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LABORATORIO DE
BIOQUIMICA
AMBIENTAL N 5
ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA DE LA CATALASA
INTEGRANTES:
INTRODUCCION
OBJETIVOS
MATERIALES
Papa
Hgado
Gillette
Pinzas
Tubos de ensayo
Gradillas para tubos
Mechero
REACTIVOS
HNO 0.1M
NaOH 0.1M
Congelador
Perxido de hidrogeno H2O2 es el sustrato, que reaccionar con la
enzima.
METODOS
Prepara las disoluciones siguientes:
10ml de una solucin 0.1M de NaOH, PM=40 g/mol
10ml de una solucin 0.1M DE HNO3 PM=63 g/mol
RESULTADOS
TUBO TRATAMIENTO
RESULTADO
EXPLICACION
OBSERVADO
1. PAPA +
2. HIGADO +
3. PAPA +
Se observa la presencia
mnima de burbujas.
catalaza se encontraba
Salida de O2
activa.
Apreciacin de gran
Debido a la presencia de
cantidad d burbujas.
enzima catalasa en
Salida de O2
mayor proporcin.
El sustrato no realiza
Desnaturalizacin de la
papa en
papa.
4. HIGADO +
Desnaturalizacin del
en la parte inferior
hgado en
La reaccin permanece
Perdida de la
propiedades biolgicas
de la papa en las
reacciones.
6. HIGADO +
7. PAPA +
No se observa la
Debido a la
presencia de ningn
desnaturalizacin del
produce en su color.
El cambio de color de la
La desnaturalizacin de
la papa es lo que
proporcin de burbujas.
predomina en al
reaccin.
8. HIGADO +
El hgado se encontraba
Desnaturalizacin en la
rodeado de burbujas en
suspensin, se
y la formacin de
mantenan adheridas al
espuma.
hgado.
9. PAPA +
Formacin de espuma la
temperaturas a la que
que el sustrato
agregado.
10. HIGADO+
Cambio
de
color
espuma
sobre
el provoca lo observado.
CUESTIONARIO
1. Explique el fundamento de cada una de las pruebas desarrolladas.
Tubos d ensayo 3 y 4 :
-PAPA +
: El sustrato
, a 2 ml.
TB: 5y6 :
- PAPA +
: No se observa la presencia de
ningn cambio. Solo el cambio de color del hgado a uno como inerte, palido,
blanquioso. Lo que nos indica que de igual modo ha perdido todas sus
propiedades biolgicas.
TB: 7y8:
TB:9y10:
Las bajas temperaturas a las que es expuesta la enzima catalasa reduce
su capacidad cataltica pero no lo suficiente para desnaturalizar la
enzima y tambin no el tiempo suficiente en la que fue colocado a bajas
temperaturas, por ello al agregarle agua oxigenada H2O2 la creacin de
agua y oxigeno fue notoriamente menor a las que si se dierna en
condiciones ptimas.
Estructura:
-
Importancia:
-
CONCLUSIONES
Todas las enzimas son protenas. Por lo tanto, todas las enzimas sufren
desnaturalizacin frente al calor. Esto quiere decir que cuando la
temperatura es muy elevada, la enzima pierde su estructura terciaria,
por lo tanto su sitio activo tambin se desnaturaliza, y ya no puede
cumplir su funcin.
La determinacin de presencia o ausencia de catalasa resulta til en el
rea de bacteriologa, para diferenciar colonias de estreptococos, que
son catalasa negativos, y de estafilococos o micrococos, que son
bacterias que contienen catalasa.
de
Clostridium.
(catalasa
activa)
RECOMENDACIONES
Tratar de cortas el hgado y la papa del mismo tamao y forma para
poder apreciar mejor las reacciones en cada muestra.
Tener cuidado con la cuchilla para evitar cortes innecesarios.
Usar el guante y la mascarilla para evitar intoxicaciones con las
sustancias toxicas.
Al momento de someter el tubo de ensayo al calor hacerlo en direccin a
un lugar despejado ya que el reactivo puede salir disparado.
BIBLIOGRAFIA:
(http://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/enzima-catalasa, 2010)
(Mnica Amat Marco, Aida Ivars Rodrguez, Estudio de los factores que influyen en la
actividad enzimtica de la catalasa)
(Universida Autnoma de Quertaro, Determinacin de la actividad enzimtica de
peroxidasas (catalasa))
(Alexander Ph, Biologa, Editorial Prentice Hall. Inc. New Yersey, 1992.)
(Audersirk, biologa, la vida en la tierra, 4 edicin 1996, Editorial Prentice Hall
Hispanoamericana Mexicana, pags. 25-167. )