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ISSN: 0122-0268
ORIGINAL
RESUMEN
Objetivo. Estudiar el ciclo celular y realizar la descripcin cromosmica de Espeletiopsis
muiska, utilizando clulas meristemticas de pices radicales obtenidos a travs de cultivo in
vitro de embriones en medio MS suplementado con AIB. Materiales y mtodos. Se colectaron
pices radicales a diferentes horas del da y se contaron en ellos las clulas presentes en
cada fase mittica, se determin la duracin del ciclo celular y la hora de mayor actividad
mittica. La descripcin de los cromosomas y la elaboracin del cariotipo de la especie,
se realiz utilizando un protocolo que permiti la obtencin de cromosomas metafsicos.
Resultados. Respecto a la duracin del ciclo celular, se encontr que la interfase comprende
el 94.65% y la mitosis el 5.35% del total del ciclo celular. Entre las fases mitticas la profase
tiene mayor duracin, 1.92%, mientras que la anafase es la ms corta, 0.96%. En cuanto
a la hora mittica, las clulas meristemticas de los pices radicales presentaron mayor
actividad entre las 10:30 y las 11:15. Con el estudio citogentico se encontraron 19 pares de
cromosomas con longitudes e ndices centromricos similares y cariotipo asimtrico. Conclusiones.
El estudio detallado de los cromosomas, permiti determinar un complemento cromosmico
2n=38+2B, dos cromosomas con microsatlites terminales y uno con constriccin secundaria.
Palabras clave: Cromosomas, mitosis, pramo, races (Fuente: CAB).
ABSTRACT
Objective. The cell cycle and chromosomic description of Espeletiopsis muiska was studied in
meristematic cells of root tips obtained from in vitro culture of embryos on MS medium supplemented
with IBA.Materials and methods. Root tips at different times of day were collected and the cells
in each mitotic phase were counted. With this information, the cell cycle length and mitotic activity
was determined at its peak hours. Description of chromosomes and elaboration of karyotype of the
specie was done with a protocol that allows obtaining metaphase chromosomes. Results. Regarding
the cell cycle length, we found that the interface includes the 94.65% and mitosis the 5.35% of total
cell cycle. Regarding the mitotic phases, the prophase lasts longer, 1.92%, while the anaphase is
the shortest, 0.96%. As to mitotic hour, meristematic cells of root tips showed an increased activity
between 10:30 and 11:15. 19 pairs of chromosomes with similar lengths, similar centromeric indices and
asymmetrical karyotype were found in this cytogenetic study. Conclusions. The detailed study of the
chromosomes revealed a chromosome complement 2n=38+2B, two chromosomes with microsatellite
terminals and one with a secondary constriction.
Key words: Chromosomes, mitosis, moorland, roots (Source: CAB).
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INTRODUCCIN
MATERIALES Y MTODOS
3870
Tiempo de
exposicin
(Horas)
0.05
0.5
3-6
ColchicinaDMSO
0.25 2
2-4
8-Hidroxiquinoleina
0.002 M
1-5
Mitodepresor
Colchicina
Temperatura
(C)
2 y 20
Agente Hidroltico
HCl
Celulasa+Pectinasa
Celulasa+Pectinasa+ Macerozima
HCl+Celulasa+Pectinasa+Macerozima
Concentracin
1N
5N
2-4; 0.5-1 (%)
2-3; 0.5-1; 1 (%)
1N-2-4; 0,5 -1; 0,5-1 (%)
Temperatura C
60
19
37
60
37
1015 / 1060
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RESULTADOS
Determinacin de la hora mittica. pices
radicales de 1 a 3 centmetros de longitud
son fcilmente manejables y colectarlos en
las primeras etapas de crecimiento garantiza
la presencia de un alto nmero de clulas en
divisin dada la alta actividad metablica en la
zona meristemtica.
En las clulas tratadas con fijador Farmer,
por un perodo de 24 horas, y expuestas a
una temperatura de 4C, se logr conservar
las caractersticas fsico-qumicas y observar
aclaramiento citoplasmtico que se obtiene
al precipitar componentes cromosmicos y
citoplasmticos. Estas condiciones facilitaron la
obtencin de un adecuado contraste cromatina/
citoplasma.
La tincin de cromatina con orceina actica
durante 10 minutos fue un procedimiento rpido
y efectivo para la coloracin de ADN; adems, el
flameo de la muestra permiti eliminar el exceso
de colorante en el citoplasma y aumentar el
contraste con los cromosomas; mientras que un
calentamiento excesivo de la muestra produce
decoloracin del preparado. Todo lo anterior
permiti diferenciar claramente las etapas del
ciclo celular y una observacin ms clara de los
cromosomas.
Tiempo (h)
B
Tiempo (h)
Figura 1. A. Variacin del ndice mittico en pices
radicales de E. muiska a diferentes horas del
da. B. Confirmacin de los picos mximos
de divisin celular en pices radicales de E.
muiska.
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Inter
Pro
Meta
Ana
Telo
Total
Clulas
observadas
17613
373
263
176
190
18165
94.6
1.92
1.44
0.96
1.03
100
ndice de fases
Concentracin (%)
IMe (10%)
Colchicina
0.05
0.5
34.3
47.7
Colchicina DMSO 2%
0.25
54.6
8-hidroxiquinoleina
0.002 M
42.4
3873
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
3874
LR
RB
IC
Tipo
1.61
3.22
0.078
1.000
50
0.96
1.61
2.58
0.062
1.677
37.2
0.96
1.93
2.58
0.062
2.010
37.2
0.96
1.29
2.25
0.054
1.343
42.66
0.96
1.29
2.25
0.054
1.343
42.66
6*
0.64
0.97
1.61
0.039
1.515
39.75
0.64
0.97
1.61
0.039
1.515
39.75
0.64
1.74
2.38
0.057
2.718
26.89
Sm
0.51
1.80
2.31
0.056
3.529
28.33
Sm
10
0.77
1.48
2.25
0,054
1.922
34.22
Sm
11
0.64
1.61
2.25
0.054
2.515
28.44
Sm
12
0.64
1.61
2.25
0.054
2.515
28.44
Sm
13
0.64
1.29
1.93
0.046
2.015
33.16
Sm
14
0.64
1.29
1.93
0.046
2.015
33.16
Sm
15
0.51
1.42
1.93
0.046
2.784
26.42
Sm
16
0.64
1.16
1.80
0.043
1.812
35.55
Sm
17
0.32
0.64
0.96
0.023
2.000
33.33
Sm
18
0.64
1.91
2.58
0.062
2.984
24.80
St
19
0.64
1.91
2.58
0.062
2.984
24.80
St
41.25
LR = longitud relativa, RB = proporcin entre brazos, IC = ndice
centromrico, m = metacntrico, sm = Submetacntrico, st =
subtelocntrico. * Par cromosmico con satlite
DISCUSIN
De acuerdo con Paniagua (14), las clulas de pices
radicales colectadas en las primeras etapas de
crecimiento poseen un conjunto de caractersticas
que las convierten en materia prima apropiada para
estudios histolgicos y citogenticos. Asimismo,
utilizar races delgadas facilita su tratamiento ya que
en E. muiska estas tienden a lignificarse, perdiendo
el aspecto translucido, y generando una exodermis
observada en plantas de campo ya reportada para
otros frailejones (15).
En el ensayo para identificar la hora mittica,
se determin como perodo de mayor divisin
celular el comprendido entre las 10:30 y 11:15
am; sin embargo, Alcorcs, 2001, Pia, 2001
en Ferrer et al (11), reportaron diferentes horas
mitticas que comprendan rangos entre las 5:30
y 10:30 para cinco especies de Tabebuia y 10:30
y 11:00 para la lnea T-C-9-6 de frjol. Alcorcs
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REFERENCIAS
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