensibilidade contaminao com DNA
estranho, que pode emparelhar com os iniciadores e ser amplificado. Contudo, h que
salientar que as tcnicas de PCR esto em permanente evoluo no sentido de se
encontrar solues para os problemas existentes e introduzir melhoramentos, de modo a
proceder-se apenas amplificao de sequncias muito especficas e com interesse.

Organismos Geneticamente Modificados

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Entende-se por organismo geneticamente modificado (OGM) todo o organismo cujo seu
material gentico foi manipulado de uma forma que no ocorre naturalmente
(normalmente, atravs da Engenharia Gentica). De um modo geral, modificaes
pretendem conferir caractersticas favorveis.
O OGM so frequentemente designados por transgnicos, principalmente quando se
referem a plantas e animais. Contudo, estes no so exactamente a mesma coisa. Um
transgnico um organismo geneticamente modificado, mas um organismo
geneticamente modificado no obrigatoriamente um transgnico. Por exemplo,
uma bactria pode ser modificada para expressar mais vezes um gene. Isso no quer
dizer que ela seja uma bactria transgnica, mas apenas um OGM, j que no foi
necessrio inserir material externo.
As principais aplicaes dos OGM, so:

Terapia Gnica;
Produo de protenas;
Plantas transgnicas;
Animais transgnicos.

Terapia Gnica
A terapia gnica baseia-se na introduo de genes nas clulas e tecidos de indivduos
que possuam uma doena causada pela deficincia desse gene, tcnica comum em
tratamento de doenas hereditrias. Embora seja uma terapia em estado primitivo, tem
revelado bons resultados.
Existem vrios tipos de vrus, que so seres dependentes, ou seja, precisam de outro ser
para executarem o seu ciclo de reproduo, introduzindo o seu material gentico dentro
das clulas do ser hospedeiro. Sinteticamente, os vrus lanam o seu DNA para dentro
das clulas hospedeiras, que por sua vez vai beneficiar dos mecanismos de transcrio e
traduo dessas clulas hospedeiras para produzir mais copias do seu DNA, infectando
assim clula aps clula.
Facilmente se percebeu, que um vrus seria um bom meio de levar genes ao interior das
clulas humanas, e assim surgiu a terapia genica utilizando os vrus como vectores. Para
isso utiliza-se a tcnica do DNA recombinante, retirando o vrus que causa a doena
viral, e introduz-se o gene de interesse a levar as clulas humanas.
Com isto possvel introduzir um gene de interesse nas clulas somticas (j que de
momento ilegal aplicar a terapia genica a clulas germinativas) para corrigir uma
doena provocada pela ausncia ou defeito desse gene, possibilitando deste modo a
produo da substncia correspondente a esse gene, e tratar o distrbio provado pela
ausncia dessa substncia.
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Como todos os Organismos geneticamente modificados surgem sempre umas possveis
desvantagens. Neste caso, os distrbios provocados por mutaes em apenas um gene
tm grandes possibilidades de se verificar eficincia na terapia gentica, mas
infelizmente, aqueles que so mais frequentes (como doena cardaca, Alzheimer e
diabetes) so causados pela combinao de vrios genes, fator que se revela altamente
problemtico usando a terapia gentica.
O maior problema que surge do uso da terapia gentica , certamente, o facto de poder
ativar oncogenes, ou seja, se o gene introduzido num local errado do genoma, como
por exemplo no lugar de um proto-oncogene ou de um gene supressor de tumores,
poderia induzir a um tumor. De qualquer forma, as expectativas atuais indicam que a
terapia gentica no se limitar apenas a substituir ou corrigir defeitos nos genes,
surgindo assim possibilidades teraputicas que esto a ser desenvolvidas para permitir a
libertao de protenas que controlem nveis hormonais ou estimulem o sistema
imunitrio. Com isto, a terapia gentica a esperana de tratamento para um grande
nmero de doenas at hoje consideradas incurveis.
Produo de Protenas
A Engenharia Gentica permite hoje em dia criar protenas a partir de bactrias.
O melhor exemplo o da insulina. Os diabticos precisam de insulina para manterem os
seus nveis de acar no sangue em equilbrio, protena que h uns anos atrs era
extrada do pncreas de porcos para poder fornecer a populao diabtica. Contudo,
tinha vrias desvantagens, como a bvia necessidade de se ter de matar um elevado
nmero de porcos e o facto de esta ainda poder originar alergias no receptor.
O primeiro organismo geneticamente modificado foi uma bactria chamada Eschericia
coli. Esta foi modificada de modo a integrar o gene humano responsvel pela produo
de insulina, para isso lhe introduzido o gene da insulina humano (atravs de processos
da Engenharia Gentica), passando, assim, a produzir esta protena em quantidades
suficientes para satisfazer a populao mundial.
Plantas transgnicas
A modificao gentica permite que plantas adquiram outras caractersticas. O resultado
so exemplares mais fortes, resistentes a secas e a insetos, por exemplo. As principais e
mais importantes plantas ou alimentos transgnicas existentes no mundo so a soja, o
milho, o algodo, a colza e o arroz dourado. Contudo, existe uma grande preocupao
em torno dos aspectos relacionados segurana alimentar e ambiental das plantas
transgnicas.
O procedimento para criao de plantas transgnicas inicia-se pela seleo do gene a
transferir, escolhendo um vetor de clonagem adequado para as plantas. Como a parede
celular dificulta a entrada do plasmdio, frequente recorrer Agrobacterium
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tumefaciens. Esta bactria produz naturalmente tumores nas plantas, pois induz a
produo em excesso de uma hormona vegetal que leva ao crecimento anormal do
tecido infectado. Este tumor importante, pois permite a multiplicao bacteriana
(infeo).
A Agrobacterium transfere parte do plasmdio, o T-DNA (DNA de transferncia), para a
clula vegetal. O materialgentico inserido nos cromossomas que se encontram no
ncleo. As clulas podem ser cultivadas em meio prprio e, por diferenciao e
crescimento, originarem uma planta adulta transgnica. A Agrobacterium tumefaciens
no parasita os cereais como o milho, o arroz e o trigo, existindo mtodos alternativos
para estas espcies, podendo nestes casos recorrer-se ao bombardeamento de
fragmentos de DNA com partculas de ouro.
As principais vantagens das plantas transgnicas, so:

Resistncia s pestes: o cultivo de plantas transgnicas ir ajudar a

eliminar a utilizao de pesticidas qumicos e a reduzir o tempo e custo de
trazer os alimentos ao mercado.
Tolerncia aos Herbicidas: as plantas transgnicas so sensveis a somente
um herbicida potente. Supostamente ser necessrio uma nica aplicao
deste herbicida reduzindo assim os custos de produo.
Resistncia a doena: resistncia a doenas provocadas por um vrus, um
fungo ou uma bactria nestas plantas.
Tolerncia ao frio: estas plantas conseguem tolerar as baixas temperaturas
que em condies normais no lhe permitiriam a sobrevivncia.
Tolerncia s secas / tolerncia a salinidade: em zonas com menos terreno
disponvel para cultivar, as plantas transgnicas poderiam ser cultivadas
em terrenos antes considerados imprprios.
Nutrio: o cultivo de alimentos enriquecidos com vitaminas e minerais
especialmente em zonas de pobreza generalizada.
Vacinao: possibilidade de cultivar plantas transgnicas que
funcionariam como vacinas comestveis.

As principais desvantagens esto divididas em trs reas nomeadamente perigos

ambientais, risco para a sade pblica e preocupaes econmicas:
Perigos ambientais

Danos no intencionais a outros organismos: o plen das plantas

transgnicas pode conter toxinas que matam insetos naquela cultivao e
noutros volta. Neste momento, este assunto ainda est sob discusso
com novos estudos sob avaliao.
Eficcia reduzida de pesticidas: existe a preocupao que os insetos
ficaro resistentes a estas plantas e aos pesticidas criados especificamente
para elas.

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Transferncia de genes para espcies no-alvo: outra preocupao a

transferncia de genes tolerantes aos herbicidas das plantas transgnicas
para as ervas daninhas tornando-as super ervas daninhas.

Risco para a sade pblica

Alergias: existe a possibilidade de ao introduzir um novo gene numa
planta, esta possa vir a criar um novo alergeno ou causar uma reao
alrgica (por vezes de risco-de-vida) em indivduos susceptveis. Um
exemplo disto a soja obtida com transferncia gentica da castanha do
Par. Foi demonstrado que uma parte das pessoas alrgicas castanha do
Par passa a ser alrgica tambm soja transgnica.
Resistncia a antibiticos: utilizam-se genes de resistncia a antibiticos
de forma a facilitar as tcnicas de transferncia e o resultado que as
clulas desses alimentos passaro a ter essa informao gentica e que
posteriormente acabaro no nosso prato.
Efeitos desconhecidos na sade humana: uma das mais importantes
preocupaes o fato de ao estarmos a introduzir genes alheios nas
plantas, estes possam vir a ter um impacto inesperado e negativo na sade
humana. Um efeito secundrio dos OGMs poder ser a criao de novas
toxinas.
Preocupaes econmicas
A entrada de alimentos transgnicas para o mercado um processo lento e caro e as
empresas de biotecnologia querem obviamente assegurar um retorno do investimento.
Muita da tecnologia, bem como as plantas transgnicas, foram patenteadas. Isto pode
fazer com que as sementes das plantas transgnicas fiquem a preos inacessveis aos
pequenos agricultores e aos pases do terceiro mundo.
Existe tambm a situao da polinizao cruzada e o cultivo involuntrio de plantas
transgnicas por agricultores que posteriormente venham a ser alvos de processos por
violao de patente. Esta situao ir arruinar os pequenos agricultores.
Os OGMs, como o milho, a soja e o tomate, que j constituem a maior parte das
plantaes destes alimentos nos EUA, podem constituir uma verdadeira praga para as
variedades tradicionais sem modificao gentica, eliminando-as por competio.
A situao em Portugal
Em Portugal, as plantas transgnicas so uma realidade, embora uma grande parte da
populao no sabe do que se trata, dos seus efeitos e origens.
A cultura de milho geneticamente modificado registou, em 2011, um crescimento
significativo, cobrindo uma rea de 7 724 hectares, mais 59% face superfcie plantada
em 2010, cerca de 4 900 hectares, revela um estudo elaborado pelo Ministrio da
Agricultura.

Animais transgnicos

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A produo de animais geneticamente modificados constitui um marco da Engenharia
Gentica, pois abre novos campos de investigao e aplicao biotecnolgica, com
potencial comercial. A investigao nesta rea visa o melhoramento gentico dos
organismos, para aumentar a sua produtividade e qualidade.
O material gentico recombinante que codifica para uma protena pretendida
frequentemente injectado em ovos fecundados. Estes so depois transferidos para o
tero de uma fmea. O organismo que se desenvolve transgnico e as suas clulas
passam a sintetizar a protena pretendida.
Um exemplo tpico a insero de um gene num vetor que possui um promotor que s
se encontra ativo nas clulas das glndulas mamrias. Nesta situao, o gene clonado
apenas ser expresso nas clulas das glndulas mamrias e a protena passa a ser
produzida em elevadas quantidades, juntamente com as restantes protenas do leite. A
protena pode ser extrada do leite como, por exemplo, os factores de coagulao
sangunea, que so produzidos em elevadas quantidades quando comparadas com os
procedimentos mais clssicos. Os animais no sofrem maus tratos.
A tecnologia transgnica em animais, ainda se encontra em fase experimental. Com o
tempo e experincia, poder vir a ser extensamente utilizada. Nessa fase, possvel ver
as potenciais vantagens e predizer os possveis riscos que essa nova tcnica possa
acarretar.
Vantagens:

Especificidade: A caracterstica requerida pode ser escolhida com muito mais

preciso, assim os riscos indesejveis reduzem bastante.
Velocidade: Pode-se estabelecer uma caracterstica desejada em uma gerao,
enquanto que, na reproduo seletiva, so necessrias muitas geraes.
Economia: Pose-se introduzir novas caractersticas nos animais, para reduzir
suas necessidades alimentcias e tratamento veterinrio.

Desvantagens:

Sade do animal: A insero de um transgene pode alterar a expresso do

genoma (e, portanto as funes do animal).

Transmisso de vrus: Este um tema particularmente preocupante no caso da

reproduo de animais como doadores de tecidos, para os xenotransplantes.

Disseminao: Os transgenes poderiam ser transmitidos a populaes silvestres

atravs da reproduo normal.

Quanto s aplicaes da tecnologia transgnica, podemos citar dois principais

segmentos:

Modelos de enfermidade: possvel introduzir genes mutantes de humanos em

ratos, induzindo determinada doena, com a finalidade de se buscar a cura, sem
que os humanos passem por testes experimentais.
Melhora de ganho: Com alteraes genticas possvel que animais criados para
fins comerciais tenham um crescimento acelerado em um menor espao de
tempo, carne com ndice de gordura reduzido ou ainda reduo da sensibilidade
a infeces.
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Concluso
Com este trabalho, conclui-o que a Engenharia Gentica teve grandes impactos na
sociedade em geral. Atravs de tcnicas como do DNA recombinante, DNA
complementar e PCR, consegue manipular os genes, obtendo-se organismos
geneticamente modificados (OGM).
O Homem produz OGM com potencial econmico-social para a alimentao, para a
sntese de compostos para a indstria farmacutica e para a farmacologia, etc. Contudo,
a manipulao de DNA tem implicaes biolgicas, ticas e sociais.
Na minha opinio, os OGM tem potencial para resolver problemas da sociedade, como
acabar com a fome. Contudo para que isso acorra necessrio que a cincia se
desenvolva, o que s ocorre atravs de grandes investimentos na investigao e na
tecnologia e tambm ter em conta todos os riscos que possam ocorrer.

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Bibliografia

DW:
http://www.dw.de/plantas-geneticamente-modificadas-problema-ou-solu
%C3%A7%C3%A3o/a-16375934, consultado a 05/03/2015;
Nadis:http://www2.ibb.unesp.br/nadi/Museu5_transmissao/Museu5_engenharia/
Museu5_engenharia_transgenicos.htm, consultado a 05/03/2015;
Wikipdia:
http://pt.wikipedia.org/wiki/Organismos_geneticamente_modificados,
consultado a 05/03/2015;
Wikipdia:
http://pt.wikipedia.org/wiki/Engenharia_gen%C3%A9tica,
consultado a 02/03/2015;
Ribeiro, Elsa; Silva, Joo Carlos; Oliveira, scar: 12 BioDesafios, Areal
Editores, consultado a 02/03/2015.

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