UNIVERSIDAD NACIONAL DE EDUCACION

LA CANTUTA
METODOS CUALITATIVOS PARA LA IDENTIFICACION DE
CARBOHIDRATOS (MONOSACARIDOS, DISACARIDOS Y
POLISACARIDOS)

1. RESUMEN
Las propiedades bioqumicas y las reacciones caractersticas de las
diferentes biomolculas dependen de
los distintos grupos
funcionales que las constituyen. En esta prctica se analiz una de
las principales macromolculas (Carbohidratos) y se realizaron
algunas reacciones qumicas especficas que permiti la
identificacin de dicho grupo.
2. INTRODUCCION
Los carbohidratos tambin llamados azcares, osas o sacridos,
son polihidrxialdehidos o polihidroxicetonas o compuestos
polimricos que por hidrlisis producen polihidroxialdehidos y
polihidroxicetonas. Segn el nmero de unidades de azcares
sencillos que posean se clasifican en:
MONOSACRIDOS o azcares sencillos, que a su vez pueden
ser ALDOSAS cuando contienen el grupo aldehdo o CETOSAS
cuando contienen el grupo cetona. Los monosacridos
naturales pertenecen a la serie D de los azcares y pueden
tener entre tres y hasta siete tomos de carbono.
DISACRIDOS que estn formados por dos monosacridos
unidos entre s por enlaces glucosdicos.
OLIGOSACRIDOS que tienen entre tres y diez monosacridos
unidos tambin por enlaces glucosdicos.
POLISACRIDOS que son polmeros naturales con varios miles
de unidades de azcar sencillo ligadas entre s. De acuerdo
con lo anterior, adems de reconocer si un compuesto
pertenece a la familia de los carbohidratos, es necesario
diferenciar si se trata de un monosacrido tipo aldosa o
cetosa, si es fcilmente oxidable o no, es decir si es un
AZCAR REDUCTOR o no lo es, si es de cinco tomos de
carbono (pentosa) o de seis tomos de carbono (hexosa), si
es disacrido o polisacrido.

Una secuencia que permite hacer el reconocimiento

diferenciacin de carbohidratos se esquematiza en:

Ensayo de Molish: Este ensayo es un ensayo para

reconocimiento general de carbohidratos en el que los
polisacridos y disacridos se hidrolizan con cido sulfrico
concentrado hasta monosacridos y se convierten en
derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales
reaccionan con a-naftol formando un color prpura violeta.
Ensayo de Benedict: El ensayo de Benedict permite el
reconocimiento de carbohidratos reductores. Al igual que el
reactivo de Felhing, el de Benedict contiene ion cprico en
medio alcalino que se reduce hasta xido cuproso en
presencia de azcares con el hidroxilo hemiacetlico libre.
Ensayo de Barfoed: Esta prueba permite diferenciar entre
monosacridos y disacridos reductores, tambin contiene
ion cprico que se reduce hasta xido cuproso ms
rpidamente con los monosacridos que con los disacridos.
Ensayo con Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una
mezcla de yodo y yoduro, permite reconocer polisacridos,
particularmente el almidn por la formacin de una
coloracin azul-violeta intensa y el glicgeno y las dextrinas
por formacin de coloracin roja.
Ensayo de Seliwanoff: Este ensayo es especfico para cetosas
y se basa en la conversin de la cetosa en 5-hidro-metilfurfural y su posterior condensacin con resorcinol formando
as complejos coloreados.
Ensayo de Bial: El reactivo de Bial contiene orcinol en cido
clorhdrico, el cual forma complejos de coloracin slo con las
pentosas.
A travs de esta prctica se logro la identificacin por mtodos
colorimtricos cuantitativos de carbohidratos: monosacridos,
disacridos y polisacridos.

3. MATERIALES Y METODOS

12 tubos de ensayo
Pipeta de 10 o 5 ml
Pipeta de 1 ml
Estufa para bao de Maria
microscopio

Reactivos:
Molish
Barfoed
Bial
Seliwanoff
Fenilhidrazina
H2SO4

Mediante los siguientes procedimientos se analiz un carbohidrato

(sustancia problema), continuando con el estudio de Hidrlisis cida
de disacridos respectivamente (Maltosa y Sacarosa).
3.1.

Anlisis para monosacridos, disacridos y polisacridos.

Sustan
cia
proble
ma ml
1

Prueba

Volum
en

Procedimiento

Molish

2 gotas

Barfoed

2.5 ml

Bial

1.5 ml

Seliwano
ff

2 ml

Fenilhidra
zina

0.5 ml

Se llevo a bao de Mara por 10

minutos, y se observaron resultados
Se mezclo y se llevo a bao de Mara,
una vez apareci el precipitado rojo, se
sacaron del calor y se anotaron los
resultados
Se llevo a bao de Mara durante 3 min
y se observaron los resultados.
Se llevo a bao de Mara por 10
minutos, y se observo la coloracin que
indicaba la presencia de pentosa
Se llevo a bao de Mara durante 10 min
y posteriormente se enfri el tubo en
agua y se dejo reposar durante 5 min,
para identificar bien los cristales se
examinaron con ayuda de un
microscopio

3.2.

tub
o

1
2
3
4

Hidrlisis cida de disacridos.

soluci
n

Maltos
a
Sacaro
sa
Maltos
a
Sacaro
sa

disacr
ido (ml)

HCl
1N
(ml)

H2
O
(ml
)

Neutral
izacin
Se
Hirvieron
simultne
amente a
bao de
Mara +

0.5 ml de
benedict
y se llevo
a bao de
Mara por
2 min
7 gotas
de
NaOH
1N
7 gotas
de agua

Se observ y se registr los resultados obtenidos.

4. RESULTADOS Y DISCUCIONES
4.1.

Anlisis para monosacridos, disacridos y polisacridos.

Identificacin de carbohidrato
Cambios
Resultado
Anillo violeta
carbohidrato
Precipitado rojo antes
Monosacridos
de los 6 minutos
Bial
No cambio su color
Hexosa
naranja
Seliwano
Leve coloracin
Glucosa o
f
galactosa
fenilhidra
Cristales en forma de
GLUCOSA
zina
palma
Prueba
Molish
Barfoed

Tabla1

Se
realiz la prueba con el reactivo de Molish y se observo una
reaccin con la solucin problema. Por lo tanto se infiri que este
reactivo sirve para la identificacin general de carbohidratos

(hidrlisis de polisacridos y disacridos con el cido sulfrico hasta

monosacridos).
Seguidamente se aplic el reactivo de Barfoed a la solucin
problema y se obtuvo que la solucin en estudio correspondi a un
Monosacrido, puesto que no tardo ms de 6 minutos en
presentarse un precipitado rojo; esto se debe a la rapidez con que
el cido cprico es reducido a oxido cuproso. (Mayor rapidez de
oxidacin en presencia de monosacridos que en presencia de
disacridos).
Despus de esto, se mezclo la solucin problema con el reactivo de
Bial y no se percibi ningn cambio de coloracin, lo cual indico
que la solucin problema era una hexosa. (Este reactivo slo toma
coloracin en presencia de pentosas).
Cuando se realiz la prueba con Seliwanoff, se determin solo una
leve coloracin en la solucin, lo cual evidenci la ausencia de
grupos cetonicos, por lo que se poda tratar de Glucosa o Galactosa
(solucin problema).
Para finalizar se realiz la mezcla de solucin problema con el
reactivo de fenilhidrazina y se logr demostrar que nos
encontrbamos en presencia de un azcar reductor GLUCOSA.

4.2.

Hidrlisis cida de disacridos.

Hidrolisis acida de carbohidratos

Disolucin de
Cambio observado
disacrido
Maltosa (HCl-NaOH)
Rojo ladrillo
Sacarosa (HCl-NaOH)
Naranja ladrillo
Maltosa (Agua)
Naranja zanahoria
Sacarosa (Agua)
No cambio color (verde claro)

Tabla2

El fundamento de esta reaccin radic en que en un medio alcalino

(NaOH), el in cprico (otorgado por el sulfato cprico) fue capaz
de reducirse por efecto del grupo aldehdo del azcar (CHO) a su
forma de Cu+. Este nuevo ion se observ como un precipitado rojo
ladrillo correspondiente al xido cuproso (Cu2O).
El medio alcalino facilit que el azcar se tornara a su forma lineal,
puesto que el azcar en solucin forma un anillo piransico. Una

vez que el azcar se encontr linealmente, su grupo aldehdo pudo

reaccionar con el ion cprico en solucin.
En este ensayo se observo que la Maltosa fue capaz de dar
positivo. Esto ocurri por las condiciones en que se realiz la
prueba: en un medio alcalino caliente este disacrido
se tautomeriza a glucosa (que es capaz de reducir al ion cprico).
La sacarosa (enlace (1 2) O), es un disacrido que no posee
carbonos anomricos libres puesto que estn siendo utilizados en
el enlace glucosdico, por lo que carece de poder reductor. Sin
embargo, en presencia de HCl y en caliente, la sacarosa se
hidroliza, es decir, incorpora una molcula de agua y se
descompone en los monosacridos que la forman, glucosa y
fructosa, que s son reductores. La prueba que se realiz demostr
la hidrlisis de este disacrido dando un resultado positivo:
aparicin de un precipitado naranja ladrillo, lo cual demuestra que
se rompi el enlace O-glucosdico de esta.
5. CONCLUSIONES
1. Monosacridos como la glucosa y disacridos como la
maltosa a excepcin de la sacarosa son azucares reductores.
2. La maltosa presenta en su estructura el OH hemiacetlico por
lo que es un azcar reductor, es decir tienen su OH
anomrico libre, y stos son los que dan positivo en la prueba
de Benedict.
3. La sacarosa no es un azcar reductor, pero en presencia de
HCl (medio cido caliente) esta puede hidrolizarse a sus
monosacridos que la componen (Glucosa- Fructosa) lo que
da positivo en la prueba de Benedict.
4. En la reaccin con el cido sulfrico los disacridos y
polisacridos se hidrolizan logrando la identificacin de los
monosacridos que los componen.
6. PREGUNTAS
1. Cules son
estudiadas

las

aplicaciones

prcticas

de

las

pruebas

Ayudan a la determinacin especfica de carbohidratos en

general sin importar si son monosacridos, disacridos o
polisacridos (Molish). Las dems pruebas son usadas para la
determinacin especifica de azucares segn sus grupos
funcionales y el nmero determinado de sus carbonos.
2. Escriba la glucosa en forma de silla

3. Defina los siguientes trminos: carbono anomrico, centro

quiral, levorrotatorio.
Carbono anomrico: hace referencia al carbono carbonlico
que se transforma en un nuevo centro quiral tras una
ciclacin hemicetal o hemiacetal.
Centro quiral: es un tomo unido a cuatro sustituyentes
diferentes. Una molcula que posee. Un centro quiral tiene
una imagen especular no superponible con ella, denominada
enantimero.
Levo rotatorio: (levo: griego, al contrario) o levgiro Se
denomina as a los monosacridos que poseen actividad
ptica y desvan el plano de la luz polarizada hacia la
izquierda, en sentido opuesto a las manecillas del reloj, y se
indica con el signo (-) o la letra l.
4. Dibuje los monosacridos glucosa, galactosa, ribosa y
fructosa, clasifquelos segn el nmero de tomos de carbono
y la funcin principal.

Hexosa
s
Glucosa

Galacto
sa

Fructos
a

Funcin
es la fuente principal de
energa de las clulas,
mediante la degradacin
catabolica
La galactosa se convierte en
glucosa en el hgado e
intestinos, de manera que sirva
de combustible metablico
para las clulas. Es sintetizada
en las glndulas mamarias para
la produccin de lactosa.
Adems es constituyente de
glucolipidos y glucoproteinas.
La fructosa se convierte en
glucosa en el hgado e
intestinos, de manera que sirva
de combustible metablico
para las clulas.

Pentos
a

funcin

Ribosa

Principal
fuente
de
energa
para el
corazn

5. Efectu un enlace hemiacetalico y uno hemicetalico, escriba

las diferencias entre ambos enlaces.

El enlace hemiacetalico se forma por reaccin entre el

carbonilo de un grupo cetona con un grupo hidroxilo de un
alcohol. Y el enlace hemicetalico se da entre el carbonilo de
un grupo aldehdo con un hidroxilo de un alcohol.
6. Escriba las funciones: aldehidica, cetonica, alcohlica, acida,
colquelas en orden de reactividad y explique el por qu de
ese orden.

7. Explique en qu consiste la hidrlisis acida de disacridos

Disacridos: (ejemplo, la sacarosa), producen dos
molculas de monosacrido por hidrlisis. Rompimiento de
enlace glucosidico.
La sacarosa (enlace (1 2) O), es un disacrido que no
posee carbonos anomricos libres puesto que estn siendo
utilizados en el enlace glucosdico, por lo que carece de
poder reductor. Sin embargo, en presencia de HCl y en
caliente, la sacarosa se hidroliza, es decir, incorpora una
molcula de agua y se descompone en los monosacridos
que la forman, glucosa y fructosa, que s son reductores, lo
cual demuestra que se rompi el enlace O-glucosdico de
esta.

8. Escriba y compare las formulas de la maltosa y la trealosa.

La maltosa resulta de la unin de dos glucosas de

manera que el carbono anomrico de una se une al
grupo -OH en el carbono 4 de otra, quedando la
primera de ellas en configuracin a-. Por eso el nombre
sistemtico de la maltosa es a-D-glucopiranosil- (1,4)D-glucopiranosa. Al quedar el carbono anomrico libre
en la segunda, la maltosa tendr propiedades
reductoras y formas anomricas a- y b-.
La trehalosa es un disacrido formado por dos glucosas
unidas por su carbonos anomricos respectivos. Al no
quedar ningn carbono anomrico libre, la trehalosa
recibe
el
siguiente
nombre
sistemtico: a-Dglucopiranosil -a-D-glucopiransido. Obsrvese el
sufijo sido para indicar su carcter no reductor;
igualmente, al hacer la denominacin sistemtica hay
que nombrar el carcter anomrico de ambos residuos
(a- y a- en este caso)

9. Defina los siguientes trminos: azcar reductor y azcar no

reductor, cite ejemplos.
Azucares reductores: son los monosacridos (todos
las aldosas, es decir aquellos que presentan un grupo
aldehdo en su estructura lineal, por ejemplo: glucosa,
manosa, fructosa, galactosa, ribosa, etc.) y los
disacridos (no todos, ejemplos son la maltosa, lactosa
y
celobiosa).
Experimentalmente se puede demostrar que son
reductores mediante un ensayo sencillo como Fehling o
Tollens.
Azucares no reductores: Los azcares No Reductores
son aquellos que se unen por enlaces glucosdicos de
tipo Alfa o Beta, cuando 2 monosacridos iguales o
diferentes se unen forman un Disacrido, los

Disacridos por condensacin liberan una molcula de

agua y son azcares no reductores ya que el grupo
Oxidrilo ( OH ) de una hexosa se combina con el grupo
Aldehdo ( CHO ) de otra hexosa liberando 1 molcula
de H20, el licor de Feeling no tiene efecto sobre ellos lo
cual los determina como azcares no reductores, por ej
la Sacarosa ( glucosa + fructosa ) Maltosa ( 2 unidades
de alfa glucosa), Trehalosa, etc.
10.

Cul es la importancia energtica del almidn.

El almidn es la sustancia con la que las plantas almacenan su

alimento en races (yuca), tubrculos (patata), frutas y semillas
(cereales). Pero, no slo es una importante reserva para las
plantas, tambin para los seres humanos tiene una alta
importancia energtica, proporciona gran parte de la energa que
consumimos los humanos por va de los alimentos. Se encuentra en
las patatas, el arroz, los cereales, las frutas, etc. En una dieta sana,
la mayor parte de la energa la conseguimos a partir del almidn y
las unidades de glucosa en que se hidroliza.
11.

Efectu un enlace glucosdico.

BIBLIOGRAFIA

CHANG WILLIAMS, Raymond. QUIMICA SEPTIMA EDICION.

Colombia; McGraw-Hill MAYO 2005.

HORTON
ROBERT.
BIOQUIMICA.
Hispanoamericana, 1995.

Briceo, C.O y Rodrguez de Cceres Lilia. Qumica General.

Curso universitario De Pime, 1988.

Mexico;

Prentice-hall