Calculos para La Validacion de Aguas noPW PDF

ESCUELA POLITCNICA NACIONAL
FACULTAD DE INGENIERA QUMICA Y

AGROINDUSTRIA
IMPLEMENTACIN DE UN SISTEMA DE VALIDACIN DE

MTODOS FSICO-QUMICOS PARA ANLISIS DE: ALCALINIDAD
TOTAL, CONDUCTIVIDAD, DBO5 Y SLIDOS TOTALES
DISUELTOS EN MUESTRAS DE AGUA
PROYECTO PREVIO A LA OBTENCIN DEL TTULO DE INGENIERA

QUMICA
MARA FERNANDA VALAREZO BASTIDAS

mafer_1462@hotmail.com
DIRECTOR: ING. LUIS JARAMILLO

luis.jaramillo@.epn.edu.ec
Quito, Noviembre 2009
Escuela Politcnica Nacional 2009

Reservados todos los derechos de reproduccin
DECLARACIN
Yo, Mara Fernanda Valarezo Bastidas, declaro que el trabajo aqu descrito es de
mi autora; que no ha sido previamente presentado para ningn grado o
calificacin profesional; y, que he consultado las referencias bibliogrficas que se
incluyen en este documento.
La
Escuela
Politcnica
Nacional
puede
hacer
uso
de
los
derechos
correspondientes a este trabajo, segn lo establecido por la Ley de Propiedad

Intelectual, por su Reglamento y por la normativa institucional vigente.
-------------------------------------------Mara Fernanda Valarezo Bastidas
CERTIFICACIN
Certifico que el presente trabajo fue desarrollado por Mara Fernanda Valarezo
Bastidas, bajo mi supervisin.
----------------------------------------Ing. Luis Jaramillo

DIRECTOR DEL PROYECTO
DEDICATORIA
A mis padres, Julio y Gladys, por el apoyo, la confianza y el amor que siempre
me han brindado, a quienes les debo todo lo que soy.
A mis hermanos, Pavel, Alexandra y Roberto por su cario y su amistad, por
compartir juntos los buenos y malos momentos.
A mis sobrinos Fabia Valentina, Paulo Issac, y aquellos que vienen en camino,
por llenar mi vida de felicidad.
A mis amigas de la infancia Angy, Diana y Tati que a pesar de la distancia
siempre me han brindado su amistad incondicional.
A mi ojitos precisos, Csar Maldonado, por su apoyo y tolerancia durante este
ao. TA.
AGRADECIMIENTOS
A mi Papito Dios, porque L es mi gua, mi fuerza y mi nica verdad.
Al Ing. Luis Jaramillo, la Ing. Carola Fierro y al Quim. Csar Yambay quienes
fueron las personas que me apoyaron durante el desarrollo de esta investigacin,
gracias por brindarme sus conocimientos, experiencias y sobre todo gracias por
brindarme su amistad.
A todo el personal del Centro de Investigaciones y Control Ambiental, por su
desinteresada colaboracin.
A mis amigas que siempre estuvieron presentes en los buenos y malos
momentos, compartiendo las alegras y las dificultades que fueron parte de este
aprendizaje, especialmente a Naty, Cris, Verito C., Gaby P., Verito A., Gaby L.,
Verito T., Majito, Jessy y Moni , a mis amigos Santy, Maurito, Luis y Gabriel.
NDICE DE CONTENIDO
RESUMEN ........................................................................................................................ xvi
INTRODUCCIN .......................................................................................................... xviii
ABREVIATURAS ............................................................................................................. xx
GLOSARIO...................................................................................................................... xxii
1
REVISIN BIBLIOGRFICA ................................................................................. 1

1.1
Sistema de Gestin de la Calidad ............................................................................ 1
1.1.1 Calidad ............................................................................................................... 1

1.1.1.1 Antecedentes Histricos de la Normalizacin .......................................... 2
1.1.1.2 Norma ISO 9000:2005 .............................................................................. 3
1.1.2 Calidacin .......................................................................................................... 4
1.1.2.1 Definicin .................................................................................................. 4
1.1.2.2 Parmetros de Validacin ......................................................................... 5
1.1.2.3 Contraste de significacin ....................................................................... 15
1.1.2.4 Datos anmalos ....................................................................................... 28
1.1.2.5 Grficos de Control ................................................................................. 30
1.1.3 Incertidumbre................................................................................................... 36
1.1.3.1 Definicin ................................................................................................ 36
1.1.3.2 Incertidumbre y otros conceptos relacionados ........................................ 36
1.1.3.3 Clculo de la Incertidumbre de medida................................................... 41
1.1.3.4 Ejemplos de clculo de las diferentes contribuciones a la
incertidumbre en funcin de la informacin disponible
habitualmente. ......................................................................................... 59
1.1.4 Materiales de Referencia Certificados (MRC) ................................................ 61
1.1.4.1 Definicin ................................................................................................ 61
1.1.4.2 Propiedades de los Materiales de Referencia Certificados ..................... 63
1.1.5 Calibracin ...................................................................................................... 64
1.1.5.1 Definicin ................................................................................................ 64
1.1.5.2 Sistema de Calibracin ............................................................................ 65
1.1.6 Trazabilidad ..................................................................................................... 67
1.1.6.1 Definicin ................................................................................................ 67
1.1.6.2 Elementos que conforman la trazabilidad ............................................... 67
1.1.6.3 Trazabilidad en los anlisis qumicos ..................................................... 69
1.1.7
Norma NTE INEN ISO/IEC 17025:2006 ..................................................... 71
ii
METODOLOGA...................................................................................................... 73
2.1
Puesta a punto de los mtodos.............................................................................. 73
2.1.1
Necesidad analtica .......................................................................................... 73
2.1.2
Mtodo ............................................................................................................. 74
2.1.3 Procedimientos de anlisis .............................................................................. 74

2.1.3.1 Pruebas previas........................................................................................ 74
2.1.3.2 Procedimiento del mtodo para la determinacin de la Alcalinidad
Total ........................................................................................................ 76
2.1.3.3 Procedimiento de mtodo para la determinacin de la
Conductividad ......................................................................................... 80
2.1.3.4 Procedimiento para la determinacin de la Demanda Bioqumica de
Oxgeno ................................................................................................... 82
2.1.3.5 Procedimiento para la determinacin de los Slidos Totales
Disueltos .................................................................................................. 92
2.1.4 Instructivo de calibracin de los equipos utilizados ........................................ 94
2.1.4.1 Instructivo de calibracin del Medidor de Conductividad ...................... 95
2.1.5 Preparacin de los objetos de ensayo .............................................................. 97
2.1.5.1 Preparacin de los elementos que se disponen para la validacin .......... 97
2.1.5.2 Preparacin de los equipos utilizados ..................................................... 98
2.2
Sistema de validacin de los mtodos ................................................................... 99
2.2.1
Eleccin de los parmetros de validacin........................................................ 99
2.2.2
Fijacin de objetivos para los parmetros de validacin ................................. 99
2.2.3 Diseo experimental y estadstico ................................................................. 103

2.2.3.1 Diseo experimental y estadstico del mtodo para la determinacin
de la Alcalinidad Total .......................................................................... 104
2.2.3.2 Diseo experimental y estadstico del mtodo para la determinacin
de la Conductividad............................................................................... 105
2.2.3.3 Diseo experimental y estadstico para el mtodo de DBO5 ................ 106
2.2.3.4 Diseo experimental y estadstico para el mtodo de Slidos
Totales Disueltos ................................................................................... 107
2.2.4
3
Ejecucin de los ensayos diseados .............................................................. 108
RESULTADOS Y DISCUSIONES ........................................................................ 109

3.1
Tratamiento estadstico de datos obtenidos ......................................................... 109
3.1.1
Contrastes de significacin realizados en las pruebas previas ...................... 109
iii
3.1.2 Clculo de los parmetros de validacin ....................................................... 110

3.1.2.1 Determinacin de la Veracidad (% de Recuperacin) .......................... 110
3.1.2.2 Determinacin de la Precisin (% CVr y % CVR) ................................ 110
3.1.2.3 Determinacin de la Incertidumbre del Mtodo ................................... 111
3.1.2.4 Determinacin del Lmite de Deteccin ............................................... 144
3.1.2.5 Determinacin del Lmite de Cuantificacin ........................................ 144
3.1.2.6 Determinacin del Intervalo de trabajo ................................................. 144
3.2
Discusin de resultados ....................................................................................... 144
3.2.1 Pruebas previas .............................................................................................. 144

3.2.1.1 Resultados de las pruebas previas realizadas para el mtodo de
alcalinidad total ..................................................................................... 145
DBO5 ..................................................................................................... 149
STD ....................................................................................................... 153
3.2.2 Parmetros de validacin ............................................................................... 156
3.2.2.1 Resultados de los parmetros de validacin obtenidos en el mtodo
de alcalinidad total ................................................................................ 157
3.2.2.2 Resultados de la calibracin del medidor de conductividad ................. 161
de conductividad ................................................................................... 162
de DBO5 ................................................................................................ 164
de STD .................................................................................................. 168
3.3
4
Elaboracin del informe y declaracin del mtodo validado .............................. 170
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES .................................................... 176

4.1
Conclusiones ....................................................................................................... 176
4.2
Recomendaciones ................................................................................................ 184
BIBLIOGRAFA ............................................................................................................. 186

ANEXOS .......................................................................................................................... 190
iv
NDICE DE TABLAS
Tabla 1.1: Ejemplo del ordenamiento de los grupos muestrales ........................................ 23
Tabla 1.2: Expresiones para el clculo del ANOVA de un factor...................................... 24
Tabla 1.3: Valores de para 95,45% ............................................................. 58
Tabla 2.1: Parmetros y objetivos de validacin del mtodo para la determinacin
de la Alcalinidad Total, rango bajo................................................................. 101
de la Alcalinidad Total, rango alto ................................................................. 101
de la Conductividad ........................................................................................ 102
de DBO5 .......................................................................................................... 102
de Slidos Totales Disueltos........................................................................... 103
Tabla 3.1: Valores obtenidos de los estadsticos y en el contraste de
significacin entre el anlisis en un sistema abierto y cerrado para el
mtodo de alcalinidad total .......................................................................... 146

Tabla 3.2: % de Recuperacin obtenidos en la determinacin del nivel bajo de
concentracin para el mtodo de alcalinidad total ....................................... 147

significacin entre el MRC y el MRi para el mtodo de alcalinidad
total ............................................................................................................... 148

concentracin para el mtodo de DBO5 ....................................................... 151
significacin entre el MRC y el MRi para el mtodo de DBO5 ................... 152
Tabla 3.7: Valores obtenidos en la determinacin del tiempo de enfriamiento de

los crisoles para el mtodo de STD .............................................................. 153
concentracin para el mtodo de STD ......................................................... 154
v
significacin entre el MRC y el MRi para el mtodo de STD ..................... 155
Tabla 3.10: Resultados de la veracidad (% de Recuperacin) obtenidos en el

Tabla 3.11: % de Recuperacin obtenidos de una muestra real fortificada en el
Tabla 3.12: Resultados de la precisin (% CVr y %CVR) obtenidos en el mtodo de
alcalinidad total ............................................................................................ 159
Tabla 3.13: Resultados de la incertidumbre expandida obtenidos en el mtodo de
Tabla 3.14: Resultados de la incertidumbre de calibracin de uso obtenidos para el
medidor de conductividad ............................................................................ 161
Tabla 3.15: Resultados del criterio de aceptacin de la incertidumbre de calibracin
de uso obtenidos para el medidor de conductividad .................................... 161
mtodo de conductividad ............................................................................. 162
conductividad ............................................................................................... 163
conductividad ............................................................................................... 164
mtodo de DBO5 .......................................................................................... 165
mtodo de DBO5 .......................................................................................... 165
DBO5 ............................................................................................................ 166
DBO5 ............................................................................................................ 166
Tabla 3.23: Resultados del blanco para la determinacin del lmite de deteccin del
mtodo de DBO5 .......................................................................................... 167
mtodo de STD............................................................................................. 168
vi

mtodo de STD............................................................................................. 168
STD .............................................................................................................. 169
STD .............................................................................................................. 170
Tabla II.1: Material volumtrico ocupado en la estandarizacin de la solucin de
cido sulfrico .............................................................................................. 194
Tabla III.1: Material volumtrico ocupado en la estandarizacin de la solucin de
tiosulfato sdico ........................................................................................... 199
Tabla IV.1: Material volumtrico utilizado en la preparacin de las soluciones
patrn para la validacin del mtodo de la alcalinidad total ........................ 201
patrn para la validacin del mtodo de DBO5 ............................................ 202
Tabla IV.3: Material volumtrico utilizado para tomar el volumen de muestra de
acuerdo a la tcnica de dilucin del mtodo de DBO5 ................................. 203
patrn para la validacin del mtodo de STD .............................................. 204
Tabla VIII.1: Valores experimentales obtenidos en la puesta a punto del mtodo de
alcalinidad total .......................................................................................... 211
Tabla VIII.2: Valores experimentales obtenidos en la determinacin del nivel bajo
de concentracin del mtodo de alcalinidad total ...................................... 212
Tabla VIII.3: Valores experimentales obtenidos en el contraste de significacin del
MRC y MRi del mtodo de alcalinidad total ............................................. 213
Tabla IX.1: Valores experimentales obtenidos en la puesta a punto del mtodo de
DBO5 ............................................................................................................ 214
Tabla IX.2: Valores experimentales obtenidos en la determinacin del nivel bajo de
concentracin del mtodo de DBO5 ............................................................. 215
vii
Tabla IX.3: Valores experimentales obtenidos en el contraste de significacin del

MRC y el MRi del mtodo de DBO5 ........................................................... 216
Tabla X.1: Valores experimentales obtenidos en la determinacin del nivel bajo de
concentracin del mtodo de STD ............................................................... 217
Tabla X.2: Valores experimentales obtenidos en el contraste de significacin del
MRC y el MRi del mtodo de STD.............................................................. 218
Tabla XI.1: Valores obtenidos en la valoracin de las soluciones de cido sulfrico
utilizadas en la validacin del mtodo de alcalinidad total ......................... 220
Tabla XI.2: Valores experimentales obtenidos en el nivel de 5 mgCaCO3/L para la
validacin del mtodo de alcalinidad total .................................................. 221
Tabla XI.3: Valores experimentales obtenidos en el nivel de 25 mgCaCO3/L para
la validacin del mtodo de alcalinidad total............................................... 222
Tabla XI.4: Valores experimentales obtenidos en el nivel de 49,9 mgCaCO3/L para
Tabla XI.8:Valores experimentales obtenidos en la determinacin del % de
Recuperacin de una muestra fortificada para el mtodo de alcalinidad
total rango bajo ............................................................................................ 227
Tabla XI.9:Valores experimentales obtenidos en la determinacin del % de
Recuperacin de una muestra fortificada para el mtodo de alcalinidad
total rango alto ............................................................................................. 228
Tabla XI.10: Clculo de la precisin en el nivel de 5 mgCaCO3/L a partir de los
valores obtenidos del ANOVA de un factor para el mtodo de
viii

Tabla XI.12: Clculo de la precisin en el nivel de 49,9 mgCaCO3/L a partir de los
Tabla XI.16: Valores para el clculo de los coeficientes de sensibilidad para el
Tabla XI.17: Clculo de los coeficientes de sensibilidad para el mtodo de
Tabla XI.18: Clculo de la incertidumbre de la concentracin del cido para el
Tabla XI.19: Clculo de la incertidumbre del volumen del cido, y del
volumen de muestra, para el mtodo de alcalinidad total .................... 238
Tabla XI.20: Clculo de la incertidumbre en la medida de la alcuota,

/ y en la medida del volumen preparado, /
para el mtodo de alcalinidad total .............................................................. 238
Tabla XI.21: Clculo de la incertidumbre del MRC,
!
para el mtodo de
Tabla XI.22: Clculo de la incertidumbre del procedimiento, "#$%&'(')*$ parel
Tabla XI.23: Clculo de la incertidumbre combinada, %,-.- para el mtodo de
ix
Tabla XI.24: Clculo del nmero efectivo de grados de libertad, para el
mtodo de alcalinidad total ...................................................................... 240
Tabla XI.25: Clculo de la Incertidumbre Expandida, / para el mtodo de
alcalinidad total........................................................................................ 240
Tabla XII.1: Valores experimentales obtenidos en la calibracin del medidor de

conductividad ............................................................................................. 241
Tabla XII.2: Datos del medidor de conductividad ........................................................... 241
Tabla XII.3: Clculo de la incertidumbre combinada de calibracin, %01234026
para el medidor de conductividad .............................................................. 241
Tabla XII.4: Clculo del nmero efectivo de grados de libertad, para el
medidor de conductividad .......................................................................... 242
Tabla XII.5: Clculo de la Incertidumbre Expandida de Uso, /78$ para el medidor
de conductividad ........................................................................................ 242
Tabla XIV.1: Valores obtenidos en la valoracin de las soluciones de tiosulfato de

sodio utilizadas en la validacin del mtodo de DBO5 ............................. 248
Tabla XIV.2: Valores experimentales obtenidos en el nivel de 2 mg/L para la
validacin del mtodo de DBO5................................................................ 249
Tabla XIV.5: Valores experimentales obtenidos en la determinacin del % de
Recuperacin de una muestra fortificada para el mtodo de DBO5 ......... 256
Tabla XIV.6: Clculo de la precisin en el nivel de 2 mg/L a partir de los valores
obtenidos del ANOVA de un factor para el mtodo de DBO5 ................. 258
Tabla XIV.9: Valores para el clculo de los coeficientes de sensibilidad para el
mtodo de DBO5 ....................................................................................... 261
Tabla XIV.10: Clculo de los coeficientes de sensibilidad para el mtodo de DBO5 ..... 262
Tabla XIV.11: Clculo de la incertidumbre en la medida de OD, 9: , medida del
volumen de aforo, y en la medida del volumen de
dilucin, <21 para el mtodo de DBO5 .................................................. 263
Tabla XIV.12: Clculo de la incertidumbre en la medida de la alcuota,

<=/ y en la medida del volumen preparado, <=/
para el mtodo de DBO5 ....................................................................... 263
Tabla XIV.13: Clculo de la incertidumbre del factor de la solucin valorante,
para el mtodo de DBO5 ..................................................................... 264
Tabla XIV.14: Clculo de la incertidumbre del MRC,
!
para el mtodo de
DBO5 ....................................................................................................... 264
Tabla XIV.15: Clculo de la incertidumbre del procedimiento, "#$%&'(')*$ para
el mtodo de DBO5 .................................................................................. 265
Tabla XIV.16: Clculo de la incertidumbre combinada, %,-.- del mtodo para el
DBO5 ....................................................................................................... 265
Tabla XIV.17: Clculo del nmero efectivo de grados de libertad, para el
mtodo de DBO5...................................................................................... 265
Tabla XIV.18: Clculo de la Incertidumbre Expandida, / para el mtodo de DBO5 ..... 266
Tabla XIV.19: Clculo de lmite de deteccin a partir de los valores obtenidos del
blanco para el mtodo de DBO5 .............................................................. 266

Tabla XV.1: Valores experimentales obtenidos en el nivel de 50 mg/L para la
validacin del mtodo de STD................................................................... 268
Tabla XV.4: Valores experimentales obtenidos en la determinacin del % de
Recuperacin de una muestra fortificada para el mtodo de STD............. 270
Tabla XV.5: Clculo de la precisin en el nivel de 50 mg/L a partir de los valores
obtenidos del ANOVA de un factor para el mtodo de STD .................... 271
xi
obtenidos del ANOVA de un factor para el mtodo de STD .................... 272
Tabla XV.7: Clculo de la precisin en el nivel de 1000 mg/L a partir de los
valores obtenidos del ANOVA de un factor para el mtodo de STD ........ 273
Tabla XV.8: Valores para el clculo de los coeficientes de sensibilidad para el
mtodo de STD .......................................................................................... 274
Tabla XV.9: Clculo de los coeficientes de sensibilidad para el mtodo de STD ........... 274
Tabla XV.10: Clculo de la incertidumbre en la medida de la alcuota, >?</
y en la medida del volumen preparado, >?</ para el mtodo
de STD ....................................................................................................... 275
Tabla XV.11: Clculo de la incertidumbre en la medida de masa, " y en la medida
del volumen de muestra, para el mtodo de STD............................... 275
Tabla XV.12: Clculo de la incertidumbre del MRC,
!
para el mtodo de STD ...... 275
Tabla XV.13: Clculo de la incertidumbre del procedimiento, "#$%&'(')*$ para
el mtodo de STD ...................................................................................... 276
Tabla XV.14: Clculo de la incertidumbre combinada, %,-.- para el mtodo de
STD ............................................................................................................ 276
Tabla XV.15: Clculo del nmero efectivo de grados de libertad, para el
mtodo de STD .......................................................................................... 276
Tabla XV.16: Clculo de la Incertidumbre Expandida, / para el mtodo de STD ......... 276
xii
NDICE DE FIGURAS
Fig 1.1: Relacin entre los distintos tipos de error y los correspondientes conceptos
cualitativos............................................................................................................... 8
Fig 1.2: Esquema para el anlisis de varianza de un factor ................................................ 22
Fig 1.3: Errores de Tipo I y II ............................................................................................. 27
Fig 1.4: Errores de Tipo I y II al aumentar el tamao de muestra ...................................... 28
Fig 1.5: Lneas de aviso y de control en un grfico de control (parte derecha), y su
relacin con la distribucin de la muestra de control ............................................ 32
Fig 1.6: Cambios en el procedimiento analtico que se pueden detectar con los
grficos de control ................................................................................................. 34
Fig 1.7: Diferencia entre precisin e incertumbre ............................................................... 38
Fig 1.8: Relacin de la incertidumbre con la tolerancia...................................................... 40
Fig 1.9: Caractersticas de la Distribucin Normal ............................................................. 49
Fig 1.10: Caractersticas de la Distribucin Rectangular .................................................... 50
Fig 1.11: Caractersticas de la Distribucin Triangular ...................................................... 51
Fig 1.12: Relacin entre la pirmide metrolgica y diversas referencias utilizadas en
medidas qumicas para verificar la trazabilidad .................................................. 70
Fig 2.1: Curva de titulacin para una mezcla hidrxidos-carbonato .................................. 77
Fig 2.2: Ejemplo de apreciacin para el criterio de medida................................................ 79
Fig 2.3: Equipo de filtracin al vaco .................................................................................. 93
Fig 3.1: Diagrama causa-efecto para identificar las fuentes de incertidumbre del
mtodo para la determinacin de la alcalinidad total ........................................ 112
Fig 3.2: Diagrama causa-efecto para identificar las fuentes de incertidumbre de
calibracin del medidor de conductividad ........................................................ 125
Fig 3.3: Diagrama causa-efecto para identificar las fuentes de incertidumbre para la
determinacin de la conductividad ................................................................... 128
Fig 3.4: Diagrama causa-efecto para identificar las fuentes de incertidumbre de
calibracin del medidor de conductividad ........................................................ 130
xiii
Fig 3.5: Diagrama causa-efecto para identificar las fuentes de incertidumbre del
mtodo para la determinacin de la alcalinidad total ........................................ 140
Fig V.1: Ejemplo de clculo del estadstico ................................................................... 205
Fig VI.1: Ejemplo de clculo del estadstico ................................................................. 207
Fig VII.1: Ejemplo de clculo del ANOVA de un factor ................................................. 209
Fig VII. 2: Ejemplo de clculo del ANOVA de un factor ................................................ 210
Fig VII.3: Ejemplo de clculo del ANOVA de un factor ................................................. 210
xiv
NDICE DE ANEXOS
ANEXO I
VALORACIN DE LA SOLUCIN DE CIDO SULFRICO PARA LA
DETERMINACIN DE LA ALCALINIDAD TOTAL................................................... 191
ANEXO II
MTODO
4500-O
C.
MODIFICACIN
DE
AZIDA
PARA
LA
DETERMINACIN DE OD .......................................................................................... 195

ANEXO III
VALORACIN DE LA SOLUCIN DE TIOSULFATO SDICO PARA LA
DETERMINACIN DEL OD .......................................................................................... 197
ANEXO IV
PREPARACIN DE LAS SOLUCIONES PATRN PARA EL DESARROLLO
DE VALIDACIN DE CADA MTODO ....................................................................... 200
ANEXO V
EJEMPLO DE CLCULO DEL ESTADSTICO @ CON AYUDA DE EXCEL ............ 205

ANEXO VI
EJEMPLO DE CLCULO DEL ESTADSTICO A CON AYUDA DE EXCEL ........... 207

ANEXO VII
EJEMPLO DE CLCULO DEL ANOVA DE UN FACTOR CON AYUDA DE
EXCEL .........................................................................................................................
209
ANEXO XVIII
VALORES EXPERIMENTALES OBTENIDOS EN LAS PRUEBAS PREVIAS
DEL MTODO DE ALCALINIDAD TOTAL ................................................................ 211
xv
ANEXO IX
DEL MTODO DE DBO5 ................................................................................................ 214
ANEXO X
DEL MTODO PARA STD ............................................................................................. 217
ANEXO XI
VALORES OBTENIDOS EN LA VALIDACIN DEL MTODO PARA LA
DETERMINACIN DE LA ALCALINIDAD TOTAL................................................... 219
ANEXO XII
VALORES OBTENIDOS EN LA CALIBRACIN DEL MEDIDOR DE
CONDUCTIVIDAD.......................................................................................................... 241
ANEXO XIII
DETERMINACIN DE LA CONDUCTIVIDAD........................................................... 243
ANEXO XIV
DETERMIANCIN DE DBO5 ......................................................................................... 247
ANEXO XV
VALORES OBTENIDOS EN LA VALIDACN DEL MTODO PARA LA
DETERMINACIN DE STD ........................................................................................... 267
ANEXO XVI
CERTIFICADOS DE CALIBRACIN ............................................................................ 277
xvi
RESUMEN
El presente proyecto forma parte de una serie de acciones que el Centro de
Investigaciones y Control Ambiental (CICAM) de la Escuela Politcnica Nacional,
se encuentra realizando para el mejoramiento de la calidad de sus servicios as
como del incremento en la competitividad del laboratorio. Actualmente mantiene
la acreditacin otorgada por el Organismo de Acreditacin Ecuatoriano (OAE).
El objetivo de la presente investigacin fue establecer metodologas de validacin
fcilmente aplicables, para desarrollar los mtodos APHA: 2320 B. Mtodo de
Titulacin para la determinacin del alcalinidad, 2510 B. Mtodo Potenciomtrico
para la determinacin de la conductividad, 2540 C. Slidos Totales Disueltos
secados a 180C para la determinacin de los STD y 5210 B. Demanda
Bioqumica de Oxgeno por el Mtodo Winkler DBO 5-das, para la determinacin
de DBO5 en el laboratorio del CICAM, basndose en el sistema de gestin de
calidad de la norma NTE INEN ISO/IEC 17025:2006.
Se realizaron pruebas previas para la puesta a punto de los mtodos, la
determinacin del nivel bajo de concentracin y la determinacin de las
diferencias significativas entre el MRC y el MRi para los controles de calidad, con
base
en
los
resultados
obtenidos
de
los
contrastes
de
significancia
respectivamente.
Se establecieron los parmetros y objetivos de validacin para cada uno de los
mtodos, en base a la experiencia del laboratorio, referente a las auditoras
realizadas por la OAE como ente regulador, a sus requerimientos y exigencias,
as como a las necesidades del cliente. Posteriormente se desarroll el diseo
experimental y estadstico de cada mtodo en funcin de los parmetros y
objetivos establecidos.
Finalmente se ejecutaron los ensayos diseados obtenindose los datos
experimentales a partir de los cuales se calcularon los parmetros de validacin y
en funcin del cumplimiento de los objetivos propuestos, definir la aceptacin y
xvii
posterior declaracin de validacin de los mtodos desarrollados en la presente

investigacin.
Los resultados obtenidos en cada mtodo fueron:
Mtodo para la determinacin de la de Alcalinidad Total rango bajo:
%CVR = 0,74% - 3,04%;
%CVr = 0,61% - 3,04%
%U = 1,61% - 8,13%;
% de Recuperacin = 94,81% 104,24%
Mtodo para la determinacin de la Alcalinidad Total rango alto:

%CVR = 0,45% - 1,26%;
%CVr = 0,38% - 1,04%
%U = 1,13% - 3,26%;
% de Recuperacin = 96,08% 98,27%
Mtodo para la determinacin de la Conductividad:

Estndar de 147 S/cm
%CVR = 0,26%;
%CVr = 0,24%
%U = 2,03% ;
% de Recuperacin = 99,37%
Estndar de 12,8 mS/cm

%CVR = 0,20%;
%CVr = 0,19%
%U = 4,44%;
% de Recuperacin = 100,60%
Mtodo para la determinacin de la Demanda Bioqumica de Oxgeno, DBO):

%CVR = 3,12% - 8,44%;
%CVr = 2,90% - 7,90%
%U = 6,16% - 16,16%;
% de Recuperacin = 95,16% 105,91%
Mtodo para la determinacin de los Slidos totales Disueltos:

%CVR = 1,36% - 8,84%;
%CVr = 1,28% - 8,74%
%U = 2,92% - 21,08%;
% de Recuperacin = 99,27% 107,73%
xviii
INTRODUCCIN
Desde hace varias dcadas ha existido una creciente preocupacin por el impacto
de la actividad humana sobre el medio ambiente, en su calidad de receptor de los
residuos de las actividades humanas y de proveedor de los recursos materiales y
energticos requeridos. Gran parte de los esfuerzos actuales de control ambiental
estn destinados a combatir la contaminacin provocada por la accin humana.
La reduccin de emisiones de residuos slidos, lquidos y gaseosos, de origen
industrial, urbano-domstico y agrcola, representan uno de los pilares
fundamentales de la normativa ambiental. En este sentido, los gobiernos han
adoptado medidas de carcter normativo y poltico para minimizar los efectos
negativos y garantizar el cumplimiento de las normas sobre calidad ambiental
(Zaror, 2000).
Es as, como de acuerdo a la Resolucin N003 La Direccin del Distrito
Metropolitana de Medioambiente considerando que: Que el Municipio del Distrito
Metropolitano de Quito tiene como misin proporcionar el mejoramiento continuo
de la calidad de vida de la comunidad, para lo cual aplicar los principios:
Precaucin, Reduccin en la fuente, Responsabilidad Integral y Quien contamina
paga. As tambin, considerando que: El Municipio del Distrito Metropolitano de
Quito, como integrante del Sistema Nacional Descentralizado de Gestin
Ambiental (SNDGA),
con
competencia en
prevencin
y control de
la
contaminacin ambiental, debe disponer de los sistemas de control necesarios

para exigir el cumplimiento del Reglamento a la Ley de Gestin Ambiental y sus
normas tcnicas.
En la mayora de casos, para la obtencin de unos buenos niveles de calidad
dentro de la diversidad de actividades desarrolladas en las empresas es
necesaria la realizacin de medidas sobre el producto. La calidad de estas
medidas depende en gran parte de la calidad global de un laboratorio, ya sea
exterior o interior a la empresa. Consecuentemente, los laboratorios precisan
demostrar que sus mtodos analticos proporcionan resultados fiables y
adecuados para la finalidad o propsito perseguidos, esto permite elaborar
xix
conclusiones para cualquier accin administrativa o legal que se deba tomar por
parte de la organizacin, ya que muchas de las decisionesg que se tomen por
parte de las organizaciones, estn basadas en la informacin que estos
resultados proporcionan (Isol, 2002).
Acorde con esta realidad, el laboratorio del Centro de Investigaciones y Control
Ambiental (CICAM), siendo un laboratorio Acreditado por la Organizacin de
Acreditacin del Ecuador (OAE), y conforme a la norma NTE INEN ISO/IEC
17025:2006 que indica: El laboratorio debe utilizar los mtodos de ensayo o de
calibracin, incluidos los de muestreo, que satisfagan las necesidades del cliente
y que sean apropiados para los ensayos o las calibraciones que realiza, incluye
en sus actividades, la validacin de cuatro de sus mtodos de anlisis para la
determinacin de: Alcalinidad Total, Conductividad, Demanda Bioqumica de
Oxgeno y Slidos Totales disueltos, que son el propsito de la presente
investigacin (NTE INEN ISO/IEC 17025:2006).
xx
ABREVIATURAS
ANOVA
Anlisis de la Varianza
APHA
American Public Health Association
BIPM
Oficina Internacional de Pesas y Medidas
CVr
Coeficiente de varianza por repetibilidad
CVR
Coeficiente de varianza por reproducibilidad
B'
Coeficiente de sensibilidad
CDEG
Diferencias cuadrticas medias dentro del grupo
CDEF
Diferencias cuadrticas medias entre grupos
CDEH
Diferencia cuadrtica total
GUM
Gua para la expresin de la Incertidumbre de Medida
Estadstico de contraste de las varianzas
I$
Hiptesis nula
INEN
Instituto Ecuatoriano de Normalizacin
ISO
Organizacin Internacional de Estandarizacin
INS
Instituto Nacional de Salud
IJ
Hiptesis alternativa
Factor de cobertura
Grupos muestrales
MRC
Material de referencia certificado
MRi
Material de referencia interno
Nmero de magnitudes de entrada
Tamao muestral
OAA
Organismo Argentino de Acreditacin
OAE
Organismo de Acreditacin Ecuatoriana
N

Probabilidad
Nmero de observaciones
OCDF
Diferencias cuadrticas entre grupos
OCDH
Diferencias cuadrticas total
OCDG
PQ
Diferencias cuadrticas dentro del grupo

Desviacin por reproducibilidad
xxi
P#
Desviacin estndar de repetibilidad
P!
Combinacin de la repetibilidad y reproducibilidad
PR
Desviacin estndar
Estadstico de contraste de las medias
S)TU'8*T
Incertidumbre del analista
$##%%')
Incertidumbre estndar de correccin
TU

%,-.
!
"#$%&'(')*$
Incertidumbre estndar de calibracin

Incertidumbre estndar del criterio de medida
Incertidumbre estndar combinada del mtodo
Incertidumbre estndar del material de referencia certificado
Incertidumbre estndar del procedimiento
!8$UX%')
Incertidumbre estndar de resolucin
YZ' [
Incertidumbre estndar
H(#T*X#T
Incertidumbre estndar de temperatura
% Y\[
Incertidumbre estndar combinada
/7]9
Incertidumbre de uso
VIM
Incertidumbre expandida
Vocabulario
Internacional
generales de Metrologa
valor muestral
^'
Magnitud de entrada
Magnitud de salida
Z_
Media muestral
Valor verdadero

Grados efectivos de libertad
'
b
Grados de libertad
Nivel de significacin
de
trminos
fundamentales
xxii
GLOSARIO
Ajuste: Conjunto de operaciones realizadas sobre un sistema de medida para
que proporcione indicaciones prescritas, correspondientes a valores dados de la
magnitud a medir (CEM, 2008).
Cadena de trazabilidad: Sucesin de patrones y calibraciones que relacionan un
resultado de medida con una referencia (CEM, 2008).
Contribuciones a la incertidumbre: Declaracin de una incertidumbre de
medida y las componentes de esa incertidumbre, junto con su clculo y
combinacin (CEM, 2008).
Correccin: Compensacin de un efecto sistemtico estimado (CEM, 2008).
Deriva instrumental: Variacin continua o incremental de una indicacin a lo
largo del tiempo, debida a variaciones de las caractersticas metrolgicas de un
instrumento de medida (CEM, 2008).
Factor de cobertura: Nmero mayor que uno por el que se multiplica una
incertidumbre tpica combinada para obtener una incertidumbre expandida (CEM,
2008).
Factor de conversin entre unidades: Relacin entre dos unidades de medida
correspondientes a magnitudes de la misma naturaleza (CEM, 2008).
Intervalo de cobertura: Intervalo que contiene el conjunto de valores verdaderos
de un mensurando con una probabilidad determinada, basada en la informacin
disponible (CEM, 2008).
Instrumento de medida: Dispositivo utilizado para realizar mediciones, solo o
asociado a uno o varios dispositivos suplementarios (CEM, 2008).
Magnitud: Propiedad de un fenmeno, cuerpo o sustancia, que puede expresarse
cuantitativamente mediante un nmero y una referencia (CEM, 2008).
xxiii
Magnitud de entrada: Magnitud que debe ser medida, o magnitud cuyo valor
puede obtenerse de otra manera, para calcular un valor medido de un
mensurando (CEM, 2008).
Magnitud de influencia: Magnitud que, en una medicin directa, no afecta a la
magnitud que realmente se est midiendo, pero s afecta a la relacin entre la
indicacin y el resultado de medida (CEM, 2008).
Magnitud de salida: Magnitud cuyo valor medido se calcula mediante los valores
de las magnitudes de entrada en un modelo de medicin (CEM, 2008).
Medicin: Proceso que consiste en obtener experimentalmente uno o varios
valores que pueden atribuirse razonablemente a una magnitud (CEM, 2008).
Mensurando: Magnitud que se desea medir (CEM, 2008).
Modelo de medicin: Relacin matemtica entre todas las magnitudes
conocidas que intervienen en una medicin (CEM, 2008).
Principio de medida: Fenmeno que sirve como base de una medicin (CEM,
2008).
Probabilidad de cobertura: Probabilidad de que el conjunto de los valores
verdaderos de un mensurando est contenido en un intervalo de cobertura
especificado (CEM, 2008).
Propiedad cualitativa, cualidad: Propiedad de un fenmeno, cuerpo o sustancia,
que no puede expresarse cuantitativamente (CEM, 2008).
Resolucin: Mnima variacin de la magnitud medida que da lugar a una
variacin perceptible de la indicacin correspondiente. Indicacin: Valor
proporcionado por un instrumento o sistema de medida (CEM, 2008).
Resultado de medida, Resultado de una medicin: Conjunto de valores de una
magnitud atribuidos a un mensurando, acompaados de cualquier otra
informacin relevante disponible (CEM, 2008).
xxiv
Valor de una magnitud: Conjunto formado por un nmero y una referencia, que
constituye la expresin cuantitativa de una magnitud (CEM, 2008).
Verificacin: Aportacin de evidencia objetiva de que un elemento satisface los
requisitos especificados (CEM, 2008).
REVISIN BIBLIOGRFICA
1.1
SISTEMA DE GESTIN DE LA CALIDAD
1.1.1
CALIDAD
La poca actual se caracteriza por grandes cambios, tecnolgicos, econmicos,

industriales y sociales. Estos cambios han introducido a las empresas de bienes y
servicios en un ambiente de gran competencia comercial, creando as una nueva
necesidad llamada calidad (Jaramillo et al., 2006).
La palabra calidad proviene de la etimologa latina qualitas, que significa cualidad,
manera de ser, propiedad de las cosas. A partir de esta raz, muchos autores han
desarrollado y caracterizado este concepto; para algunos la calidad es una
filosofa, otros la definen como una tcnica y algunos ms la asocian a una forma
de vida y de pensamiento (Smano, 2000).
El concepto calidad se ha modificado con el tiempo y con base en el enfoque
desde el cual se analiza y al alcance que se desea, clasificndose
de esta
manera en tres grandes grupos:

-
Calidad como conformidad.- Se asocia a la calidad con el cumplimiento de las

expectativas de normas o especificaciones de diseo bajo las cuales fue
creado.
Calidad como diferenciacin.- En esta definicin el enfoque est puesto en el

producto mismo y en las diferencias que tiene contra otros productos
similares, incluyendo la satisfaccin del cliente como un factor importante.
Calidad como fin.- Esta definicin abarca tanto la fabricacin del producto, su
desarrollo, diseo, manufactura y la satisfaccin del cliente, definiendo como
cliente a todos los individuos involucrados en el diseo, fabricacin y consumo
del producto; enfatizando que la satisfaccin del cliente se logra a travs de
las caractersticas de un producto o servicio y la falta de deficiencias
(Smano, 2000).
Segn la gua ISO 9000 la calidad se define como, Grado en el que un conjunto
de caractersticas inherentes cumple con los requisitos, definiendo a su vez
requisitos como, necesidad o expectativa establecida, generalmente implcita u
obligatoria (ISO 9000:2005).
Sin embargo, la calidad no slo es un concepto terico optimista, de moda o un
ideal a alcanzar, sino un presente, una til herramienta que aplicada a numerosos
procesos de diferentes mbitos, permite mejorar las caractersticas de un
elemento para satisfacer las necesidades explcitas e implcitas. En todos estos
mbitos, la calidad genera una mayor productividad y una mayor participacin en
el mercado, lo cual se traduce en mayores ingresos y mayor rentabilidad para
todas las organizaciones (Smano, 2000).
1.1.1.1
Antecedentes Histricos de la Normalizacin
Desde hace tiempo se ha hecho presente un proceso de globalizacin econmica,

el cual exige a las empresas redefinir sus estrategias y sus procesos, con la
finalidad de lograr un uso eficiente de sus recursos y el aumento de su
productividad, de modo que puedan competir con xito en el mercado actual. Esta
necesidad, dio la pauta a la creacin de diversas normas o certificaciones, que
garanticen a los que adquieren los productos o servicios, que todo se va a hacer
siempre igual o tendr las mismas propiedades y caractersticas (Jaramillo et al.,
2006).
Se entiende por normalizacin, la actividad que tiene por objeto establecer ante
problemas reales o potenciales, disposiciones destinadas a usos comunes y
repetidos con el fin de obtener un nivel de ordenamiento ptimo en un contexto
dado, que puede ser tecnolgico poltico o econmico. As mismo, promueve la
creacin de un idioma tcnico comn a todas las organizaciones y es una
contribucin importante para la libre circulacin de los productos industriales
(Jaramillo et al., 2006).
La Organizacin Internacional para la Normalizacin (ISO), (cuyo nombre
corresponde a sus siglas en ingls, International Organization for Standarization),
tiene sus orgenes en la Federacin Internacional de Asociaciones Nacionales de

Normalizacin (1926-1939). El Comit Coordinador de las Naciones Unidas para
la Normalizacin (UNSCC) actu como organizacin interina para la formacin de
grupos en beneficio de la calidad de 1943 a 1946. En octubre de 1946, en
Londres, se acord por representantes de veinticinco pases el nombre de
Organizacin Internacional para la Normalizacin (Jaramillo et al., 2006).
La ISO, celebra su primera reunin en junio de 1947 en Zurich, Suiza, su sede se
encuentra ubicada en Ginebra. Tiene como finalidad principal, promover el
desarrollo de estndares internacionales y actividades relacionadas, incluyendo la
conformidad de los estatutos para facilitar el intercambio de bienes y servicios en
todo el mundo. Est constituida por delegaciones gubernamentales y no
gubernamentales que representan a ms de 100 pases subdivididos en una serie
de miembros, encargados de desarrollar las guas que contribuirn al
mejoramiento ambiental. (Jaramillo et al., 2006)
1.1.1.2
Norma ISO 9000:2005
Entre las normas publicadas por la ISO, la ms conocida internacionalmente

desde su aparicin en 1987, es la familia de Normas ISO 9000. Es un conjunto de
normas internacionales y guas de calidad, elaboradas para asistir a las
organizaciones, de todo tipo y tamao, en la implementacin y la operacin de
sistemas de gestin de la calidad eficaces (Jaramillo et al., 2006).
La Norma define el sistema de gestin de la calidad como, sistema de gestin
para dirigir y controlar una organizacin con respecto a la calidad. El sistema de
gestin de calidad responde de manera genrica a los procesos necesarios para
el funcionamiento de una organizacin (ISO 9000:2005).
El conjunto de normas que integran la familia ISO 9000 se citan a continuacin:
-
La Norma ISO 9000 describe los fundamentos de los sistemas de gestin de

la calidad y especifica la terminologa para los sistemas de gestin de la
calidad.
La Norma ISO 9001 especifica los requisitos para los sistemas de gestin de
la calidad aplicables a toda organizacin que necesite demostrar su
capacidad para proporcionar productos que cumplan los requisitos de sus
clientes y los reglamentarios que le sean de aplicacin, y su objetivo es
aumentar la satisfaccin del cliente.
La Norma ISO 9004 proporciona directrices que consideran tanto la eficacia

como la eficiencia del sistema de gestin de la calidad. El objetivo de esta
norma es la mejora del desempeo de la organizacin y la satisfaccin de los
clientes y de otras partes interesadas.
La Norma ISO 19011 proporciona orientacin relativa a las auditoras de

sistemas de gestin de la calidad y de gestin ambiental (ISO 9000:2005).
Todas estas normas juntas forman un conjunto coherente de normas de sistemas

de gestin de la calidad que facilitan la mutua comprensin en el comercio
nacional e internacional. El enfoque a travs de un sistema de gestin de la
calidad, puede ayudar a las organizaciones a aumentar la satisfaccin de sus
clientes. Proporciona confianza tanto a la organizacin como a sus clientes, de su
capacidad para proporcionar productos que satisfagan los requisitos de forma
coherente (ISO 9000:2005).
1.1.2
1.1.2.1
VALIDACIN
Definicin
La norma NTE NEN-ISO/IEC 17025:2006 en el literal 5.4.5.1 define, validacin es

la confirmacin, a travs del examen y el aporte de evidencias objetivas, de que
se cumplen los requisitos particulares para un uso especfico previsto (NTE
INEN-ISO/IEC 17025:2006).
En la actualidad, se requieren mtodos analticos fiables para cumplir con las
normativas nacionales e internacionales en todas las reas de anlisis. Es as
como la validacin de mtodos, se convierte en un componente esencial de las
medidas que un laboratorio debe implementar, para obtener resultados
tcnicamente vlidos, exactos y confiables. La realizacin de estas actividades
de validacin de los mtodos de ensayo utilizados por el propio laboratorio,

contemplan la satisfaccin de las necesidades del cliente y la adecuacin para
realizar los ensayos previstos [Castelluci, 2005; OAA, 2003].
1.1.2.2
Parmetros de Validacin
1.1.2.2.1
Selectividad/Especificidad
La selectividad se define como la propiedad de un sistema de medida,

empleando un procedimiento de medida especificado, por la que el sistema
proporciona valores medidos para uno o varios mensurandos, que son
independientes entre s o de otras magnitudes existentes en el fenmeno, cuerpo
o sustancia en estudio. En qumica, la selectividad de un sistema de medida
generalmente se obtiene para magnitudes con componentes seleccionadas en
concentraciones con intervalos determinados. Otra definicin la describe como la
capacidad de un mtodo para cuantificar el analito con precisin en presencia de
interferentes, es decir, la habilidad de un procedimiento analtico para diferenciar
entre varias sustancias presentes en las muestras. Idealmente, la selectividad
debera evaluarse para todos los interferentes importantes susceptibles de estar
presentes. Sin embargo, puede no ser viable considerar o probar cada uno de los
interferentes potenciales; en cuyo caso, se deben comprobar los casos
probablemente peores (Castelluci, 2005; CEM, 2008).
La especificidad es la capacidad de evaluar inequvocamente el analito en
presencia de componentes que se puede esperar que estn presentes, en otras
palabras, sugiere que ningn compuesto excepto el analito contribuye al resultado
de un ensayo. Para demostrar la especificidad de un mtodo existen varias
posibilidades tales como:
-
Agregar el componente que interfiere en cantidades sucesivas y evaluar su

influencia.
Probar un estndar certificado de la matriz con cantidades conocidas del

analito. Si se encuentra el valor correcto, el procedimiento es especfico
(OAA, 2003).
Algunos autores consideran que la selectividad y la especificidad son dos

trminos equivalentes, y se definen como la capacidad de un mtodo para medir
exacta y especficamente el analito, sin interferencias de otras sustancias que
puedan estar en la propia muestra. Salvo en el caso, de estar validando un
mtodo completamente desarrollado por el laboratorio, estos parmetros de
validacin se resuelven bibliogrficamente, ya que lo mtodos seleccionados, de
reconocida
aplicacin,
cuentan
con
informacin
sobre
su
selectividad,
especificidad y las interferencias que se conocen (Muoz, 2001).

1.1.2.2.2
Exactitud / veracidad
El trmino exactitud se utiliz durante cierto tiempo para referirse nicamente a la

componente ahora denominada veracidad, pero como se explica a continuacin,
este trmino debe indicar el desplazamiento total de un resultado con respecto a
su valor de referencia, debido tanto a los efectos aleatorios como a los
sistemticos (Barlandas et al., 2008).
Para conocer el valor de una magnitud se emplea un procedimiento de medicin,
y los resultados que se obtienen son una estimacin del valor del mensurando, tal
estimacin contiene un error de medida. Tradicionalmente, se ha considerado que
el error de medida posee dos componentes; una componente aleatoria y una
componente sistemtica [CEM, 2008; Gonzlez, 2002].
-
El error aleatorio es la componente del error de medida que, en mediciones

repetidas, vara de manera impredecible. El valor de referencia del error
aleatorio, es la media que se obtendra de un nmero infinito de mediciones
repetidas del mismo mensurando. El error aleatorio del resultado de una
medicin no puede ser compensado por el incremento del nmero de
mediciones, pero este puede normalmente ser disminuido por tal incremento. Es
igual a la diferencia entre el error de medida y el error sistemtico [CEM,
2008; Gonzlez, 2002].
El error sistemtico es la componente del error de medida que, en

mediciones repetidas, permanece constante o vara de manera predecible,
es decir, puede ser independiente del valor del mensurando, o puede variar
con el valor del mismo. El valor de referencia del error sistemtico, es un valor
verdadero, un valor medido de un patrn cuya incertidumbre de medida es
despreciable, o un valor convencional. Es independiente del nmero de
mediciones realizadas y no puede por tanto ser reducido incrementando el
nmero de mediciones. El error sistemtico es igual a la diferencia entre el
error de medida y el error aleatorio [CEM, 2008; Gonzlez, 2002].
Los errores aleatorios y sistemticos pueden ocurrir independientemente unos de
otros y surgir en diferentes etapas del procedimiento. El error aleatorio es ms
fcil de detectar que el sistemtico, ya que el segundo no se puede apreciar con
la sola repeticin de mediciones y, a menos que se conozca de antemano el valor
verdadero del mensurando, podran existir errores sistemticos muy grandes, que
pasen inadvertidos si no se aplican sistemas de control de calidad interno. La
imposibilidad de conocer el valor verdadero hace que el error sistemtico de un
procedimiento solamente pueda ser estimado. El error sistemtico total es
denominado el sesgo de la medida y es igual al valor medio, Z_ que resultara de
un nmero infinito de mediciones del mismo mensurando bajo condiciones de

repetibilidad menos el valor verdadero, a del mensurando, de acuerdo a la
ecuacin 1.1 [CEM, 2008; Gonzlez, 2002].

PcPde Z_ f a
[1.1]
El valor que es sumado algebraicamente al resultado no corregido de una

medicin, para compensar el error sistemtico se denomina correccin. La
correccin es igual al negativo del error estimado (INS, 2008).
El VIM define veracidad como, la proximidad entre la media de un nmero infinito
de valores medidos repetidos y un valor de referencia. La veracidad es una
propiedad metrolgica cualitativa que no tiene valor numrico. Se cuantifica
mediante el error sistemtico con el que se relaciona de manera inversa, pero no
est relacionada con el error aleatorio. En otras palabras, la veracidad se
relaciona con la presencia de errores de tipo sistemticos, tambin llamado sesgo
o desviacin, que puede expresarse como un valor absoluto o relativo al valor
verdadero (CEM, 2008).
La exactitud de un resultado segn el VIM se define como, la proximidad entre un

valor medido y un valor verdadero de un mensurando. Por tanto, adems de
considerar los errores sistemticos, la exactitud considera tambin los errores
aleatorios ya que estos siempre estn presentes en el resultado de una medida.
Es decir, la exactitud es la suma de dos conceptos: veracidad y precisin (CEM,
2008).
En resumen, la precisin describe errores aleatorios, el sesgo describe errores
sistemticos, y la exactitud, es decir, la proximidad al verdadero valor de una
medida individual o un valor medio, incorpora ambos tipos de error. Por lo anterior
mencionado, el trmino general de exactitud se usa en esta investigacin para
referirse conjuntamente, a la veracidad y a la precisin. En la figura 1.1 se
muestra la relacin entre los distintos tipos de error y los correspondientes
conceptos cualitativos [Barlandas et al., 2008; Miller y Miller, 2002].
Fig 1.1: Relacin entre los distintos tipos de error y los correspondientes conceptos
cualitativos.
(Barlandas et al., 2008)
La evaluacin de la veracidad puede realizarse por medio del error relativo. Se

realiza utilizando un material de referencia certificado (MRC) o un material de
referencia (MR), con un valor conocido del analito, considerado el valor asignado
a ste como el valor verdadero. El clculo del porcentaje de error relativo, se
realiza aplicando la ecuacin 1.2. Entre menor sea el porcentaje de error relativo
mayor ser la veracidad del mtodo.
% gc chheh hcijke
TU$# & ##)%'TlTU$# & UT (&'%')

TU$# & ##)%'T
m 100
[1.2]
Otra forma de calcular la veracidad es mediante el porcentaje de recuperacin. Se

puede utilizar material de referencia certificado o un material de referencia (MR).
El material se somete a examen y se estima la concentracin media del analito y
con el valor obtenido se determina el porcentaje de recuperacin aplicando la
ecuacin 1.3 (Barlandas et al., 2008).
% gc pcBchjBkM
TU$# $q*)'&$
TU$# & ##)%'T
m 100
[1.3]
Donde:
rjieh escMkge Valor promedio obtenido del anlisis
rjieh gc hctchcMBkj Valor de referencia (terico) del MRC

1.1.2.2.3
Precisin
La precisin segn el VIM se define como, proximidad entre valores medidos

obtenidos en mediciones repetidas de un mismo objeto, o de objetos similares,
bajo condiciones especificadas. La precisin depende exclusivamente de la
dispersin del error aleatorio y vara inversamente a ste. La precisin es una
propiedad cualitativa y no tiene valor numrico por lo que la variabilidad debido a
fluctuaciones aleatorias se cuantifica mediante otro concepto distinto: la
imprecisin. Cuanto mayor sea la dispersin de los resultados obtenidos mayor
ser la imprecisin del procedimiento de medida. La imprecisin es la desviacin
tpica P, la varianza o el coeficiente de variacin de un conjunto de mediciones de
una magnitud bajo las condiciones especificadas. La precisin se utiliza para

definir la repetibilidad de medida, la precisin intermedia y la reproducibilidad
[CEM, 2008; Gonzlez, 2002].
1.1.2.2.3.1
Repetibilidad (P# )
La repetibilidad es la concordancia entre los resultados de mediciones sucesivas

del mismo mensurando efectuadas en las mismas condiciones de medida
denominadas condiciones de repetibilidad. Las Condiciones de repetibilidad son
aquellas que se producen cuando en las distintas mediciones se utiliza el mismo
procedimiento de medida, el mismo observador, el mismo instrumento de medida
10
utilizado en las mismas condiciones, el mismo lugar y una repeticin de las

mediciones a lo largo de un corto periodo de tiempo, es decir, las condiciones de
repetibilidad vienen a ser aquellas que se producen dentro de una serie de
mediciones. Se considera una serie metrolgica al conjunto de mediciones
realizadas con un mismo sistema de medida entre dos momentos previamente
delimitados. La repetibilidad se expresa cuantitativamente mediante la desviacin
tpica o el coeficiente de variacin, que en este caso se denominan desviacin
tpica de repetibilidad y coeficiente de variacin de repetibilidad [CEM, 2008;
Gonzlez, 2002].
1.1.2.2.3.2
Precisin intermedia (PQ [:
La precisin en condiciones intermedias es aquella que se refiere a la calculada

cuando se producen cambios en alguno de las condiciones de medida del
procedimiento. En general existen cuatro factores dentro de las condiciones de
medida de un laboratorio que se consideran que son la principal contribucin a la
variabilidad de las mediciones. Estos cuatro factores son: tiempo, calibracin,
operador y equipamiento. La precisin en condiciones intermedias hace referencia
a aquella precisin en la que se han cambiado uno o ms de los factores
mencionados. La calibracin usada en este contexto no se refiere a aquella que
es requerida como una parte integrante de procedimiento para obtener los
resultados, sino que se refiere a aquel proceso de calibracin que se produce a
intervalos regulares de tiempo entre grupos de menciones dentro de un
laboratorio [CEM, 2008; Gonzlez, 2002].
1.1.2.2.3.3
Reproducibilidad (P! ):
Es la precisin de medida bajo un conjunto de condiciones de reproducibilidad.

La reproducibilidad es la concordancia entre los resultados de las mediciones del
mismo mensurando realizadas haciendo variar las condiciones de medida. Las
condiciones que se pueden variar son: el principio o mtodo de medida, el
observador, el instrumento de medida, el lugar, las condiciones de uso y el
tiempo. El concepto definido por este trmino viene a ser el equivalente al de
precisin entre laboratorios. La reproducibilidad se expresa cuantitativamente
11
mediante la desviacin tpica o el coeficiente de varianza denominados en este

caso desviacin tpica de reproducibilidad o el coeficiente de variacin de
reproducibilidad [CEM, 2008; Gonzlez, 2002].
Resumiendo, la precisin es el grado de concordancia entre ensayos
independientes obtenidos bajo unas condiciones estipuladas. Estas condiciones
dependen de los factores que se varen entre cada uno de los ensayos. Las dos
medidas de precisin extremas son la reproducibilidad (que proporciona la mayor
variabilidad ya que los ensayos se obtienen por diferentes laboratorios) y la
repetibilidad (que proporciona la menor variabilidad ya que los ensayos se
obtienen en intervalos cortos de tiempo sin variar ningn factor). Pero cuando un
laboratorio obtiene los ensayos variando todos los factores que puedan afectar a
un resultado, este caso, se obtiene la precisin intermedia ya que (como su propio
nombre indica) se obtiene en unas condiciones que estn entre medio de las
condiciones de repetibilidad y de reproducibilidad. La precisin intermedia es, por
tanto, un parmetro muy importante ya que proporciona una idea de la
variabilidad que pueden tener los resultados dentro de un laboratorio (Maroto et
al.,2001).
El estudio de la precisin se puede realizar calculando, a travs del anlisis
simple de varianza, las desviaciones estndar de repetibilidad (P# ) y de
reproducibilidad (PQ ) para cada uno de los niveles de ensayo, a partir de las
ecuaciones 1.4 y 1.5 respectivamente.

P# uCDEG
PQv
[1.4]
: = l: w
[1.5]
El denominar es igual al nmero de observaciones que se realizan cada da (en

cada nivel) Si por efectos aleatorios PQv x 0, debe asumirse PQv 0 (normalmente
debe cumplirse que CDEF y CDEG ). Los valores de CDEF , CDEG y son
obtenidos del clculo del ANOVA de un factor. Su significado y forma de clculo

se
explican
ms
adelante.
La
combinacin
de
la
repetibilidad,
P#
reproducibilidad, PQ , se obtiene como la raz cuadrada de la suma de varianzas de
12
repetibilidad (conocida como variacin interna promedio) y reproducibilidad

(conocida como variabilidad entre condiciones), de acuerdo a la ecuacin 1.6.
P! uO#v z OQv
[1.6]
A partir de los valores P# y P! , se calcula el porcentaje de los coeficientes de
variacin de repetibilidad (Drh) y el coeficiente de variacin en funcin de la
combinacin de repetibilidad y reproducibilidad (Dr! ) de acuerdo a las ecuaciones

1.7 y 1.8 respectivamente.
% Drh
]4
100
[1.7]
% Dr!
]~
100
[1.8]
1.1.2.2.4
R|{
R_
Lmite de deteccin (LD)
Es la cantidad ms pequea de analito en una muestra que puede ser detectada

por una nica medicin, con un nivel de confianza determinado, pero no
necesariamente cuantificada con un valor exacto. Es comnmente expresado
como concentracin del analito. Tambin se puede definir el lmite de deteccin
de un analito, como aquella concentracin que proporciona una seal en el
instrumento significativamente diferente de la seal del blanco o seal de fondo
con cierto nivel de confianza especificado [Muoz, 2001; OAA, 2003].
En la prctica no hay acuerdo entre los profesionales en la manera de calcularlo,
ya que esta definicin no es concreta. Los procedimientos de determinacin
posible son:
a) veces la dispersin, expresada como desviacin estndar, a partir de
mediciones repetidas del blanco (vlido solamente para procedimientos con
blanco), o de soluciones del analito en agua pura, de acuerdo a la ecuacin
1.9.
C Z_F z 3PF
[1.9]
13
Donde:
Z_F Valor promedio del blanco
OF Desviacin estndar del blanco

b) 2, 5 a 5 veces la relacin/ruido del instrumento de medida a utilizar (OAA,
2003).
Cuando se considere necesario, los valores obtenidos para el lmite de deteccin
deben ser confirmados experimentalmente, fortificando muestras de la misma
matriz a los niveles de concentracin respectivos y efectuando su anlisis con el
mismo nmero de replicados que en la validacin correspondiente (OAA, 2003).
1.1.2.2.5
Lmite de cuantificacin (LC)
Es la cantidad ms pequea de analito en una muestra que puede ser

cuantitativamente determinada con una incertidumbre asociada, para un nivel de
confianza dado. Es un parmetro del anlisis cuantitativo para niveles bajos de
compuestos en matrices de muestra y se usa particularmente para impurezas y
productos de degradacin. Se expresa como concentracin del analito. En
esencia se encuentran en la literatura dos formas para determinarlo:
a) De manera anloga al lmite de deteccin, en el cual el lmite de cuantificacin
es como mnimo tres veces el lmite de deteccin, segn cada caso, de
acuerdo a la siguiente expresin.
D Z_F z 3 m D
[1.10]
b) Por determinacin de una incertidumbre de los resultados mxima permisible

(dada como dispersin relativa del 30%, por ejemplo) por medio de la
determinacin de la concentracin ms pequea que se pueda medir, con este
valor mximo. Este lmite de cuantificacin es, por lo tanto, dependiente de las
exigencias de la incertidumbre (OAA, 2003).
14
1.1.2.2.6
Linealidad
Es la capacidad (dentro de un intervalo dado) del procedimiento analtico de

obtener resultados de prueba que sean directamente proporcionales a la
concentracin de analito en la muestra.
La linealidad involucra una serie de
muestras de concentracin conocida o una serie de diluciones conocidas de

muestras altamente concentradas. Las mediciones o los valores de las pruebas
reportadas son comparados con los valores asignados o los valores de dilucin.
Se grafica respuesta (rea o relacin de reas en el caso de utilizar patrn
interno) en funcin de la concentracin de la dilucin utilizada y se efecta el
tratamiento estadstico de los datos, determinando: ordenada al origen, pendiente
(sensibilidad), coeficiente de correlacin y coeficiente de variacin porcentual para
cada nivel de concentracin (Barlandas et al., 2008).
La linealidad es la parte de la funcin de calibracin, en la que la seal obtenida
para el analito responde linealmente a la concentracin. Se verifica mediante la
obtencin del coeficiente de correlacin que debe ser preferentemente mayor o
igual a 0,995 (aunque puede encontrarse entre 0,98 y 0,99 segn el mtodo
analtico) [Muoz, 2001; OAA, 2003].
1.1.2.2.7 Robustez
Es la medida de la capacidad de un procedimiento analtico de permanecer
inafectado por pequeas pero deliberadas variaciones en los parmetros del
mtodo y provee una indicacin de su fiabilidad en condiciones de uso normales.
En otras palabras, es la resistencia al cambio en los resultados obtenidos por un
mtodo analtico, cuando se realizan desviaciones menores a partir de las
condiciones experimentales descritas en el procedimiento. El objetivo de la
prueba de robustez es optimizar el mtodo analtico y describir que bajo las
condiciones establecidas (incluidas sus tolerancias) se pueden obtener resultados
suficientemente exactos con una alta seguridad, de manera que el procedimiento
funcione confiablemente si se utiliza en otros laboratorios o despus de intervalos
largos de tiempo. Un mtodo es ms robusto entre menos dependan los
15
resultados del ensayo de una modificacin en las condiciones de ste [Castelluci,

2005; OAA, 2003].
1.1.2.2.8
Intervalo de trabajo
Es el conjunto de los valores de magnitudes de una misma naturaleza que un

instrumento o sistema de medida dado puede medir con una incertidumbre
instrumental especificada, en unas condiciones determinadas. Es el intervalo
entre la menor y la mayor concentracin de analito en la muestra (incluyendo
stas concentraciones) para las cuales se ha demostrado que el procedimiento
analtico tiene el nivel adecuado de precisin, exactitud y linealidad. Es importante
comprender que este intervalo no es necesariamente idntico al intervalo til de
calibrado. Mientras que el calibrado puede cubrir un amplio intervalo de
concentraciones, el resto de la validacin (normalmente una parte mucho ms
importante en trminos de incertidumbre) cubre un intervalo ms restringido
[CEM, 2008; Isol, 2002].
1.1.2.2.9
Incertidumbre
La incertidumbre es junto con la trazabilidad, uno de los conceptos de metrologa

fundamentales, su definicin, su relacin con otros conceptos, as como los
aspectos relevantes para el clculo de este parmetro se explican en el literal
1.1.3.
1.1.2.3
Contraste de significacin
Una de las propiedades ms importantes de un mtodo analtico es que se

encuentre libre de errores sistemticos. Esto significa que el valor dado para la
cantidad de analito debera ser el valor verdadero. Esta propiedad de un mtodo
analtico se puede contrastar al aplicar el mtodo a una muestra de ensayo estndar
que contenga una cantidad conocida de analito. Sin embargo, incluso si no
existieran errores sistemticos, los errores aleatorios hacen poco probable que la
cantidad medida sea exactamente igual que la cantidad patrn conocida. Para
decidir si la diferencia entre la cantidad medida y la cantidad conocida se puede
16
atribuir a estos errores aleatorios, se puede aplicar una prueba estadstica

denominada contraste de significacin (tambin conocida como prueba de
significancia). Como su nombre lo indica, esta aproximacin contrasta si son
significativas las diferencias entre los dos resultados, o si se pueden justificar
slo por variaciones aleatorias. Los contrastes de significacin se utilizan
ampliamente en la evaluacin de los resultados experimentales (Miller y Miller,
2002).
1.1.2.3.1
Comparacin de una media experimental con un valor conocido
Al hacer un contraste de significacin se prueba la veracidad de una hiptesis

denominada hiptesis nula denotada por I$ . Si se refiere al prrafo anterior, la
hiptesis nula adoptada es aquella mediante la cual un mtodo analtico no est

sujeto a errores sistemticos. El trmino nulo se emplea para indicar que no hay
otra diferencia entre el valor observado y el conocido que la atribuible a la

variacin aleatoria. Suponiendo que esta hiptesis nula es verdadera, la teora
estadstica se puede emplear para calcular la probabilidad de que la diferencia
observada (o una superior a ella) entre la media muestral, Z_ , y el valor verdadero,

a, se deba solamente a un errores aleatorios. Cuanto ms pequea sea la
probabilidad de que la diferencia observada ocurra por azar, menos probable ser
que la hiptesis nula sea verdadera (Miller y Miller, 2002).
Normalmente la hiptesis nula se rechaza cuando la probabilidad de que dicha
diferencia observada ocurra por azar es menor que 1 de cada 20 veces (es decir,
0,05 5%). En este caso se dice que la diferencia es significativa al nivel de 0,05 (
5%). Utilizando este nivel de significacin se rechaza, en promedio, la hiptesis
nula, aunque sea de hecho verdadera, 1 de cada 20 veces. El nivel de significacin
se indica escribiendo, por ejemplo, P (es decir, la probabilidad) = 0,05 y proporciona
la probabilidad de rechazar una hiptesis nula cuando esta es verdadera. Es
importante tener en cuenta que si se acepta la hiptesis nula no significa que se
haya probado que sea verdadera, slo que no se ha demostrado que sea falsa
(Miller y Miller, 2002).
17
Para decidir si la diferencia entre Z_ y a es significativa, es decir para contrastar I$ :
la media de la poblacin = a, se calcula el estadstico segn la ecuacin 1.11.
YZ_ f a[uMP
[1.11]
Donde:
M Tamao muestral
Si || (es decir, el valor calculado de sin tener en cuenta su signo) es mayor que
un cierto valor crtico entonces se rechaza la hiptesis nula. El valor crtico para
un nivel de significacin concreto se puede encontrar en tablas, de la misma

bibliografa aqu citada (Miller y Miller, 2002).
1.1.2.3.2
Comparacin de dos medias experimentales
Los resultados de un mtodo analtico nuevo se pueden contrastar mediante

comparacin con los obtenidos utilizando un segundo mtodo (quizs un mtodo
de referencia). Se dispone de dos medias mustrales Z_J y Z_v . Se toma como hiptesis
nula que los dos mtodos proporcionan el mismo resultado, es decir I$ : aJ av , se
necesita probar si YZ_J f Z_v [ difiere significativamente de cero. Si las dos muestras
tienen desviaciones estndar que no son significativamente diferentes, se puede
calcular una estimacin conjunta de la desviacin estndar, P, a partir de la dos
desviaciones estndar individuales sJ y sv (Miller y Miller, 2002).
Se decide si la diferencia entre dos medias muestrales, Z_J y Z_v es significativa, es

decir, se contrasta la hiptesis nula, I$ : aJ av, mediante el clculo del estadstico
utilizando la ecuacin 1.12. En la ecuacin, tiene MJ z Mv f 2 grados de
libertad. El mtodo supone que las muestras se extraen de poblaciones con

desviaciones estndar iguales (Miller y Miller, 2002).

YR_ lR_ [
8 uYJ) J) [
Donde P de calcula a partir de la ecuacin 1.13
[1.12]
18
Pv
Y) lJ[8 Y) lJ[8
Y) ) lv[
[1.13]
Cuando sea poco probable que las desviaciones estndar de las poblaciones
sean iguales, no es muy apropiado mezclar las desviaciones estndar muestrales
para dar una estimacin global o conjunto de la desviacin estndar. Cuando no
puede suponerse que las dos muestras proceden de poblaciones con desviaciones
estndar iguales, se contrasta I$ : aJ av , calculando el estadstico a partir de la

ecuacin 1.14

YR_ lR_ [
[1.14]
8 ) 8 )
El nmero de grados de libertad se calcula a partir de la ecuacin 1.15

dhjgeP gc ikschjg Y[
8 ) 8 )
6 Y6 [ 6
Y6 [
[1.15]
1.1.2.3.3 Contraste de una y dos colas

Los mtodos analizados en los literales anteriores, se refieren al contraste de la
diferencia entre dos medias en cualquier direccin. El mtodo descrito en el literal
1.1.2.3.1 contrasta si existe diferencia significativa entre el resultado experimental
y el valor conocido para el material de referencia, sin tener en cuenta el signo de
la diferencia. En muchas situaciones, el analista no tiene una idea preconcebida,
previa a las mediciones experimentales, en cuanto a si la diferencia entre la media
experimental y el valor de referencia ser positiva o negativa. Por ello, el contraste
utilizado debe cubrir cualquier posibilidad. Dicho contraste se denomina de dos
colas (o bilateral). Sin embargo, en algunos casos puede ser apropiado otro tipo
de contraste diferente. Si se considera por ejemplo, un experimento en el que se
espera aumentar la velocidad de reaccin aadiendo un catalizador; en este caso,
es evidente que antes de empezar el experimento el nico resultado que interesa
es si la nueva velocidad es mayor que la anterior, y por lo tanto, slo es necesario
contrastar un aumento. Este tipo de contraste se llama de una cola (o unilateral)
(Miller y Miller, 2002).
19
El uso de valores crticos de tablas estadsticas en contrastes de significacin fue

adoptado a que antiguamente era demasiado tedioso calcular la probabilidad de
que superara al valor experimental. Las computadoras han alterado tal situacin,
y normalmente los programas estadsticos proporcionan los resultados de los

contrastes de significacin en trminos de una probabilidad. As, tambin, si el
contraste se lleva a cabo con la computadora, ser necesario indicar si este es un
contraste uni o bilateral (Miller y Miller, 2002).
1.1.2.3.4
El contraste F para la comparacin de desviaciones estndar
Los contrastes de significacin hasta ahora descritos se utilizan para comparar

medias y, por lo tanto, para detectar errores sistemticos. En muchos casos, es
tambin importante comparar las desviaciones estndar, es decir, los errores
aleatorios de dos conjuntos de datos. Esta comparacin, como en el caso de los
contrastes de medias, puede tomar dos formas. Se puede pretender probar si el
Mtodo A es ms preciso que el Mtodo B (es decir, la prueba de una cola) o si los
mtodos A y B difieren en su precisin (o sea, un contraste de dos colas). El
contraste F considera la razn de las dos varianzas muestrales, es decir, la razn
de los cuadrados de las desviaciones estndar PJv Pvv (Miller y Miller, 2002).
Mediante el clculo del estadstico de acuerdo a la ecuacin 1.16, se prueba si
es significativa la diferencia entre dos varianzas muestrales. Esto es, se prueba

que I$ : PJv Pvv
PJv Pvv
[1.16]
Donde 1 y 2 se disponen en la ecuacin de modo que sea siempre 1. El

nmero de grados de libertad del numerador y denominador son MJ f 1 y Mv f 2,
respectivamente. El contraste supone que las poblaciones de donde se extraen

las muestras son normales.
Si la hiptesis nula fuese verdadera, la relacin de varianzas debera ser prxima
a 1. Las diferencias respecto de 1 se deben a variaciones aleatorias, pero si la
diferencia es demasiado grande no se podr atribuir a esta causa. Si el valor
calculado de F supera un cierto valor (obtenido de tablas), entonces se rechaza la
20
hiptesis nula. Este valor crtico de F depende del tamao de las dos muestras, del
nivel de significacin y del tipo de contraste realizado. En el caso de realizar este
contraste en Excel, se debe tener en cuenta que este slo proporciona el
contraste de una cola, siendo necesario introducir la muestra con la varianza
ms grande como primera muestra. (Miller y Miller, 2002).
1.1.2.3.5
Anlisis de la Varianza
En el literal 1.1.2.3.2 se describi un mtodo para comparar dos medias y

contrastar si diferan significativamente. En el trabajo analtico se suelen presentar
a menudo comparaciones en las que intervienen ms de dos medias. El anlisis
de la varianza (ANOVA) es una potente herramienta estadstica, de gran utilidad
tanto en la industria, para el control de procesos, como en el laboratorio de
anlisis, para el control de mtodos analticos. Los ejemplos de aplicacin son
mltiples, pudindose agrupar, segn el objetivo que persiguen, en dos
principalmente: la comparacin de mltiples columnas de datos y la estimacin de
los componentes de variacin de un proceso. Para esta investigacin se tratar el
primer caso (Boqu y Maroto, 2004).
1.1.2.3.5.1
Comparacin de mltiples poblaciones
La comparacin de diversos conjuntos de resultados es habitual en los

laboratorios analticos. Por ejemplo, puede interesar comparar diversos mtodos
de anlisis con diferentes caractersticas, diversos analistas entre s, o una serie
de laboratorios que analizan una misma muestra con el mismo mtodo (ensayos
colaborativos). Otro caso sera, cuando se desea analizar una muestra que ha
estado sometida a diferentes tratamientos o ha estado almacenada en diferentes
condiciones. En todos estos ejemplos hay dos posibles fuentes de variacin: una
es el error aleatorio en la medida y la otra es lo que se denomina factor controlado
(tipo de mtodo, diferentes condiciones, analista o laboratorio, etc) (Boqu y
Maroto, 2004).
Una de las herramientas estadsticas ms utilizadas que permite la separacin de
las diversas fuentes de variacin es el anlisis de la varianza (ANOVA, del ingls
Analysis of Variance). Se puede utilizarse tambin en situaciones donde ambas
21
fuentes de variacin son aleatorias. Un ejemplo de este caso, sera el anlisis de

algn compuesto de un vino almacenado en un depsito. Supngase que las
muestras se toman aleatoriamente de diferentes partes del depsito y se realizan
diversos anlisis replicados. Aparte de la variacin natural en la medida se tendr
una variacin en la composicin del vino de las diferentes partes del depsito.
Cuando se tiene un factor, controlado o aleatorio, aparte del error propio de la
medida, se hablara del ANOVA de un factor (Boqu y Maroto, 2004).
En el caso, por ejemplo, de que se estuviese desarrollando un nuevo mtodo
colorimtrico y se quisiera
investigar la influencia de diversos factores
independientes sobre la absorbancia, tales como la concentracin de reactivo A y

la temperatura a la que tiene lugar la reaccin, entonces se hablara de un
ANOVA de dos factores. En los casos donde se tiene dos o ms factores que
influyen, se realizan los experimentos para todas las combinaciones de los
factores estudiados, seguido del ANOVA. Se puede deducir entonces, si cada uno
de los factores o una interaccin entre ellos tienen influencia significativa en el
resultado (Boqu y Maroto, 2004).
Para utilizar el ANOVA de forma satisfactoria deben cumplirse tres tipos de
hiptesis, aunque se aceptan ligeras desviaciones de las condiciones ideales:
2. Cada conjunto de datos debe ser independiente del resto.
3. Los resultados obtenidos para cada conjunto deben seguir una distribucin
normal.
4. Las varianzas de cada conjunto de datos no deben diferir de forma
significativa (Boqu y Maroto, 2004).
ANOVA de un factor
Como ya se indic, el ANOVA puede utilizarse para comparar entre s las medias
de los resultados obtenidos por diversos laboratorios, analistas, mtodos de
anlisis, etc. El ANOVA de un factor contrasta la existencia de diferencias
significativas entre medias cuando estn presentes ms de dos muestras. Se
sabe que debido al error aleatorio, incluso si el valor verdadero que se quiere
medir no ha variado, la media muestral puede variar de una muestra a otra. El
22
mtodo ANOVA contrasta si la diferencia entre las medias muestrales es

demasiado grande para explicar mediante errores aleatorios (Boqu y Maroto,
2004).
Se va a suponer, que se desea comparar las medias de k grupos muestrales,
cada uno de los cuales se supone que tiene la misma varianza. Se toma , como
el tamao respectivo (todos iguales), de cada grupo muestral k, siendo M el
nmero total de elementos muestrales YM k [ A cada valor muestral Z, se le
asignan dos subndices k, de manera que, Z' , designar el -simo valor en el k -
simo grupo, donde 1 k k y 1 . El procedimiento para contrastar la
hiptesis de igualdad de medias en este contexto se denomina anlisis de

varianza de un factor. El esquema para el anlisis de varianza de un factor para
este caso se presenta el en la figura 1.2 (Boqu y Maroto, 2004).
Fig 1.2: Esquema para el anlisis de varianza de un factor

(Boqu y Maroto, 2004)
La hiptesis nula especifica que los k grupos muestrales tienen una media comn.
El primer paso entonces, es calcular las medias de cada grupo muestral. Las
medias de cada grupo muestral estarn definidas entonces por la ecuacin 1.17.
Z|
R2
[1.17]
Asimismo, la media general estar definida por la ecuacin 1.18

Z_
2 R2
)
2 R_ 2
)
2 R_ 2
[1.18]
23
Las observaciones (repeticiones) se ordenarn normalmente, tal como se puede

observar en la tabla 1.1.
Tabla 1.1: Ejemplo del ordenamiento de los grupos muestrales
GRUPO MUESTRAL
Repeticiones
1
2
ZJJ
kf1
Z'
f1
Z
En funcin de la hiptesis nula adoptada, el objetivo del ANOVA, es comparar los

diversos
valores
medios
para
determinar
si
alguno
de
ellos
difiere
significativamente del resto. Para ello se utiliza una estrategia lgica: si los
resultados proporcionados en los grupos muestrales, no contienen errores
sistemticos, los valores medios respectivos no diferirn mucho los unos de los
otros y su dispersin, debida a los errores aleatorios, ser comparable a la
dispersin presente individualmente en cada grupo (Boqu y Maroto, 2004)
El secreto est en descomponer la variabilidad total de los datos en dos fuentes
de variacin. La primera es la variabilidad en torno a las medias individuales
muestrales de los k grupos de observaciones, la cual se denomina variabilidad
dentro de los grupos o suma de diferencias cuadrticas dentro del grupo YOCDG [.
La segunda es la variabilidad entre las medias de los k grupos. sta se denomina
variabilidad entre grupos o suma de diferencias cuadrticas entre grupos (OCDF [.
La suma de las discrepancias de todas las observaciones muestrales respecto de

su media global, se denomina suma de diferencias cuadrticas total YOCDH [.
Matemticamente, esta tima es igual a la suma dentro de los grupos OCDG ms
la suma entre grupos OCDF (Boqu y Maroto, 2004).
24
Como se mencion al inicio, el contraste de igualdad de medias est basado en el

supuesto de que los k grupos muestrales tienen una varianza comn. Si la
hiptesis nula de igualdad de las medias es cierta, cada una de las sumas de
cuadrados, OCDG y OCDF , pueden ser utilizadas como base para una estimacin
de la varianza comn. Para obtener estas estimaciones, se divide la suma de las

diferencias cuadrticas para el nmero apropiado de grados de libertad Y[. Se
puede demostrar que una estimacin insesgada de la varianza poblacional resulta

de dividir OCDG para YM f k), la estimacin resultante se denomina diferencia
cuadrtica dentro del grupo CDEF . Otra estimacin insesgada de la varianza
poblacional se obtiene dividiendo OCDF para (k f1), la cantidad resultante se
denomina diferencia cuadrtica entre grupos CDEF . La diferencia cuadrtica total

se obtiene dividiendo la suma de diferencias cuadrticas total para M f 1, y se
denomina con las iniciales CDEH . En la tabla 1.2, se presenta el resumen de
todas las ecuaciones necesarias para anlisis del ANOVA, que han sido
mencionadas (Boqu y Maroto, 2004).
Tabla 1.2: Expresiones para el clculo del ANOVA de un factor
ANLISIS SIMPLE DE LA VARIANZA
Origen de la
varianza
Grados de
libertad ()
Entre grupos
(Between)
J k f 1
Dentro del
Grupo
(Within)
Total
v M f k
Mf1
J z v
Sumas de diferencias
cuadrticas (SDC)
OCDF YZ_' f Z_ [v
'J
OCDG YZ' f Z| [v
'J J
OCDH YZ' f Z_ [v
'J J
OCDF z OCDG
Diferencias cuadrticas
medias (DCM = SDC/)
CDEF
OCDF
kf1
CDEG
OCDG
Mfk
CDEH
OCDH
Mf1
Finalmente, si la hiptesis nula es cierta, se est en posesin de dos estimaciones

insesgadas de la misma cantidad, la varianza poblacional comn. Entonces, sera
razonable esperar que estas estimaciones sean muy cercanas la una de la otra. A
mayor discrepancia entre ambas, permaneciendo todo lo dems igual, mayor ser
25
la sospecha de que la hiptesis nula no es cierta. El contraste de la hiptesis nula

estar basado en el cociente de los dos cuadrados medios, de acuerdo a la
ecuacin 1.19 (Boqu y Maroto, 2004).
: =
%TU%XUT&$ :
[1.19]
Si este cociente se aproxima a 1, no habr duda de que la hiptesis nula de

igualdad de medias es cierta. Sin embargo, si la variabilidad entre grupos es
grande en comparacin con la variabilidad dentro de los grupos, el cociente antes
mencionado 1 ser considerablemente mayor que 1. La hiptesis nula ser
rechazada para grandes valores de ese cociente. Un contraste formal se sigue del
hecho de que si la hiptesis nula de igualdad de medias fuese cierta, la variable
aleatoria correspondiente a 1 seguir una distribucin con (k f 1) grados de

libertad en el numerador y (M f k) grados en el denominador, con el supuesto de
que las distribuciones poblacionales son normales (Boqu y Maroto, 2004).
Un contraste a nivel b de significacin quedar determinado por la regla de
decisin, de acuerdo a la expresin 1.20. Rechazar YI$ [ si:

: =
%TU%XUT&$
:
y *TqXUT&$
[1.20]
El *TqXUT&$ se lo determina para distintos grados de libertad y b 0,05. Se puede
decir entonces, si no existe diferencia estadsticamente significativa entre CDEF y

CDEG , la presencia de errores aleatorios ser la causa predominante de la
discrepancia entre los valores medios. Si, por el contrario, existe algn error
sistemtico, CDEF ser mucho mayor que CDEG , con lo cual el valor calculado de
ser mayor que el valor tabulado *TqXUT&$ para el nivel de significacin
escogido y los grados de libertad mencionados (Boqu y Maroto, 2004).
Para hacer claro los principios en los que se apoya el mtodo ANOVA de un
factor, se han descrito en este literal los clculos necesarios. Sin embargo, en la
prctica, dichos clculos se pueden realizar mediante el uso de herramientas de
anlisis de datos que proporciona el programa de hoja de clculo de Microsoft
26
Excel. De igual manera, el clculo de los estadstico y pueden ser realizados
en Excel eligiendo la opcin adecuada.
1.1.2.3.6
Conclusiones a partir de los contrastes de significacin
Como ya se ha indicado, un contraste de significacin, por ejemplo, al nivel N

0,05 supone un riesgo del 5% de que se rechazar una hiptesis nula incluso
aunque sea verdadera. Este tipo de error se le denomina error de Tipo I. el riesgo
de tal error se puede reducir al alterar el nivel de significacin del contraste a N
0,01 o incluso a N 0,001. Sin embargo, ste no es el nico tipo de error posible:
es posible tambin mantener una hiptesis nula aun cuando sea falsa. Este es el
denominado error tipo II. Para calcular la probabilidad de este tipo de error es
necesario postular una alternativa a la hiptesis nula conocida como hiptesis
alternativa, IJ (Miller y Miller, 2002).
Para entender se presenta un ejemplo, considrese un producto qumico del cual

se piensa que contiene el 3% de fsforo por pesada. Se tiene la impresin de que
esta proporcin se ha incrementado y para contrastar esto se ha analizado la
composicin empleando un mtodo estndar con una desviacin estndar
conocida del 0,036%. Se supone que se toman cuatro medidas y se realiza un
contraste de significacin al nivel N 0,05. Es necesario que dicho contraste sea
de una cola, ya que solo interesa un incremento. La hiptesis nula es: I$ : a

3,0% (Mille -r y Miller, 2002).
La lnea continua de la figura 1.3, indica la distribucin muestral de la media si H
fuese verdadera. Esta distribucin muestral tiene una media 3,0 y una desviacin
estndar (es decir, error estndar de la media) M 0,034%. Si la media
muestral cae por encima del valor critico indicado, Z_ % , la hiptesis nula se rechaza.
Por tanto, la regin sombreada, con rea 0,05, representa la probabilidad de un
error de Tipo I. Suponer ahora que se tiene la hiptesis alternativa: IJ 3,05 %.
La lnea punteada de la figura 1.3, muestra la distribucin muestral de la media si
la hiptesis alternativa fuese verdadera. Incluso si este fuese el caso se aceptar

la hiptesis nula si la media muestral cae por debajo de Z_ % (Miller y Miller, 2002).
27
Fig 1.3: Errores de Tipo I y II

(Miller y Miller, 2002)
La probabilidad de este error tipo II se presenta por el rea rayada. El diagrama

pone de manifiesto la interdependencia de los dos tipos de error. Por ejemplo, si
se cambia el nivel de significacin a N 0,01 para reducir un riesgo de un error
de Tipo I, Z_% aumentar y el riesgo de un error de Tipo II aumentar tambin.

Recprocamente, una disminucin en el riesgo de un error de Tipo II slo puede
lograrse a expensas de un incremento en la probabilidad de un error de Tipo I. El
nico camino por el que pueden reducirse ambos errores (para una hiptesis
alternativa dada) es aumentar el tamao de la muestra (Miller y Miller, 2002).
El efecto de incrementa M (hasta 9 por ejemplo), se ilustra en la figura 1.4. La
disminucin resultante en el error tpico de la media producir una disminucin de
ambos tipo de error, para un valor dado de Z_ % . La probabilidad de que una
hiptesis nula falsa se rechace se denomina la potencia de un contraste. Esto es,
la potencia de un contraste es (1 - probabilidad de un error de Tipo II). En el

ejemplo expuesto es funcin de la media especificada en la hiptesis alternativa.
Esto depende tambin del tamao de muestra, el nivel de significacin del
contraste y si el contraste es de una o dos colas. En aquellas circunstancias
donde se dispone de dos o ms contrastes para contrastar la misma hiptesis,
puede ser til comparar las potencias de los contrastes con el fin de decidir cul
es el ms adecuado (Miller y Miller, 2002).
28
Fig 1.4: Errores de Tipo I y II al aumentar el tamao de muestra

(Miller y Miller, 2002)
Los errores de Tipo I y II son tambin relevantes cuando se aplican

secuencialmente contrastes de significacin. Un ejemplo de esta situacin es la
aplicacin del contraste a la diferencia entre dos medias, despus de utilizar en
primer lugar el contraste para decidir si se pueden juntar o no las varianzas de
las muestras. Los dos errores de Tipo I y II puede surgir del contraste inicial, y
si ocurre alguno de ellos querr decir que los niveles de significacin establecidos
para el subsiguiente contraste son incorrectos, debido a la forma incorrecta en
que el contraste ha sido aplicado (Miller y Miller, 2002).

1.1.2.4
Datos anmalos
Es muy frecuente que las personas que realizan experimentos se enfrenten a la

situacin en que uno (o posiblemente ms) de los resultados obtenidos en una serie
de medidas difiera del resto de manera inexplicable. Estas medidas se denominan
resultados anmalos. En algunos casos, un resultado puede atribuirse a un error
humano. El contraste de Dixon (a veces llamado contraste ) es un contraste
popular para datos anmalos debido a que el clculo es simple. Para pequeas
muestras (tamaos de 3 a 7) el contraste evala una medida sospechosa
comparando la diferencia entre ella y la medida ms prxima en tamao, con el
intervalo de las medidas. Para usar el contraste de Dixon para un valor anmalo,
esto es, para probar I : todas las medidas proceden de la misma poblacin, se
29
calcula el estadstico de acuerdo a la ecuacin 1.21. Este contraste es vlido
para tamaos de muestras de 3 a 7 y supone que la poblacin es normal. Los

valores crticos de para N 0,05 se pueden encontrar en tablas. Si el valor de
calculado supera el valor crtico, se rechaza el valor sospechoso (Miller y Miller,

2002).
|TU$# 8$8%$8$lTU$# (8 %#%T)$|
|TU$# (8 #T)&lTU$# (8 X$|
[1. 21]
Otro contraste utilizado frecuentemente para datos anmalos es el contraste de

Grubbs, que compara la desviacin entre el valor sospechoso y la media
muestral, con la desviacin estndar de la muestra. Este contraste es
recomendado por ISO preferentemente al de Dixon. Para usar el contraste de
Grubbs para un valor anmalo, esto es, para probar I$ : todas las medidas
proceden de la misma poblacin, se calcula el estadstico de acuerdo a la

ecuacin 1.22 (Miller y Miller, 2002).
|jieh PePcBePe f Z_ |P
[1.22]
Donde P se calcula incluyendo el valor sospechoso. El contraste supone que la
poblacin es normal. Los valores crticos de para N 0,05 se encuentran en
tablas. Si el valor de calculado supera al valor crtico, se rechaza la hiptesis de
que el dato sospechoso no es anmalo. Es importante tener en cuenta que para
un nivel de significacin del 5% hay todava un 5% de riesgo, o 1 de cada 20, de

rechazar incorrectamente el valor sospechoso. Esto puede tener un efecto
considerable a la hora de estimar la precisin de un experimento (Miller y Miller,
2002).
Cuando las medidas se repiten solo unas pocas veces (lo que es normal en un
trabajo analtico), el rechazo de un valor origina una gran variacin sobre la media
y sobre la desviacin estndar. En concreto, el hecho de tomar tres medidas y
rechazar la que difiere ms de las otras dos debe evitarse. Se puede demostrar
que se obtiene una estimacin ms fiable de la media, en promedio, utilizando el
valor que est en medio de los tres que utilizando la media de los dos que no
fueron rechazados (Miller y Miller, 2002).
30
1.1.2.5
Grficos de Control
Como ya se ha mencionado, uno de los principales parmetros a verificar en la

validacin de un mtodo analtico es la exactitud de los resultados proporcionados
por dicho mtodo. La exactitud, suma de la veracidad y la precisin, se
comprueba asegurando la trazabilidad de los resultados proporcionados por el
mtodo analtico a una referencia. Por lo tanto, mediante la comparacin a una
referencia se puede saber si existe trazabilidad a la referencia utilizada en el
momento de la comparacin. Pero la comparacin a una referencia, como por
ejemplo los materiales de referencia certificados (MRC) o los ejercicios
interlaboratorio, no se efecta de una forma rutinaria en el laboratorio, y pueden
pasar meses entre la comparacin entre dos referencias. Por lo tanto, los
laboratorios de anlisis necesitan algn tipo de herramienta para asegurar
sistemticamente la trazabilidad de los resultados que proporcionan. Una de las
herramientas ms utilizadas son los grficos (o cartas) de control (Riu, 2005).
1.1.2.5.1 Construccin de los Grficos de Control
Los grficos para el control de productos industriales fueron desarrollados
inicialmente por W. Shewhart en 1931, con el principal objetivo de investigar si un
proceso se encuentra bajo control estadstico. El elemento clave en los grficos
de control es la muestra de control, que servir para construir el grfico y
monitorizar el estado del procedimiento analtico. Esta muestra, que tiene que ser
estable con el tiempo, puede ser: una sustancia patrn, una muestra sinttica
adicionada, un material de referencia, un material de referencia certificado o una
muestra real. En la mayora de estos tipos de muestras el valor de la
concentracin o propiedad que se desea monitorizar ya viene dado (en las
sustancias patrn, materiales de referencia o materiales de referencia
certificados), o bien se lo conoce de una forma muy exacta (en el caso de
muestras sintticas fortificadas). Pero en el tipo de muestras de control ms
utilizado (una muestra real), se desconoce este valor de la concentracin o
propiedad a controlar. En este tipo de muestras la estimacin de la concentracin
o propiedad a monitorizar se debe llevar a cabo analizando la muestra de control
31
con el mtodo analtico una vez que se ha acabado de verificar la trazabilidad del
mismo (Riu, 2005).
El fundamento de los grficos de control se basa en la asuncin de la normalidad
de los resultados de medida: cuando se lleva a cabo algn proceso (por ejemplo,
un mtodo de anlisis) de forma sistemtica, es decir, bajo las mismas fuentes de
influencia o variacin, el proceso se ver afectado por errores aleatorios que
conducirn a una distribucin normal de los resultados. Esta afirmacin es una
consecuencia del teorema del lmite central. Se dir que el mtodo analtico est
bajo control si los resultados obtenidos con este mtodo siguen las caractersticas
de una distribucin normal (Riu, 2005).
En la figura 1.5 (izquierda) se puede observar que aproximadamente el 67% de
los resultados han de encontrarse dentro del intervalo: valor de la muestra de
control 1P (donde s es la desviacin estndar asociada a los anlisis de la

muestra
de
control
con
el
procedimiento
que
se
desea
monitorizar),
aproximadamente el 95% de los resultados han de encontrarse dentro del

intervalo: valor de la muestra de control 2P y aproximadamente el 99% de los
resultados han de encontrarse dentro del intervalo: valor de la muestra de control

3P (Riu, 2005).
Cuando los resultados de los anlisis de la muestra de control a lo largo del

tiempo se encuentran dentro de los lmites aceptados, se dice que el sistema se
encuentra bajo control estadstico. Cuando se encuentran puntos fuera de los
lmites especificados, o se encuentran tendencias, se dice que el sistema se
encuentra fuera de control. En la construccin de un grfico de control se pueden
distinguir las siguientes etapas:
1.1.2.5.1.1
Etapa de aprendizaje
En esta etapa se obtienen los resultados iniciales con la muestra de control. En el

caso de utilizar una muestra real, se debera comprobar la normalidad y la
presencia de resultados discrepantes (anmalos) y su eliminacin. Con los
resultados iniciales de la muestra de control se establece el valor de la lnea
central. Este valor debera obtenerse con un mnimo de 15- 30 anlisis de la
32
muestra de control. Los diferentes lmites suelen establecerse a una distancia del
valor central 2P (lnea de aviso), y a una distancia del valor central 3P (lnea
de control). Estas lneas pueden observarse en la figura 1.5 (derecha) (Riu, 2005).
Fig 1.5: Lneas de aviso y de control en un grfico de control (parte derecha), y su relacin
con la distribucin de la muestra de control
(Riu, 2005)
Los lmites de aviso y de control situados a unas distancias de 2P y 3P
respectivamente, pueden construirse utilizando los valores 2 y 3 cuando el valor

promedio de la muestra de control ha sido encontrado con un nmero
suficientemente grande de repeticiones (alrededor de 30). En este caso se asume
que se conocen los valores reales de los parmetros (promedio y desviacin
estndar). Si se tienen menos repeticiones, se aconseja considerar que los
valores reales de estos parmetros son desconocidos, y se deben efectuar
correcciones sobre la asuncin de distribucin normal. Esto implica utilizar valores
tabulados en lugar de los valores 2 y 3. Normalmente un laboratorio empieza
considerando como desconocidos los valores de los parmetros, hasta que se
han recogido suficientes datos como para poder considerar estos parmetros
como conocidos (Riu, 2005).
1.1.2.5.1.2
Etapa de control
En esta etapa se representan frente al tiempo los diversos resultados de la

muestra de control con el objetivo de detectar tendencias y situaciones fuera de
control. El grfico de control representado en la Figura 1.5, se denomina un
grfico de valores individuales, y en ella se efecta un solo replicado de la
33
muestra de control cada vez que sta se analiza. El grfico de valores individuales
es quiz el ms empleado, pero hay otras variaciones:
-
Grfico de promedios.- cada vez que se analiza la muestra de control se
efectan M rplicas (siempre el mismo nmero M de rplicas), y se representa

el valor medio de estas M rplicas. En este caso, los lmites de aviso y de
control se encuentran respectivamente a 2PM y 3PM, siempre que se
consideren como conocidos los parmetros del valor promedio y de la
desviacin estndar. En estos grficos se aplica el mismo comentario para la

construccin de los lmites de aviso y control que en el grfico de valores
individuales cuando se tienen pocos datos y no se pueden considerar los
parmetros promedio y desviacin estndar como verdaderos.
-
Grfico de intervalos mviles.- se mide el intervalo entre un par consecutivo

de valores en un grfico de valores individuales. De esta manera se pueden
controlar saltos en el procedimiento analtico.
Grfico de intervalos.- cuando se establece el control de los promedios, su

distribucin puede medirse por el intervalo (valor mximo valor mnimo) de
los valores utilizados para cada promedio, y controlar as esta dispersin (Riu,
2005).
Existen otros ms complejos, como el grfico de control de sumas acumuladas

(CUSUM, el cual es ms sensible y rpido para la deteccin de derivas) o el
grfico de control de medias mviles exponencialmente ponderadas (EWMA, el
cual al dar ms peso al punto ms actual representa mejor el estado del
procedimiento) (Riu, 2005).
1.1.2.5.2
Uso de los grficos de control
Los grficos de intervalos son especialmente efectivos para detectar dispersiones

anmalas o saltos, por lo que se recomienda que se utilicen tanto los grficos de
valores individuales como los grficos de promedios conjuntamente con los
grficos de intervalos, ya que este ltimo tipo de grficos son efectivos para
controlar desviaciones a partir del valor promedio, tendencias y modelos
anmalos.
Como
se
puede
observar,
los
dos
tipos
de
grficos
34
(intervalos/intervalos
mviles
promedios/valores
individuales),
son
complementarios entre s (Riu, 2005).

La confirmacin sobre si el sistema se encuentra bajo control estadstico se
obtiene por lo tanto, mediante la observacin visual del grfico de control: si los
puntos representados en el grfico se encuentran distribuidos de una forma
aproximadamente aleatoria, se dice que el sistema se encuentra bajo control
estadstico. Por ejemplo, en los grficos de promedios o valores individuales, la
probabilidad de que un punto caiga fuera de los lmites de aviso es
aproximadamente del 5%, pero la probabilidad de que dos puntos consecutivos, o
dos de tres puntos consecutivos caigan fuera de los lmites de aviso es muy baja.
Por lo tanto, cuando esto ocurre, tenemos una indicacin de que el procedimiento
debera ser inspeccionado. La figura 1.6 muestra algunos efectos que los grficos
de control pueden ayudar a detectar:
-
Aparicin de un sesgo: cuando una serie consecutiva de valores se distribuye

a un lado de la lnea central, pero sin variar la precisin del procedimiento.
Esto provoca un cambio en el valor promedio, tal como se puede observar en

la figura 1.6 a.
Aparicin de una progresiva tendencia a obtener valores crecientes o

decrecientes: deriva, como se observa en la figura 1.6 b.
Cambios cclicos o peridicos, de acuerdo a la figura 1.6 c (Riu, 2005).
Fig 1.6: Cambios en el procedimiento analtico que se pueden detectar con los grficos de
control
(Riu, 2005)
35
Cuando los grficos de control se utilizan de esta manera, son muy adecuados
para detectar sesgos muy significativos, o un incremento en las fluctuaciones
aleatorias, pero no son muy efectivos para detectar pequeos sesgos o derivas
lentas del procedimiento. Existen una serie de reglas muy conocidas para evaluar
si un sistema se encuentra bajo control estadstico utilizando los grficos de
promedios o de valores individuales. Estas reglas son las reglas de la Western
Electric, y para utilizarlas es conveniente dividir el grfico de control en tres zonas:
-
Zona central: de f1P a z1P
Zona de aviso: de f1P a f2P y de z1P a z2P
Zona de control: de f2P a f3P y de z2P a z3P (Riu, 2005).
Se considera que el procedimiento analtico se encuentra fuera de control, o que

ha cambiado significativamente, cuando hay:
-
1 punto ms all de la zona de control: se estima que la probabilidad de que

pase esto es suficientemente baja (de hecho es inferior al 0,3%) como para
sospechar que el sistema est fuera de control.
de 3 puntos consecutivos en la zona de control: similar al caso anterior, ya

que la probabilidad de que esto suceda es inferior al 0,0625%.
6 puntos consecutivos en lnea ascendente o descendente: se considera que

el sistema sigue una tendencia no aleatoria.
9 puntos consecutivos a un lado de la lnea central (ya sea por encima de ella
o por debajo): este caso suele constituir un desplazamiento del promedio o
del valor central, generalmente debido a un cambio significativo en el sistema.
14 puntos consecutivos alternando arriba o abajo: fenmeno cclico o series

temporales.
15 puntos consecutivos en la zona de control: esto implica una mejora de la

precisin y una menor desviacin estndar asociada. Se tendran que volver a
recalcular los lmites de aviso y de control.
4 de 5 puntos consecutivos en la zona de aviso o ms all.
8 puntos consecutivos por encima y por debajo de la zona de control: 2

poblaciones diferentes (Riu, 2005).
36
1.1.3
INCERTIDUMBRE
1.1.3.1
Definicin
La incertidumbre de medicin (frecuentemente denominada en forma abreviada

incertidumbre) es un parmetro que constituye un indicador comparativo de la
calidad de la medicin, a la vez que permite la obtencin de un intervalo de
confianza aproximado para el valor verdadero del mensurando. La incertidumbre
de la medicin es una forma de expresar el hecho de que para un mensurando y
su mensurando y su resultado de medicin dados, no hay un solo valor, sino un
nmero infinito de valores dispersos alrededor de resultado, que son consistentes
con todas las observaciones datos y conocimientos que se tengan del mundo
fsico, y que con distintos grados de credibilidad pueden ser atribuidos al
mensurando. El Vocabulario Internacional de Metrologa define a la incertidumbre
como, parmetro asociado al resultado de una medicin, que caracteriza la
dispersin de los valores que podran ser razonablemente atribuidos al
mensurando [CEM, 2008; Schmid y Lazos, 2004].
1.1.3.2
Incertidumbre y otros conceptos relacionados
1.1.3.2.1
Incertidumbre, exactitud y trazabilidad
El trmino exactitud, tal como se ha indicado, implica una combinacin de

componentes aleatorios y un error sistemtico o sesgo. Por tanto, la exactitud se
expresa como suma de dos trminos: la precisin (que tiene en cuenta la
variabilidad de los resultados) y la veracidad (es decir, que los resultados no
tengan un error sistemtico). En la prctica, la veracidad de los resultados se
comprueba utilizando referencias adecuadas: materiales de referencia certificados
(MRC), mtodos de referencia, etc. Es aqu, donde se une el concepto de
veracidad con el de trazabilidad y, por tanto, el de exactitud con el de trazabilidad
(Boqu et al., 2001).
La trazabilidad no se puede establecer si no se conoce la incertidumbre asociada
a cada uno de los pasos de la cadena ininterrumpida de comparaciones.
37
Asimismo, tampoco tiene sentido calcular la incertidumbre si previamente no se

ha verificado la trazabilidad del mtodo analtico. Si no se ha verificado la
trazabilidad del mtodo, no se puede asegurar que se hayan corregido o tenido en
cuenta todos los posibles errores sistemticos del mtodo y, por tanto, es
imposible asegurar que el intervalo de valores pcPijge MBchkgshc
contenga al valor considerado verdadero. Por tanto, se puede ver que
incertidumbre y trazabilidad son conceptos muy relacionados entre s (Maroto et

al., 2001).
1.1.3.2.2
Incertidumbre y precisin
Segn lo indicado en el concepto de precisin, esta se utiliza para definir la

repetibilidad de medida, la precisin intermedia y la reproducibilidad, siendo la
precisin intermedia la de mayor importancia ya que proporciona una idea de la
variabilidad que pueden tener los resultados dentro de un laboratorio. Es fcil
pensar entonces, que la precisin intermedia y la incertidumbre estn
relacionadas entre s, ya que la incertidumbre debe considerar todas las fuentes
de variabilidad que afecten a los resultados. Por tanto, se puede afirmar que la
precisin intermedia es un componente muy importante de la incertidumbre. Sin
embargo, la incertidumbre siempre es mayor que la precisin intermedia, ya que
la incertidumbre tambin debe incluir como mnimo un trmino asociado a la
verificacin de la trazabilidad. Adems, tambin puede ser necesario incluir en la
incertidumbre otros trminos asociados, por ejemplo, a la heterogeneidad de la
muestra o a tratamientos previos realizados sobre sta. Es aqu, donde se
demuestra la diferencia ms importante entre precisin e incertidumbre, mientras
la trazabilidad est muy relacionada con la incertidumbre, la precisin no lo est.
Es decir, la precisin de un mtodo puede calcularse sin verificar la trazabilidad.
Sin embargo, no tiene sentido calcular la incertidumbre si previamente no hemos
verificado la trazabilidad del mtodo. En la figura 1.7 se muestran los resultados
de analizar un material de referencia certificado (MRC) cuyo valor de referencia
es D# para ilustrar la diferencia entre la precisin y la incertidumbre (Boqu et

al.,2001).
38
Fig 1.7: Diferencia entre precisin e incertumbre

(Boqu et al., 2001)
En los casos 1 y 2, el MRC se ha analizado con el mismo mtodo analtico (dos

ensayos independientes con el mismo mtodo) mientras que en el caso 3 se ha
utilizado otro mtodo ms preciso para analizar el MRC. En todos los casos se
puede observar, que la incertidumbre es mayor que el intervalo de confianza
asociado a la precisin. Adems, tambin se observa que el intervalo asociado a
la incertidumbre contiene siempre al valor de referencia mientras que el intervalo
asociado a la precisin slo lo contiene en uno de los casos. Esto es debido a que
la precisin no considera el trmino asociado a la verificacin de la trazabilidad
mientras que la incertidumbre s lo considera. Por ltimo, el caso 3 muestra que,
normalmente, cuanto ms preciso es el mtodo, menor es la incertidumbre de los
resultados (Boqu et al., 2001).
39
1.1.3.2.3
Incertidumbre y error
En general todo procedimiento de medicin tiene imperfecciones que dan lugar

a un error en el resultado de la medicin, lo que provoca que el resultado sea
slo una aproximacin o estimado del valor del mensurando. Es importante
distinguir
entre
error
incertidumbre.
El
Vocabulario
de
Metrologa
Internacional define el error como, la diferencia entre un valor medido de una

magnitud y un valor verdadero. Es decir, que el error es un simple valor. En
principio el valor de un error conocido puede ser aplicado como una correccin
al resultado de una medicin. El valor verdadero del mensurando es aquel que
caracterizara idealmente al resultado de la medicin, o sea, el que resultara
de una medicin perfecta. Por tanto, el error es un concepto idealizado y los
errores no pueden ser conocidos exactamente. La incertidumbre por otro lado,
toma la forma de un rango, y, si es estimada para un procedimiento de
medicin, puede aplicarse a todas las determinaciones descritas en dicho
procedimiento. En general, el valor de la incertidumbre no puede utilizarse para
corregir el resultado de una medicin (Boqu et al., 2001).
Para ilustrar la diferencia, puede darse el caso de que un resultado tenga un
error despreciable ya que, por casualidad, este resultado puede estar muy
prximo al valor considerado verdadero. Sin embargo, la incertidumbre de este
resultado puede ser muy elevada simplemente porque el analista est inseguro
del resultado que ha obtenido debido al gran nmero de fuentes de error que
puede tener el mtodo analtico. Por otro lado, el error cometido al analizar
varias veces una muestra con un mtodo analtico no es siempre el mismo ya
que los errores aleatorios hacen que el error cometido en cada uno de los
anlisis sea diferente. Sin embargo, la incertidumbre de todos los resultados
obtenidos al analizar esa muestra es siempre la misma ya que se utiliza el
mismo mtodo analtico. Por tanto, si la incertidumbre se ha calculado para un
mtodo analtico y un tipo de muestra determinado, todas las muestras de ese
tipo que se analicen con ese mtodo tendrn la misma incertidumbre pero no
tienen por qu tener el mismo error asociado (Boqu et al.,2001).
40
Las diferencias entre error e incertidumbre se muestran en la Figura 1.7. Se

puede observar que el error cometido en el caso 1 es mucho mayor que el
cometido en el caso 2 pero que la incertidumbre asociada a analizar el MRC en
ambos casos es la misma porque hemos utilizado el mismo mtodo analtico
1.1.3.2.4
Incertidumbre y tolerancia
La incertidumbre juega un papel muy importante al momento de afirmar, si un

producto cumple o no con unas determinadas especificaciones. Para ello, se
debe comprobar si el resultado analtico est dentro o no de una tolerancia o
intervalo de valores definido en las especificaciones. En la Figura 1.8,
se
muestran cuatro situaciones que pueden ocurrir cuando se quiere comprobar si el

resultado (estimacin + incertidumbre asociada) est dentro o no de la tolerancia
Fig 1.8: Relacin de la incertidumbre con la tolerancia

En el caso 1 de la figura 1.8, el producto es vlido ya que tanto la estimacin del

valor como su incertidumbre estn dentro de la tolerancia. En el caso 2, el
producto es claramente no vlido porque ni la estimacin ni su incertidumbre
estn dentro de la tolerancia. Pero, en el caso 3, la estimacin del valor est fuera
de la tolerancia pero hay una parte de la incertidumbre que est dentro de la
tolerancia. Por tanto, se dira que el resultado es dudoso. En el caso 4 el resultado
41
tambin se lo calificara de dudoso, ya que, si bien la estimacin est dentro de

la tolerancia, hay parte de la incertidumbre que cae fuera de la tolerancia.
Normalmente, en estos dos ltimos casos se rechazara el producto. (Boqu et
al., 2001).
1.1.3.3
Clculo de la Incertidumbre de medida
El objetivo de una medicin es determinar el valor de la magnitud que se desea

medir, denominada mensurado. Durante la realizacin de una medicin
intervienen una serie de factores que determinan su resultado. Adems del propio
mensurando, el resultado de la medicin est afectado por las denominadas
magnitudes de influencia. En un sentido amplio se considera que las magnitudes
de influencia incluyen no solo las que se refieren a las condiciones ambientales,
como son la temperatura, la presin baromtrica y la humedad, sino tambin
fenmenos tales como las fluctuaciones breves de los instrumentos de medicin,
valores asociados con patrones de medicin y datos de referencia de los cuales
puede depender el resultado de la medicin (Lazos y Schmid, 2004).
Una medicin comienza con una especificacin apropiada del mensurando, del
mtodo de medicin y de los procedimientos de medicin. El mtodo de medicin
es la secuencia lgica de operaciones, generalmente descritas, usada en la
ejecucin de las mediciones de acuerdo con un principio de medicin
determinado. El procedimiento de medicin es el conjunto de operaciones,
descritas de forma especfica, utilizadas en la ejecucin de mediciones
particulares, de acuerdo a un mtodo de medicin determinado. El procedimiento
de medicin se registra en un documento y contiene un nivel suficiente de detalle,
que le permite a un operador realizar la medicin sin informacin adicional. El
principio de medicin es el fundamento cientfico del mtodo de medicin. El
conocimiento del principio de medicin permite al metrlogo dominar la medicin,
esto es, modificarla, disear otra, evaluar su conveniencia, etc., adems es
indispensable para estimar la incertidumbre de la medicin (Lazos y Schmid,
2004).
42
El principio, el mtodo y el procedimiento de medicin son determinantes en el

valor de la incertidumbre de la medicin. Un conocimiento insuficiente de ellos
muy probablemente conducir a una estimacin equivocada, o incompleta en el
mejor de los casos, de la incertidumbre de la medicin (Lazos y Schmid, 2004).
1.1.3.3.1
Especificacin del mensurando
Modelo fsico
Un modelo fsico de la medicin consiste en el conjunto de suposiciones sobre el
propio mensurando y las variables fsicas o qumicas relevantes para la medicin.
Estas suposiciones usualmente incluyen:
-
Relaciones fenomenolgicas entre variables;
Consideraciones sobre el fenmeno como conservacin de cantidades,

comportamiento temporal, comportamiento espacial, simetras;
Consideraciones sobre propiedades de la sustancia como homogeneidad e

isotropa.
Una medicin fsica, por simple que sea, tiene asociado un modelo que slo
aproxima el proceso real (Lazos y Schmid, 2004).
Modelo matemtico
El modelo fsico se representa por un modelo descrito con lenguaje matemtico.
El modelo matemtico supone aproximaciones originadas por la representacin
imperfecta o limitada de las relaciones entre las variables involucradas.
Considerando a la medicin como un proceso, se identifican magnitudes de
entrada denotadas por el conjunto ^' , expresin en la cual el ndice k toma
valores entre 1 y el nmero de magnitudes de entrada L. La relacin entre las
magnitudes de entrada y el mensurando Y como la magnitud de salida se
representa como una funcin como se observa en la ecuacin 1.23, representada

por una tabla de valores correspondientes, una grfica o una ecuacin.
` tY^' [ tY^J , ^v , ^ [
[1.23]
43
Se denota con Z' al mejor estimado de las magnitudes de entrada ^' . Los valores
de las magnitudes de entrada pueden ser resultados de mediciones recientes

realizadas por el usuario o tomados de fuentes como certificados, literatura,
manuales, etc. El mejor estimado \ del valor del mensurando es el resultado de
calcular el valor de la funcin t evaluada en el mejor estimado de cada magnitud
de entrada Z' , como se observa en la ecuacin 1.24

\ tYZJ , Zv , Z [
[1.24]
En algunas ocasiones se toma el mejor estimado de ` como el promedio de

varios valores \ del mensurando, obtenidos a partir de diversos conjuntos de
valores ^' de las magnitudes de entrada (Lazos y Schmid, 2004).
1.1.3.3.2
Identificacin de las fuentes de incertidumbre
Una vez determinados el mensurando, el principio, el mtodo y el procedimiento

de medicin, se identifican las posibles fuentes de incertidumbre. stas provienen
de los diversos factores involucrados en la medicin, como por ejemplo:
-
La incertidumbre propia de la calibracin de los instrumentos utilizados en los

ensayos
La incertidumbre del patrn o del material de referencia
La repetibilidad de las lecturas
La reproducibilidad de las mediciones por cambio de observadores,

instrumentos u otros elementos
Caractersticas del propio instrumento, como resolucin, histresis, deriva,

etc.
Variaciones de las condiciones ambientales
La definicin del propio mensurando
El modelo particular de la medicin
Variaciones en las magnitudes de influencia.
El diagrama de causa-efecto, es una forma muy conveniente de listar las fuentes

de incertidumbre, mostrando cmo se relaciona cada una e indicando su
44
influencia en la incertidumbre del resultado. Adems, ayuda a evitar que se

dupliquen las fuentes al considerarlas nuevamente (Lazos y Schmid, 2004).
1.1.3.3.3
Cuantificacin de las fuentes de incertidumbre
Una vez que han sido identificadas las fuentes de incertidumbre, para su
estimacin puede ser necesario tomar cada fuente de incertidumbre y tratarla
separadamente para obtener la contribucin de cada fuente. Cada una de las
contribuciones separadas a la incertidumbre es referida como una componente de
incertidumbre. Se distinguen dos mtodos principales para cuantificar las fuentes
de incertidumbre: El Mtodo de Evaluacin Tipo A, basado en un anlisis
estadstico de una serie de mediciones, y el Mtodo de Evaluacin Tipo B, que
comprende todas las dems maneras de estimar la incertidumbre (Lazos y
Schmid, 2004).
Es importante mencionar que esta clasificacin, no significa que exista alguna
diferencia en la naturaleza de los componentes que resultan de cada uno de los
dos tipos de evaluacin, puesto que ambos tipos estn basados en distribuciones
de probabilidad. La nica diferencia es que en una evaluacin tipo A, se estima
esta distribucin basndose en mediciones repetidas obtenidas del mismo
proceso de medicin; mientras, en el caso de tipo B, se supone una distribucin
con base en experiencia o informacin externa al analista (Lazos y Schmid, 2004).
Evaluacin tipo A
Una incertidumbre estndar de tipo A se puede obtener por cualquier mtodo
estadstico que ofrezca un estimado vlido de la dispersin de los datos.
Primer caso.- La incertidumbre de una magnitud de entrada ^' , obtenida a partir
de observaciones repetidas bajo condiciones de repetibilidad, se estima con base

en la dispersin de los resultados individuales. Si ^' se determina mediante M
mediciones independientes, resultando en valores ZJ , Zv , Z) , el mejor estimado
de Z' para el valor de ^' es la media de los resultados individuales, de acuerdo a

la ecuacin 1.25.
45
Z_'
. )'J Z'
[1 25]
La dispersin de los resultados de la medicin ZJ , Zv , Z) , para la magnitud de
entrada ^' se expresa por su desviacin estndar experimental PYZ[, de acuerdo a

la ecuacin 1.26.
PR )lJ . )'JYZ' f Z_ [v
J
[1 26]
La desviacin estndar experimental de la media, PYZ_ [, es la estadstica utilizada
para la cuantificacin de la incertidumbre estndar, YZ' [ de ^' , segn la ecuacin

1.27.
YZ' [ PYZ_ [
[1.27]
Donde:
YZ' [ Es la llamada incertidumbre estndar tipo A
As, la incertidumbre estndar de ^' resulta finalmente de la ecuacin 1.28

YZ' [
)lJ
. )'JYZ' f Z_ [v
[1.28]
El nmero ideal de las repeticiones M depende de las condiciones y exigencias
(meta para la incertidumbre) de cada medicin especfica. No se puede dar una

recomendacin general, sin embargo se pueden tener presente las siguientes
consideraciones:
Aumentar el nmero de repeticiones resulta en una reduccin de la incertidumbre
por repetibilidad, la cual es proporcional a 1M.
-
Un nmero grande de repeticiones aumenta el tiempo de medicin, que

puede ser contraproducente, si las condiciones ambientales u otras
magnitudes de entrada no se mantienen constantes en este tiempo.
46
En pocos casos se recomienda o se requiere M mayor de 10. Por ejemplo

cuando se caracterizan instrumentos o patrones, o se hacen mediciones o
calibraciones de alta exactitud.
Para determinar el impacto que tiene M en la incertidumbre expandida puede
estimarse su influencia en el nmero de grados efectivos de libertad, de ser

aplicable este concepto (Lazos y Schmid, 2004).
Segundo caso.- Es la evaluacin de la incertidumbre de la medicin mediante el

anlisis estadstico de los datos obtenidos de un diseo experimental. Este es el
caso, ms complejo que el primero, del llamado Anlisis de la Varianza (ANOVA),
que si bien persigue otros objetivos tambin permite las evaluaciones Tipo A de
las componentes de la incertidumbre, mediante el diseo de secuencias anidadas
de mediciones del mensurando variando los valores de las magnitudes de entrada
de las que depende. Existen diferentes modelos incluidos bajo el nombre general
de ANOVA y son utilizados exitosamente en muchas situaciones de mediciones
encontradas en la prctica, sin embargo, es poco probable lograr la variacin de
todas las magnitudes de entrada debido a las limitaciones en tiempo y recursos,
por lo que normalmente, se evalan solo algunas componentes de incertidumbre
utilizando estos mtodos (ECA, 2004).
Tercer caso.- Este caso es el ajuste por el mtodo de los mnimos cuadrados de
una curva ` t^ a partir de datos experimentales. La varianza y la
incertidumbre estndar de los parmetros que caracterizan la curva y de cualquier

punto predicho, se calculan tambin mediante los procedimientos estadsticos
asociados a las tcnicas ANOVA (ECA, 2004).
Cuarto caso.- Es la incertidumbre estndar mancomunada o histrica. En el caso
de mediciones que se realicen bajo control estadstico en el cual est determinada
una desviacin estndar del comportamiento de las mediciones mancomunadas o
histricas (P ), como incertidumbre de la medicin realizada podra utilizare la
siguiente expresin:
YZ' [
[1.29]
47
Donde M es el nmero de mediciones repetidas para evaluar Z' , segn la ecuacin
1.25, mientras P se determin por un nmero distinto de mediciones. La
incertidumbre estndar mancomunada tiene una especial importancia en los

niveles ms bajos de la cadena de calibracin, donde los patrones de referencia
constituyen prcticamente valores verdaderos al ser calibrados en Laboratorios
Nacionales o Primarios, de manera que la incertidumbre del resultado de la
calibracin comprende una sola componente y es la incertidumbre estndar de
tipo A calculada a partir de la desviacin estndar mancomunada del
procedimiento de medicin P (ECA, 2004).
Evaluacin tipo B
En una evaluacin tipo B de la incertidumbre de una magnitud de entrada se usa
informacin externa un obtenida por experiencia. Las fuentes de informacin
pueden ser:
-
Certificados de calibracin.
Manuales del instrumento de medicin, especificaciones del instrumento.
Normas o literatura.
Valores de mediciones anteriores.
Conocimiento sobre las caractersticas o el comportamiento del sistema de

medicin (Lazos y Schmid, 2004).
El uso adecuado del conjunto de informacin disponible para una evaluacin tipo
B de la incertidumbre de la medicin, depende de la experiencia y el conocimiento
del evaluador que se afianzan con la prctica. Se debe reconocer que una
evaluacin tipo B de la incertidumbre estndar puede ser tan confiable como una
de tipo A, sobre todo cuando el nmero de observaciones es pequeo (ECA,
2004).
Distribuciones de probabilidad
La cuantificacin de una fuente de incertidumbre incluye la asignacin de un valor
y la determinacin de la distribucin a la cual se refiere este valor. Las
distribuciones que aparecen ms frecuentemente son:
48
a) Distribucin normal
Los resultados de una medicin repetida afectada por magnitudes de influencia
que varan aleatoriamente, generalmente siguen en buena aproximacin una
distribucin normal. En particular, la distribucin de la media de una serie de
mediciones repetidas se aproxima a una normal independientemente de la
distribucin de las lecturas individuales. Tambin la incertidumbre indicada en
certificados de calibracin se refiere generalmente a una distribucin normal
(Lazos y Schmid, 2004).
b) Distribucin rectangular
En una distribucin rectangular cada valor en un intervalo dado tiene la misma
probabilidad, o sea la funcin de densidad de probabilidad es constante en este
intervalo. Ejemplos tpicos son la resolucin de un instrumento digital o la
informacin tcnica sobre tolerancias de un instrumento. En general, cuando
exclusivamente hay conocimiento de los lmites superior e inferior del intervalo de
variabilidad de la magnitud de entrada, lo ms conservador es suponer una
distribucin rectangular (Lazos y Schmid, 2004).
c) Distribucin triangular:
Si adems del conocimiento de los lmites superior e inferior hay evidencia de que
la probabilidad es ms alta para valores en el centro del intervalo y se reduce
hacia los lmites, puede ser ms adecuado basar la estimacin de la
incertidumbre en una distribucin triangular (Lazos y Schmid, 2004).
1.1.3.3.4
Determinacin de las incertidumbres estndar
Con el fin de combinar contribuciones de la incertidumbre que tienen

distribuciones
diferentes,
es
necesario
representar
los
valores
de
las
incertidumbres originales como incertidumbres estndar. Para ello se determina la

desviacin estndar de la distribucin asignada a cada fuente.
49
a) Distribucin normal
La desviacin estndar experimental de la media calculada a partir de los
resultados de una medicin repetida segn la ecuacin 1.26 ya representa la
incertidumbre estndar. Cuando se dispone de valores de una incertidumbre
expandida / y la distribucin del mensurando es o se supone normal, como los
presentados por ejemplo en certificados de calibracin, se divide / entre el factor

de cobertura K, obtenido ya sea directamente o a partir de un nivel de confianza
dado de acuerdo a la ecuacin 1.30 (Lazos y Schmid, 2004).

aYZ' [
[1.30]
En la figura 1.9, se resumen las caractersticas de la distribucin normal.
Fig 1.9: Caractersticas de la Distribucin Normal

(Eurachem, 2000)
b) Distribucin rectangular
Si la magnitud de entrada ^' tiene una distribucin rectangular con el lmite
superior j y el lmite inferior jl , el mejor estimado del valor de ^' est dado por
la ecuacin 1.31.
Z'
T T
v
La incertidumbre estndar se calcula por la ecuacin 1.32
[1.31]
50
YZ' [
T l T
[1.32]
Jv
Si los lmites superior e inferior son simtricos con respecto a Z' , es decir,
j f jl 2 j, entonces, la incertidumbre estndar de ^ se calcula de acuerdo a
la ecuacin 1.33.
YZ' [
[1.33]
Una aplicacin tpica es la resolucin de un instrumento digital. Tambin la

incertidumbre relacionada con el nmero finito de cifras significativas de datos
tomados de la literatura puede ser tratada con esta distribucin (siempre y cuando
no haya indicios que la incertidumbre en realidad es mayor que la incertidumbre
relacionada con la ltima cifra significativa). Si se aplica a la resolucin o a datos
tomados de la literatura, j corresponde al ltimo dgito significativo o a la ltima
cifra significativa respectivamente (Lazos y Schmid, 2004).
En la figura 1.10, se resumen las caractersticas de la distribucin rectangular.
Fig 1.10: Caractersticas de la Distribucin Rectangular

(Eurachem, 2000)
c) Distribucin triangular
Como en una distribucin rectangular, para una magnitud de entrada ^' que tiene
una distribucin triangular con los lmites j y jl , el mejor estimado para el valor
de ^' est dado por la ecuacin 1.31.
51
Z'
T T
[1.31]
La incertidumbre estndar se calcula en este caso por la ecuacin 1.34.

YZ' [
T l T
[1.34]
Si los lmites superior e inferior son simtricos con respecto a Z' , es decir,
j f jl 2 j, entonces, la incertidumbre estndar de ^ se calcula de acuerdo a
la ecuacin 1.35 (Lazos y Schmid, 2004)

YZ' [
[1.35]
En la figura 1.11, se resumen las caractersticas de la distribucin triangular.
Fig 1.11: Caractersticas de la Distribucin Triangular

(Eurachem, 2000)
1.1.3.3.5
Combinacin (Incertidumbre Estndar Combinada % Y\[
El resultado de la combinacin de las contribuciones de todas las fuentes es la
incertidumbre estndar combinada % Y\[. La contribucin ' Y\[ de cada fuente a
la incertidumbre combinada depende de la incertidumbre estndar YZ' [ de la
propia fuente y del impacto de la fuente sobre el mensurando. Es posible
encontrar que una pequea variacin de alguna de las magnitudes de influencia

tenga un impacto importante en el mensurando, y viceversa. Se determina ' Y\[
52
por el producto de YZ' [ y su coeficiente de sensibilidad B' (o factor de
sensibilidad) de acuerdo a la ecuacin 1.36.

' Y\[ B' YZ' [
[1.36]
El coeficiente de sensibilidad describe qu tan sensible es el mensurando con

respecto a variaciones de la magnitud de entrada correspondiente. Si el modelo
matemtico para el mensurando ` tY^J , ^v , , ^ [ describe la influencia de la
magnitud de entrada ^J suficientemente bien mediante una relacin funcional, el
coeficiente de sensibilidad B' se calcula por la derivada parcial de t con respecto

a ^' , de acuerdo a la ecuacin 1.37 (Lazos y Schmid, 2004).
B'
Y , , [
2
| R R
[1.37]
Propagacin de la incertidumbre para magnitudes de entrada no

correlacionadas
En el caso de magnitudes de entrada no correlacionadas, la incertidumbre
combinada % Y\[ se calcula por la suma geomtrica de las contribuciones
particulares, de acuerdo a la ecuacin 1.38.

v
%v Y\[
'J ' Y\[
[1 38]
Considerando las ecuaciones 1.36 y 1.37 resulta finalmente la ecuacin 1.39

v

% Y\[
'JB' YZ' [ 'J YZ' [

[1 39]
La regla presentada en la ecuacin 1.39 es llamada ley de propagacin de
incertidumbre. Cuando se dispone de la relacin funcional entre ` y ^' se aplica
la ltima expresin en esta ecuacin. La ley de propagacin de incertidumbre se

debe aplicar exclusivamente para combinar incertidumbres estndar. De ninguna
manera se debe utilizar para combinar intervalos de confianza [JCGM, 2008;
Schmid y Lazos, 2004].
53
Magnitudes de entrada relacionadas con ms de una fuente de

incertidumbre
En la mayora de los casos una magnitud de entrada ^' es afectada por varias
fuentes de incertidumbre, que pueden ser por ejemplo la resolucin del

instrumento, la dispersin de datos obtenidas por mediciones repetidas y la
incertidumbre de la calibracin del instrumento. En este caso hay dos maneras
equivalentes de calcular la incertidumbre combinada.
a) Como primera alternativa, se calcula la incertidumbre total (combinada)
relacionada con cada magnitud de entrada ^' por la suma geomtrica de las
incertidumbres individuales, de acuerdo a la ecuacin 1.40.
2
YZ' [
YZ' [ J
[1.40]
donde YZ' [ es la incertidumbre estndar de la fuente de incertidumbre
nmero de la E' fuentes relacionadas con la magnitud de entrada ^' .
Despus se introducen los valores de YZ' [ en la ecuacin 1.39.
b) Si uno est interesado en ver el efecto particular que tiene cada una de las
fuentes en la incertidumbre combinada % Y\[, cada fuente puede entrar
individualmente en la ecuacin 1.39, sustituyendo el nmero de magnitudes

de entrada L en la suma por el nmero total de fuentes de incertidumbre.
Cabe mencionar que el coeficiente de sensibilidad B' es igual para todas las
fuentes de incertidumbre relacionadas con la misma magnitud de entrada ^' ,
de acuerdo a la ecuacin 1.41.

2
v
% Y\[
'J B' J YZ' [
[1.41]
Cuando el coeficiente de sensibilidad B' es cero o cuando la funcin no admite
una representacin lineal adecuada (nicamente con la primera derivada) en el

intervalo YZ' [ es conveniente e indispensable considerar trminos de segundo
54
orden (que dependen de las segundas derivadas) [CEM, 2008; Lazos y Schmid,
2004].
Clculo con incertidumbres relativas
Si el modelo matemtico se compone de productos de las magnitudes de entrada
^' , de acuerdo a la ecuacin 1.42.
2
tY^J , , ^ [ BeMP
'JY^' [
[1 42]
donde BeMP es una constante y los exponentes ' son constantes reales
(positivas o negativas), el clculo (numrico) de la incertidumbre combinada se
facilita utilizando incertidumbres relativas. Los coeficientes de sensibilidad en este
caso son ' , y la ley de propagacin de incertidumbre representada por la
ecuacin 1.39 para calcular la incertidumbre combinada relativa a%,#U Y\[ se

simplifica de acuerdo a la ecuacin 1.43.
%,#U Y\[
X0 Y[
v

'J' #U YZ' [ 'J '
XYR2 [ v
R2
[1.43]
Un caso particular muy comn es que todos los exponentes ' son +1 o -1, o sea
` es un producto o cociente de las magnitudes de entrada. Puesto que en este

caso los coeficientes de sensibilidad son 1, la incertidumbre combinada relativa
a%,#U Y\[ es la suma geomtrica de las incertidumbres relativas de las magnitudes
de entrada, como indica la ecuacin 1.44 [CEM, 2008; Lazos y Schmid, 2004].
v
a%,#U Y\[
'J a#U YZ' [
1.1.3.3.6
[1.44]
Incertidumbre expandida
La forma de expresar la incertidumbre como parte de los resultados de la

medicin depende de la conveniencia del usuario. A veces se comunica
simplemente como la incertidumbre estndar combinada, otras ocasiones como
un cierto nmero de veces tal incertidumbre, algunos casos requieren se exprese
en trminos de un nivel de confianza dado, etc. En cualquier caso, es
55
indispensable comunicar sin ambigedades la manera en que la incertidumbre

est expresada (Lazos y Schmid, 2004).
Factor de cobertura y nivel de confianza
La incertidumbre estndar % tiene un valor igual a la desviacin estndar de la
funcin de distribucin del mensurando. El intervalo centrado en el mejor
estimado del mensurando contiene el valor verdadero con una probabilidad de
68% aproximadamente, bajo la suposicin de que los posibles valores del

mensurando siguen una distribucin normal. Generalmente se desea una
probabilidad mayor de 68%, lo que se obtiene expandiendo este intervalo por un
factor K, llamado factor de cobertura. El resultado se llama incertidumbre
expandida /, su clculo se realiza a partir de la ecuacin 1.45.
/ K %
[1.45]
La incertidumbre expandida / indica entonces un intervalo, llamado intervalo de
confianza, que representa una fraccin de los valores que puede probablemente
tomar el mensurando. El valor de es llamado el nivel de confianza y puede ser

elegido a conveniencia. En el medio industrial, a menudo se elige el nivel de
confianza de manera tal que corresponda a un factor de cobertura como un

nmero entero de desviaciones estndar en una distribucin normal. Por ejemplo,
K = 1 corresponde a = 68,27 %, K = 2 corresponde a = 95,45% y K = 3 a =
99,73 %. La relacin entre el factor de cobertura K y el nivel de confianza
depende de la distribucin de probabilidad del mensurando. Por ejemplo, en una

distribucin rectangular =57,74 % si K =1, y para logar un nivel de confianza de
95,45 % se requiere multiplicar por K =1,65. (Schmid y Lazos, 2004).

Distribucin @ de Student
Frecuentemente, los valores del mensurando siguen una distribucin normal. Sin
embargo, el mejor estimado del mensurando, la media (obtenida por muestreos
de M mediciones repetidas) dividida entre su desviacin estndar, sigue una
distribucin llamada de Student, la cual refleja las limitaciones de la informacin
disponible debidas al nmero finito de mediciones. Esta distribucin coincide con
56
la distribucin normal en el lmite cuando M tiende a infinito, pero difiere
considerablemente de ella cuando M es pequeo.
La distribucin de Student es caracterizada por un parmetro llamado nmero
de grados de libertad. Por lo anterior, el intervalo correspondiente al nivel de

confianza , dado antes por la ecuacin 1.45, se calcula ahora por la ecuacin
1.46.
/ Y[ %
[1.46]
El factor Y[ indica los lmites del intervalo correspondiente al nivel de confianza
de la distribucin y su valor siempre es mayor o igual que el factor K (tomado de

la distribucin normal).
Cuando se combinan las fuentes de incertidumbre con sus respectivas
distribuciones para obtener la incertidumbre combinada % del mensurando, el
Teorema del Lmite Central permite aproximar la distribucin resultante por una
distribucin normal. La aproximacin ser mejor mientras ms grande sea el
nmero de fuentes de incertidumbre y sus contribuciones sean similares,
independientemente de la forma particular de sus distribuciones. Nuevamente, la
disponibilidad limitada de informacin hace necesario el uso de la distribucin de

Student para determinar la incertidumbre expandida de manera rigurosa (con la
suposicin de que los valores del mensurando obedecen una distribucin normal)
Grados de libertad
De cierta manera el nmero de grados de libertad asociado a una distribucin
de una magnitud (^' o `) puede considerarse una medida de incertidumbre de la
incertidumbre de esa magnitud. Entre mayor sea la estimacin de la

incertidumbre ser ms confiable.
El nmero efectivo de grados de libertad del mensurando considera el nmero
de grados de libertad ' de cada fuente de incertidumbre. El nmero efectivo de

grados de libertad se calcula segn la ecuacin de Welch-Satterthwaite. Esta
57
ecuacin puede escribirse en trminos de la relacin entre la contribucin de la

fuente k y la incertidumbre combinada como se indica en la ecuacin 1.47. Si el
valor de resultante no es entero, generalmente se considera como el
entero menor ms prximo.

X0 Y[
2 Y[
2
2
[1.47]
En la estimacin de incertidumbres por el mtodo tipo A, ' depende directamente

del nmero de datos considerados y disminuye conforme el nmero de
parmetros estimados a partir de los mismos datos. La repetibilidad de una
medicin, estimada por la desviacin estndar experimental de M lecturas tiene
M f 1 grados de libertad. Una regresin lineal de E puntos mediante una ecuacin
de parmetros tiene E f grados de libertad. Si la incertidumbre se estima
por un mtodo tipo B, la determinacin del nmero de grados de libertad implica el

criterio del metrlogo soportado por su experiencia. Es posible tomar los grados
de libertad ' de contribuciones tipo B como infinitos (), es decir sus valores son
conocidos con un valor de certeza muy alto [CEM, 2008; Lazos y Schmid, 2004].
Un anlisis de la ecuacin 1.46 muestra el dominio de las fuentes con pocos

grados de libertad en el clculo de , sobre todo de aquellas cuyas
contribuciones son grandes a la incertidumbre combinada. De hecho una fuente

cuya contribucin es alta y con pocos grados de libertad, es determinante del
valor de . Por todo ello, la frmula para hallar los grados efectivos de libertad
se reduce a la ecuacin 1.48.

X0 Y[
6
[1.48]
Resumiendo, si la funcin de distribucin de probabilidad del mensurando \ es
normal, de manera rigurosa la incertidumbre expandida calculada con la ecuacin

1.45, se calcula como se indica en la ecuacin 1.49
/ %
[1.49]
58
Donde:
Factor derivado de la distribucin de Student a un nivel de confianza
Grados de libertad
Comparando la ecuacin 1.45 con la ecuacin 1.49, es evidente que el factor de
cobertura K de la ecuacin 1.45 corresponde al valor de . Frecuentemente,
cuando es suficientemente grande, no se encuentra diferencia significativa en
los resultados numricos obtenidos con la ecuacin 1.49 para un dado de
aqullos obtenidos con la ecuacin 1.45 tomando K de la distribucin normal para

el mismo [CEM, 2008; Lazos y Schmid, 2004].
1.1.3.3.7
Expresin de la incertidumbre
Es difcil asegurar un valor preciso de la incertidumbre debido a las mltiples

aproximaciones realizadas durante su estimacin. Por ello, generalmente los
valores de para = 95% se aproximan por los que corresponden a
para = 95,45% con el fin de obtener un valor de K = 2,00 en el lmite de una
distribucin normal. Los valores de para 95,45% se muestran en la
tabla 1.3.
Tabla 1.3: Valores de para 95,45%

(Lazos
10
20
50
100
13,97
4,53
3,31
2,87
2,65
2,52
2,43
2,37
2,32
2,28
2,13
2,05
2,025
2,00
y Schmid, 2004)
La expresin de la incertidumbre expandida / incluye su indicacin como un
intervalo centrado en el mejor estimado \ del mensurando, la afirmacin de que
es del 95% (o el valor elegido) aproximadamente y el nmero efectivo de grados

de libertad, cuando sea requerido. Una manera de expresar el resultado de la
medicin es de acuerdo a la ecuacin 1.50.
` \/
[1.50]
59
El nmero de cifras significativas en la expresin de la incertidumbre es

generalmente uno, o dos cuando la exactitud es alta (si la primera cifra
significativa es uno o dos, cabe la posibilidad de usar un dgito ms para evitar la
prdida de informacin til). Adems debe asegurarse que el nmero de cifras
significativas del valor del mensurando sea consistente con el de la incertidumbre
1.1.3.4
Ejemplos de clculo de las diferentes contribuciones a la incertidumbre en

funcin de la informacin disponible habitualmente.
Certificado de calibracin
Se utiliza la informacin del certificado de calibracin del equipo (o del patrn). En
el certificado debe figurar el valor del error como de la incertidumbre expandida, /,
para cada uno de los puntos del campo de medida donde se ha realizado la
calibracin. La incertidumbre debida a la calibracin de un equipo se calcula a
partir de la ecuacin 1.51 (Garca y Surez, 2005).
TU'q#T%')
701
[1.51]
Donde:
/%TU Incertidumbre expandida que aparece en el certificado de calibracin
K
Factor de cobertura
En caso de no aplicar la correccin del certificado a los valores obtenidos por el
equipo, existe otra componente, la incertidumbre de correccin, $##%%') que se
calcula de acuerdo a la ecuacin 1.52 (Garca y Surez, 2005).

$##%%')
2
[1.52]
Donde:
D' Correccin que aparece en el certificado de calibracin (o error, ya que se
toma en valor absoluto).
60
Deriva
Inicialmente, cuando todava se desconoce sta, se puede sustituir por la
exactitud del instrumento de medida (accuracy, clase, etc.) que viene dada por
el fabricante, en algunos casos, como deriva en un perodo, y se interpreta como
la mxima variacin de sus caractersticas de medida a lo largo de un tiempo por
todas las causas no especificadas de otra forma. Por su carcter de lmite de
desviacin estndar asociada se calcular como la exactitud divida para 3 de
acuerdo a la ecuacin 1.53.

:#'T
RT%*'*X&
[1.53]
Cuando se tiene suficiente historia de un equipo, la exactitud puede ser sustituida

por la mxima deriva, estimada como la diferencia entre dos certificados
sucesivos, de acuerdo a la ecuacin 1.54.
:#'T
|6 l6 |
[1.54]
Donde:
D) f D)lJ Mayor de las diferencias entre correcciones de calibraciones
consecutivas del equipo. Esta resta debe hacerse teniendo en
cuenta los signos de las correcciones. Una vez hecha la resta, se

toma su valor absoluto (Garca y Surez, 2005).
Temperatura
Incertidumbre debida a la diferencia entre la temperatura de calibracin (o
especificacin del fabricante) y la de trabajo. Si no viene expresamente definida
por el fabricante, ni se conoce o espera algn tipo de influencia, no se considera
como contribucin, siempre que se trabaje dentro de los mrgenes de
temperatura para los que est garantizado. Su contribucin a la incertidumbre se
considerar como un lmite mximo, salvo que se especifique de otra forma, y por
lo tanto se divide para 3. En muchos casos el fabricante lo que da es un
61
coeficiente mximo de variacin de la sensibilidad con la temperatura. En este

caso el lmite mximo se estima de acuerdo a la ecuacin 1.55.
H(#T*X#T
HH
[1.55]
Donde:
D Deriva de sensibilidad
Diferencia mxima entre la temperatura de calibracin del equipo y la
temperatura al momento en que se realiza la medida.
^ Valor medido por el instrumento de la magnitud de entrada.

Resolucin
En los equipos digitales se considera como resolucin el dgito menos significativo
que pueda ser claramente ledo por el operador. De acuerdo con la definicin de
resolucin, se asigna una distribucin rectangular. Su contribucin se calcula de
acuerdo a la ecuacin 1.56.
!8$UX%')
#8$UX%')
[1.56]
En equipos anlogos se considera como la fraccin ms pequea de una escala

de divisin que pueda ser estimada. En general, puede estar considerada en la
del operador y criterio de medida, relacionada con su apreciacin de la divisin de
escala.
1.1.4
1.1.4.1
MATERIALES DE REFERENCIA CERTIFICADOS (MRC)

Definicin
Uno de los principales parmetros a verificar en la validacin de un mtodo

analtico es la exactitud de los resultados proporcionados por dicho mtodo. La
exactitud, suma de la veracidad y la precisin, se comprueba asegurando la
trazabilidad de los resultados proporcionados por el mtodo analtico a una
referencia. Por lo tanto, un elemento clave en el aseguramiento de la trazabilidad
62
de los resultados es la utilizacin de una correcta referencial. Desde un punto de

vista prctico, la mejor referencia posible la constituyen los materiales de
referencia certificados (Riu, 2004).
Los materiales de referencia (MR) y los materiales de referencia certificados
(MRC) hacen posible la transferencia de los valores de las magnitudes asignadas
o medidas (fsica, qumica, biolgica o tcnica), entre un lugar y otro. Son
ampliamente usados para la calibracin de los instrumentos de medicin, para la
evaluacin o verificacin de los mtodos de ensayo anlisis, para el
aseguramiento de la calidad de las mediciones, etc. Todas las clases de MR y
MRC juegan un papel importante y creciente en las actividades de la
normalizacin nacional e internacional, en los ensayos de aptitud y en la
acreditacin de laboratorios (Riu, 2004).
Segn el Vocabulario Internacional de Metrologa, un material de referencia (MR)
es un material suficientemente homogneo y estable con relacin a una o ms
propiedades, usado en calibracin, en la asignacin de un valor a otro material, o
en el aseguramiento de la calidad. Asimismo, define a un material de referencia
certificado como, material de referencia acompaado por los documentos
emitidos por una autoridad, con referencia a procedimientos vlidos para obtener
un valor de la propiedad especificada con incertidumbre y trazabilidad (CEM,
2008).
La principal diferencia entre un MR y un MRC es el certificado asociado al MRC
emitido por un organismo competente. Este certificado garantiza que un MRC
sea, desde un punto de vista prctico, la mejor referencia posible en la verificacin
de la trazabilidad de un mtodo analtico. Por lo tanto, un MRC es un material,
parecido a las muestras reales que estamos analizando en nuestro laboratorio,
del cual un organismo competente nos certifica y garantiza la cantidad del
mensurando (por ejemplo concentracin de un determinado analito) que
queremos analizar con nuestro mtodo analtico (Riu, 2004).
63
1.1.4.2
Propiedades de los Materiales de Referencia Certificados
1.1.4.2.1
Trazabilidad
El MRC debe ser trazable a patrones de referencia nacionales o internacionales.

Esto debe quedar perfectamente reflejado en el certificado que aporte el
organismo productor. Desde un punto de vista prctico, no existe un
procedimiento normalizado para asegurar la trazabilidad de los parmetros de
inters en un MRC, y cada organismo de certificacin tiene sus propios mtodos
de trabajo. Sin embargo, la trazabilidad de un MRC exige la utilizacin de varios
mtodos independientes, es decir, que se encuentre el valor de la propiedad que
se desea certificar utilizando diversos mtodos analticos cuyos principios de
medida sean completamente distintos (Riu, 2004).
1.1.4.2.2
Homogeneidad
ste es un requisito indispensable, y significa que un MRC ha de presentar el

mismo valor de la propiedad certificada dentro de una misma unidad y entre todas
las unidades del MRC. Desde un punto de vista prctico, un MRC puede ser
suficientemente homogneo respecto a la propiedad de inters aunque no lo sea
respecto a otras propiedades (siempre y cuando esta falta de homogeneidad no
suponga una influencia significativa en la incertidumbre asociada a la propiedad
de inters). Obviamente, los lquidos y gases presentan menos problemas de
homogeneidad que los materiales slidos, lo que no es inconveniente para
encontrar en el mercado (Riu, 2004).
1.1.4.2.3
Estabilidad
El material debe ser estable durante las condiciones de envo, y el usuario debe
conocer durante cunto tiempo permanece estable el MRC desde su recepcin y
desde que se abre el recipiente. La estabilidad tiene que referirse tanto a las
propiedades certificadas como a la matriz. Algunos MRC pueden verse afectados
por numerosos factores como la luz, la temperatura o la exposicin a la
atmsfera, por lo que el fabricante deber indicar las condiciones de transporte,
manejo y almacenamiento recomendadas para el material (Riu, 2004).
64
1.1.4.2.4
Similitud con las muestras reales
El MRC ha de ser lo ms parecido posible, tanto en la composicin de la matriz

como en el valor de la propiedad a determinar, a las muestras reales que sern
posteriormente analizadas con nuestro mtodo analtico. Como un MRC que se
asemeje exactamente a las muestras generalmente ser imposible de encontrar,
se puede utilizar un MRC que sea parecido (Riu, 2004).
1.1.4.2.5
Incertidumbre
Los valores certificados de la propiedad deseada en el MRC deben ir

acompaados por sus valores de incertidumbre. El nivel de incertidumbre
asociado tambin informa de la calidad de un MRC en concreto (Riu, 2004).
1.1.5
1.1.5.1
CALIBRACIN
Definicin
De acuerdo con el Vocabulario de Metrologa Internacional, la calibracin es la

operacin que bajo condiciones especificadas, en una primera etapa establece
una relacin entre los valores de la magnitud y sus incertidumbres de medida
obtenidos de los patrones de medida y las correspondientes indicaciones con sus
incertidumbres asociadas, y, en una segunda etapa, usa esta informacin para
establecer una relacin que permita obtener un resultado de medicin a partir de
una indicacin (CEM, 2008).
Una calibracin puede expresarse por una declaracin, una funcin de
calibracin, un diagrama de calibracin, una curva de calibracin o una tabla de
calibracin. En algunos casos puede dar lugar a una correccin aditiva o
multiplicativa de la indicacin con su respectiva incertidumbre (Atienza et al.,
2001).
65
1.1.5.2
Sistema de Calibracin
1.1.5.2.1
Objetivo
El objetivo bsico de la calibracin es la determinacin del grado de incertidumbre

de las medidas efectuadas con el equipo.
1.1.5.2.2
Alcance de la calibracin
El material que es sometido a calibracin se clasifica en:

1.1.5.2.2.1
Patrones y materiales de referencia
Este material es de la mxima calidad metrolgica disponible en el laboratorio. Es

calibrado y/o certificado por entidades externas que garanticen la trazabilidad de
dichas calibraciones a patrones nacionales e internacionales. Dicho material slo
ser empleado para la calibracin, verificacin interna del equipamiento y/o
validacin de mtodos analticos.
1.1.5.2.2.2
Equipos y/o instrumentacin destinada al anlisis
Es calibrado bien con los patrones y/o materiales de referencia que posea el
Laboratorio, o bien externamente cuando no se disponga de stos (como en el
caso anterior, por entidades que aseguren la trazabilidad de las calibraciones)
(Atienza et al., 2001).
1.1.5.2.3
Procedimiento de calibracin.
Se elaboran procedimientos especficos para todos aquellos equipos que se han

de calibrar internamente. La estructura de los documentos de calibracin y/o
verificacin deben contener los siguientes apartados:
-
Periodicidad
Materiales de referencia
Patrones
Reactivos
66
Preparacin de reactivos y de patrones de trabajo a partir de los patrones o

materiales de referencia correspondientes
Instrumentos necesarios
Procedimiento (en el cual se debe indicar, si es preciso, las condiciones

previas al proceso, tales como tiempo de estabilizacin, necesidad de
limpieza o ajustes preliminares).
As mismo, el proceso de calibracin implica los siguientes puntos:

-
Seleccin de los puntos del rango de medida del instrumento en los que se va
a realizar la calibracin.
Comparacin del valor obtenido con el equipo en cada uno de los puntos
seleccionados y del proporcionado por el patrn o material de referencia que
posea el Laboratorio.
Realizacin de varias repeticiones para cada una de las medidas.
Clculo de la incertidumbre en cada uno de los puntos.
Emisin del certificado de calibracin correspondiente.
Identificacin del estado de calibracin del equipo, segn los resultados

obtenidos en sta (Atienza et al., 2001).
1.1.5.2.4
Certificado de Calibracin
Cuando el personal del laboratorio realiza la calibracin, se genera un Certificado

de Calibracin que debe archivarse de acuerdo con las instrucciones especficas
contenidas en el Sistema de Calidad del laboratorio. Si un organismo ajeno al
laboratorio extiende algn documento o certificado de calibracin, este debe
contener la misma informacin, completando este, si fuera necesario con un
documento auxiliar elaborado por el laboratorio (Atienza et al., 2001).
1.1.5.2.5
Periodicidad de calibracin
La periodicidad de la calibracin de un determinado equipo debe especificarse en

la correspondiente ficha de equipo. Para seleccionar el intervalo entre
calibraciones se deben tener en cuenta las instrucciones del fabricante, la
legislacin vigente, las recomendaciones, la bibliografa y la propia experiencia. El
67
responsable tcnico del equipo puede determinar la conveniencia de calibraciones

adicionales por circunstancias no contempladas en el plan de calibracin (Atienza
et al., 2001).
1.1.5.2.6
Periodicidad de verificacin
La periodicidad de las operaciones de verificacin se debe especificar en la

correspondiente ficha de equipo. Para el establecimiento de los periodos de
verificacin se tienen en cuenta los mismos criterios que para la calibracin. La
verificacin generalmente es ms frecuente que la calibracin, pudiendo
suprimirse en determinados equipos. Por otra parte, es intil realizar una
verificacin si el equipo no est en uso (Atienza et al., 2001).
1.1.6
1.1.6.1
TRAZABILIDAD
Definicin
El Vocabulario de Metrologa Internacional (VIM) define la trazabilidad como,

propiedad de un resultado de medicin por la cual el resultado puede ser
relacionado a una referencia establecida mediante una cadena ininterrumpida y
documentada de calibraciones, cada una de las cuales contribuye a la
incertidumbre de medida. Esta cadena de comparaciones permite tener
confianza en los resultados obtenidos ya que, como nuestros resultados son
comparables a una referencia, podemos asegurar que no se comete ningn error
sistemtico significativo en ninguna de las etapas del mtodo analtico. Adems,
la verificacin de la trazabilidad permite asegurar que nuestros resultados son
comparables a los obtenidos por otros laboratorios [CEM, 2008; Maroto, 2002].
1.1.6.2
Elementos que conforman la trazabilidad
La trazabilidad de los resultados de las mediciones se caracteriza a travs de seis

elementos esenciales:
68
1.1.6.2.1
Una cadena ininterrumpida de comparaciones.
Se remite a referencias determinadas aceptables para las partes, por lo general

un patrn nacional o internacional.
1.1.6.2.2
Incertidumbre de la medicin
La incertidumbre de medicin para cada paso de la cadena de trazabilidad se

deber calcular o estimar de acuerdo con mtodos acordados (establecidos en la
GUM) y se deber declarar de modo que se pueda calcular o estimar una
incertidumbre total para la cadena completa.
1.1.6.2.3
Documentacin
Cada paso de la cadena se debe realizar de acuerdo con procedimientos

documentados y generalmente reconocidos; los resultados se debern registrar.
1.1.6.2.4
Competencia Tcnica
Los laboratorios u organismos que ejecuten uno o ms pasos de la cadena

debern presentar evidencias de su competencia tcnica (por ejemplo, demostrar
que estn acreditados).
1.1.6.2.5
Referencia a las unidades del SI
La cadena de comparaciones terminar en los patrones primarios para la

realizacin de las unidades del SI; donde sea posible.
1.1.6.2.6
Intervalos de calibracin
Las calibraciones se debern repetir a intervalos apropiados; la duracin de estos

intervalos depende de una serie de variables (por ejemplo, la incertidumbre
requerida, la frecuencia y modo de uso, la estabilidad de los equipos, entre otros)
(OAE, 2008).
69
1.1.6.3
Trazabilidad en los anlisis qumicos
El resultado de medida qumico se obtiene normalmente como la suma de

diversas etapas que pueden ir desde la toma de muestra hasta los clculos
finales. Entonces, se debera tener la trazabilidad en todas las etapas, pero
frecuentemente es imposible determinar la trazabilidad de cada etapa. Esto
contrasta con los resultados de tipo fsico. En el campo de las medidas fsicas, la
trazabilidad se consigue mediante el uso de patrones certificados e instrumentos
calibrados que se interconectan entre si hasta llegar al patrn fsico fundamental,
por ejemplo: el kilogramo, el metro o el segundo. No obstante, en el anlisis
qumico es muy difcil llegar a travs de una cadena ininterrumpida de
comparaciones a la unidad fundamental de materia en el sistema internacional
(SI) de unidades, el mol, ya que en la mayora de los procedimientos analticos no
es posible asegurar la trazabilidad de cada una de sus etapas. Esto es debido a
que el tipo de muestra puede afectar mucho a los resultados. Adems, la
naturaleza de los errores es diferente en medidas qumicas y fsicas: en las fsicas
predominan los errores sistemticos mientras que en las qumicas predominan los
aleatorios. La alternativa en el anlisis qumico consiste en trazar globalmente los
resultados obtenidos con el procedimiento analtico a un valor de referencia y
evaluar si los resultados obtenidos con dicho procedimiento son comparables a
los proporcionados por la referencia utilizada [Boqu et al., 2001; Maroto, 2002].
1.1.6.3.1
Patrones adecuados
La trazabilidad de los resultados analticos se suele verificar globalmente

utilizando un valor de referencia. Este valor de referencia puede ser, por ejemplo,
la concentracin de un material de referencia certificado (MRC), el valor de
consenso obtenido en un ejercicio interlaboratorio o la concentracin encontrada
con un mtodo de referencia. Cada una de estas referencias tiene, tericamente,
un nivel de trazabilidad a la unidad fundamental, el mol [Boqu et al., 2001;
Maroto, 2002].
En la figura 1.12, se puede observar una clasificacin de referencias y la conexin
de cada una de ellas con la pirmide metrolgica. Como se puede observar, la
70
mejor referencia la constituyen los mtodos definitivos o absolutos. Es decir, la

mejor forma de verificar la trazabilidad de los resultados, es comparar los
resultados del anlisis de una muestra representativa utilizando el procedimiento
analtico (con el que se realizar los anlisis sobre futuras muestras desconocidas
en el laboratorio), con los resultados del anlisis de la misma muestra empleando
un mtodo definitivo. Los mtodos definitivos son aquellos que por definicin se
pueden trazar directamente al mol, es decir, estn directamente ligados al sistema
internacional de unidades. Los mtodos definitivos se utilizan muy poco en la
prctica para verificar la trazabilidad. La siguiente referencia en orden de
importancia metrolgica, son los material de referencia certificados (MRC). Los
principales inconvenientes de los materiales de referencia son su elevado precio
Fig 1.12: Relacin entre la pirmide metrolgica y diversas referencias utilizadas en

medidas qumicas para verificar la trazabilidad
(Maroto, 2002)
La siguiente referencia en orden de importancia lo constituyen los ejercicios

interlaboratorio. Existen tres tipos principales de ejercicios interlaboratorio, de
acuerdo a los objetivos que quieren conseguirse: los ensayos de aptitud, los
ejercicios colaborativos y los ejercicios de certificacin de materiales de
referencia. Los ms utilizados son los ensayos de aptitud, los cuales evalan el
buen funcionamiento de los laboratorios para obtener una visin general de los
71
errores en un grupo de laboratorios, miden la calidad de un laboratorio individual,

aseguran que cada grupo de laboratorios consiguen una exactitud aceptable y
que los errores estn bajo control estadstico y estimulas el inters en la calidad
de los datos. En los ejercicios colaborativos, el objetivo es la evaluacin de un
mtodo de anlisis, y en los ejercicios de certificacin se intenta asignar un valor a
un material de referencia (Boqu et al., 2001).
En un nivel inferior de jerarqua de referencias, se encuentras los mtodos de
referencia. En este caso, la verificacin de la trazabilidad se lleva a cabo
comparando los resultados obtenidos analizando una muestra representativa
mediante el procedimiento de ensayo que se desea validar con los obtenidos
analizando la misma muestra mediante un mtodo de referencia, que suele ser un
mtodo normalizado o un mtodo oficial de anlisis (validado por alguna
organizacin, generalmente de reconocido prestigio). Las cuatro referencias hasta
ahora mencionadas, constituyen las mejores referencias que pueden ser
utilizadas en el proceso de verificacin de la trazabilidad de los resultados. Una de
las referencias ms utilizadas, a pesar de encontrarse en uno de los niveles
inferiores dentro de la escala de referencias. Esta tcnica consiste en analizar una
muestra representativa a la cual se le ha aadido una cantidad conocida del
analito en estudio. La trazabilidad se verifica a travs del porcentaje de analito
recuperado, es decir, la relacin entre la cantidad encontrada y la cantidad
adicionada. Existen diferentes modalidades, puesto que la muestra adicionada
puede contener o no de antemano el analito en cuestin. Adems, la adicin
puede hacerse a uno o varios niveles de concentracin (Boqu et al., 2001).
1.1.7
NORMA NTE INEN ISO/IEC 17025:2006
Con la finalidad de promover el aseguramiento de la calidad en los laboratorios

dentro de la Unin Europea (UE) se lleg al establecimiento de la norma EN
45001 referente a los criterios tcnicos generales para el funcionamiento de los
laboratorios de ensayo (Isol, 2002).
La elaboracin de la nueva norma ISO/IEC 17025 es producto de la experiencia
acumulada en la aplicacin de la Gua ISO/IEC 25 y la Norma Europea EN 45001,
72
a las cuales anula y sustituye. En ella describe todos los requisitos que los
laboratorios de ensayo y calibracin deben cumplir para demostrar que poseen un
sistema de gestin, son tcnicamente competentes y son capaces de generar
resultados tcnicamente vlidos. Esta norma seala, el creciente uso de los
sistemas de gestin ha producido un aumento de la necesidad de asegurar que
los laboratorios que forman parte de organizaciones mayores o que ofrecen otros
servicios, puedan funcionar de acuerdo con un sistema de gestin de la calidad
que se considera que cumple la Norma ISO 9001 as como esta Norma
Internacional (NTE INEN-ISO/IEC 17025:2006).
Aunque la ISO 17025 incluye muchas de las caractersticas y requerimientos de la
ISO 9001, su enfoque es especfico en competencia tcnica para verificacin y
calibracin, es decir, requiere de un mayor grado de competencia tcnica que los
requisitos impuestos por ISO 9001. Esta norma representa, para los organismos
de evaluacin de la conformidad u organismos de acreditacin, organismos de
calibracin o ensayos, entidades de inspeccin, etc., lo que la serie ISO 9000
representa para empresas. Sin embargo, la ISO 17025 requiere de un mayor
grado de competencia tcnica que los requisitos impuestos por ISO 9001 (Isol,
2002).
Es importante resaltar, que la aceptacin de los resultados de ensayo y de
calibracin entre pases resultar, ms fcil si los laboratorios cumplen esta
Norma Internacional, y, obtienen la acreditacin de organismos que han firmado
acuerdos de reconocimiento mutuo con organismos equivalentes que utilizan esta
Norma Internacional en otros pases. El uso de esta Norma Internacional facilitar
la cooperacin entre los laboratorios y otros organismos y ayudar al intercambio
de informacin y experiencia, as como a la armonizacin de normas y
procedimientos (NTE INEN-ISO/IEC 17025:2006).
Esta Norma se constituye como la gua para la evaluacin de la conformidad de
los requisitos para calidad y competencia aplicable a todos los laboratorios,
independientemente de la naturaleza del ensayo y/o calibracin que se realice.
Proporciona herramientas y la estructura para que el laboratorio pueda generar
confianza a sus clientes mejorando su competitividad y productividad.
73
2 METODOLOGA
2.1
PUESTA A PUNTO DE LOS MTODOS
2.1.1
NECESIDAD ANALTICA
El anlisis se considera hoy en da un proceso mediante el cual se obtiene

informacin. Se realizan millones de anlisis cada da en el mundo en los mbitos
ms variados: anlisis de productos, manufacturados, anlisis medioambientales,
anlisis clnicos, qumico y fsicos, etc., en todos ellos se requiere una confianza
en los resultados obtenidos. La validacin de las metodologas analticas, junto
con otras actividades englobadas en el rea del aseguramiento de la calidad,
permite demostrar a los laboratorios, que sus mtodos analticos proporcionan
resultados fiables y adecuados para su finalidad o propsito perseguidos; es
decir, permiten conseguir calidad, otorgando un grado elevado de confianza
necesaria entre los resultados de los anlisis qumicos.
Desde el punto de vista econmico, los costes asociados al proceso analtico
suelen ser elevados y surgen costes adicionales ligados a las decisiones que se
toman sobre la base de los resultados obtenidos. La validacin es el proceso que
establece, mediante estudios de laboratorio, que los parmetros de desempeo
del mtodo de ensayo cumplen las especificaciones relacionadas con el uso
previsto de los resultados del ensayo.
Con este referente, el laboratorio del Centro de Investigaciones y Control
Ambiental (CICAM), advirti la necesidad de satisfacer las expectativas de los
clientes en cuanto a la calidad de los ensayos, razn por la cual, incluy en sus
actividades la validacin de cuatro de sus mtodos de anlisis para la
determinacin de: Alcalinidad Total, Conductividad, Demanda Bioqumica de
Oxgeno y Slidos Totales disueltos, que fueron el propsito de la presente
investigacin.
74
2.1.2
MTODO
Para la seleccin de los mtodos de anlisis a validar, se consider como

referencia bibliogrfica el Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater, 21th edition, libro del que dispone el laboratorio para la ejecucin de
sus anlisis. Asimismo, de acuerdo con la norma NTE INEN - ISO 17025:2006
que indica en la Nota 3 del literal 5.4.5.3, La validacin es siempre un equilibrio
entre los costos, los riesgos y las posibilidades tcnicas, se consider adems, la
disponibilidad de los recursos instrumentales con los que cuenta el laboratorio.
Los mtodos seleccionados con la respectiva codificacin con la que se
encuentran en la referencia bibliogrfica se presentan a continuacin:
-
Alcalinidad Total, 2320 B. Mtodo de Titulacin
Conductividad, 2510 B. Mtodo Potenciomtrico
DBO5, 5210 B. Demanda Bioqumica de Oxgeno por el Mtodo Winkler
STD, 2540 C. Slidos Totales Disueltos secados a 180 C
2.1.3
2.1.3.1
PROCEDIMIENTOS DE ANLISIS
Pruebas previas
La validacin es una actividad que se debe llevar a cabo sobre la versin final del
mtodo bajo condiciones de operacin definidas, de aqu la necesidad de realizar
la puesta a punto del mtodo. La puesta a punto de un mtodo es una actividad
previa a la validacin que debe realizar el laboratorio para llegar a tener un
conocimiento general del mismo. Con esta actividad se consigue que el mtodo
funcione dando unas respuestas razonablemente aceptables y consistentes.
Con ayuda de la experiencia del laboratorio en la ejecucin de los anlisis y
fundamentados en la bibliografa que la presente investigacin demand, se
realiz la puesta a punto previa a la validacin de cada mtodo. Es importante
que se entienda, que no se est hablando de un cambio en el procedimiento
establecido en la bibliografa, sino, por el contrario, se trata de ser ms
especficos en el mismo, a fin de reflejar las condiciones reales de la aplicacin de
75
los mtodos en el laboratorio y lograr su adecuado funcionamiento. Tampoco se

debe confundir esta actividad, con la optimizacin del mtodo, que no fue el
motivo de esta investigacin.
Las pruebas previas para la puesta a punto que se realiz en cada mtodo para
cumplir con lo mencionado se describen a continuacin:
En el ensayo para la determinacin de la alcalinidad total, la formacin de cido
carbnico en la muestra debido a la posible solubilidad del Dixido de Carbono
(presente en el aire) durante el desarrollo del ensayo en un sistema abierto,
podra reducir el pH de la muestra y consecuentemente alterar el resultado. Para
determinar si existen diferencias significativas entre los resultados, al realizar el
anlisis en un sistema abierto o un sistema cerrado, se realiz un contraste de
significacin de los datos obtenidos a partir de una solucin preparada de 62,5
mgCaCO3/L de concentracin. Se obtuvieron tres lecturas de la solucin
analizadas en un sistema abierto y tres lecturas analizadas en un sistema
cerrado. La modificacin del sistema consisti en colocar un tapn en el vaso de
titulacin durante el desarrollo del ensayo. Con las lecturas obtenidas se calcul
los estadstico y para determinar la existencia de diferencias significativas
(APHA et al., 2005).
En el ensayo para la determinacin de DBO5, el uso de agua del machngara

para la preparacin del inculo supone la necesidad de utilizar un inhibidor de
nitrificacin en el anlisis, para todas las muestras sin importar su procedencia,
debido a la naturaleza del inculo utilizado para el anlisis. Para determinar la
necesidad del uso o no del inhibidor, se realiz un contraste de significacin de
los datos obtenidos de una solucin de 20 mg/L de concentracin. Se tomaron
tres lecturas de la solucin empleando el inhibidor de nitrificacin (piridina), y tres
lecturas sin adicin del inhibidor. Con las lecturas obtenidas se calcul los
estadsticos y para determinar la existencia de diferencias significativas.
En el ensayo para la determinacin de los slidos totales disueltos, el enfriamiento

de los crisoles en el desecador es un factor importante del ensayo, ya que este
influye en el peso de los de los crisoles y posteriormente en el clculo de los
76
resultados. Para determinar el tiempo adecuado de enfriamiento de los crisoles en

el desecador, se sacaron los crisoles de la estufa y se colocaron en el desecador;
se tomaron los pesos de los crisoles cada media hora de enfriamiento. La
seleccin del tiempo adecuado de enfriamiento, se bas en un criterio lgico, las
medidas obtenidas deban mostrar una estabilizacin en el peso del crisol.
En el ensayo para la determinacin de la conductividad, no fue necesario realizar
ninguna prueba previa, debido a la simplicidad del anlisis, el mismo que no
presenta interferencias tal como se puede observar en su procedimiento descrito
ms adelante.
A partir de los resultados obtenidos en estas pruebas, los cuales se presentan en
el captulo 3, se estableci para cada mtodo lo siguiente: realizar el anlisis de
alcalinidad total en un sistema abierto. Utilizar el inhibidor de nitrificacin (piridina)
para todas las muestras sin importar su procedencia en el ensayo de DBO y para
el ensayo de STD emplear 2 horas y media en el enfriamiento de lo crisoles, antes
de pesarlos.
A continuacin se detallan los procedimientos establecidos para cada uno de los
mtodos de anlisis en funcin de lo establecido.
2.1.3.2
Procedimiento del mtodo para la determinacin de la Alcalinidad Total
2.1.3.2.1
Fundamento terico
La alcalinidad de un agua puede definirse como su capacidad para neutralizar

cidos, su capacidad para reaccionar con iones hidrgeno, su capacidad para
aceptar protones o como la medida de su contenido total de sustancias alcalinas
YOH l [. En aguas naturales, la alcalinidad se debe generalmente a la presencia de
tres clases de compuestos: carbonatos, bicarbonatos e hidrxidos. En algunas

aguas es posible
encontrar otras clases de compuestos (boratos, silicatos,
fosfatos, etc.) que contribuyen a su alcalinidad; sin embargo, en la prctica la

contribucin de stos es insignificante y puede ignorarse (Romero, 2002).
77
2.1.3.2.2
Principio del mtodo
La alcalinidad del agua se determina por titulacin con cido sulfrico 0,02 N y se
expresa como mgCaCO3/L, equivalente a la alcalinidad determinada. Los iones
YH [ procedentes de la solucin 0,02 N de H2SO4 neutralizan los iones YOH l [

libres y los disociados por concepto de la hidrlisis de carbonatos y bicarbonatos
presentes en la muestra. Las reacciones de hidrolizacin 2.1, 2.2 y neutralizacin

2.3, 2.4 y 2.6 se presentan a continuacin:
l
CO z Hv O HCOl
z OH
[2.1]
l
HCOl
z Hv O Hv CO z OH
[2.2]
l
H z CO
HCO
[2.4]
H z OH l Hv O
[2.3]
H z HCOl
Hv CO
[2.5]
Fig 2.1: Curva de titulacin para una mezcla hidrxidos-carbonato

(Romero, 2002)
La titulacin se efecta en dos etapas sucesivas, definidas por los puntos de

equivalencia para los carbonatos y el cido carbnico. Del anlisis de la curva de
titulacin que se muestra en la figura 2.1, se puede observar lo siguiente: la
concentracin de iones OH l libres se neutraliza cuando ocurre el cambio brusco

de pH a un valor mayor de 8,3. La mitad de los carbonatos se neutraliza a pH 8,3
y la totalidad a pH 4,5, y finalmente los bicarbonatos son neutralizados a pH 4,5.
78
Por tanto, el pH de punto final para la determinacin de la alcalinidad total es 4,5

(Romero, 2002).
2.1.3.2.3
Interferencias del mtodo
Los jabones, las materias oleosas y los slidos en suspensin o precipitados

pueden recubrir el electrodo de vidrio y causar una respuesta retardada. Dejar un
tiempo adicional entre las adiciones del reactivo para permitir que el electrodo
recupere el equilibrio (APHA et al., 2005).
2.1.3.2.4
Materiales y equipos
pHmetro calibrado
Matraz erlenmeyer de 125 mL
Agitador magntico.
Barra de agitacin
Bureta de 10 mL, calibrada
Matraces volumtricos de 25 y 100 mL, calibrados
2.1.3.2.5
-
Reactivos
Solucin de cido Sulfrico 0,02 N: Diluir 1,67 mL de una solucin de cido

sulfrico 6 N preparada previamente. Valorar la solucin de cido sulfrico
frente a una solucin de NaOH de la misma normalidad. El procedimiento
de valoracin se describe en el anexo I.
2.1.3.2.6
Procedimiento del mtodo
a) Seleccionar el volumen de muestra de acuerdo a su contenido de

alcalinidad. Para muestras con alcalinidades menores o iguales a 49,9
mgCaCO3/L analizar 100 mL de muestra. Para alcalinidades mayores o
iguales a 50 mg CaCO3/L analizar 25 mL de muestra. No se debe filtrar,
diluir, concentrar o alterar la muestra. Ajustar la muestra a temperatura
ambiente si es necesario.
b) Verter la muestra en el vaso de titulacin, manteniendo la punta del matraz
cerca del fondo del vaso de titulacin.
79
c) Agitar continua y lentamente la muestra.

d) Enjuagar con agua destilada y secar el electrodo.
e) Introducir el electrodo en la muestra, debiendo quedar este a un tercio de la
superficie del lquido para un volumen de muestra de 100 mL, y a un lado
del vaso para un volumen de 25 mL, evitando que la barra de agitacin
golpee al electrodo.
f) Realizar la titulacin con la solucin de H2SO4 0,02 N hasta pH 4,5. Dejar
un tiempo adicional entre las adiciones del reactivo para permitir que el
electrodo recupere el equilibrio.
g) Registrar el gasto del reactivo y realizar el clculo de la alcalinidad.
Criterio de medida para reportar el gasto de la solucin valorante: Si al
observar el menisco en la bureta, ste se encontrara entre la fraccin ms
pequea de una escala de divisin segn la apreciacin del analista, (situacin
que se muestra en la figura 2.1), se podr reportar valores del gasto de la solucin
valorante correspondiente a 0,025 mL, as por ejemplo, se est en capacidad de
reportar valores iguales a 1,175 mL.
Fig 2.2: Ejemplo de apreciacin para el criterio de medida

(Romero, 2002)
80
2.1.3.2.7
Clculo
D( T9/Q
m

[2.6]
Donde:
D = Concentracin del analito, mgCaCO3/L
rS = Volumen de la solucin de cido sulfrico gastado, mL
DS = Concentracin de la solucin de cido sulfrico, 1000 mgCaCO3/L

r = Volumen de muestra analizado, mL
NOTA: La concentracin de cido sulfrico, DS se calcula a partir del valor de la
normalidad del cido valorado, LS y el factor de conversin igual a 50.000
mgCaCO3/Eq, de acuerdo a la ecuacin 2.7.

DS LS m 50.000
2.1.3.3
Procedimiento de mtodo para la determinacin de la Conductividad
2.1.3.3.1
Fundamento terico
[2.7]
La conductividad es una expresin numrica de la capacidad de una solucin

para transportar una corriente elctrica. Esta capacidad depende de la presencia
de iones y de su concentracin total, de su movilidad, valencia y concentraciones
relativas, as como de la temperatura de la medicin (Romero, 2002).
2.1.3.3.2
Principio del mtodo
La forma ms usual de medir la conductividad en aguas es mediante instrumentos

comerciales de lectura directa en mho/cm a 25 C. La conductividad leda es
igual a la conductividad elctrica de la muestra medida entre caras opuestas de
un cubo de 1 cm. Como se demuestra a continuacin.
La resistencia especfica de un conductor es funcin de sus dimensiones y puede
expresarse como:
81
D
!S
[2.8]
Donde:
D Resistencia especfica, ohmiomcm
p Resistencia, ohmio
rea de la seccin transversal del conductor, cm2, y
Longitud del conductor, cm
En otras palabras, es la conductividad de un conductor de 1 cm de longitud y una

seccin transversal de 1 cm2, por tanto, numricamente es igual a la
conductividad. Como en aguas el valor de la conductividad es muy pequeo, se
expresa en mho/cm o en unidades del sistema internacional siemens/cm
tomando en cuenta que 1 mho = 1 siemens (Romero, 2002).
2.1.3.2.1
Material y equipos
Medidor de Conductividad calibrado.
Vaso de precipitacin
2.1.3.2.2
a) Tomar un volumen de muestra en el vaso de precipitacin (suficiente para

cubrir completamente el electrodo del medidor de conductividad). Ajustar
la muestra a temperatura ambiente si es necesario.
b) Enjuagar con agua destilada y secar el electrodo.
c) Introducir el electrodo en la muestra, agitar ligeramente (para eliminar las
burbujas en el electrodo) y esperar hasta que el equipo de la lectura.
Evitar reclinar el electrodo en la base o a los costados del vaso.
d) Reportar la conductividad de la muestra con el valor ledo por el equipo.
2.1.3.2.3
Clculo
DeMgBkkgjg icgj DeMgBkkgjg gc ij cPhj
[2.9]
82
2.1.3.4
Procedimiento para la determinacin de la Demanda Bioqumica de

Oxgeno
2.1.3.4.1
Fundamento terico
La oxidacin microbial o mineralizacin de la materia orgnica descrita en la

ecuacin 2.9, es una de las principales reacciones que ocurren en los cuerpos
naturales de agua y constituye una de las demandas de oxgeno, ejercida por los
microorganismos heterotrficos, que se debe cuantificar (Romero, 2002).
Ejchkj ehdMkBj z v z MhkcMcP
Dv z Iv z McjP BiijP z MhkcMcP z cMchdj

[2.10]
La Demanda Biolgica de Oxgeno (DBO) es un parmetro que permite medir la

cantidad de oxgeno requerido para la oxidacin de la materia orgnica
biodegradable presente en una muestra de agua como resultado de la oxidacin
bioqumica aerobia (Romero, 2002).
2.1.3.4.2
Principio del mtodo
La prueba de DBO5 se determina incubando por cinco das a 20 C en la

oscuridad, la muestra de agua residual o natural, o una dilucin conveniente de la
misma. La disminucin de la concentracin de oxgeno disuelto (OD), medida por
el mtodo Winkler, durante el periodo de incubacin, produce una medida de la
DBO. Las muestras para la determinacin de la DBO se deben analizar con
prontitud; si no es posible, refrigerarlas a una temperatura cercana al punto de
congelacin (4C), ya que se pueden degradar durante el almacenamiento, dando
como resultado valores bajos. Sin embargo, es necesario mantenerlas el mnimo
tiempo posible en almacenamiento, incluso si se llevan a bajas temperaturas
83
2.1.3.4.3
Existen numerosos factores que afectan la prueba de la DBO, entre ellos la

relacin de la materia orgnica soluble, la materia orgnica suspendida, los
slidos sedimentables, los flotables, la presencia de hierro en su forma oxidada o
reducida, la presencia de compuestos azufrados y las aguas no bien mezcladas.
Al momento no existe una forma de corregir o ajustar los efectos de estos
factores. La oxidacin de las formas reducidas del nitrgeno como amoniaco y
nitrgeno orgnico, mediada por los microorganismos, ejercen una demanda
nitrogencea, que es considerada como una interferencia en la prueba; sin
embargo, esta puede ser eliminada con la adicin de inhibidores qumicos.
Cuando se inhiba la demanda nitrogencea de oxgeno, se debe reportar los
resultados como demanda bioqumica de oxgeno carboncea (DBOC5); cuando
no se inhiba, reportar los resultados como DBO5 (APHA et al., 2005).
2.1.3.4.4
Incubadora de aire, calibrada a 20 C
Aireador
Botellas de incubacin (winkler de 300 mL)
Probetas de 1000 mL, calibradas
Pipetas volumtricas, calibradas
Matraces volumtricos, calibrados
Pipetas serolgicas, calibradas
Botelln de 20 L de capacidad
Varilla tipo mbolo
2.1.3.4.5
-
Reactivos
Solucin tampn de fosfato: Disolver 8,5 g de KH2PO4, 21,75 g de K2HPO4,

33,4 g de Na2HPO4.7H2O, y 1,7 g de NH4Cl en aproximadamente 500 mL
de agua destilada y diluir a 1 L. El pH debe ser 7,2 sin posteriores ajustes.
Si se presenta alguna seal de crecimiento biolgico, descartar este o
cualquiera de los otros reactivos.
84
Solucin de sulfato de magnesio: Disolver 22,5 g de MgSO4.7H2O en agua

destilada y diluir a 1 L.
Solucin de cloruro de calcio: Disolver 27,5 g de CaCl2 en agua destilada y

diluir a 1L.
Solucin de cloruro frrico: Disolver 0,25 g de FeCl3.6H2O en agua

destilada, diluir a 1L
Soluciones cida y alcalina, 1 N, para neutralizacin de muestras custicas

o cidas.
-
cido: A un volumen apropiado de agua destilada agregar muy

lentamente y mientras se agita, 28 mL de cido sulfrico
concentrado; diluir a 1 L.
lcali: Disolver 40 g de hidrxido de sodio en agua destilada y diluir

a 1 L.
Solucin de sulfito de sodio: Disolver 1,575 g de Na2SO3 en 1000 mL de

agua destilada. Esta solucin no es estable y se debe preparar
diariamente.
Inhibidor de nitrificacin: 2-cloro-6-(triclorometil) piridina, slido.
Solucin de cloruro de amonio: Disolver 1,15 g de NH4Cl en 500 mL de

agua destilada, ajustar el pH a 7,2 con solucin de NaOH, y diluir a 1 L. La
solucin contiene 0,3 mg de N/mL.
2.1.3.4.6
2.1.3.4.6.1

Preparacin del inculo.
a) Colocar 50 mL del sobrenadante del agua del machngara (decantado

por al menos 1 hora) en un vaso plstico
b) Aadir 10 gotas de la muestra a analizar (previamente regulado su pH
entre 6,5 y 7,5 con las soluciones cida o lcali 1 N). Incubar a 20 C
durante 30 min.
c) Aadir 5 gotas de la muestra e incubar durante 1 hora.
d) Aadir 5 gotas de la muestra e incubar a 20 C por 24 horas.
85
2.1.3.4.6.2
Tcnica de dilucin
Las diluciones deben ser tales, que permitan obtener al cabo de los 5 das de
incubacin, un oxgeno residual de al menos 1 mg/L y una captacin de oxgeno
de al menos 2 mg/L, en otras palabras, se espera un consumo de
aproximadamente 4 mg/L del OD presente en la botella al inicio de la prueba.
Para estar en estos rangos, es necesario emplear una fraccin volumtrica
adecuada, que permita realizar los clculos de las tres diluciones necesarias para
la ejecucin del anlisis. Esta fraccin se calcula a partir de la relacin entre los
valores de DBO y DQO, esta relacin es un indicativo de la biodegradabilidad de
la materia contaminante. En bibliografa se encuentra, que el valor terico de DBO
es la mitad del valor del DQO presente en la muestra, es decir, la relacin de
DBO/DQO es de 0,5. Sin embargo, esta relacin no es fija. En aguas residuales,
se interpreta un valor de la relacin DBO/DQO menor de 0,2 para un vertido de
tipo inorgnico, mientras que para un vertido tipo orgnico (fcilmente
biodegradable) se considera una relacin
mayor de 0,6. Para las aguas
domsticas, la relacin DBO/DQO oscila entre 0,4 y 0,8. Las aguas estabilizadas
biolgicamente tienen una relacin DBO/DQO = 0,12. Es necesario antes de
realizar el anlisis, tener un conocimiento previo de la procedencia de la muestra,
para determinar con criterio la DBO esperada de la muestra. Para el ejemplo de
clculo de la fraccin volumtrica se parte de la ecuacin 2.10, con las debidas
consideraciones que esta relacin tiene de acuerdo al tipo de muestra analizada.
:F9,420:9
0,5 C*#'%$ C2
[2.11]
Entonces, la fraccin volumtrica de la muestra se calcula con la ecuacin 2.11

thjBBkM eihkBj
:F9,420-
[2.12]
Puesto que la ecuacin 2.11 depende del DBO esperado en la muestra, basado
en el criterio del analista, es necesario comprender un amplio rango donde se
encuentre la DBO real de la muestra, para lo cual se toma el 0,5 y 1,5 de la
fraccin volumtrica calculada. El volumen de la muestra de cada dilucin se
calcula multiplicando estos valores por el volumen de aforo (probeta de 1000 mL
86
donde se realizan las diluciones), tal como se indica en las ecuaciones 2.12, 2.13
y 2.14
CkiBkM 1 thjBBkM eihkBj m 1000, Y gc cPhj[
[2.13]
CkiBkM 3 thjBBkM eihkBj m 1000 m 1,5, Y gc cPhj[
[2.15]
CkiBkM 2 thjBBkM eihkBj m 1000 m 0,5, Y gc cPhj[
[2.14]
Para valores de DBO menores o iguales a 4 mg/L, no se realizar diluciones de la

muestra, debido al volumen total que se requerira de acuerdo a los clculos
arriba descritos.
2.1.3.4.6.3
Preparacin del agua de dilucin.
Para muestras que requieren dilucin

a) Se realizan tres diluciones por cada muestra, cada dilucin se prepara en
una probeta de 1000 mL, ms aproximadamente 600 mL necesarios para
el blanco, por tanto, se requieren preparar al menos 4 litros de agua de
dilucin para el procedimiento de anlisis. Colocar la cantidad de agua
destilada necesaria en el botelln.
b) Aadir por cada litro de agua destilada (referirse al paso anterior), mL de
cada una de las siguientes soluciones (tambin denominadas nutrientes):
solucin tampn, sulfato de magnesio, cloruro de calcio y cloruro frrico.
c) Llevar el agua a 20C antes de su uso. Saturarla por burbujeo de aire
filtrado libre de materia orgnica, durante 30 min y dejar estabilizar por 30
min.
d) Adicionar 0,5 mL del inculo por cada litro de agua destilada.
e) Aadir 10 mg de inhibidor de nitrificacin por cada litro de agua luego de su
estabilizacin. Es posible que el inhibidor se disuelva lentamente.
Para muestras que no requieren dilucin
a) Se requiere preparar al menos 2 litros de agua de dilucin. Esto debido a
que se llenarn seis botellas de DBO (3 para el OD inicial y tres para el OD
final de la muestra), por tanto, se requieren preparar al menos 2 litros de
87
agua de dilucin para el procedimiento de anlisis. El nmero de rplicas

puede variar segn el criterio del analista. Colocar la cantidad de muestra
necesaria en el botelln.
b) Regular el pH de la muestra entre 6,5 y 7,5 con una solucin de NaOH o
H2SO4 1 N (la cantidad de reactivo adicionado, no debe diluir la muestra en
ms de 0,5%). Regular la temperatura de la muestra a 20 C si es
necesario.
c) Aadir por cada litro de muestra (referirse al litera a)), 1 mL de cada una de
las siguientes soluciones (tambin denominadas nutrientes): solucin
tampn, sulfato de magnesio, cloruro de calcio y cloruro frrico.
d) Aadir 0,5 mL del inculo por cada mL de muestra.
e) Saturar la muestra por burbujeo de aire filtrado libre de materia orgnica,
durante 30 min y dejar estabilizar por 30 min.
f) Aadir 10 mg de inhibidor de nitrificacin por cada litro de muestra luego de
su estabilizacin. Es posible que el inhibidor se disuelva lentamente.
NOTA: Proceder de la misma manera si el volumen requerido para la dilucin
(referirse a la tcnica de dilucin) supera el 60% del volumen de la probeta donde
se realizan las diluciones, es decir, para valores de DBO esperado que sean
menores a 4 mg/L. El analista deber decidir si para valores cercanos a 4 mg/L,
se realiza el anlisis sin dilucin de la muestra en funcin de los resultados
obtenidos de los clculos de la tcnica de dilucin, debido al volumen total
requerido.
2.1.3.4.6.4
Tratamiento previo de la muestra
Muestras con compuestos residuales de cloro

Evitar las muestras que contengan cloro residual; para ello se recomienda tomar
la muestra antes del proceso de cloracin; si la muestra ha sido clorada pero no
presenta cloro residual detectable, realizar el inculo; si hay cloro residual,
declorar la muestra y proceder a realizar el inculo. En algunas muestras, el cloro
se elimina si se deja la muestra 1 o 2 h a la luz, lo cual puede suceder durante el
transporte y manejo de la muestra. Para muestras en las cuales el cloro residual
88
no se disipa en un tiempo razonablemente corto, eliminar el cloro residual por

adicin de la solucin de Na2SO3. El volumen de Na2SO3 requerido se determina
en una porcin de 100 a 1.000 mL de la muestra, previamente neutralizada, por la
adicin de 10 mL de cido actico 1 + 1 o H2SO4 1 + 50, 10 mL (relacin de
volmenes) de solucin de yoduro de potasio (10 g KI/100 mL), por cada 1000 mL
de muestra; el volumen resultante se titula con la solucin de Na2SO3 hasta su
punto final, determinado por el indicador almidn-yodo. Se agrega a la muestra
neutralizada, el volumen relativo de solucin de Na2SO3 determinado, se mezcla
bien y se deja en reposo cerca de 10 a 20 minutos. Ensayar la muestra para
determinar el cloro residual. (Un exceso de Na2SO3 en la muestra, consume
oxgeno y reacciona con ciertas cloraminas orgnicas que pueden estar presentes
en muestras tratadas) (APHA et al., 2005).
Muestras contaminadas con sustancias txicas
Las muestras de aguas residuales provenientes de industrias, por ejemplo
electroqumicas, contienen metales txicos. Estas muestras requieren de estudios
especiales y deben ser tratadas antes de medirles la DBO (APHA et al., 2005).
Muestras sobresaturadas con OD
En muestras procedentes de aguas muy fras o de aguas en que la produccin
primaria es alta, los valores de OD a 20C suelen ser mayores de 9 mg de OD/L.
Para prevenir prdidas de oxgeno durante la incubacin, llevar la temperatura de
la muestra a 20 3C en una botella parcialmente llena, mientras se sacude
fuertemente o se burbujea aire (APHA et al., 2005).
2.1.3.4.6.5
Anlisis de la muestra
Para muestras que requieren dilucin

a) Seleccionar el volumen de muestra necesario para el ensayo, (referirse a la
tcnica de dilucin). Regular el pH de la muestra entre 6,5 y 7,5 con una
solucin de NaOH o H2SO4 1 N, (la cantidad de reactivo adicionado, no
debe diluir la muestra en ms de 0,5%).
89
b) Regular la temperatura de la muestra a 20 C antes de realizar el ensayo.

c) Trasvasar el agua de dilucin cuidadosamente mezclada, hasta llenar la
mitad de la probeta de 1000 mL, procurando burbujear lo menos posible,
para ello, se recomienda colocar la llave del botelln pegado a la pared de
la probeta para que el agua se deslice por la pared y evitar la entrada de
aire.
d) Agregar la cantidad de muestra correspondiente al volumen necesario para
la dilucin 1 (referirse a la tcnica de dilucin), completar el volumen de la
probeta con agua de dilucin procurando introducir en el sistema la menor
cantidad de aire posible, tanto al agregar la muestra como el agua de
dilucin (tener la misma consideracin de llenado que en el literal c)).
e) Mezclar con ayuda de una varilla tipo mbolo, llevando la varilla de arriba
hacia abajo, por al menos 10 veces, evitando la entrada de aire.
f) Trasvasar la dilucin de la probeta a dos botellas de DBO, teniendo el
mismo cuidado de evitar la entrada de aire. Dejar estabilizar por 15 min
antes de tapar las botellas.
g) Llenar dos botellas de DBO con agua de dilucin, estas botellas
constituyen los blancos, que permiten verificar la calidad del agua de
dilucin a travs del consumo de oxgeno disuelto del blanco. Dejar
estabilizar por 15 min antes de tapar las botellas.
h) Repetir los pasos c, d e y f para las dos diluciones restantes de la muestra
(referirse a la tcnica de dilucin). En total se tendrn 2 botellas de DBO
por cada dilucin (una para el oxgeno disuelto (OD) inicial y la otra para el
final), 6 botellas en total ms dos botellas para el blanco (para el OD inicial
y la para el final).
i) Determinar el oxgeno disuelto inicial de las muestras y del blanco
incubar por 5 das a 20C las restante tres botellas y el blanco. El OD se

determina
utilizando
el mtodo
yodomtrico
de
azida
modificado
establecido en el Standar Methods, su procedimiento se detalla en el anexo

II. (La solucin de tiosulfato de sodio empleada en la determinacin del OD
debe ser valorada siguiendo el procedimiento descrito en el anexo III).
j) Determinar el OD final de la muestra y del blanco transcurrido los 5 das de
incubacin ( 4 horas) como se describe en el anexo II.
90
k) Registrar los valores y realizar el clculo de DBO5. Reportar el promedio de

las tres diluciones como resultado final.
Para muestras que no requieren dilucin
a) Trasvasar el agua de dilucin (preparada segn el procedimiento descrito
para la preparacin de agua de dilucin cuando la muestra no requiere
dilucin) a seis botellas de DBO procurando burbujear lo menos posible,
para ello se recomienda colocar la llave del botelln pegado a la pared del
winkler para que el agua se deslice por la pared y evitar la entrada de aire.
Dejar estabilizar por 15 min antes de tapar las botellas.
b) Determinar el OD inicial de tres botellas, e incubar las otras tres por 5 das
a 20 C. El OD se determina de acuerdo al procedimiento descrito en el
anexo II.
c) Para determinar el consumo de OD del blanco, preparar un litro de agua de
dilucin (de acuerdo al procedimiento descrito para la preparacin de agua
de dilucin para muestras que requieren dilucin).
d) Trasvasar el agua de dilucin a dos botellas de DBO con las mismas
indicaciones del literal a) para evitar la entrada de aire.
e) Determinar el OD inicial del blanco e incubar por 5 das a 20 C la otra
botella. Seguir el mismo procedimiento descrito en el anexo II para la
determinacin del OD.
f) Determinar el OD final de las muestra y de blanco transcurrido los 5 das
de incubacin ( 4 horas) como se describe en el anexo II. (La solucin de
tiosulfato de sodio empleada en la determinacin del OD debe ser valorada
siguiendo el procedimiento descrito en el anexo III).
g) Registrar los valores y realizar el clculo de DBO5. Reportar el promedio de
las tres mediciones como resultado final.
Criterio de medida para reportar el gasto de la solucin valorante: Emplear el
mismo criterio de medida descrito en el mtodo para la determinacin de la
alcalinidad total.
91
NOTA: El consumo de OD del blanco no debe ser mayor que 2 mg/L, si superara
este valor, mejorar la preparacin del agua de dilucin, prestando atencin a la
limpieza del material utilizado, as como tambin, al agua del machngara
empleada para la preparacin del inculo, la misma que debe mantenerse en
refrigeracin a 4 C y cambiada constantemente.
2.1.3.4.7
Clculo
Cuando no se realiza dilucin de la muestra

D(Q :F9 YCJ f Cv [ f YJ f v [ m t
[2.16]
Donde:
CJ OD de la muestra antes de la incubacin, mg/L
Cv OD de la muestra despus de la incubacin, mg/L
J OD antes de la incubacin del blanco, mg/L
v OD del blanco despus de la incubacin, mg/L

t Factor de la solucin valorante
Cuando se realiza dilucin de la muestra

D(Q :F9
Y: l: [lYF lF [m
<21
mt
[2.17]
Donde:
rS Volumen de aforo donde se realiza la dilucin (volumen de la probeta), mL
r:'U Volumen de dilucin, mL
NOTA: El factor de la solucin valorante, t, se obtiene del cociente entre la

normalidad de la solucin valorante (solucin que estar ser valorada), LH !TU y la
normalidad terica igual a 0,025 N, de acuerdo a la ecuacin 2.18.

t
? ~1
,v
[2.18]
92
2.1.3.5
Procedimiento para la determinacin de los Slidos Totales Disueltos
2.1.3.5.1
Fundamento terico
Los procedimientos usados en la determinacin del contenido de slidos son

mtodos gravimtricos, y como tales requieren la determinacin del peso de los
crisoles con residuos o sin ellos. Por tanto, es importante usar recipientes
previamente acondicionados y de peso constante, con el fin de no introducir
errores en la determinacin (Romero, 2002).
2.1.3.5.2
Principio del mtodo
Para la determinacin de los slidos totales disueltos se filtra una muestra bien
mezclada por un filtro estndar de fibra de vidrio; posteriormente, se toma un
volumen del filtrado y se evapora hasta que se seque en un crisol, previamente
tarado a 180 C. El aumento del peso en el crisol representan los slidos totales
disueltos (APHA et al., 2005).
2.1.3.5.3
Las aguas excesivamente mineralizadas con un contenido considerable de silicio,

magnesio, cloruros y/o sulfatos, pueden ser higroscpicas y exigir un secado
prolongado, un grado de desecacin adecuado y un pesado rpido. Las muestras
ricas en bicarbonato requieren un secado cuidadoso y, probablemente,
prolongado, para asegurar la conversin completa de bicarbonato a carbonato
2.1.3.1.1
Horno de Mufla
Estufa calibrada a 180 C
Crisoles de porcelana, 50 mL de capacidad
Matraz volumtrico de 50 mL, calibrado
Desecador, provisto de slica gel
Filtros de fibra de vidrio sin aglutinante orgnico
Equipo de filtracin
93
Bomba para succin
2.1.3.1.2
2.1.3.1.2.1
Preparacin de los crisoles previo la realizacin del ensayo
a) Colocar el crisol en la mufla a 550 C por 30 min (para eliminar cualquier

residuo orgnico presente).
b) Tarar el crisol en la estufa a 180 C durante 2 horas.
c) Enfriar el crisol en el desecador por un lapso de 2 horas y media. Pesar el
crisol.
d) Mantener el crisol en el desecador hasta ser utilizado.
2.1.3.1.2.2
Anlisis de la muestra
a) Armar el equipo de filtracin de acuerdo a la figura 2.3.

b) Filtrar la muestra, previamente homogeneizada.
c) Tomar 50 mL de la solucin filtrada y verterla en el crisol previamente
pesado, siguiendo el procedimiento completo de preparacin del crisol.
d) Colocar el crisol en la estufa para evaporar la muestra, dejar la muestra en
la estufa mnimo 15 horas para asegurar la completa evaporacin.
e) Enfriar el crisol en el desecador por un lapso de 2 horas y media y pesarlo.
f) Registrar los pesos y realizar el clculo de los slidos totales disueltos.
Fig 2.3: Equipo de filtracin al vaco

(Romero, 2002)
94
NOTA: Si se realiza el anlisis de STD de varias muestras, es decir, si se requiere

el uso de gran espacio del desecador en donde varios crisoles a 180 C requieren
ser enfriados, se recomienda cambiar el tiempo de enfriamiento a 3 horas antes
de pesar los crisoles.
2.1.3.1.3
Clculo:
D(/Q
]H:
Y" l" [mJ

[2.19]
Donde:
NJ Peso de residuo seco + peso del crisol, g
Nv Peso del crisol, g
r volumen de muestra, mL
1000000 Factor de conversin mg*L/g*L

2.1.4
INSTRUCTIVO DE CALIBRACIN DE LOS EQUIPOS UTILIZADOS
Para el desarrollo de esta investigacin, la calibracin de los equipos constituy

un requerimiento indispensable, debido, a que los datos de calibracin formaban
parte de los clculos de la incertidumbre de medida, tal como se indic en el
captulo uno.
Debido a esta necesidad, el laboratorio solicit al Instituto Ecuatoriano de
Normalizacin (INEN), la calibracin de aquellos equipos necesarios para el
desarrollo de cada mtodo, descritos en el literal 2.1.3. Por lo cual se cont con
los siguientes equipos calibrados:
-
Estufa, LINBERG/BLUE, calibrada a 180 C
Incubadora, MEMMERT, calibrada a 20 C
Balanza analtica, METTLER TOLEDO
Material Volumtrico, LMS y GLASWERK WERTHEIM
Los certificados de calibracin entregados por el INEN, se presentan en el anexo

XVI de donde se tomaron los datos para los clculos correspondientes.
95
Asimismo, se cont con el medidor de pH, ORION, calibrado por el personal del
laboratorio, cuyo certificado de calibracin se encuentra en el anexo XVI. El
medidor de conductividad, fue el nico equipo que requiri de calibracin interna
como parte de esta investigacin.
A continuacin se describe el proceso de
calibracin y verificacin desarrollado para este equipo.
2.1.4.1
Instructivo de calibracin del Medidor de Conductividad
2.1.4.1.1
Objetivo
Se tiene por objeto describir el procedimiento para la calibracin interna y la

verificacin del conductivmetro HACH modelo 54500-23.
2.1.4.1.2
2.1.4.1.2.1
-
Reactivos
Solucin patrn certificada de 147 S/cm, / 1 S/cm
Solucin patrn certificada de 12,8 mS/cm, / 0,2 mS/cm
2.1.4.1.3
2.1.4.1.3.1
-
Identificacin del instrumento a calibrar y verificar
Conductivmetro HACH modelo 54500-23
2.1.4.1.2.2
-
Descripcin
Preparacin de los elementos requeridos

Soluciones para la calibracin
Las soluciones certificadas deben ser almacenadas de acuerdo a las

indicaciones establecidas en su certificado. Al momento de ser utilizadas
se debe evitar su contaminacin.
2.1.4.1.3.2
-
Ajuste del Equipo
Seguir los pasos a), b) y c) descrito en el literal 2.1.3.2.6 (procedimiento del

mtodo para la determinacin de la conductividad) tomando como muestra
las soluciones certificadas.
96
Para ajustar el equipo, presionar la tecla funcional CAL que aparece en la

parte baja e izquierda de la pantalla. CAL ? y 1.0001/cm aparecern en la
parte superior de la pantalla. Si el equipo ha sido ajustado, este valor
aparecer en la pantalla.
Utilizar el teclado numrico para ingresar el valor de la conductividad de la

solucin certificada a 25 C empleada y presionar ENTER.
2.1.4.1.4
Proceso de calibracin
Realizar cinco lecturas de cada solucin patrn, siguiendo el procedimiento

completo descrito en el literal 2.1.3.2.6.
2.1.4.1.5
Tratamiento estadstico
Calcular la incertidumbre de calibracin, presentar resultados y anexos de

clculos.
2.1.4.1.6
Criterios de aceptacin y rechazo
Aceptar la calibracin si la incertidumbre obtenida es menor o igual que dos veces

la exactitud del equipo ms la incertidumbre del patrn. De acuerdo al manual del
equipo, el valor de la exactitud es igual a 5% en cada rango. As, para el estndar
de 147 S/cm el valor de la incertidumbre de calibracin debe ser menor o igual a
2,47 S/cm, mientras que para el estndar de 12,8 mS/cm, el valor de la
incertidumbre de calibracin debe ser menor o igual a 0,33 mS/cm. Los valores de
incertidumbre de cada estndar, corresponden a los ya mencionados en los
reactivos en el literal 2.1.4.1.2.2.
2.1.4.1.7
Proceso de verificacin
Verificar cada vez que se utilice el conductivmetro. Realizar una lectura de la

solucin patrn de 147 S/cm o 12,8 mS/cm, segn el valor que se espera
obtener de la muestra analizada. Si se obtiene una lectura con un error relativo
del 1%, aceptar la verificacin. Caso contrario, ajustar el equipo siguiendo el
procedimiento descrito en el literal 2.1.4.1.3.2.
97
2.1.5
PREPARACIN DE LOS OBJETOS DE ENSAYO
2.1.5.1
Preparacin de los elementos que se disponen para la validacin
2.1.5.1.1
Soluciones patrn
Se prepararon a partir de las soluciones patrn certificadas (MRC) disponible en

cada mtodo a los niveles de concentracin requeridos para el desarrollo de la
validacin, de acuerdo al diseo experimental que se indica ms adelante en el
literal 2.2.3; evitando la contaminacin de las soluciones. Para un patrn
certificado slido, se prepar siguiendo las indicaciones del certificado, evitando
igualmente su contaminacin.
A partir de la solucin patrn certificada se prepararon las disoluciones
(soluciones) ms diluidas, necesarias en cada mtodo de acuerdo a los niveles de
concentracin requeridos para el desarrollo de la validacin. Para ello se emple
la ley de las diluciones definido por la siguiente expresin
D" m r" D m r
[2.20]
Donde:
D" Concentracin de la solucin patrn certificada
r" Alcuota tomada de la solucin patrn certificada

D Concentracin de la solucin final preparada
r Volumen de la solucin final preparada

2.1.5.1.2
Materiales de Referencia internos (Ep' )
Se prepararon a partir de los reactivos con los que cuenta el laboratorio siguiendo
las indicaciones establecidas en el Standar Methods, a los niveles de
concentracin requeridos para los diferentes contrastes de significacin que se
describen a lo largo del captulo dos.
98
2.1.5.1.3
Reactivos
Los reactivos necesarios para la ejecucin de cada mtodo se prepararon

siguiendo las indicaciones del Standard Methods, los mismos que fueron descritos
en el procedimiento de cada mtodo en el literal 2.1.3.
2.1.5.1.4
Muestras reales
Se eligi una muestra de agua residual conservada en refrigeracin a 4C, para la

determinacin del % de Recuperacin de acuerdo al procedimiento que se
describe ms adelante en el diseo experimental.
2.1.5.2
Preparacin de los equipos utilizados
Previo a la realizacin de cada anlisis, se verificaron los equipos de acuerdo a su

necesidad de uso para constatar el buen funcionamiento de los mismos. Se
siguieron
los
procedimientos
establecidos
dentro
del
laboratorio,
se
consideraron los criterios de aceptacin para aceptar la verificacin del equipo.

Las acciones que se realizaron se resumen a continuacin:
-
Verificacin del pHmetro utilizando las soluciones buffer de pH 4 y 7. Se

acept la verificacin si el valor cumpla con los criterios de aceptacin
establecidos de acuerdo al manual del equipo, es decir, slope entre 85% y
115%.
Verificacin de la balanza utilizando la pesa de 10,0000 g. Se acept la

verificacin si el valor pesado se encontr dentro de los criterios de
aceptacin, que de acuerdo a bibliografa es de 0,0010g, sin embargo, el
laboratorio ha adoptado en base a su experiencia como criterio de aceptacin
un valor igual a 0,0007 g.
Verificacin del material de vidrio, en este caso se seleccion el equipo de

vidrio en buen estado que permita el correcto desarrollo de los mtodos. El
principal criterio para la aceptacin del material fue la limpieza del mismo, que
en el caso del material volumtrico ocupado se verific y acept siempre y
cuando el llenado de este permaneciera uniformemente hmedo y el menisco
99
no present deformacin o distorsin en las orillas. De manera general se

acept aquel material limpio, sin manchas y que no presentara puntas
despostilladas.
2.2
SISTEMA DE VALIDACIN DE LOS MTODOS
2.2.1
ELECCIN DE LOS PARMETROS DE VALIDACIN
La validacin como ya se mencion, no es ms que el conocimiento del mtodo

por determinacin de una serie de caractersticas del mismo, constituyendo estas
caractersticas sus parmetros de validacin que definen el mtodo. As, para
demostrar que un mtodo es adecuado para la aplicacin que se pretende es
preciso determinar mediante estudios de laboratorio sus parmetros de
desempeo. Esta caracterizacin del desempeo del mtodo es un proceso caro
e inevitablemente puede ser acortado por el tiempo y consideraciones del costo.
El Centro de Investigacin y Control Ambiental (CICAM), siendo un laboratorio
acreditado, estableci los parmetros y objetivos de validacin del mtodo que
necesitan caracterizarse para validar el mtodo, en base a la experiencia del
laboratorio, referente a las auditoras realizadas por la OAE como ente regulador,
a sus requerimientos y exigencias, as como a las necesidades del cliente. En el
literal 2.2.2, se describen los parmetros seleccionados para cada mtodo, as
como sus objetivos.
2.2.2
FIJACIN DE OBJETIVOS PARA LOS PARMETROS DE VALIDACIN
La Norma INEN-ISO/IEC 17025:2006 en la Nota 1 del literal 5.4.5.3 indica, La

validacin incluye las especificaciones de los requisitos, la determinacin de las
caractersticas de los mtodos, una verificacin de que los requisitos pueden
satisfacerse utilizando el mtodo, y una declaracin sobre la validez. Estos
requisitos establecidos a priori son los objetivos de validacin.
100
Como ya se indic en el literal anterior, el laboratorio estableci sus parmetros y

objetivos de validacin para cada mtodo en funcin de su experiencia. Sin
embargo, en funcin de esta experiencia, fue necesario establecer con ayuda de
pruebas de laboratorio, el nivel bajo de concentracin del intervalo de trabajo.
Estas pruebas se realizaron despus de las pruebas previas descritas en el literal
2.1.3.1 para la puesta a punto de los mtodos.
Una vez establecido el procedimiento especfico de los mtodos, se realizaron
pruebas para determinar el nivel bajo de concentracin. Las pruebas realizadas
se describen a continuacin:
Para la determinacin del nivel bajo de concentracin en el ensayo para la
determinacin de la alcalinidad total, se realizaron tres lecturas de soluciones
preparadas a 1, 3 y 5 mg CaCO3/L de concentracin. Mediante el clculo de la
recuperacin de los resultados obtenidos, se estableci el valor del nivel bajo, el
mismo que deba encontrarse dentro del valor de recuperacin establecido para la
veracidad (80% - 120%).
determinacin de DBO, se realizaron tres lecturas de cada solucin, preparadas a
1 y 2 mg/L de concentracin. Mediante el clculo de la recuperacin de los
resultados obtenidos, se estableci el valor del nivel bajo, el mismo que deba
encontrarse dentro del valor de recuperacin establecido para la veracidad (80% 120%).

determinacin de los STD, se realizaron tres lecturas de soluciones preparadas a
5, 10, 20 y 50 mg/L de concentracin. Mediante el clculo de la recuperacin de
los resultados obtenidos, se estableci el valor del nivel bajo, el mismo que deba
encontrarse dentro del valor de recuperacin establecido para la veracidad (80% 120%).
Para la determinacin de la conductividad, no se realiz esta prueba, ya que el

nivel bajo de concentracin 147 S/cm estuvo definido por el valor de la solucin
patrn que el laboratorio adquiri para la validacin del mtodo.
101
En las tablas 2.1, 2.2, 2.3, 2.4 y 2.5, se presentan los parmetros y objetivos de
validacin para cada mtodo, establecidos en funcin de los resultados de las
pruebas y de la experiencia del laboratorio.
Tabla 2.1: Parmetros y objetivos de validacin del mtodo para la determinacin de la
Alcalinidad Total, rango bajo
PARMETRO
OBJETIVO ESTABLECIDO
Linealidad/Funcin respuesta
No aplica
Lmite de Deteccin
No aplica
Lmite de Cuantificacin
5 mgCaCO3/L
Precisin (repetibilidad y/o

reproducibilidad)
CVr 15 %
CVR 20 %
Veracidad (% de Recuperacin)
80% - 120%
Incertidumbre
35 %
5 f 49,9 mgCaCO3/L

Alcalinidad Total, rango alto
PARMETRO
No aplica
Lmite de Deteccin
No aplica
50 mgCaCO3/L
Precisin
(repetibilidad
reproducibilidad)
y/o CVr 15 %
CVR 20 %
80% - 120%
Incertidumbre
35 %
50 f 250 mgCaCO3/L
102

Conductividad
PARMETRO
No aplica
Lmite de Deteccin
No aplica
147 aOB
Precisin
(repetibilidad
reproducibilidad)
y/o CVr 15 %
CVR 20 % CVR 20 %
80% - 120%
Incertidumbre
35 %
147 aOB - 12,8 OB
Tabla 2.4: Parmetros y objetivos de validacin del mtodo para la determinacin de

DBO5
PARMETRO
No aplica
Lmite de Deteccin
C Z_F z 3PF
Precisin
(repetibilidad
reproducibilidad)
2 mg/L
y/o CVr 15 %
CVR 20 %
80% - 120%
Incertidumbre
35 %
2 f 500 mg/L
103
Tabla 2.5: Parmetros y objetivos de validacin del mtodo para la determinacin de

Slidos Totales Disueltos
PARMETRO
No aplica
Lmite de Deteccin
No aplica
50 mg/L
Precisin
(repetibilidad
reproducibilidad)
2.2.3
y/o CVr 15 %
CVR 20 %
80% - 120%
Incertidumbre
35 %
50 - 1000 mg/L
DISEO EXPERIMENTAL Y ESTADSTICO
Se estableci un diseo experimental y estadstico para cada uno de los mtodos.

Donde el diseo experimental, no es ms que los procedimientos que se
desarrollaron para la obtencin de los parmetros de validacin, mientras que el
estadstico, constituye los clculos realizados para la determinacin de estos
parmetros.
En las pruebas previas mencionadas en el captulo 2, se realizaron pruebas de
contraste para determinar si los reactivos con los que cuenta y diariamente trabaja
el laboratorio, no presentan diferencias significativas respecto al MRC empleado
para la validacin. Pudiendo ser utilizados para los respectivos controles de
calidad que el laboratorio debe realizar. El estadstico fue empleado para los
contrastes de significacin, as como el estadstico . Los datos se obtuvieron a

partir de dos soluciones, una solucin preparada con el MRC de concentracin
igual a la establecida como nivel bajo en el intervalo de trabajo de cada mtodo.
La otra solucin preparada con los reactivos del laboratorio a la misma
concentracin. Los reactivos empleados en esta prueba fueron: carbonato de
104
sodio para el mtodo de alcalinidad total y el mtodo de slidos totales disueltos,

as tambin cido glutmico y glucosa para el mtodo de DBO5. La preparacin
de las soluciones patrn se detallan en el anexo IV. A continuacin se describe el
diseo experimenta y estadstico para cada mtodo:
2.2.3.1
Diseo experimental y estadstico del mtodo para la determinacin de la

Alcalinidad Total
2.2.3.1.1
-
Elementos que se dispone para la validacin
Solucin patrn certificada (MRC), 500 mgCaCO3/L de concentracin:

preparar a tres niveles de concentracin en cada rango:
Rango bajo:
Nivel bajo: 5 mgCaCO3/L
Nivel medio: 25 mgCaCO3/L
Nivel alto: 49,9 mgCaCO3/L
Rango alto:
Nivel bajo: 50 mgCaCO3/L
Nivel medio: 100 mgCaCO3/L
Nivel alto: 250 mgCaCO3/L
Muestra real: escoger una muestra de agua residual.
2.2.3.1.2
Procedimiento
a) Obtener cinco lecturas diarias (en condiciones de repetibilidad) de los tres

niveles de concentracin del MRC, tanto para el rango bajo como el rango
alto. Esto durante tres das distintos (en condiciones de reproducibilidad).
Cada nivel de concentracin se debe preparar cada da, previo a la
realizacin del anlisis.
b) Obtener cinco lecturas de la muestra real en condiciones de repetibilidad.
Adicionar a la muestra una cantidad de analito conocida del MRC y obtener
cinco lecturas de la muestra adicionada.
105
2.2.3.1.3
Lectura
Tomar la lectura del gasto de la solucin de H2SO4 0,02 N hasta llevar la muestra
analizada a un pH de 4,5. Cada muestra debe seguir el procedimiento completo.
Realizar los clculos de la alcalinidad total.
NOTA: Preparar la solucin tituladora por cada da de validacin, es decir, al
menos tres soluciones de H2SO4 0,02 N. Valorar cada solucin siguiendo el
procedimiento descrito en el anexo I.
2.2.3.1.4
-
Calcular la veracidad (% de Recuperacin) en cada nivel con las lecturas

obtenidas en el literal a) del procedimiento.
Calcular el % de Recuperacin de los datos obtenidos en el literal b)
Realizar el anlisis simple de la varianza de las lecturas obtenidas en el

literal a). Determinar la precisin, %CVr y %CVR en cada nivel.
Calcular la incertidumbre de medida asociada a cada nivel.
2.2.3.2
Diseo experimental y estadstico del mtodo para la determinacin de la

Conductividad
2.2.3.2.1
-
Soluciones patrn certificada (MRC), 147 S/cm y 12,8 mS/cm de

conductividad.
2.2.3.2.2
Procedimiento
a) Obtener cinco lecturas diarias (en condiciones de repetibilidad) de los dos

niveles de conductividad, esto durante tres das distintos (en condiciones
de reproducibilidad).
106
2.2.3.2.3
Lectura
Tomar las lecturas del equipo. Cada muestra debe seguir el procedimiento
completo.
2.2.3.2.4
-
Calcular la veracidad (% de Recuperacin) en cada punto con las lecturas

obtenidas.
Realizar el anlisis simple de la varianza de las lecturas obtenidas para la

determinacin de la precisin, %CVr y %CVR en cada punto.
Calcular la incertidumbre de medida asociada a cada punto.
2.2.3.3
Diseo experimental y estadstico para el mtodo de DBO5
2.2.3.3.1
Solucin patrn certificada (MRC), 200 mg/L de concentracin: preparar a tres

niveles de concentracin:
Nivel bajo: 2 mg/L
Nivel medio: 200 mg/L
Nivel alto: 500 mg/L
Muestra real: escoger una muestra de agua residual
2.2.3.3.2
Procedimiento
a) Obtener cinco lecturas diarias (en condiciones de repetibilidad) de cada

nivel de concentracin del MRC, esto durante tres das distintos (en
condiciones de reproducibilidad). Cada nivel de concentracin se debe
preparar cada da previo a la realizacin del anlisis.
107
2.2.3.3.3
Lectura
Tomar las lecturas del gasto de la solucin de tiosulfato 0,025 M. Cada muestra
debe seguir el procedimiento completo. Calcular el DBO5 de las muestras
analizadas.
NOTA: Preparar la solucin tituladora por cada da de validacin, es decir, al
menos tres soluciones de tiosulfato 0,025 M. Valorar cada solucin siguiendo el
procedimiento descrito en el anexo III.
2.2.3.3.4
-


2.2.3.4
Diseo experimental y estadstico para el mtodo de Slidos Totales

Disueltos
2.2.3.4.1
-
Solucin patrn certificada (MRC), 1000 mg/L de concentracin: preparar a

dos niveles de concentracin:
Nivel bajo: 50 mg/L
Nivel medio: 500 mg/L
Nivel alto: 1000 mg/L
Muestra real: escoger una muestra de agua residual.
108
2.2.3.4.2
Procedimiento
a) Obtener cinco lecturas diarias (en condiciones de repetibilidad) de cada

nivel de concentracin del MRC, esto durante tres das distintos (en
condiciones de reproducibilidad). Cada nivel de concentracin se debe
preparar cada da previo a la realizacin del anlisis.
2.2.3.4.3
Lectura
Tomar las lecturas del peso inicial y final de los crisoles. Cada muestra debe
seguir el procedimiento completo. Calcular los STD de las muestras analizadas.
2.2.3.4.4
-


2.2.4
EJECUCIN DE LOS ENSAYOS DISEADOS
Una vez que se eligieron los mtodos de anlisis a validar, se establecieron los
procedimientos que aseguren el buen funcionamiento de los mtodos, se
establecieron los parmetros y objetivos de validacin, se calibraron los equipos
necesarios, se prepararon los objetos de ensayo, y finalmente, se establecieron
los diseos experimentales y estadsticos para cada uno de los mtodos, se dio
inicio al proceso de validacin, es decir la ejecucin de los ensayos diseados.
109
RESULTADOS Y DISCUSIONES
3.1
TRATAMIENTO ESTADSTICO DE DATOS OBTENIDOS
3.1.1
CONTRASTES DE SIGNIFICACIN REALIZADOS EN LAS PRUEBAS

PREVIAS
En el captulo dos se refiri del por qu la necesidad de las pruebas previas para
la puesta a punto de los mtodos, para la determinacin del nivel bajo de
concentracin y para la determinacin de las diferencias significativas entre el
MRC y los reactivos utilizados por el laboratorio. A continuacin se resumen el
tratamiento estadstico realizado con los datos experimentales obtenidos en cada
prueba.
Para la puesta a punto del mtodo, tanto para el mtodo de la alcalinidad total
como para el DBO, se realiz el contraste de significacin para la comparacin de
las medias muestrales y de las varianzas, mediante el clculo de los estadstico
y respectivamente. Con los resultados obtenidos, se decidi si el ensayo se
realiza en un sistema abierto o cerrado para el mtodo de la alcalinidad total, y se
decidi el uso o no del inhibidor de nitrificacin para el anlisis de DBO. En el

ensayo de STD, no se realiz ningn contraste de significacin, bast el criterio
lgico para decidir el tiempo de enfriamiento de los crisoles. Finalmente, en el
ensayo de la conductividad, no realiz ninguna prueba previa, debido a la
simplicidad del anlisis como ya se indic.
En cuanto a las pruebas previas realizadas para determinar el nivel bajo de
concentracin, se calcul el % de Recuperacin de las muestras a diferentes
concentraciones preparadas y en funcin de este resultado, se decidi el nivel
bajo para cada mtodo La ltima prueba realizada, fue el contraste de
significacin entre el MRC y el MRI (reactivos del laboratorio), en esta prueba se
calcul igualmente los estadsticos y para determinar si existen o no
diferencias significativas entre las medias y las varianzas.
110
Los estadsticos y fueron calculados mediante el uso de herramientas de
anlisis de datos que proporciona el programa de hoja de clculo de Microsoft
Excel. En los anexos V y VI se describe el ejemplo de clculo para y
respectivamente. El clculo del % de Recuperacin se explica ms adelante en el

literal 3.1.2.
3.1.2
3.1.2.1
CLCULO DE LOS PARMETROS DE VALIDACIN

Determinacin de la Veracidad (% de Recuperacin)
La determinacin de la veracidad se realiz calculando el % de Recuperacin,

empleando la ecuacin 1.3 descrita en el captulo uno cuando se refiri al
concepto de la exactitud.
%gc pcBchjBkM
TU$# $q*)'&$
TU$# & ##)%'T
m 100
[1.3]
Para la muestra real fortificada, el % de Recuperacin se calcul de igual manera

empleando la ecuacin 1.3, donde la expresin, rjieh escMkge, es igual a la
diferencia entre el resultado obtenido de la muestra real (agua residual) fortificada

y el resultado de la muestra sin adicin. La concentracin de analito adicionada
para la determinacin del % de Recuperacin, correspondi a un valor cercano o
igual al nivel bajo concentracin establecido en el intervalo de trabajo, al
considerarse este el nivel como el ms crtico. Al cumplirse para este el objetivo
de validacin establecido, es decir, que el valor del % de Recuperacin se
encuentra entre 80 y 120%, se presumir que para los niveles ms altos del
intervalo de trabajo del mtodo, el % de Recuperacin tambin se encontrar
dentro del intervalo establecido.
3.1.2.2
Determinacin de la Precisin (% CVr y % CVR)
La determinacin de la precisin se caracteriz por el clculo de los porcentajes

de los coeficientes de variacin % CVr y % CVR, empleando las ecuaciones 1.7 y
1.8 respectivamente, descritas en el captulo 1 en el concepto de precisin.
111
% Drh
]4
100
[1.7]
% Dr!
]~
100
[1.8]
R|{
R_
Los valores P# y P! se calcularon a partir de las ecuaciones 1.4 y 1.5 descritas en

el captulo 1.
P# uCDEG
P! uP#v z PQv
[1.4]
[1.6]
Donde,
PQv
: = l: w
[1.5]
Los valores de CDEF y CDEG necesarios para el clculo de O# y O! , se obtuvieron
a partir de los resultados del ANOVA de un factor realizado con ayuda de Excel.
Como se indic en el captulo 1, en la prctica, este contraste puede ser calculado
con ayuda de una computadora, en donde Excel tiene una opcin que realiza el
clculo del ANOVA de un factor, en el anexo VII se presenta un ejemplo de
clculo.
3.1.2.3
Determinacin de la Incertidumbre del Mtodo
El clculo de la incertidumbre de medida, se realiz con base a la metodologa

propuesta por la ISO (Guide to the Expression of Uncertainty in Measurement,
GUM), explicado en el captulo uno. A continuacin se describe el modelo de
clculo de la incertidumbre de medida para cada mtodo de validacin.
3.1.2.3.1 Clculo de la Incertidumbre del mtodo para la determinacin de la

alcalinidad total
A partir de los clculos realizados en este modelo de clculo, se realizar el
clculo de la incertidumbre de medida de los mtodos restantes, donde se har
112
referencia a las ecuaciones desarrolladas en este mtodo si su modelo de clculo

as lo requiere. El modelo de clculo de la incertidumbre de medida desarrollado
para la determinacin de la alcalinidad total se detalla a continuacin:
Se especific el mensurando a partir de la ecuacin 2.6 (descrita en el
procedimiento del mtodo), que constituye el modelo matemtico para el clculo
del mensurando.
D(T9 /Q
m

[2.6]
Con ayuda del diagrama causa-efecto, se identificaron las fuentes de

incertidumbre, tanto las asociadas al modelo matemtico del mensurando como
aquellas que no aparecen explcitamente en ella, tal como se puede observar en
la figura 3.1.
Fig 3.1: Diagrama causa-efecto para identificar las fuentes de incertidumbre del mtodo
para la determinacin de la alcalinidad total
Se evaluaron las fuentes de incertidumbre identificadas en el diagrama para evitar
las duplicaciones al considerarlas nuevamente. De esta evaluacin se hallaron las
siguientes observaciones:
-
El volumen valorado tanto del cido sulfrico, r ]9 1-4.- , como de la
solucin de NaOH, rT9 TU$#T&$ , fueron volmenes iguales de 5 mL de
acuerdo con el procedimiento de valoracin descrito en el anexo I. Ambos

volmenes fueron medidos utilizando el mismo material volumtrico, pipeta
113
volumtrica de 5 mL. Al evaluar la contribucin de cada componente, ambos

se determinaran empleando la ecuacin 3.11 (descrita ms adelante en este
modelo), y al tratarse del mismo material volumtrico utilizado, la contribucin
de cada componente sera la misma. Con este reparo, slo se consider la
contribucin debida al volumen del cido, r ]9 1-4.- y evitar de esta
manera la duplicacin de las fuentes de incertidumbre.
El volumen gastado de la solucin de NaOH, rT9 T8*T&$ , como de la
solucin de ftalato cido de potasio, r" T8*T&$ , que corresponden a los
volmenes gastados en la estandarizacin del cido sulfrico y del NaOH

respectivamente, fueron medidos empleando el mismo material volumtrico,
una bureta de 10 mL de acuerdo con el procedimiento de estandarizacin
descrito en el anexo I. Los volmenes gastados se esperaran sean iguales
en las respectivas titulaciones (ya que ambas soluciones tienen la misma
concentracin 0,02 N e igual volumen a titular de 5 mL, como se indic en el
prrafo anterior). La contribucin de cada componente se calculara
empleando la ecuacin 3.10 (descrita ms adelante), y, al tratarse
nuevamente del mismo material volumtrico ocupado, las contribuciones
seran idnticas. Por tanto, slo se consider la contribucin del volumen de
KHP, r" T8*T&$ , y evitar as la duplicacin de las fuentes de incertidumbre.
Una vez identificadas y evaluadas las fuentes de incertidumbre, se procedi a la

cuantificacin de los componentes, expresados como incertidumbres estndar
para su combinacin, tal como se indica a continuacin:
A: Analista, @
Incertidumbre estndar tipo A, asociada a los errores aleatorios en la mediciones
debido a la variabilidad de las condiciones ambientales y del propio analista. Se
calcul a partir de la combinacin de la desviacin estndar de repetibilidad y de
reproducibilidad expresada como P! . Se calcul la incertidumbre estndar
asociada de acuerdo a la ecuacin 3.1

S)TU'8*T P!
[3.1]
114
B: Procedimiento, @
Estuvo asociada a las contribuciones a la incertidumbre de los instrumentos de
medida, utilizados para la estimacin del mensurando. La incertidumbre
combinada del procedimiento se calcul aplicando la ley de propagacin de
incertidumbre (de acuerdo a la ecuacin 1.39), al modelo matemtico para el
clculo del mensurando definido por la ecuacin 2.6, obtenindose la siguiente
expresin
v
"#$%&'(')*$ / m z m z m

[3.2]
Donde:
Incertidumbre en la medida del volumen de cido
Incertidumbre de la concentracin de cido
Incertidumbre en la medida del volumen de muestra
Derivando parcialmente la ecuacin 2.6 respecto a cada una de las variables, se

obtuvieron los coeficientes de sensibilidad y posteriormente se determinaron las
contribuciones de cada componente de incertidumbre: , y de la
ecuacin 3.2.

J
J

[3.3]
[3.4]
m

DJ
[3.5]
B.1: Incertidumbre en la medida del volumen de cido, : Esta componente
estuvo relacionada con varias fuentes de incertidumbre, en funcin del

instrumento de medida utilizado, una bureta de 10 mL. De acuerdo a la
informacin disponible del material volumtrico, las contribuciones a la
incertidumbre consideradas fueron las siguientes:
115
1) La incertidumbre de la calibracin del material volumtrico, TU'q#T%') . Debido
a que cualquier instrumento de medida debe ser calibrado para garantizar la
trazabilidad de los resultados que proporciona. Su contribucin se calcul a
partir de los datos de la incertidumbre expandida, / y del factor de cobertura,
K, proporcionados en el certificado de calibracin del instrumento, empleando
la ecuacin 1.51, tomando el valor mximo de /%TU reportado en el certificado

de calibracin, para que la incertidumbre corresponda a cualquier lectura que
se tome con el instrumento, obtenindose la siguiente expresin
TU'q#T%')
701 2-
[3.6]
2) La incertidumbre de correccin, $##%%') . Debido a que no se aplic la
correccin del certificado a los valores obtenidos por el equipo. Su
contribucin se calcul a partir de los datos de las correcciones, D' ,
proporcionados en el certificado de calibracin, empleando la ecuacin 1.52,

tomado el valor mximo de las correcciones reportadas en el certificado de
calibracin, para que la incertidumbre corresponda a cualquier lectura que se
tome con el instrumento, obtenindose la siguiente expresin
$##%%')
2 2-
[3.7]
Para que la incertidumbre de ambos componentes, TU'q#T%') y $##%%') ,

corresponda a cualquier lectura que se tome con el instrumento, se consider
tanto para la ecuacin 1.51 como para la ecuacin 1.52, el valor mximo de
/%TU y de las correcciones D' reportadas en el certificado de calibracin.
3) La incertidumbre de temperatura, H(#T*X#T . Debido a la diferencia entre la

temperatura de calibracin del instrumento y la temperatura en que se realiz
la medida. Su contribucin se calcul a partir de la ecuacin 1.55, donde el
valor de D, fue igual a 2,1 m 10l YD lJ [. (Este valor fue tomado del
Procedimiento
Especfico
PEC/CICAM/05
del
laboratorio,
donde
se
encontraba establecido). Para el valor de , la temperatura de calibracin se

tom del certificado de calibracin y la temperatura de medida se consider
igual a 20 C (temperatura normal de trabajo reportada por el laboratorio). El
116
valor de ^ correspondi al volumen del instrumento, en este caso fue igual al
volumen de la bureta, obtenindose as la siguiente expresin

H(#T*X#T
HH$UX()
[3.8]
4) La incertidumbre del criterio de medida, . Debido al criterio de medida
considerado en funcin de la apreciacin del analista al reportar la lectura del

volumen de cido gastado, como se indic en el procedimiento del mtodo.
Su contribucin se calcul considerando una distribucin triangular, debido a
la evidencia de que la probabilidad es ms alta para los valores en el centro
del intervalo (divisin de escala de la bureta). Por tanto, se calcul de acuerdo
a la ecuacin 3.9.

Jv &''8') & 8%TUT
[3.9]
La incertidumbre combinada asociada a la medida del volumen de cido, , se
calcul por la suma geomtrica de las incertidumbres individuales (de acuerdo a

la ecuacin 1.40), obtenindose la siguiente expresin.
v
v
TU
z $##%%')
z vH(#T*X#T z v
[3.10]
La expresin 3.10, se generaliz para el clculo de toda componente de

incertidumbre, relacionada a una medida de volumen utilizando una bureta; tanto
para el mtodo de alcalinidad total como para cualquier mtodo, que de acuerdo a
su procedimiento emple este instrumento.
B.2: Incertidumbre en la medida del volumen de muestra, : Esta
componente al igual que en el clculo anterior para , estuvo relacionada con
varias fuentes de incertidumbre, en funcin del instrumento de medida utilizado,
un matraz aforado. De acuerdo a la informacin disponible del material

volumtrico, para su clculo se tomaron las mismas contribuciones a la
incertidumbre consideradas en el clculo de , esto implica, las mismas

ecuaciones de clculo descritas, con las siguientes indicaciones:
117
La incertidumbre de calibracin del material volumtrico, TU'q#T%') , empleado la
ecuacin 1.51, la incertidumbre de correccin, $##%%') empleando la ecuacin

1.52. Para el clculo de estas componentes existe un valor nico de /%TU y de la
correccin D' , reportada en el certificado de calibracin del instrumento,
naturalmente debido a que un matraz aforado no tiene divisin de escala a

diferencia de la bureta y finalmente la incertidumbre de temperatura, H(#T*X#T
empleando la ecuacin 3.8. El valor de D, como el de , fueron calculados
como ya se explic. El valor de ^, que corresponde al volumen del instrumento,
en este caso fue igual al volumen de aforo del matraz. La incertidumbre del
criterio de medida
no se consider para el clculo de esta incertidumbre,
debido a la ausencia de escala en el instrumento.

La incertidumbre combinada asociada a la medida del volumen de muestra, ,
se calcul de igual manera por la suma geomtrica de las incertidumbres

individuales, obtenindose la siguiente expresin.
v
v
TU
z $##%%')
z vH(#T*X#T
[3.11]
La ecuacin 3.11 se generaliz para el clculo de toda componente de

incertidumbre, relacionada a una medida de volumen utilizando un matraz aforado
o pipeta volumtrica; tanto para el mtodo de alcalinidad total como para cualquier
mtodo, que de acuerdo a su procedimiento emple este instrumento. Se
entiende que los clculos se realizarn a partir de los datos proporcionados del
respectivo certificado de calibracin de acuerdo al instrumento utilizado, pero con
las mismas referencias descritas para esta ecuacin.
B.3: Incertidumbre de la concentracin del cido, : La incertidumbre
combinada asociada a la concentracin del cido, , se calcul a partir de la
ecuacin 2.7 descrita en el procedimiento del mtodo, de donde se obtuvo la
expresin 3.9 sin necesidad de aplicar la ley de propagacin de incertidumbre al

modelo matemtico de donde evidentemente se hubiera obtenido la misma
expresin.
118
50.000 m
[3.12]
Donde:
Incertidumbre de la normalidad del cido
B.3.1: Incertidumbre de la normalidad del cido, : La estandarizacin de la
solucin de cido sulfrico, se realiz en dos etapas de acuerdo al procedimiento

descrito en el anexo I. Combinando las ecuaciones I.1 y I.3 se especific el
modelo matemtico para el clculo de LS obtenindose la siguiente expresin,

donde L ]9 LS
L ]9
,.-
> 1-4.-
m ,.-
[3.13]
1-4.-
En la evaluacin de las fuentes de incertidumbre de la figura 3.1, se explic que
las contribuciones debidas al rT9 TU$#T&$ y al rT9 T8*T&$ no se consideraron.
Con estas observaciones, de la ecuacin 3.13 se eliminaron estos trminos

obtenindose la ecuacin 3.14.
LS L ]9
m ,.-
[3.14]
> 1-4.-
La incertidumbre combinada asociadas a la normalidad del cido, , se calcul

aplicando la ley de propagacin de incertidumbre al modelo matemtico.

m z
m z
>
m >
[3.15]
Donde:
Incertidumbre de la normalidad de la solucin de KHP

Incertidumbre en la medida del volumen gastado de la solucin de KHP
> Incertidumbre en la medida del volumen del cido valorado
119
Derivando parcialmente la ecuacin 3.14 respecto a cada una de las variables y

se obtuvieron los coeficientes de sensibilidad y posteriormente se calcul la
contribucin de las componentes de incertidumbre: , y > de la

ecuacin 3.15.

v

[3.16]
>
>
>
m
>
[3.17]
Dv
[3.18]
B.3.1.1: Incertidumbre en la medida del volumen gastado de la solucin de

KHP, : Esta componente se calcul de acuerdo a la ecuacin 3.10, ya que
estuvo relacionada a una medida de volumen utilizando una bureta.
v
v
z $##%%')
z vH(#T*X#T z v
TU
[3.19]
B.3.1.2: Incertidumbre en la medida del volumen de cido valorado,
Esta componente se calcul de acuerdo a la ecuacin 3.11, ya que estuvo

relacionada una medida de volumen utilizando una pipeta volumtrica.
v
v
> TU
z $##%%')
z vH(#T*X#T
[3.20]
B.3.1.3: Incertidumbre de la normalidad de la solucin de KHP, : La

incertidumbre combinada asociada a la normalidad de la solucin de KHP, ,
se calcul aplicando la ley de propagacin de incertidumbre a la ecuacin I.2
(descrita en el anexo I) que constituye la expresin matemtica para el clculo de

L" .
L"
G
m
>
De la ecuacin I.2 se obtuvo la siguiente expresin
[I.2]
120

G m G z m >
>
[3.21]
Donde:
G Incertidumbre en la pesada de KHP
>
Incertidumbre en la medida del volumen preparado de KHP
Derivando parcialmente la ecuacin I.2 respecto a cada una de las variables y se

obtuvieron los coeficientes de sensibilidad y posteriormente se cuantific la
contribucin de las componentes: G y >

G
>
>
de la ecuacin 3.21.
G
m
>
[3.22]
[3.23]
B.3.1.3.1: Incertidumbre en la pesada de KHP, : Esta componente estuvo

relacionada con varias fuentes de incertidumbre, en funcin del instrumento de
medida utilizado, una balanza analtica, as como del patrn pesado. Las
contribuciones a la incertidumbre consideradas fueron:
1. La incertidumbre de la calibracin de la balanza, TU'q#T%') . Debido a que
cualquier instrumento de medida debe ser calibrado para garantizar la
trazabilidad de los resultados que proporciona, tal como se indic en la

incertidumbre de calibracin del material volumtrico. Su contribucin se
calcul a partir de los datos de la incertidumbre expandida, / y del factor de
cobertura, K, proporcionados en el certificado de calibracin de la balanza,

empleando la ecuacin 1.51.
TU'q#T%')
701
[1.51]
2. La incertidumbre de deriva, :#'T , Debido a que la balanza se va

descalibrando con el paso del tiempo, por lo cual, la correccin calculada en
121
la calibracin puede haber variado ya que con el paso del tiempo la balanza
se va descalibrando. Su contribucin se calcul a partir de los valores
obtenidos de las correcciones de los dos ltimos certificados de calibracin
consecutivos de la balanza, para el valor de
ecuacin 1.54.
:#'T
D) f D)lJ , empleando la
|6 l6 |
[1.54]
3. La incertidumbre de temperatura, H(#T*X#T . Debido a la diferencia entre la
temperatura de calibracin de la balanza y la temperatura en que se pes la

muestra. Su contribucin se calcul a partir de la ecuacin 1.55, donde el
valor de D, fue igual a 2,0 m 10l (D lJ ). (Este valor fue tomado del
Procedimiento
Especfico
PEC/CICAM/05
del
laboratorio,
donde
se
encontraba establecido). El valor de , fue igual a 3C, (de acuerdo a los
registros de la temperatura reportados en el cuarto de balanza del

laboratorio). El valor de ^ correspondi en este caso al peso de la masa
patrn igual a 10 g de acuerdo al certificado de calibracin, obtenindose la

ecuacin
H(#T*X#T
HH"8$
[3.24]
4. La incertidumbre de resolucin, !8$UX%') . Debido a que esta interviene en la
medida de la masa a determinar. Su contribucin se calcul a partir de la

ecuacin 1.56. El valor de resolucin corresponde a valor del dgito menos
significativo de la balanza igual a 0,001 g.
!8$UX%')
#8$UX%') & UT qTUT)T
[3.25]
La incertidumbre de la calibracin del patrn, " . Su contribucin se calcul a

partir de los datos de la incertidumbre expandida, /, y del factor de cobertura, K,
proporcionados en el certificado de calibracin del MRC, empleando la ecuacin

1.51. El valor de la incertidumbre proporcionada en el certificado est expresada
en %, por tanto, la ecuacin 1.51 se multiplic por el peso de KHP, " , para
122
obtener el resultado de esta contribucin en g como las dems contribuciones. Se

obtuvo as la ecuacin 3.26 para el clculo de la incertidumbre del patrn, " .
"
%7
mJ
m "
[3.26]
La incertidumbre combinada del peso de KHP, G , se calcul por la suma
geomtrica de las incertidumbre individuales, obtenindose la siguiente expresin.

v
v
v
v
G TU
z vH(#T*X#T z :#'T
z !8$UX%')
z "
[3.27]
La expresin 3.27, se emplear para el clculo de toda componente de

incertidumbre, relacionada a una medida de masa; tanto para este mtodo de
alcalinidad total, como para cualquier mtodo de acuerdo a su procedimiento.
B.3.1.3.2: Incertidumbre en la medida del volumen preparado de KHP,
Esta componente se calcul de acuerdo a la ecuacin 3.11, ya que estuvo

relacionada a una medida de volumen utilizando un matraz aforado.
>
v
v
TU
z $##%%')
z vH(#T*X#T
[3.28]
C: MRC,
Estuvo asociada a las contribuciones a la incertidumbre debidas a la preparacin
de la solucin patrn. Primero se especific el modelo matemtico para el clculo
de la concentracin preparada a partir de la ecuacin 2.20 descrita en el literal
2.1.5, de la cual se obtuvo la siguiente expresin.
D(T9Ql
m

[3.29]
La incertidumbre combinada asociada a la preparacin de la solucin patrn,

! ,
se calcul aplicando la ley de propagacin de incertidumbre a la ecuacin
3.29, obtenindose la siguiente expresin.
123

!

m z

m

m z
v
[3.30]
Donde:
Incertidumbre de la concentracin de la solucin patrn certificada
Incertidumbre en la medida de la alcuota tomada

Incertidumbre en la medida del volumen preparado


se obtuvieron los coeficientes de sensibilidad y posteriormente se determin la
contribucin de las componentes de incertidumbre:

de la ecuacin 3.30.

,

[3.31]
m

[3.32]
[3.33]
C.1: Incertidumbre de concentracin de la solucin patrn certificada,

: Se calcul a partir de los datos de la incertidumbre expandida, /, y
del factor de cobertura, K, proporcionados en el certificado de calibracin del
MRC, empleando la ecuacin 1.51. El valor de la incertidumbre proporcionada en

el certificado est expresada en %, por tanto, la ecuacin 1.5| se multiplic por el
valor de la concentracin, D(T9Ql , para obtener el resultado de esta
contribucin en mgCaCO3/L como las dems contribuciones. Se obtuvo as la
ecuacin 3.34 para el clculo de la incertidumbre de concentracin, .
124

%7~
mJ
m D(T9Ql
[3.34]
C.2: Incertidumbre en la medida de la alcuota tomada,
: Esta
componente se calcul de acuerdo a la ecuacin 3.11, ya que estuvo relacionada

a una medida de volumen utilizando un matraz aforado o una pipeta graduada
segn el nivel de concentracin preparado de acuerdo al procedimiento descrito
en el anexo IV.
v
v
v
TU
z $##%%')
z H(#T*X#T
[3.35]
C.3: Incertidumbre en la medida del volumen preparado,

A
: Esta

a una medida de volumen utilizando un matraz aforado segn el nivel de
concentracin preparado de acuerdo al procedimiento descrito en el anexo IV.
v
v
v
TU
z $##%%')
z H(#T*X#T
[3.36]
Una vez cuantificados todos los componentes de incertidumbre de medida:

S)TU'8*T , "#$%&'(')*$ y
! ,
identificados en el diagrama causa-efecto mostrado
en la figura 3.1. Se calcul la incertidumbre combinada total del mtodo, %,-.-
por la suma geomtrica de las componentes individuales (de acuerdo a la

ecuacin 1.39), obtenindose la siguiente expresin.
v
v
%,-.- S)TU'8*T
z "#$%&'(')*$
z v !
[3.37]
Se calcul el valor de nmero efectivo de grados de libertad, , empleando la

ecuacin 1.48. De la tabla 1.3 se tom el valor de , para = 95,45%.

X0 Y[
6
[1.48]
Finalmente, la incertidumbre expandida, /, se calcul empleando la ecuacin

1.48, considerando que el mensurando sigue una distribucin de Student.
125
/ %,-.-
[1.49]
3.1.2.3.2 Clculo de la incertidumbre de calibracin del medidor de conductividad

Se especific el mensurando a partir de la expresin 2.9 (descrita en el
procedimiento del mtodo), que constituye el modelo matemtica para el clculo
del mensurando.
DeMgBkkgjg gc ij cPhj DeMgBkkgjg icgj
[2.9]

incertidumbre, tanto las asociadas al modelo matemtica del mensurando como
aquellas que no aparecen explcitamente en l, tal como se puede observar en la
figura 3.2.
Fig 3.2: Diagrama causa-efecto para identificar las fuentes de incertidumbre de calibracin
del medidor de conductividad
Se evaluaron las fuentes de incertidumbre identificadas en el diagrama,
concluyndose que no existe ninguna duplicacin. Se procedi entonces, a la
126
A: Analista, @
Incertidumbre estndar tipo A, asociada con los errores aleatorios en la

mediciones debido a la variabilidad de las condiciones ambientales y del propio
analista. Se calcul a partir de la desviacin estndar de repetibilidad empleando
la ecuacin 1.27 obtenindose la siguiente expresin
S)TU'8*T YZ' [
[3.38]
B: Procedimiento, @
Estuvo asociada a las contribuciones a la incertidumbre del equipo de medida

utilizado para la estimacin del mensurando. De acuerdo al modelo matemtico
para su clculo definido por la expresin 2.9, la incertidumbre de conductividad de
la muestra es igual a la incertidumbre de conductividad leda, esto es, igual a la
lectura proporcionada por el equipo de medida, de acuerdo a ecuacin 3.39.
$)&X%*''&T& & UT (X8*#T $)&X%*''&T& U&T
[3.39]
De acuerdo a la informacin que se tiene del equipo, se consider como

contribucin a la incertidumbre $)&X%*''&T& U&T la resolucin de lectura en
escala digital. Esta se calcul a partir de la ecuacin 1.56. El valor de la resolucin

se tom de las especificaciones del fabricante de acuerdo al rango. Se obtuvo as
la siguiente expresin.
"#$%&'(')*$ $)&X%*''&T& U&T
#8$UX%') &U X'$
[3.40]
C: MRC,
Estuvo asociada a la incertidumbre de la solucin patrn empleada. Se clculo a

partir de los datos de la incertidumbre expandida, /, y del factor de cobertura, K,
proporcionados en el certificado de calibracin del MRC, empleando la ecuacin

1.51 obtenindose la siguiente expresin

!
7~
[3.41]
127
Se calcul la incertidumbre combinada de calibracin, %01234026 por la suma

geomtrica de las componentes individuales obtenindose la siguiente expresin.
v
v
%01234026 S)TU'8*T
z "#$%&'(')*$
z v !
[3.42]
Se calcul el valor de nmero efectivo de grados de libertad, , empleando la

ecuacin 1.48. De la tabla 1.3 se tom el valor de , para = 95,45%.

X0 Y[
6
[1.48]
La incertidumbre expandida de calibracin /%TU , se calcul empleando la ecuacin

1.49, considerando que el mensurando sigue una distribucin de Student.
/%TU %,-.-
[1.49]
Se calcul el valor de correccin para cada punto que de acuerdo a la definicin

dada en el captulo uno, la correccin es igual al negativo del error sistemtico,
como se toma el valor absoluto, la correccin es igual en valor al sesgo calculado
con la ecuacin 1.1, de acuerdo a la siguiente expresin
DehhcBBkM |Z_ f a|
[3.43]
La incertidumbre de uso para cada punto calibrado, se consider igual a la suma

de los valores absolutos de la correccin y la incertidumbre, de acuerdo a la
ecuacin 3.44 (INS, 2008).
/78$ |DehhcBBkM| z |/%TU |
[3.44]
3.1.2.3.3 Clculo de la incertidumbre del mtodo para la determinacin de la

conductividad
La especificacin del mensurando ya se explic en el clculo de la incertidumbre
de calibracin. La figura 3.3 muestra las fuentes de incertidumbre identificadas,
128
tanto las asociadas al modelo matemtica del mensurando como aquellas que no
aparecen explcitamente en l.
Fig 3.3: Diagrama causa-efecto para identificar las fuentes de incertidumbre para la
determinacin de la conductividad
Posteriormente, se procedi a la cuantificacin de los componentes expresados
como incertidumbres estndar para su combinacin, tal como se indica a
continuacin:
A: Analista, @
Incertidumbre estndar tipo A, asociada con los errores aleatorios en la

mediciones debido a la variabilidad de las condiciones ambientales y del propio
analista. Se calcul de acuerdo a la siguiente expresin
S)TU'8*T P!
[3.45]
B: Procedimiento, @
Como ya se explic en el clculo de la incertidumbre de calibracin, esta

componente estuvo asociada a las contribuciones a la incertidumbre del equipo
de medida. Las contribuciones que se consideraron en funcin de la informacin
del medidor de conductividad fueron:
129
1. La incertidumbre de la calibracin del medidor de conductividad, TU'q#T%') .

Debido a que cualquier instrumento de medida debe ser calibrado para
garantizar la trazabilidad de los resultados que proporciona, tal como se ha
indicado anteriormente. Su contribucin se calcul a partir de los datos
obtenidos en el clculo de la incertidumbre de calibracin del medidor, ya
explicada, empleando la ecuacin 1.51.
TU'q#T%')
701
[1.51]
2. La incertidumbre de deriva, :#'T . Debida a la exactitud de instrumento de

medida. Su contribucin se calcul empleando la ecuacin 1.53. El valor de la
exactitud fue tomada de la informacin del fabricante, el mismo que estaba

expresado en %, por tanto se multiplic a la ecuacin 1.53 el valor de la
conductividad de la solucin patrn, de acuerdo a la ecuacin 3.46
:#'T
RT%*'*X&Y%[m$)&X%*''&T& & UT 8$UX%') T*#) %#*''%T&T
C: MRC,
Jm
[3.46]
Se calcul como se indic en el clculo de la incertidumbre de calibracin del

medidor de conductividad empleando la ecuacin 3.41

!
7~
[3,41]
La incertidumbre combinada del mtodo, %,-.- se calcul por la suma

geomtrica de las componentes individuales de acuerdo a la ecuacin 3.32.
v
v
%,-.- S)TU'8*T
z "#$%&'(')*$
z v !
[3.47]
Los clculos posteriores se realizaron siguiendo el modelo de clculo de la

incertidumbre del mtodo establecido para la determinacin de la alcalinidad total.
130
3.1.2.3.4 Clculo de la incertidumbre del mtodo en el ensayo para la determinacin de

DBO5
De acuerdo al procedimiento del mtodo, existen dos casos para determinar el
DBO5 de las muestras, el primero se refiere cuando es necesario realizar
diluciones de la muestra y el segundo cuando no se requiere de dilucin. A
continuacin se describe el primer caso.
del mensurando.
D(Q :F9
Y: l: [lYF lF [m
<21
mt
[2.17]

incertidumbre, tanto las asociadas al modelo matemtico del mensurando como
figura 3.4.
Fig 3.4: Diagrama causa-efecto para identificar las fuentes de incertidumbre de calibracin
del medidor de conductividad
131

A: Analista, @

calcul a partir de la desviacin estndar de repetibilidad de acuerdo a la
ecuacin 3.48.
S)TU'8*T P!
[3.48]
B: Procedimiento, @

medida, utilizados para la estimacin del mensurando definido por la ecuacin
2.17. En esta ecuacin, la diferencia YCJ f Cv [, as como la diferencia YJ f v [,
son medidas de volumen utilizando el mismo instrumento de medida, que en este

caso, se refiere al uso de bureta. Por esta razn, se reemplaz en la ecuacin
2.17 YCJ f Cv [ f YJ f v [ C, para evitar la duplicacin de la contribucin a
la incertidumbre de la bureta utilizada. Con esta consideracin, la ecuacin 2.17

queda segn la ecuacin 3.49 para muestras que requieren dilucin
D(Q :F9
9:m
<21
mt
[3.49]
La incertidumbre combinada asociada al procedimiento, se calcul aplicando la

ley de propagacin de incertidumbre a la ecuacin 3.49, obtenindose la siguiente
expresin
"#$%&'(')*$ <=
m 9: z

m z
<
m <21 z
Donde:
9: Incertidumbre en la medida del OD
m
[3.50]
132
Incertidumbre en la medida del volumen de aforo
<21 Incertidumbre en la medida del volumen de dilucin

Incertidumbre del factor de la solucin valorante


obtuvieron los coeficientes de sensibilidad y posteriormente se determin la
contribucin de cada componente de incertidumbre: , , < y de la
ecuacin 3.50.

m t
f
9:

<

<21
9:
<21
m t
9:m
<21
9:m
<
m t D
[3.51]
[3.52]
[3.53]
[3.54]
B.1: Incertidumbre en la medida de OD, : De acuerdo al procedimiento

empleado para la determinacin del OD, descrito en el anexo II, el valor de OD
se determin a partir del gasto de una solucin valorante, la cual fue medida con
ayuda de una bureta, por tanto, sta componente se calcul de acuerdo a la
ecuacin 3.10, referida al uso de este instrumento obtenindose la siguiente
expresin
v
v
v
9: TU
z $##%%')
z H(#T*X#T
z v
[3.55]
B.2: Incertidumbre en la medida del volumen de aforo, : Esta componente
debido a la falta de calibracin del instrumento de medida utilizado, una probeta

de 1000 mL, se calcul a partir de la tolerancia del instrumento dividida para 3
de acuerdo a la ecuacin 3.56, donde el valor de la tolerancia fue igual a 5 mL.

H$U#T)%'T
[3.56]
133
B.3: Incertidumbre en la medida del volumen de dilucin, : Esta

a una medida de volumen utilizando una pipeta aforada o graduada, de acuerdo al

procedimiento de preparacin de las soluciones patrn descritas en el anexo IV.
v
v
v
z $##%%')
z H(#T*X#T
<21 TU
[3.57]
B.4: Incertidumbre del factor de la solucin valorante, : La incertidumbre
combinada asociada al factor de acuerdo a su expresin matemtica definido por

la ecuacin 2.18, se calcul de acuerdo a la siguiente expresin.
t
? ~1
[2.18]
,v
De esta ecuacin se obtiene la siguiente expresin.

,v
m ? ~1
[3.58]
Donde:
? ~1 Incertidumbre de la normalidad real de la solucin de Tiosulfato
B.4.1: Incertidumbre de la normalidad real de la solucin de Tiosulfato,
: Se calcul aplicando la ley de propagacin al modelo matemtico para el

clculo de la LH definido por la ecuacin III.3.
LH !TU
< m <
[III.3]
? ,.-
De esta ecuacin se obtuvo la siguiente expresin

? ~1
? ~1
? ~1 m < z
m < z ? ~1 m ? ,.-
<
<
? ,.-
[3.59]
134
Donde:
< Incertidumbre de la normalidad de la solucin de Dicromato
<
Incertidumbre en la medida del volumen de la solucin de Dicromato

tomado para la valoracin
? ,.- Incertidumbre en la medida del volumen gastado de la solucin de

Tiosulfato
Derivando parcialmente la ecuacin III.3 respecto a cada una de las variables y se

obtuvieron los coeficientes de sensibilidad de la ecuacin y posteriormente se
calcul la contribucin de las componentes de incertidumbre: < , < y
? ,.- de la ecuacin 3.59.
? ~1
<
[3.60]
? ~1
<
[3.61]
m <
[3.62]
<
<
? ,.-
? ~1
? ,.-
? ,.-
f <
? ,.-
B.4.1.1: Incertidumbre en la medida de volumen gastado de la solucin de

Tiosulfato, @ : Esta componente se calcul de acuerdo a la ecuacin 3.10,
ya que estuvo relacionada a una medida de volumen utilizando una bureta.
v
v
v
? ,.- TU
z $##%%')
z H(#T*X#T
z v
[3.63]
B.4.1.2: Incertidumbre en la medida de volumen tomado de la solucin de

Dicromato, : Esta componente se calcul de acuerdo a la ecuacin 3.11, ya
que estuvo relacionada a una medida de volumen utilizando una pipeta aforada.
v
v
v
< TU
z $##%%')
z H(#T*X#T
[3.64]
135
B.4.1.3: Incertidumbre de la normalidad de la solucin de Dicromato, A :
Estuvo asociada a las contribuciones a la incertidumbre a la preparacin de la

solucin 0,025 N, definida por la ecuacin III.2 de acuerdo al procedimiento de
valoracin del tiosulfato descrito en el anexo III. Aplicando la ley de propagacin

de incertidumbre a esta ecuacin se calcul la incertidumbre combinada.
L:l
< m <
[III.2]
<
De esta ecuacin se obtuvo la siguiente expresin:
< < m < z < m < z < m <

<
<
<
vv
[3.65]
Donde:
< Incertidumbre de la normalidad de la solucin patrn certificada de
Dicromato
< Incertidumbre en la medida de la alcuota tomada de la solucin patrn
< Incertidumbre en la medida del volumen preparado de la solucin de

Dicromato
Derivando parcialmente la ecuacin III.2 respecto a cada una de las variables se

obtuvieron los coeficientes de sensibilidad y posteriormente se calcul la
contribucin de las componentes de incertidumbre: < < y < de la
ecuacin 3.65.
<
<
<
<
<
<
<
[3.66]
<
[3.67]
<
<
< m <
<
D
[3.68]
B.4.1.3.1: Incertidumbre de la normalidad de la solucin patrn certificada

de Dicromato, : Se calcul a partir de los datos de la incertidumbre
136
expandida, /, y del factor de cobertura, K, proporcionados en el certificado de
calibracin del MRC, empleando la ecuacin 1.51. El valor de /, se lo expresa en

porcentaje, para ser multiplicado por el valor de la normalidad de la solucin
preparada, obtenindose la siguiente expresin
<
%7~
mJ
m L:l
[3.69]
B.4.1.3.2: Incertidumbre en la medida de la alcuota tomada de la solucin

patrn Dicromato, : Esta componente se calcul de acuerdo a la ecuacin
3.11, ya que estuvo relacionada a una medida de volumen utilizando probeta de

acuerdo al anexo III.
v
v
v
< TU
z $##%%')
z H(#T*X#T
[3.70]
B.4.1.3.3: Incertidumbre en la medida de volumen preparado de la solucin

de Dicromato, A : Se calcul de acuerdo a la ecuacin 3.11, ya que estuvo
relacionada a una medida de volumen utilizando un matraz aforado de acuerdo al

procedimiento descrito en el anexo III.
v
v
v
< TU
z $##%%')
z H(#T*X#T
[3.71]
Para el segundo caso, correspondiente al nivel de 2 mg/L de concentracin, el

modelo matemtico en este caso estuvo definido por la ecuacin 2.16, en donde
de igual manera se realiz el cambio de YCJ f Cv [ f YJ f v [ C, por

indicado anteriormente. De esta manera se obtuvo la siguiente expresin.
D(Q :F9 C m t
[3.72]
Para calcular la incertidumbre combinada del procedimiento se aplic igualmente

la ley de propagacin de incertidumbre al modelo matemtico, ecuacin 3.72
"#$%&'(')*$ <=
m 9: z
m
[3.73]
137

obtuvieron los coeficientes de sensibilidad de la ecuacin 3.73.

:

Yt[
[3.74]
YC[
[3.75]
La contribucin a la incertidumbre de cada componente: 9: y fueron
calculadas tal como ya se indic en el primer caso empleando las ecuaciones

3.55 y 3.58 respectivamente.
C: MRC,
En el caso del nivel medio y alto de concentracin, donde no se realiz dilucin de
la solucin patrn certificada, la incertidumbre del MRC,
a la <= que se explica ms adelante.
!
fue calculada igual
Para el nivel bajo de 2 mg/L de concentracin, la incertidumbre del MRC,
! ,
estuvo asociada a las contribuciones a la incertidumbre debido a la preparacin

de la solucin final. Primero se especific el modelo matemtico para el clculo de
la concentracin preparada a partir de la ecuacin 2.20 descrita en el literal 2.1.5,
obtenindose la siguiente expresin.
D(:F9Ql
<= m <=
[3.76]
<=

! ,
!
3.76
<=
<=

<=
m <= z <=
<=
z
<=

<=
m <=
m <=
[3.77]
138
Donde:
<= Incertidumbre de la concentracin de la solucin patrn certificada
<= Incertidumbre en la medida de la alcuota tomada de la solucin

patrn certificada
<= Incertidumbre en la medida del volumen preparado de la solucin

patrn final
Derivado parcialmente la ecuacin 3.76 respecto a cada una de las variables y se

obtuvieron los coeficientes de sensibilidad y se calcul la contribucin de las
componentes de incertidumbre: <= , <= y <=
de la
ecuacin 3.77.
<=
<=
<=
<=
<=
<=
<=
<=

<=

<=
<= m <=
[3.78]
<=
[3.79]
D
[3.80]

: Se calcul a partir de los datos de la incertidumbre expandida, /, y
del factor de cobertura, K, proporcionados en el certificado de calibracin del
MRC, empleando la ecuacin 1.51. El valor de /, se lo expresa en porcentaje,

para ser multiplicado por el valor de la concentracin preparada de acuerdo a
ecuacin 3.81.
<=
%7~
mJ
m D(:F9Ql
[3.81]

: Se
calcul de acuerdo a la ecuacin 3.11, ya que estuvo relacionada a una medida

de volumen utilizando una pipeta aforada segn el procedimiento descrito en el
anexo IV.
139
v
v
v
z $##%%')
z H(#T*X#T
<= TU
[3.82]

A : Se
calcul de acuerdo a la ecuacin 3.11, ya que estuvo relacionada a una medida
de volumen utilizando un matraz aforado, de acuerdo al procedimiento descrito en

el anexo IV.
v
v
v
<= TU
z $##%%')
z H(#T*X#T
[3.83]
La incertidumbre combinada del mtodo, %,-.- se calcul por la suma

v
v
%,-.- S)TU'8*T
z "#$%&'(')*$
z v !
[3.84]
Todos los clculos posteriores se realizaron siguiendo el modelo de clculo de la

incertidumbre del mtodo para la determinacin de la alcalinidad total.
3.1.2.3.5 Clculo de la incertidumbre del mtodo para la determinacin de slidos

totales disueltos
del mensurando.
D(/Q
]H:
Y" l" [mJ

[2.19]

incertidumbre, tanto las asociadas al modelo matemtica del mensurando como
figura 3.5.
140
Fig 3.5: Diagrama causa-efecto para identificar las fuentes de incertidumbre del mtodo
para la determinacin de la alcalinidad total
cuantificacin de los componentes expresados como incertidumbres estndar
A: Analista, @

calcul de acuerdo a la ecuacin 3.85
S)TU'8*T P!
[3.85]
B: Procedimiento, @

medida, utilizados para la estimacin del mensurando definido por la ecuacin
2.19. En esta ecuacin, la diferencia YNJ f Nv [, son medidas de masa empleando
el mismo equipo de medida, que en este caso, se refiere al uso de una balanza
analtica Por esta razn, se reemplaz en la ecuacin 2.19 YNJ f Nv [ N, para
evitar la duplicacin de la contribucin a la incertidumbre debido a la balanza. Con

esta consideracin, la ecuacin 2.19 queda segn la ecuacin 3.86.
141
D(/Q
"mJ
]H:
[3.86]

La incertidumbre combinada asociada al procedimiento, se calcul aplicando la

ley de propagacin de incertidumbre a la ecuacin 3.86, obtenindose la siguiente
expresin.
"#$%&'(')*$ / >?<
"
m " z

m
[3.87]
Donde:
" Incertidumbre en la medida de masa
Incertidumbre en la medida del volumen de muestra

obtuvieron los coeficientes de sensibilidad y posteriormente determinar la
contribucin de cada componente de incertidumbre: " y de la ecuacin 3.87

"

J

" mJ

[3.88]
[3.89]
B.1.1: Incertidumbre en la medida de masa, : Esta componente se calcul de
acuerdo a la ecuacin 3.27, debido a que estuvo relacionada a una medida de

masa. Considerando iguales, tanto las ecuaciones como los datos proporcionados
para el clculo de cada contribucin. No se incluy en este clculo la contribucin
debida al patrn, ya que sta contribucin es analizada ms adelante. Se obtuvo
as la siguiente ecuacin 3.90.
v
v
v
v
" TU
z H(#T*X#T
z :#'T
z !8$UX%')
[3.90]
B.1.2: Incertidumbre en la medida del volumen de muestra, : Esta

a un matraz aforado.
142
v
v
v
z $##%%')
z H(#T*X#T
TU
[3.91]
C: MRC, ,
En el caso del nivel alto de concentracin no se realiz dilucin de la solucin

patrn certificado de acuerdo al anexo IV, la incertidumbre del MRC, en este caso
fue igual a la >?< que se determina ms adelante, donde
>?< .
!
Para los niveles bajo y medio de concentracin, donde se realiz dilucin de la
solucin patrn como se describe en el anexo IV, la incertidumbre del MRC,
! ,
estuvo asociada a las contribuciones a la incertidumbre debido a la preparacin

de la solucin patrn. Primero se especific el modelo matemtico para el clculo
de la concentracin preparada a partir de la ecuacin 2.20 descrita en el literal
2.1.5, obtenindose la siguiente expresin.
D(]H:/Ql
>?</ m>?</
[3.92]
>?</

! ,
3.92
!
>?<
>?<
>?<
m >?< z >?<

z >?<

>?<

>?<
m >?<
m >?<
[3.93]
Donde:
>?< Incertidumbre de la concentracin de la solucin patrn certificada
>?< Incertidumbre en la medida de la alcuota tomada
>?< Incertidumbre en la medida del volumen preparado
143

se obtuvieron los coeficientes de sensibilidad y posteriormente se calcul la
contribucin de las componentes de incertidumbre: >?< , >?< y
>?< de la ecuacin 3.93.
>?<
>?<

>?<
>?<

>?<
>?<
>?<
>?<
>?<
JJ
>?<
[3.94]
JJ
>?< m >?<
>?<
[3.95]
DJJ
[3.96]

: Se calcul empleando la ecuacin 1.51, con los datos proporcionados
en el certificado de calibracin del MRC de acuerdo a la ecuacin 3.97

>?<
%7~
mJ
m D(]H:Ql
[3.97]

: Esta

a una medida de volumen utilizando un matraz aforado o pipeta volumtrica
segn el nivel de concentracin preparado de acuerdo al procedimiento descrito
en el anexo IV.
v
v
v
>?< TU
z $##%%')
z H(#T*X#T
[3.98]

A : Esta
a una medida de volumen utilizando un matraz aforado de acuerdo al

procedimiento descrito en el anexo IV.
v
v
>?< TU
z $##%%')
z vH(#T*X#T
[3.99]
144
La incertidumbre combinada de medida, %
*$&$
se calcul por la suma

%
*$&$
v
v
S)TU'8*T
z "#$%&'(')*$
z v !
[3.100]
Los clculos posteriores se realizaron siguiendo el modelo de clculo de la

incertidumbre del mtodo establecido para la determinacin de la alcalinidad total.
3.1.2.4
Determinacin del Lmite de Deteccin
Se determin el lmite de deteccin a partir de los datos obtenidos del blanco

empleando la ecuacin 1.9 descrita en el captulo uno.
C Z_F z 3PF
3.1.2.5
[1.9]
Determinacin del Lmite de Cuantificacin
Se estableci en funcin de los resultados obtenidos de los parmetros de

validacin para el nivel bajo de concentracin.
3.1.2.6
Determinacin del Intervalo de trabajo
El intervalo de trabajo qued definido, en funcin de los resultados obtenidos de

los parmetros de validacin, los cuales deban cumplir con los objetivos
propuestos en el captulo 2.
3.2
DISCUSIN DE RESULTADOS
3.2.1
PRUEBAS PREVIAS
Los resultados obtenidos en las pruebas previas realizadas: 1) para la puesta a

punto de los mtodos, 2) para la determinacin del nivel bajo de concentracin y
145
3) para el contraste de significacin entre el MRC y MRi, se presentan a

continuacin.
3.2.1.1
Resultados de las pruebas previas realizadas para el mtodo de alcalinidad

total
3.2.1.1.1 Prueba previa para la puesta a punto del mtodo

Como se indic en el captulo dos, para esta prueba se analiz una muestra de
62,5 mgCaCO3/L de concentracin en un sistema abierto y cerrado. Para decidir
si la diferencia entre las dos medias muestrales de los resultados proporcionados
por ambos sistemas son las mismas, es decir, para contrastar la hiptesis nula
I$ : aJ av , se calcul el estadstico y . Los resultados obtenidos con ayuda de
Excel se presentan en la tabla 3.1. Los valores experimentales obtenidos en la

puesta a punto del mtodo, se presentan en el anexo VIII.
Como se puede observar en la tabla 3.1, para un nivel de significacin N 0,05, el
valor experimental de || igual a 0,2 es menor que el valor crtico de igual a 2,78
para un contraste de una cola, ya que de antemano se presumi que el sistema

abierto presentara un sesgo negativo en comparacin con los resultados
obtenidos con el sistema cerrado debido a la posible solubilidad del CO2 del aire.
Sin embargo, el resultado para un contraste de una cola prob que la diferencia
entre las dos medias no fue significativa al nivel del 5%; es decir, no existi
evidencia de que el anlisis en sistema abierto presente un sesgo negativo
significativo respecto al sistema cerrado. En consecuencia se acept la hiptesis
nula que indic que no existieron diferencias significativas entre las medias
muestrales
proporcionadas
por
ambos
sistemas.
Excel
proporcion
adicionalmente el valor de la probabilidad NY|| y0,2) = 0,43 como se puede
observar en la tabla 3.1. El valor de esta probabilidad es muy superior a 0,05, por
tanto esto indic que la diferencia no fue significativa a un nivel del 5% como ya
mencion.
146
Tabla 3.1: Valores obtenidos de los estadsticos y en el contraste de significacin entre
el anlisis en un sistema abierto y cerrado para el mtodo de alcalinidad total
Prueba t para dos muestras suponiendo varianzas desiguales
Muestras: soluciones analizadas en Sist. Abierto y Cerrado
Concentracin: 62,5 mgCaCO3/L
Resultados
Sist. Cerrado
Sist. Abierto
Media
59,97
59,89
Varianza
0,28
0,26
Observaciones
Diferencia hipottica de las medias
Grados de libertad
Estadstico t
0,2
P(T<=t) una cola
0,43
Valor crtico de t (una cola)
2,13
P(T<=t) dos colas
0,85
Valor crtico de t (dos colas)
2,78
Prueba F para varianzas de dos muestras

Resultados
Sist. Cerrado
Sist. Abierto
Media
59,97
59,89
Varianza
0,28
0,26
Observaciones
Grados de libertad
1,08
P(F<=f) una cola
0,48
Valor crtico para F (una cola)
19,00
3
2
Igualmente, se calcul el valor del estadstico , para probar si la diferencia entre
las dos varianzas muestrales proporcionadas por ambos sistemas era

significativa, es decir, para probar I : PJv Pvv . Como se puede observar en la
tabla 3.1, para un nivel de significacin N 0,05, el valor experimental de igual a
1,08 es menor que el valor crtico de igual a 19 para un contraste de una cola,
debido a que como se indic anteriormente, Excel calcula el valor de solo para
una cola, es decir, para obtener un valor de mayor a uno. El resultado prob
que el sistema cerrado no es ms preciso que el abierto, es decir, se acept la

hiptesis nula de que no existieron diferencias significativas entre las varianzas
147
muestrales a un nivel del 5%. Asimismo, como se puede observar en la tabla 3.1,
Excel proporcion el valor de la probabilidad NY y1,03) 0,48. Puesto que esta
probabilidad es muy superior a 0,05, se prob que la diferencia no fue significativa

a un nivel del 5%.
Con estos resultados, se verific que no existieron diferencias significativas entre
el anlisis en un sistema abierto o cerrado para la determinacin de la alcalinidad

total. Razn por la cual, se decidi realizar este ensayo en un sistema abierto, con
la intensin de facilitar el desarrollo del mismo, tal como fue especificado en el
procedimiento del mtodo.
3.2.1.1.2 Prueba previa para la determinacin del nivel bajo de concentracin
Se realiz el anlisis de tres muestras de 1, 3 y 5 mgCaCO3/L de concentracin.
Para establecer el nivel bajo del mtodo, se calcul el % de Recuperacin de las
mediciones realizadas, cuyos resultados obtenidos se presentan en la tabla 3.2.
Los valores experimentales obtenidos en esta prueba, se presentan en el anexo
VIII. Como se puede observar en la tabla 3.2, para las concentraciones de 1 y 3
mgCaCO3/L, se obtuvieron valores del % de Recuperacin fuera del intervalo
establecido en los objetivos de validacin, es decir, fuera del 80% - 120%. Sin
embargo para la muestra de 5 mgCaCO3/L de concentracin, el % de
Recuperacin obtenido se encontr dentro de este intervalo. En funcin de este
resultado, se estableci el valor del nivel bajo igual a 5 mgCaCO3/L, tal como fue
especificado en los objetivos de validacin del mtodo.
concentracin para el mtodo de alcalinidad total
Anlisis del nivel bajo de concentracin
1 mgCaCO3/L
Repeticiones Concentracin
% de
3 mgCaCO3/L
Concentracin
% de
5 mgCaCO3/L
Concentracin
% de
(mgCaCO3/L) Recuperacin (mgCaCO3/L) Recuperacin (mgCaCO3/L) Recuperacin

1
2,0
203,0
4,1
135,3
5,1
101,5
2,0
203,0
4,3
143,8
5,6
111,7
2,0
203,0
4,3
143,8
5,3
106,6
148
3.2.1.1.3 Prueba previa para el contraste de significacin entre el MRC y el MRi

En esta prueba se analizaron dos muestras de igual concentracin, 5 mgCaCO3/L
preparadas a partir de MRC y del MRi. Para decidir si la diferencia entre las
medias muestrales, as como la diferencia entre las varianzas proporcionadas por
ambas muestras era significativa, se calcul el estadstico y . Los resultados
obtenidos se presentan en la tabla 3.3. Los valores experimentales obtenidos en

el contraste de significacin se presentan en el anexo VIII.
Como se puede observar en la tabla 3.3, para un nivel de significacin N 0,05,
el valor experimental de || igual a 1,83 es menor que el valor crtico de igual a
2,36 para un contraste de dos colas, se compara con este valor de dos colas ya
que no se tuvo una idea preconcebida de los resultados que se obtendran. Este
resultado indic que la diferencia entre las dos medias no fue significativa al nivel
del 5%. El valor de la probabilidad NY|| y1,83) = 0,11 fue superior a 0,05, lo que
confirm que la diferencia no fue significativa a un nivel del 5%.

el MRC y el MRi para el mtodo de alcalinidad total
Muestras: soluciones preparadas con MRC y MRi
Concentracin: 5 mgCaCO3/L
Resultados
MRi
MRC
Media
5,13
5,38
Varianza
0,07
0,03
Observaciones
Varianza agrupada
0,049
Grados de libertad
Estadstico t
-1,83
P(T<=t) una cola
0,06
1,89
P(T<=t) dos colas
0,11
2,36
149
el MRC y el MRi para el mtodo de alcalinidad total Continuacin
Resultados
MRi
MRC
Media
5,13
5,38
Varianza
0,07
0,03
Observaciones
Grados de libertad
P(F<=f) una cola
0,26
6,39
Con estos resultados, se comprob al igual que en la puesta a punto del mtodo,
que no existieron diferencias significativas entre el MRC y el MRi, para la
determinacin de la alcalinidad total. Por tanto, se estableci que el laboratorio
para sus respectivos controles de calidad, puede emplear como MRi el reactivo de
carbonato de sodio empleado en este contraste de significacin.
3.2.1.2
Resultados de las pruebas previas realizadas para el mtodo de DBO5
3.2.1.2.1 Prueba previa para la puesta a punto del mtodo

En esta prueba se analiz una muestra de 20 mg/L de concentracin usando un
inhibidor de nitrificacin (piridina) y sin el uso del mismo. De igual manera de
calcularon los estadstico y para comprobar las hiptesis nulas, I$ : aJ av y
I : PJv Pvv respectivamente. Los resultados obtenidos se presentan en la tabla
3.4 que se muestra a continuacin y los valores experimentales obtenidos se

presentan en el anexo IX. Como se puede observar en la tabla, el valor
experimental de igual a 0,34 es menor que el valor crtico de igual 4,30 para un
contraste de dos colas, lo que indic que la diferencia entre las dos medias no fue
significativa al nivel del 5%, de esta manera se acept la hiptesis nula.

Igualmente el valor de la probabilidad NY|| y0,34) = 0,76, fue muy superior a 0,05
lo que indic que la diferencias no fueron significativas a un nivel del 5%.
150
el anlisis con y sin el uso del inhibidor de nitrificacin (piridina) para el mtodo de DBO5
Muestras: soluciones analizadas con y sin inhibidor
Concentracin: 20 mg/L
Resultados
Sin inhibidor Con inhibidor
Media
20,94
20,11
Varianza
17,34
0,01
Observaciones
Grados de libertad
Estadstico t
0,34
P(T<=t) una cola
0,38
2,92
P(T<=t) dos colas
0,76
4,30

Resultados
Sin inhibidor Con inhibidor
Media
20,94
20,11
Varianza
17,34
0,01
Observaciones
Grados de libertad
1791,31
P(F<=f) una cola
0,0006
19
Sin embargo, el valor experimental de igual 1791,31 es extremadamente mayor
que el valor crtico de igual 19 para un contraste de una cola, esto prob que el
anlisis usando el inhibidor de nitrificacin es mucho ms preciso que el anlisis

donde no se us este inhibidor. Por tanto, la hiptesis nula se rechaz. De hecho,
de acuerdo al valor de NY|| y1791,31) 0,0006 que se puede observar en la 3.4,
este es menor que el 0,05, esto indic, que la diferencia entre las desviaciones
fue significativa incluso al nivel de 0,06%. En otras palabras, se rechaza la
hiptesis nula, aunque sea de hecho verdadera 1 de cada 1818 veces
(aproximadamente). Este resultado puede deberse a la procedencia del agua del
151
machngara utilizada para la preparacin del inculo y que fue la razn explicada
en el captulo dos, por la cual se estableci el desarrollo de esta prueba previa
para el mtodo.
En funcin de estos resultados obtenidos, para el desarrollo del ensayo de DBO
se decidi emplear el inhibidor de nitrificacin (piridina) para cualquier muestra
analizada, tal como fue establecido en el procedimiento del mtodo.
3.2.1.2.2 Prueba previa para la determinacin del nivel bajo de concentracin
En esta prueba se analizaron dos muestras de 1,24 y 1,98 mg/L. Se calcul el %
de Recuperacin de las mediciones realizadas, cuyos valores se presentan en la
tabla 3.5 que se muestra a continuacin. Los valores experimentales obtenidos se
presentan en el anexo IX.
concentracin para el mtodo de DBO5
Anlisis del nivel bajo de concentracin
1,24 mg/L
Repeticiones Concentracin
1,98 mg/L
% de
Concentracin
% de
(mg/L)
Recuperacin
(mg/L)
Recuperacin
0,8
61,2
1,9
94,6
0,8
67,3
2,1
107,3
1,5
118,3
1,7
86,9
0,9
72,6
2,2
109,9
Como se puede observar en la tabla 3.5, los valores del % de Recuperacin para
1,24 mg/L estuvieron fuera del intervalo de 80% y 120% establecido en los
objetivos de validacin. Mientras que para la concentracin de 1,98 mg/L, estos
valores si se encontr dentro del intervalo. Ya que el valor de la solucin patrn
certificada para el desarrollo de la validacin de este mtodo, fue de 200 mg/L de
concentracin, el nivel bajo de concentracin se defini igual a 2 mg/L, tal como
se indic en los objetivos de validacin del mtodo.
152
3.2.1.2.3 Prueba previa para el contraste de significacin entre el MRC y MRi

En esta prueba se analizaron dos muestras de igual concentracin, 2 mg/L
preparadas a partir del MRC y del MRi. Los clculos de los estadsticos y se
presentan en la tabla 3.6 que se muestra a continuacin. Los valores

experimentales obtenidos en esta prueba, se presentan en el anexo IX.
el MRC y el MRi para el mtodo de DBO5
Resultados
MRi
MRC
Media
1,97
1,95
Varianza
0,03
0,03
Observaciones
Grados de libertad
Estadstico t
0,18
P(T<=t) una cola
0,43
1,86
P(T<=t) dos colas
0,86
2,31

Resultados
MRi
MRC
Media
1,97
1,95
Varianza
0,03
0,03
Observaciones
Grados de libertad
1,36
P(F<=f) una cola
0,39
6,39
Como se puede observar en la tabla 3.6, el valor experimental de || igual a 0,18
es menor que el valor crtico de igual a 2,31 para un contraste de dos colas, lo
que prob que la diferencia entre las dos medias no fue significativa. El valor de la
153
probabilidad NY|| y0,18) = 0,86 result muy superior a 0,05, esto confirm que la
diferencia no fue significativa a un nivel del 5%. As tambin, el valor experimental

de igual a 1,36 fue menor que el valor crtico de igual a 0,39 como se puede
observar en la tabla 3.6. Esto prob la hiptesis nula.. El valor de la probabilidad
NY y1,36) = 0,39 confirm que la diferencia entre las varianzas no fue
significativa a un nivel del 5%. En otras palabras, lo resultados obtenidos del MRC
no son ms precisos que los obtenidos con el MRi.
Con estos resultados, se comprob que no existieron diferencias significativas
entre el MRC y el MRi, para la determinacin de DBO. Por tanto, se estableci
que el laboratorio para sus respectivos controles de calidad, puede emplear como
MRi los reactivos de glucosa y cido glutmico utilizados para este contraste de
significacin.
3.2.1.3
Resultados de las pruebas previas realizadas para el mtodo de STD
3.2.1.3.1 Prueba previa para la puesta a punto

En esta prueba se tomaron los pesos de los crisoles a diferentes tiempos de
enfriamiento. Los pesos obtenidos se presentan en la tabla 3.7 que se muestra a
continuacin.
Tabla 3.7: Valores obtenidos en la determinacin del tiempo de enfriamiento de los
crisoles para el mtodo de STD
Pesos
Tiempo de
estabilizacin
Crisol 1
Crisol 2
Crisol 3
(min)
(g)
(g)
(g)
60
43,8161
43,6336
43,8798
90
43,8160
43,6338
43,8801
120
43,8160
43,6339
43,8802
150
43,8160
43,6338
43,8802
Como se puede observar en la tabla 3.7, la lgica para establecer el tiempo de

enfriamiento de los crisoles en el desecador, se bas en la imposibilidad de
conseguir que la diferencia del ltimo dgito reportado sea igual a cero, debido a la
154
resolucin de la balanza que es igual a 0,0001 g, por tanto, de acuerdo a los

pesos reportados, el tiempo de enfriamiento se estableci igual a 2 horas y media
(150 minutos), tiempo en que como se puede observar en la tabla 3.7, se
obtuvieron diferencias en el ltimo dgito de los pesos, que se atribuyen a la
resolucin de la balanza. Este resultado fue es especificado en el procedimiento
del mtodo.
3.2.1.3.2 Pruebas previa para la determinacin de nivel bajo de concentracin
En esta prueba se analizaron cuatro muestras de 5, 10, 20 y 50 mg/L de
concentracin. Los valores de los % de Recuperacin obtenidos, se presentan a
continuacin en la tabla 3.8. Los valores experimentales obtenidos, se presentan
en el anexo X.
concentracin para el mtodo de STD
Anlisis del Nivel bajo de Concentracin
5 mg/L
Repeticiones
10 mg/L
Concentracin
% de
Concentracin
% de
(mg/L)
Recuperacin
(mg/L)
Recuperacin
18
360
26
260
18
360
18
180
12
240
20
200
20 mg/L
Repeticiones
50 mg/L
Concentracin
% de
Concentracin
% de
(mg/L)
Recuperacin
(mg/L)
Recuperacin
28
140
60
120
30
150
58
116
18
90
58
116
Como se puede observa en la tabla 3.8, para las concentraciones de 5, 10 y 20

mg/L se obtuvieron valores de los % de Recuperacin mucho mayores al
establecido en los objetivos de validacin de 80% - 120%. Algunos incluso iguales
a 360% obtenido para el nivel de 5mg/L, por mencionar el valor ms alto obtenido.
Sin embargo, para la concentracin de 50 mg/L, se obtuvieron valores de los %
155
de Recuperacin dentro del intervalo establecido, aunque uno de estos valores se

encontr justo en el lmite superior igual a 120, sin embargo de acuerdo a los
objetivos puede llegar hasta este valor. En funcin de estos resultados, el nivel
bajo de concentracin se defini igual a 50 mg/L tal como fue especificado en los
objetivos de validacin del mtodo.
3.2.1.3.3 Pruebas previas para el contraste de significacin del MRC y el MRi
En esta prueba se analizaron dos muestras de igual concentracin, 50 mg/L
preparadas a partir de MRC y del MRi. Los estadsticos y obtenidos, se
presentan en la tabla 3.9. Como se puede observar, el valor experimental de ||
igual a 0,35 fue menor que el valor crtico de igual a 2,31 para un contraste de
dos colas, lo que prob que la diferencia entre las dos medias no fue significativa
aceptndose la hiptesis nula. Tal como se observa, el valor de la probabilidad
NY|| y0,35) = 0,73 es muy superior a 0,05, esto indic que la diferencia no es
significativa a un nivel del 5%.

el MRC y el MRi para el mtodo de STD
Estadsticos t y F obtenidos en la hoja de clculo de Excel
Resultados
MRC
MRi
Media
62,8
63,2
Varianza
3,2
3,2
Observaciones
Grados de libertad
Estadstico t
-0,35
P(T<=t) una cola
0,37
1,86
P(T<=t) dos colas
0,73
2,31
156
el MRC y el MRi para el mtodo de STD Continuacin
Resultados
MRC
MRi
Media
62,8
61,6
Varianza
3,2
3,2
Observaciones
Grados de libertad
P(F<=f) una cola
0,5
6,39
Asimismo, el valor experimental de igual a 1 tal como se puede observar en la
tabla 3.9, es menor que el valor crtico de igual a 6,39, se prob as tambin que
no existieron diferencias significativas entre las varianzas de los resultados a un
nivel del 5%. El valor de la probabilidad NY y1) = 0,5 confirm que la diferencia
no es significativa. Los valores experimentales obtenidos se presentan en el
anexo X.
En funcin de estos resultados, se comprob que no existieron diferencias
significativas entre el MRC y el MRi, para la determinacin de STD. Por tanto, se
estableci que el laboratorio para sus respectivos controles de calidad, puede
emplear como MRi el reactivo de carbonato de sodio empleado en este contraste
de significacin.
3.2.2
PARMETROS DE VALIDACIN
A partir de los valores experimentales obtenidos en la ejecucin del diseo

experimental descrito para cada mtodo, se calcularon los parmetros de
validacin: % de Recuperacin, precisin e incertidumbre establecidos para la
aceptacin de la validacin de los mtodos, de acuerdo al cumplimiento de los
objetivos. Los resultados obtenidos en cada mtodo se presentan a continuacin.
157
3.2.2.1
Resultados de los parmetros de validacin obtenidos en el mtodo de

alcalinidad total
Todos
los
valores
experimentales
obtenidos,
as
como
los
clculos
correspondientes de los parmetros de validacin del mtodo, se presentan en el

anexo XI.
3.2.2.1.1 Veracidad (% de Recuperacin)
En la tabla 3.10 se presentan los % de Recuperacin calculados, a partir de las
mediciones realizadas en cada nivel de concentracin definidos para el intervalo
de trabajo.
Tabla 3.10: Resultados de la veracidad (% de Recuperacin) obtenidos en el mtodo de
alcalinidad total
Valor de referencia
Valor medio
% de
(mgCaCO3/L)
(mgCaCO3/L)
Recuperacin
5,21
104,24
25
24,46
97,85
49,9
47,31
94,81
50
49,13
98,27
100
97,22
97,22
250
240,20
96,08
Como se puede observar en la tabla 3.10, los valores obtenidos del % de

Recuperacin tanto para el rango bajo como para el rango alto, se encontraron
dentro del intervalo de 80% y 120% establecido en los objetivos de validacin del
mtodo. Para el rango bajo los valores obtenidos variaron desde el 94,81% hasta
el 104,24%; mientras que, para el rango alto los valores variaron desde el 96,08%
hasta el 98,27%, como se puede observar en la tabla 3.10. Los valores ms
alejado al 100% corresponden a los niveles altos de concentracin en ambos
rangos del mtodo. En la tabla 3.11 se presentan los % de Recuperacin
calculados a partir de las mediciones realizadas para la muestra real fortificada.
Como se puede observar, los porcentajes de recuperacin obtenidos se
encontraron entre el 80,25% hasta el 96,30% para el rango bajo. Para el rango
158
alto los valores obtenidos fueron desde el 83,46% hasta el 87,74%. Los
porcentajes de recuperacin se encontraron dentro del intervalo establecido del
80% al 120%.
Tabla 3.11: % de Recuperacin obtenidos de una muestra real fortificada en el mtodo de
alcalinidad total
Rango bajo
Adicin
5 mgCaCO3/L
Matriz
Matriz + MRC
% de
(mgCaCO3/L)
(mgCaCO3/L)
Recuperacin
13,9
18,7
96,30
14,2
18,2
80,25
13,9
18,2
85,60
13,9
18,5
90,95
14,2
18,2
80,25
Repeticiones
Rango alto
Adicin
50 mgCaCO3/L
Matriz
Matriz + MRC
% de
(mgCaCO3/L)
(mgCaCO3/L)
Recuperacin
66,3
109,1
85,60
66,3
108,1
83,46
65,3
109,1
87,74
65,3
108,1
85,60
66,3
108,1
83,46
Repeticiones
3.2.2.1.2 Precisin (% CVr y % CVR)

En la tabla 3.12 se presentan los resultados relevantes calculados para la
determinacin de la precisin del mtodo. De acuerdo a lo explicado en el captulo
uno, el ANOVA de un factor fue diseado para contrastar la hiptesis nula,
I$ : aJ av a . De acuerdo a los resultados obtenidos por el ANOVA de un
factor calculados en la hoja de clculo de Excel que se presentan en la tabla, los
valores experimentales de igual a 1,22, 3,04, 3,26, 3,51, 2,94 y 2,94 para los
niveles de rango bajo, as como para los del rango alto respectivamente, fueron
menores al valor crtico de igual a 3,89 (para todos los niveles).
Consecuentemente, se acept la hiptesis nula, es decir, la diferencia entre las

medias muestrales se pudo atribuir a la presencia de errores aleatorios. El nivel
159
de significacin b que se presenta en la tabla 3.12, es el valor calculado por

Excel, el mismo como se puede observar, en todos los casos es superior a 0,05;
por tanto, la diferencia no fue significativa al nivel del 5%.
alcalinidad total
Rango bajo de trabajo
Nivel bajo
Nivel medio
Nivel alto
5 mgCaCO3/L
25 mgCaCO3/L
49,9 mgCaCO3/L
F calculado
1,22
3,04
3,26
F crtico
3,89
3,89
3,89
0,33
0,09
0,07
CVr, %
3,02
0,81
0,61
CVR, %
3,04
0,96
0,74
Resultados
Rango alto de trabajo

Nivel bajo
Nivel medio
Nivel alto
50 mgCaCO3/L
100 mgCaCO3/L
250 mgCaCO3/L
F calculado
3,51
2,94
2,94
F crtico
3,89
3,89
3,89
0,06
0,09
0,09
CVr, %
1,04
0,94
0,38
CVR, %
1,26
1,10
0,45
Resultados
Los porcentajes de CVr y CVR obtenidos en ambos rangos se encontraron dentro

de los valores establecidos en los objetivos de validacin, %CVr 15% y
%CVR 20%. Los valores mximos obtenidos correspondieron a los niveles bajos
de ambos rangos, es decir, para 5 y 50 mgCaCO3/L, tal como se puede observar

en los resultados presentados en la tabla 3.12.
3.2.2.1.3 Incertidumbre
En la tabla 3.13 se presentan los valores de la incertidumbre relativa del mtodo
obtenidos en cada nivel de concentracin para el rango alto y bajo establecidos
para el mtodo. Como se puede observar, los mximos valores de incertidumbre
relativa obtenidos iguales a 8,13% y 3,26%, correspondieron al nivel bajo de
160
concentracin para 5 mgCaCO3/L y 50 mgCaCO3/L respectivamente. Ninguno sin

embargo, super el valor establecido en los objetivos de validacin 35%. Los
valores de se calcularon para un nivel de confianza del 95,45%,
obtenindose valores iguales 2, tal como se puede observar en la tabla 3.13. Los
valores obtenidos en los dems niveles de concentracin, se encontraron de igual
manera dentro del valor establecido.
Tabla 3.13: Resultados de la Incertidumbre Expandida obtenidos en el mtodo de
alcalinidad total
Incertidumbre Expandida del mtodo
(mgCaCO3/L)
(mgCaCO3/L)
0,20
@
2
0,41
8,13
25
0,28
0,55
2,21
49,9
0,40
0,80
1,61
50
0,81
1,63
3,26
100
1,22
2,44
2,44
250
1,42
2,83
1,13
Concentracin
Incertidumbre Expandida,
(mgCaCO3/L)
3.2.2.1.4 Lmite de cuantificacin

De acuerdo a los resultados de los parmetros de validacin obtenidos de los
niveles bajos de concentracin, el lmite de cuantificacin fue igual a 5
mgCaCO3/L y 50 mgCaCO3/L para el rango bajo y alto respectivamente.
3.2.2.1.5 Intervalo de trabajo
En funcin de los ya mencionados resultados obtenidos: el % de Recuperacin, la
precisin e incertidumbre, todos cumplieron con los objetivos de validacin
propuestos, por tanto, el intervalo de trabajo se defini igual al establecido, es
decir, de 5 a 49,9 mgCaCO3/L para el rango bajo del mtodo y de 50 a 250
mgCaCO3/L para el rango alto del mtodo.
161
3.2.2.2
Resultados de la calibracin del medidor de conductividad
En la tabla 3.14 se presentan los resultados obtenidos del clculo de la

incertidumbre de calibracin del medidor de conductividad. Como se puede
observar, La incertidumbre de uso obtenida en cada punto, fue 1,37 S/cm y 2,03
mS/cm para el estndar de 147 S/cm y 12,8 mS/cm respectivamente.
Tabla 3.14: Resultados de la incertidumbre de calibracin de uso obtenidos para el
medidor de conductividad
Incertidumbre Expandida de Calibracin de Uso
0,54 S/cm
@
||
147 S/cm
0,30 S/cm
1,37 S/cm
0,93
12,8 mS/cm
0,10 mS/cm
0,06 mS/cm
0,26 mS/cm
2,03
Estndar
Incertidumbre Expandida
/78$
En el procedimiento de calibracin descrito en el captulo dos, se estableci el

criterio de aceptacin o rechazo para los valores obtenidos de la incertidumbre de
calibracin, criterio que indic, si el valor de la incertidumbre obtenida es menor o
igual que dos veces la exactitud del equipo, ms la incertidumbre del patrn,
aceptar la calibracin. En la tabla 3.15 se presentan los valores de la
incertidumbre de las soluciones patrones certificadas empleadas para la
calibracin, as como el valor de la exactitud del equipo igual a 5%, valor que fue
tomado del manual del equipo.
Tabla 3.15: Resultados del criterio de aceptacin de la incertidumbre de calibracin de uso
obtenidos para el medidor de conductividad
Estndar
147 S/cm
12,8 mS/cm
1 S/cm
0,2 mS/cm
Exactitud
0,5 %
0,5 %
Criterio
2,47 S/cm
0,33 mS/cm
1,37 S/cm
0,26 mS/cm
Se acepta
Se acepta
/&U 8*)&T#
/78$
Aceptacin
Como se puede observar en la tabla 3.15, los valores de la incertidumbre relativa

fueron menores a los valores correspondientes al criterio de aceptacin o
rechazo. Por tanto, se acept la calibracin del medidor de conductividad, a partir
162
de los valores obtenidos. Los valores experimentales obtenidos en la calibracin

del medidor de conductividad, as como los clculos de la incertidumbre de
calibracin correspondiente, se presentan en el anexo XII.
3.2.2.3

conductividad
Todos
los
valores
experimentales
obtenidos
as
como
los
clculos
correspondientes de los parmetros para la validacin del mtodo, se presentan

en el anexo XIII.
En la tabla 3.16 se presentan los % de Recuperacin obtenidos para los dos
puntos correspondientes a los estndares utilizados en la validacin del mtodo.
Como se puede observar, el valor obtenido para el estndar de 147 S/cm igual a
99,37% y el valor obtenido para el estndar de 12,8 mS/cm igual a 100,60% se
encontraron dentro del intervalo del 80% al 120% establecido en| los objetivos de
validacin, cabe resaltar que fueron valores muy cercanos al valor ideal del 100%,
lo que indic que el mtodo tiene una buena recuperacin.
conductividad
% de
Valor de
referencia
Valor medio
147 S/cm
146,08 S/cm
99,37
12,8 mS/cm
12,88 mS/cm
100,60
Recuperacin

Los resultados de la precisin del mtodo se presentan en la tabla 3.17 obtenidos
a partir de los clculos del ANOVA de un factor que se presentan en el anexo XI.
Como se puede observar en la tabla, tanto para el estndar de 147 S/cm como
para el de 12,8 mS/cm los valores experimentales de igual 2,23 y 1,87
163
respectivamente, fueron menores al valor crtico de igual a 3,89 para ambos
estndares. Con este resultado, la hiptesis nula I$ : aJ av a , fue
aceptada, lo que prob en otras palabras, que la diferencia entre las medias
muestrales se debi a la presencia de los errores aleatorios. As tambin, el valor
de b obtenido igual a 0,15 y 0,20 para cada estndar, fue superior a 0,05, por
tanto, la diferencia no fue significativa al nivel de 5%.

conductividad
Resultados
Estndar
147 S/cm
12,8 mS/cm
F calculado
2,23
1,87
F crtico
3,89
3,89
0,15
0,20
% CVr
0,24
0,19
% CVR
0,26
0,20
Los valores de %CVr y % CVR iguales a 0,24 y 0,26 para el estndar de 147
S/cm y de 0,19 y 0,20 para el estndar de 12,8 mS/cm, no superaron el lmite
establecido %CVr 15% y %CVR 20% en los objetivos de validacin tal como
se observa en la tabla 3.17.
Los clculos de la incertidumbre expandida del mtodo se presentan en la tabla

3.18. Los valores de la incertidumbre relativa obtenida para el punto bajo igual a
2,03% y para el punto alto igual a 4,44%, se encontraron dentro del 35%
establecido en los objetivos de validacin. %. Los
valores de se
calcularon para un nivel de confianza del 95,45%, obtenindose valores iguales 2,

tal como se puede observar en la tabla 3.18.
164
Tabla 3.18: Resultados de la Incertidumbre Expandida obtenidos en el mtodo de

conductividad
Incertidumbre Expandida del mtodo
147 S/cm
1,49 S/cm
@
2
2,98 S/cm
2,03
12,8 mS/cm
0,28 mS/cm
0,57 mS/cm
4,44
Estndar
/

El lmite de cuantificacin del mtodo se estableci igual a 147 S/cm en funcin
de que este nivel cumpli con los objetivos de validacin.
El mtodo de conductividad fue validado en los puntos correspondientes a los
valores de conductividad de los estndares disponibles, de acuerdo a los
resultados obtenidos del % de Recuperacin, precisin e incertidumbre, se acept
la validacin del mtodo para el intervalo comprendido entre 147 S/cm y 12,8
mS/cm.
3.2.2.4

DBO5
Todos los valores experimentales, as como los clculos correspondientes de los

parmetros para la validacin del mtodo, se presentan en el anexo XIV.
En la tabla 3.19 se presentan los % de Recuperacin calculados en cada nivel de
concentracin para la determinacin de la veracidad del mtodo. Como se puede
observar, se obtuvo para el nivel medio el valor de recuperacin ms alejado del
100% igual a 105,91%. Para los niveles bajo y alto se obtuvieron valores de
recuperacin un poco ms cercanos al 100% e iguales a 95,16% y 95,31%
respectivamente. Ningn porcentaje super el 80% o 120% establecido en los
165
objetivos de validacin. La serie de diluciones necesarias para el anlisis de la

muestra, es un factor influyente en el resultado, ya que como se indic en el
procedimiento del mtodo, este puede provocar el ingreso de aire al sistema.
DBO5
Valor de referencia
Valor medio
% de
(mg /L)
(mg/L)
Recuperacin
1,90
95,16
200
211,82
105,91
500
476,53
95,31
En la tabla 3.20 se presentan los resultados del % de Recuperacin obtenidos del

anlisis de la muestra real fortificada. Como se puede observar, los porcentajes
de recuperacin obtenidos de la muestra fortificada, variaron desde el 84,48%
hasta el 118,18%, encontrndose dentro del intervalo establecido del 80% al
120% en los objetivos de validacin. Estos resultados reafirmaron que la
recuperacin del mtodo se encuentra dentro de los lmites establecidos.
DBO5
Adicin
10 mg/L
Matriz
Matriz + MRC
% de
(mg/L)
(mg/L)
Recuperacin
16,4
27,4
109,65
15,6
24,5
89,51
15,5
23,9
84,48
14,2
26,0
118,18
14,3
25,5
111,75
Repeticiones

En la tabla 3.21 se presentan los resultados del clculo de la precisin del mtodo
a partir de los valores obtenidos del ANOVA de un factor, que se presentan en el
anexo XIV.
166
Tabla 3.21: Resultados de la precisin (% CVr y %CVR) obtenidos en el mtodo de DBO5

Nivel bajo
Nivel medio
Nivel alto
2 mg/L
200 mg/L
500 mg/L
F calculado
1,47
1,93
1,92
F crtico
3,89
3,89
3,89
0,27
0,19
0,19
% CVr
7,90
5,60
2,90
% CVR
8,44
6,26
3,12
Resultados
Como se puede observar en la tabla 3.21, los valores experimentales de iguales
a 1,47, 1,93 y 1,92 obtenidos para los niveles bajo, medio y alto respectivamente
no superaron el valor crtico de igual a 3,89. La hiptesis nula fue por tanto
aceptada, I$ : aJ av a . De acuerdo a los valores del nivel de significacin b
obtenidos en cada nivel, estos fueron muy superiores a 0,05, lo que prob, que la
diferencia de las medias muestrales no fue significativa a nivel del 5%. Los
valores de %CVr y %CVR fueron menores al 15% y 20% respectivamente
establecidos en los objetivos de validacin, donde para el nivel bajo correspondi
los valores ms altos obtenidos para el intervalo de trabajo del mtodo.
Los valores de la incertidumbre expandida calculada para cada nivel de
concentracin del mtodo, se presentan en la tabla 3.22 que se muestra a
continuacin.
Tabla 3.22: Resultados de la Incertidumbre Expandida obtenidos en el mtodo de DBO5
Incertidumbre expandida del mtodo
0,16
@
2
0,32
16,16
200
13,35
26,69
13,35
500
15,40
30,80
6,16
Concentracin
(mg/L)
(mg/L)
(mg/L)
Para el nivel bajo y medio se obtuvieron valores de la incertidumbre relativa

iguales a 16,16% y 13,35% respectivamente, como se puede observar en la tabla
167
3.22. La obtencin de valores altos para ambos niveles puede deberse al hecho
de que, para el nivel bajo de 2 mg/L, una diferencia en el reporte del gasto del
reactivo titulante, influye considerablemente sobre el resultado de DBO, mientras
que para el nivel de 200 mg/L, si bien este hecho tambin influye, aqu el factor
ms influyente es el ingreso de aire al sistema. Para el nivel de 500 mg/L el valor
obtenido fue igual a 6,16%, si bien ambos factores, gasto de reactivo como
ingreso de aire al sistema influyen en el resultado, estos no son significativos
comparado con el valor de la concentracin analizada. Finalmente, ninguno de los
valores obtenidos super el establecido en los objetivos de validacin.
3.2.2.4.4 Lmite de deteccin
A partir de los valores obtenidos del blanco que se presentan en la tabla 3.23 se
determin el lmite de deteccin del mtodo. Como se puede observar, el valor
ms bajo calculado fue igual a 0,90 mg/L, por tanto este valor se estableci como
el lmite deteccin del mtodo.
Tabla 3.23: Resultados del blanco para la determinacin del lmite de deteccin del
mtodo de DBO5
BLANCO
DA 1
DA 2
DA 3
Valor medio
0,99
0,55
0,64
Desv. estndar
0,23
0,21
0,09
LD
1,68
1,17
0,90

De acuerdo a los resultados obtenidos de los parmetros de validacin para el
nivel bajo de concentracin, se estableci el lmite de cuantificacin igual a 2
mg/L.
En funcin de los resultados obtenidos, donde cada parmetro de validacin
cumpli con los objetivos propuestos, se defini el intervalo de trabajo de 2 a 500
mg/L para el mtodo de DBO5.
168
3.2.2.5
Resultados de los parmetros de validacin obtenidos en el mtodo de STD
Todos los valores experimentales, as como los clculos correspondientes de los

parmetros de validacin del mtodo, se presentan en el anexo XV.
Los valores del % de Recuperacin obtenidos en cada nivel de concentracin del
intervalo de trabajo del mtodo, se presentan a continuacin en la tabla 3.24.
Como se puede observar, los % de Recuperacin variaron desde un 99,27%
hasta el 107,48%, correspondiendo el valor ms alejado del 100% al nivel bajo de
50 mg/L. Esto se puede atribuir a la influencia que tiene la misma resolucin del
equipo igual a 0,0001g, que corresponde al 4% de error relativo
STD
Valor de referencia
Valor medio
% de
(mg/L)
(mg/L)
Recuperacin
50
53,87
107,73
500
512,40
102,48
1000
992,67
99,27
El % de Recuperacin obtenido de la muestra real fortificada se presenta en la

tabla 3.25 que se muestra a continuacin.
STD
Adicin
50 mg/L
Matriz
Matriz + MRC
% de
(mg/L)
(mg/L)
Recuperacin
248
292
88
244
292
96
240
288
96
248
290
84
246
290
88
Repeticiones
169
Como se puede observar en la tabla 3.25, el % de Recuperacin vari entre 84%

al 96% cumpliendo con el valor entre el 80% y 120%. Este resultado reafirm que
el mtodo proporciona valores de Recuperacin dentro del intervalo establecido
en los objetivos de validacin.
En la tabla 3.26 se presentan los resultados ms relevantes de la precisin del
mtodo obtenidos a partir del clculo del ANOVA de un factor. Como se puede
observar, los valores experimentales de calculados por el ANOVA de un factor

iguales a 1,09, 1,03 y 1,79 para los niveles bajo, medio y alto respectivamente, no
superaron el valor crtico de igual a 3,89. La hiptesis nula, I$ : aJ av a
consecuentemente fue aceptada. Los valores del nivel de significacin b
obtenidos, fueron muy superiores a 0,05, confirmado que la diferencia de las

medias muestrales segn la hiptesis nula planteada no fue significativa al nivel
del 5%. El %CVr y el %CVR para el nivel bajo de concentracin, fue el mayor de
entre los tres niveles del rango de trabajo, mientras que el obtenido en el nivel alto
fue el menor valor. Estos resultados, confirman la presuncin de que el nivel bajo
es el ms crtico de todo el intervalo al obtenerse los valores ms altos en cuanto
a los parmetros de validacin.
Tabla 3.26: Resultados de la precisin (% CVr y %CVR) obtenidos en el mtodo de STD
Nivel bajo
Nivel medio
Nivel alto
50 mg/L
500 mg/L
1000 mg/L
F calculado
1,09
1,03
1,79
F crtico
3,89
3,89
3,89
0,37
0,39
0,21
% CVr
8,74
1,48
1,28
% CVR
8,84
1,49
1,36
Resultados
Los valores de la Incertidumbre Expandida obtenidos en cada nivel de
concentracin se presentan en la tabla 3.27.
170
Tabla 3.27: Resultados de la Incertidumbre Expandida obtenidos en el mtodo de STD

(mg/L)
50
5,27
@
500
1000
Concentracin
(mg/L)
(mg/L)
10,54
21,08
8,09
16,17
3,23
14,62
29,23
2,92
Como se puede observar en la tabal 3.27, para el nivel bajo de 50 mg/L de

concentracin se obtuvo el valor ms alto de la incertidumbre relativa igual a
21,08%. Este resultado tan alto puede deberse, al hecho de que al igual que en
los mtodos anteriores el reporte en este caso del peso para el clculo de STD, si
se considerara nicamente la influencia que tuvo la resolucin propia de la
balanza igual a 0,0001 g, este valor representara un error relativo del 4% para
este de concentracin, mientras que este para la concentracin de 500 mg/L
correspondera a un error relativo del 0,4 % y del 0,2% para el de 1000 mg/L. sin
embargo, todos los valores de la incertidumbre relativa obtenidos cumplieron con
el objetivo de validacin establecido 35%.
De acuerdo a los resultados obtenidos de los parmetros de validacin para el

nivel bajo de concentracin, se estableci el lmite de cuantificacin igual a 50
mg/L.
3.2.2.5.5 Intervalo de concentracin
En funcin de los resultados obtenidos de los parmetros de validacin, el
intervalo de trabajo qued definido de 50 a 1000 mg/L para el mtodo de STD.
3.3
ELABORACIN DEL INFORME Y DECLARACIN DEL

MTODO VALIDADO
El informe de validacin de cada mtodo fue entregado al laboratorio del CICAM

siguiendo el esquema establecido en su manual de calidad. En funcin de este
171
ltimo se presentan a continuacin el resumen de los resultados obtenidos en la

validacin y que consecuentemente permitieron la declararon del mtodo
validado.
DECLARACIN DEL MTODO VALIDADO PARA LA DETERMINACIN DE LA

ALCALINIDAD TOTAL, RANGO BAJO
CUANTITATIVO
Analito: Alcalinidad Total
CUALITATIVO
Unidades: mgCaCO3/L
DE IDENTIFICACIN
Matriz: Agua claras y residuales
FUNCIN DE RESPUESTA
No aplica
EXACTITUD
Nivel:
concentracin
Repetibilidad
Reproducibilidad
U ( )
%CVR
3,04
% de
Recuperacin
0,16
3,04
104,24
8,13
0,20
0,81
0,23
0,96
97,85
2,21
49,9 mgCaCO3/L
0,29
0,61
0,35
0,74
94,81
1,61
Global
No aplica
%CVr
5 mgCaCO3/L
0,15
25 mgCaCO3/L
LMITE DE DETECCIN (L.D.) :
No aplica
LMITE DE CUANTIFICACIN (L.C.) :
5 mgCaCO3/L
SELECTIVIDAD / ESPECIFIDAD
INTERFERENCIAS CONOCIDAS: Referirse a Mtodo de Titulacin, 2320 B. APHA
TIPO DE INTERFERENCIA: Referirse a Mtodo de Titulacin, 2320 B APHA
CORRECCIN: Referirse a Mtodo de Titulacin, 2320 B APHA
INTERVALO DE TRABAJO VALIDADO:
5 - 49,9 mgcaCO3/L
CRITERIOS DE ACEPTACIN / RECHAZO:

VERACIDAD % 80 < E < 120% , datos de 94,81 hasta 104,24 %; validacin aceptada
INCERTIDUMBRE <= 35%, datos de 1,61 hasta 8,13 %; validacin aceptada
%CVR <= 20%, datos de 0,74 hasta 3,04% ; validacin aceptada
172

ALCALINIDAD TOTAL, RANGO ALTO
CUANTITATIVO
Analito: Alcalinidad Total
CUALITATIVO
Unidades: mgCaCO3/L
DE IDENTIFICACIN
FUNCIN DE RESPUESTA
No aplica
EXACTITUD
Nivel:
concentracin
Repetibilidad
Reproducibilidad
U ( )
%CVR
1,04
% de
Recuperacin
0,62
1,26
98,27
3,26
0,91
0,94
1,07
1,10
97,22
2,44
250 mgCaCO3/L
0,92
0,38
1,08
0,45
96,08
1,13
Global
No aplica
%CVr
50 mgCaCO3/L
0,51
100 mgCaCO3/L
LIMITE DE DETECCIN (L.D.)
No aplica
LIMITE DE CUANTIFICACIN (L.C.)
50 mgCaCO3/L
INTERFERENCIAS CONOCIDAS: Referirse a Mtodo de Titulacin, 2320 B. APHA
TIPO DE INTERFERENCIA: Referirse a Mtodo de Titulacin, 2320 B APHA
CORRECCIN: Referirse a Mtodo de Titulacin, 2320 B APHA
50 - 250 mgCaCO3/L

INCERTIDUMBRE
<= 35%, datos de 1,13 hasta 3,26 %; validacin aceptada
%CVR <= 20%, datos de 0,45 hasta 1,26 % ; validacin aceptada
173

CONDUCTIVIDAD
CUANTITATIVO
Analito: Conductividad
CUALITATIVO
Unidades: S/cm mS/cm
DE IDENTIFICACIN
FUNCIN DE RESPUESTA
No aplica
EXACTITUD
Nivel:
conductividad
Repetibilidad
Reproducibilidad
%CVr
%CVR
% de
Recuperacin
U ( )
%
147 S/cm
0,35
0,24
0,39
0,26
99,37
2,03
12,8 mS/cm
0,02
0,19
0,03
0,20
100,60
4,44
Global
No aplica
No aplica
147 S/cm
INTERFERENCIAS CONOCIDAS: Referirse a Mtodo Potenciomtrico, 2510 B. APHA
TIPO DE INTERFERENCIA: Referirse a Mtodo Potenciomtrico, 2510 B. APHA
CORRECCIN: Referirse a Mtodo Potenciomtrico, 2510 B. APHA
147 S/cm - 12,8 mS/cm

VERACIDAD % 80 < E < 120% , datos 99,37 y 100,60 %; validacin aceptada
INCERTIDUMBRE
<= 35%, datos 2,03 y 4,44 %; validacin aceptada
%CVR <= 20%, datos 0,20 y 0,26 % ; validacin aceptada
174
DECLARACIN DEL MTODO VALIDADO PARA LA DETERMINACIN DE

DBO5
CUANTITATIVO
Analito: Demanda Bioqumica de Oxgeno
CUALITATIVO
Unidades: mg/L
DE IDENTIFICACIN
FUNCIN DE RESPUESTA
No aplica
EXACTITUD
Repetibilidad
Reproducibilidad
U ( )
%CVR
7,90
% de
Recuperacin
0,16
8,44
95,16
16,16
12,17
5,60
13,25
6,26
105,91
13,35
500 mg/L
13,66
2,90
14,86
3,12
95,31
6,16
Global
No aplica
Nivel:
concentracin
%CVr
2 mg/L
0,15
200 mg/L
0,90 mg/L
2 mg/L
INTERFERENCIAS CONOCIDAS: Referirse a Mtodo 5210 B. APHA
TIPO DE INTERFERENCIA: Referirse a Mtodo 5210 B. APHA
CORRECCIN: Referirse a Mtodo 5210 B. APHA
2 - 500 mg/L

INCERTIDUMBRE
175
DECLARACIN DEL MTODO VALIDADO PARA LA DETERMINACIN DE

STD
CUANTITATIVO
Analito: Slidos Totales Disueltos
CUALITATIVO
Unidades: mg/L
DE IDENTIFICACIN
FUNCIN DE RESPUESTA
No aplica
EXACTITUD
Repetibilidad
Reproducibilidad
U ( )
%CVR
8,74
% de
Recuperacin
4,76
8,84
107,73
21,08
7,62
1,48
7,65
1,49
102,48
3,23
1000 mg/L
12,55
1,28
13,50
1,36
99,27
2,92
Global
No aplica
Nivel:
concentracin
%CVr
50 mg/L
4,72
500 mg/L
No aplica
50 mg/L
INTERFERENCIAS CONOCIDAS: Referirse a Mtodo 5240 C. APHA
TIPO DE INTERFERENCIA: Referirse a Mtodo 5240 C. APHA
CORRECCIN: Referirse a Mtodo 5240 C. APHA
50 - 1000 mg/L

INCERTIDUMBRE
176
4
4.1
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
CONCLUSIONES
Para el mtodo de alcalinidad total se obtuvieron las siguientes conclusiones:

-
En la prueba previa para la puesta a punto del mtodo, los valores de los
estadsticos y iguales a 0,2 y 1,08 no superaron los valores crticos de
2,78 y 19 respectivamente para un nivel de significacin del 5%. Por lo cual se
estableci realizar el ensayo para la determinacin de la alcalinidad total en

sistema abierto.
-
En la prueba previa para la determinacin del nivel bajo de concentracin del

mtodo, para una concentracin de 1 mgCaCO3/L se obtuvo un % de
Recuperacin igual a 203,0%, para el nivel de 3 mgCaCO3/L vari desde
135,3% hasta 143,8% y para la concentracin de 5 mgCaCO3/L se obtuvieron
valores desde 101,5% hasta 111,7%, por lo cual se estableci para el nivel
bajo del intervalo de trabajo la concentracin de 5mgCaCO3/L.
Los valores obtenidos de los estadsticos y iguales a 1,83 y 2

respectivamente, en el contraste de significacin entre el MRi y el MRC, no
superaron los valores crticos de 2,36 y 6,39 respectivamente para un nivel de

significacin del 5%, probando que no existieron diferencias significativas
entre ambos materiales de referencia.
-
Se establecieron dos rangos de trabajo para la validacin del mtodo. Cada

rango con tres niveles de concentracin: 5 mgCaCO3/L, 25 mgCaCO3/L y 49,9
mgCaCO3/L para el rango bajo y 50 mgCaCO3/L, 100 mgCaCO3/L y 250
mgCaCO3/L para el rango alto. En cada nivel de concentracin en cada rango
se determinaron los parmetros de validacin y se comprob que cumplan
con los objetivos de validacin establecidos.
177
En la determinacin de la veracidad del mtodo, para el rango bajo se

obtuvieron valores del % de Recuperacin de 94,81%, 97,85% y 104,24%. En
el rango alto se obtuvieron valores de 96,08%, 97,22% y 98,27%
cumplindose en ambos rangos de trabajo el objetivo de validacin
establecido que indicaba % de Recuperacin entre el 80% y 120%.
En la muestra real fortificada se obtuvo un % de Recuperacin entre el

80,25% al 96,30% para la adicin de 5 mgCaCO3/L y del 83,46%% al 87,74%
para la adicin de 50 mgCaCO3/L cumplindose con el objetivo de validacin
establecido del % de Recuperacin entre el 80% y 120%.
En el contraste de significacin de ANOVA de un factor diseado para

contrastar la hiptesis nula, H : J v , los valores obtenidos del
estadstico iguales a 1,22, 3,04, 3,26 para los niveles de concentracin del
rango bajo, y 3,51, 2,94, 2,94 para el rango alto, no superaron el valor de
crtico igual 3,89 para un nivel de significacin del 5%. Con estos resultados
se prob que la presencia de errores aleatorios sera la causa predominante
de la discrepancia entre los valores medios, es decir, que no hubieron
diferencias significativas.
-
En la determinacin de la precisin del mtodo, los valores del %CVr

obtenidos de 3,04%, 0,81% y 0,61% para el rango bajo y de 1,04%, 0,94% y
0,38% para el rango alto, cumplieron con el objetivo de validacin establecido
que indicaba %CVr 15%. De la misma manera, los valores del %CVR
obtenidos de 3,04%, 0,96% y 0,74% para el rango bajo y 1,26%, 1,10% y

0,45% para el rango alto, cumplieron con el objetivo de validacin que
indicaba %CVR 20%.
En la determinacin de la incertidumbre relativa del mtodo, para el rango

bajo se obtuvieron valores de 8,13%, 2,21% y 1,61%. Para el rango alto la
incertidumbre relativa obtenida fue de 3,26%, 2,44% y 1,13%
En ambos
rangos se cumpli con el objetivo de validacin establecido para la

incertidumbre relativa 35%.
178
El lmite de cuantificacin del mtodo se estableci igual a 5 mgCaCO3/L en

funcin de los resultados obtenidos.
Al cumplirse con todos los objetivos de validacin establecidos, que

especificaban: % de Recuperacin 80% - 120%, CVr% 15%, % CVR 20%
e Incertidumbre 35%, el intervalo de trabajo del mtodo se estableci de 5

mgCaCO3/L a 49,9 mgCaCO3/L para el rango bajo y de 50 mgCaCO3/L a 250
mgCaCO3/L para el rango alto.

-
Con los resultados obtenidos se procedi a la aceptacin y declaracin de la

validacin del mtodo para la determinacin de la alcalinidad total, 2320 B.
Mtodo de Titulacin del Standar Methods.
Para el mtodo de conductividad se obtuvieron las siguientes conclusiones:

-
Los valores obtenidos en la calibracin del medidor de conductividad para los

estndares de 147 S/cm y 12,8 mS/cm fueron iguales a 1,37 S/cm y 2,03
mS/cm respectivamente. Ambos puntos cumplieron con el criterio de
aceptacin establecido que indicaba que deba ser valores menores a 2,37
S/cm y 2,03 mS/cm. Por tanto se acept la calibracin del medidor de
conductividad.
En la determinacin de la veracidad del mtodo, para el estndar de 147

S/cm se obtuvo un % de Recuperacin del 99,37% y para el estndar de
12,8 mS/cm se obtuvo un % de Recuperacin de 100,60%. Ambos puntos
cumplieron con el objetivo de validacin establecido del % de Recuperacin
entre el 80% y 120%.

estadstico para 147 S/cm fue igual a 2,23 y para 12,8 mS/cm fue 1,87;.
Ambos valores no superaron el valor de crtico igual 3,89 para un nivel de
significacin del 5%. Con estos resultados se prob que la presencia de
179
errores aleatorios sera la causa predominante de la discrepancia entre los

valores medios, es decir, que no hubieron diferencias significativas.
-
En la determinacin de la precisin del mtodo, los valores del %CVr

obtenidos iguales a 0,24% y 1,19% para 147 S/cm y 12,8 mS/cm
respectivamente, cumplieron con el objetivo de validacin establecido que
indicaba %CVr 15%. Igualmente, los valores del %CVR obtenidos de 0,26%
y 0,20% para 147 S/cm y 12,8 mS/cm respectivamente, cumplieron con el

objetivo de validacin que indicaba %CVR 20%.
En la determinacin de la incertidumbre relativa del mtodo, para el estndar

de 147 S/cm se obtuvo un valor igual a 2,03%. Para el estndar de 12,8
mS/cm se obtuvo un valor igual a 4,44%. En ambos puntos se cumpli con el
objetivo de validacin establecido para la incertidumbre relativa 35%.
El lmite de cuantificacin del mtodo se estableci igual a 147 S/cm L en

funcin de los resultados obtenidos.
Al cumplirse con todos los objetivos de validacin establecidos, los mismos

que especificaban: % de Recuperacin 80% - 120%, CVr% 15%, % CVR
20% e Incertidumbre 35%, el intervalo de trabajo del mtodo se estableci

de 147 S/cm a 12,8 mS/cm.

validacin del mtodo para la determinacin de la conductividad, 2510 B.
Mtodo Potenciomtrico del Standar Methods.
Para el mtodo de DBO5 se obtuvieron las siguientes conclusiones:

-
En la prueba previa para la puesta a punto del mtodo, se obtuvo un valor del
estadstico igual a 2 que no super el valor crtico de 4,30; sin embargo, el
valor del estadstico 1791,31 fue mucho mayor que el valor crtico de 19
180
para un nivel de significacin del 5%. Por lo cual se estableci para el

desarrollo del ensayo el uso del inhibidor de nitrificacin (piridina).
-

mtodo, para la concentracin de 1,24 mg/L el % de Recuperacin vari
desde 61,2% hasta 118,3% y para la concentracin de 1,98 mg/L se
obtuvieron valores desde 86,9% hasta 107,3%, por tanto se estableci para el
nivel bajo de concentracin el valor de 2 mg/L de acuerdo al estndar
disponible de 200 mg/L.
Los valores obtenidos de los estadsticos y en el contraste de significacin
entre el MRi y el MRC iguales a 0,18 y 1,36 respectivamente, no superaron

los valores crticos de 2,32 y 6,39 para un nivel del significacin del 5%,
probando que no existieron diferencias significativas entre ambos materiales
de referencia.
Para la validacin del mtodo se establecieron tres niveles de concentracin:

2 mg/L, 200 mg/L y 500 mg/L para cada uno de los cuales se determinaron
los parmetros de validacin y se comprob que cumplan con los objetivos de
validacin establecidos.
En la determinacin de la veracidad del mtodo, se obtuvieron % de

Recuperacin de 95,16%, 105,91 y 105,91%, cumplindose con el objetivo
de validacin establecido del % de Recuperacin entre el 80% y 120%.
En la muestra real fortificada se obtuvo un % de Recuperacin entre el

84,48% y 118,18% cumplindose con el objetivo de validacin establecido del
% de Recuperacin entre el 80% y 120%.
estadstico iguales a 1,47, 1,93 y 1,92 para los tres niveles de concentracin
establecidos, no superaron el valor de crtico igual 3,89 para un nivel de
181

-
En la determinacin de la precisin del mtodo en los tres niveles de

concentracin, los valores del %CVr obtenidos 7,90%, 5,60% y 2,90%
cumplieron con el objetivo de validacin establecido que indicaba %CVr
15%. De la misma manera, los valores del %CVR obtenidos 8,44%, 6,26% y
3,12% cumplieron con los objetivos de validacin que indicaban %CVR
20%.
-
En la determinacin de la incertidumbre relativa del mtodo, se obtuvieron

valores de 16,16%, 13,35% y 6,16%, cumpliendo con el objetivo de validacin
establecido para la incertidumbre relativa 35%.
El lmite de deteccin del mtodo, se determin igual a 0,90 mg/L en funcin

de los resultados obtenidos del blanco.
El lmite de cuantificacin del mtodo se estableci igual a 2 mg/L en funcin

de los resultados obtenidos.
Al cumplirse con todos los objetivos de validacin establecidos que

mg/L a 500 mg/L.

validacin del mtodo para la determinacin del DBO5, 5210 B. Demanda
Bioqumica de Oxgeno por el Mtodo Winkler del Standar Methods.
182
Para el mtodo de STD se obtuvieron las siguientes conclusiones:

-
En la prueba previa para la puesta a punto del mtodo, se estableci dos

horas y media como tiempo de enfriamiento en el desecador de los crisoles
para el procedimiento de anlisis.

mtodo, para la concentracin de 5 mg/L el % de Recuperacin vari desde
240% hasta 360%, para la concentracin de 10 mg/L vari desde 180% hasta
260%, para 20 mg/L el % de Recuperacin vari desde 90% hasta 150% y
para la concentracin de 50 mg/L se obtuvieron valores desde 116% hasta
120%, por tanto se estableci para el nivel bajo la concentracin de 50 mg/L.
Los valores obtenidos de los estadsticos y iguales a 0,35 y 1

respectivamente, en el contraste de significacin entre el MRi y el MRC para
el mtodo, no superaron los valores crticos de 2,31 y 6,39 para un nivel de
significacin del 5 %, demostrando que no existieron diferencias significativas
entre ambos materiales de referencia.
Para la validacin del mtodo se establecieron tres niveles de concentracin:

50 mg/L, 500 mg/L y 1000 mg/L para cada uno de los cuales se determinaron
los parmetros de validacin y se comprob que cumplan con los objetivos de
validacin establecidos.
En la determinacin de la veracidad del mtodo, se obtuvieron % de

Recuperacin de 107,73%, 102,48 y 99,27%, cumplindose con el objetivo
de validacin establecido del % de Recuperacin entre el 80% y 120%.
En la muestra real fortificada se obtuvo un % de Recuperacin entre el 84% y

96% cumplindose con el objetivo de validacin establecido del % de
Recuperacin entre el 80% y 120%.
183

estadstico iguales a 1,79, 3,89 y 0,21 para los tres niveles de concentracin
establecidos, no superaron el valor de crtico igual 3,89 para un nivel de

En la determinacin de la precisin del mtodo en los tres niveles de

concentracin, los valores del %CVr obtenidos 8,74%, 1,48% y 1,36%
cumplieron con el objetivo de validacin establecido que indicaba %CVr
15%. De la misma manera, los valores del %CVR obtenidos 8,44%, 1,49% y
1,36% cumplieron con los objetivos de validacin que indicaban %CVR
20%.
-
En la determinacin de la incertidumbre relativa del mtodo, se obtuvieron

valores de 21,08%, 3,23% y 2,92%, cumpliendo con el objetivo de validacin
establecido para la incertidumbre relativa 35%.
El lmite de cuantificacin del mtodo se estableci igual a 50 mg/L en funcin

de los resultados obtenidos.
Al cumplirse con todos los objetivos de validacin establecidos que

mg/L a 1000 mg/L.

-

validacin del mtodo para la determinacin de STD, 2540 B. Slidos Totales
Disueltos secados a 180C del Standar Methods.
184
4.2
-
RECOMENDACIONES
Se recomienda seguir los procedimientos establecidos en cada mtodo,
tomado en cuenta las indicaciones que en ellos se han descrito, para
asegurar la obtencin de resultados confiables.
Se recomienda prestar especial atencin en las indicaciones para el

desarrollo del ensayo de DBO5 en lo referente a evitar el ingreso de aire
(oxgeno) al sistema, ya que siendo este el analito cuantificado, una alteracin
en su concentracin real producir datos alejados de la realidad.
Se recomienda tener en cuenta, que no todas las fuentes de incertidumbre

identificadas durante la evaluacin de la incertidumbre realizan una
contribucin significativa a la incertidumbre combinada, ya que en la prctica
es probable que slo lo haga un pequeo nmero de ellas, las cuales tiene
que
analizarse
con
detalle
para
poder
estimar
con
fiabilidad
sus
contribuciones.
-
Se recomienda tener en cuenta, que nunca debe infravalorarse la

incertidumbre. En el caso de que la incertidumbre fuera muy elevada, sta
deber disminuirse mejorando las etapas del mtodo analtico responsables
de los componentes de incertidumbre ms elevados.
Se recomienda antes de realizar el experimento, tomar la decisin sobre si el

contraste de significacin se debe realizar de una o dos colas, y no despus,
cuando los resultados podran prejuzgar la eleccin.
Se recomienda asegurar que las superficies internas de los recipientes

volumtricos estn suficientemente limpias antes de ser utilizadas para la
ejecucin de los ensayos.
Se recomienda despus del procedimiento de limpieza general, si las paredes

del recipiente no estn limpias, continuar la limpieza con mezcla de
185
peroxidisulfato de amonio. Esta mezcla debe ser trabajada en campana de

extraccin usando mscara protectora y guantes durante su uso y
preparacin.
-
Para los controles de calidad que el laboratorio realice, se recomienda

emplear carbonato de sodio para el mtodo de alcalinidad total y STD, as
como glucosa y cido glutmico para el mtodo de DBO5.
Se recomienda, en funcin de los resultados obtenidos en la presente

investigacin, que el laboratorio replante los objetivos de validacin
establecidos para la aceptacin y declaracin de validacin del mtodo, es
decir, disminuir los intervalos en funcin de los resultados obtenidos en cada
mtodo.
186
BIBLIOGRAFA
1. Atienza, J., Marinero, P., Sanz, M. y Tabernero, M., 2001, Calibracin y
Verificacin de Equipos de Medida y Ensayo,
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Gestin
de
Calidad
en
IV Congreso Virtual
laboratorios
(IBEROLAB),
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20. Ministerio de Salud de Costa Rica, 2008, Gua de Validacin de Mtodos
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Cualimetra, Universidat Rovira i Virgili, Tarragona, http://www.quimica.urv.es/
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28. Smano, J., 2000, Sistemas de Aseguramiento de Calidad ISO 9000 en la
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29. Zaror, C., 2000, Introduccin a la Ingeniera Ambiental para la Industria de
Procesos, Concepcin, Chile, p. 4, 7.
190
ANEXOS
191
ANEXO I
VALORACIN DE LA SOLUCIN DE CIDO SULFRICO PARA
LA DETERMINACIN DE LA ALCALINIDAD TOTAL
La valoracin de la solucin de cido Sulfrico, H2SO4 0,02 N se realiza a partir
de una solucin de NaOH 0,02 N, previamente valorada con una solucin de
ftalato cido de potasio 0,02 N. Por tanto, la valoracin de esta solucin titulante
se realiza en dos etapas:
1era ETAPA: Valoracin de la solucin de NaOH 0,02 N
Para preparar una solucin de hidrxido de sodio de una determinada
concentracin, se parte de hidrxido sdico slido comercial, se disuelve un peso
conocido en agua destilada y se diluye a un volumen conocido. Al no ser el
hidrxido sdico un patrn primario, es necesario valorar con una sustancia
patrn primario como el ftalato cido de potasio (KHP, por sus siglas en ingls).
Como indicador de la titulacin se emplea fenolftalena.
Materiales
-
Pipeta aforada de 5 mL, calibrada
Reactivos
-
Solucin de NaOH 0,1 N: Pesar 4,0 g de NaOH, disolver en un vaso de

precipitacin, y diluir con agua destilada a 1000 mL.
Solucin de NaOH 0,02 N: Diluir 50 mL de solucin de NaOH 0,1 N con

agua destilada hasta 250 mL.
Solucin de ftalato cido de potasio KHP 0,02 N (99,97%): Secar

aproximadamente 1 g de KHP durante 2 horas a 120C. Pesar 0,4086 g de
KHP, y disolver con agua destilada a 100 mL.
Solucin de fenolftalena al 0,1% en etanol.
192
Procedimiento
a) Enjuagar la bureta con la solucin de KHP 0,02 N, enrasar a cero teniendo
cuidado que no queden burbujas de aire en el interior de la llave o en el
cuerpo de la bureta.
b) Colocar en el erlenmeyer (limpio) 5 mL de NaOH 0,02 N medidos con
pipeta. Aadir una gota de solucin de fenolftalena.
c) Iniciar la valoracin aadiendo inicialmente sobre el erlenmeyer un
volumen de la solucin de KHP prximo, por defecto al volumen terico (5
mL). Continuar la valoracin aadiendo la solucin valorante gota a gota y
agitando continuamente hasta que la solucin pierda su color rosa.
d) Anotar el volumen gastado de KHP, y calcular la concentracin de la
solucin de NaOH preparada.
Clculos
La normalidad de la solucin de NaOH preparada se calcula de la ecuacin I.1.
LT9 m rT9 TU$#T&$ L" m r" T8*T&$
[I.1]
Donde:
LT9 Normalidad de la solucin de NaOH
rT9 TU$#T&$ Volumen de la solucin de NaOH valorado
L" Normalidad de la solucin de KHP
r" T8*T&$ Volumen de la solucin de KHP gastado
El peso de KHP requeridos para la preparacin de una solucin de cualquier

concentracin, en este caso 0,02 N, se calcula de la ecuacin I.2.
L"
G
m
>
Donde:
L" Normalidad de la solucin de KHP, Eq/L
E" Peso molecular del KHP (204,223 g/mol)
[I.2]
193
" Peso del KHP, g
r] Volumen de solucin de KHP preparado, mL

1000 Factor de conversin, Eq*mL/mol*L
2da ETAPA: Valoracin de una solucin de H2SO4 0,02 N

Para preparar una solucin de una determinada concentracin se parte de la
solucin de H2SO4 concentrado, comercial, y se diluye con agua destilada en un
matraz aforado hasta el volumen adecuado. Al no ser el cido sulfrico un patrn
primario, para conocer la concentracin exacta, se estandariza con una solucin
patrn. En este caso, se utiliza una solucin de NaOH valorada con una solucin
de KHP, que es un patrn primario. Como indicador de la titulacin se emplea
fenolftalena.
Materiales
-
Reactivos
-
Solucin de H2SO4 0,02 N: Diluir lentamente 1,7 mL de una solucin de

cido sulfrico 6 N en 300 mL de agua destilada aproximadamente,
mezclar bien y diluir a 500 mL.
Solucin de NaOH 0,02 N: Se utiliza la solucin estandarizada en la 1era

etapa.
Solucin de fenolftalena al 0,1% en etanol.
Procedimiento
a) Enjuagar la bureta con la solucin de NaOH 0,02 N, enrasar a cero
teniendo cuidado que no queden burbujas de aire en el interior de la llave o
en el cuerpo de la bureta.
194
b) Colocar en el erlenmeyer (limpio) 5 mL de H2SO4 0,02 N medidos con

pipeta. Aadir una gota de solucin de fenolftalena.
c) Valorar aadiendo inicialmente sobre el erlenmeyer un volumen de la
solucin de NaOH prximo, por defecto al volumen terico (5 mL).
Continuar la valoracin aadiendo el reactivo valorante gota a gota y
agitando continuamente hasta que la solucin tome un color rosa, que
debe persistir durante 15 o 20 segundos.
d) Anotar el volumen gastado de NaOH, y calcular la concentracin de la
solucin de cido sulfrico preparada.
Clculos
La normalidad de la solucin de H2SO4 preparada se calcula empleando la
siguiente expresin
L ]9 m r ]9 1-4.- LT9 m rT9 T8*T&$
[I.3]
Donde:
L ]9 Normalidad de la solucin de H2SO4
r ]9 1-4.- Volumen de la solucin de H2SO4 valorado
LT9 Normalidad de la solucin de NaOH valorante
rT9 T8*T&$ Volumen de la solucin de NaOH gastad
Tabla II.1: Material volumtrico ocupado en la estandarizacin de la solucin de cido

sulfrico
Volumen
(mL)
Material volumtrico
utilizado
rT9 TU$#T&$&$
Pipeta graduada de 5 mL
Bureta de 10 mL
r]
100
Baln aforado de 100

mL
rT9 T8*T&$
Bureta de 10 mL
Datos
r" T8*T&$
r ]9 TU$#T&$
195
ANEXO II
MTODO 4500-O C. MODIFICACIN DE AZIDA PARA LA
DETERMINACIN DE OD
Discusin general
Utilizar la modificacin de azida para la mayora de aguas residuales, diluyentes y
muestras de corrientes, especialmente que contienen ms de 50 gNO2-N/L de y
no ms de 1 mg de hierro ferroso/L. Deben estar ausentes otros agentes
reductores u oxidantes. Si se aade 1 mL de solucin KF antes de acidificar la
muestra y no se retrasa la titulacin, el mtodo es aplicable en presencia de 100 a
200 mg de hierro frrico/L.
Reactivos
-
Solucin de sulfato manganoso: disolver 480 g de MnSO4.4H2O, o 400 g

MnSO4.2H2O o 364 g de MnSO4.H2O en agua destilada, filtrar y diluir a 1L. La
solucin MnSO4 no debe dar color con almidn cuando se aade a una
solucin acidificada de yoduro potsico (KI).
Reactivo de lcali-yoduro-azida:
-
Para muestras saturadas o menos que saturadas: Disolver 500 g NaOH (o

700 g KOH) y 135 g NI (o 150 g de KI) en agua destilada y diluir a 1 L.
Anadir 10 g NaN3 disueltos en 40 mL de agua destilada. Las sales de
potasio y sodio pueden intercambiarse. Este reactivo no debe dar color con
la solucin de almidn cuando se diluya y acidifique.
Para muestras sobresaturadas: Disolver 10 g NaN3 en 500 mL de agua

destilada. Aadir 480 g NaOH y 750 g de yoduro de sodio y agitar hasta
disolucin. Se producir una turbidez blanca debido al carbonato de sodio
Na2CO3, pero que no es perjudicial. PRECAUCIN: No acidificar esta
solucin porque se pueden producir humos de cido hidrozoico.
cido sulfrico, H2SO4 concentrado: 1 mL es equivalente a unos 3 mL de

reactivo lcali-yoduro-azida.
196
Almidn: utilizar una solucin acuosa o mezclas solubles de polvo de almidn.

Para prepara una solucin acuosa, disolver 2 g de cido saliclico, como
conservador, en 100 mL de agua destilada caliente.
Titulante de tiosulfato sdico: Disolver 6,205 g Na2S2O3.5H2O en agua

destilada. Aadir 1,5 mL de una solucin NaOH 6 N o 0,4 g de NaOH slido y
diluir a 1000 mL.
Procedimiento
a) Para fijar el oxgeno, adicionar 1 mL de solucin de MnSO4, y despus 1
mL de reactivo lcali-yoduro-azida a la muestra recogida en un frasco
winkler de 300 mL. Si se mojan las pipetas con la muestra, lavar antes de
volver al frasco de reactivo. Alternativamente, mantener la punta de la
pipeta justo por encima de la superficie del lquido al aadir los reactivos.
b) Tapar con cuidado para excluir las burbujas de aire, y mezclar invirtiendo
varias veces el frasco.
c) Cuando
el
precipitado
se
ha
depositado
adecuadamente
(hasta
aproximadamente la mitad del volumen del frasco), aadir 1,0 mL H2SO4

concentrado, para dejar un sobrenadante claro por encima del hidrxido de
manganeso floculado.
d) Volver a tapar y mezclar invirtiendo varias veces hasta disolucin completa.
Titular un volumen correspondiente a un volumen de 200 mL de muestra
original.
e) Titular con solucin de 0,025 M de Na2S2O3 hasta color paja plido. Aadir
una gota de la solucin de almidn, y titular hasta la primera desaparicin
del color azul.
f) Anotar el volumen gastado de la solucin de Na2S2O3.
Clculo
Los mg/L de OD para un volumen de 200 mL de muestra titulado es:
1 gc PeiBkM gc Ljv Ov , 0,025 E 1 d C/
[II.1]
197
ANEXO III
VALORACIN DE LA SOLUCIN DE TIOSULFATO SDICO
PARA LA DETERMINACIN DEL OD
El tiosulfato sdico (en realidad, Na2S2O3.5H2O) no es una sustancia patrn
primario, por lo que no pueden obtenerse soluciones de concentracin exacta por
simple pesada. La estandarizacin de estas soluciones se basa en su titulacin
frente a sustancias patrones primarios como el K2Cr2O7, que en exceso de KI da
lugar a la siguiente reaccin. El yodo liberado se titula con la solucin de
Na2S2O3 utilizando almidn como indicador.
Crv O vl z 6I l z 14H 2Cr z 3Iv z 7Hv O
[III.1]
El laboratorio no cont con el patrn primario de K2Cr2O7, sin embargo, cont con
una solucin de dicromato de amonio (NH4)2Cr2O7 que fue empleada para la
estandarizacin de la solucin de tiosulfato sdico. La concentracin de esta
solucin es 991 g/mL de Cr+6 como se puede observar en el certificado del MRC
en el anexo XVII, la expresin de la normalidad de la solucin se calcul tal como
se indica a continuacin.
J ( #
Q 8$U Y [ # 9!
J#
m J(# m
J ($U Y [ # 9!
J#
# 9
m J ($U Y [ !#

9!
,# 9!
Q 8$U Y
[ # 9!
De acuerdo a este clculo, se obtuvo una solucin 0,057 N, que corresponde al

valor de L:l" . A partir de la ecuacin III.2 se determin la alcuota tomada de la
solucin patrn certificada r:l" 43,7 mL (empleando una probeta de 50 mL),
para preparar una 100 mL = r:l , de una solucin 0,025 N que correspondiente al
valor de L:l (empleando un matraz aforado de 100 mL).

L:l
< m <
<
Donde:
L:l" Normalidad de la solucin patrn certificada de Dicromato
r:l" Alcuota tomada de la solucin patrn certificada de Dicromato

L:l Normalidad de la solucin final preparada de Dicromato
[III.2]
198
r:l Volumen de la solucin final preparada de Dicromato

Materiales
Reactivos
-
Solucin de (NH4)2Cr2O7 0,025 N: Tomar 43,7 mL de la solucin patrn

certificada, diluir con agua destilada hasta 100 mL.
Almidn: utilizar una solucin acuosa o mezclas solubles de polvo de

almidn. Para prepara una solucin acuosa, disolver 2 g de cido saliclico,
como conservador, en 100 mL de agua destilada caliente.
Procedimiento
-
En el matraz erlenmeyer disolver 1 g de yoduro de potasio exento de

yodato en 60 mL de agua.
Agregar 0,5 mL de cido sulfrico concentrado y 10 mL de la disolucin de

dicromato de amonio empleando la pipeta aforada.
Diluir a 100 mL con agua y valorar el yodo con la solucin de tiosulfato.

Agregar el almidn hasta el final de la determinacin, cuando se alcance un
color amarillo plido.
Anotar el volumen gastado.
Clculos
La solucin de tiosulfato se estandariza con la solucin de dicromato de amonio
0,025 N preparada. Su normalidad real se calcula a partir de la ecuacin III.3.
LH !TU
Donde:
< m <
? ,.-
L:l Normalidad de la solucin final preparada de Dicromato
[III.3]
199
r: Volumen de la solucin de Dicromato 0,025 N tomado para la valoracin

rH T8*T&$ Volumen de la solucin de Tiosulfato gastado
Tabla III.1: Material volumtrico ocupado en la estandarizacin de la solucin de

tiosulfato sdico
Volumen
(mL)
Material volumtrico
utilizado
r:l"
43,7
Probeta de 50 mL
r:l
100
Baln aforado de 100

mL
r:
10
Pipeta aforada de 10 mL
rH T8*T&$
10
Bureta de 10 mL
Datos
200
ANEXO IV
PREPARACIN DE LAS SOLUCIONES PATRN PARA EL
DESARROLLO DE VALIDACIN DE CADA MTODO
De manera general, la preparacin de las soluciones patrn de acuerdo los
niveles de concentracin requeridas para el desarrollo de validacin de cada
mtodo, se prepararon en funcin del volumen de muestra requerido descrito en
el procedimiento del mtodo (literal 2.1.3), as como del nmero de lecturas
necesarias de cada solucin segn el diseo experimental (literal 2.2.3). Para
efectos de la validacin, la muestra es referida a la solucin patrn preparada.
Como se indic en la preparacin de los objetos de ensayo, en el literal 2.1.5,
cada nivel de concentracin fue preparado mediante dilucin, tomando la alcuota
necesaria de la solucin patrn certificada y aforando al volumen de solucin
deseado. A partir de la ecuacin 2.20 se determin la alcuota tomada.
D" m r" D m r
[2.20]
Siguiendo estas indicaciones se describe a continuacin la preparacin de las

soluciones patrn para cada mtodo.
Mtodo para la determinacin de la alcalinidad total
Para la validacin de este mtodo, el laboratorio adquiri una solucin patrn

certificada (MRC) de 500 mgCaCO3/L de concentracin. De acuerdo al
procedimiento del mtodo y al diseo experimental, para el rango bajo del
mtodo, se requera tomar un volumen de muestra igual a 100 mL obtenindose 5
lecturas por da de la muestra, por tanto, se requera un total de 500 mL de
muestra, preparndose por seguridad 1000 mL de solucin en cada nivel de
concentracin para el rango bajo del mtodo. Para el rango alto, el volumen de
muestra fue 25 mL, debindose obtener de igual manera 5 lecturas por da, dando
un total de 125 mL necesarios, por tanto, en este caso se prepararon 250 mL de
solucin patrn en cada nivel de concentracin para el rango alto del mtodo. En
201
la tabla IV.1 se especifica el material volumtrico ocupado en cada nivel de

concentracin.
Tabla IV.1: Material volumtrico utilizado en la preparacin de las soluciones patrn para
la validacin del mtodo de la alcalinidad total
Concentracin de la solucin patrn certificada ( /
l [ =
D(T9 /Ql
Alcuota tomada
500 mgCaCO3/L
Solucin patrn preparada
(mgCaCO3/L)
r(T9 /Ql"
(mL)
Material volumtrico
utilizado
r(T9 /Ql
(mL)
Material volumtrico
utilizado
10
1000
Matraz aforado de 1000 mL
25
50
1000
49,9
99,8
1000
50
25
250
100
50
250
250
125
250
Para la concentracin de 49,9 mgCaCO3/L, se especifica el uso de dos materiales

volumtricos, esto se debi, a que fue necesario medir primero una alcuota de
100 mL con ayuda del matraz aforado y luego se sac 0,2 mL con ayuda de la
pipeta serolgica de 1 mL, para obtener la alcuota necesaria de 99,8 mL de
acuerdo a la tabla IV.1. De igual manera, para la concentracin de 250
mgCaCO3/L, primero se tom una alcuota de 100 mL y luego los 25 mL restantes
cada uno con el matraz aforado respectivo, de esta manera se obtuvo los 125 mL
de alcuota necesarios.
Mtodo para la determinacin de DBO5
certificada (MRC) de 200 mg/L de concentracin. De acuerdo al procedimiento del
mtodo, el volumen de muestra requerido para el anlisis no es un valor
constante, sino que depende del valor de DBO de la solucin patrn analizada.
Por tanto, en este mtodo cada nivel de concentracin fue un caso diferente, que
se detalla a continuacin.
202
Para el nivel bajo de 2mg/L de concentracin de acuerdo a la tcnica de dilucin

no demandaba diluciones. El procedimiento del mtodo para muestras que no
requieren dilucin, indica que se deben realizar tres lecturas por muestra para
reportar el resultado igual al promedio de estos tres valores. Sin embargo, para la
validacin del mtodo se report el resultado de cada lectura, sin ser promediado,
obtenindose 5 lecturas por da de acuerdo al diseo experimental. Esto debido a
la cantidad de solucin patrn que tres lecturas por resultado demandaba. Con
esta consideracin, se prepararon 1000 mL de solucin patrn (de las cual se
podan obtener 3 lecturas debido al volumen del frasco winkler, 300 mL),
preparndose evidentemente dos soluciones por da, para completar las 5
lecturas. En la tabla IV.2 se especifica el material volumtrico ocupado en cada
nivel de concentracin.
la validacin del mtodo de DBO5
Concentracin de la solucin patrn certificada (/
l )
D(:F9/Ql
Alcuota tomada
200 mg/L
(mg/L)
r(:F9/Ql"
(mL)
Material volumtrico
utilizado
r(:F9/Ql
(mL)
Material volumtrico
utilizado
10
1000
200
500
Para el nivel medio de 200 mg/L de concentracin, como se observa en la tabla

IV.2 no se debi tomar ningn volumen de alcuota, ya que este nivel corresponde
a la concentracin de la solucin patrn certificada. Sin embargo, este valor de
DBO si demand de diluciones de la muestra, para su anlisis. Por tanto, de
acuerdo a las ecuaciones descritas en la tcnica de dilucin del procedimiento, se
determin el volumen de muestra necesario para el anlisis.
thjBBkM eihkBj
:F9,420-
CkiBkM 1 thjBBkM eihkBj m 1000 m 0,5 Y gc cPhj[
CkiBkM 2 thjBBkM eihkBj m 1000 Y gc cPhj[
CkiBkM 3 thjBBkM eihkBj m 1000 m 1,5 Y gc cPhj[
[2.12]
[2.14]
[2.13]
[2.15]
203
Para la concentracin del nivel alto de 500 mg/L, se debi realizar igualmente
diluciones para el anlisis de la muestra. En la tabla IV.3 se especifica el material
volumtrico ocupado para tomar el volumen de muestra tanto para el nivel medio
y alto del mtodo en funcin de los datos obtenidos.
Tabla IV.3: Material volumtrico utilizado para tomar el volumen de muestra de acuerdo a
la tcnica de dilucin del mtodo de DBO5
Nivel de
Volumen
concentracin de dilucin
(mg/L)
(mL)
200
500
Material volumtrico
utilizado
-
D1 : 10
D2 : 20
D3 : 30
D1 : 4
D2 : 8
D3 : 12
Cada volumen de dilucin para el mismo nivel de concentracin, se tom

empleando el mismo material volumtrico como se puede observar en la tabla
IV.3.
Para el nivel alto de 500 mg/L de concentracin, debido a que la solucin patrn
certificada tena un valor de concentracin menor, se hizo uso de un artificio
matemtico para el clculo de DBO5. Se realiz el anlisis con la solucin de 200
mg/L, tomando el volumen de muestra como si se tratase de una concentracin
de 500 mg/L, y de igual manera con las lecturas obtenidas, se realiz el clculo de
la DBO de la muestra. Es decir, como si se tratase de una concentracin igual a
500 mg/L.
Mtodo para la determinacin de STD
certificada (MRC) de 1000 mg/L de concentracin. De acuerdo al procedimiento
del mtodo y al diseo experimental, se requera tomar un volumen de muestra
igual a 50 mL obtenindose 5 lecturas de la solucin patrn, por tanto, se
204
prepararon 250 mL de solucin en cada nivel de concentracin. En la tabla IV.4 se

especifica el material volumtrico ocupado en cada nivel de concentracin.
la validacin del mtodo de STD
Concentracin de la solucin patrn certificada (/
l )
D(]H:/Ql
Alcuota tomada
1000 mg/L
(mg/L)
r(]H:/Ql"
(mL)
Material volumtrico
utilizado
r(]H:/Ql
(mL)
Material volumtrico
utilizado
50
25
500
500
250
500
1000
205
ANEXO V
EJEMPLO DE CLCULO DEL ESTADSTICO @ CON AYUDA DE
EXCEL
Excel tiene una opcin que realiza el clculo del estadstico . Los pasos a seguir
a) Ingresar los datos obtenidos en una hoja de Excel. Ir a la barra de

herramientas y en la opcin Datos, seleccionar Anlisis de datos.
b) En la ventana que se despliega, seleccionar la opcin Prueba t para dos

muestras suponiendo varianzas desiguales Aceptar, tal como se indica
en la figura V.1.
Fig V.1: Ejemplo de clculo del estadstico
c) Se despliega una nueva ventana la que se muestra en la figura V.2.

Ingresar los datos obtenidos de las dos muestras analizadas en la opcin
Rango para la variable 1 y 2 respectivamente.
d) En las opciones de salida, seleccionar Rango de salida para indicar la
celda dentro de la hoja donde se est trabajando para que sea mostrados
los resultados. Caso contrario, elegir cualquiera de dos opciones restantes
Aceptar.
206
e) El valor de alfa que representa el nivel de probabilidad, para todos los

clculos en esta investigacin se estableci igual a b 0,05. En la figura
V.3 se muestra un ejemplo de la presentacin de los resultados en la hoja
de Excel.
207
ANEXO VI
EJEMPLO DE CLCULO DEL ESTADSTICO A CON AYUDA DE
EXCEL
Excel tiene una opcin que realiza el clculo del estadstico . Los pasos a seguir

b) En la ventana que se despliega, seleccionar la opcin Prueba para

varianzas desiguales Aceptar, tal como se indica en la figura VI.1.
Fig VI.1: Ejemplo de clculo del estadstico

c) Se despliega una nueva ventana la que se muestra en la figura VI.2.
Ingresar los datos obtenidos de las dos muestras analizadas en la opcin
Rango para la variable 1 y 2 respectivamente. Se debe recordar que
Excel para este clculo, slo proporciona el contraste F de una cola, siendo
necesario introducir la muestra con la varianza ms grande como primera
muestra, es decir, en la variable 1.
d) En las opciones de salida, seleccionar Rango de salida para indicar la
208

Aceptar.

e) El valor de alfa que representa el nivel de probabilidad para todos los
niveles en esta investigacin se estableci igual a 0,05. En la figura
VI.2 se muestra un ejemplo de la presentacin de los resultados en la hoja

de Excel.
209
ANEXO VII
EJEMPLO DE CLCULO DEL ANOVA DE UN FACTOR CON
AYUDA DE EXCEL
Excel tiene una opcin que realiza el clculo del ANOVA de un factor. Los pasos a
seguir se describen a continuacin:
b) En la ventana que se despliega, seleccionar la opcin Anlisis de

varianza de un factor Aceptar, tal como se indica en la figura VII.1.
Fig VII.1: Ejemplo de clculo del ANOVA de un factor

c) Se despliega una nueva ventana la que se muestra en la figura VII.2.
Ingresar los datos obtenidos de las muestras analizadas en la opcin
Rango de entrada.
d) En las opciones de salida, seleccionar Rango de salida, para indicar la

Aceptar.
210
Fig VII. 2: Ejemplo de clculo del ANOVA de un factor

e) El valor de alfa que representa el nivel de probabilidad para todos los
niveles es esta investigacin se estableci a 0,05. En la figura VII.3 se
muestra un ejemplo de la presentacin de los resultados en la hoja de

Excel.
Fig VII.3: Ejemplo de clculo del ANOVA de un factor
211
ANEXO XVIII
VALORES EXPERIMENTALES OBTENIDOS EN LAS PRUEBAS
PREVIAS DEL MTODO DE ALCALINIDAD TOTAL
Tabla VIII.1: Valores experimentales obtenidos en la puesta a punto del mtodo de
alcalinidad total
Concentracin
62,5 mgCaCO3/L
Solucin Valorante de H2SO4 empleada N 1

Anlisis en un Sistema Abierto
Repeticiones
1
2
3
Condiciones
inicial
final
pH
10,50
4,50
T (C)
19,7
20,1
pH
10,45
4,54
T (C)
20,0
20,6
pH
10,44
4,48
T (C)
18,0
18,5
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)
5,950
60,4
5,900
59,9
5,850
59,4
Anlisis en un Sistema Cerrado

Repeticiones
1
2
3
Condiciones
inicial
final
pH
10,39
4,50
T (C)
19,3
20,1
pH
10,39
4,53
T (C)
20,0
20,2
pH
10,23
4,50
T (C)
17,9
18,4
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)
5,950
60,4
5,925
60,1
5,850
59,4
212
Tabla VIII.2: Valores experimentales obtenidos en la determinacin del nivel bajo de

concentracin del mtodo de alcalinidad total
Concentracin
1 mgCaCO3/L
Solucin valorante de H2SO4 empleada N 1

Repeticiones
1
2
3
Condiciones
inicial
final
pH
6,44
4,49
T (C)
20,7
20,9
pH
6,23
4,49
T (C)
20,7
21,0
pH
6,53
4,52
T (C)
22,1
22,9
Concentracin
Repeticiones
1
2
3
inicial
final
pH
6,71
4,54
T (C)
18,2
18,5
pH
6,58
4,48
T (C)
18,7
19,0
pH
6,5
4,56
T (C)
18,9
19,2
Repeticiones
2
3
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)
0,200
2,0
0,200
2,0
0,200
2,0
3 mgCaCO3/L
Condiciones
Concentracin
Gasto
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)
0,400
4,1
0,425
4,3
0,425
4,3
5 mgCaCO3/L
Condiciones
inicial
final
pH
7,14
4,51
T (C)
17,6
18,1
pH
8,78
4,53
T (C)
17,2
17,5
pH
8,75
4,50
T (C)
17,6
18,0
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)
0,500
5,1
0,550
5,6
0,525
5,3
213
Tabla VIII.3: Valores experimentales obtenidos en el contraste de significacin del MRC

y MRi del mtodo de alcalinidad total
Concentracin
5 mgCaCO3/L

Material de Referencia Certificado (MRC)
Repeticiones
1
2
3
4
5
Condiciones
inicial
final
pH
6,85
4,53
T (C)
17,6
17,6
pH
6,62
4,55
T (C)
17,7
18,2
pH
6,35
4,50
T (C)
17,7
18,2
pH
6,69
4,53
T (C)
17,6
18,3
pH
6,85
4,50
T (C)
18,5
20,4
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)
0,550
5,6
0,525
5,4
0,525
5,4
0,500
5,1
0,525
5,4
Material de Referencia Interno (MRi)

Repeticiones
1
2
3
4
5
Condiciones
inicial
final
pH
8,68
4,45
T (C)
20,5
20,7
pH
8,66
4,52
T (C)
20,2
20,6
pH
8,25
4,50
T (C)
20,2
20,5
pH
8,14
4,53
T (C)
19,8
20,1
pH
7,84
4,55
T (C)
20,0
20,2
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)
0,475
4,9
0,525
5,4
0,525
5,4
0,500
5,1
0,475
4,9
214
ANEXO IX
PREVIAS DEL MTODO DE DBO5
Tabla IX.1: Valores experimentales obtenidos en la puesta a punto del mtodo de DBO5
Concentracin
20 mg/L
Solucin valorante de Na2S2O4 empleada N 1

Anlisis sin inhibidor de nitrificacin
Repeticiones
Dilucin
gasto inicial
gasto final
DBO5
(mL)
(mL)
(mL)
(mg/L)
Blanco
6,675
6,100
0,6
100
6,875
2,725
36,2
200
6,875
1,500
24,3
300
6,350
1,100
15,8
25,4
Blanco
6,850
6,450
0,4
100
6,850
4,750
17,2
200
6,550
2,650
17,7
300
6,450
1,125
16,6
17,2
Blanco
6,850
6,350
0,5
100
7,025
4,250
23,0
200
6,700
2,275
19,9
300
6,675
0,900
17,8
20,2
Anlisis empleando inhibidor de nitrificacin (piridina)

Repeticiones
Dilucin
gasto inicial
gasto final
DBO5
(mL)
(mL)
(mL)
(mg/L)
Blanco
6,925
6,825
0,1
100
6,725
4,600
20,5
200
6,825
3,075
18,5
300
6,700
0,200
21,6
20,2
215
Tabla IX.1: Valores experimentales obtenidos en la puesta a punto del mtodo de DBO5
Continuacin
Repeticiones
Dilucin
gasto inicial
gasto final
DBO5
(mL)
(mL)
(mL)
(mg/L)
Blanco
6,925
6,850
0,1
100
6,750
4,650
20,5
200
6,725
3,100
18,0
300
6,850
0,250
22,0
20,2
Blanco
6,925
6,800
0,1
100
6,775
4,750
19,2
200
6,650
2,950
18,1
300
6,900
0,050
22,7
20,0
Tabla IX.2: Valores experimentales obtenidos en la determinacin del nivel bajo de

concentracin del mtodo de DBO5
Concentracin
1,24 mg/L

Blanco: 0,1 mL
gasto inicial
gasto final
DBO5
Repeticiones
(mL)
(mL)
(mg/L)
6,700
5,850
0,8
6,450
5,525
0,8
6,900
5,350
1,5
6,500
5,500
0,9
Concentracin
1,98 mg/L
Blanco: 0,5 mL
gasto inicial
gasto final
DBO5
Repeticiones
(mL)
(mL)
(mg/L)
6,750
4,400
1,9
6,750
4,150
2,1
6,550
4,350
1,7
6,750
4,100
2,2
216
Tabla IX.3: Valores experimentales obtenidos en el contraste de significacin del MRC y

el MRi del mtodo de DBO5
Concentracin
2 mg/L

Material de Referencia Certificados (MRC)
Blanco: 0,5 mL
gasto inicial
gasto final
DBO5
Repeticiones
(mL)
(mL)
(mg/L)
6,650
4,200
2,0
6,675
4,050
2,2
6,525
4,150
1,9
6,800
4,300
2,0
6,550
4,350
1,7

Blanco: 0,5 ml
gasto inicial
gasto final
DBO5
Repeticiones
(mL)
(mL)
(mg/L)
6,750
4,400
1,9
6,750
4,150
2,1
6,550
4,350
1,7
6,750
4,100
2,2
6,750
4,300
2,0
217
ANEXO X
PREVIAS DEL MTODO PARA STD
Tabla X.1: Valores experimentales obtenidos en la determinacin del nivel bajo de
concentracin del mtodo de STD
Concentracin
5 mg/L
Peso inicial
Peso final
Concentracin
(g)
(g)
(mg/L)
45,4058
45,4067
18
45,5481
45,5490
18
47,1681
47,1687
12
Repeticiones
Concentracin
10 mg/L
Peso inicial
Peso final
Concentracin
(g)
(g)
(mg/L)
45,3706
45,3719
26
44,2773
44,2782
18
46,0325
46,0335
20
Repeticiones
Concentracin
20 mg/L
Peso inicial
Peso final
Concentracin
(g)
(g)
(mg/L)
43,8808
43,8822
28
47,3672
47,3687
30
41,6568
41,6577
18
Repeticiones
Concentracin
50 mg/L
Peso inicial
Peso final
Concentracin
(g)
(g)
(mg/L)
43,6351
43,6381
60
43,8165
43,8194
58
44,1745
44,1774
58
Repeticiones
218
Tabla X.2: Valores experimentales obtenidos en el contraste de significacin del MRC y

el MRi del mtodo de STD
Concentracin
50 mg/L
Material de Referencia Certificado (MRC)

Peso inicial
Peso final
Concentracin
(g)
(g)
(mg/L)
47,5272
47,5304
64
46,9348
46,9379
62
41,4699
41,4731
64
42,8853
42,8883
60
45,4330
45,4362
64
Repeticiones

Peso inicial
Peso final
Concentracin
(g)
(g)
(mg/L)
45,2611
45,2643
64
43,5452
43,5482
60
41,6556
41,6588
64
43,6339
43,6371
64
46,1743
46,1775
64
Repeticiones
219
ANEXO XI
VALORES OBTENIDOS EN LA VALIDACIN DEL MTODO PARA
LA DETERMINACIN DE LA ALCALINIDAD TOTAL
220
Tabla XI.1: Valores obtenidos en la valoracin de las soluciones de cido sulfrico

utilizadas en la validacin del mtodo de alcalinidad total
Valoracin de la solucin de H2SO4 N 1
Gasto de KHP
Gasto de NaOH
Normalidad
(mL)
(mL)
(Eq/L)
4,9
5,15
0,0202
4,875
5,175
0,0202
4,925
5,20
0,0205
0,0203
Promedio

Gasto de KHP
Gasto de NaOH
Normalidad
(mL)
(mL)
(Eq/L)
4,9
5,225
0,0205
4,9
5,20
0,0204
4,950
5,225
0,0207
0,0205
Promedio

Gasto de KHP
Gasto de NaOH
Normalidad
(mL)
(mL)
(Eq/L)
4,975
5,30
0,0211
5,0
5,30
0,0212
5,0
5,35
0,0214
0,0212
Promedio
Validacin de la solucin de H2SO4 N 4

Gasto de KHP
Gasto de NaOH
Normalidad
(mL)
(mL)
(Eq/L)
4,95
5,35
0,0212
4,975
5,40
0,0215
4,975
5,425
0,0216
0,0214
Promedio
221

validacin del mtodo de alcalinidad total
Nivel bajo
Repeticiones
Concentracin =
Condiciones
inicial
final
5 mgCaCO3/L
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)

1
DA 1
2
3
4
5
pH
8,68
4,45
T (C)
20,5
20,7
pH
8,66
4,52
T (C)
20,2
20,6
pH
8,25
4,50
T (C)
20,2
20,5
pH
8,14
4,53
T (C)
19,8
20,1
pH
7,84
4,55
T (C)
20,0
20,2
0,500
5,1
0,525
5,4
0,500
5,1
0,500
5,1
0,475
4,9

1
DA 2
2
3
4
5
pH
8,81
4,46
T (C)
20,7
21,3
pH
8,98
4,54
T (C)
20,3
20,8
pH
8,83
4,48
T (C)
20,2
21,1
pH
8,46
4,55
T (C)
19,8
20,5
pH
8,53
4,51
T (C)
19,5
20,1
0,505
5,4
0,500
5,3
0,475
5,0
0,500
5,3
0,505
5,4

1
DA 3
2
3
4
5
pH
8,67
4,50
T (C)
20,4
21,1
pH
8,47
4,52
T (C)
20,7
21,9
pH
8,60
4,54
T (C)
20,8
21,3
pH
8,40
4,46
T (C)
20,9
21,4
pH
8,33
4,50
T (C)
21,1
21,1
0,500
5,4
0,475
5,1
0,500
5,4
0,475
5,1
0,500
5,4
222

Nivel medio
Repeticiones
Concentracin =
Condiciones
inicial
final
25 mgCaCO3/L
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)

1
DA 1
2
3
4
5
pH
9,75
4,50
T (C)
17,4
17,7
pH
9,62
4,55
T (C)
17,1
18,0
pH
9,58
4,50
T (C)
18,0
18,4
pH
9,62
4,52
T (C)
18,1
18,7
pH
9,61
4,54
T (C)
18,2
18,7
2,375
24,3
2,400
24,6
2,350
24,1
2,350
24,1
2,375
24,3

1
DA 2
2
3
4
5
pH
9,23
4,50
T (C)
19,1
20
pH
9,20
4,52
T (C)
19,3
20,7
pH
8,83
4,50
T (C)
19,6
20,2
pH
8,96
4,49
T (C)
19,6
20,2
pH
8,91
4,50
T (C)
19,5
20,3
2,350
24,9
2,300
24,4
2,325
24,6
2,300
24,4
2,325
24,6

1
DA 3
2
3
4
5
pH
9,72
4,51
T (C)
18,9
19,4
pH
9,45
4,52
19
19,8
pH
9,52
4,46
T (C)
18,9
19,6
pH
9,51
4,50
T (C)
18,9
20,3
pH
9,48
4,55
T (C)
19,1
19,9
T (C)
2,275
24,3
2,275
24,3
2,300
24,6
2,300
24,6
2,300
24,6
223
Tabla XI.4: Valores experimentales obtenidos en el nivel de 49,9 mgCaCO3/L para la

Nivel alto
Repeticiones
Concentracin =
Condiciones
inicial
final
49,9 mgCaCO3/L
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)

1
DA 1
2
3
4
5
pH
10,02
4,45
T (C)
18,4
19,1
pH
9,91
4,48
T (C)
18,3
19,4
pH
9,98
4,50
T (C)
18,8
19,6
pH
9,97
4,49
T (C)
18,6
19,3
pH
9,96
4,50
T (C)
18,5
19,2
4,600
47,2
4,550
46,6
4,625
47,4
4,550
46,6
4,625
47,4

1
DA 2
2
3
4
5
pH
9,93
4,52
T (C)
18,3
18,9
pH
10,00
4,53
T (C)
18,5
19,1
pH
9,93
4,52
T (C)
18,8
19,3
pH
10,07
4,54
T (C)
18,8
19,5
pH
9,80
4,47
T (C)
18,8
19,5
4,475
47,4
4,450
47,2
4,500
47,7
4,500
47,7
4,475
47,4

1
DA 3
2
3
4
5
pH
10,03
4,52
T (C)
20,2
20,4
pH
9,99
4,53
T (C)
20,4
20,6
pH
9,81
4,48
T (C)
20,5
20,8
pH
9,92
4,54
T (C)
20,5
20,9
pH
9,95
4,50
T (C)
20,6
21,2
4,400
47,1
4,425
47,3
4,425
47,3
4,450
47,6
4,450
47,6
224

Nivel bajo
Repeticiones
Concentracin =
Condiciones
inicial
final
50 mgCaCO3/L
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)

1
DA 1
2
3
4
5
pH
10,00
4,51
T (C)
19,3
21,2
pH
9,96
4,50
T (C)
19,7
21,3
pH
9,90
4,47
T (C)
20,0
21,4
pH
9,96
4,55
T (C)
19,5
21,8
pH
9,96
4,47
T (C)
19,7
21,7
1,175
48,2
1,200
49,2
1,200
49,2
1,175
48,2
1,200
49,2

1
DA 2
2
3
4
5
pH
9,68
4,52
T (C)
19,3
19,7
pH
9,55
4,53
T (C)
19,6
20
pH
9,45
4,61
T (C)
19,6
20,9
pH
9,66
4,47
T (C)
19,7
20,4
pH
9,64
4,51
T (C)
20,1
20,6
1,175
49,8
1,175
49,8
1,150
48,8
1,175
49,8
1,175
49,8

1
DA 3
2
3
4
5
pH
9,86
4,57
T (C)
18,4
18,9
pH
10,03
4,56
T (C)
18,7
20,3
pH
10,03
4,51
T (C)
18,9
20,6
pH
9,88
4,47
T (C)
19,8
21,7
pH
9,95
4,50
T (C)
19,4
20,1
1,150
49,2
1,150
49,2
1,150
49,2
1,125
48,2
1,150
49,2
225

Nivel medio
Repeticiones
Concentracin =
Condiciones
inicial
final
100 mgCaCO3/L
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)

1
DA 1
2
3
4
5
pH
10,33
4,50
T (C)
19,0
20,9
pH
10,31
4,58
T (C)
19,4
21,4
pH
10,20
4,36
T (C)
19,6
21,9
pH
10,25
4,50
T (C)
21,1
22,5
pH
10,20
4,52
T (C)
20,2
22,3
2,350
96,4
2,350
96,4
2,350
96,4
2,375
97,4
2,350
96,4

1
DA 2
2
3
4
5
pH
10,02
4,48
T (C)
19,1
21,4
pH
10,07
4,52
T (C)
19,3
21,4
pH
9,99
4,45
T (C)
18,9
21,2
pH
10,05
4,45
T (C)
19,4
21,9
pH
10,03
4,55
T (C)
19,0
20,5
2,350
99,6
2,275
96,5
2,300
97,5
2,325
98,6
2,300
97,5

1
DA 3
2
3
4
5
pH
10,31
4,42
T (C)
19,9
21,0
pH
10,28
4,50
T (C)
20,5
21,6
pH
10,30
4,42
T (C)
20,2
21,4
pH
10,15
4,56
T (C)
20,1
21,9
pH
10,19
4,55
T (C)
19,7
22,2
2,275
97,4
2,300
98,4
2,250
96,3
2,250
96,3
2,275
97,4
226

Nivel alto
Repeticiones
Concentracin =
Condiciones
inicial
final
250 mgCaCO3/L
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)

1
DA 1
2
3
4
5
pH
10,53
4,45
T (C)
17,5
19,9
pH
10,56
4,50
T (C)
18,3
21,7
pH
10,54
4,56
T (C)
17,7
20,3
pH
10,55
4,55
T (C)
17,6
19,7
pH
10,50
4,50
T (C)
18,0
20,0
5,850
239,9
5,850
239,9
5,850
239,9
5,800
237,8
5,850
239,9

1
DA 2
2
3
4
5
pH
10,48
4,48
T (C)
18,9
19,6
pH
10,51
4,54
T (C)
18,7
20,0
pH
10,44
4,54
T (C)
19,1
20,2
pH
10,48
4,46
T (C)
19,2
20,7
pH
10,52
4,49
T (C)
18,9
20,9
5,700
241,7
5,700
241,7
5,700
241,7
5,650
239,6
5,650
239,6

1
DA 3
2
3
4
5
pH
10,53
4,47
T (C)
19,8
20,1
pH
10,49
4,43
T (C)
20,1
20,9
pH
10,48
4,46
T (C)
20,2
21,5
pH
10,45
4,50
T (C)
20,5
21,4
pH
10,60
4,55
T (C)
20,0
20,6
5,600
239,7
5,600
239,7
5,625
240,8
5,625
240,8
5,625
240,8
227
Tabla XI.8: Valores experimentales obtenidos en la determinacin del % de Recuperacin

de una muestra fortificada para el mtodo de alcalinidad total rango bajo
Matriz: Agua residual
Repeticiones
1
2
3
4
5
Condiciones
inicial
final
pH
7,05
4,47
T (C)
21,3
21,7
pH
6,96
4,50
T (C)
21,1
21,7
pH
7,01
4,54
T (C)
21,1
21,6
pH
7,03
4,52
T (C)
21,2
21,8
pH
7,06
4,47
T (C)
21,2
21,7
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)
1,300
13,9
1,325
14,2
1,300
13,9
1,300
13,9
1,325
14,2
Matriz + adicin del MRC

Adicin : 5 mgCaCO3/L
Repeticiones
1
2
3
4
5
Condiciones
inicial
final
pH
7,08
4,50
T (C)
20,8
21,2
pH
7,08
4,53
T (C)
21,0
21.5
pH
7,04
4,51
T (C)
21,0
21,5
pH
7,03
4,50
T (C)
21,2
21,7
pH
7,04
4,51
T (C)
21,0
21,5
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)
1,750
18,7
1,700
18,2
1,700
18,2
1,725
18,5
1,700
18,2
228
Tabla XI.9: Valores experimentales obtenidos en la determinacin del % de Recuperacin

de una muestra fortificada para el mtodo de alcalinidad total rango alto
Matriz: Agua residual
Repeticiones
1
2
3
4
5
Condiciones
inicial
final
pH
7,54
4,52
T (C)
21,4
21,8
pH
7,43
4,43
T (C)
21,4
21,7
pH
7,61
4,53
T (C)
21,2
21,6
pH
7,56
4,50
T (C)
21,5
22,5
pH
7,60
4,50
T (C)
21,6
23,0
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)
1,550
66,3
1,550
66,3
1,525
65,3
1,525
65,3
1,550
66,3

Adicin : 50 mgCaCO3/L
Repeticiones
1
2
3
4
5
Condiciones
inicial
final
pH
7,86
4,56
T (C)
21,4
22,0
pH
7,87
4,51
T (C)
21,2
22,1
pH
7,88
4,51
T (C)
21,3
22,7
pH
7,88
4,46
T (C)
21,3
22,9
pH
7,89
4,57
T (C)
21,6
23,5
Gasto
Concentracin
(mL)
(mgCaCO3/L)
2,550
109,1
2,525
108,1
2,550
109,1
2,525
108,1
2,525
108,1
229
Tabla XI.10: Clculo de la precisin en el nivel de 5 mgCaCO3/L a partir de los valores

obtenidos del ANOVA de un factor para el mtodo de alcalinidad total
Nivel bajo
Concentracin = 5 mgCaCO3/L
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
5,1
5,4
5,4
5,4
5,3
5,1
5,1
5,0
5,4
5,1
5,3
5,1
4,9
5,4
5,4
| , mgCaCO3/L
$
5,13
5,27
5,24
% CVr
3,02
2,94
2,95
|, mgCaCO3/L
$
5,21
0,001
0,15
, mgCaCO3/L2
% CVr
3,02
, mgCaCO3/L
0,16
% CVR
3,04
, mgCaCO3/L
Resultados del ANOVA de un factor realizados con ayuda de Excel

Origen de las
variaciones
Entre grupos
0,06
%
2
0,03
Dentro de los grupos
0,29
12
0,02
Total
0,35
14
SDC
DCM
F
1,22
&
F crtico
0,33
3,89

0,06
Diferencia cuadrtica entre grupos
0,29
Diferencia cuadrtica dentro del grupo

0,03
Diferencia cuadrtica media entre grupos
0,02
Diferencia cuadrtica media dentro del grupo

0,35
Diferencia cuadrtica media total
1,22
&
0,33
A crtico
'
3,89
experimental
Valor crtico para

Probabilidad
Grados de libertad 1
12
14
Grados de libertad totales
230

Nivel medio
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
24,3
24,9
24,3
24,6
24,4
24,3
24,1
24,6
24,6
24,1
24,4
24,6
24,3
24,6
24,6
| , mgCaCO3/L
$
24,29
24,59
24,50
% CVr
0,81
0,80
0,80
|, mgCaCO3/L
$
24,46
0,02
0,20
, mgCaCO3/L2
% CVr
0,81
, mgCaCO3/L
0,23
% CVR
0,96
, mgCaCO3/L

Origen de las
variaciones
Suma de Grados de
cuadrados libertad
Promedio
de los
cuadrados
Probabili_
dad
Valor
crtico
para F
3,04
0,09
3,89
Entre grupos
0,24
0,12
0,47
12
0,04
Total
0,70
14

0,24
0,47

0,12
0,04

0,70
3,04
&
0,09
A crtico
'
3,89
experimental
Valor crtico para

Probabilidad
12
14
231
Tabla XI.12: Clculo de la precisin en el nivel de 49,9 mgCaCO3/L a partir de los

valores obtenidos del ANOVA de un factor para el mtodo de alcalinidad total
Nivel alto
Concentracin = 49,9 mgCaCO3/L
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
47,2
47,4
47,1
46,6
47,2
47,3
47,4
47,7
47,3
46,6
47,7
47,6
47,4
47,4
47,6
| , mgCaCO3/L
$
47,05
47,49
47,40
% CVr
0,61
0,61
0,61
|, mgCaCO3/L
$
47,31
0,04
0,29
, mgCaCO3/L2
% CVr
0,61
, mgCaCO3/L
0,35
% CVR
0,74
, mgCaCO3/L

Origen de las
variaciones
Suma de Grados de
cuadrados libertad
Promedio
de los
cuadrados
Probabili_
dad
Valor
crtico
para F
3,26
0,07
3,89
Entre grupos
0,54
0,27
1,00
12
0,08
Total
1,55
14

0,54
1,00

0,27
0,08

1,55
3,26
&
0,07
A crtico
'
3,89
experimental
Valor crtico para

Probabilidad
12
14
232

Nivel bajo
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
48,2
49,8
49,2
49,2
49,8
49,2
49,2
48,8
49,2
48,2
49,8
48,2
49,2
49,8
49,2
| , mgCaCO3/L
$
48,79
49,61
49,01
% CVr
1,04
1,02
1,03
|, mgCaCO3/L
$
49,13
0,13
0,51
, mgCaCO3/L2
% CVr
1,04
, mgCaCO3/L
0,62
% CVR
1,26
, mgCaCO3/L

Origen de las
variaciones
Suma de Grados de
cuadrados libertad
Promedio
de los
cuadrados
Probabili_
dad
Valor
crtico
para F
3,51
0,06
3,89
Entre grupos
1,80
0,90
3,08
4,87
12
14
0,26
Total

1,80
3,08

0,90
0,26

4,87
3,51
&
0,06
A crtico
'
3,89
experimental
Valor crtico para

Probabilidad
12
14
233
Nivel medio
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
96,4
99,6
97,4
96,4
96,5
98,4
96,4
97,5
96,3
97,4
98,6
96,3
96,4
97,5
97,4
| , mgCaCO3/L
$
96,56
97,94
97,16
% CVr
0,94
0,93
0,93
|, mgCaCO3/L
$
97,22
0,32
0,91
, mgCaCO3/L2
% CVr
0,94
, mgCaCO3/L
1,07
% CVR
1,10
, mgCaCO3/L

Origen de las
variaciones
Suma de Grados de
cuadrados libertad
Promedio
de los
cuadrados
Probabili_
dad
Valor
crtico
para F
2,94
0,09
3,89
Entre grupos
4,85
2,43
9,89
12
0,82
Total
14,74
14

4,85
9,89

2,43
0,82

14,74
2,94
&
0,09
A crtico
'
3,89
experimental
Valor crtico para

Probabilidad
12
14
234
Nivel alto
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
239,9
241,7
239,7
239,9
241,7
239,7
239,9
241,7
240,8
237,8
239,6
240,8
239,9
239,6
240,8
|
$ , mgCaCO3/L
239,44
240,83
240,32
% CVr
0,38
0,38
0,38
|, mgCaCO3/L
$
240,20
0,33
0,92
, mgCaCO3/L2
% CVr
0,38
, mgCaCO3/L
1,08
% CVR
0,45
, mgCaCO3/L

Origen de las
variaciones
Suma de Grados de
cuadrados libertad
Promedio
de los
cuadrados
Entre grupos
4,96
2,48
10,13
12
0,84
Total
15,09
14

Probabili_
dad
Valor
crtico
para F
2,94
0,09
3,89
4,96
10,13

2,48
0,84

15,09
2,94
&
0,09
A crtico
'
3,89
experimental
Valor crtico para

Probabilidad
12
14
235
Tabla XI.16: Valores para el clculo de los coeficientes de sensibilidad para el mtodo de
alcalinidad total
Valores para el clculo de las constantes A1, B1 y C1
1000 mgCaCO3/L
Concentracin
(mgCaCO3/L)
(mL)
(mL)
0,5
100
25
2,5
100
49,9
4,99
100
50
1,25
25
100
2,5
25
250
6,25
25
(mL)
0,02
(Eq/L)
(mL)
Valores para el clculo de las constantes A3 y B3

Factor de conversin = 1000 Eq*mL/mol*mL
(g)
(g/mol)
0,4086
204,223
100
(mL)

/
l
500 mgCaCO3/L
/
lA
(mgCaCO3/L)
/
l
(mL)
/
lA
10
1000
25
50
1000
49,9
99,8
1000
50
25
250
100
50
250
250
125
250
(mL)
236
Tabla XI.17: Clculo de los coeficientes de sensibilidad para el mtodo de alcalinidad

total
Clculo de las constantes A1, B1 y C1
A partir de las ecuaciones descritas en el captulo 3 se calcularon los coeficientes de sensibilidad
J

[3.3] ;

Concentracin

DJ
[3.4] ;

A1
m
[3.5]

B1
C1
(mgCaCO3/L)
(mgCaCO3/L*mL)
(mL/mL)
(mL*mgCaCO3/L/mL2)
10
0,005
0,05
25
10
0,025
0,25
49,9
10
0,0499
0,499
50
40
0,05
100
40
0,1
250
40
0,25
10
Clculo de las Constantes A2, B2 y C2

v

[3.16] ; v
>
A2
>
B2
[3.17] ; Dv
m
>
[3.18]
C2
(mL/mL)
(N/mL)
(N*mL/mL)
0,004
0,004

>
A3
[3.22] ;
G
>
[3.23]
B3
(Eq/g*L)
(Eq/mL2)
0,048966
0,00020
Clculos de las Constantes A4, B4 y C4
rdDjD fN
DdDjD fN
DdDjD fNm rdDjD fN
3
3
3
3
[3.31];
[3.32]; D
[3.33]
rdDjD f
rdDjD f
rdDjD f 2
3
B4
Concentracin
A4
C4
(mgCaCO3/L)
(mL/mL)
(mgCaCO3/L*mL)
(mgCaCO3/L*mL)
0,01
0,5
0,005
25
0,05
0,5
0,025
49,9
0,0998
0,5
0,0499
50
0,1
0,2
100
0,2
0,4
250
0,5
237
Tabla XI.18: Clculo de la incertidumbre de la concentracin del cido para el

mtodo de alcalinidad total
Incertidumbre de la concentracin del cido
Clculo de
Material Volumtrico utilizado :
Baln aforado de 100 mL
Equipo utilizado :
Balanza analtica
MRC utilizado :
KHP slido
Contribucin del peso de KHP

TU (g)
Contribucin del volumen de KHP

TU (mL)
0,000070
:#'T (g)
H(#T*X#T (g)
!8$UX%') (g)
" (g)
(g)
0,000058
0,000058
0,000102
A2 (mL/mL)
0,08718
0,08740
( mL)
B3 (Eq/L*mL)
0,049
(Eq/L) [3.21]
$##%%') (mL)
H(#T*X#T (mL)
0,000035
0,000152
A3 (Eq/g*L)
0,0015
0,00606
0,0002
1,90E-05
Clculo de y

Bureta de 10 mL
TU (mL)
0,001
$##%%') (mL)
0,00693
(mL)
0,01021
H(#T*X#T (mL)
(mL)
B2 (Eq/L*mL)
0,0025
H(#T*X#T (mL)
0,00030
0,00383
$##%%') (mL)
0,00279
0,01269
(mL)
C2 (Eq/L*mL)
0,004
(Eq/L) [3.15]
TU (mL)
0,0029
0,004
5,63E-05
Factor de conversin
50000 mgCaCO3/Eq
(mgCaCO3/L) [3.12]
2,816
238
Tabla XI.19: Clculo de la incertidumbre del volumen del cido, y del volumen de
muestra, para el mtodo de alcalinidad total
Clculo de [3.10]
Clculo de rango bajo [3.11] Clculo de rango alto [3.11]

Material volumtrico utilizado :
Bureta de 10 mL
TU (mL)

0,001
$##%%') (mL)
0,00693
H(#T*X#T (mL)
(mL)
(mL)
0,00279
0,01021
0,01269
TU (mL)
TU (mL)
0,0015
$##%%') (mL)
0,08718
(mL)
0,08740
H(#T*X#T (mL)
$##%%') (mL)
0,00404
(mL)
0,00441
H(#T*X#T (mL)
0,00606
0,0015
0,00091
Tabla XI.20: Clculo de la incertidumbre en la medida de la alcuota, / y en

la medida del volumen preparado, / para el mtodo de alcalinidad total
/
lA /
l
Clculo de
/

[3.35]
(mL)
@
/

(mgCaCO3/L)
(mL)
(mL)
10
0,0015
0,00115
0,00242
0,00308
25
50
0,0015
0,01501
0,01394
0,02054
49,9
99,8
0,0035
0,09064
0,00613
0,09092
50
25
0,0015
0,00404
0,00091
0,00441
100
50
0,0015
0,01501
0,01394
0,02054
250
125
0,003
0,09122
0,04547
0,10197
Clculo de
/
lA
(mL)
(mL)
1000
0,015
/
A
Clculo de
/
lA
(mL)
(mL)
250
0,01
/
A
(mL)
para el rango bajo [3.36]
(mL)
@
0,12124
0,02425
(mL)
para el rango alto [3.36]
(mL)
@
0,05774
0,02122
(mL)
(mL)
/
A
(mL)
0,12455

/
A
(mL)
0,06232
239
Tabla XI.21: Clculo de la incertidumbre del MRC,

total
Concent.
A4
(mgCaCO3/L) (mL/mL)
/

!
Clculo de [3.30]
B4
(mgCaCO3/L)
(mgCaCO3/L*mL)
/

para el mtodo de alcalinidad
C4
(mL)
(mgCaCO3/L*mL)
/
A
(mL)
(mgCaCO3/L)
0,01
0,0075
0,5
0,00308
0,005
0,12455
0,00166
0,05
0,0030
0,5
0,02054
0,025
0,12455
0,01073
49,9
0,0998
0,0749
0,5
0,09092
0,0499
0,12455
0,04649
50
0,1
0,0750
0,00441
0,2
0,06232
0,01701
100
0,2
0,1500
0,02054
0,4
0,06232
0,05665
250
0,5
0,3750
0,10197
0,06232
0,28395
Tabla XI.22: Clculo de la incertidumbre del procedimiento, "#$%&'(')*$ parel mtodo

de alcalinidad total
Concent.
A1
(mgCaCO3/L) (mgCaCO3/L*mL)
Clculo de @ [3.2]
B1
C1
(mL)
(mL/mL)
(mgCaCO3/L)
(mgCaCO3/L*mL)
@.
(mL)
(mgCaCO3/L)
10
0,01269
0,005
2,816
0,05
0,08740
0,1277
10
0,01269
0,025
2,816
0,25
0,08740
0,1467
49,9
10
0,01269
0,0499
2,816
0,499
0,08740
0,1943
50
40
0,01269
0,05
2,816
0,00441
0,5267
100
40
0,01269
0,1
2,816
0,00441
0,5806
250
40
0,01269
0,25
2,816
10
0,00441
0,8689
Tabla XI.23: Clculo de la incertidumbre combinada, %,-.- para el mtodo de

alcalinidad total
Clculo de @ [3.37]
(mgCaCO3/L)
@ [3.1]
(mg CaCO3/L)
@
(mgCaCO3/L)
(mgCaCO3/L)
(mgCaCO3/L)
0,16
0,1277
0,0017
0,2034
25
0,23
0,1467
0,0107
0,2764
49,9
0,35
0,1943
0,0465
0,4013
50
0,62
0,5267
0,0170
0,8139
100
1,07
0,5806
0,0567
1,2185
250
1,08
0,8689
0,2840
1,4166
Concentracin
240
Tabla XI.24: Clculo del nmero efectivo de grados de libertad, para el mtodo de
alcalinidad total
@
Clculo de [1.48]
(mgCaCO3/L)
(mgCaCO3/L4)
(mgCaCO3/L4)
0,0017
0,0006
14
38,18
25
0,0058
0,0030
14
27,26
2,11
49,9
0,0259
0,0147
14
24,74
2,12
50
0,4388
0,1480
14
41,50
2,07
100
2,2047
1,3099
14
23,56
2,12
250
4,0273
1,3718
14
41,10
2,07
Concentracin
@
2,08
*Factor derivado de la distribucin de Student a un nivel de confianza 95,45% obtenido de la tabla

1.3
Tabla XI.25: Clculo de la Incertidumbre Expandida, / para el mtodo de alcalinidad total

Concentracin
Clculo de [1.49]
(mgCaCO3/L)
(mgCaCO3/L)
0,20
25
0,28
49,9
@
**
(mgCaCO3/L)
0,41
8,13
0,55
2,21
0,40
0,80
1,61
50
0,81
1,63
3,26
100
1,22
2,44
2,44
250
1,42
2,83
1,13
**Valor de @ de la tabla XI.24 tomado como el entero menor ms prximo
241
ANEXO XII
VALORES OBTENIDOS EN LA CALIBRACIN DEL MEDIDOR DE
CONDUCTIVIDAD
Tabla XII.1: Valores experimentales obtenidos en la calibracin del medidor de
conductividad
Estndar
Conductividad = 147 S/cm
Conductividad = 12,8 mS/cm
Conductividad
Temperatura
Conductividad
Temperatura
(uS/cm)
T (C)
(mS/cm)
T (C)
147,5
18,2
12,87
20,0
147,6
18,6
12,85
20,0
147,7
18,8
12,86
19,9
146,9
18,8
12,86
19,8
146,8
18,8
12,86
20,0
Repeticiones
Valor medio
147,30 S/cm
12,86 mS/cm
Correccin
-0,30 S/cm
-0,06 mS/cm
Desv. Estndar
0,42 S/cm
0,01 mS/cm
Tabla XII.2: Datos del medidor de conductividad

Estndar
Datos del equipo

Exactitud
Resolucin
147 S/cm
0,5 %
0,1 S/cm
12,8 mS/cm
0,5 %
0,01 mS/cm
Tabla XII.3: Clculo de la incertidumbre combinada de calibracin, %01234026 para el

medidor de conductividad
Estndar
147 (S/cm)
12,8 (mS/cm)
Clculo de [3.42]
@
[3.38]
@
[3.40]

[3.41]
0,500
0,00316
0,01
0,100
0,10
0,18708
0,06
0,54
242
Tabla XII.4: Clculo del nmero efectivo de grados de libertad, para el medidor de
conductividad
Estndar
147 S/cm
12,8 mS/cm
Clculo de [1.48]
0,08314 S/cm4
0,0012 S/cm4
0,00010 mS/cm
1,00E-10 mS/cm
271,46
4034741,78
@
2
2
*Factor derivado de la distribucin de Student a un nivel de confianza 95,45% obtenido de la

tabla 1.3
Tabla XII.5: Clculo de la Incertidumbre Expandida de Uso, /78$ para el medidor de

conductividad
Clculo de [3.44]
|| Incertidumbre Expandida
Estndar
147 S/cm
0,54 S/cm
@
2
0,30 S/cm
1,37 S/cm
0,93
12,8 mS/cm
0,10 mS/cm
0,06 mS/cm
0,26 mS/cm
2,03
[3.43]
/78$
243
ANEXO XIII
LA DETERMINACIN DE LA CONDUCTIVIDAD
Tabla XIII.1: Valores experimentales obtenidos para el estndar de 147 S/cm y 12,8
mS/cm para la validacin del mtodo de conductividad
Estndar
DA 1
DA 2
Conductividad = 12,8 S/cm
Conductividad
Temperatura
Conductividad
Temperatura
(S/cm)
(C)
(mS/cm)
(C)
146,3
18,2
12,85
18,2W
146,4
18,6
12,91
18,0
146,5
18,8
12,90
18,0
145,7
18,8
12,89
18,0
145,6
18,8
12,89
17,9
146,1
19,0
12,87
17,9
145,8
19,3
12,87
17,9
145,7
18,8
12,85
17,9
145,9
18,9
12,88
17,9
145,7
19,1
12,94
18,0
146,4
18,4
12,87
20,0
146,9
18,6
12,85
20,0
146,0
18,7
12,86
19,9
146,3
19,0
12,86
19,8
145,9
19,0
12,86
20,0
Repeticiones
DA 3
Conductividad = 147 S/cm
244
Tabla XIII.2: Clculo de la precisin para el estndar de 147 S/cm a partir de los valores
obtenidos del ANOVA de un factor para el mtodo de conductividad
Conductividad
147 S/cm
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
146,3
146,1
146,4
146,4
145,8
146,9
146,5
145,7
146,0
145,7
145,9
146,3
145,6
145,7
145,9
| , S/cm
$
146,10
145,84
146,30
% CVr
0,24
0,24
0,24
|, S/cm
$
146,08
0,03
0,35
, S/cm2
% CVr
0,24
, S/cm
0,39
% CVR
0,26
, S/cm

Origen de las
variaciones
SDC
DCM
&
F crtico
Entre grupos
0,53
0,27
2,23
0,15
3,89
1,43
12
0,12
Total
1,96
14

0,53
1,43

0,27
0,12

1,96
2,23
A crtico
&
'
3,89
0,15
experimental
Valor crtico para

Probabilidad
12
14
245
Tabla XIII.3: Clculo de la precisin para el estndar de 12,8 mS/cm a partir de los
valores obtenidos del ANOVA de un factor para el mtodo de conductividad
Conductividad
12,8 mS/cm
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
12,85
12,87
12,87
12,91
12,87
12,85
12,90
12,85
12,86
12,89
12,88
12,86
12,89
12,94
12,86
| , mS/cm
$
12,89
12,88
12,86
% CVr
0,19
0,19
0,19
|, mS/cm
$
12,88
0,0001
0,02
, mS/cm2
% CVr
0,19
, mS/cm
0,03
% CVR
0,203
, mS/cm

Origen de las
variaciones
Entre grupos
0,0022
%
2
0,0011
0,0070
12
0,0006
Total
0,0091
14
SDC
DCM
F
1,87
&
F crtico
0,20
3,89

0,0022
0,0070

0,0011
0,0006

0,0091
1,87
&
0,20
A crtico
'
3,89
experimental
Valor crtico para

Probabilidad
12
14
246
Tabla XIII.4: Clculo de la incertidumbre combinada, %,-.- para el mtodo de

conductividad

[3.46]
Estndar
147 (S/cm)
0,42435
12,8 (mS/cm)
0,11085
Clculo de @ [3.47]
@
[3.45]
[1.51]
1,37
0,0261
0,26
0,28424
0,3856
1,48877
Tabla XIII.5: Clculo del nmero efectivo de grados de libertad, para el mtodo de
conductividad
@
Estndar
147 S/cm
12,8 mS/cm
Clculo de [1.48]
4,91258 S/cm4
0,0221 S/cm4
0,00653 mS/cm
4,64E-07 mS/cm
@
14
3111,79
14
196867,28
2
2

tabla 1.3
Tabla XIII.6: Clculo de la Incertidumbre Expandida, U para el mtodo de conductividad

Clculo de [1.49]
1,49 S/cm
@
2
2,98 S/cm
2,03
0,28 mS/cm
0,57 mS/cm
4,44
Estndar
147 S/cm
12,8 mS/cm
/
247
ANEXO XIV
LA DETERMIANCIN DE DBO5
248
Tabla XIV.1: Valores obtenidos en la valoracin de las soluciones de tiosulfato de sodio

utilizadas en la validacin del mtodo de DBO5
Valoracin de la solucin de Na2S2O3 N 1
@
(mL)
(Eq/L)
Factor
9,90
0,025
1,01
9,95
0,025
1,01
9,80
0,025
1,02
Promedio =
1,012

@
(mL)
(Eq/L)
Factor
10,00
0,025
1,00
9,90
0,025
1,01
9,90
0,025
1,01
Promedio =
1,007

@
(mL)
(Eq/L)
Factor
9,7
0,025
1,03
9,5
0,025
1,05
9,8
0,025
1,02
Promedio =
1,035

@
(mL)
(Eq/L)
Factor
9,95
0,025
1,01
9,90
0,025
1,01
9,95
0,025
1,01
Promedio =
1,007
249
Tabla XIV.2: Valores experimentales obtenidos en el nivel de 2 mg/L para la validacin

del mtodo de DBO5
Nivel bajo
Concentracin =
2 mg/L

gasto inicial
gasto final
DBO5
Repeticiones
(mL)
(mL)
(mg/L)
6,65
4,2
2,0
6,675
4,05
2,1
6,525
4,15
1,9
6,8
4,3
2,0
6,55
4,35
1,7
6,65
4,3
1,9
6,725
4,5
1,7
6,575
4,35
1,7
6,575
4,25
1,8
6,7
4,35
1,9
7,25
4,975
1,8
6,75
4,5
1,8
7,15
4,65
2,0
7,3
4,55
2,3
6,75
4,3
2,0
DA 3
DA 2
DA 1
Blanco: 0,5 mL
250
del mtodo de DBO5
Nivel medio
Concentracin
200 mg/L

Repeticiones
Dilucin
gasto inicial
gasto final
DBO5
(mL)
(mL)
(mL)
(mg/L)
Blanco
7,575
6,200
1,4
10
7,525
4,500
170,8
20
6,950
1,925
188,9
30
7,400
0,050
206,1
188,6
Blanco
7,700
6,700
1,0
10
7,800
4,700
217,4
20
7,450
1,975
231,6
30
7,450
0,050
220,8
DA 1
223,2
Blanco
7,300
6,500
0,8
10
7,100
4,425
194,1
20
6,950
1,650
232,9
30
7,700
0,050
236,3
221,1
Blanco
7,300
6,450
0,9
10
7,500
4,500
222,5
20
7,575
2,700
208,3
30
7,500
0,150
224,3
218,4
Blanco
7,500
6,600
0,9
10
7,450
4,300
232,9
20
7,500
1,800
248,4
30
7,400
0,050
222,5
234,6
251
del mtodo de DBO5 Continuacin
Repeticiones
Dilucin
gasto inicial
gasto final
DBO5
(ml)
(ml)
(ml)
(mg/L)
Blanco
7,150
6,450
0,7
10
7,150
4,500
201,8
20
7,150
2,700
194,1
30
7,175
1,200
182,0
192,6
Blanco
7,025
6,725
0,3
10
7,125
5,025
186,3
20
7,150
2,750
212,2
30
7,000
1,275
187,2
DA 2
195,2
Blanco
7,350
7,000
0,4
10
7,300
4,850
217,4
20
7,150
3,100
191,5
30
6,800
0,500
205,3
204,7
Blanco
7,400
6,700
0,7
10
7,450
4,875
194,1
20
7,150
2,425
208,3
30
7,525
0,650
213,0
205,1
Blanco
7,300
6,600
0,7
10
7,450
4,275
256,2
20
7,150
3,050
176,0
30
7,525
0,375
222,5
218,2
252
Repeticiones
Dilucin gasto inicial
gasto final
DBO5
(ml)
(ml)
(ml)
(mg/L)
Blanco
7,400
6,650
0,8
10
7,050
4,575
178,5
20
7,800
2,150
253,6
30
7,800
0,050
241,5
224,5
Blanco
7,700
7,000
0,7
10
7,150
5,000
150,1
20
7,900
2,300
253,6
30
7,150
0,050
220,8
DA 3
208,2
Blanco
7,675
7,150
0,5
10
7,350
4,975
191,5
20
7,550
2,825
217,4
30
7,350
0,050
233,7
214,2
Blanco
6,950
6,350
0,6
10
7,400
4,800
207,0
20
7,150
2,250
222,5
30
7,300
0,050
229,4
219,7
Blanco
6,950
6,350
0,6
10
7,400
5,300
155,3
20
7,150
1,900
240,6
30
7,300
0,000
231,2
209,0
253
del mtodo de DBO5
Nivel alto
Concentracin
500 mg/L

Repeticiones
Dilucin
gasto inicial
gasto final
DBO5
(ml)
(ml)
(ml)
(mg/L)
Blanco
7,750
7,350
0,4
7,750
5,275
522,4
7,400
3,200
478,3
12
7,200
1,650
432,2
477,6
Blanco
7,100
6,800
0,3
7,150
4,900
490,9
7,550
3,600
459,4
12
7,250
1,750
436,4
DA 1
462,2
Blanco
7,150
6,900
0,3
7,600
5,400
490,9
7,850
3,600
503,5
12
7,550
1,700
469,9
488,1
Blanco
6,950
6,800
0,2
6,950
4,925
472,0
6,850
3,050
459,4
12
6,800
1,175
459,4
463,6
Blanco
6,950
6,800
0,2
6,900
4,900
465,7
6,900
3,100
459,4
12
6,800
1,175
459,4
461,5
254
Nivel alto
Repeticiones
Concentracin =
500 mg/L
Dilucin
gasto inicial
gasto final
DBO5
(mL)
(mL)
(mL)
(mg/L)
Blanco
7,500
7,100
0,4
7,250
4,900
490,9
7,300
3,100
478,3
12
7,250
1,800
423,8
464,3
Blanco
7,250
6,850
0,4
7,275
5,100
446,9
7,400
2,450
572,7
12
7,400
1,400
469,9
DA 2
496,5
Blanco
6,925
6,850
0,1
7,000
5,050
472,0
6,725
3,000
459,4
12
6,650
1,600
417,5
449,7
Blanco
7,550
7,250
0,3
7,050
4,900
465,7
7,200
3,050
484,6
12
6,925
0,900
480,4
476,9
Blanco
7,500
7,100
0,4
7,250
4,900
490,9
7,300
3,100
478,3
12
7,250
1,800
423,8
464,3
255
Nivel alto
Repeticiones
Concentracin =
500 mg/L
Dilucin
gasto inicial
gasto final
DBO5
(mL)
(mL)
(mL)
(mg/L)
Blanco
7,500
7,200
0,3
7,550
5,225
509,8
7,300
3,100
490,9
12
7,100
1,500
444,8
481,8
Blanco
7,150
6,900
0,3
7,300
5,100
490,9
7,650
3,700
465,7
12
7,350
1,000
511,9
DA 2
489,5
Blanco
6,900
6,700
0,2
6,900
4,650
516,1
6,750
2,600
497,2
12
6,800
0,750
490,9
501,4
Blanco
7,500
7,250
0,3
7,100
4,900
490,9
7,225
3,050
494,1
12
6,825
0,900
476,2
487,1
Blanco
7,000
6,900
0,1
7,000
5,000
478,3
7,100
3,350
459,4
12
6,925
1,150
476,2
471,3
256

Recuperacin de una muestra fortificada para el mtodo de DBO5
Matriz: agua residual
Repeticiones
Dilucin
gasto inicial
gasto final
DBO5
(mL)
(mL)
(mL)
(mg/L)
Blanco
7,300
7,150
0,1
100
6,900
5,100
16,6
200
7,025
3,675
16,1
300
7,150
2,100
16,4
16,4
Blanco
7,300
7,075
0,2
100
7,600
5,900
14,9
200
7,050
3,425
17,1
300
7,100
2,500
14,7
15,6
Blanco
7,450
7,400
0,05
100
7,100
5,425
16,4
200
7,100
4,150
14,6
300
7,100
2,450
15,4
15,5
Blanco
7,075
6,800
0,3
100
7,100
5,500
13,3
200
6,800
3,350
16,0
300
6,750
2,550
13,2
14,2
Blanco
7,100
6,825
0,3
100
7,100
5,300
15,4
200
6,800
3,750
14,0
300
6,750
2,450
13,5
14,3
257

Recuperacin de una muestra fortificada para el mtodo de DBO5 Continuacin
Adicin : 10 mg/L
Repeticiones
Dilucin
gasto inicial
gasto final
DBO5
(ml)
(ml)
(ml)
(mg/L)
Blanco
7,150
6,850
0,3
50
7,950
6,100
31,2
100
6,950
4,400
22,7
150
7,300
2,800
28,2
27,4
Blanco
7,150
7,000
0,2
50
7,200
5,850
24,2
100
7,000
4,650
22,2
150
7,200
3,000
27,2
24,5
Blanco
7,350
7,150
0,2
50
7,200
5,850
23,2
100
6,825
4,400
22,4
150
7,200
3,100
26,2
23,9
Blanco
7,000
6,850
0,2
50
7,075
5,600
26,7
100
6,950
4,275
25,4
150
7,050
3,050
25,8
26,0
Blanco
7,050
6,975
0,1
50
7,200
5,850
25,7
100
6,825
4,400
23,7
150
7,200
3,100
27,0
25,5
258

obtenidos del ANOVA de un factor para el mtodo de DBO5
Nivel bajo
Concentracin =
2 mg/L
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
2,0
1,9
1,8
2,1
1,7
1,8
1,9
1,7
2,0
2,0
1,8
2,3
1,7
1,9
2,0
| , mg/L
$
1,94
1,81
1,96
% CVr
7,90
8,49
7,84
|, mg/L
$
1,90
0,002
0,15
, mg/L2
% CVr
7,90
, mg/L
0,16
% CVR
8,44
, mg/L

Origen de las
variaciones
Entre grupos
0,07
%
2
0,03
0,28
12
0,02
Total
0,35
14
SDC
DCM
F
1,47
&
F crtico
0,27
3,89

0,07
0,28

0,03
0,02

0,35
1,47
&
0,27
A crtico
'
3,89
experimental
Valor crtico para

Probabilidad
12
14
259
Nivel medio
Concentracin =
200 mg/L
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
188,6
192,6
224,5
223,2
195,2
208,2
221,1
204,7
214,2
218,4
205,1
219,7
234,6
218,2
209,0
| , mg/L
$
217,18
203,18
215,11
% CVr
5,60
5,99
5,66
|, mg/L
$
211,82
27,50
12,17
, mg/L2
% CVr
5,60
, mg/L
13,25
% CVR
6,26
, mg/L

Origen de las
variaciones
DCM
285,56
1,93
Dentro de los grupos 1.776,64
12
148,05
Total
14
SDC
Entre grupos
571,12
2347,76

571,12
1.776,64
&
F crtico
0,19
3,89


285,56
148,05

2347,76
1,93
&
0,19
A crtico
'
3,89
experimental
Valor crtico para

Probabilidad
12
14
260
Nivel alto
Concentracin =
500 mg/L
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
477,6
464,3
481,8
462,2
496,5
489,5
488,1
449,7
501,4
463,6
476,9
487,1
461,5
476,2
471,3
| , mg/L
$
470,63
472,73
486,23
% CVr
2,90
2,89
2,81
|, mg/L
$
476,53
34,33
13,66
, mg/L2
% CVr
2,90
, mg/L
14,86
% CVR
3,12
, mg/L

Origen de las
variaciones
DCM
358,12
1,92
12
186,47
Total
14
SDC
Entre grupos
716,25
2.953,94

716,25
2.237,70
&
F crtico
0,19
3,89


358,12
186,47

2.953,94
1,92
&
0,19
A crtico
'
3,89

experimental
Valor crtico para

Probabilidad
12
14
261
Tabla XIV.9: Valores para el clculo de los coeficientes de sensibilidad para el mtodo de
DBO5
Valores para el clculo de las constantes A5, B5, C5 y D5; A8 y B8
Factor de dilucin (f)
=

Concentracin
(mg/L)
(mg/L)
(mL)
(mL)
00
1000
20
500
1000
Valores para el clculo de las constantes A6, B6, C6 y D6

(Eq/L)
(mL)
@
0,025
10
10
lA
(mL)
Valor de las constantes A7, B7 y C7

l
0,057 (Eq/L)
lA
(Eq/L)
l
(mg/L)
lA
0,025
43,7
100
(mL)
Valor de las constantes A9, B9 y C9

l
200 mg/L

lA
(mg/L)

l
(mL)

lA
10
1000
200
500
(mL)
262
Tabla XIV.10: Clculo de los coeficientes de sensibilidad para el mtodo de DBO5

Clculo de las constantes A5, B5, C5 y D5

m t [3.51] ;
<21
Concentracin
9:
<21
A5
m t [3.52] ;
B5
9:m
<21
m t [3.53] ;
C5
9:m
<
m t [3.54]
D5
(mg/L)
(mL/mL)
(mg/L*mL)
(mg/L*mL)
(mg/L)
200
50
0,2
10,0
200
500
125
0,5
62,5
500
Clculo de las Constantes A8 y B8

t [3.74] ;
C [3.75]
Concentracin
D8
A8
(mg/L)
2
(mg/L)
2,0

<
? ,.-
A6
[3.60] ;
<
? ,.-
(mL/mL)
B6
(Eq/L*mL)
0,0025
[3.61]; D
/0 m 10
12 3456478
[3.62]
C6
(Eq/L*mL)
0,0025

<
<
[3.66] ;
A7
<
[3.67];
<
(mL/mL)
B7
(Eq/L*mL)
0,437
0,00057
D
< m <
<
[3.68]
C7
(Eq/L*mL)
0,000249
Clculos de las Constantes A9, B9 y C9

rdCfN
[3.78];
rdCf
Concentracin
DdCfN
DdCfNm rdCfN
[3.79]; D
[3.80]
rdCf
rCf 2
A9
B9
C9
(mg/L)
(mL/mL)
(mg/L*mL)
(mg/L*mL)
0,01
0,2
0,002
200
500
263
Tabla XIV.11: Clculo de la incertidumbre en la medida de OD, 9: , medida del volumen
de aforo, y en la medida del volumen de dilucin, <21 para el mtodo de DBO5
Clculo de [3.55]
Clculo de [3.56]
Bureta de 10 mL
Probeta de 1000 mL
TU (mL)
0,001
$##%%') (mL)
0,00693
H(#T*X#T (mL)
TU (mL)
2,8868
0,00279
(mL)
0,01443
(mL = mg/L) =
0,01628
(mL) =
2,88675
Clculo de [3.57]

Para 200mg/L
Para 500 mg/L
TU (mL)
0,0015
$##%%') (mL)
H(#T*X#T (mL)
(mL)
0,00115
0,00242
0,00308
TU (mL)
0,0025
$##%%') (mL)
H(#T*X#T (mL)
(mL)
0,00693
0,00109
0,00745
Tabla XIV.12: Clculo de la incertidumbre en la medida de la alcuota, <=/ y en

la medida del volumen preparado, <=/ para el mtodo de DBO5
Clculo de /
[3.82]
Clculo de /
A [3.83]
TU (mL)
0,0015
$##%%') (mL)
0,00115
/
(mL) =
0,00308
H(#T*X#T (mL)
0,00242
TU (mL)
0,0150
$##%%') (mL)
0,12124
/
A (mL) =
0,12455
H(#T*X#T (mL)
0,02425
264
Tabla XIV.13: Clculo de la incertidumbre del factor de la solucin valorante, para el

mtodo de DBO5
Clculo de
Clculo de A
MRC utilizado :
(Eq/L)
A7 (mL/mL)
Solucin de Dicromato 0,057 N
2,5227E-05
0,437

TU (mL)
Probeta de 50 mL

TU (mL)
0,0150
d$##%%') (mL)
0,15588
H(#T*X#T (mL)
0,15665
B7 (Eq/L*mL)
A (Eq/L)
A6 (Eq/L)-1
Clculo de @ [3.63]
0,08718
A (Ml)
0,08740
0,00606
C7 (Eq/L*mL)
0,00057
[3.65]
$##%%') (mL)
H(#T*X#T (mL)
0,00364
(mL)=
0,0015
0,000249
9,25635E-05
Clculo de [3.64]
TU (mL)
Bureta de 10 mL
$##%%') (mL)
0,00693
(mL)
0,01443
H(#T*X#T (mL)
@ (mL) =
C6 (Eq/L*mL)
TU (mL)
0,001
$##%%') (mL)
0,00115
(mL)=
0,00308
H(#T*X#T (mL)
0,00279
0,01628
(Eq/L)
0,025
0,00370
Tabla XIV.14: Clculo de la incertidumbre del MRC,

A9
(mg/L)
(mL/mL)
/

Clculo de [3.77]
B9
(mg/L)
(mg/L*mL)
0,01
0,01020
200
500
0,0025
0,0000926
Normalidad terica (Eq/L) =
Concent.
0,00242
B6 (Eq/L*mL) =
0,0025
[3.58]
0,0015
/

!
para el mtodo de DBO5
C9
(mL)
(mg/L*mL)
0,2
0,00308
1,02041
2,55102
/
A
(mL)
(mg/L)
0,002
0,12455
0,00067
1,02041
2,55102
265
Tabla XIV.15: Clculo de la incertidumbre del procedimiento, "#$%&'(')*$ para el

mtodo de DBO5
Conc.
A8
(mg/L)
Clculo de @ [3.50]
(mg/L)
(mg/L)
D8
0,0179
(mg /L)
0,01628
0,0037
Conc.
A5
B5
(mg/L) (mL/mL)
(mg/L)
(mg/L*mL)
(mL)
(mg/L*mL)

(mL)
(mg/L)
C5
D5
(mg /L)
200
50
0,0163
0,2
2,89
10,0
0,00308
200
0,0037
1,2431
500
125
0,0163
0,5
2,89
62,5
0,00745
500
0,0037
3,1416
Tabla XIV.16: Clculo de la incertidumbre combinada, %,-.- del mtodo para el DBO5
Clculo de @ [3.84]
Concentracin @ [3.45]
(mg/L)
(mg/L)
(mg/L)
(mg/L)
(mg/L)
0,16
0,0179
0,0007
0,1616
200
13,25
1,2431
1,0204
13,3470
500
14,86
3,1416
2,5510
15,4007
Tabla XIV.17: Clculo del nmero efectivo de grados de libertad, para el mtodo de
DBO5
(mg/L4)
(mg/L4)
0,0007
0,0007
14
14,35
200
31734,44
30819,55
14
14,42
2,21
500
56255,09
48754,59
14
16,15
2,19
Concentracin
(mg/L)
Clculo de [1.48]
@
2,21

tabla 1.3
266
Tabla XIV.18: Clculo de la Incertidumbre Expandida, / para el mtodo de DBO5

(mg/L)
0,16
200
500
Concentracin
@
(mg/L)
**
(mg/L)
0,32
16,16
13,35
26,69
13,35
15,40
30,80
6,16
**Valor de @ de la tabla XIV.17 tomado como el entero menor ms prximo
Tabla XIV.19: Clculo de lmite de deteccin a partir de los valores obtenidos del blanco
para el mtodo de DBO5
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
1,4
0,7
0,8
1,0
0,3
0,7
0,8
0,4
0,5
0,9
0,7
0,6
0,9
0,7
0,6
Valor medio
0,99
0,55
0,64
Desv. estndar
0,23
0,21
0,09
LD
1,68
1,17
0,90
267
ANEXO XV
VALORES OBTENIDOS EN LA VALIDACN DEL MTODO PARA
LA DETERMINACIN DE STD
268
Tabla XV.1: Valores experimentales obtenidos en el nivel de 50 mg/L para la validacin

del mtodo de STD
Nivel bajo
DA 1
DA 2
50 mg/L
Peso inicial
Peso final
Concentracin
(g)
(g)
(mg/L)
44,2775
44,2805
60
43,6345
43,6369
48
45,2620
45,2646
52
43,5468
43,5492
48
41,6572
41,6597
50
47,3677
47,3701
48
42,8860
42,8888
56
46,0329
46,0359
60
46,9357
46,9382
50
44,2781
44,2809
56
44,7643
44,7670
54
45,4087
45,4115
56
48,5640
48,5670
60
43,8159
43,8184
50
43,5452
43,5482
60
Repeticiones
DA 3
Concentracin
del mtodo de STD
Nivel medio
DA 1
500 mg/L
Peso inicial
Peso final
Concentracin
(g)
(g)
(mg/L)
44,1736
44,1992
512
43,8168
43,8430
524
48,5648
48,5909
522
47,3692
47,3946
508
44,2813
44,3066
506
43,6379
43,6635
512
43,8823
43,9079
512
46,0333
46,0583
500
41,6575
41,6832
514
43,8811
43,9063
504
Repeticiones
DA 2
Concentracin
269
del mtodo de STD Continuacin
Peso inicial
Peso final
Concentracin
(g)
(g)
(mg/L)
46,0330
46,0590
520
45,2650
45,2900
500
47,3675
47,3932
514
46,0330
46,0590
520
45,2623
45,2882
518
DA 3
Repeticiones

validacin del mtodo de STD
Nivel alto
DA 1
DA 2
1000 mg/L
Peso inicial
Peso final
Concentracin
(g)
(g)
(mg/L)
41,4711
41,5201
980
45,3721
45,4208
974
43,6349
43,6850
1002
47,5309
47,5806
994
44,7648
44,8133
970
42,8877
42,9374
994
46,9367
46,9869
1004
45,3742
45,4233
982
44,1728
44,2224
992
48,5666
48,6172
1012
44,7643
44,8141
996
44,1721
44,2221
1000
41,6601
41,7097
992
46,9359
46,9867
1016
43,5489
43,5980
982
Repeticiones
DA 3
Concentracin
270
Tabla XV.4: Valores experimentales obtenidos en la determinacin del % de

Recuperacin de una muestra fortificada para el mtodo de STD
Matriz : Agua residual
Peso inicial
Peso final
Concentracin
(g)
(g)
(mg/L)
44,7630
44,7754
248
47,3670
47,3792
244
44,2769
44,2889
240
43,8807
43,8931
248
46,0407
46,0530
246
Repeticiones

Adicin : 50 mg/L
Peso inicial
Peso final
Concentracin
(g)
(g)
(mg/L)
44,1715
44,1861
292
43,8151
43,8297
292
48,5639
48,5783
288
44,5652
44,5797
290
47,1696
47,1841
290
Repeticiones
271

obtenidos del ANOVA de un factor para el mtodo de STD
Nivel bajo
Concentracin =
50 mg/L
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
60
48
54
48
56
56
52
60
60
48
50
50
50
56
60
| , mg/L
$
51,6
54,0
56,0
% CVr
9,14
8,74
8,43
|, mg/L
$
53,87
0,40
4,72
, mg/L2
% CVr
8,74
, mg/L
4,76
% CVR
8,84
, mg/L

Origen de las
variaciones
Entre grupos
48,53
%
2
24,27
267,20
12
22,27
Total
315,73
14

SDC
DCM
F
1,09
&
F crtico
0,37
3,89
48,53
267,20

24,27
22,27

315,73
1,09
&
0,37
A crtico
'
3,89
experimental
Valor crtico para

Probabilidad
12
14
272
Nivel medio
Concentracin =
500 mg/L
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
512
512
520
524
512
500
522
500
514
508
514
520
506
504
518
| , mg/L
$
514,4
508,4
514,4
% CVr
1,48
1,50
1,48
|, mg/L
$
512,40
0,37
7,62
, mg/L2
% CVr
1,48
, mg/L
7,65
% CVR
1,49
, mg/L

Origen de las
variaciones
Entre grupos
120,00
%
2
60,00
697,60
12
58,13
Total
817,60
14
SDC
DCM
F
1,03
&
F crtico
0,39
3,89

120,00
697,60

60,00
58,13

817,60
1,03
&
0,39
A crtico
'
3,89
experimental
Valor crtico para

Probabilidad
12
14
273
Nivel alto
Concentracin
1000 mg/L
Repeticiones
DA 1
DA 2
DA 3
980
994
996
974
1004
1000
1002
982
992
994
992
1016
970
1012
982
| , mg/L
$
984,0
996,8
997,2
% CVr
1,28
1,26
1,26
|, mg/L
$
992,67
24,88
12,55
, mg/L2
% CVr
1,28
, mg/L
13,50
% CVR
1,36
, mg/L

Origen de las
variaciones
DCM
281,87
1,79
12
157,47
Total
14
SDC
Entre grupos
563,73
2.453,33

563,73
1.889,60
&
F crtico
0,21
3,89


281,87
157,47

2.453,33
1,79
&
0,21
A crtico
'
3,89

experimental
Valor crtico para

Probabilidad
12
14
274
Tabla XV.8: Valores para el clculo de los coeficientes de sensibilidad para el mtodo de
STD
Valores para el clculo de las constantes A10 y B10
Factor de conversin
= 1000.000 mg*mL/g*L
(mg/L)
(g)
(mL)
50
0,0025
50
500
0,025
50
1000
0,05
50
Concentracin

/
l
1000 mg/L
/
lA
(mg/L)
/
l
(mL)
/
lA
50
25
500
500
250
500
1000
(mL)
Tabla XV.9: Clculo de los coeficientes de sensibilidad para el mtodo de STD

Clculo de las Constantes A10, y B10
J
J

[3.88] ;
Concentracin
" mJ

[3.89]
A10
B10
(mg/L)
(mg/g*L)
(mg/mL*L)
50
20000
500
20000
10
1000
20000
20

JJ
rdOCfN
DdOCfN
DdOCfNm rdOCfN
[3.94]; JJ
[3.95]; DJJ
[3.96]
rdOCf
rdOCf
rdOCf 2
Concentracin
A11
B11
C11
(mg/L)
(mL/mL)
(mg/L.mL)
(mg/L)
50
0,05
0,1
500
0,5
1000
275
Tabla XV.10: Clculo de la incertidumbre en la medida de la alcuota, >?</ y en la

medida del volumen preparado, >?</ para el mtodo de STD
Clculo de /
[3.98]
(mL)
(mL)
(mL)
@
(mL)
/

50
25
0,0015
0,0040
0,00091
0,00441
500
250
0,0100
0,0577
0,02122
0,06232
1000
/
lA
(mg/L)
/
l
Clculo de /
A [3.99]
(mL)
(mL)
(mL)
(mL)
@
(mL)
/
A
500
0,01
0,26558
0,00606
0,26584
/
lA
(mL)
Tabla XV.11: Clculo de la incertidumbre en la medida de masa, " y en la medida del

volumen de muestra, para el mtodo de STD
Clculo de [3.90]

Equipo utilizado :
Clculo de [3.91]
Balanza analtica
Contribucin del peso
Contribucin del volumen
TU (g)
0,000058
!8$UX%') (g)
0,000058
0,00007
:#'T (g)
H(#T*X#T (g)
(g)
0,000035
0,000113
TU (mL)
$##%%') (mL)
H(#T*X#T (mL)
0,01501
0,02054
(mL)
Tabla XV.12: Clculo de la incertidumbre del MRC,

Concent.
A11
(mg/L)
(L/L)
50
/

Clculo de [3.93]
B11
(mg/L)
(mg/L*L)
0,05
0,2551
500
0,5
1000
0,0015
/

!
0,01394
para el mtodo de STD
C11
(L)
(mg/L*L)
2000
4,41E-06
2,5510
2000
5,1020
/
A
(L)
(mg/L)
100
2,66E-04
0,0308
6,23E-05
1000
2,66E-04
1,3089
5,10
276
Tabla XV.13: Clculo de la incertidumbre del procedimiento, "#$%&'(')*$ para el

mtodo de STD
Concentracin
Clculo de @
A10
-1
[3.87]
B10
(L)
(mg/L)
(L )
(mg)
(mg/L )
(mg/L)
50
20
0,112990
1000
2,05E-05
2,25989
500
20
0,112990
10000
2,05E-05
2,26911
1000
20
0,112990
20000
2,05E-05
2,29684
Tabla XV.14: Clculo de la incertidumbre combinada, %,-.- para el mtodo de STD

Clculo de @ [3.100]
Concentracin @ [3.85]
(mg/L)
(mg/L)
(mg/L)
(mg/L)
(mg/L)
50
4,76
2,25989
0,0308
5,27017
500
7,65
2,26911
1,3089
8,08509
1000
13,50
2,29684
5,1
14,6169
Tabla XV.15: Clculo del nmero efectivo de grados de libertad, para el mtodo de
STD
@
Concentracin
(mg/L4)
(mg/L)
Clculo de
(mg/L4)
@
50
771,43
513,78
14
21,02
500
4273,06
3423,03
14
17,48
2,17
1000
45647,58
33250,31
14
19,22
2,14
2,13

tabla 1.3
Tabla XV.16: Clculo de la Incertidumbre Expandida, / para el mtodo de STD

Concentracin
(mg/L)
@
(mg/L)
Clculo de [1.49]
@
**
(mg/L)
10,54
21,08
50
5,27
500
8,09
16,17
3,23
1000
14,62
29,23
2,92
**Valor de @ de la tabla XV.15 tomado como el entero menor ms prximo
277
ANEXO XVI
CERTIFICADOS DE CALIBRACIN

Calculos para La Validacion de Aguas noPW PDF

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ESCUELA POLITCNICA NACIONAL

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA Y

IMPLEMENTACIN DE UN SISTEMA DE VALIDACIN DE

PROYECTO PREVIO A LA OBTENCIN DEL TTULO DE INGENIERA

MARA FERNANDA VALAREZO BASTIDAS

DIRECTOR: ING. LUIS JARAMILLO

Quito, Noviembre 2009

Escuela Politcnica Nacional 2009

correspondientes a este trabajo, segn lo establecido por la Ley de Propiedad

-------------------------------------------Mara Fernanda Valarezo Bastidas

----------------------------------------Ing. Luis Jaramillo

REVISIN BIBLIOGRFICA ................................................................................. 1

Sistema de Gestin de la Calidad ............................................................................ 1

1.1.1 Calidad ............................................................................................................... 1

Norma NTE INEN ISO/IEC 17025:2006 ..................................................... 71

Puesta a punto de los mtodos.............................................................................. 73

Necesidad analtica .......................................................................................... 73

2.1.3 Procedimientos de anlisis .............................................................................. 74

Sistema de validacin de los mtodos ................................................................... 99

Eleccin de los parmetros de validacin........................................................ 99

Fijacin de objetivos para los parmetros de validacin ................................. 99

2.2.3 Diseo experimental y estadstico ................................................................. 103

Ejecucin de los ensayos diseados .............................................................. 108

RESULTADOS Y DISCUSIONES ........................................................................ 109

Tratamiento estadstico de datos obtenidos ......................................................... 109

Contrastes de significacin realizados en las pruebas previas ...................... 109

3.1.2 Clculo de los parmetros de validacin ....................................................... 110

Discusin de resultados ....................................................................................... 144

3.2.1 Pruebas previas .............................................................................................. 144

Elaboracin del informe y declaracin del mtodo validado .............................. 170

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES .................................................... 176

Conclusiones ....................................................................................................... 176

Recomendaciones ................................................................................................ 184

BIBLIOGRAFA ............................................................................................................. 186

mtodo de alcalinidad total .......................................................................... 146

Tabla 3.3: Valores obtenidos de los estadsticos y  en el contraste de

total ............................................................................................................... 148

Tabla 3.6: Valores obtenidos de los estadsticos y  en el contraste de

significacin entre el MRC y el MRi para el mtodo de DBO5 ................... 152

Tabla 3.7: Valores obtenidos en la determinacin del tiempo de enfriamiento de

significacin entre el MRC y el MRi para el mtodo de STD ..................... 155

Tabla 3.10: Resultados de la veracidad (% de Recuperacin) obtenidos en el

Tabla 3.25: % de Recuperacin obtenidos de una muestra real fortificada en el

Tabla IX.3: Valores experimentales obtenidos en el contraste de significacin del

Tabla XI.11: Clculo de la precisin en el nivel de 25 mgCaCO3/L a partir de los

Tabla XI.18: Clculo de la incertidumbre de la concentracin del cido  para el

mtodo de alcalinidad total .......................................................................... 237

volumen de muestra,  para el mtodo de alcalinidad total .................... 238

Tabla XI.20: Clculo de la incertidumbre en la medida de la alcuota,

para el mtodo de alcalinidad total .............................................................. 238

Tabla XI.21: Clculo de la incertidumbre del MRC, 

alcalinidad total ............................................................................................ 239

Tabla XI.22: Clculo de la incertidumbre del procedimiento, "#$%&'(')*$ parel

mtodo de alcalinidad total .......................................................................... 239

Tabla XI.23: Clculo de la incertidumbre combinada, %,-.- para el mtodo de

alcalinidad total ............................................................................................ 239

mtodo de alcalinidad total ...................................................................... 240

Tabla XI.25: Clculo de la Incertidumbre Expandida, / para el mtodo de

alcalinidad total........................................................................................ 240

Tabla XII.1: Valores experimentales obtenidos en la calibracin del medidor de

para el medidor de conductividad .............................................................. 241

medidor de conductividad .......................................................................... 242

Tabla XII.5: Clculo de la Incertidumbre Expandida de Uso, /78$ para el medidor

Tabla 3.3: Valores obtenidos de los estadsticos y en el contraste de

Tabla 3.6: Valores obtenidos de los estadsticos y en el contraste de

Tabla XI.18: Clculo de la incertidumbre de la concentracin del cido para el

volumen de muestra, para el mtodo de alcalinidad total .................... 238

Tabla XI.21: Clculo de la incertidumbre del MRC,

Tabla XI.22: Clculo de la incertidumbre del procedimiento, "#$%&'(')*$ parel

Tabla XI.23: Clculo de la incertidumbre combinada, %,-.- para el mtodo de

volumen de aforo, y en la medida del volumen de

dilucin, <21 para el mtodo de DBO5 .................................................. 263

para el mtodo de DBO5 ..................................................................... 264

Tabla XIV.14: Clculo de la incertidumbre del MRC,

Tabla XIV.15: Clculo de la incertidumbre del procedimiento, "#$%&'(')*$ para

Tabla XIV.16: Clculo de la incertidumbre combinada, %,-.- del mtodo para el

y en la medida del volumen preparado, >?</ para el mtodo

Tabla XV.11: Clculo de la incertidumbre en la medida de masa, " y en la medida

del volumen de muestra, para el mtodo de STD............................... 275

Tabla XV.12: Clculo de la incertidumbre del MRC,

Tabla XV.13: Clculo de la incertidumbre del procedimiento, "#$%&'(')*$ para

Tabla XV.14: Clculo de la incertidumbre combinada, %,-.- para el mtodo de