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CICLO CELULAR
Las clulas aisladas cultivadas en un volumen finito de medio de cultivo apropiado van utilizando los
nutrientes que tienen disponibles, sintetizando sus propios componentes celulares y dividindose en
cuanto duplican su masa y su material gentico. El tiempo que tarda una clula en cumplir ese proceso se
denomina tiempo de generacin () y puede variar desde unos 20 minutos en condiciones ptimas hasta
varios meses en condiciones ambientales. Cada vez que transcurre un tiempo de generacin, el nmero de
clulas se duplica, siguiendo, por tanto, un incremento exponencial.
CINTICA DE CRECIMIENTO
Es importante conocer la cintica de crecimiento de los cultivos microbianos para predecir cmo va a
evolucionar un cultivo, cmo va a ir consumindose el substrato y cmo se van a ir acumulando los
productos del cultivo. Conociendo estos factores es posible iniciar el cultivo a mayores escalas.
Si la bacteria crece en un medio lquido, en la mayora de los casos las clulas que se producen en cada
divisin forman una suspensin de clulas libres.
En un cultivo discontinuo de bacterias en medio lquido, se pueden diferenciar cuatro fases en la
evolucin de los parmetros que miden el crecimiento microbiano
1.- Fase lag o de adaptacin durante la que los microorganismos adaptan su metabolismo a las nuevas
condiciones ambientales (abundancia de nutrientes y condiciones de cultivo). En esta fase no hay
incremento en el nmero de clulas, pero hay gran actividad metablica, aumento en el tamao individual
de las clulas, en el contenido proteico, ADN y peso seco de las clulas.
Mtodo turbidimtrico: el sistema se basa en que las clulas en suspensin dispersan la luz causando la
turbidez del cultivo. La turbidez depende de la masa en suspensin y, por tanto, midiendo esta se puede
estimar aquella. Este es el parmetro de medida ms fcil de usar en los cultivos de laboratorio. La
densidad de clulas debe ser del orden de 105 por ml. Esta metodologa se basa en la ley de Lambert-Beer.
Recuento directo: consiste en la observacin al microscopio de volmenes muy pequeos de
suspensiones de bacterias. Se usan unos portaobjetos especiales denominados cmaras de PetroffHausser. Para que la medida sea correcta es necesario que la densidad de clulas sea del orden de
105 por ml.
Medida del nmero de partculas usando contadores electrnicos de partculas. Estos sistemas no nos
indican si las partculas corresponden a clulas vivas o muertas; pero nos pueden dar una idea del tamao
de las partculas.
Medida de parmetros bioqumicos tales como la cantidad de ADN, ARN, protenas, peptidoglicano,
etc. por unidad de volumen de cultivo.
Medida de actividad metablica de las bacterias como que respiran producen una disminucin del
potencial redox del medio en que se encuentran como consecuencia del consumo de oxgeno (utilizacin
de colorantes sensibles a oxidacin-reduccin tales como el azul de metileno).
Mtodos fsicos: Impedancia (bactometer , bioMerieux),microcalorimetra, citometra de flujo.
Films secos (Petrifilm): Son pelculas deshidratadas de medios de cultivos generales o selectivos en las
que se deposita 1 ml de la muestra que rehidrata el medio. Tras la incubacin se hace el recuento.
Mtodo del nmero ms probable: Basado en series de diluciones y clculo estadstico del nmero de
bacterias presentes en las diluciones ms altas. Se puede hacer con 3 5 tubos. El mtodo es popular
aunque poco exacto.
Actividad de agua: Se denomina actividad de agua a la relacin entre la presin de vapor de agua del
substrato de cultivo (P) y la presin de vapor de agua del agua pura (P0). El valor de la actividad de agua
est relacionado con el de la humedad relativa (HR).
El valor de la actividad de agua nos da una idea de la cantidad de agua disponible metablicamente.
Cuando un microorganismo se encuentra en un substrato con una actividad de agua demasiado baja, su
crecimiento se detiene. Esta detencin del crecimiento no suele llevar asociada la muerte del
microorganismo, sino que ste se mantiene en condiciones de resistencia durante un tiempo ms o menos
largo.
Potencial redox: Nos indica la capacidad del substrato para aceptar o donar electrones, es decir sus
caractersticas oxidantes o reductoras. Uno de los factores que intervienen en el potencial redox, aunque
no el nico, es la concentracin de oxgeno [O2]. Hay microorganismos que requieren ambientes
oxidantes para crecer, mientras que otros necesitan ambientes reductores. El metabolismo de ambos tipos
de microorganismos presenta diferencias notables. El requerimiento de condiciones oxidantes o
reductoras no debe confundirse con la necesidad de presencia o ausencia de oxgeno para que se produzca
el crecimiento.
de
pirimidina
(en
-Si es muy intensa provoca fotooxidaciones en protenas y cidos nucleicos debido a la absorcin de
energa por molculas tales como riboflavinas, porfirinas o citocromos. Tambin puede generar Oxigeno
singlete.(1. Crecimiento microbiano: concepto y consideraciones generales, n.d.)
Bibliografa:
1. Crecimiento microbiano: concepto y consideraciones generales. (n.d.). Retrieved June 3, 2015, from
http://www.diversidadmicrobiana.com/index.php?
option=com_content&view=article&id=182&Itemid=225