Rev. Int. Contam. Ambient. 21 (Supl.

1) 63-70, 2005

VYDATE L-24, UN PLAGUICIDA CARBMICO QUE INDUCE ABERRACIONES

CROMOSMICAS EN CLULAS MERISTEMTICAS DE Vicia faba

Rafael VALENCIA-QUINTANA1,2, Juana SNCHEZ-ALARCN1,2, Jos Luis GMEZ-OLIVARES2,3,

Libertad JUREZ-SANTACRUZ1,2, Elizabeth GARCA-GALLEGOS1,2, Jos Mariano R. MONTIELGONZLEZ1,2, Edelmira GARCA-NIETO1,2 y Stefan M. Waliszewski4

Laboratorio de Citogentica Ambiental, Centro de Investigacin en Gentica y Ambiente. Correo electrnico

rafael@cci.uatx.mx o juana@cci.uatx.mx
2
Posgrado en Ciencias Ambientales, Coordinacin de Ciencias Biolgicas, Secretara de Investigacin Cientfica
y Posgrado, Universidad Autnoma de Tlaxcala. Av. Universidad 1, Tlaxcala 90000, Tlax., Mxico
3
Divisin de Ciencias Biolgicas y de la Salud, Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa
4
Instituto de Medicina Forense, Universidad Veracruzana, 94290 - Boca del Ro, Ver.
1

Palabras clave: Vydate, oxamilo, plaguicidas carbmicos, aberraciones cromosmicas, Vicia faba
RESUMEN
En un anlisis previo se demostr que el Vydate L-24, plaguicida carbmico a base de
oxamilo (metil N,N-dimetil-N-[(metilcarbamoil)oxi]-1-tiooxamidato), no indujo alteraciones
cromosmicas en clulas meristemticas de la raz de Vicia faba ni produjo efectos sobre
el ndice mittico. En ese entonces se sugiri que estos resultados se deban a que las
concentraciones empleadas eran insuficientes para causar dao o que el compuesto no
era clastgeno. Esto justific la confirmacin de alguna de estas suposiciones, por medio
del anlisis de la toxicidad a nivel gentico del Vydate L-24 (oxamilo al 24 %), expresada en
la capacidad para inducir aberraciones cromosmicas en clulas meristemticas de la raz
de Vicia faba. Los resultados indicaron que este insecticida induce aberraciones
cromosmicas que aumentan conforme se eleva la concentracin. Asimismo, el ndice
mittico no result afectado. Con base en estas observaciones el Vydate L-24 puede
considerarse como genotxico, por lo que deben tomarse las medidas de proteccin
adecuadas con el fin de evitar este riesgo, ya que para combatir algunas plagas en ciertos
cultivos se recomienda utilizarlo en concentraciones superiores a las probadas en este
estudio. De igual manera, se discute la posible intervencin del metabolismo vegetal en la
determinacin de las propiedades genotxicas de dicho plaguicida.

Keywords: Vydate, oxamyl, carbamate pesticides, chromosomal aberrations, Vicia faba

ABSTRACT

In a preliminary assessment of Vydate L-24, an oxamyl (methyl N,N-dimethylN-[(methylcarbamoyl)oxy]-1-thiooxamidate) base carbamate pesticide, it did not
induce neither chromosomal alterations in meristematic cells of Vicia faba roots
nor effects on the mitotic index. At that time, it was suggested that such results
would stem from the fact that concentrations tested had been insufficient to
cause damage, or this chemical was not clastogenic. In order to confirm any of
these assumptions, the genetic toxicity of Vydate L-24 (oxamyl 24 %) was
analyzed through its capacity to induce chromosomal aberrations in meristematic
cells of Vicia faba root tips. The results showed that Vydate L-24 induce
chromosomal aberrations, which increase as the concentration of the pesticide

64

R. Valencia-Quintana et al.

rises. On the other hand, the mitotic index did not appear affected. On the basis
of these facts Vydate L-24 can be considered genotoxic, so it follows that adequate
protection measures during its field application to avoid such risk must be taken.
This is significative especially because to control several pests in various field
crops the concentrations recommended are higher than those tested in this study.
It is also discussed the role of plant metabolism in the development of the Vydate
L-24 genotoxicity properties.

INTRODUCCIN
Aun cuando los plaguicidas son compuestos txicos
que afectan el ambiente y la salud humana, resultan
indispensables para la agricultura. Las estimaciones indican que los factores biticos animales plaga, microorganismos y malezas- disminuyen el rendimiento de la produccin agrcola en 35 %
(Matolcsy et al. 1988).
A causa del origen relativamente ms reciente de
los plaguicidas carbmicos, las investigaciones acerca de su accin, selectividad, metabolismo y relaciones entre estos factores todava no alcanzan la importancia que se observa en el caso de los plaguicidas fosforados. Por esta razn es importante precisar la existencia de efectos deletreos no atribuibles
a alteraciones en el sistema colinrgico (Gmez-Arroyo y Villalobos-Pietrini 1995, Valencia-Quintana 2000).
En general, existen pocos estudios sobre las propiedades mutgenas, carcingenas y teratgenas de
los compuestos del grupo de los carbmicos y los resultados son contradictorios, aunque indican con claridad que el uso excesivo de estos compuestos puede
modificar la estructura gentica (Gmez-Arroyo y
Villalobos-Pietrini 1995).
Los ingredientes activos de los insecticidas
carbmicos aprobados para su uso en Mxico son
aldicarb, carbarilo, carbofurn, metomilo, oxamilo,
pirimicarb, propoxur y tiodicarb.
El oxamilo est registrado y es vendido en Mxico por Du Pont de Nemours con el nombre comercial de Vydate, que se presenta como un concentrado lquido soluble (24 % de ingrediente activo). Este
compuesto carbmico es insecticida, acaricida y
nematicida que se aplica antes, durante y despus de
la cosecha sobre una gran diversidad de cultivos (RED
2000a, USEPA 2000a). No hay registros de uso domstico.
El perfil toxicolgico del oxamilo (Extension
Toxicology Network 1996), incluye informacin sobre toxicidad aguda y crnica y efectos en la reproduccin. De igual manera existen antecedentes acerca de efectos teratgenos, mutgenos y carcingenos
y efectos txicos en rganos, como hgado, cerebro,
corazn, pulmones, testculos y glndulas adrenales;

as como tambin datos sobre su distribucin en los

cuerpos de humanos y animales una vez que ingresa
en el organismo. Asimismo, se describen efectos en
aves, organismos acuticos y abejas, y por ltimo incluye informacin sobre la degradacin de dicho
plaguicida en el suelo, el agua subterrnea, las aguas
superficiales y la vegetacin.
En una evaluacin previa sobre la genotoxicidad
del Vydate L-24 (Valencia et al. 1993), ste no indujo
alteraciones cromosmicas en clulas meristemticas
de la raz de Vicia faba ni efectos sobre el ndice
mittico. Lo anterior sugiri que las concentraciones
empleadas fueron insuficientes para provocar dao o
que el compuesto no era clastgeno.
Los bioensayos de mutagenicidad con plantas superiores constituyen en la actualidad un sistema bien
establecido para monitorear daos genticos causados por xenobiticos ambientales (Grant et al. 1992).
De igual manera, los vegetales no slo son capaces
de detectar la mutagenicidad del compuesto original
sino tambin la de sus metabolitos, muchos de los
cuales son similares a los encontrados en organismos
animales completos (Plewa y Gentile 1982, Plewa et
al. 1984, Gentile et al. 1986).
Basndose en lo anterior y con el propsito de
confirmar alguna de las suposiciones sealadas, se
reanaliz la toxicidad gentica del Vydate L-24
(oxamilo al 24 %) a travs de la induccin de aberraciones cromosmicas, as como por su accin sobre
la divisin celular, empleando como sistema de prueba las clulas meristemticas de la raz de Vicia faba.
MATERIALES Y MTODOS
Las semillas de Vicia faba se hicieron germinar en
la oscuridad entre dos capas de algodn, humedecidas
con agua corriente y mantenidas a 20 C. Cuando las
races principales alcanzaron entre 3 y 4 cm. de longitud, se expusieron por 4 horas a soluciones acuosas de
Vydate L-24 (Du Pont, Mxico) con concentraciones
de 4 000, 6 000, 8 000 y 10 000 ppm de ingrediente
activo. Esto fue seguido por un periodo de recuperacin
de 18 44 horas en un bao de agua corriente con
aireacin y temperatura constante (19 C). Los lotes

65

VYDATE L-24, INDUCE ABERRACIONES CROMOSMICAS

CUADRO I. FRECUENCIAS DE ABERRACIONES (-TESTIGO) EN CROMOSOMAS DE LAS CLULAS MERISTEMTICAS DE LA RAZ DE Vicia
faba DESPUS DE 4 HORAS DE EXPOSICIN A DIFERENTES CONCENTRACIONES DE VYDATE L-24 Y 18 HORAS DE RECUPERACIN
Concentracin
(PPM)a

4 000
6 000
8 000
10 000

Metafases
anormales*
%

Fragmentos
cromatdicos e
isocromatdicos
%

7.60
14.90
21.00
27.20

6.15
14.80
21.20
28.00

Anillos
%

1.15
1.55
0.50
0.50

Aberraciones
totales
%
7.30
16.40
21.70
28.50

* 200 clulas analizadas en metafase para cada tratamientoa

a
De ingrediente activo

testigo, uno por cada tiempo de recuperacin, se colocaron en agua destilada.

Enseguida, los meristemos se cortaron y colocaron en una solucin de colchicina (0.05 %) durante 3
horas y se tieron con el reactivo de Schiff.
Todos los aplastamientos para la obtencin de la
monocapa (squash), se realizaron usando cido
actico al 45 %. Las laminillas se hicieron permanentes por medio de la tcnica del hielo seco (Conger
y Fairchild 1953); para ello se deshidrataron mediante dos cambios de butanol absoluto y luego se montaron en blsamo de Canad. Para el registro de las
alteraciones cromosmicas, las laminillas se codificaron de tal forma que el observador desconoca a
que grupo pertenecan durante todo el anlisis.
Los datos presentados en este trabajo corresponden a un experimento y una repeticin. El registro de
las aberraciones cromosmicas se realiz en 200
metafases mediante la cuantificacin de fragmentos
cromatdicos e isocromatdicos y anillos.
En campos al azar se observaron 2 000 clulas en

interfase y para calcular el ndice mittico se dividi

la cantidad total de clulas en divisin entre el nmero total de clulas examinadas.
El anlisis estadstico de los resultados se llev a
cabo mediante la prueba de diferencia de proporciones (Spiegel 1970)
RESULTADOS
Los datos sobre el efecto del Vydate L-24 (oxamilo)
se muestran en las Tablas I-IV. Las frecuencias de
alteraciones cromosmicas en los lotes tratados se
incrementaron en ms del doble en comparacin con
las del lote testigo, por lo que a las primeras se les rest
el valor de ste. De esta manera, los valores mostrados
son las frecuencias absolutas del efecto y denotan el
efecto completo producido por este plaguicida.
Las aberraciones observadas fueron de tipo cromatdico e isocromatdico, as como anillos cromatdicos (Tablas I y II).

CUADRO II. FRECUENCIAS DE ABERRACIONES (-TESTIGO) EN CROMOSOMAS DE LAS CLULAS MERISTEMTICAS DE LA RAZ DE
Vicia faba DESPUS DE 4 HORAS DE EXPOSICIN A DIFERENTES CONCENTRACIONES DE VYDATE L-24 Y 44 HORAS DE
RECUPERACIN
Concentracin
(PPM)a

4 000
6 000
8 000
10 000

Metafases
anormales*
%

Fragmentos
cromatdicos e
isocromatdicos
%

10.30
23.20
28.50
35.40

12.30
26.25
32.00
37.25

* 200 clulas analizadas en metafase para cada tratamiento;

a
De ingrediente activo

Anillos
%

0.00
0.45
0.00
0.55

Aberraciones
totales
%
12.30
26.70
32.00
37.80

66

R. Valencia-Quintana et al.

CUADRO III. NDICE MITTICO DE RACES DE Vicia

faba EXPUESTAS DURANTE 4 HORAS A DIFERENTES CONCENTRACIONES DE
VYDATE L-24 Y 18 HORAS DE RECUPERACIN
Concentracin
IM
Valor de Z
(PPM)
%
0
4 000
6 000
8 000
10 000

8.00
7.30
10.00
8.80
8.00

0.59
-1.56
-0.64
0.00

ns
ns
ns
ns

Z (0.001) = + 3.291
ns: no significativo

La frecuencia de las alteraciones causadas por

4 000, 6 000, 8 000 y 10 000 ppm de oxamilo muestran
que slo las metafases anormales y los fragmentos
cromatdicos e isocromatdicos se incrementaron con
el aumento de las concentraciones usadas, tanto a
las 18 (Tabla I) como a las 44 horas de recuperacin
(Tabla II). As mismko, anomala como son los -anillos cromatdicos- se pone de manifiesto con menor
frecuencia y sin relacin con la variacin de las concentraciones (Tablas I y II).
En cuanto al ndice mittico (Tablas III y IV) no
se presentan alteraciones cuando se comparan los
efectos producidos por diferentes concentraciones de
Vydate L-24 y el testigo.
DISCUSIN Y CONCLUSIONES
Los agroqumicos se utilizan extensamente para
el control de plagas, de modo que se justifica el inters que existe sobre el riesgo que implica la exposicin de los seres humanos a estos compuestos. Asimismo, es esencial contar con el conocimiento adecuado sobre su mutagenicidad. Una de las principa-

CUADRO IV. NDICE MITTICO DE RACES DE Vicia

faba EXPUESTAS DURANTE 4 HORAS A DIFERENTES CONCENTRACIONES DE
VYDATE L-24 Y 44 HORAS DE RECUPERACIN
Concentracin
IM
Valor de Z
(PPM)
%
0
4 000
6 000
8 000
10 000
Z (0.001) = + 3.291
ns: no significativo

8.70
7.30
9.30
9.40
7.40

1.15
-0.47
-0.55
1.07

ns
ns
ns
ns

les consideraciones debe ser el peligro que representa no slo el compuesto original, sino tambin cualquier derivado de su metabolismo.
A diferencia de los resultados encontrados en este
trabajo, en estudios in vitro el oxamilo no result
mutgeno en la prueba de Ames (bacterias), ni
mutgeno en las clulas de mamfero en cultivo, no
indujo aberraciones cromosmicas en clulas ovricas
de criceto chino, fue negativo en cuanto a la induccin de reparacin del dao en el DNA y no caus
alteraciones en la sntesis no programada de DNA
en hepatocitos primarios de rata (USEPA 2000a,b).
En este experimento los tratamientos con Vydate
L-24, que tiene una formulacin tcnica a base de
oxamilo al 24 %, incrementaron significativamente las
aberraciones cromatdicas en clulas meristemticas
de la raz de Vicia faba en comparacin con el testigo; de igual manera, se observa una respuesta relacionada con la concentracin (Tablas I y II).
En lo que concierne al mecanismo molecular causante del dao gentico, en general los plaguicidas
carbmicos, como el Vydate L-24, actan a la manera de agentes alquilantes con efectos S-dependientes
y retardados, ya que slo producen aberraciones de
tipo cromtidico despus de tratamientos de 4 h con
18 y 44 h de recuperacin (Kihlman 1966, Kihlman
et al. 1978).
De manera comn se utilizan 1 500 ingredientes
activos, la mayora de los cuales se preparan y venden
con diferentes nombres comerciales. El ingrediente
activo del plaguicida no se comercializa en forma pura,
sino combinado con otras sustancias que favorecen su
accin y le confieren propiedades determinadas a la
mezcla o preparado. Por consiguiente la toxicidad del
producto no se refiere exclusivamente a la toxicidad
del compuesto puro per se sino que est determinada
por las propiedades de la frmula comercial, en la que
es importante la presencia de disolventes y surfactantes
que facilitan la penetracin del plaguicida al disolver la
capa lipdica de la piel o alterar la permeabilidad de la
membrana celular, entre otras vas.
En apoyo a lo anterior existen diversos trabajos
que demuestran que los compuestos presentes en los
plaguicidas y que se afirma son inocuos, en algunos
casos no lo son. Un ejemplo de esto es el insecticida
dibromopiretroide deltametrina. Tanto sta como su
formulacin comercial resultaron eficaces para modificar las actividades de varias enzimas del hgado
de rata. Sin embargo, se observaron algunas diferencias entre los tratamientos con la deltametrina pura y
la frmula comercial, ya que esta ltima result ms
activa; efecto que puede ser atribuido a los aditivos,
disolventes y compuestos intermediarios presentes en
la formulacin Decis. Estos resultados sugieren que
la exposicin a la formulacin comercial de

VYDATE L-24, INDUCE ABERRACIONES CROMOSMICAS

deltametrina podra ser ms peligrosa que la exposicin a deltametrina sola (Villarini et al. 1995).
Por esa razn en este estudio, en vez de analizar
los efectos del principio activo -el oxamilo-, se evalu
una de las frmulas comerciales, Vydate L-24, ya que
es en realidad a ste al que estn expuestos los cultivos y los seres humanos.
Con base en lo anteriormente expuesto, la respuesta negativa encontrada en un experimento previo con este mismo plaguicida (Valencia-Quintana
et al. 1993) posiblemente se debi a que las concentraciones empleadas fueron insuficientes para
causar dao. En el presente trabajo se probaron concentraciones que van de 4 000 a 10 000 ppm, que
aunque aparentemente son muy elevadas estn por
debajo de la concentracin de 60 000 ppm utilizada
en el cultivo de tabaco para eliminar nematodos (Du
Pont 1998).
Por otra parte, Snchez-Alarcn (1995) informa
que entre 62.5 ppm y 250 ppm, el Vydate L-24
incrementa la frecuencia de intercambios de
cromtidas hermanas en linfocitos humanos en cultivo y provoca muerte celular a 500 ppm. Con respecto a lo anterior, es probable que las diferencias en las
respuestas genotxicas entre estos dos sistemas de
prueba se deban al metabolismo del oxamilo por la
planta.
El efecto del metabolismo vegetal sobre la actividad genotxica de los xenobiticos ha sido pasada
por alto cuando se consideran los riesgos que significan los mutgenos ambientales. Se sabe que las
plantas tienen la capacidad de metabolizar dichos
compuestos, convertir un promutgeno en un
mutgeno o, por el contrario, inactivar un mutgeno
transformndolo en una sustancia inocua (Plewa y
Gentile 1982, Plewa et al. 1988, Gmez-Arroyo et
al. 1995, Caldern Segura et al. 1999).
En apoyo a las observaciones anteriores, Valencia et al. (1998) determinaron que el Lannate-90 es
un eficiente inductor de intercambios de cromtidas
hermanas (ICH); asimismo Debuyst y Larebeke
(1983) encontraron que el metomilo (ingrediente activo del Lannate-90) causa un incremento en los ICH,
pero slo cuando se halla en presencia de la mezcla
S9. Por el contrario, Bonnatti et al. (1994) no observaron aumento significativo en los ICH. Las discrepancias pueden deberse al diferente tipo de formulacin empleado en cada caso. En el primero se evalu
Lannate-90, en el segundo se utiliz metomilo sin especificar su grado de pureza y en el ltimo trabajo se
emple Lannate-25. De igual manera, es importante
considerar que este ltimo estudio in vitro no incluy
activacin metablica.
Los datos disponibles sobre el metabolismo del
oxamilo son adecuados para satisfacer las especifi-

67

caciones de las normas. Cuando se administr por

va bucal a ratas, el oxamilo fue fcilmente absorbido
y eliminado en la orina (80-91 % de la dosis) y las
heces (<3 % de la dosis). El principal componente
hallado en la orina fue la oxima glucorinada (31-37 %
de la dosis), seguido de la oxima (13-18 % de la dosis) y el compuesto original (7-11 % de la dosis). No
se observ acumulacin en los tejidos (RED 2000b,
USEPA 2000a). No se encontraron diferencias debidas al sexo en lo concerniente a absorcin, eliminacin, distribucin y metabolismo del oxamilo. La base
de datos sobre sus efectos txicos proporciona informacin suficiente para seleccionar diferentes marcadores de toxicidad y dosis que permitan evaluar los
riesgos de este compuesto (USEPA 2000a).
Los metabolitos oxima y cido dimetiloxmico
(DMOA) (Fig. 1) parecen ser ms mviles y persistentes que el compuesto original, empero los datos
sobre movilidad ambiental y toxicidad son muy limitados y evalan y caracterizan de manera muy reducida el riesgo de la exposicin a dichos compuestos.
Los escasos datos de que se dispone sugieren que la
oxima y el DMCF, un metabolito que no se detect
en los estudios de degradacin ambiental, pueden ser
menos txicos para los mamferos que el compuesto
original oxamilo (USEPA 1999).
De igual manera se informa que el oxamilo es
metabolizado rpidamente por las plantas (USEPA
1987), lo que disminuye la probabilidad de que este
plaguicida provoque efectos mutgenos in vivo. Esto
podra explicar la respuesta negativa encontrada a
concentraciones ms bajas que las probadas en este
estudio. Es probable que a niveles menores Vicia faba
sea capaz de metabolizarlo e inactivarlo, pero a partir
de 4 000 ppm se satura el mecanismo de degradacin y provoca los efectos observados.
Por otra parte, algunos informes sealan que las
alteraciones cromosmicas causan directamente la
muerte celular (Heddle y Salomone 1981), por ello
los cambios en el ndice mittico pueden considerarse como indicadores de dao citotxico o citosttico.
Asimismo se ha demostrado que las radiaciones
(Burholt y Vant Hof 1972) y algunas sustancias, como
los nuclesidos de adenina, la azaserina, el bromuro
de etidio y la cicloheximida, entre otras, (Kovacs y
Vant Hof 1971, Webster 1973, McGill et al. 1974),
inhiben la divisin celular.
Como ya se mencion, la actividad de los plaguicidas carbmicos no slo puede afectar al DNA sino
tambin a grupos proteicos (Rannug y Rannug 1984,
Hemavathy y Krishnamurthy 1987, Bolognesi et al.
1994). De esta manera, no es factible encontrar nicamente daos a nivel gentico que se manifiestan
por medio de la induccin de aberraciones
cromosmicas, como se observa al aplicar el Vydate

68

R. Valencia-Quintana et al.

L-24, sino tambin otro tipo de alteraciones biolgicas, como los efectos sobre el ndice mittico.
Sin embargo el Vydate L-24 no tiene accin sobre
el ndice mittico (IM) (Tablas III y IV), lo que sugiere que los efectos toxicolgicos son los que determinan las concentraciones mximas permitidas, ya
que este insecticida, como se menciona anteriormente, se recomienda en ciertos cultivos y contra determinadas plagas en una concentracin de hasta 60 000
ppm, pero el peligro de afectar el material hereditario
de Vicia faba se presenta a partir de 4 000 ppm en
las condiciones de estudio.

CH3
S

NH

H3C

AGRADECIMIENTOS

Al Bil. Mario Alberto Hernndez Cuapio, por

su apoyo y colaboracin en la revisin del presente
artculo.

H3C

CH3

REFERENCIAS

Oxamilo
CH3
S

HO

N
H3C

CH3

Oxima (metil-2-(dimetilamino)-N-hidroxi-2-oxoetanimidotioato):
OH

C
O

O
C

N
H3C

Los resultados de este trabajo muestran claramente que el insecticida carbmico Vydate L-24 es capaz de inducir alteraciones cromosmicas sin afectar
el ndice mittico, aun en la concentracin ms alta
que se prob, por lo que puede representar un peligro
potencial para los organismos expuestos.
Existen asimismo riesgos para los trabajadores que
mezclan y aplican el oxamilo en el campo, as como
tambin para las personas que entran en los campos
tratados con oxamilo.
Por los resultados obtenidos, es importante utilizar el Vydate L-24 con precaucin, as como tratar
de emplear concentraciones bajas y observar las medidas de seguridad recomendadas para el almacenamiento y manejo.
Con las medidas de mitigacin adecuadas, los riesgos laborales y ecolgicos derivados del manejo del
oxamilo podran reducirse significativamente.

CH3

cido dimetiloxmico (cido (dimetilamino)oxoacetico)

Fig. 1. Estructura del oxamilo y de sus principales metabolitos

Bolognesi C., Peluso M., Degan., Rabn R., Munnia A. y

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VYDATE L-24, INDUCE ABERRACIONES CROMOSMICAS

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