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Avaliao da qualidade microbiolgica de cpsulas e chs de plantas utilizadas na


assistncia ao tratamento da obesidade
VERDI, Susana 1; YOUNES, Salua2; BERTOL, Charise D. *,1
Controle de Qualidade, Curso de Farmcia, Universidade de Passo Fundo, Passo Fundo/RS, Brasil, CEP:
99001-970; 2 Laboratrio de Anlises Clnicas, Curso de Farmcia, Universidade de Passo Fundo, Passo
Fundo/RS, Brasil, CEP: 99001-970; * Autor correspondente: Charise D. Bertol. Endereo: Universidade de
Passo Fundo, Curso de Farmcia, Campus I, Caixa Postal 611, Km 171, BR 285, CEP 99001-970, Bairro So
Jos, Passo Fundo/ RS. Fone/Fax: (54) 3316-8499. E-mail: charise@upf.br

RESUMO: O uso de plantas diurticas e laxativas uma alternativa medicamentosa para


muitas pessoas que objetivam o emagrecimento com menores efeitos adversos. A avaliao
microbiolgica um requisito essencial para a garantia de qualidade dos produtos. A finalidade
deste trabalho foi avaliar a qualidade microbiolgica de cpsulas e chs de alcachofra (Cynara
scolymus L.), centella asitica (Hydrocotile asiatica L.), fucus (Fucus vesiculosus L.), e sene
(Cassia acutifolia Delile), atravs da contagem de micro-organismos viveis totais e pesquisa
de patgenos. Na contagem de micro-organismos viveis, os chs analisados foram aprovados,
pois apesar de apresentarem uma carga microbiana elevada, esta se encontrava dentro das
especificaes, entretanto, 16,66% e 66,66% das cpsulas analisadas foram reprovadas por
apresentaram quantidades superiores de bactrias e fungos, respectivamente. Na pesquisa
de patgenos, 76% das amostras (88% dos chs e 58% das cpsulas) apresentaram um ou
mais de um tipo de micro-organismo. Salmonella sp. esteve presente em 33% das amostras
evidenciando a qualidade microbiolgica insatisfatria dos produtos encontrados no mercado.
Estes resultados demonstram a necessidade da realizao do controle de qualidade tanto das
matrias-primas vegetais, quanto dos produtos acabados, atravs do controle e fiscalizao
rigorosa, com adoo de medidas regulamentadoras e educativas.
Palavras-chave: Alcachofra, Centella, Controle Microbiolgico, Fucus, Sene.
ABSTRACT: Microbiological quality evaluation of herbal capsules and teas to assist the
treatment of obesity. The use of laxative and diuretic herbal drugs is an alternative therapy for
many people looking for loosing weight with fewer side effects. The microbiological evaluation
is an essential requirement for the quality assurance of products. This study aimed to evaluate
the microbial quality of artichoke (Cynara scolymus L.), centella (Hydrocotile asiatica L.), fucus
(Fucus vesiculosus L.), and Senna (Cassia acutifolia Delile) capsules and teas, by counting
the total viable aerobic microorganisms and through tests for specified microorganisms. On the
total viable aerobic microorganisms count, the teas analyzed were approved, because although
they had a high microbial load, this was in accordance with the specifications, however 16.66%
and 66.66% of the capsules analyzed were rejected because they presented higher amounts
of bacteria and fungi, respectively. In relation to the tests for specified microorganisms, 76% of
the samples (88% of the teas and 58% of the capsules) presented one or more than one type of
microorganisms. Salmonella sp. was present in 33% of the samples, showing the unsatisfactory
microbial quality of the products in the market. These results demonstrate the necessity of
performing quality control both on herbal raw material and finished products, through a rigorous
control and inspection, adopting regulatory and educational measures.
Key words: Artichoke, Centella, Microbial Control, Fucus, Senna.

Recebido para publicao em 27/04/2012


Aceito para publicao em 30/01/2013

Rev. Bras. Pl. Med., Campinas, v.15, n.4, p.494-502, 2013.

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INTRODUO
A obesidade uma doena caracterizada
pelo acmulo excessivo de gordura corporal
e se constitui um problema de Sade Pblica,
atingindo todas as faixas etrias e nveis sociais,
estando relacionada a m alimentao, falta
de atividade fsica, urbanizao, desequilbrio
hormonal e emocional, entre outros (Abeso, 2011).
Os medicamentos sintticos para o tratamento
da obesidade atuam no sistema nervoso central
e podem ocasionar diversos efeitos colaterais
(insnia, cefalia, irritabilidade, depresso, etc.) e,
ainda necessitam de prescrio mdica especial
e acompanhamento teraputico inviabilizando
o tratamento de pessoas carentes. Atualmente,
desde o dia 4 de outubro de 2011, muito desses
medicamentos sintticos derivados anfetamnicos
- foram proibidos pela Agncia Nacional de Vigilncia
Sanitria (ANVISA) devido a seus efeitos colaterais
e ao uso abusivo (Brasil, 2011).
O uso de medicamentos e chs de origem
vegetal uma alternativa medicamentosa para
muitas pessoas que objetivam o emagrecimento
com menores efeitos adversos e economicamente
viveis (Zaroni et al., 2004). Estima-se que as
vendas globais de produtos base de plantas
totalizaram cerca de 60 milhes de dlares em 2000.
Como consequncia a segurana e a qualidade dos
medicamentos tornam-se preocupaes cada vez
mais importantes para as autoridades de sade
pblica (WHO, 2003).
Muitas plantas so utilizadas com finalidade
de emagrecimento. Dentre essas plantas encontrase a alcachofra (Cynara scolymus L.) com ao
hepatoestimulante, colertica, hipocolesterolmica,
diurtica e colagoga; a centella asitica (Hydrocotile
asiatica L.) que tem ao diurtica; o fucus (Fucus
vesiculosus L.) que apresenta ao diurtica,
estimulante da tireide e promove um aumento do
trnsito intestinal; e o sene (Cassia acutifolia Delile)
que laxativo (Teske & Trentini, 2003; DIppolito et
al., 2005).
No Brasil, o principal rgo responsvel
pela regulamentao de plantas medicinais e
seus derivados a ANVISA que visa garantir a
segurana da sade da populao (Carvalho et
al., 2008; Brasil, 2010a). Apesar dos esforos, a
prtica da fitoterapia segura encontra diversas
dificuldades, que vo, desde a identificao correta
do material botnico inexistncia de estudos
de segurana, eficcia e qualidade (Carvalho et
al., 2008; Rocha et al., 2009). Alm disso, muitos
produtores desconhecem os cuidados que se deve
ter nas diversas etapas para a obteno de matriasprimas e produtos com adequada qualidade (Zaroni
et al., 2004). Os problemas mais frequentes esto
relacionados origem da matria-prima e s

condies inadequadas de armazenamento durante


a comercializao e a manipulao (exposio
poeira, calor, umidade, insetos e micro-organismos).
O controle de qualidade microbiolgico
realizado para assegurar que a carga microbiana
presente, no comprometa a qualidade final ou
segurana do paciente (Pinto et al., 2003; Rocha
et al., 2009). A contaminao por bactrias e
fungos pode levar a degradao ou alterao das
substncias ativas e ocasionar a produo de
substncias txicas (Luiza et al., 1999), alm de
representar risco potencial de aquisio de quadro
clnico infeccioso.
Muitos estudos demonstram elevados
ndices de contaminao microbiana em materiais
vegetais, alm de presena de patgenos (Limyati
& Juniar, 1998; Arajo & Ohara, 2000; Martins et al.,
2001; Zaroni et al., 2004; Bianco et al., 2008; Mller
& Basedow, 2007).
Neste contexto, foram selecionadas para
avaliao da qualidade microbiolgica amostras de
plantas comercializadas em sacos plsticos (chs) e
em cpsulas de alcachofra, centella asitica, fucus e
sene, disponveis comercialmente devido ao elevado
consumo no tratamento auxiliar da obesidade. As
amostras foram submetidas contagem de microorganismos viveis totais (bactrias e fungos) e
pesquisa de patgenos.
MATERIAL E MTODO
Material vegetal
As amostras utilizadas foram cpsulas
e chs de alcachofra (Cynara scolymus L.),
centella asitica (Hydrocotile asiatica L.), fucus
(Fucus vesiculosus L.) e sene (Cassia acutifolia
Delile) adquiridas comercialmente, totalizando 21
amostras (9 amostras de chs e 12 de cpsulas).
Os fornecedores (fabricantes/ farmcias de
manipulao) foram designados genericamente
pelas letras A (Passo Fundo/ RS), B (Passo
Fundo/ RS), C (Valinhos/ SP), D (Chapec/ SC)
e E (Colombo/ PR). Nas cpsulas as plantas
encontravam-se na forma pulverizada e nos chs
na forma de folhas, caules, ou partes da planta seca
embalados em sacos plsticos.
Contagem de micro-organismos viveis
totais
Foram pesadas 10 g de cada amostra
diludas em peptona bacteriolgica contendo 1% de
polissorbato 80. As anlises foram realizadas pela
tcnica de semeadura em profundidade (Pour Plate)
em duplicata nas seguintes diluies 1:20, 1:200 e
1:2000, onde foi adicionado 1 mL de cada diluio

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em placas de petry estreis e posteriormente o


gar soja-casena ou gar batata liquefeito para
contagem, respectivamente, de bactrias e fungos.
As placas foram incubadas a 35C por 5 dias para
pesquisa de bactrias e a 25C por 7 dias para
pesquisa de fungos. Os meios de cultura utilizados
foram preparados conforme especificao do
fabricante e autoclavados a 121 C por 20 minutos.
As anlises foram realizadas em capela de fluxo
laminar (modelo VLPS18CL2A, Veco, Campinas/
SP), acompanhadas de controle ambiental e
controles dos meios de cultura (Brasil, 2010b). Aps
o perodo de incubao as colnias foram contadas,
multiplicadas pelo fator de diluio, e o nmero de
unidades formadoras de colnias (UFC) por grama
de material vegetal foi calculado.
Pesquisa de Patgenos
Foram pesadas 1 g de cada amostra,
adicionou-se 30 mL de caldo de enriquecimento
estril (contendo caldo de casena de soja, peptona
de carne, extrato de levedura, 1% de polissorbato
80) e incubou-se a 35 C por 48 h. Estrias do caldo
contendo a amostra enriquecida foram semeadas,
com auxlio de ala de platina, na superfcie dos
meios de cultura seletivos (Brasil, 2010b).
Na presena de crescimento de colnias
suspeitas foram realizados testes confirmatrios.
Foram utilizados o gar verde brilhante e o
gar Mac Conkey para pesquisa de Salmonella
sp e Escherichia coli respectivamente e, para
confirmao foram realizados repiques das colnias
em gar TSI (triple sugar iron), lisina, SIM (sulfeto,
indol, motilidade), citrato e uria. Na pesquisa de
Staphylococcus aureus, as colnias crescidas
no gar Vogel-Jhonson, foram submetidas ao
teste da catalase, onde se pingou uma gota de
perxido de hidrognio sobre as colnias. O gnero
estafilococos confirmado se h formao de
bolhas, considerando catalase-positivo. O teste de
coagulase foi realizado para confirmao da espcie
(aureus). Neste teste da coagulase, a colnia foi
inoculada em um tubo de ensaio contendo 500 L
de plasma (utilizando citrato como anticoagulante) e
incubou-se a 37 C por 24 h. A formao de cogulos
(gel) aps a incubao interpretada como uma
prova positiva. Para confirmao de Pseudomonas
aeruginosa, as colnias crescidas no gar cetrimida
foram submetidas ao teste das tiras de oxidase e
foram realizados repiques destas colnias no gar
Mueller Hinton.
RESULTADO
Os resultados obtidos na contagem de
micro-organismos viveis totais encontrados nos
produtos (chs e cpsulas) e seus fornecedores

TABELA 1. Contagem de micro-organismos viveis


totais de chs e cpsulas.
Planta

Produto/

Bactrias

Fungos

medicinal

Fornecedor

(UFC/g)

(UFC/g)

Alcachofra

Ch/ A

1,56 . 104

4,26 . 103

Ch/ C

1,43 . 102

7,33 . 101

Ch/ D

1,33 . 105

1,40 . 103

Cpsula/ A

5,63 . 103

1,02 . 103

Cpsula/ B

2,66 . 10

1,00 . 104

Cpsula/ E

< 10

1,00 . 103

Centella

Ch/ A

1,60 . 104

4,06 . 102

Ch/ C

< 10

< 10

Cpsula/ A

1,40 . 10

1,76 . 102

Cpsula/ B

1,20 . 103

2,63 . 102

Cpsula/ E

6,70 . 102

1,00 . 103

Fucus

Ch/ A

1,66 . 103

1,38 . 103

Cpsula/ A

3,46 . 10

< 10

Cpsula/ B

1,44 . 10

1,00 . 101

Cpsula/ E

< 10

< 10

Sene

Ch/ A

4,30 . 104

6,74 . 103

Ch/ C

7,66 . 10

3,70 . 103

Ch/ D

1,64 . 105

1,40 . 103

Cpsula/ A

6,10 . 103

4.06 . 102

Cpsula/ B

2,13 . 104

1,11 . 104

Cpsula/ E

< 10

1,00 . 103

2
5

esto representados na tabela 1. Na figura 1 est


representado o percentual de reprovao das
cpsulas em relao contagem de bactrias e
fungos viveis. Este percentual de reprovao
foi calculado considerando o nmero total de
amostras de cpsulas analisadas (12 amostras)
e utilizando a especificao da Farmacopeia
Brasileira 5 Ed. (Brasil, 2010b) como referncia.
Na pesquisa de patgenos nos meios
presuntivos seletivos (gar verde brilhante,
gar Mac Conkey, gar Vogel Jhonson, gar
cetrimida), para a alcachofra o ch do fornecedor
A apresentou crescimento em todos os meios,
enquanto o ch do fornecedor C apresentou
crescimento apenas no gar Vogel Jhonson e,
o ch do fornecedor D apenas no gar verde
brilhante. J as cpsulas do fornecedor A
apresentaram crescimento no gar verde brilhante
(dois tipos de colnias com distintos aspectos
macroscpicos) e no gar cetrimida, as cpsulas
do fornecedor B apresentaram crescimento no
gar Vogel Jhonson e as cpsulas do fornecedor
E no apresentaram crescimento nos meios.
Para a centella o ch do fornecedor A apresentou

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30

% Reprovao

25
20
15
10
5
0
Alcachofra

Centella

Fucus
Cpsulas

Sene
Bactrias

Fungos

FIGURA 1. Representao do percentual de reprovao das cpsulas em relao contagem de bactrias e


fungos viveis.
crescimento no gar verde brilhante e o ch do
fornecedor C no gar Vogel Jhonson e, ambas as
cpsulas dos fornecedores A e B apresentaram
crescimento no gar verde brilhante, enquanto
as cpsulas do fornecedor E no apresentaram
crescimento nos meios. Para o fucus, o ch do
fornecedor A apresentou crescimento no gar
verde brilhante (dois tipos de colnias com
distintos aspectos macroscpicos) e no gar
Vogel Jhonson; as cpsulas dos fornecedores
A e B no apresentaram crescimento nos meios
e, as cpsulas do fornecedor E apresentaram
crescimento no gar verde brilhante e no gar
Mac Conkey. Para o sene, o ch do fornecedor
A no demonstrou crescimento nos meios,
enquanto o ch do fornecedor C apresentou
crescimento no gar verde brilhante, no gar Mac
Conkey e no gar Vogel Jhonson; por outro lado,
o ch do fornecedor D apresentou crescimento
no gar verde brilhante (dois tipos de colnias
com distintos aspectos macroscpicos) e, as
cpsulas dos fornecedores A e B apresentaram
crescimento no gar verde brilhante; as cpsulas
do fornecedor B tambm apresentaram crescimento
no gar Mac Conkey e as cpsulas do fornecedor
E no apresentaram crescimento nos meios.
Todos os chs e cpsulas que apresentaram
crescimento foram subsequentemente testados
para as provas confirmatrias e identificao do
micro-organismo, sendo que, para aquelas amostras
que apresentaram mais de um tipo de colnia, os
ensaios de identificao foram realizados para as
duas colnias.
Os resultados das provas confirmatrios e
de identificao dos micro-organismos na pesquisa
de patgenos encontram-se nas tabelas 2 e 3.

DISCUSSO
As especificaes comumente usadas para
materiais de origem vegetal encontram-se resumidos
na tabela 4. Para os chs se aceita um limite maior,
pois antes do uso normalmente adiciona-se gua
fervente. Nos limites microbiolgicos estabelecidos
na 5 Edio da Farmacopeia Brasileira (Brasil,
2010b), os produtos de origem vegetal foram
classificados de acordo com o uso, onde as cpsulas
se inserem na categoria de produtos que sero
administrados via oral (V.O.) e, os chs pertencem
categoria de drogas vegetais que sero submetidas
a processos extrativos a quente. Esta classificao
mais apropriada e rigorosa para os produtos
de origem vegetal. Os chs so drogas vegetais
que passam por processos de coleta e secagem
podendo estar na forma ntegra, rasurada, triturada
ou pulverizada, no sendo, portanto, medicamentos
fitoterpicos. Contudo as cpsulas se enquadram
no conceito de fitoterpicos pois so medicamentos
obtidos de matrias-primas exclusivamente vegetais
e, devem possuir registro de medicamentos quando
fabricados industrialmente, alm de laudo de controle
de qualidade que incluem avaliao microbiolgica
(Brasil, 2010a). Na Resoluo RDC n 12 de 2001,
os chs so classificados como alimentos por no
possurem indicao teraputica e, nesta resoluo
se encontram os limites microbiolgicos para
produtos que sero consumidos aps a adio de
lquido com emprego de calor (mnimo 75C, durante
20 s) (Brasil, 2001). Em relao aos fitoterpicos,
a Coordenao de Fitoterpicos, Dinamizados e
Notificados (COFID) em 2009, publicou os limites
microbiolgicos que podem ser aceitos (Brasil,
2009), sendo estes semelhantes aos estabelecidos
para produtos no estreis em geral na 4 Edio

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TABELA 2. Resultados encontrados na pesquisa de patgenos nas provas confirmatrias.


Planta

Produto/

TSI

Lisina Uria Citrato SIM

medicinal

Fornecedor

Alcachofra Ch/ A

A/VGs -H2S -

Ch/ C

NA

NA

Ch/ D

A/VGs +H2S -

Cps/ AColnia 1 A/VGs +H2S -

Catalase Coagulase

Mueller Oxidase

Hinton

I- M- +

NA NA

NA

NA

NA

I- M+ NA

NA

NA

NA

I+ M+ NA

NA

Cps/ AColnia 2 A/VGs -H2S -

I+ M- NA

NA

NA

NA

Cps/ B

NA

NA

NA NA

NA

NA

NA

Centella

Ch/ A

AGs +H2S -

I- M+ NA

NA

NA

NA

Ch/ C

NA

NA

NA NA

NA

NA

NA

Cps/ A

A/VGs +H2S +

I- M-

NA

NA

NA

NA

Cps/ B

A/VGs +H2S +

I- M-

NA

NA

NA

NA

Fucus

Ch/ AColnia 1

A/VGs -H2S +

I- M - +

NA

NA

Ch/ AColnia 2

A/VGs +H2S -

I- M- NA

NA

NA

NA

Cps/ E

A/VGs +H2S +

I- M- NA

NA

NA

NA

Sene

Ch/ C

A/VGs +H2S -

I+ M- +

NA

NA

Ch/ DColnia 1

A/VGs +H2S -

I- M+ NA

NA

NA

NA

Ch/ DColnia 2

A/VGs +H2S -

I- M+ NA

NA

NA

NA

Cps/ A

A/VGs +H2S -

I- M- NA

NA

NA

NA

Cps/ B

A/VGs +H2S -

I- M-

NA

NA

NA

NA

+: crescimento positivo; -: nenhum crescimento; TSI: meio que apresenta glicose, sucrose e lactose e, as bactrias fermentadoras
destes acares convertem o meio de vermelho para amarelo: A meio ficou amarelo, V meio ficou vermelho; Gs: + formou gs; -
no formou gs; H2S: + formou pontos pretos (sulfeto de hidrognio), - no formou; Lisina: descarboxilao - meio roxo com base
amarela, descarboxilao + meio roxo, desaminao + meio roxo com superfcie vermelha;; Uria: - meio permaneceu laranja, + meio
mudou para rosa; Citrato: - meio permaneceu verde, + meio mudou para azul; SIM (Sulfeto Indol Motilidade): I+ produziu indol (aps
adio de reagente de Kovac), I- no produziu indol, M- no apresentou motilidade, M+ apresentou motilidade; NA: no se aplica.

TABELA 3. Micro-organismos encontrados nos chs e cpsulas.


Planta medicinal

Produto/ Fornecedor

Micro-organismo encontrado

Alcachofra

Ch/ A

Enterobacter sp. e Staphylococcus coagulase negativo

Ch/ C

Staphylococcus coagulase negativo

Ch/ D

Salmonella sp.

Cpsula/ A

Providencia e Klebsiella sp.

Cpsula/ B

Staphylococcus coagulase negativo

Centella

Ch/ A

Klebsiella sp.

Ch/ C

Staphylococcus coagulase negativo

Cpsula/ A

Salmonella sp.

Cpsula/ B

Salmonella sp.

Fucus

Ch/ A

Salmonella sp., Enterobacter sp. e Staphylococcus coagulase negativo

Cpsula/ E

Salmonella sp.

Sene

Ch/ C

Proteus sp.e Staphylococcus coagulase negativo

Ch/ D

Enterobacter sp. e Salmonella sp.

Cpsula/ A

Salmonella sp.

Cpsula/ B

Enterobacter sp.

Rev. Bras. Pl. Med., Campinas, v.15, n.4, p.494-502, 2013.

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TABELA 4. Especificaes comumente usadas como critrio para aprovao ou reprovao de materiais vegetais.
Especificao

Farmacopeia
Brasileira 5 Ed.
(Brasil, 2010b)

Produto
vegetal

Bactrias

Fungos

Micro-organismos especficos

Preparao para uso oral


contendomatria-prima de origem
natural (como as cpsulas)

No mximo 2
x 104 UFC/ g

No mximo 2
x 102 UFC/ g

Escherichia coli: ausncia/g


Staphylococcus aureus: ausncia/g
Salmonella: ausncia/g
Outras enterobactrias: no mximo 2 x 102
UFC/g

Drogas vegetais que sero


submetidas a processos extrativosa
quente (como os chs)

No mximo 2
x 107 UFC/ g

No mximo 2
x 104 UFC/ g

Escherichia coli: no mximo 2 x 102 UFC/g


Salmonella: ausncia/10g
Outras enterobactrias: no mximo 2 x 104
UFC/g

Coordenao de
Fitoterpicos,
Dinamizados
e Notificados
(COFID) (Brasil,
2009)

Fitoterpicos (como as cpsulas)

No mximo 5
x 103 UFC/ g

No mximo 5
x 102 UFC/ g

No descrito.

RDC n 12 de
2001 (Brasil,
2001)*

Produtos que sero consumidos


aps a adio de lquido quente
(mnimo 75C por 20 s) (como os
chs)

No descrito.

No descrito.

Escherichia coli: no mximo 103 UFC/ g


Salmonella: ausncia

Farmacopeia
Britnica (British
Pharmacopoeia,
2007)

Produtos vegetais onde no ser


adicionada gua quente antes do
uso (como as cpsulas)

No mximo 5
x 105 UFC/ g

No mximo 5
x 104 UFC/ g

- Escherichia coli: ausncia/ g


- Salmonella: ausncia/ 10 g
- Outras Enterobactrias e bactrias gramnegativas: no mximo 5 x 103 UFC/g

Produtos vegetais onde ser


adicionada gua quente antes do
uso (como os chs)

No mximo 5
x 107 UFC/ g

No mximo x
105 UFC/ g

Escherichia coli: no mximo 5 x 102 UFC/g

No mximo 5
x 105 UFC/ g

Escherichia coli: no mximo 104 UFC/g

OMS (WHO 1998)

Farmacopeia
Americana
(USP, 2007)

Material vegetal cru destinado a


processamento futuro
Material vegetal pr-tratado com
gua fervente (como os chs)

No mximo 5
x 107 UFC/ g

No mximo 5
x 103 UFC/g

Escherichia coli: no mximo 5 x 102 UFC/g


Salmonella: ausncia
Outras enterobactrias: no mximo 5 x 104
UFC/g

Material vegetal para uso interno


(como as cpsulas)

No mximo 5
x 105 UFC/ g

No mximo 5
x 103 UFC/g

Escherichia coli: no mximo 5 x 101 UFC/g


Salmonella: ausncia
Outras enterobactrias: no mximo 5 x 103
UFC/g

Plantas secas ou pulverizadas

No mximo 5
x 105 UFC/ g

No mximo 5
x 103 UFC/g

Escherichia coli: ausncia/ 10 g


Salmonella: ausncia/ 10 g
Bactrias gram negativas bile tolerantes:
no mximo 5 x 103 UFC/g

Extrato de plantas pulverizadas


(como as cpsulas)

No mximo 5
x 104 UFC/ g

No mximo 5
x 103 UFC/g

Escherichia coli: ausncia/ 10 g


Salmonella: ausncia/ 10 g

Plantas tratadas com gua ferventes


antes do uso (como os chs)

No mximo 5
x 105 UFC/g

No mximo 5
x 103 UFC/g

Escherichia coli: ausncia/ 10 g

* Na RDC 12 de 2001 (Brasil, 2001), Escherichia coli denominada de coliformes termotolerantes.

Rev. Bras. Pl. Med., Campinas, v.15, n.4, p.494-502, 2013.

500

da Farmacopeia Brasileira (1988).


Todas as especificaes citadas na tabela 4
encontram-se em vigor. Dependendo da referncia
utilizada, os resultados de aprovao das amostras
podem variar, por isso neste trabalho optou-se por
utilizarmos as especificaes determinadas na
Farmacopeia Brasileira 5 Ed., pois os insumos
farmacuticos, os medicamentos e outros produtos
sujeitos vigilncia sanitria devem atender s
normas e especificaes estabelecidas nesta
(Brasil, 2010b). Neste contexto, percebe-se a
necessidade de unificao/padronizao dos
limites microbiolgicos de aceitao, para uma
melhor interpretao das anlises pelo operador e
principalmente para a segurana do consumidor.
Em relao aos dados obtidos, segundo a
tabela 1, para as cpsulas os nveis encontrados
de contaminao por bactrias viveis variaram de
0 a 1,44 x 105 UFC/g e, para fungos de 0 a 1,11 x
104 UFC/g. Para os chs os nveis de contaminao
para bactrias variaram de 0 a 1,64 x 105 UFC/g e,
para fungos de 0 a 6,74 x 103 UFC/g.
Dessa forma, todos os chs analisados
foram aprovados quanto ao nmero de bactrias e
fungos viveis. Entretanto, observou-se que 16,66%
das cpsulas analisadas foram reprovadas por
apresentarem quantidades superiores de bactrias
e 66,66% foram reprovadas por apresentarem
quantidades superiores de fungos. A qualidade das
cpsulas foi decrescente na ordem: fucus > centella
> alcachofra > sene, conforme a figura 1. Este alto
percentual de reprovao est relacionado aos
limites microbiolgicos mais rigorosos estabelecidos
(principalmente em relao contaminao fngica)
pela F. Bras. 5 Ed. (Brasil, 2010b), sendo estes
limites coerentes com os outros produtos utilizados
via oral de origem sinttica.
As trs amostras de cpsulas de alcachofra
analisadas apresentaram contagem de fungos
acima do permitido (fornecedores A, B e E). Nas
cpsulas de centella, duas das trs amostras
analisadas apresentaram contagem de fungos
superior aos limites (fornecedores B e E), e uma
das trs amostras de cpsulas de fucus, apresentou
contagem de bactrias acima dos limites (fornecedor
B). Nas trs amostras de cpsulas de sene todas
apresentaram a contagem de fungos acima das
especificaes (fornecedor A, B e E) e uma destas
apresentou tambm contagem de bactrias acima
dos limites (fornecedor B).
Em relao aos fornecedores/ fabricantes
das cpsulas, as amostras adquiridas dos
fornecedores B e E apresentaram contaminao
bacteriana e principalmente fngica acima dos
limites, demonstrando falhas no controle de
qualidade destes fabricantes, alm da provvel
aquisio de matrias-primas vegetais de m

qualidade para a produo das cpsulas.


Para os chs, a alcachofra e o sene do
fornecedor D, apesar de estarem dentro das
especificaes para chs, apresentaram as maiores
contaminaes. A qualificao de fornecedores e o
controle da contaminao microbiana um aspecto
importante das Boas Prticas de Fabricao e deve
ser parte integrante do programa de garantia de
qualidade (Bugno et al., 2003).
No caso dos chs poderamos ter obtido
diferentes resultados se as anlises fossem
realizadas aps a infuso que consiste em verter
gua fervente sobre a planta medicinal, tapar o
recipiente para que no se percam as essncias
volteis e aguardar 10 minutos. Provavelmente, aps
este procedimento a contaminao seria menor, pois
a gua fervente auxilia na eliminao dos microorganismos. No entanto, ressalta-se a importncia
dos chs estarem livres de contaminao prvia,
pois a contaminao pode permanecer dependendo
das condies empregadas no processo de infuso.
Para assegurar que o infuso consumido esteja
livre de contaminao microbiana, devem ser
empregados temperaturas e tempos de contato
suficientes, o que na prtica nem sempre acontece
(Gomes et al., 2008).
Na pesquisa de patgenos os ensaios
foram qualitativos, indicando apenas a presena,
sem a quantificao exata do nmero de UFC.
Havendo crescimento das amostras enriquecidas
em caldo nos meios seletivos realizou-se uma srie
de provas para a confirmao do micro-organismo
(tabela 2). Na tabela 3 encontram-se a relao dos
micro-organismos encontrados, sendo que das
21 amostras analisadas, 16 apresentaram algum
tipo de micro-organismo, representando 76%
das amostras. Os micro-organismos estiveram
presentes em 88% dos chs analisados e em 58%
das cpsulas. Salmonella sp. esteve presente em
33% das amostras, Staphylococcus sp. (coagulase
negativo) em 28%, e Enterobacter sp. em 19%
das amostras. As amostras que apresentaram
Salmonella sp. (ch de alcachofra/fornecedor D,
cpsulas de centella/ fornecedor A e B, ch de
fucus/ fornecedor A, cpsulas de fucus/ fornecedor
E, ch de sene/ fornecedor D, cpsulas de sene /
fornecedor A) podem ser consideradas reprovadas
nestas anlises, pois segundo as especificaes
(WHO, 1998; British Pharmacopoea, 2007; Brasil,
2010b) produtos de origem vegetal utilizados via oral
que apresentem Salmonella sp. so considerados
imprprios para o consumo. A presena de cepas
patognicas representa risco de aquisio de
quadro clnico infeccioso ou de transferncia de
toxina indesejveis, sendo imprescindvel sua
determinao.
Segundo Arajo & Ohara (2000), Klebsiella

Rev. Bras. Pl. Med., Campinas, v.15, n.4, p.494-502, 2013.

501

sp., Enterobacter sp. e Citrobacter sp. so comuns


em matrias-primas vegetais, uma vez que esto
relacionados ao meio ambiente das plantas, no
sendo necessariamente de origem fecal.
Os resultados obtidos evidenciaram que
mais de 60% das cpsulas, consideradas produtos
fitoterpicos, apresentaram contagem microbiana
acima dos limites de aceitao (Brasil, 2010b). Os
chs foram considerados aprovados, pois apesar
de apresentarem uma carga microbiana elevada,
esta se encontrava dentro dos limites especificados.
Na pesquisa de patgenos, 76% das amostras
apresentaram um ou mais de um tipo de microorganismo, sendo que Salmonella sp. esteve presente
em 33% das amostras. Estes dados evidenciam a
qualidade microbiolgica insatisfatria dos produtos
encontrados no mercado, demonstrando a falta de
preocupao dos fabricantes/ fornecedores em
obter matria-prima vegetal de boa procedncia
e qualidade comprovada, e a falta de controle de
qualidade dos produtos acabados.
Estes resultados demonstram a necessidade
de controle de qualidade destes produtos de
origem vegetal amplamente utilizados no combate
obesidade, atravs do controle e fiscalizao
rigorosa, com adoo de medidas regulamentadoras
e educativas. Alm disso, necessrio, definir
aes adequadas de boas prticas de fabricao e
controle para garantir a qualidade e segurana deste
tipo de produto desde a coleta, armazenamento e
manipulao at o produto final.
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