PRACTICA N 5

DETERMINACIN DE TOXICIDAD

DONCENTES

ALUMNO

LIMA - PER
2014

I. INTRODUCCIN
Se entiende por "toxicidad" a la cantidad de una sustancia que, bajo un conjunto
especfico de condiciones, causa efectos detrimentales. La toxicidad indica la potencia de una
sustancia venenosa y no la afeccin producida por sta (concepto que corresponde a
"intoxicacin" o "envenenamiento"). La toxicidad se expresa como la cantidad de la sustancia
en mg/kg de peso vivo que origina efectos biolgicos determinados, en un tiempo dado y en
una especie establecida. Existen diversos indicadores de toxicidad, siendo uno de los ms
usados la "dosis letal 50" (LD50); este es un indicador estadstico de toxicidad aguda, el cual
seala la cantidad del txico que causa la muerte del 50% de los animales intoxicados. Con el
nombre de "LC50" ("concentracin letal 50") se proyecta el indicador anterior a la toxicidad de
un gas en el aire, aunque tambin se le suele referir al agua.
Es frecuente sealar la concentracin de un txico o la dosis administrada utilizando al
"ppm" (partes por milln) como unidad de medida. Al respecto debe recordarse que 1 ppm
equivale a 1 g/tonelada, 1 mg/kilogramo y a 1 ug/gramo. Es tambin frecuente referirse a ellos
en trminos porcentuales (%) y en numerosas ocasiones se hace necesaria la interconversin de
estas unidades. Para convertir ppm a % se correr la coma decimal 4 puestos a la izquierda; lo
inverso se realizar para convertir % a ppm. (Sachana, 2007).
OBJETIVOS:
Objetivo General
-

Determinar la toxicidad de un contaminante quimico

Objetivos Especficos
-

Determinar la concentracin letal (CL50) de dicromato de potasio en una especie sensible

Daphnia magna

II. MARCO TERICO

2.1.

Toxicidad.

Es la capacidad para producir dao a un organismo vivo, en relacin con la

cantidad o dosis de sustancia administrada o absorbida, la va de administracin y su
distribucin en el tiempo (dosis nicas o repetidas), tipo y severidad del dao, tiempo
necesario para producir este, la naturaleza del organismo afectado y otras condiciones
intervinientes.
La toxicidad es una cualidad intrnseca y relativa de todas las sustancias, las
cuales dependen de un conjunto de condiciones y circunstancias como son los procesos de
biotransformacin, as como los mecanismos de defensa del propio individuo, lo cual est
determinado por las caractersticas genticas de cada uno; es posible que tambin tengan
influencia otros factores internos y externos como son las circunstancias fisiolgicas del
individuo y participacin concomitante de otros compuestos qumicos.
El manejo y consumo de estas supone un riesgo que est dado por:
a. Las caractersticas fsico-qumicas de las sustancias.
b. Su potencialidad toxica (pT), o toxicidad intrnseca que est en razn inversa a las

cantidades precisas para provocar daos a los seres vivos.

c. La probabilidad de que sea adsorbida por el hombre, y la frecuencia con que esto pueda

ocurrir. De estos dos factores dependen el riesgo, o probabilidad de que se produzca un

efecto toxico.
Cuando un organismo recibe pequeas dosis de una sustancia procura adaptarse a ella, bien
sea incrementando su propia capacidad de biotransformacin (metabolismo) y excrecin o
incluso elevando, dentro de unos mrgenes, su umbral de sensibilidad para soportar el
toxico.

En el caso en que la dosis supere estas capacidades fisiolgicas de adaptacin, aparecern

modificaciones en los parmetros biolgicos.
2.2. Factores que modifican la toxicidad de una sustancia.
a. Va de administracin y absorcin.
b. Propiedades fsico-qumicas.
c. Distribucin y acumulacin en el organismo.
d. Variedad e integridad de los mecanismos de toxicacin y excrecin que posea

el organismo.
e. Salud previa del individuo.
f.

La selectividad sistmica del xenobitico y la importancia de los rganos blanco.

g. La susceptibilidad personal del individuo.

2.3. Clasificacin Toxicolgica

a. Intoxicaciones agudas. (24-48 horas). Leve. Moderada o severa.
b. Intoxicacin subaguda. Perodo de latencia de 2 a 4 semanas.
c. Intoxicacin subcrnica. 4 semanas 7 aos
d. Intoxicacin crnica. Mayor a 7 aos.

2.3.1. Toxicidad Aguda.

Una exposicin nica (sola) a una sustancia txica que puede causar el dao
biolgico severo o incluso la muerte; exposiciones agudas por lo general no son
caracterizadas con una duracin mayor a un da.
La toxicidad aguda tiene por objeto determinar los efectos de una dosis nica y muy
elevada de una sustancia.
2.3.2. Toxicidad Crnica.
Es la capacidad de una sustancia para producir efectos adversos consecuentes a
una exposicin prolongada; estos pueden aparecer durante o despus de interrumpida la

exposicin, estos efectos o cambios estn relacionados con cambios en el metabolismo,

crecimiento o capacidad de supervivencia (muerte y reduccin de la capacidad reproductora).
2.3.3. Toxicidad Subcrnica.
Son los efectos adversos ocasionados por administracin o exposicin repetida de
una sustancia durante un corto periodo de tiempo, usualmente el 10% de la vida (al menos
90 das en animales).
2.4. Ensayos de toxicidad
Los ensayos biolgicos son constituidos como herramientas de diagnstico
adecuadas para determinar el efecto de agentes fsicos o qumicos sobre unos organismos de
prueba bajo condiciones experimentales especficas y que son controladas por el los
experimentadores. Estos efectos pueden ser tanto de inhibicin como de magnificacin y
son evaluados gracias a la reaccin de los organismos, tales como muerte, crecimiento,
proliferacin, multiplicacin, cambios morfolgicos, fisiolgicos o histolgicos.
Los efectos pueden manifestarse en diferentes niveles, desde estructuras subcelulares
o sistemas de enzimas, hasta organismos completos, poblaciones o comunidades.
Considerando que el efecto toxico sobre los sistemas biolgicos es ejercido por la
accin combinada de todas las sustancias nocivas presentes en el medio, incluso aquellas
que no son toxicas en s, pero que afectan las propiedades qumicas o fsicas del sistema y
consecuentemente las condiciones de vida de los organismos.
En los sistemas acuticos es caracterstico el caso de sustancias que agotan el
oxgeno o que son coloreadas, o que simplemente impiden la propagacin de la luz, por lo
que los ensayos biolgicos tambin incluyen el efecto de los organismos sobre las sustancias,
como la degradacin microbiana o biodegradabilidad.

Los ensayos de toxicidad se emplean para diferentes fines (establecimiento de

concentraciones aceptables de diferentes parmetros, determinacin del cumplimiento de la
legislacin, etc.) y proporcionan resultados tiles para la proteccin de la salud pblica y de
la vida acutica frente al impacto causado por la introduccin de contaminantes en las
aguas. A continuacin la tabla 1, muestra una lista de sustancias no deseables y txicas
que puede contener el agua:
De forma general, los ensayos, tambin llamados pruebas de toxicidad, pueden ser definidos
de acuerdo con:

Su duracin; corto, mediano o largo plazo.

El mtodo implementado para incorporar la muestra al sistema de ensayo;

estadstico, con renovaron, de flujo continuo.

El propsito para el cual son utilizados; control de calidad de vertimientos,

evaluacin de compuestos especficos, toxicidad relativa, sensibilidad relativa, etc.
Tabla 1. Sustancias no Deseables y Toxicas Incluidas en Estndares de Agua

SUSTANCIAS
NO DESEABLES Y TOXICAS
INCLUIDAS
SUSTANCIAS
SUSTANCIAS
Nitratos
Organoclora
Arsn
Antim
Nitritos
Hierro
Beril
Seleni
Amonio
Manganeso
Cadm
Pestici
Sulfuro de
Cobre
Cianu
HAP
Hidrocarburos
Zinc
Cro
Fenoles
Fosforo
Merc
Boro
Flor
Nqu
Surfactantes
Bario
Plom
Fuente: www.miliarium.com.
A pesar del limitado alcance de la informacin que proviene de los ensayos de
toxicidad para su extrapolacin a escala ambiental, los estudios con organismos en
laboratorio, en condiciones controladas y estandarizadas para la evaluacin de respuestas, se

han convertido en fuentes de informacin importantes para la evaluacin ecolgica de los

efectos de los contaminantes txicos.
Debido a que no es viable econmicamente determinar la toxicidad especfica de
cada una de las sustancias txicas que pueden aparecer en el agua, se efecta el ensayo de
toxicidad del efluente global mediante la utilizacin de organismos acuticos y la
observacin de respuestas.
Tras la exposicin del organismo o grupos de organismos a distintas concentraciones
de la muestra problema, se miden y registran los efectos biolgicos observados en cada uno
de los grupos tratados y en los grupos control y, posteriormente, se efecta un anlisis
estadstico de los datos obtenidos. La cantidad de txico suministrado se puede expresar de
dos formas:
a. Concentracin: Masa de txico por unidad de volumen de agua.
b. Dosis: Cantidad de txico que penetra en el organismo por unidad de masa

de tejido o de ser vivo sobre el que acta.

Tambin se puede determinar la concentracin a la cual no se observa efecto
(Non Observable Effect Concentration, NOEC) y la concentracin ms baja a la
cual se observa efecto (Low Observable Effect Concentration, LOEC).
La toxicidad que experimentan los organismos tras los ensayos puede ser de dos tipos:
a. Toxicidad Aguda
b. Toxicidad Crnica.

2.5. Bioensayos.
El medio acutico es quien frecuentemente recibe las consecuencias de
las actividades antrpica, entre ellas la actividad industrial. En los efluentes se
encuentran una serie de sustancias contaminantes, tanto orgnicas como inorgnicas,
que ponen en riesgo la salud del ecosistema. Los bioensayos de laboratorio posibilitan
tener un primer acercamiento al posible impacto que produce un toxico aislado o una
mezcla de ellos.
Los bioensayos de toxicidad con agentes contaminantes en organismos
vivos bajo condiciones de laboratorio, se han incrementado en estos ltimos
tiempos debido a la brevedad con que se obtiene la informacin sobre las dosis
letales y subletales (CL50), que afectan negativamente organismos vivos en los
ambientes marinos, estuarinos y dulceacucolas.
El uso de bioensayos para la evaluacin de toxicidad de sustancias liberadas
al medio a travs de efluentes, ha llevado a la utilizacin de biomonitores propios
de los ambientes evaluados, lo cual favorece indirectamente la preservacin de la
biodiversidad local. Sin embargo, la variabilidad en la aplicacin de las tcnicas
experimentales

para

el mantenimiento

de

organismos

silvestres

afecta

la

interpretacin y comparacin de los resultados entre laboratorios, por lo que se hace

necesario desarrollar metodologas estandarizadas para establecer condiciones
controladas.
Utilizar organismos provenientes directamente del hbitat natural puede
distorsionar los resultados obtenidos por fuentes de variabilidad no previstas, como
nutricin, dinmica de la poblacin, estrs por depredacin, etc. Estas variables
pueden ser controladas o eliminadas con las poblaciones de laboratorio; adems, el
entrecruzamiento consanguneo que ocurre a lo largo del tiempo en esas poblaciones,
resulta en una considerable reduccin de la variabilidad gentica.
Por otra parte, la causa de la complejidad del medio ambiente acutico y de
las comunidades biolgicas que lo integran hace difcil establecer el grado de
deterioro que afecta a las especies o comunidades acuticas. Por esta razn es

conveniente realizar bioensayos utilizando organismos vivos en condiciones

controladas de laboratorio. Sin embargo, el objetivo primordial de un bioensayo es
reflejar la realidad de cmo afectara a los organismos vivos en su medio natural y
para ello es recomendable paralelamente investigar continuamente las comunidades
en su propio hbitat (Villamar, 1996).
2.6. Dosis Letal 50 (LD50).
Para referirse a la toxicidad de las sustancias, se establecen las dosis
precisas para producir la muerte tras una sola absorcin, es decir que para originar
una intoxicacin aguda letal.
Esta dosis letal (DL) se calcula por experimentacin con suficiente numero
de animales para obtener valores de significacin estadstica; as se calculan la DL
mnima que mata a un solo individuo, la DL50, o media letal para el 50% de los
ejemplares, la DL-100 que intoxica mortalmente a todos los individuos, y dosis
intermedias como la DL-25, DL-75, etc.
Sin embargo, se ha observado que este parmetro es insuficiente para
calificar la toxicidad de las sustancias, porque productos de escasa toxicidad aguda,
con altas DL- 50, resultan muy peligrosos cuando se adsorben de forma crnica.
2.7. Concentracin efectiva 50
(EC50.)
Concentracin del efluente que produce efectos negativos apreciables en un
porcentaje "x" de la poblacin de ensayo. Se usa el CE50 o EC50, que sera la
concentracin efectiva que afecta al 50 % de la poblacin.

2.8. Concentracin Letal 50 (LC50.)

Es la concentracin inhalada de un producto que es capaz de provocar la
muerte del 50% de los individuos de una muestra, en un perodo de tiempo. Se

expresa en partes por milln (PPM) para gases y vapores, en miligramos por metro
3
cbico (mg/mt ) para polvos. 11

Al encontrar la relacin dosis respuesta, se puede establecer una curva de

toxicidad, que permita un anlisis estadstico de los resultados para as obtener la
concentracin letal media (CL50) de los organismos prueba, expresada en partes por
milln (ppm).
Unos efectos nocivos evaluados por medio de ensayos biolgicos
normalizados pueden indicar niveles de peligrosidad trasladable y asimilable a
organismos que forman parte de los sistemas naturales y la biocenosis,

por lo

tanto la forma correcta de realizar los bioensayos es mediante el empleo de la

respuesta cuantitativa, es decir, considerando solo dos resultados experimentales
muerto o vivo, a partir de esto se puede determinar la relacin entre la concentracin
y el efecto, en porcentaje. Como se dijo anteriormente los datos cuantitativos
permiten la determinacin estadstica de la posicin e inclinacin de la curva de
concentracin mortalidad para un periodo de exposicin. Con esto se puede
evaluar el peligro y riesgo generado por sustancias de inters sanitario que se
encuentran en el medio donde vive el organismo prueba. A continuacin en la grfica
1 se muestra la relacin dosis respuesta que puede sufrir cualquier organismo a
ciertas concentraciones de contaminantes presentes en su medio, los cuales producen
alteraciones en su hbitat.
Cuando se implementan pruebas de toxicidad, se debe realizar la
estandarizacin de las mismas, en la cual se establece la sensibilidad de las especies
y su secuencia de efecto frente a un txico de referencia, segn las repeticiones
del experimento. Con esto se certifica que la respuesta de la poblacin en
estudio se debe al efecto del txico de referencia y no a variaciones de
sensibilidad de los organismos o a fallas operacionales en la aplicacin del mtodo,
elaborando as cartas de vigilancia, teniendo en cuenta la precisin y exactitud que
se deben y pueden obtenerse en los resultados generados por un determinado
bioensayo.

2.9. Tipos de organismos empleados en los bioensayos.

La seleccin de organismos para bioensayos debe basarse
en:
-

Los objetivos del programa toxicolgico.

La informacin disponible sobre los posibles organismos.

Las caractersticas de las especies.

Las instalaciones y equipo del laboratorio.

El nivel de capacitacin de los tcnicos.

Los bioensayos acuticos pueden aplicarse a un amplio rango de programas,

sin embargo, es importante entender claramente todas las facetas del proceso de
seleccin a fin de disear programas que se acercarn efectivamente a los objetivos.
2.10. Ventajas de los organismos cultivados en el laboratorio de
bioensayos.
Disponibilidad en forma inmediata de organismos aclimatados, saludables,
que han sido criados bajo las mismas condiciones. La respuesta de los organismos
para bioensayos a la sustancia txica est influenciada por factores tales como su
edad (los animales jvenes son usualmente ms sensibles), dieta (los animales
bien alimentados brindan respuestas ms consistentes), presin (los organismos
alterados o presionados son ms sensibles) y condiciones fsicas como temperatura,
luz y el nivel de oxgeno disuelto en el agua.
Los organismos para bioensayos que se cultivan en el laboratorio representan
una fuente predecible de organismos de prueba de una edad conocida. El uso de
condiciones estndares de laboratorio y de alimentacin asegurar que todos los
organismos de prueba respondern a las sustancias txicas en una forma similar con
el paso del tiempo. Esta es una caracterstica importante cuando se comparan los
resultados de diferentes laboratorios.

2.10.

Desventajas de los organismos cultivados en el laboratorio de

bioensayos
Muchos organismos con ciclos

complejos de vida o informacin

insuficiente sobre su cultivo no pueden ser cultivados en el laboratorio. Por lo tanto,

la variedad de organismos est ms limitada cuando se usan los que han sido criados
en el laboratorio.
Los

requerimientos

sustancialmente,

de

cultivo

para

organismos

acuticos

varan

an entre especies estrechamente relacionadas. Es necesario

conocer el alimento ptimo, la temperatura, el ciclo de luz y el agua a fin de

mantener cultivos continuos en el laboratorio. Esta informacin requiere de aos de
investigacin. Aunque muchas algas, invertebrados y especies de peces se han usado
como organismos para bioensayos, slo existe informacin disponible sobre algunas
especies,

que

permite

un

cultivo

satisfactorio

de

laboratorio.

Falta

de

representatividad a las condiciones y organismos en la comunidad a ser probada.

El aspecto negativo de los organismos estndares criados en el laboratorio es
que ellos no son necesariamente representativos de la comunidad acutica o de las
condiciones de salud de los organismos de cada lugar. Por lo tanto, si el objetivo es
estudiar un efluente especfico o la descarga a un ro o lago, entonces deben
considerarse los organismos recolectados en el campo como una alternativa.
2.11.Ventajas de los Organismos Recolectados en el Campo para
Bioensayos.
Hay circunstancias en las que los organismos recolectados en el campo son
apropiados.
-

Puede recolectarse el organismo directamente del campo, adems esto ocurre

en poblaciones grandes, monoespecficas.

Estn los organismos disponibles durante todo el ao o slo durante ciertas

estaciones.

Se pueden desarrollar exmenes con varias especies en la misma cmara

de prueba, adems, los organismos que son compatibles, tales como caracoles,
almejas, peces y plantas acuticas pueden incluirse en la misma cmara de
prueba, permitiendo un estudio simultneo de efectos mltiples.

2.12.

Desventajas de los Organismos Recolectados en el Campo para

Bioensayos.

La alta presin y mortalidad frecuentemente estn asociadas con los

procedimientos de recoleccin y transferencia.

Muchos organismos pueden morir antes o durante la prueba y otros pueden

ser inusualmente sensibles a sustancias txicas como resultado de la presin
asociada con los procedimientos de recoleccin y transferencia. Las muertes
en los controles pueden invalidar la prueba.

La disponibilidad de los organismos puede estar limitada.

Muchas especies no abundan durante todo el ao o tienen varios cambios en

su ciclo de vida.

La edad, salud y condiciones de cultivo de los organismos son desconocidas.

No existe manera de obtener organismos "estandarizados" del

campo y frecuentemente hasta la edad es desconocida.
En general, es preferible utilizar organismos criados en el laboratorio en vez de

los recolectados en el campo porque los exmenes estandarizados requieren de un

abastecimiento siempre disponible de organismos en buena salud provenientes de
cultivos de condiciones conocidas y constantes. Los bioensayos hechos en el
laboratorio usando organismos recolectados en el campo han sido menos
satisfactorios, con muy pocas excepciones. Los organismos recolectados en el
campo son ms satisfactorios cuando el laboratorio est cerca al lugar de
recoleccin y el abastecimiento de agua desde all est siempre disponible.
El uso de ms de una especie, permitir que el bioensayo, sea de
toxicidad aguda o crnica, una determinacin ms cuidadosa de toxicidad porque

los organismos acuticos varan en sus respuestas a las sustancias txicas. Por
ejemplo, los peces pueden ser mucho ms sensibles que los invertebrados a una
sustancia qumica, mientras que puede suceder lo contrario con otra sustancia
qumica. La tabla 3 presenta los principales grupos de organismos para bioensayos e
indica su adaptabilidad al cultivo de laboratorio versus la recoleccin de campo y la
cantidad de informacin disponible en los mtodos de cultivo y prueba.
Tabla 2. Adaptabilidad de los Organismos como Especies para
Bioensayos.
-

Adaptabilidad del
Cultiv
organismo

Comnmente usado

o de

Recoleccin de

como un organismo

labora

Muy
difcil de
campo

1. Algas

Excelen

2. Protozoos

te
Excelen

puro
Muy cultivo
difcil de

te

recolectar

3.

recolectar,

para bioensayo
S
Muy limitado

a. Plantnicos

Invertebrados

Muy difcil de
1.

Bueno

Rotferos

recolectar,

Limi

cultivo
puro
Alta
tasa de

tado

2.

Excelen

mortandad

Cladceros

te

3.

Median

mortandad

Limi

4.
Coppodo

oBueno

Bueno
despus
de la

S
tado

Alta tasadedela
despus

b. Bnticos

Camarones
1.

Median

Mediano

Limitado

2.
Insectos
Anlidos

oBajo

Mediano

S
S

3.

Bueno

Mediano

4.
Moluscos

Mediano

Crustceos

Alta tasa de

4. Peces

Excelen
te

mortandad

despus de la

Fuente: Manual de evaluacin y manejo de sustancias toxicas en aguas

Superficiales,

III.
-

MATERIALES

Muestra orgnica - especies de Daphnia Magna.

Solucin de Dicromato de Potasio (K2Cr2O7) de 200 ppm
Tubos de ensayos de 10 mL.
Goteros
Pipetas
Agua destilada
IV.

METODOLOGA

1. Seleccionar individuos de Daphnia magna adultas, y colocarlos en 11 tubos (10x

tubo) de ensayos diferentes; 10 pruebas y un 1 blanco.
2. Aadir solucin de Dicromato de Potasio a 200ppm de concentracin y agua
destilada en los 10 tubos de ensayo hasta obtener soluciones de 1 -20 ml de
concentracin respectivamente, segn lo indicado en la Cuadro N 01.

Cuadro N3: Concentracin de soluciones para el ensayo

N Test
Blanco
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Volumen de K2Cr2O7
(mL)
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20

Volumen de agua (mL)

20
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0

3. Tomar nota de la hora de inicio, a partir del cual se observar los efectos de la
toxicidad (inmovilizacin o muerte) de los individuos y determinar CL50.

PREPARACION DE DILUCIONES

V. RESULTADOS
Preparacin de la batera de tubos de ensayo, conteniendo concentraciones de dicromato
de potasio (K2Cr2O7)

Seleccin de las muestras de daphnia

El control del ensayo se realiz a los siguientes intervalos de tiempos:

1era lectura 1 hora
2da lectura 3 horas

3era lectura 24 horas

El cuadro siguiente muestra los resultados:
CONC(K2Cr2O7) ml

1 hora

3 horas

24 horas

ENSAYO

10

10

10

10

10

10

10

12

10

14

10

16

10

18

10

20

10

La DL50 se obtuvo de la lectura realizada a 24 horas de exposicin

USANDO EL PROGRAMA SPEARMAN SE OBTUVO LOS SIGUIENTE

RESULTADOS
Clculos del parmetro
Parmetro
Media
Desv.Est.

Error
estndar
2,04448
4,94212

Estimado
20,1979
0,481828

IC normal de 95,0%
Inferior
Superior
16,1908
24,2050
0,0000000 259225818

Tabla de percentiles
(Para los clculos se supone que la respuesta natural es fija)
Perc con

Porcentaje
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
20
30
40
50
60
70
80
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99

respuesta
natural
9,91
10,82
11,73
12,64
13,55
14,46
15,37
16,28
17,19
18,1
27,2
36,3
45,4
54,5
63,6
72,7
81,8
90,9
91,81
92,72
93,63
94,54
95,45
96,36
97,27
98,18
99,09

Error
estndar
9,46774
8,12097
7,26657
6,62390
6,10120
5,65634
5,26633
4,91717
4,59967
4,30745
2,13927
0,603287
0,811856
2,04448
3,29182
4,62916
6,19552
8,36864
8,66113
8,97888
9,32828
9,71851
10,1636
10,6865
11,3294
12,1840
13,5310

Percentil
19,0770
19,2083
19,2917
19,3543
19,4053
19,4487
19,4868
19,5209
19,5519
19,5804
19,7924
19,9452
20,0758
20,1979
20,3199
20,4505
20,6034
20,8154
20,8439
20,8749
20,9089
20,9470
20,9904
21,0414
21,1041
21,1874
21,3188

IC normal de 95,0%
Inferior Superior
0,520539
37,6334
3,29151
35,1251
5,04943
33,5339
6,37173
32,3370
7,44721
31,3635
8,36252
30,5350
9,16498
29,8086
9,88339
29,1583
10,5367
28,5670
11,1379
28,0228
15,5995
23,9852
18,7628
21,1276
18,4846
21,6670
16,1908
24,2050
13,8681
26,7718
11,3775
29,5235
8,46039
32,7464
4,41312
37,2176
3,86838
37,8194
3,27658
38,4732
2,62585
39,1920
1,89906
39,9949
1,07014
40,9107
0,0962433
41,9866
-1,10107
43,3093
-2,69274
45,0676
-5,20148
47,8390

El resultado indica que se requiere una concentracin de 20.1979 ml de dicromato de

potasio (K2Cr2O7) para la DL50
VI.
-

CONCLUSIONES

La DL50 y CL50, estn sujetas a las concentraciones, tiempo y masa de los

individuos expuesto al toxico.

En el caso del ensayo, las daphnias muestran tolerancias a bajas concentraciones

del toxico utilizado.

VII.

CUESTIONARIO

1. Qu significa CL50, EC50 y DL50?

CL50: Concentracin Letal (CL): Es la concentracin de txico estimada que

produce la muerte de una proporcin especfica de los organismos de prueba. Se
define como la concentracin letal media (CL50), que corresponde a la
concertacin que mata al 50% de los organismos expuestos en un determinado
periodo de tiempo. la CL50 se expresa en mg / litro

DL50:

La Dosis letal 50% (DL50) es aquella concentracin de

txico, que al ser administrada por cualquier va de ingreso

en un periodo de

tiempo definido mata el 50% de la poblacin de insectos evaluada. Usualmente se

expresa con una cantidad de qumico administrado (miligramos) por 100 gramos (o
kilogramos) del peso corporal del animal
-

EC50: La EC50 se define como la concentracin de una sustancia en un medio que

se espera produzca un cierto efecto en el 50% de los organismos testeados de una
poblacin bajo ciertas condiciones.

2.

Qu significa partenognesis?
La partenognesis es una forma de reproduccin basada en el desarrollo de
clulas sexuales femeninas no fecundadas, que se da con cierta frecuencia
en platelmintos,rotferos, tardgrados, crustceos, insectos, anfibios y reptiles,

ms

raramente en algunos peces y, excepcionalmente, en aves. La partenognesis fue

descubierta por Charles Bonnet. Jan Dzierzon fue el primero en descubrir la
partenognesis de los znganos de las abejas
3. Qu otros organismos pueden utilizarse para la determinacin de la
toxicidad Aguda?
En los ensayos ectoxicolgicos pueden emplearse diferentes organismos, pueden
ser estos considerados como indicadores de calidad u otros, como muestra la siguiente
tabla:

Adaptabilidad del organismo

Organismos
para
bioensayos

Cultivo de
laboratorio

Recoleccin de campo

1. Algas

Excelente

Muy difcil de recolectar, cultivo

puro

2. Protozoos

Excelente

Muy difcil de recolectar

3. Invertebrados

Muy difcil de recolectar, cultivo

puro

5. Rotferos

Bueno

6.
Cladceros

Excelente

Alta tasa de mortandad despus

de la recoleccin de campo

7.
Coppodos

Mediano

Alta tasa de mortandad despus

de la recoleccin de campo

8.
Camarones
9. Anlidos

Bueno

Bueno

Mediano

Mediano

10. Insectos

Bajo

Mediano

11.
Moluscos
12. Crustceos

Bueno

Mediano

Bajo

Mediano

13. Peces

Excelente

Alta tasa de mortandad despus

de la recoleccin de campo

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Davila C.; Rincon N. Diseo de un sistema a nivel piloto para la remocin del
hierro y el manganeso por debajo de la concentracin letal media (cl 50- 48)
para

daphnia magna. Tesis de Grado para Optar al Ttulo de Ingenieros

Ambientales y Sanitarios. Bogota, 2009.

Sachana M, Hargreaves AJ. Toxicological testing: in vitro and in vivo models.
En: Veterinary Toxicology: Basic and Clinical Principles (Gupta RC, ed.)
Academic Press, New York, 2007.