Professional Documents
Culture Documents
CALIBRACIN
indicaciones.
Suelen distinguirse dos tipos de calibraciones: la calibracin directa y la calibracin
indirecta, esta ltima tambin llamada calibracin analtica.
1.2.
CALIBRACIN DIRECTA.
perfectamente definido.
1.3.
3
Esta calibracin se realiza mediante patrones que contienen cantidades conocidas de
analito, que generalmente son disoluciones del mismo en un disolvente apropiado, que son
sometidas al proceso de medida instrumental.
Al realizar una determinacin analtica empleando una tcnica instrumental, la calibracin
indirecta establece una correspondencia entre la respuesta y la concentracin, o cantidad
absoluta, de analito.
Funcin de calibracin: Seal analtica = (concentracin o cantidad de analito)
Esta funcin es aplicable en un intervalo de concentraciones perfectamente establecido y no
debe ser extrapolada fuera del mismo.
Existen distintos mtodos de calibracin:
1. Curva de calibrado.
2. Adicin estndar.
3. Patrn interno.
El primero es el ms cmodo, pero no siempre el mejor. La eleccin del mtodo de
calibracin depende de la tcnica instrumental, de la naturaleza de la matriz y del nmero
de muestras que se han de analizar.
1.4.
CURVA DE CALIBRADO.
4
Es recomendable que los patrones tengan una matriz lo ms parecida posible a la muestra.
Para ello se debe agregar el volumen del disolvente utilizado, los reactivos y un exceso del
componente que se encuentra en mayor cantidad en la muestra.
Si el tratamiento de la muestra previo a la medida requiere de operaciones o adiciones de
varios reactivos que no es posible de agregar a los patrones, se debe preparar un blanco de
la muestra. Este consiste en una disolucin preparada exactamente igual que la muestra,
pero que no contiene analito. Si aquel blanco de la muestra da una respuesta
significativamente diferente de cero, habr que restarla a la lectura de la muestra.
Ventajas y limitaciones de la curva de calibrado:
1.5.
Ventajas: sencillez y rapidez, ya que con unos pocos patrones pueden determinarse
numerosas muestras.
Limitaciones: es preciso asegurar que no existe efecto de la matriz o que se ha
corregido convenientemente.
ADICIN ESTNDAR.
Se aplica cuando existe un efecto de la matriz que no es posible corregir. En este mtodo se
mide la seal analtica de la disolucin de la muestra y de las disoluciones que, adems de
la muestra, contienen cantidades conocidas de analito. Estas cantidades conocidas de
analito actan como patrones que se hallan bajo el mismo efecto de la matriz, al igual que
el analito, procedente de la muestra.
Se preparan diferentes disoluciones con alcuotas idnticas de muestra o realizando
adiciones sucesivas sobre una misma alcuota de muestra. El nmero de adiciones oscila
entre una y tres. La funcin de calibracin debe ser rectilnea y sin trmino independiente.
Por ello, en caso de que la seal incluya una contribucin del blanco, sta deber restarse
necesariamente.
Se representa grficamente las seales analticas de la muestra y las de las muestras con
adiciones respecto al incremento de concentracin. Por extrapolacin se obtiene la
concentracin de analito en la muestra no adicionada.
La cantidad de analito adicionada no puede ser muy grande, la respuesta de la muestra sera
muy pequea en relacin a las de las adicionadas, ni muy pequea, no conviene hacer
extrapolaciones muy grandes. Para obtener buenos resultados la concentracin de analito ha
de ser muy similar a x, entre la mitad y el doble.
En el segundo caso, es decir, en las adiciones sucesivas sobre la misma parte alcuota (se
suele emplear en voltamperometra), para no modificar la composicin de la matriz, es muy
importante que el volumen del patrn agregado sea pequeo. S es as, al hacer los clculos,
se puede eliminar el efecto de dilucin.
0
a3
5
C
Figura 2. Curva de adicin estndar
1.5.1. Ventajas y limitaciones de la adicin estndar:
otra parte, la medida se hace por extrapolacin, por lo que pequeas variaciones de la
pendiente de la recta pueden repercutir significativamente en su punto de interseccin
con el eje de las abscisas.
1.6.
PATRN INTERNO.
Se aplica cuando, entre medidas sucesivas, es difcil mantener alguno de los parmetros
operatorios o reproducir la cantidad de muestra sometida al proceso de medida. Se aaden a
la muestra y a los patrones cantidades conocidas de una sustancia, el patrn interno, que no
Desventajas: la adicin del PI a muestras y patrones hace que este mtodo sea ms
ESPECTROSCOPA ATMICA
2.1.
INTRODUCCIN
sustancia pasa a un estado de energa superior. El paso desde el estado excitado o nivel
energtico superior a un estado de energa ms bajo produce la emisin de radiacin, la que
instrumentalmente es medida.
Por otra parte, en los mtodos de absorcin se mide la atenuacin de la intensidad o
ESPECTROSCOPA ATMICA.
Cuando las especies que absorben o emiten radiacin son tomos aislados o gaseosos, las
tcnicas analticas derivadas corresponden a las espectroscopa de absorcin atmica, EAA
o AAS, y espectroscopa de emisin atmica, EEA o AES, respectivamente. En ambos
casos se obtienen espectros de bandas muy estrechas, o lneas.
2.3.
Para la aplicacin de esta tcnica se requiere tener las especies absorbentes como tomos
gaseosos, aislados, por lo que es necesario un sistema capaz de producir vapor atmico,
normalmente mediante energa trmica, espectroscopa de absorcin atmica de llama, o
con un horno elctrico, espectroscopa de absorcin atmica con horno de grafito.
La tcnica de absorcin atmica con llama, que es la ms empleada en los laboratorios
industriales y la que trabajaremos en el laboratorio y en este texto, requiere la nebulizacin
de la disolucin de analito para producir un aerosol que es conducido a la llama. El vapor
atmico, generado en la llama, es atravesado por una radiacin especfica del elemento que
Atomizador
Lmpara de
ctodo hueco
hueco
0.6
45
Nebulizador
Detector
Procesador Sistema
de seal
Solucin
electrnico
de lectura
Modulacin
Fuente
radiante
Monocromador
Atomizador
Nebulizador
Detector
Amplificador
Dispositivo
de lectura
Monocromador
Nebulizador
Cmara de
premezclado
1.645
Detector
Disolucin de la
muestra, patrn o
Procesador
de seal
Sistema
electrnico
de lectura
blanco
SESIN 2
3.
3.1.2. REACTIVOS
Disolucin de Cu2+ 100 mg/L, preparar por dilucin de la solucin stock en medio de
cido ntrico al 2 %.
Medir las absorbancias de cada una de las disoluciones patrones a 324,8 nm.
Representar los valores de absorbancia en funcin de la concentracin del patrn
correspondiente.
Calcular la variacin del valor medio de ambos grupos de valores, mediante la frmula:
10
d = 100 ( x1 - x2 ) / x1
donde x corresponde a la mediana del primer grupo, y x es la mediana del segundo
grupo de valores. El valor de d no debera exceder de un 10 %.
1
Metal Conc.
nm Terica exper. diferencia mg/L
nm
mg/L
Zn
Cu
Mn
1
4
25
213.9
324.8
403.1
0.5
0.5
0.5
2. Medir los valores de absorbancia de los patrones siguiendo las condiciones indicadas en
la tabla.
3. Los valores obtenidos no deberan diferir de los valores tericos, entregados por el
instrumento, en ms de un 10 %.
3.1.6. OBSERVACIONES
En caso de obtener diferencias notables en todas las lecturas proceder a un completo control
DE LA SENSIBILIDAD.
3.2.1.2. PROCEDIMIENTO:
a. Preparar dos estndares de cobre en agua destilada
Est : 0.05 g Cu/ mL
Est : 0.10 g Cu/ mL
b. Calibrar el instrumento en la lnea de resonancia principal del Cu, 324.8 nm
1
2
c.
Optimizar la seal hasta que un estndar de chequeo de 4.00 g Cu/ mL entregue una
seal de 0.200 A
11
d. Leer la absorbancia para los estndares de chequeo Est y Est en la siguiente secuencia:
blanco (agua destilada), corrija cero, Est , blanco, Est , blanco, Est , ...
e. Tabular los valores y restar a cada valor de absorbancia obtenido para los estndares el
valor ledo para el blanco siguiente.
f. Calcular la media para Est y Est sus respectivas desviaciones estndares (n-1).
g. Aplicar para cada estndar de cobre:
1
.
L D
.
* 3 DS
Conc Est
A
h. Calcular la media entre los dos valores obtenidos para L.D. e informar el lmite de
deteccin.
3.2.1.3. SENSIBILIDAD
onda de absorcin del Cu: 216.5, 222.6, 224.4, 244.2, 249.2, 324.8 y 327.4 nm
d. Calcular la sensibilidad de cada lnea relativa a 324.8 nm.
12
3.3.3. LINEALIDAD EN FUNCIN DE LA LNEA DE RESONANCIA ESCOGIDA
Medir la curva de calibracin del punto 9.2.3.3. a tres valores de SLIT en la lnea
resonante 324.8 nm y graficar sus resultados.
SESIN 3
3.4. INTERFERENC1AS
ANALTICAS
QUE
AFECTAN
LAS
INFLUENCIAS DE ANIONES:
mL Ca + HC1 2 % v/v
13
+ La 0.2 %
+ La 0.2 %
+ La 0.2 %
+ La 0.2 %
INFLUENCIAS DE CATIONES