Practica TCL

Fitoqumica y Farmacognosia - 2015
ANLISIS DE COMPONENTES EN
CROMATOGRAFA EN CAPA FINA
Amari Jhossellyn1, Calva Paola1, Senz Cristian1, Santos Mara Soledad1
1
Profesionales en Formacin, Ciencias de la Salud, Titulacin de Bioqumica y Farmacia, Universidad

Tcnica Particular de Loja, San Cayetano Alto s/n C.P. 11 01 608; Loja, Ecuador.
RESUMEN
El presente trabajo tuvo como finalidad llevar a cabo la separacin de una mezcla de
eluyentes que se revelo e identifico mediante TLC (cromatografa de capa fina), con la
ayuda del anlisis cuantitativo se pudo medir la polaridad y capilaridad, mediante esta
metodologa utilizada nos permiti aislar los componentes de una mezcla que se
separan por diferencia de solubilidad y capilaridad, la cual se constituy en dos fases
estacionaria y mvil, constando de etapas directa e inversa, determinado el nmero de
Rf (coeficiente de reparto), para lo cual hay que encontrar la relacin con la solubilidad
de
un
compuesto,
dependiendo
de
su
estructura
qumica
su
hidrosolubilidad/liposolubilidad.
Palabras Claves: TLC, anlisis cuantitativo, componentes, etapa inversa y directa
INTRODUCCIN
simples,
lpidos,
metabolitos,
es
aminocidos
asi
que
la
y
fase
Podemos empezar diciendo que la
estacionaria puede ser variada, ya que
cromatografa
puede ser de celulosa o de un gel de
analtico
es
que
un
procedimiento
separa
diferentes
silicato unido a una superficie slida,
componentes de una muestra x, por
puede ser rgida o flexible. El tipo de
distribucin
una
fase estacionaria que se utilice en un
estacionaria y otra mvil, con el fin de
experimento depender del tipo de
identificarlos y cuantificarlos.
molculas que se quieran separar, el
entre
dos
fases,
La TLC (significado) es frecuentemente

utilizada para separar los componentes
solvente que puede ser agua, orgnico

o una mezcla de ambos.
puros de una mezcla, de acuerdo con
Por otra parte, la fase mvil sube a lo
su polaridad. Por otra parte Oriols
largo de la placa por capilaridad,
(2011),
utilizar
desplazando los componentes de la
frecuentemente para separar azcares
mezcla a diferentes velocidades, lo que
menciona
que
al
provoca su separacin, es as que la
se observ utilizando luz UV(254nm y
TLC se la debe realizar cuando an se
365nm).
desconoce la polaridad del compuesto,
Para determinar el revelado se aplic
en una fase directa o inversa.
reactivos
como
cido
sulfrico
vainillina, que dan como resultado

MATERIALES Y MTODOS
reacciones
Para el presente trabajo se utiliz una

placa de gel de slice (5x1.5mm), en
donde se realiz el marcado de 0.5mm
en la parte inferior y 0.3mm en la parte
superior, tomando como referencia la
parte ms ancha, sealando el punto
medio.
Se
complement
diclorometano
para
con
el
us
limpiar
los
capilares, tambin se necesit tres

placas
de
cromatografa
dos
fase
directa y una de inversa. En el gel de

slice se coloc con el capilar el
compuesto puro aislado (huperzia),
de
coloracin
sustancias contenidas
con
las
en la mezcla,
primero se coloc el cido sulfrico y

luego
vainillina,
calent
posteriormente
la
placa
en
calefactora
para
una
se
plancha
visualizar
las
manchas.
Por
ltimo
se
midi
la
distancia
recorrida por cada mancha desde el

lugar donde coloc la muestra hasta el
centro de la mancha de color.
El recorrido de los compuestos y el
factor de reparto
se aplic con la
frmula para calcular el Rf se aplica la

siguiente
expresin.
eluyente de 100% acetato de etilo,

placa directa, teniendo en cuenta de
lavar el capilar, procediendo a colocar
Rf =
Distancia recorrida por la sustancia

Distancia recorrida por el solvente
con el capilar hexano acetato de etilo,

factor de dilucin 7:3, dndonos 2.8 de
hexano y 1.2 de acetato de etilo igual 4
RESULTADOS Y DISCUSIN
ml, en la placa directa y en la placa
Se
inversa colocamos eluyente de metanol
presencia de metalitos terpenos o
ms agua, 9:1
cidos grasos representados por la
dndonos 3.6ml de
puede
deducir
que
tenemos
metanol + 0.4ml de agua igual 4ml,
coloracin
cada placa se coloc de forma vertical
compuestos como flavonoides por la
dentro de la cmara, en donde va a
coloracin amarillenta.
morada
adems
migrar por capilaridad en la placa

cromatogrfica, para ello se procedi a
Con los diferentes eluyentes (cuadro 1)
separar por migracin
diferencial los
dio como resultado en Rf, las distancias
diversos componentes
de la mezcla,
han sido medidas con una regla, por lo
que los valores de polaridad no son
cidos grasos y/o terpenos por la
exactos sino una simple aproximacin.
coloracin que presentan.
Tratamientos
Met/H2O 9:1
HEX/AE 7:3
Acetato 100%
1
2
3
1
2
1
Recorrido
(mm)
Rf
0.4
1.3
0.8
04
1.3
3.2
0.09
0.3
0.1
0.09
0.3
1.3
CONCLUSIONES
Se puede concluir mencionando que es
una
tcnica muy accesible, fcil y
rpida, teniendo como ventajas el costo

y numero de material. Otra es que la
eficacia al tratarse de una tcnica muy
Cuadro 1.
sensible, precisa y necesita muy poca

cantidad de muestra para hacer una
Es as que se puede determinar la
identificacin correcta. Es as que la
polaridad de las sustancias y as mismo
TLC tiene buena aceptacin, ya que se
que el eluyente ms adecuado sera el
puede llevar a cabo anlisis en los
met/H2O ya que es el disolvente ms
sectores medioambientales, deteccin
polar y arrastra ms fcilmente a los
de drogas como el caso de forenses,
compuestos y adems al hacer la
en la industria de alimentacin y
comparacin entre las placas es el que
farmacutica.
tuvo mayor visualizacin de sustancias,

esto en comparacin con el menos
BIBLIOGRAFA
polar que fue el acetato ya que no

arrastr mucho a los componentes, ya
que la slice gel atrae a la sustancia
ms polar debido a que esta es muy
polar y hace que el compuesto quede
retenido en ella, en la fase estacionaria,
es decir, corren menos mientras que
Oriols
las molculas menos polares se ven
Cromatografa en Capa fina (TLC). Una
menos retenidas y avanzan a mayor
herramienta
til
velocidad arrastradas por el eluyente.
restaurador.
Departamento
se observ tambin la presencia de

varias manchas lo que nos indican que
en la muestra analiza hay varios
compuestos entre ellos flavonoides,
Pladevall
Nria.
para
qumicas.
Universidad
Barcelona.
Revista
Edicin 22. pg. 21-24
ANEXOS
el
(2011).
conservadorde
ciencias
Autnoma
Unicum
de
Catalua.

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Profesionales en Formacin, Ciencias de la Salud, Titulacin de Bioqumica y Farmacia, Universidad

Podemos empezar diciendo que la

estacionaria puede ser variada, ya que

puede ser de celulosa o de un gel de

silicato unido a una superficie slida,

componentes de una muestra x, por

puede ser rgida o flexible. El tipo de

fase estacionaria que se utilice en un

estacionaria y otra mvil, con el fin de

experimento depender del tipo de

molculas que se quieran separar, el

La TLC (significado) es frecuentemente

solvente que puede ser agua, orgnico

puros de una mezcla, de acuerdo con

Por otra parte, la fase mvil sube a lo

su polaridad. Por otra parte Oriols

largo de la placa por capilaridad,

desplazando los componentes de la

frecuentemente para separar azcares

mezcla a diferentes velocidades, lo que

Fitoqumica y Farmacognosia - 2015

provoca su separacin, es as que la

se observ utilizando luz UV(254nm y

TLC se la debe realizar cuando an se

desconoce la polaridad del compuesto,

Para determinar el revelado se aplic

en una fase directa o inversa.

vainillina, que dan como resultado

Para el presente trabajo se utiliz una

capilares, tambin se necesit tres

directa y una de inversa. En el gel de

primero se coloc el cido sulfrico y

recorrida por cada mancha desde el

frmula para calcular el Rf se aplica la

eluyente de 100% acetato de etilo,

Distancia recorrida por la sustancia

con el capilar hexano acetato de etilo,

ml, en la placa directa y en la placa

inversa colocamos eluyente de metanol

presencia de metalitos terpenos o

cidos grasos representados por la

metanol + 0.4ml de agua igual 4ml,

cada placa se coloc de forma vertical

compuestos como flavonoides por la

dentro de la cmara, en donde va a

migrar por capilaridad en la placa

Con los diferentes eluyentes (cuadro 1)

separar por migracin

dio como resultado en Rf, las distancias

han sido medidas con una regla, por lo

Fitoqumica y Farmacognosia - 2015

que los valores de polaridad no son

cidos grasos y/o terpenos por la

exactos sino una simple aproximacin.

coloracin que presentan.

tcnica muy accesible, fcil y

rpida, teniendo como ventajas el costo

sensible, precisa y necesita muy poca

Es as que se puede determinar la

identificacin correcta. Es as que la

polaridad de las sustancias y as mismo

TLC tiene buena aceptacin, ya que se