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INTRODUCCION
Un laboratorio de microbiologa es un lugar convenientemente habilitado
donde se puede habilitar, manejar y examinar microorganismos. Este tipo de
trabajo debe ser llevado a cabo con una buena tcnica asptica y por tanto se
requiere un ambiente limpio y ordenado. Cuando manejamos cualquier tipo de
muestra debemos evitar que microorganismos ajenos a nuestros cultivos y
presentes en el ambiente se introduzcan en ellos contaminndolos, o que los
microorganismos de la muestra nos contaminen a nosotros. Por ello se debe
trabajar en condiciones de estabilidad.
En el laboratorio de microbiologa encontraremos en estas condiciones bien en
campanas de seguridad biolgica o bien en la proximidad de la llama de un
mechero de alcohol o de gas. Aunque los microorganismos que se manipulan
no se han considerados patgenos todos los cultivos de todos los
microorganismos deben ser manejados con precaucin por su potencial
patogenicidad. En resumen, nunca debe olvidarse la necesidad de cumplir
estos dos requisitos bsicos: restringir la presencia de los microorganismos en
estudio a sus recipientes y medios de cultivo para evitar el riesgo de
contaminarse uno mismo o a un compaero; evitar que los microorganismos
ambientales (presentes en piel, pelo, aire, ropa, etc.) contaminen nuestras
muestras.
Adems de un ambiente microbiolgico, el laboratorio de microbiologa
requiere una instrumentacin bsica para llevar a cabo estudios elementales.
Son necesarios el equipo y materiales que a continuacin sealaremos en el
presente informe.
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I. MARCO TEORICO
MANEJO DE EQUIPOS Y MATERIALES DE LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA
Para el correcto manejo de equipos y materiales de laboratorio de
microbiologa, es necesario conocer el concepto y el uso de cada uno de ellos.
EQUIPOS DE LABORATORIO
1. ESTUFA DE SECADO
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se
5. MICROSCOPIO
El microscopio es un instrumento que permite
observar objetos que son demasiado pequeos
para ser vistos a simple vista. El tipo ms comn y
el primero que se invent es el microscopio ptico.
Se trata de un instrumento ptico que contiene
dos o ms lentes que permiten obtener una
imagen aumentada del objeto y que funciona por
refraccin.
TIPOS DE MICROSCOPIOS
Microscopio ptico
Un microscopio
ptico es
un microscopio basado
en lentes pticos.
Tambin se le conoce como microscopio de luz, (que utiliza luz o
"fotones") o microscopio de campo claro.
Microscopio simple
Un microscopio simple es aquel que utiliza una sola lente de
aumento. Es el microscopio ms bsico. El ejemplo ms clsico es
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Microscopio compuesto
Un microscopio compuesto tiene ms de una lente objetivo. Los
microscopios compuestos se utilizan especialmente para examinar objetos
transparentes, o cortados en lminas tan finas que se transparentan. Se
emplea para aumentar o ampliar las imgenes de objetos y organismos
no visibles a simple vista.
Microscopio de fluorescencia
El microscopio de fluorescencia es una variacin del microscopio de luz
ultravioleta en el que los objetos son iluminados por rayos de una
determinada longitud de onda. La imagen observada es el resultado de
la radiacin
electromagntica emitida
por
las molculas que
han
absorbido la excitacin primaria y reemitido una luz con mayor longitud
de onda.
Microscopio petrogrfico
El microscopio
petrogrfico, microscopio
polarizador o de
luz
polarizada es un microscopio ptico al que se le han aadido dos
polarizadores (uno entre el condensador y la muestra y el otro entre
la muestra y el observador).
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Microscopio confocal
El microscopio confocal es un microscopio que emplea una tcnica
ptica de imagen para incrementar el contraste y/o reconstruir
imgenes tridimensionales utilizando un "pinhole" espacial
(colimador de orificio delimitante) para eliminar la luz desenfocada
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Microscopio electrnico
Un microscopio electrnico es aqul que utiliza electrones en lugar
de fotones o luz visible para formar imgenes de objetos diminutos.
Los microscopios electrnicos permiten alcanzar ampliaciones hasta
5000 veces ms potentes que los mejores microscopios pticos,
debido a que la longitud de onda de los electrones es mucho menor
que la de los fotones "visibles".
6. AUTOCLAVE
Una autoclave es un recipiente de presin metlico
de paredes gruesas con un cierre hermtico que
permite trabajar a alta presin para realizar una
reaccin industrial, una coccin o una esterilizacin
con vapor de agua. Su construccin debe ser tal que
resista la presin y temperatura desarrollada en su
interior. La presin elevada permite que el agua
alcance temperaturas superiores a su punto de
ebullicin. La accin conjunta de la temperatura y el
vapor produce la coagulacin de las protenas de los
microorganismos, entre ellas las esenciales para la
vida y la reproduccin de stos, cosa que lleva a su
destruccin.
Se utiliza como mtodo de esterilizacin denominada esterilizacin
fraccionada o tindalizacin, se emplea con frecuencia para esterilizar
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MATERIALES DE LABORATORIO
1. PLACA PETRI
Es un recipiente de cristal o de plstico, que
consta de una base circular, y las paredes son
de una altura baja aproximadamente de (1 cm);
y una cubierta de la misma forma pero algo
ms grande de dimetro para que encaje como
una tapa.
Se utiliza en los laboratorios principalmente
para
el
cultivo
de
bacterias
o
microorganismo, solindose cubrir el fondo con distintos medios de
cultivo.
2. MECHERO BUNSEN
Es una pieza en el laboratorio que sirve para
calentar sustancias, proporcionando una
llama caliente, constante y sin humo. En el
laboratorio de microbiologa sirve para
esterilizar aparatos en el cultivo de bacterias.
Para mantenerlos en
condiciones de
esterilidad debemos de trabajar en campana
de flujo laminar o en a proximidad de la llama
de un mechero de bunsen para mantener un
ambiente estril ya que cuando manejamos
cualquier tipo de muestra debemos evitar
que microorganismos ajenos a nuestros
cultivos y presentes en el ambiente se introduzcan en ellos
contaminndolos, o que los microorganismos de la muestra nos
contaminen a nosotros.
3. MEDIOS DE CULTIVO
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carbono que representa alrededor del 50% del peso seco, oxgeno (32%),
nitrgeno (14%), fsforo (3%), azufre (en torno al 1%) y otros elementos
traza entre los que se encuentran Fe, K, Mg, Mn, Co, Mb, Cu y Zn.
La elaboracin de medios de cultivo requiere proporcionar los elementos
antes citados en una forma asimilable. As, por ejemplo, el C debe estar
en forma de carbono orgnico para los hetertrofos y como CO 2 para los
auttrofos, el N en forma de amonio, de nitrato o de nitrito o en forma de
aminocidos a los que se pueda tomar su grupo amino; el P debe estar en
forma de fosfato, el S procede de aminocidos sulfurados o de sulfatos,
etc.
Adems, en ciertos casos, es necesario aadir a los medios de cultivo
algunos aminocidos o vitaminas que determinados tipos de
microorganismos no pueden sintetizar.
En el caso de la levadura del pan (Saccharomyces cerevisiae) la frmula
elemental ms concreta es:
4. ASAS DE SIEMBRA
El asa bacteriolgica es un instrumento de laboratorio tipo
pinza, es empleada para transportar inculos (pequeo
volumen que contiene microorganismos en suspensin)
desde la solucin de trabajo al medio de cultivo.
Est formada por una base que puede estar hecha de
platino, acero, aluminio y un filamento que puede ser de
nicromo, tungsteno o platino que termina o en aro o en
punta.
5. DESINFECTANTES
Desinfectantes qumicos: Las frmulas de los
productos desinfectantes presentan
grandes
diferencias. Es esencial, por lo tanto, que las
diluciones se hagan de acuerdo con lo
recomendado por los fabricantes.
Hipoclorito de sodio: Es un agente qumico
barato y fcil de adquirir, mata bacterias y virus.
Tiene dos inconvenientes importantes: se deteriora
y es corrosivo
Cloramina: Es ms estable que el hipoclorito de sodio. Sin embargo,
debe protegerse de la humedad, la luz y el calor excesivo. Puede
obtenerse en forma de polvo o de tabletas.
6. BALANAZA ANALITICA
La balanza analtica es uno de los instrumentos de medida ms
usados en laboratorio y de la cual dependen bsicamente todos los
resultados analticos. Las balanzas analticas modernas, que
pueden ofrecer valores de precisin de lectura de 0,1 g a 0,1 mg,
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Localizacin de la balanza
La precisin y la confianza de las medidas del peso estn
directamente relacionadas a la localizacin de la balanza analtica.
Los principales puntos que deben de ser considerados para su
correcta posicin son:
Caractersticas de la sala de medida
Tener apenas una entrada.
Condiciones ambientales
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Cuidados Operacionales
Cuidados bsicos
Verificar siempre la nivelacin de la balanza.
El frasco de medida
Usar siempre el menor frasco de medida posible.
El plato de medida
Poner el frasco siempre en el centro del plato de medida.
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La lectura
Verificar si el mostrador indica exactamente cero al empezar la
operacin. Tare la balanza, si es necesario.
Calibracin
Calibrar la balanza regularmente, ms todava cuando est siendo
operada por vez primera, si fu cambiada de sitio, despus de
cualquier nivelacin y despus de grandes variaciones de
temperatura o de presin atmosfrica.
Mantenimiento
Mantener siempre la cmara de medida y el plato limpios.
III. CONCLUSIONES
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IV. ANEXOS.
DESINFECCIN DEL REA DE TRABAJO
La limpieza y la desinfeccin son procedimientos de gran
importancia, ya que permiten controlar la presencia de
microorganismos sobre las superficies.
La limpieza se define como el proceso de remover fsicamente el
sucio, el polvo, la grasa, y otros contaminantes de las superficies,
equipos, reas, etc. Para ello generalmente se utilizan detergentes
que eliminan el tipo de sustancia presente y que no daan la
superficie a tratar.
La desinfeccin es un proceso que implica la destruccin de
microorganismos perjudiciales (formas vegetativas), a travs del uso
de sustancias qumicas o agentes fsicos aplicados sobre superficies
inertes. Entre los desinfectantes ms utilizados podemos citar los
alcoholes, los compuestos de amonio cuaternario, y los compuestos
clorados, etc.
La limpieza debe ser un paso previo a la desinfeccin ya que con
este proceso, adems de eliminar muchas sustancias que pueden
servir como nutrientes para los microorganismos, se eliminan
sustancias que pueden impedir que las soluciones desinfectantes
acten eficientemente. Es importante seleccionar productos que
aseguren una correcta desinfeccin, por cual deben responder a lo
siguiente:
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