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TESIS:
UTILIZACIN DE BACTERIAS ACIDFILOS
COMO SUSTITUTO ENZIMTICO PARA
ELABORAR QUESOS DE PASTA FRESCA Y
BLANDA CON CARACTERSTICAS
FUNCIONALES.
ASESOR:
ING. JORGE EDMUNDO LPEZ PADILLA.
PRESENTADO POR:
ALEJANDRO ANTONIO BONILLA LEMUS
PARA OPTAR AL GRADO DE INGIENERA
AGROINDISTRIAL
INDICE
CONTENIDO
PGINA
Resumen
I. Introduccin............................................................................
ii
1
2
3
5
5
6
6
9
11
13
15
16
21
22
24
25
26
27
29
31
33
34
35
54
VI. Conclusiones........................................................................
86
VII. Recomendaciones...............................................................
89
91
Glosario
Anexo
56
56
67
81
NDICE DE TABLAS
18
20
23
24
39
43
53
55
55
62
63
82
84
NDICE DE GRFICOS
Grafica N 1. Prueba de Triangulo.............................................
66
67
68
69
71
72
74
76
78
79
83
NDICE DE ANEXOS
Anexo N 1. Flujograma de proceso.
Anexo N 2. Cartilla de evaluacin sensorial.
Anexo N 3. Tabla de distribucin t de Student.
Anexo N 4. Tabla prueba tringulo para significancia.
Anexo N 5. Anlisis bromatolgicos.
Anexo N 6. Norma salvadorea NSO 67.01.04:05.
Anexo N 7. Anlisis microbiolgico.
Anexo N 8. Anlisis de identificacin de bacterias acidfilos.
AGRADECIMIENTOS
Quiero hacer constar mis ms sinceros agradecimientos a las
autoridades docentes y personas de la Facultad de Agricultura e
Investigacin Agrcola de la Universidad Dr. Jos Matas Delgado, por
ensearme y transmitir sus conocimientos y por el apoyo brindado para
la realizacin de nuestros estudios.
A mis padres, por su apoyo incondicional desde el inicio de mi carrera
hasta el final. Agradezco todo su apoyo moral, sincero, espiritual y
sobre todo econmico para el bien de mi futuro.
A mis abuelos Paternos Adn Bonilla y Lucila Henrquez por apoyarme
en todo momento para seguir con mis estudios.
A mis abuelos Maternos Cupertino Lemus y Hortensia Martines por
apoyarme en todo momento para seguir con mis estudios.
A mis padrinos por brindarme su apoyo incondicional para seguir
adelante con mis estudios y a motivarme cuando lo necesitaba.
A mi hermana Vernica Bonilla, por animarme en todo momento para
seguir estudiando, en los momentos en que necesitaba motivacin para
seguir con mis estudios.
A mi ta Margo Martines por su apoyo incondicional durante toda mi
carrera.
A mi to Edgardo Bonilla y familia por su apoyo incondicional durante
toda mi carrera.
A mi compaero Vladimir Ramrez, Don Jaime Ramrez y familia por
brindarme su apoyo durante mi carrera.
A Melida y Alexis, por su apoyo y compresin durante la fase de trabajo
de tesis.
A mis profesores mi Padre Lic. Guillermo Antonio Bonilla por haber
compartido sus conocimientos conmigo, y sus colegas Ing. Edgardo
Daz Peate, Ing. Walter Otto, Licda. Cristabel Cruz Muos.
DEDICATORIA
Dedico mi esfuerzo acadmico a Dios Todopoderoso por darme la
fuerza y sabidura por guiarme en cada tramo de mi camino para lograr
mis ideales y ser una persona de bien para la sociedad.
A mis padres por su a poyo econmico y moral, y por confiar en mi y
acompaarme durante todo el camino de mi carrera.
A mi hermana y abuelos por su motivacin, apoyo y optimismo.
A mis familiares y amigos, quienes de una u otra forma me apoyaron y
contribuyeron para que lograra alcanzar mi meta universitaria.
Agradecimiento
A Dios todo poderoso por estar conmigo siempre.
Mis padres: Maria Magdalena de Bonilla y Lic. Guillermo Antonio
Bonilla
La Lic. Maria Georgia Gmez de Reyes. Decana de la Facultad de
Agricultura.
El Ing. Jorge Edmundo Lpez. Asesor de mi Tesis.
La Inga. Fahara Alabi Hernndez. Jurado de tesis
El Dor. Rodrigo Antonio Reyes. Jurado de tesis
El Ing. Juan Manuel Prez. Jurado de tesis.
Asesor de mi Tesis.
Ing. Jorge Edmundo Lpez.
Jurados.
RESUMEN
Esta investigacin tuvo como objetivo estudiar la interaccin
mediante la utilizacin de bacterias acidfilas como sustituto enzimtico,
para elaborar quesos de pasta fresca y blanda con caractersticas
funcionales, para ello fue necesario utilizar leches frescas pasteurizadas ya
que estos son medios estriles que propician interacciones bacterianas que
son capaces de inhibir la accin de otras no benficas. El cultivo probitico
utilizado fue con bacterias propias de un yogurt natural, como son
Lactobacillus bulgaris y Streptococus thermophilus. Se utiliz cido lctico
a una cantidad no mayor de 12 g. para 3750 ml., a una concentracin de
85% y a un pH=5.00. Del proceso trmico el que mejor se adapta al
proceso es a 80 a 60C., ya que la velocidad de calentamiento afecta a la
velocidad de sntesis de la sinresis del suero y al crecimiento de los
microorganismos de arranque. Con respecto al anlisis estadstico se
acepta la Hiptesis nula (Ho) de Igualdad de medias en los atributos de
textura, olor, color, apariencia y aceptacin, esto indica que hay evidencias
estadsticas de que ambas muestras A y B son de igual calidad
organolptica en trminos promedios generales, aunque la muestra A es
ligeramente ms aceptada por tener un mayor valor promedio; es decir, las
diferencias entre ambas son mnimas. En cuanto a los anlisis
bromatolgicos de los quesos elaborados con bacterias y sin bacterias en
perodos de 0 a 15 das, con muestreos cada 5 das para analizar la
evolucin de los estados de stos, se estableci que el queso con bacterias
mejora la calidad nutricional en todos los factores medidos (% protena,
grasa, humedad, ceniza, acidez y slidos totales; as como calcio y fsforo)
por lo que el queso con bacterias supera todas las exigencias de la Norma
Salvadorea NSO 67.01.04:05. Por consiguiente el tipo de cido lctico
producido en la fermentacin durante la elaboracin del queso con estas
bacterias tienen y mantienen latentes las bacterias Streptococus
thermophilus de importancia funcional, ya que esta especie es capaz de
sintetizar el ismero L(+) en un 100% y que este se le atribuyen las
propiedades de disminuir el crecimiento de tumores malignos. Por tal
beneficio el queso elaborado en esta investigacin ofrece un alimento
nutritivo y funcional.
INTRODUCCIN
La obtencin de alimentos a partir de plantas, animales o
microorganismos se ha llevado a cabo de manera espontnea mediante
procesos que podran denominarse de biotecnologa tradicional; que se
puede definir como una tcnica que utiliza clulas vivas, cultivo de tejidos o
molculas derivadas de un organismo como las enzimas para obtener y
modificar un producto, mejorar una planta, animal o desarrollar un
microorganismo para utilizarlo con un propsito especfico. En los ltimos
aos ha surgido un notable mercado aunque segmentado, de alimentos que
se consumen con fines especficos como: productos saludables,
nutracuticos o funcionales que cumplen necesidades nutricionales muy
particulares. Por otra parte, existe el problema de la alimentacin y
desnutricin. Una de las causas principales de la mal nutricin en nuestro
pas es la baja produccin y la disponibilidad de alimentos proteico,
sumados al hecho que la dieta del sector popular se basa principalmente en
ser calrico-energtico y deficiente en protena. Dada que la desnutricin
calrico-proteica es frecuente en nuestra poblacin, siendo muy marcada
en la edad escolar y pre-escolar, con el reemplazo de la leche materna por
fculas o cualquier otro alimento rico en carbohidratos: resulta muy
necesario ofrecer alimentos balanceado calrico-proteico, de buena
digestibilidad y que a su vez est al alcance de las grandes mayoras.
Es posible desarrollar nuevos alimentos que eliminen problemas de
intolerancia causados por algunos alimentos tradicionales. Esto se puede
realizar
bloqueando
los
compuestos
ii
que
causa
la
intolerancia,
iv
bfidas
dicha
investigacin
fue
necesario
utilizar
leches
como:
Staphylococus
aureus,
Coliformes
Totales,
nombres:
Bacilos
Bfidos.
Bifidobacterium
bifidum,
10
11
12
13
14
15
16
17
18
Agua (en %)
60-80
55-57
42-55
20-40
19
20
Queso graso, con un contenido mnimo del 40% de grasa sobre extracto
seco.
Queso semigraso, con un contenido mnimo del 20% de grasa sobre
extracto seco.
Queso magro, con un contenido de menos del 60% de grasa sobre
extracto seco.
21
22
23
Fuente de energa
Vitaminas
Solubles
Soluble en agua
grasa
A
D
B1
B2
Nia
i.u. i.u
Mg
mg
cin
a
mg
Kcal
.
Kj
Prot
ena
g
Grasa
G
H.C
g
Quesos firmes y
semifirmes:
Queso 60% (*)............
435
1.819
19.9
37.0
1.0
355
1.488
25.0
26.0
1.4
755
277
1.161
28.9
17.0
1.4
291
334
1.218
1.396
21.4
19.8
22.4
27.8
0.2
0.2
354
394
1.480
1.653
20.1
16.5
29.5
36.1
1.0
1.0
258
1.085
19.4
19.2
1.5
384
1.608
9.6
36.9
2.5
338
1.413
10.2
31..5
2.5
916
323
1.353
24.2
24.5
0.6
712
1.130 16
Minerales
B6
mg
C
mg
Calcio Hierro
mg
g
0.042
0.270
5.1
0.05
790
0.13
11
0.050
0.330
6.1
0.09
946
0.15
494
0.055
0.325
6.8
0.06
990
0.19
651
808
10
11
0.045
0.050
0.460
0.340
6.4
4.9
0.02
0.23
0
0
720
600
0.18
0.21
858 12
1.025 15
0.040
0.030
0.500
0.500
6.2
5.8
0.23
0.22
0
0
620
710
014
0.50
0.019
0.260
4.3
0.05
620
0.22
1.073 14
0.035
0.200
2.3
0.05
230
0.30
13
0.040
0.200
2.4
0.05
200
0.30
10
0.090
0.430
5.8
0.03
630
0.34
Quesos de moho
blanco:
Camembert Dans
45% (*).......................
Brie Dans 50 (*)....
Quesos azules :
Danablu 50% (*)........
Danablu 60% (*)........
Quesos en salmuera:
Feta Dans 40% (*)....
Quesos de doble
crema:
Quesos de doble crema
70% (*)........................
Quesos de doble crema
60% (*)........................
Quesos fundidos:
Queso fundido 45%
(*)...........................
530
24
Ejemplo de nombres
Componente enzimtico
activo
Quimosina A y B, Pepsina
(A) y Gastricina
cuajo en pasta
dem ms Lipasa
Estmago Ovino
Quimosina y Pepsina
Estmago Caprino
Quimosina y Pepsina
Estmago Porcino
Coagulante porcino
Pepsina A y B, Gastricina
Fuente
Estmago Bovino
Animal
Proteasa asprtica de
Rhizomucor miehei
Hannilase
Microbiano
R. miehei
Proteasa asprtica de R.
pusillus
Proteasa asprtica de C.
parasitica
Rhizomucor pusillus
Coag. Pusillus
Cryphonectria parasitica
Coagulante de parasitica
Aspergillus niger
Chymax
Quimosina B
(Quimosina producida
por fermentacin)
Kluyveromyces lactis
Quimosina B
Vegetal
Cynara cardunculus
Cardoon
FPC
25
26
27
28
I.
Thermobacterium (Lactobacillus):
Bastoncitos alargados, aislados o en cadenas cortas.
Termfilos (temperatura ptima entre 40 y 50 C).
Acidificantes muy energticos, hasta el 2,7% de cido inactivo o
levgiro.
Actividad caseoltica notable.
B) Grupo Heterofermentativo:
La produccin de cido es ms dbil; adems del cido lctico se
forman otros cidos, sustancias diversas y gas.
29
IV. Bifidobacterium:
Bastoncitos que se ahorquillan en los cultivos viejos.
Producen cido actico en proporcin elevada y cido lctico
dextrgiro.
Anaerobios abundantes en las heces de los lactantes.
V.
Betabacterium (Lactobacillus):
Formas en bastoncitos, produccin de gas, de cido succnico y otros.
No actan sobre la casena. cido lctico inactivo.
30
31
32
33
34
35
36
37
38
4.2. Muestreo.
Antes de comenzar la parte experimental se efectu un sondeo de la
calidad de la leche que sera utilizada para la elaboracin de los quesos,
as:
Se evaluaron leches fresca enteras sin pasteurizar en una cantidad de
aproximadamente de 5 galones (25 botellas) por ensayo (10) del
rancho Mi Reina, en el kilmetro 38 carretera a Sonsonate.
Se
evaluaron
leches
pasteurizadas
en
una
cantidad
de
se manejaron
a temperaturas de 3 a 5 C.
39
qumicos
Leche fresca
pasteurizada
Olor
Olor a pasto
Sabor
Dulce
Ligeramente azucarada
Color
Ligeramente amarillo
Blanco mate
pH
6.3
Acidez titulables
0.18
0.20
1.030
1.028
40
Materias primas:
Leche fresca de vaca de primera calidad.
Sal refinada.
Medio de bacterias acidfilos.
Azcar.
Saborizantes: loroco, ajo, cebolla y chile
picante.
b) Equipos:
Instrumentos analticos: bureta, pipetas, Beacker, pH-metro (medidor
de pH), titulador, termmetro y otros.
Ollas.
Cucharones y cucharas.
Paletas de madera
Mantas de colar.
Coladores.
Bscula granatara (Terrallon)
41
cido lctico.
Fenolftalena.
NaOH 0.1N
c) Reactivos:
cido lctico.
Fenolftalena.
Hidrxido de sodio 0.1N.
42
pasteurizadas
se
efectuaron
los
controles
fsico-qumicos
43
A*
B*
Leche entera
3750 ml
3750 ml
Carbohidratos
17g
17g
Cultivos naturales
cido lctico
300 ml
12g
300 ml
cido ctrico
Sal
9g
37.5g
37.5g
* A= cido lctico
*B= cido ctrico
4.4.2 Desarrollo de queso con propiedades funcionales.
Debido a la calidad que se ofrecen de leches frescas en el mercado
nacional y a la falta de equipos adecuados de pasteurizacin se tuvo que
trabajar con leches pasteurizadas comerciales.
44
2) Pesado de ingrediente.
Para el pesado de los ingrediente se utiliz una bscula
granataria digital marca Terraillon con capacidad de
5lbs., entre los ingredientes utilizados tenemos: azcar
(17g) y cido lctico (11ml), sal (37.5g) y el cultivo natural
(300ml) en 3750 ml. de leche fresca pasteurizada.
45
consistente
para
realizar
esta
46
forma
47
48
a = b => a b= o => d o
49
50
UFC/gramos,
Coliformes
totales
UFC/gramos,
Escherichia
coli
de queso a
51
52
53
Leche entera
Peso
(ml/g)
3750 ml.
Carbohidratos
INGREDIENTES
Costo $
Total
costo
3.19
3.19
17g
0.33 (1 lb.)
0.013
Cultivos naturales
cido lctico
300ml
12ml
0.45
1.80
0.90
0.22
Sal
37.5 g
0.05
0.004
TOTAL
4.33
54
V. DISCUSIN DE RESULTADOS.
Basndose en la informacin obtenida en el proceso de los anlisis
de degustacin, los resultados se sometieron a evaluaciones estadsticas
mediante la prueba de t con diferencias de medias. Evaluando los quesos
prototipos con cido lctico ms bacterias (A) y queso con cido ctrico
ms bacterias (B). Para ello, fue necesario medir los atributos de cada
queso especficamente: la apariencia, olor, color, sabor, textura,
aceptacin personal. El anlisis sensorial, se realiz con 15 panelistas no
entrenados (focus grup) en una escala hednica del 1 al 9 de calificacin.
Luego para evaluar al queso que fue el preferido por los panelistas
se realiz una prueba estadstica de tringulo con el objetivo de identificar
si los panelistas encontraban diferencias significativas entre un queso con
bacterias y otro sin bacterias, en este caso el queso con preferencias fue el
queso con cido lctico ms bacterias (A).
A continuacin, se describirn en la siguiente tabla los resultados
de prueba de t con diferencias de medias para queso con cido lctico y
cido ctrico, tomando encuenta las tablas de distribucin de t student.
55
(Anexo 3)
Tabla N 8. Medias para queso con cido lctico
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
Total
Medias
Xi2
Textura Olor
Sabor
Color
Apariencia Aceptacin
6
8
8
8
6
7
8
5
8
9
4
4
7
8
7
103
6.9
741
4
9
8
9
6
8
8
7
7
8
6
7
7
8
8
110
7.3
830
5
9
5
9
5
8
8
5
8
9
7
7
8
8
8
109
7.3
825
6
8
4
9
4
7
8
5
7
7
7
7
5
8
8
100
6.7
700
5
7
7
9
6
7
7
5
7
9
6
6
6
7
8
102
6.8
714
6
8
6
8
6
7
8
7
7
8
5
8
8
8
8
108
7.2
792
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
Total
Medias
Xi2
Textura Olor
Sabor
Color
Apariencia Aceptacin
6
7
9
7
7
2
7
5
8
9
8
4
7
8
5
99
6.6
705
8
7
9
8
7
2
5
6
8
9
8
3
7
7
5
99
6.6
713
5
8
8
7
8
7
6
7
8
8
8
7
8
8
5
108
7.2
794
7
6
9
8
7
6
7
7
7
8
7
6
7
8
6
106
7.1
760
6
8
8
7
8
6
6
5
7
7
7
5
5
8
7
100
6.7
684
7
8
9
7
8
2
6
6
8
9
9
4
8
7
7
105
7.0
787
56
TEXTURA
ORIGEN
lctico
ctrico
N
15
15
Media
6.87
6.60
Desviacin
tp.
1.552
1.920
Error tp. de
la media
.401
.496
F
TEXTURA
Se han asumido
varianzas iguales
No se han asumido
varianzas iguales
Sig.
.348
.560
gl
Sig. (bilateral)
Diferencia
de medias
Error tp. de
la diferencia
95% Intervalo de
confianza para la
diferencia
Inferior
Superior
.418
28
.679
.27
.637
-1.039
1.572
.418
26.824
.679
.27
.637
-1.042
1.575
57
i) Decisin Estadstica:
Como el valor P de la prueba (sig. bilateral) de 0.679 > = 0.418,
Siendo = 0.05, por lo tanto como 0 .679 > 0.05, se acepta H 0: La
calidad del queso Tipo A y Tipo B son iguales en cuanto a Textura.
(Decisin basada en la comparacin del Valor p de la prueba (sig.
bilateral)
ORIGEN
lctico
ctrico
OLOR
Desviacin
tp.
1.207
1.113
Media
6.80
6.67
15
15
Error tp. de
la media
.312
.287
F
OLOR
Se han asumido
varianzas iguales
No se han asumido
varianzas iguales
Sig.
.012
.913
gl
Sig. (bilateral)
Diferencia
de medias
Error tp. de
la diferencia
95% Intervalo de
confianza para la
diferencia
Inferior
Superior
.315
28
.755
.13
.424
-.735
1.002
.315
27.816
.755
.13
.424
-.735
1.002
58
tienen
ORIGEN
lctico
ctrico
SABOR
Media
7.33
6.60
15
15
Desviacin
tp.
1.291
2.063
Error tp. de
la media
.333
.533
F
SABOR
Se han asumido
varianzas iguales
No se han asumido
varianzas iguales
2.693
Sig.
.112
gl
Sig. (bilateral)
Diferencia
de medias
Error tp. de
la diferencia
95% Intervalo de
confianza para la
diferencia
Inferior
Superior
1.167
28
.253
.73
.628
-.554
2.021
1.167
23.505
.255
.73
.628
-.565
2.032
59
ORIGEN
lctico
ctrico
COLOR
Desviacin
tp.
1.534
1.082
Media
7.27
7.20
15
15
Error tp. de
la media
.396
.279
F
COLOR
Se han asumido
varianzas iguales
No se han asumido
varianzas iguales
Sig.
2.763
.108
gl
Sig. (bilateral)
Diferencia
de medias
Error tp. de
la diferencia
95% Intervalo de
confianza para la
diferencia
Inferior
Superior
.138
28
.892
.07
.485
-.926
1.060
.138
25.173
.892
.07
.485
-.931
1.065
tienen
APARIENC
ORIGEN
lctico
ctrico
N
15
15
Media
6.67
7.07
Desviacin
tp.
1.543
.884
Error tp. de
la media
.398
.228
60
v) Decisin Estadstica:
Prueba de muestras independientes
Prueba de Levene
para la igualdad de
varianzas
F
APARIENC
Se han asumido
varianzas iguales
No se han asumido
varianzas iguales
Sig.
5.245
.030
gl
Diferencia
de medias
Sig. (bilateral)
Error tp. de
la diferencia
95% Intervalo de
confianza para la
diferencia
Inferior
Superior
-.871
28
.391
-.40
.459
-1.340
.540
-.871
22.292
.393
-.40
.459
-1.351
.551
ACEPTAC
ORIGEN
lctico
ctrico
N
15
15
Media
7.20
7.00
Desviacin
tp.
1.014
1.927
Error tp. de
la media
.262
.498
F
ACEPTAC
Se han asumido
varianzas iguales
No se han asumido
varianzas iguales
1.679
Sig.
.206
gl
Sig. (bilateral)
Diferencia
de medias
Error tp. de
la diferencia
95% Intervalo de
confianza para la
diferencia
Inferior
Superior
.356
28
.725
.20
.562
-.952
1.352
.356
21.202
.726
.20
.562
-.969
1.369
61
tienen
PROMEDIO
TIPOS
lctico
ctrico
Desviacin
tp.
.26583
.26583
Media
7.0333
6.8667
6
6
Error tp. de
la media
.10853
.10853
F
PROMEDIO
Se han asumido
varianzas iguales
No se han asumido
varianzas iguales
Sig.
.000
1.000
gl
Sig. (bilateral)
Diferencia
de medias
Error tp. de
la diferencia
95% Intervalo de
confianza para la
diferencia
Inferior
Superior
1.086
10
.303
.1667
.15348
-.17530
.50864
1.086
10.000
.303
.1667
.15348
-.17530
.50864
62
Valor P
Textura
Olor
Sabor
Color
Apariencia
Aceptacin
Promedios
Diferencia
Significativa
No
No
No
No
No
No
No
63
requiere que los panelistas presten atencin a una sola causa de variable,
en la observacin perceptible.
A continuacin, se describe en la siguiente tabla el nmero de
aciertos y no aciertos que hay en la prueba, cuyos resultados se sometieron
a la evaluacin estadstica de Chi-cuadrada, con el objetivo de hacer la
comparacin de la hiptesis planteada.
Tabla N 11. Tabulacin de resultados de la prueba de tringulo.
Prueba
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
Sumatoria 24
Acertado
1
1
1
1
1
1
1
0
0
1
1
0
1
0
1
1
0
1
1
1
0
1
1
1
Sumatoria
18
No Acertado
0
0
0
0
0
0
0
1
1
0
0
1
0
1
0
0
1
0
0
0
1
0
0
0
Sumatoria
6
64
65
= 10.4
24 x 0.33 x 0.67
Nivel de Significanca
Estadstico
5%
X una cola
13
Comparando los resultados del clculo de Chi- cuadrada ajustada
con la Tabla de x2 calculada es menor el valor de la probabilidad del
5%, por lo cual se puede decir que los jueces no detectaron de manera
significativa la diferencia existente entre las muestras. La hiptesis Nula
(Ho) se acepta y se rechaza la Hiptesis Alternativa (Ha).
La siguiente formula permite calcular la probabilidad exacta en la
curva estadstica:
(X1 0.5) np
Z=
(np(1-p)1/2
(24-0.5) (24 x .033)
Z=
(24 x 0.33 x 0.67)1/2
(23.5) (7.92)
Z=
(5.3064)
186.12
Z=
=
2.303
Z = 80.82
66
25
21
17
N DE PERSONAS
13
DE LA PRUEBA
9
5
1
QUESO
18
ACIERTO
6
ACIERTO
NO ACIERTO
18
NO ACIERTO
67
Porcentaje de los
quesos
20
14.24
16.37
17.36
16.08
15.34
18.63
15
14.11
14.36
10
5
0
dia 0
dia 5
dia 10
dia 15
Dias de Elaboracion de los
Que sos
68
Porcentaje de los
Quesos
25
20
15
19.46
18.07
18
16
18
16
18
16
10
5
0
dia 0
dia 5
dia 10
dia 15
69
Del grfico anterior del anlisis de grasa, puede observarse que los
porcentajes de los quesos solo existieron diferencias al cero da de anlisis.
Ntese en el queso con bacterias tiene un porcentaje inicial de 19.46
por ciento, comparado con el queso sin bacterias con 18.07 por ciento,
siendo de menor porcentaje. Obsrvese el comportamiento del 5 o al 15o en
el queso con bacterias no hubo ningn cambio significativo en su
porcentaje mantenindose en un 18 por ciento, esto pudo deberse a que las
grasas durante la maduracin se hidrolizan en gran parte, de igual manera
sucedi con el queso sin bacterias que mantuvo un 16 por ciento, del 5 o al
15o da. Debido a la cantidad de grasa presente el queso elaborado,
concuerda con lo recomendado por la Norma Salvadorea NSO
67.01.04:05 (Anexo 6) descrita en la Tabla N1. (Caractersticas fsicoqumicas) la cual menciona que un queso fresco debe contener de 20 a 30%
de grasa en masa de base hmeda. Por otra parte, Moreno (1991) en su
obra: Leches y sus Derivados, hacen mencin que el queso segn su
contenido en grasa se puede clasificar como cuarto graso aquellos que
contienen de 10 a 25%, por lo que podemos considerar el queso elaborado
con bacterias como un queso bajo en grasa, semiligth.
Grfico N 5. Grfico de humedad.
Grafico de Humedad
Porcentaje de los
Quesos
70
60
51.88
59.64
56.19
52.44
51.87
47.41
50
40
48.76
47.14
30
20
10
0
dia 0
dia 5
dia 10
dia 15
Dias de Elaboracion de los
Que sos
70
71
Indice de pH
5.18
5
4
5.09
5.61
6.26
5.25
5.2
5.32
4.97
Queso con Bacterias
2
1
0
dia 0
dia 5
dia 10
dia 15
72
Porcentaje de los
Quesos
0.2
0.18
0.15
0.16
0.15
0.16
0.16
0.15
0.1
0.14
0.05
0
dia 0
dia 5
dia 10
dia 15
Dias de e laboracion de los
Que sos
73
74
Porcentaje de los
Quesos
60
48.3
48.13
41.3
43.81
50
40
52.59
52.86
47.52
40.36
30
Queso sin Bacterias
20
10
0
dia 0
dia 5
dia 10
dia 15
Dias de Elaboracion de los
Que sos
75
76
Cantidad en mg de
Calcio en los quesos
Grafico de Calcio
1000
812
799
797
800
892
400
795
600
510
446
200
0
dia 0
dia 5
dia 10
dia 15
77
78
Cantidad en mg de
Fosforo en los quesos
300
265
240
270
250
250
230
200
150
165
Queso con
Bacterias
170
100
150
50
0
Dias de Elaboracion de los
Que sos
79
Porcentaje de los
quesos
6
5.15
5
4.00
3
2
2.21
0.76
1
0
2.63
0.74
dia 0
1.28
dia 5
1.15
dia 10
dia 15
80
81
comercial
con
bacterias
acidfilas
especficamente
con
82
- Con bacteria
- Sin bacteria
0 da
(-)
(-)
0.3x102
1.4xl02
(-)
(-)
(-)
(-)
CUMPLE
CON NORMA
- Con bacteria
- Sin bacterias
5 das
(-)
(-)
0.2xl022
1.3xl0
(-)
(-)
(-)
(-)
CUMPLE
CON NORMA
- Con bacterias
-Sin bacterias
10 das
(-)
(-)
0.2X1022
1.2x10
(-)
(-)
(-)
(-)
CUMPLE
CON NORMA
- Con bacterias
- Sin bacterias
15 das
(-)
(-)
0.1x1022
1.0x10
(-)
(-)
(-)
(-)
CUMPLE
CON NORMA
- Yogurt Natural 1 a 15
(-)
(-)
(-)
CUMPLE
CON NORMA
das
(-)
Salmonella
sp.
25 gramos
Observaciones
83
acuerdo a los resultados de los anlisis se puede observar que las muestras
cumplen con las especificaciones de la Norma Salvadorea en ambos
quesos y el yogurt, ya que las cantidades de microorganismo estn dentro
de los lmites permitidos. Una observacin se hace cuando los quesos son
analizados desde el 0 da es la cantidad de Coniformes Totales tienen una
carga inicial mayor que el resto de los das de los anlisis, esto no se
considera nocivo para la salud ya que la norma dice que puede permitirse
hasta 500 UFC/gramos.
A continuacin se puede observar ms claro de forma graficada la
tendencia de disminucin mediante los das pasan.
Grfico N 12. Recuento de Coliformes totales en quesos con y sin
bacterias.
Recuento de Coliformes totales con o sin bacterias acidfilas
UFC/g
1,60E+02
1,40E+02
1,20E+02
1,00E+02
8,00E+01
6,00E+01
con bacterias
sin bacterias
4,00E+01
2,00E+01
0,00E+00
0
10
15
20
Tiempo (das)
84
1 a 5 das.
5 a 10 das
10 a 15 das
1 a 15 das
CATALASA
OXIDASA
NEGATIVAS
NEGATIVAS
NEGATIVAS
NEGATIVAS
MICROORGANISMO
AISLADO
UFC x
gramo
Streptococus thermophilus
Streptococus thermophilus
Streptococus thermophilus
Streptococus thermophilus
1.0 X 102
5.2 X 102
10.5X102
15.7X102
85
menor. Algunos autores (Japika E., Pablo Gmez, 2004) mencionan que el
cido lctico juega un papel importante en el metabolismo humano, siendo
la principal fuente de energa muscular y otras actividades beneficiosas y
que el cuerpo metaboliza nicamente el ismero que el mismo puede
sintetizar, o sea el cido lctico L(+) al que se le denomina cido lctico
fisiolgico. La gran capacidad de asimilacin de este ismero hace que se
pueda ingerir en los alimentos sin ningn tipo de restricciones.
Por consiguiente, el tipo de cido lctico producido en la
fermentacin de los derivados lcteos depende de las bacterias utilizadas,
si tomamos en cuenta que en esta investigacin se utilizaron bacterias
naturales del yogurt y se encuentra que el aumento en el queso inoculado
con estas bacterias tienen y mantienen latentes las bacterias Streptococus
thermophilus que tienen importancia funcional ya que esta especies se dice
que son las nicas que son capaces de sintetizar el ismero L(+) en un
100% y que se le atribuyen las propiedades de disminuir el crecimiento de
tumores malignos (Japika E., Pablo Gmez, 2004).
Por tal beneficio que aportan dichas bacterias encontradas en el
queso elaborado en esta investigacin se cumple con los objetivos
propuesto al ofrecer un alimento nutritivo y funcional.
86
por
de
87
88
89
90
se
con
respaldados
por
Normas
Nacionales
91
Pablo;
(2005)
Conservadores
Naturales
de
los
92
-------------------;
(2005),Bacterias
Lcticas
Productoras
de
J.;
Seleccin
(2005),
de
Bacterias
Lcticas
es
muy
Rica
en
Bfidobacterias,
disponible
[online]http://www.consumaseguridad.com/web/.es/investigacion/2006.
Santos M.;
A.;
(1999),
Microbiologa
de
la
Fermentacin
S. A.
93
Consultas en Internet
GLOSARIO
ANEXO N1
Diagrama operativo de la elaboracin de queso de pasta fresca y
blanda.
Obtencin y recepcin de la leche en la granja ensayo 1 y
comercial. ensayo 2.
Inspeccin: anlisis fsicos, ensayo 1 y2.
Operacin.
Anlisis e Inspeccin.
Demora y Operacin.
Transporte.
Moldeado y almacenado.
Ensayo 1 y 2.
Anlisis: fsico, qumico y microbiolgico. Ensayo 1 y 2.
Anexo N 2
PRUEBAS SENSORIALES
Prueba Hednica para evaluar la aceptabilidad.
Nombre:_____________________________________________
Fecha:___________________________
Instrucciones:
Observe y pruebe cada muestra. Indique el grado en que le gusta o le
desagrada cada muestra, haga una marca circular en un nmero
correspondiente a la descripcin que usted considere apropiada de
acuerdo su criterio de aceptacin. Anote tambin el cdigo de la muestra.
Recuerde que tiene que ser 100% imparcial en
sus apreciaciones.
RECUERDE AGUA ENTRE MUESTRAS.
Apariencia
Cdigo
1Cdigo
ESCALA
\ESCALA
l. Me Disgusta
\Muchsimo.
2.Me disgusta
mucho.
3.Me disgusta
moderadamente.
4. Me disgusta
poco.
5.No me gusta
ni disgusta.
6.Me gusta poco
7.Me gusta
moderadamente
8.Me gusta
mucho.
9.Me gusta
muchsimo
Comntanos:
_
Olor
Cdigo
ESCALA
l. Me Disgusta
Muchsimo.
2.Me disgusta
mucho.
3.Me disgusta
moderadamente.
4. Me disgusta
poco.
5.No me gusta
ni disgusta.
6.Me gusta poco
7.Me gusta
moderadamente
8.Me gusta
mucho.
9.Me gusta
muchsimo
Comntanos:
Color
Sabor
Cdigo
Cdigo
ESCAL4
ESCALA
ESCALA
l. Me Disgusta l. Me Disgusta
Muchsimo.
Muchsimo.
2.Me disgusta 2.Me disgusta
mucho.
mucho.
3.Me disgusta 3.Me disgusta
moderadamente. moderadamente.
4. Me disgusta
4. Me disgusta
poco.
poco.
5.No me gusta 5.No me gusta
ni disgusta.
ni disgusta.
6.Me gusta poco 6.Me gusta poco
7.Me gusta
7.Me gusta
moderadamente moderadamente
8.Me gusta
8.Me gusta
mucho.
mucho.
9.Me gusta
9.Me gusta
muchsimo
muchsimo
Textura
Cdigo
ESCALA
Aceptacin
Cdigo.
ESCALA
l. Me Disgusta
Muchsimo.
2.Me disgusta
mucho.
3.Me disgusta
moderadamente.
4. Me disgusta
poco.
5.No me gusta
ni disgusta.
6.Me gusta poco
7.Me gusta
moderadamente
8.Me gusta
mucho.
9.Me gusta
muchsimo
l. Me Disgusta
Muchsimo.
2.Me disgusta
mucho.
3.Me disgusta
moderadamente.
4. Me disgusta
poco.
5.No me gusta
ni disgusta.
6.Me gusta poco
7.Me gusta
moderadamente
8.Me gusta
mucho.
9.Me gusta
muchsimo
Comntanos:
Comntanos:
Comntanos:
Comntanos:
1
r
0.75
0.80
0.85
0.90
0.95
0.975
0.99
0.995
1
2
3
4
5
1.000
0.816
0.765
0.741
0.727
1.376
1.061
0.978
0.941
0.920
1.963
1.386
1.250
1.190
1.156
3.078
1.886
1.638
1.533
1.476
6.314
2.920
2.353
2.132
2.015
12.706
4.303
3.182
2.776
2.571
31.821
6.965
4.541
3.747
3.365
63.657
9.925
5.841
4.604
4.032
6
7
8
9
10
0.718
0.711
0.706
0.703
0.700
0.906
0.896
0.889
0.883
0.879
1.134
1.119
1.108
1.100
1.093
1.440
1.415
1.397
1.383
1.372
1.943
1.895
1.860
1.833
1.812
2.447
2.365
2.306
2.262
2.228
3.143
2.998
2.896
2.821
2.764
3.707
3.499
3.355
3.250
3.169
11
12
13
14
15
0.697
0.695
0.694
0.692
0.691
0.876
0.873
0.870
0.868
0.866
1.088
1.083
1.079
1.076
1.074
1.363
1.356
1.350
1.345
1.341
1.796
1.782
1.771
1.761
1.753
2.201
2.179
2.160
2.145
2.131
2.718
2.681
2.650
2.624
2.602
3.106
3.055
3.012
2.977
2.947
16
17
18
19
20
0.690
0.689
0.688
0.688
0.687
0.865
0.863
0.862
0.861
0.860
1.071
1.069
1.067
1.066
1.064
1.337
1.333
1.330
1.328
1.325
1.746
1.740
1.734
1.729
1.725
2.120
2.110
2.101
2.093
2.086
2.583
2.567
2.552
2.539
2.528
2.921
2.898
2.878
2.861
2.845
21
22
23
24
25
0.686
0.686
0.685
0.685
0.684
0.859
0.858
0.858
0.857
0.856
1.063
1.061
1.060
1.059
1.058
1.323
1.321
1.319
1.318
1.316
1.721
1.717
1.714
1.711
1.708
2.080
2.074
2.069
2.064
2.060
2.518
2.508
2.500
2.492
2.485
2.831
2.819
2.807
2.797
2.787
26
27
28
29
30
0.684
0.684
0.683
0.683
0.683
0.856
0.855
0.855
0.854
0.854
1.058
1.057
1.056
1.055
1.055
1.315
1.314
1.313
1.311
1.310
1.706
1.703
1.701
1.699
1.697
2.056
2.052
2.048
2.045
2.042
2.479
2.473
2.467
2.462
2.457
2.779
2.771
2.763
2.756
2.750
40
60
120
0.681
0.679
0.677
0.674
0.851
0.848
0.845
0.842
1.050
1.046
1.041
1.036
1.303
1.296
1.289
1.282
1.684
1.671
1.658
1.645
2.021
2.000
1.980
1.960
2.423
2.390
2.358
2.326
2.704
2.660
2.617
2.576
Anexo N 4
Tabla 1. Nmeros mnimos de respuestas correctas para establecer una diferencia en
varios niveles significativos para la prueba triangular.
Nmero
de respuestas
Mnimo nmero de
respuestas
correctas para un
nivel de
significancia
5%
1%
0.1%
Nmero
de respuestas
Mnimo nmero de
respuestas
correctas para un
nivel de
significancia
5%
1%
0.1%
Mnimo nmero
Nmer
de respuestas
o de
correctas para un
resnivel de
puesta
significancia
s
5%
1%
0.1%
5
6
7
8
4
5
5
6
5
6
6
7
7
8
37
38
39
40
18
19
19
19
20
21
21
21
22
23
23
24
69
70
71
72
31
31
31
32
33
34
34
34
36
37
37
38
9
10
11
12
6
7
7
8
7
8
8
9
8
9
10
10
41
42
43
44
20
20
20
21
22
22
23
23
24
25
25
26
73
74
75
76
32
32
33
33
35
35
36
36
39
39
39
39
13
14
15
16
8
9
9
9
9
10
10
11
11
11
12
12
45
46
47
48
21
22
22
22
24
24
24
25
26
27
27
27
77
78
79
80
34
34
34
35
36
37
37
38
40
40
41
41
17
18
19
20
10
10
11
11
11
12
12
13
13
13
14
14
49
50
51
52
23
23
24
24
25
26
26
26
28
28
29
29
81
82
83
84
35
35
36
36
38
38
39
39
40
42
42
43
21
22
23
24
12
12
12
13
13
14
14
15
15
15
16
16
53
54
55
56
24
25
25
26
27
27
28
28
30
30
30
31
85
86
87
88
37
37
37
38
40
40
40
41
43
44
44
44
25
26
27
28
13
14
14
15
15
15
16
16
17
17
18
18
57
58
59
60
26
26
27
27
28
29
29
30
31
32
32
33
89
90
91
92
38
38
39
39
41
42
42
42
45
45
46
46
29
30
31
32
15
15
16
16
17
17
18
18
19
19
20
20
61
62
63
64
27
28
28
29
30
30
31
31
33
33
34
34
93
94
95
96
40
40
40
41
43
43
44
44
46
47
47
48
33
34
35
36
17
17
17
18
18
19
19
20
21
21
22
22
65
66
67
68
29
29
30
30
32
32
33
33
35
35
36
36
97
98
99
100
41
41
42
42
44
45
45
46
48
48
49
49
Anexo N 5
UNIVERSIDAD DE EL SALVADOR
FACULTAD DE CIENCIAS AGRONMICAS
DEPARTAMENTO DE QUMICA AGRCOLA
Telfonos: 2225-1500 2225-6903 Extensin 4619
Apartados Postales 773 y 747
San Salvador, El Salvador, C. A.
Presencia de Bacteria
y das
Protena
(%)
Grasa
(9/%)
Humedad (%)
pH
Acidez
Titulable (%)
Ceniza (%)
Calcio
(mg/100g)
Fsforo
(g/100 g)
0.15
Slidos
Totales
(ppm)
41.30
94
14.11
19.46
48.76
5.09
0.76
510
165
95
16.37
18.00
56.19
5.61
0.16
43.81
1.28
494
170
96
17.36
18.00
47.41
6.26
0.14
52.59
5.15
795
230
97
18.63
18.00
47.14
5.25
0.16
52.86
2.21
892
250
98
14.24
18.07
51.88
5.18
0.15
48.30
0.74
812
265
99
16.08
16.00
51.87
5.20
0.16
48.13
4.00
799
240
100
15.34
16.00
52.44
5.32
0.18
47.52
2.63
797
270
101
14.36
16.00
59.64
4.97
0.11
40.36
1.15
446
150
A
Anexo N 7
REPORTE DE ANLISIS MICROBIOLOGA.
MUESTRAS: ...................................... Queso de fechas establecidas:
Das: 1 a 5 das.
5 a 10 das.
10 a 15 das.
FECHA DE RECIBIDO:...26 de Octubre 2007.
FECHA DE ANLISIS: ...................... 26 de Octubre 2007.
FECHA DE RESULTADOS:.....01 de Octubre 2007
SOLICITANTE: .................................. BR ALEJANDRO ANTONIO BONILLA LEMUS.
PUNTO DE TESIS:............................. "Utilizacin de bacterias Acidfilas para elaborar quesos de
pastas frescas y blandas con caractersticas funcionales"
FACULTAD:............................................... .ING. AGROINDUSTRIAL.
UNIVERSIDAD:......................................... Dr. Jos Matas Delgado.
CARACTERSTICAS ORGANOLPTICAS.
SABOR: Normal.
TEXTURA: Propia.
OLOR: Normal.
APARIENCIA: Propia.
ESTUDIO BACTERIOLGICO:
Staphylococus
aureus
MUESTRAS Tiempo
Coliformes
Totales.
UFC/gramos UFC/gramos
Muestra de queso
- Con bacteria
- Sin bacteria
Acidla
Muestra de queso
- Con bacteria
- Sin bacterias
Acidfia
Muestra de queso
- Con bacterias
- Sin bacterias
Acidfila
Muestra de queso
- Con bacterias
- Sin bacterias
Acidfila
l da
(-)
(-)
0.3x10 2
1.4xl02
(-)
(-)
(-)
(-)
CUMPLE
CON NORMA
5 das
(-)
(-)
0.2xl022
1.3xl0
(-)
(-)
(-)
(-)
CUMPLE
CON NORMA
10 das
(-)
(-)
0.2X1022
1.2x10
(-)
(-)
(-)
(-)
CUMPLE
CON NORMA
15 das
(-)
(-)
0.1x1022
1.0x10
(-)
(-)
(-)
(-)
CUMPLE
CON NORMA
Muestra de Yogurt 1 a 15
Con bacterias
das
(-)
(-)
(-)
(-)
CUMPLE
CON NORMA
Anexo N 8
Caractersticas Microbiolgicas
Conforme a la NORMA Salvadorea (NOS): 67-01-04:05
c(2) nmero de
n(l) nmero de
muestra que se
m(3) recuento
mximo
Microorganismos maestras que deben permiten en recuento
mayor que m, pero no
recomendado.
analizarse
mayor que M.
Staphylococus
aureus UFC/gramos.
Coliformes Totales
UFC/gramos
Escherichia coli
FC/gramo
Salmonella sp.
en 25 gramos
M(4) recuento
mximo permitido.
102
103
200
500
1 a 5 das.
5 a 10 das
10 a 15 das
1 a 15 das
NEGATIVAS
NEGATIVAS
NEGATIVAS
NEGATIVAS
MICROORGANISMO
UFC x gramo
AISLADO
Streptococos thermophillus
Streptococos thermophillus
Streptococos thermophillus
Streptococos thermophillus
1.0 X 102
5.2 X 102
10.5X102
15.7X102