OVULACIN

BRUCE D. MURPHY
Centro de Investigacin en Reproduccin Animal,
Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad de Montreal,
St-Hyacinthe Qc Canada J3N1M2
Tomado de: Memorias IX Simposio Internacional de Reproduccin Animal
IRAC 9,10 y 11 de Septiembre de 2011.

Abstract
La ovulacin es el nombre dado a la suma de eventos intrafoliculares que dan
lugar a la extrusin de un ovocito viable desde el folculo ovrico. En los
folculos que han adquirido un tamao y madurez suficiente, la ovulacin es
provocada por la hormona luteinizante, actuando a travs de su receptor y
mltiples vas de sealizacin intracelular. Los primeros eventos incluyen la
induccin de diferenciacin terminal de clulas del folculo y la expresin del
receptor de progesterona que, a su vez, induce la activacin de mltiples vas.
En uno de estos, la progesterona induce la sntesis de prostaglandina que
luego induce la expansin del cumulus oophorus. La consecuencia, es la
ruptura de las proyecciones trans-zonal y la comunicacin entre el cumulus y el
ovocito, permitiendo la reanudacin de la meiosis. Esto es seguido por la
ruptura del folculo y la liberacin del vulo. La coordinacin de esta secuencia,
es necesaria para la ovulacin oportuna, la cual, en s misma, es esencial para
la reproduccin.

Introduccin
Con excepciones de pocas especies y en condiciones patolgicas, la
fertilizacin en mamferos se lleva a cabo en el oviducto. Los espermatozoides,
son depositados en la vagina, migrando a travs del cuerpo y cuernos del
tero, donde encuentran al ovocito. La salida del ovocito desde su lugar de
desarrollo, el folculo, es un complejo de coordinacin de la progresin
neuroendcrina, la pituitaria y procesos ovricos. Dos tipos de ovulacin son
reconocidas, segn las seales externas y endcrinas por las cuales estas son
provocadas. La primera de ellas, la ovulacin espontnea, es la forma ms
comn, que se encuentra en los primates, en la
mayora de los rumiantes domsticos y en muchos
roedores. Esto se basa en el ciclo ovrico, en las
ltimas etapas del desarrollo folicular se producen
estrgenos que actan en regiones del sistema
nervioso central, en particular, en el hipotlamo,
provocando el pico preovulatorio de la hormona
luteinizante

(LH)

[1].

Para

garantizar

que

el

apareamiento y la ovulacin ocurran dentro de un

marco de tiempo, para lograr la fertilizacin, los
estrgenos secretados por el folculo tambin inducen
al estro y el comportamiento de apareamiento en
muchas especies, por lo tanto la copula y la ovulacin, estn temporalmente
relacionados. Los primates son la excepcin, donde el apareamiento puede
ocurrir en cualquier da durante el ciclo estral. El segundo modo es la ovulacin
inducida, donde el acto de la copula induce la ovulacin. Este tipo de ovulacin
es muy extendido entre los mamferos, pero particularmente presente en
lagomorfos, roedores y carnvoros, y algo sorprendente entre los rumiantes, en
los camlidos. El mecanismo vara, pero en la mayora de las especies, la
estimulacin del cuello uterino proporciona entradas neuronales con el
hipotlamo, induciendo la liberacin de LH [2]. En los camlidos, nuevos
estudios

han

demostrado

que

un

componente

en

el

semen ahora conocido como factor inductor de la ovulacin

(ovulation inducing factor; OIF) induce la ovulacin, actuando
actuando en el hipotlamo, la pituitaria o ambos [3,4].

SEALES OVRICAS Y OVULACIN

Durante la culminacin del desarrollo del folculo, las clulas de la granulosa
adquieren, bajo la influencia de los estrgenos, receptores de membrana para
la LH [5]. La interaccin de la LH con estos receptores, provoca la activacin de
mltiples vas intracelulares, con el ms conocido e importante que es el AMPc,
la cascada de la protena quinasa-A [6]. En este sistema, el segundo
mensajero, AMPc, fosforila la protena quinasa-A, que, a su vez activa varias
protenas blanco por fosforilacin. Otros sistemas de sealizacin intracelular
que son activados son el mitgeno activado de la protein-quinasa y la va de la
protein-quinasa B [7].

EXPANSIN DEL CUMULUS OOPHORUS

La secuencia de eventos dentro del folculo provocada por la sealizacin de la
LH en las clulas de la granulosa es compleja. Una primera respuesta, es una
onda de proliferacin de las clulas de la granulosa y la rpida expansin del
folculo [8]. La capa compacta del muro de las clulas de la granulosa, se
expande, y las conexiones intracelulares que hacan un sincitio funcional se
cortan [9].

A las pocas horas, dependiendo de la especie, las clulas del cumulus

oophorus se desprenden del ovocito y entre ellas [10]. Una de las
consecuencias de esta disociacin es la liberacin del ovocito a la detencin
meitica (vase ms adelante). Nuevos estudios, han demostrado la
importancia de los mecanismos de las seales intracelulares en la induccin de
estos eventos. De particular importancia, es la induccin de la sntesis de
progesterona y la consecuente aparicin de la familia de ligandos del factor de
crecimiento epidrmico (EGF), incluyendo la anfiregulina, betacelulina y
epirregulina, que interactan con el receptor de EGF (ERBB1)[11]. La
respuesta a esta interaccin, es la induccin de la sntesis de prostaglandinas
locales. El acontecimiento ms importante es la aparicin de la expresin de la
forma inducible de la sintetasa de prostaglandina (PTGS2), tambin conocida
como la ciclo-oxigenasa-2 [12]. La inhibicin farmacolgica de la secrecin de
PTGS2, impiden la expansin del cumulus y prohbe la ovulacin [13]. Otra
seal importante en el proceso de la ovulacin, es la secrecin de progesterona
local, que interacta con el receptor de progesterona, el cual se expresa
brevemente durante la siguiente seal de LH, antes de la expansin del
cumulus (revisado por [7]). En su ausencia, el cumulus no se expande y parece
que la seal es necesaria para la ruptura del folculo, pero los mecanismos de
activacin de la progesterona no son bien conocidos [14].

Recientemente, se han hecho avances considerables en la comprensin de la

expansin del cumulus, y datos ms recientes apuntan a un papel tanto de las
clulas del cumulus, como del ovocito por si solo [15]. El evento ms
importante, como lo describe la revisin de Edsen et al. [7] es la sntesis de
hialuronato, la molcula que constituye la columna vertebral de la matriz de
glicoprotenas. Otras protenas, incluyendo TNFa inducida por la protena-6 y
pentraxina-3, en combinacin con la condroitina sulfatos presentes en la matriz,
y la inter-alfa-inhibidor de la tripsina de la circulacin, estabilizan la matriz [16].
La matriz estabilizada, atrae agua que luego provoca hinchazn, y esto separa
las clulas del cumulus oophorus de los ovocitos.

REANUDACIN DE LA MEIOSIS EN EL OVOCITO

El otro gran cambio que acompaa al proceso de la
ovulacin se produce en el ovocito. Es bien sabido,
que las ovogonias en el ovario que sobreviven para
formar los folculos, se detienen en la etapa de
diploides en la profase de la primera divisin meitica.
En la vaca, los folculos primordiales, con los ovocitos
con arresto meitico, comienzan a formarse en el
ovario fetal alrededor del da 75 de gestacin [17]. El
ovocito persiste en el arresto meitico a travs de la
vida til del folculo, por un periodo variable tan largo
como el de un folculo primordial, despus de los 60
das +/- de trayectoria hasta el estado periovulatorio [18]. Esto no quiere decir
que el ovocito no sufre ningn cambio durante su vida til, es bien sabido que
el ovocito se expande y adquiere la competencia para ser fecundado en el
antro donde el folculo se forma y crece [19]. Se conoce hace varios aos, que
los ovocitos liberados del folculo y colocados rpidamente en cultivo reinician
la meiosis, lo que ha dado lugar a numerosos estudios que han demostrado
que el ovocito se mantiene en la profase debido a la interaccin con las clulas
del cumulus oophorus [20]. Esto adopta la forma del contacto
directo.

Las clulas del cumulus estn conectadas por uniones gap y funcionan como
un sincitio que produce un mensaje intracelular, AMPc. Esta pequea molcula,
es trasmitida hacia los ovocitos a travs de proyecciones citoplasmticas de las
clulas del interior del cumulus, la corona radiata, y es responsable de prevenir
la maduracin adicional de los ovocitos. Estos procesos citoplasmticos,
conocidos como proyecciones trans-zonales, estn en contacto con la
membrana plasmtica del ovocito, tambin conocida como oolema. La ruptura
de las conexiones intracelulares que es causada por la expansin del cumulus
interrumpe la transferencia de AMPc, lo que permite la progresin de la meiosis
[20].
Los acontecimientos de la reactivacin de los ovocitos se muestran en la Figura
3. El primer paso, morfolgicamente reconocible, en la progresin meitica tras
la fuga de la detencin del desarrollo, es la disolucin de la membrana nuclear,
ms conocida como la vescula germinal [21]. Se produce la progresin a
travs de la primera divisin meitica, seguida de una citocinesis asimtrica,
que se traduce en la expulsin del primer cuerpo polar [22]. Los ovocitos
restantes, luego progresan a la metafase de la segunda divisin meitica donde
se detiene hasta que se produce la fecundacin [23]. En la mayora de las
especies de mamferos, incluyendo los ungulados, es en la metafase de la
meiosis II que el vulo es liberado del ovario por la ruptura del folculo.

RUPTURA DEL FOLCULO

El evento del que menos sabemos, es la ruptura del folculo, probablemente el
ms importante para la entrega de los ovocitos para el oviducto. Numerosas
teoras, incluyendo aumento de la presin folicular, se han formulado y
consecuentemente refutado. Lo que se sabe, es que la remodelacin de la
matriz extracelular y la protelisis focal, debilitan una regin especfica en la
superficie del ovario, en la pared del folculo, hasta el punto de ruptura. Como
se sealo anteriormente, la sealizacin de progesterona es esencial para este
proceso [14]. Al parecer, para provocar una cascada de expresin de las
proteasas que actan para remodelar varias protenas estructurales
en la pared del folculo, como el colgeno, versican

y varias lamininas [24]. Las enzimas proteolticas ms conocidas que

participan en este proceso son: ADAMTS-1, la catepsina L, as como otras
metaloproteinasas matrices, pero no solo la proteasa se ha visto como la nica
mediadora de este proceso [25]. Se ha demostrado, que la expresin de
ADAMTS-1 es inducida despus de la seal de LH y que la mayora de los
ratones que carecen del gen ADAMTS-1 no ovulan [26], pero ocurre la
ovulacin en algunos animales argumentado, por la redundancia entre las
metaloproteinasas, en la induccin de la ruptura del folculo.

SINCRONIZACIN DE LA OVULACIN
El xito reproductivo en todos los mamferos,
incluidos

los

rumiantes,

depende

de

la

coordinacin de una serie de eventos. Es evidente,

que en el caso de la ovulacin, tiene una
importancia

elevada

para

el

xito

de

la

reproduccin, porque este proceso por el cual el

ovocito es liberado desde el ovario para tomar su
camino

hacia

el

oviducto,

donde

ocurre

la

fecundacin. El tiempo requerido de cualquiera de

los picos de LH natural o inducido a provocar la
ovulacin, es variable en la vaca, pero en general
es del orden de 28 h [12, 27]. Gran parte de la
poblacin bovina, ms aun la poblacin de vacas
lecheras, intentan ser preadas por medio de inseminacin artificial (IA) con
semen criopreservado. El proceso de congelado y descongelado reduce en
gran medida la vida til de la fecundacin de los espermatozoides en el tracto
reproductivo, debido a una mayor tasa de capacitacin [28]. Por lo tanto, el
momento de la inseminacin con respecto a la ovulacin tiene un impacto
significativo en el xito del procedimiento, y el esfuerzo de la investigacin se
ha centrado en la sincronizacin de la ovulacin para la IA.

Estudios recientes, han demostrado que existe un tamao ptimo para un

folculo en la ovulacin, basado en una investigacin bastante extensa del
tamao folicular y la preez en ganado vacuno. Perry et al. [29] inform que
folculos ovulando con un dimetro menor a 10,7 mm o mayor a 15,7 mm eran
menos propensos a producir gestaciones viables en comparacin con folculos
dentro de ese rengo. El trabajo se repite en una amplia muestra de Nelore y
Nelore/Angus donde se demostr una reduccin de la preez cuando los
dimetros del folculo de 11 mm o menos en comparacin a los folculos de
mayor dimetro [30]. Heterogeneidad en el tamao de los folculos, dentro de
una sola ovulacin en cerdas, ha sido reportado, y los embriones de los
folculos ms pequeos pueden dar lugar a ovocitos con menor fertilidad [31],
aunque esto es dependiente de la raza [32].Los mecanismos por los que el
tamao del folculo, consecuentemente, influencia en la supervivencia del
embrin/feto no se conocen, pero lo ms obvio, es que la integridad de los
ovocitos puede verse comprometida en los folculos que son demasiado
grandes o demasiado pequeos [33]. Una explicacin alternativa es que el
cuerpo lteo derivado de un folculo pequeo, es de alguna manera menos
capaz de proporcionar el apoyo hormonal que es fundamental para la gestacin
temprana. Los resultados no obstante, sealan la importancia de la ovulacin
adecuadamente programada en el xito reproductivo.

Referencias
1. Duggavathi R, Murphy BD. Development. Ovulation signals. Science 2009; 324: 890-891.
2. Katsuki S, Mizuta M. Experimental studies on the hypothalamic control of the female gonadal
function. I. Ovulation induced by electrical stimulation of the hypothalamus in rabbits. Endocr J
1958; 5: 185-191.
3. Ratto MH, Delbaere LT, Leduc YA, Pierson RA, Adams GP. Biochemical isolation and
purification of ovulation-inducing factor (OIF) in seminal plasma of llamas. Reprod Biol
Endocrinol; 9: 24.
4. Adams GP, Ratto MH, Huanca W, Singh J. Ovulation-inducing factor in the seminal plasma of
alpacas and llamas. Biol Reprod 2005; 73: 452-457.
5. Ireland JJ, Richards JS. Acute effects of estradiol and follicle-stimulating hormone on specific
binding of human [125I]iodofollicle-stimulating hormone to rat ovarian granulosa cells in vivo
and in vitro. Endocrinology 1978; 102: 876-883.

6. Conti M. Specificity of the cyclic adenosine 3',5'-monophosphate signal in granulosa cell

function. Biol Reprod 2002; 67: 1653-1661.
7. Edson MA, Nagaraja AK, Matzuk MM. The mammalian ovary from genesis to revelation.
Endocr Rev 2009; 30: 624-712.
8. Murphy BD, Gevry N, Ruiz-Cortes T, Cote F, Downey BR, Sirois J. Formation and early
development of the corpus luteum in pigs. Reprod Suppl 2001; 58: 47-63.
9. Campbell KL, Albertini DF. Freeze-fracture analysis of gap junction disruption in rat ovarian
granulosa cells. Tissue Cell 1981; 13: 651-668.
10. Binelli M, Murphy BD. Coordinated regulation of follicle development by germ and somatic
cells. Reprod Fertil Dev; 22: 1-12.
11. Conti M. Signaling networks in somatic cells and oocytes activated during ovulation. Ann
Endocrinol (Paris); 71: 189-190.
12. Sirois J, Sayasith K, Brown KA, Stock AE, Bouchard N, Dore M. Cyclooxygenase-2 and its
role in ovulation: a 2004 account. Hum Reprod Update 2004; 10: 373-385.
13. Jimenez LM, Binelli M, Bertolin K, Pelletier RM, Murphy BD. Scavenger receptor-B1 and
luteal function in mice. J Lipid Res; 51: 2362-2371.
14. Conneely OM. Progesterone receptors and ovulation. Handb Exp Pharmacol: 37-44.
15. Buccione R, Vanderhyden BC, Caron PJ, Eppig JJ. FSH-induced expansion of the mouse
cumulus oophorus in vitro is dependent upon a specific factor(s) secreted by the oocyte. Dev
Biol 1990; 138: 16-25.
16. Ievoli E, Lindstedt R, Inforzato A, Camaioni A, Palone F, Day AJ, Mantovani A, Salvatori G,
Salustri A. Implication of the oligomeric state of the N-terminal PTX3 domain in cumulus matrix
assembly. Matrix Biol.
17. Yang MY, Fortune JE. The capacity of primordial follicles in fetal bovine ovaries to initiate
growth in vitro develops during mid-gestation and is associated with meiotic arrest of oocytes.
Biol Reprod 2008; 78: 1153-1161.
18. Rodgers RJ, Irving-Rodgers HF. Morphological classification of bovine ovarian follicles.
Reproduction; 139: 309-318.
19. Fair T. Follicular oocyte growth and acquisition of developmental competence. Anim Reprod
Sci 2003; 78: 203-216.
20. Liang CG, Su YQ, Fan HY, Schatten H, Sun QY. Mechanisms regulating oocyte meiotic
resumption: roles of mitogen-activated protein kinase. Mol Endocrinol 2007; 21: 2037-2055.
21. Sun QY, Miao YL, Schatten H. Towards a new understanding on the regulation of
mammalian oocyte meiosis resumption. Cell Cycle 2009; 8: 2741-2747.
22. Pfender S, Kuznetsov V, Pleiser S, Kerkhoff E, Schuh M. Spire-type actin nucleators
cooperate with formin-2 to drive asymmetric oocyte division. Curr Biol; 21: 955-960.
23. Solc P, Schultz RM, Motlik J. Prophase I arrest and progression to metaphase I in mouse
oocytes: comparison of resumption of meiosis and recovery from G2-arrest in somatic cells. Mol
Hum Reprod; 16: 654-664.
24. Irving-Rodgers HF, Catanzariti KD, Aspden WJ, D'Occhio MJ, Rodgers RJ. Remodeling of
extracellular matrix at ovulation of the bovine ovarian follicle. Mol Reprod Dev 2006; 73: 12921302.
25. Robker RL, Russell DL, Espey LL, Lydon JP, O'Malley BW, Richards JS. Progesteroneregulated genes in the ovulation process: ADAMTS-1 and cathepsin L proteases. Proc Natl
Acad Sci U S A 2000; 97: 4689-4694.
26. Brown HM, Dunning KR, Robker RL, Boerboom D, Pritchard M, Lane M, Russell DL.
ADAMTS1 cleavage of versican mediates essential structural remodeling of the ovarian follicle
and cumulus-oocyte matrix during ovulation in mice. Biol Reprod; 83: 549-557.

27. Fisher AD, Morton R, Dempsey JM, Henshall JM, Hill JR. Evaluation of a new approach for
the estimation of the time of the LH surge in dairy cows using vaginal temperature and
electrodeless conductivity measurements. Theriogenology 2008; 70: 1065-1074.
28. Curry MR. Cryopreservation of semen from domestic livestock. Rev Reprod 2000; 5: 46-52.
29. Perry GA, Smith MF, Roberts AJ, MacNeil MD, Geary TW. Relationship between size of the
ovulatory follicle and pregnancy success in beef heifers. J Anim Sci 2007; 85: 684-689.
30. Sa Filho MF, Crespilho AM, Santos JE, Perry GA, Baruselli PS. Ovarian follicle diameter at
timed insemination and estrous response influence likelihood of ovulation and pregnancy after
estrous synchronization with progesterone or progestin-based protocols in suckled Bos indicus
cows. Anim Reprod Sci; 120: 23-30.
31. Xu X, Faillace LS, Harding RT, Foxcroft GR, Hunter MG. Evidence that Meishan and largewhite hybrid preovulatory follicles may differentially affect oocyte in vitro maturation and
fertilization. Anim Reprod Sci 1998; 51: 307-319.
32. Biggs C, Tilton JE, Craigon J, Foxcroft GR, Ashworth CJ, Hunter MG. Comparison of
follicular heterogeneity and ovarian characteristics in Meishan and large-white hybrid pigs. J
Reprod Fertil 1993; 97: 263-269.
33. Fair T. Mammalian oocyte development: checkpoints for competence. Reprod Fertil Dev;
22: 13-20.