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Informe de laboratorio: Prctica - Biomolculas

Lab report: Practice - Biomolecules

Catalina Orozco, Cristian Serna, Daniela Jaramillo

Resumen: Casi todas las molculas en la clula son compuestos carbonados asociados a otros elementos,
entre otros se consideran los carbohidratos, lpidos, protenas y los cidos nucleicos. Existen pruebas
cualitativas como el uso de los reactivos de Benedict, Lugol, Biuret y Sudan III que permiten identificar
determinadas biomolculas. En la prctica se analiz distintas muestras de alimentos para consumo
humano tales como pan comn, pan integral, papaya y pia; se sometieron los alimentos a cada uno de los
diferentes reactivos antes mencionados. Se encontr en el pan comn carbohidratos de tipo monosacrido
y polisacrido, en el pan integral polisacridos; para las frutas, se detect la presencia de polisacridos en
la pia, ms la papaya, no reaccion con ninguna prueba.
Palabras clave: Biomolculas, Reactivos, Testigos, Oxido-reduccin, Identificacin

Abstract: Almost all molecules in the cell are carbon compounds associated with other elements, among
others are carbohydrates, lipids, proteins and nucleic acids. Qualitative evidence such as the use of the
reagents Benedict, Lugol, Biuret, and Sudan III that identify certain biomolecules. In practice was
analyzed different samples of food for human consumption such as common bread, whole wheat bread,
papaya and pineapple; the food were subjected to each of the different reagents mentioned above. Found
in the common bread type carbohydrates monosaccharide and polysaccharide on the bread
polysaccharides; for fruits, detected the presence of polysaccharides in more papaya, pineapple, it did not
react with any evidence.
Key words: Biomolecules, Reagents, Witnesses, Oxydo-reduction, Identification.

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Introduccin
Una clula viva est constituida bsicamente por cuatro elementos (C, H, O y N) los cuales combinados
entre s, dan origen a un gran nmero de compuestos. Casi todas las molculas en la clula son
compuestos carbonados asociados a otros elementos, entre otros se consideran los carbohidratos, lpidos,
protenas y los cidos nucleicos. Estos son distintos en sus propiedades fsicas y qumicas, pero los tres
primeros son similares metablicamente, al menos, en el hecho de que son fuentes de energa para los
organismos. [1]
Las protenas, los cidos nucleicos y la mayora de los carbohidratos son macromolculas formadas por la
unin de cientos o miles de unidades monomricas de aminocidos, nucletidos o azucares simples
respectivamente; los lpidos qumicamente son el resultado de la unin tipo ster entre un alcohol y uno o
varios cidos grasos. La mayora de los compuestos orgnicos contribuye a la estructura de las plantas y
de los animales, o se usan en su metabolismo puesto que son una reserva de energa potencial que pueden
poner a disposicin segn sus necesidades.
En el laboratorio puedo determinar la presencia o ausencia de diferentes tipos de macronolculas
mediante pruebas cualitativas y cuantitativas. Cualitativas en este caso como el uso de reactivos tipo
Benedict y Lugol que me determinan monosacridos y polisacridos respectivamente, Biuret que me
indica la presencia de protenas y Sudan III que me muestra la presencia de Lpidos.

Marco terico
Los Carbohidratos, tambin llamados azcares o hidratos de carbono, son compuestos orgnicos formados
por unidades de azcares simples, su frmula general es (CH 2O)n Pueden clasificarse como monosacridos
y polisacridos, qumicamente por la presencia de grupos OH en sus estructuras se clasifican en
polihidroxialdehidos y polihidroxicetonas, haciendo referencia a los grupos funcionales aldehdo y cetona
presentes en la molcula. Los carbohidratos como los azcares y los almidones generalmente se utilizan
por los organismos como fuentes de energa; mientras que los otros como las celulosas, pectinas y quitinas
tienen funcin estructural en clulas individuales y an en organismos completos como hongos, plantas,
bacterias artrpodos. [1]
Las protenas son polipptidos de aminocidos unidos por enlaces amida que van de miles a millones.
Estas macromolculas llevan a cabo todas las actividades de la clula; son herramientas moleculares y

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mquinas que hacen que sucedan las cosas [7]. Son las ms variadas de la naturaleza, son las ms
complejas.
Los lpidos son molculas biolgicas no polares que no se disuelven en agua, lo que explica muchas
funciones biolgicas. Pueden clasificarse en tres grupos principales: Simples, que incluyen grasas y
aceites; Complejos, que comprenden los fosfolpidos o fosfoglicridos; Derivados, que incluyen lpidos
como los esteroides, carotenoides prostaglandinas y vitaminas liposolubles que no se incluyen en los
anteriores [1]. Desempean tres funciones bsicas en las clulas: Primero, proporcionan una importante
fuente de energa. Segundo, los lpidos son el componente principal de las membranas celulares. Tercero,
desempean un importante papel en la sealizacin celular, bien como hormonas esteroideas o como
mensajeros moleculares que trasladan seales desde los receptores desde la superficie celular hasta dianas
dentro de la clula. [2]
El reactivo de Bnedict, est constituido por una disolucin de sulfato de cobre II, citrato de sodio y
carbonato de sodio. La reaccin de Benedict es una prueba cualitativa que identifica azcares reductores
(OH libre en el carbono anomrico) como: glucosa, lactosa, maltosa y celobiosa [3]; en la reaccin el
azcar al ser tratado con estos reactivos experimenta una oxidacin, el cobre II en disolucin acuosa, de
color azul, se reduce a cobre I, el cual se precipita como xido de d cobre I, de color rojo.

Figura 1. Esquema de reaccin para una

prueba positiva con el reactito de Benedict.
Recuperado de: Herrera. C. et al. (2003) p
El Lugol es una disolucin de yodo molecular, I2, y yoduro potsico, KI, en agua destilada donde se forma
el compuesto KI3; (I2 + KI

KI3). El reactivo de Lugol obtenido se utiliza para reconocer la presencia

de almidn pues esta substancia adsorbe el yodo produciendo una coloracin azul intensa, que desaparece
al calentar pues se destruye la estructura producida, y que reaparece al enfriar [9].
La reaccin de Biuret es una combinacin de los reactivos Hidrxido de sodio (NaOH) y Sulfato de cobre
(CuSO4); se usa para la identificacin de protenas, siendo un mtodo sencillo, rpido y econmico. El
reactivo de Biuret es una solucin alcalina de cobre que forma un complejo de color azul prpura, con los
enlaces peptdicos de las protenas. [11]

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Los pptidos (a partir de los tripptidos) y
las protenas reaccionan con el reactivo de
Biuret. Los iones cpricos forman un
complejo de coordinacin con los pares de
electrones no compartidos, presentes en los
aminocidos de las protenas. [5]
Figura 2. Complejo de cobre formado en
la reaccin de Biuret.

El Sudan III es un colorante que se utiliza para detectar especficamente grasas, dado que es insoluble en
agua y soluble en grasas o aceites. Es de un color rojo que cuando se disuelve tie las grasas de un color
rojo anaranjado.
Figura 3. SudanIII. Nombre IUPAC: 1-((4(fenildiazenil)fenil)diazenil) naftaleno-2-ol
Recuperado de http://es.wikipedia.org/wiki/Sud
%C3%A1n_III

Procedimiento
Los objetivos de la prctica se encaminaron al reconocimiento, mediante reactivos adecuados, la presencia
de carbohidratos, protenas y grasas en preparaciones de laboratorio. As como tambin la identificacin
de las mismas biomolculas, mediante pruebas cualitativas, en muestras de alimentos para el consumo
humano. Las muestras a analizar se trataron previamente; El pan, tanto el pan comn como el integral, se
licuaron en agua pura (no de grifo). Las frutas: pia y papaya, tambin estuvieron tratadas con el mismo
proceso, sin adicin de azcares y un posterior colado (filtrado) adecuado.
En la prctica los estudiantes se agruparon por mesas de trabajo, de la uno a la cuatro, para el desarrollo de
la misma. Cada mesa alist cuatro tubos de ensayo marcados as: 1A, 2A, 3A, 4A, siendo estos los

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testigos negativos y, cuatro tubos de ensayo marcados as: 1B, 2B, 3B, 4B, siendo estos los testigos
positivos.
A una mesa se le asign realizar los testigos para la prueba en base a lo siguiente: A cada tubo de la serie A
le agregaron 5ml de agua destilada. Para los tubos de la serie B se procedi as: al 1B se agregaron 3ml de
glucosa al 10%; para el tubo 2B se agregaron 3ml de almidn; para el tubo 3B se agreg 1ml de clara de
huevo y al tubo 4B se agreg 1ml de aceite vegetal.
Posterior a esto, trabajaron con pares de tubos de ensayo para comparar en cada caso las reacciones
ocurridas, es decir comparando 1A Vs 1B; 2A Vs 2B; 3A Vs 3B y 4A Vs 4B con base en la siguiente
secuencia:
1. Para los tubos 1A y 1B, agregaron 10 gotas del reactivo de Benedict y se someti a bao Mara hasta
reaccin en uno de los tubos (cambio de color);
2. Para los tubos 2A y 2B, se agregaron 3gotas del reactivo Lugol y se esper hasta reaccin.
3. Para los tubos 3A y 3B, se adicion 2 gotas de sulfato de cobre (CuSO 4) e hidrxido de sodio al 10%
(NaOH), se esper hasta reaccin.
4. Para los tubos 3A y 3B, se agreg 6 gotas del reactivo SudanIII y se agit con un agitador de vidrio
hasta la homogenizacin en uno de los dos tobos.
Posterior a la obtencin de los tubos patrn o testigo se trabaj secuencialmente en cada mesa cada
muestra, donde una a una se sometieron a los reactivos para su respectivo anlisis. Se marc una serie de
cuatro tubos de ensayo limpios con el serial M1, M2, M3 y M4, para cada tubo se agreg 2ml de la
muestra a analizar y se procedi con los numerales 1 al 4 anteriores. As, se continu igualmente para las
muestras restantes.

MONOSACRRID
MONOSACRRID
OS
OS

BENEDICT
BENEDICT

POLISACRIDOS
POLISACRIDOS

LUGOL
LUGOL

CARBOHIDRATOS
IDENTIFICACIN
IDENTIFICACIN
DE
DE
BIOMOLCULAS
BIOMOLCULAS

PROTEINAS
PROTEINAS

BIUERT
BIUERT

LPIDOS

SUDN III

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Grfico 1. Identificacin del tipo de biomolcula con el reactivo correspondiente.

Resultados
Las muestras tratadas en los tubos de ensayo testigo, fueron correctamente tratadas, se obtuvo un resultado
positivo para los reactivos que fueron sometidas: la glucosa positivo para Benedict, el almidn positivo
para Lugol, la clara de huevo positivo para Biuret, El aceite Vegetal; as como el agua destilada negativo
para cada uno de los reactivos. La pareja de tubos se someti a una reaccin en especfico.
Tabla 1.
REACTIVO /
PAREJAS

Benedict

Lugol

Biuret

SudanIII

1A
1B
2
2B
3
3B
4
4B

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

NA

(CuSo4+NaOH)

NA

NA

Resultados positivo y negativo en los tubos de ensayo testigos. La sigla NA indica que no aplica, la pareja
de tubos no fue sometida al reactivo.

Los siguientes resultados se obtuvieron en las muestras de alimentos: El anlisis dio positivo en las
reacciones con Bnedict y Lugol en el pan comn; la reaccin con Lugol dio positivo con pan integral;
Un caso especial es la papaya, que en nuestro caso no present reaccin con los reactivos, para todos fue
negativa la prueba; por su parte la pia present un resultado positivo frente al reactivo de Benedict,
siendo entonces la nica fruta (nica entre las dos sometidas al experimento) que present reaccin
indicando la presencia de biomolculas.

Imagen 1. Pan blanco positivo para Benedict

Imagen 2. Pan blanco positivo para Lugol

Imagen 3. Pan blanco positivo para Lugol

Imagen 4. Pia positivo para Benedict

Tabla 2.
Reactivo / Muestra
Pan Comn
Pan Integral
Papaya
Pia

Benedict

Lugol

+
+

+
+
-

Biuret
(CuSo4+NaOH)

SudanIII

Resultados positivo y

negativo para

presencia o ausencia de

carbohidratos,

protenas y lpidos segn

las muestras

analizadas y reactivos.

Anlisis de resultados

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El pan blanco, por su elaboracin con harinas refinadas a las que se les ha eliminado una parte del salvado
(cscara del grano del cereal) tiene una muy elevada presencia de almidn y escasa presencia de fibra,
vitaminas y sales minerales. Su valor es pues fundamentalmente energtico. El pan integral (moreno), est
elaborado a partir de harinas de distinto nivel de extraccin (cuanto menos refinada la harina, ms
nutriente conserva). Es rico en fibra, sales minerales, vitaminas del complejo B y protenas vegetales, as
como cantidades poco significativas de grasa vegetal. [4]
Lo anterior apoya la hiptesis de que las diferencias entre el pan comn y el integral radican entonces en
la preparacin y el tipo de ingredientes que se utilizan. De all que los resultados dieran negativo para
protenas y lpidos en ambos, y positivo para carbohidratos; monosacridos y polisacridos en el pan
blanco y polisacridos en pan integral.
Las frutas, al no ser una fuente directa de protenas y lpidos se encuentra escasa literatura al respecto. [10]
Ramirez y Pacheco (2011) reportan valores bajos de estas biomolculas en el estudio; sin embargo hacen
referencia a otros estudios donde tambin se reportan algunos datos del contenido en frutas.
Existen diferencias estadsticamente significativas tanto en los azcares totales como en los reductores de
estas pulpas, teniendo la pia el mayor contenido de azcares totales (Ramirez y Pacheco 2011). Lo que
sustentara el resultado positivo para la prueba de lugol.
Lobo-Rodrigo (1995) reporta en su tesis un estudio realizado por Selvaraj y Col. (1982) donde analizaron
el contenido de azcares, cidos orgnicos, aminocidos, vitaminas y minerales en frutos a distintos
estados de desarrollo, sin llegar a la madurez. El contenido de carbohidratos vari de 2-12% (Sacarosa 750%, glucosa 14-78% y fructosa de 13-50% del contenido total de carbohidratos). Se infiere entonces que
se pudiera encontrar en mayor proporcin glucosa, pero tambin que este como el resto de carbohidratos
totales, depende del estado de maduracin de fruto. Para el caso del resultado obtenido con la papaya, de
no reaccin con reactivo alguno, es posible argumentar que esta no estaba en un estado de maduracin
adecuado para el anlisis y por tanto se plantea realizar un nuevo estudio tomando en cuenta condiciones
de maduracin ms avanzadas, con el fin de obtener un resultado de mayor fiabilidad.

Bibliografa
[1] Cogua. J. (sf) Biologia virtual. Universidad Nacional de Colombia-Sede Bogot. Colombia.
Recuperado de: http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000024/html/contenido.html
[2] Cooper & Hausman. (2011). La Clula. Quinta edicin. Espaa: Marbn.

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[3] Fundacin Wikipedia, Inc. (2014). Wikipedia la enciclopedia libre. Licencia Creative Commons
Atribucin Compartir Igual 3.0. Recuperado de http://es.wikipedia.org/wiki/ Reacci
%C3%B3n_de_Benedict
[4] Gil-Hernandez & Serra-Majem. (2010). Libro blanco del pan. Espaa: Panamericana
[5] Guarnizo. A & Martinez.P; otro. (sf). Experimentos de Qumica Orgnica con enfoque en ciencias de
la vida. Recuperado de https://books.google.com.co/books?
id=Otm5wsEeKYEC&pg=PA183&dq=reactivo+de+biuret&hl=es&sa=X&ei=pCIfVfLoL8PwsA
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[6] Herrera. C. et al. (2003) Qumica de alimentos: Manual de Laboratorio. Recuperado de
https://books.google.com.co/books?
id=8VpJ8foyDiIC&pg=PA12&lpg=PA12&dq=reactivo+de+benedict&source=bl&ots=q1sNjXgm
Vb&sig=IEKksozT_rHHRifaU2Ivxf1VhI&hl=es&sa=X&ei=lQ4fVcHoOsKigwSb64KgDQ&sqi=2&ved=0CFYQ6AEwCw#v=one
page&q=reactivo%20de%20benedict&f=false
[7] Karp, G. (2009). Biologa celular y molecular, conceptos y experimentos. Quinta edicin. Mxico:
Mc Graw-Hill
[8] Lobo- Rodrigo. M. (1995). Caracterizacin bioqumica de frutos de papaya (carica papaya, cv.
Sunrise), hembra y hermafrodita, en relacin con su aptitud al procesado por congelacin, Tesis
doctoral. Universidad Complutense de Madrid - Facultad de farmacia.
[9] Martin-Sanchez. M. (2013). Reactivo de Lugol: Historia de su descubrimiento y aplicaciones
didcticas. Educacin Qumica, 24(1), 31-36.
[10] Ramirez & Pacheco. (2011). Composicin qumica y compuestos bioactivos presentes en las pulpas
de pia, guayaba y guanbana. Interciencia, 36(1), 71-75.
[11] Segal. C & Ortega.G (2005). Manual de prcticas d biologa de la clula 1. Recuperado de
https://books.google.com.co/books?id=i_7RXUu44IC&pg=PT46&dq=reactivo+de+biuret&hl=es&sa=X&ei=pCIfVfLoL8PwsAXE64Dg
CQ&ved=0CCAQ6AEwAQ#v=onepage&q=reactivo%20de%20biuret&f=false