VA R I A I N D E C A R I O T I P O

CARIOTIPO
El cariotipo es el patrn cromosmico de una especie expresado a travs de un cdigo,
establecido por convenio, que describe las caractersticas de sus cromosomas. Debido a que
en el mbito de la clnica suelen ir ligados, el concepto de cariotipo se usa con frecuencia para
referirse a un cariograma, el cual es un esquema, foto o dibujo de los cromosomas de
una clula metafsica ordenados de acuerdo a su morfologa (metacntricos,
submetacntricos, telocntricos, subtelocntricos y acrocntricos) y tamao, que estn
caracterizados y representan a todos los individuos de una especie. El cariotipo es
caracterstico de cada especie, al igual que el nmero de cromosomas; el ser humano tiene 46
cromosomas (23 pares porque somos diploides o 2n) en el ncleo de cada clula,
organizados en 22 pares autosmicos y 1 par sexual (hombre XY y mujer XX). Cada brazo ha
sido dividido en zonas y cada zona, a su vez, en bandas e incluso las bandas en sub-bandas,
gracias a las tcnicas de marcado. No obstante puede darse el caso, en humanos, de que
existan otros patrones en los cariotipos, a lo cual se le conoce como aberracin cromosmica.

IDIOGRAMA
Un idiograma es la representacin esquemtica del tamao, forma y patrn de bandas de todo
el complemento cromosmico, los cromosomas se sitan alineados por el centrmero, y con
el brazo largo siempre hacia abajo.
Los cromosomas se clasifican en 7 grupos, de la A a la G, atendiendo a su longitud relativa y a
la posicin del centrmero, que define su morfologa. De esta manera, el cariotipo humano
queda formado as:

Grupo A: Se encuentran los pares cromosmicos 1, 2 y 3. Se caracterizan por ser

cromosomas muy grandes, casi metacntricos. En concreto, 1 y 3 metacntricos; 2
submetacntrico.

Grupo B: Se encuentran los pares cromosmicos 4 y 5. Se trata de cromosomas

grandes y submetacntricos (con dos brazos muy diferentes en tamao).

Grupo C: Se encuentran los pares cromosmicos 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, X. Son

cromosomas medianos submetacntricos.

Grupo D: Se encuentran los pares cromosmicos 13, 14 y 15. Se caracterizan por ser
cromosomas medianos acrocntricos con satlites.

Grupo E: Se encuentran los pares cromosmicos 16, 17 y 18. Son cromosomas

pequeos, metacntrico el 16 y submetacntricos 17 y 18.

Grupo F: Se encuentran los pares cromosmicos 19 y 20. Se trata de cromosomas

pequeos y metacntricos.

Grupo G: Se encuentran los pares cromosmicos 21, 22. Se caracterizan por ser
cromosomas pequeos y acrocntricos (21 y 22 con satlites).

Mediante el cariotipado se pueden analizar anomalas numricas y estructurales, cosa que

sera muy difcil de observar mediante gentica mendeliana. Requisitos para el estudio del
cariotipo

Ante todo, deben guardarse las mximas condiciones de esterilidad. Adems, debe cumplirse
lo siguiente:
Las clulas deben encontrarse en divisin. Para ello, se har la incubacin de la muestra en
presencia de productos inductores de la mitosis (mitgenos), como es el caso de
fitohemoaglutinina.
Las clulas deben pararse en prometafase, empleando colchicina, la cual interfiere en la
polimerizacin de los microtbulos del huso mittico.
Con el objetivo de conseguir una buena separacin cromosmica, las clulas deben
someterse a choque osmtico. Para ello, se emplea un medio hipotnico (0,075M KCl), que
ocasiona el aumento de volumen de las clulas.
Las clulas tienen que ser fijadas.
Hay que proceder a la tincin de los cromosomas para que sean identificables.
Tincin
El estudio de los cariotipos es posible debido a la tincin. Usualmente un colorante adecuado
es aplicado despus de que las [clulas] hayan sido detenidas durante la divisin celular
mediante una solucin de colchicina. Para humanos los glbulos blancos son los usados ms
frecuentemente porque son fcilmente inducidos a crecer y dividirse en cultivo de tejidos.2
Algunas veces las observaciones pueden ser realizadas cuando las clulas no se estn
dividiendo (interfase). El sexo de un neonato feto puede ser determinado por observacin de
clulas en la interfase (ver puncin amnitica y corpsculo de Barr).
La mayora (pero no todas) las especies tienen un cariotipo estndar. El ser humano
normalmente tiene 22 pares de cromosomas autosmicos y un par de cromosomas sexuales.
El cariotipo normal para la mujer contiene dos cromosoma X denominado 46,XX, y el varn un
cromosoma X y uno Y, denominado 46 XY. Cualquier variacin de este cariotipo estndar
puede llevar a anormalidades en el desarrollo.
En los laboratorios de Citogentica se utilizan varias tcnicas de bandeo cromosmico. En
este sentido, destaca el mtodo de tincin de las bandas de quinacrina (bandas Q). Fue el
primero en emplearse, requiere un microscopio de fluorescencia, aunque su uso ya no est
tan extendido como el de las bandas de giemsa (bandas G). Para producir estas bandas G se
aplica una tincin de Giemsa tras digerir parcialmente las protenas cromosmicas con
tripsina. Las bandas reversas (bandas R) requieren tratamiento por calor y en ellas se invierte
el patrn normal blanco y negro que se observa en las bandas Q y G. Este mtodo destaca
por su gran utilidad en la tincin de los extremos distales de los cromosomas. Existen otras
tcnicas de tincin como las bandas C y las NOR (regin de organizadores nucleolares),
tiendo estos ltimos especficamente ciertas regiones del cromosoma. As, las bandas C
tien la heterocromatina constitutiva, que se localiza normalmente cerca de los centrmeros, y
la tincin NOR marca los satlites y tallos de los cromosomas acrocntricos.

Las bandas de alta resolucin suponen la tincin de los cromosomas en profase o metafase
precoz (prometafase) antes de alcanzar la condensacin mxima. Los cromosomas en
profase y prometafase estn ms elongados que los cromosomas en metafase; por este
motivo, el nmero de bandas observadas, para el conjunto de cromosomas, aumenta desde
300-450 hasta casi 800. Ello permite detectar anomalas menos claras, que con las bandas
convencionales no suelen apreciarse. Para obtener este tipo de bandas se necesita aadir
otro requisito para la realizacin del cariotipo. Se trata de un componente utilizado en
quimioterapia, el metotrexato que junto con la colchicina se aade antes de realizar la tincin.
Mtodo de estudio del cariotipo
1. Toma de sangre perifrica y separacin de los glbulos blancos (linfocitos T)
2. Incubacin en presencia de productos que inducen a la mitosis (mitgenos), como la
fitohemoaglutinina. Los mitgenos se adicionan a las clulas para que stas crezcan
adecuadamente hasta formar una monocapa. Despus se recogen separndolas del flask
mediante un rascador.
3. Detencin de la mitosis en la metafase (utilizando colchicina, que interfiere en la
polimerizacin de los microtbulos del huso mittico).
Tanto el paso de adicin de mitgenos como la adicin de colchicina son los pasos crticos
para el estudio del cariotipo.
4. Paso por un medio hipotnico que hace que las clulas se hinchen
5. Depositar una gota de la preparacin entre porta y cubre (sobre el cual se hace presin
para dispersar los cromosomas)
6. Fijar, teir y fotografiar los ncleos estallados (10-15; 30 en mosaicos). Se miran de 10 a 15
ncleos porque puede haber muchos falsos positivos debido a que le hemos aadido
mitgenos (de manera que las clulas se dividen de forma rpida y precipitada) y colchicina,
los cuales pueden provocar mutaciones e irregularidades en los cromosomas. Si los 10-15
ncleos no son iguales puede ser debido a estas sustancias o a que nos encontremos delante
de un organismo mosaico (por lo que deberamos mirar ms ncleos)
7. Actualmente existen aparatos de captacin y programas de anlisis que elaboran el
cariotipo automticamente con los datos obtenidos.
Es necesario realizar un recuento de, al menos, 12-25 clulas en metafase. Esto es debido a
que si por ejemplo, al contar un ncleo le falta el cromosoma 21, puede ser que sea mosaico y
que el resto de clulas s presenten ese cromosoma. Otra opcin, y ms probable, es que sea
un efecto de la adicin del mitgeno, ya que este compuesto altera el proceso normal de
divisin celular, favoreciendo las aneuploidas. Una ltima opcin podra ser que los
cromosomas se solapen y al proceder al analizar el cariotipo slo se cuente un cromosoma
cuando realmente hay dos. Por todas estas razones se deben contar un mnimo de 12-15
clulas en metafase que se encuentren bastante separados en el porta.

Cariotipo clsico
En el cariotipo clsico se suele utilizar una solucin de Giemsa como tincin (especfica para
los grupos fosfato del ADN) para colorear las bandas de los cromosomas (Bandas-G), menos
frecuente es el uso del colorante Quinacridina (se une a las regiones ricas en AdenosinaTimina). Cada cromosoma tiene un patrn caracterstico de banda que ayuda a identificarla.
Los cromosomas se organizan de forma que el brazo corto de este quede orientado hacia la
parte superior y el brazo largo hacia la parte inferior. Algunos cariotipos nombran a los brazos
cortos p y a los largos q. Adems, las diferentes regiones y subregiones teidas reciben
designaciones numricas segn la posicin a la que se encuentren respecto a estos brazos
cromosmicos. Por ejemplo, el sndrome de Cri du Chat implica una delecin en el brazo corto
del cromosoma 5. Est escrito como 46, XX, 5p-. La regin crtica para este sndrome es la
delecin de 15.2, la cual es escrita como 46,XX, del(5)(p15.2)3
Cariotipo espectral

Cariotipo del humano de sexo masculino.

El anlisis espectral de los cariotipos (o SKY) se trata de una tecnologa de citogentica
molecular que permite el estudio y visualizacin de los 23 pares de cromosomas en forma
simultnea. Sondas marcadas fluorescentemente son hechas para cada cromosoma al marcar
DNA especfico de cada cromosoma con diferentes fluorforos. Debido a que hay un limitado
nmero de fluorforos espectralmente distintos, un mtodo de etiquetado combinatorio es
usado para generar muchos colores diferentes. La diferencias espectrales generadas por el
etiquetado combinatorio son capturadas y analizadas usando un interfermetro agregado a un
microscopio de fluorescencia. El programa de procesamiento de imgenes entonces asigna
un pseudocolor a cada combinacin espectralmente diferente, permitiendo la visualizacin de
cromosomas coloreados.4
Esta tcnica es usada para identificar aberraciones estructurales cromosmicas en clulas
cancergenas y otras patologas cuando el bandeo con Giemsa u otras tcnicas no son lo
suficientemente precisas.
Este tipo de tcnicas mejorar la identificacin y diagnstico de las aberraciones
cromosmicas en citogentica prenatal as como en clulas cancerosas.
Cariotipo digital
El cariotipo digital es una tcnica utilizada para cuantificar el nmero de copias de ADN en una
escala genmica. Se trata de secuencias de locus de ADN especficos de todo el genoma que
son aisladas y enumeradas. 5
Este mtodo es tambin conocido como cariotipado virtual.
Observaciones en cariotipo

Los cromosomas sufren grandes variaciones en su tamao a lo largo del ciclo celular,
pasando de estar muy poco compactados (interfase) a estar muy compactados (metafase).

VARIACIN DE CARIOTIPO

PALABRAS CLAVE:
diploide: dos juegos de cromosomas identicos: 11-22- 33genomio: el conjunto de los distintos cromosomas no homologos entre si:1-2-3
numero bsico: nmero de cromosomas del genomio (x)