TGF-: Dualidade da funo entre Tumor Preveno e carcinognese.

Daniel R. Principe, Jennifer A. Doll, Jessica Bauer, Barbara Jung, Hidayatullah

G. Munshi, Laurent Bartholin, Boris Pasche, Chung Lee, Paul J.
Manuscrito Grippo recebeu 11 de maio de 2013;
revisto 24 de setembro de 2013;
aceito 29 de outubro de 2013.

Vrios mecanismos fundamentais a progresso do tumor tm permanecido

indescritveis, particularmente em relao ao fator de crescimento transformante beta
(TGF-). Embora o TGF- inicialmente iniba o crescimento epitelial, parece promover
a progresso de tumores avanados. Defeitos nas vias normais de TGF- explica
parcialmente este paradoxo, o que pode conduzir a uma cascata de eventos que
conduzem mltiplas vias oncognicas, manifestando-se como vrias caractersticaschave de tumorignese (proliferao descontrolada, perda de apoptose, transio de
epitelial para mesenquimal, angiognese sustentada, evaso de vigilncia imunolgica, e
metstase). Compreender os mecanismos de desregulao do TGF- provavelmente ir
revelar novos pontos de convergncia entre TGF- e outros percursos que podem ser
especificamente orientadas para a terapia

At mesmo os cnceres mais letais so inicialmente indolentes e localizados,

ainda assim eles adquirem a capacidade de invadir tanto tecidos ao redor quanto tecidos
distantes. Embora vrios componentes-chave dessa progresso tenha sido identificado,
uma compreenso abrangente desses eventos permanece obscura (1-3). Dados recentes
sugerem que uma etapa potencialmente vital deste mecanismo a aberrao do fator de
crescimento transformante beta (TGF-) de sinalizao (4-6). A desregulao de vias de
TGF- leva a uma extensa reprogramao de sinal, permitindo que as clulas cancerosas
rsequestrem a funo normal para garantir a sua prpria sobrevivncia.

TGF- Biologia Celular

TGF-, compreende trs isoformas, uma potente citocina pleiotrpica que
regula o desenvolvimento dos mamferos, diferenciao, e homeostase em quase todos
os tipos de clulas e tecidos. Estudos revelaram que cada uma das isoformas essencial
para o desenvolvimento. Camundongos TGF-1-nulos so viveis por 2 semanas aps o
nascimento e logo desenvolvem leses inflamatrias graves em mltiplos rgos e uma
rpida sndrome delibitante, culminando com a morte em 3 a 5 semanas de idade (7).
Camundongos TGF-2-nulos so predominantemente perinatal letal com os filhotes
sobreviventes desenvolvendo cianose. Estes ratinhos apresentam-se com disfuno
cardaca grave alm de defeitos em vrias outros rgos e so fenotipicamente distintos
dos nocautes de outras isoformas de TGF- (8). Por ltimo, os ratos TGF-3 nulos
presentam-se com fendas palatinas graves e comear ofegante logo aps o nascimento.

Estes os ratos so incapazes de mamar, tornam-se cianticos, e morrem dentro de 24

horas aps o nascimento (9).
Cada um destes trs isoformas TGF- inicialmente sintetizado como um
homodmero de 75 kDa conhecida como pr-TGF-. Pro-TGF- , em seguida, clivado
no Golgi para formar o homodmero TGF- maduro. Estes homodimeros 25-kDa
interagem com protenas associadas a latncia para formar o complexo latente pequeno
(10-12). No retculo endoplasmtico, uma nica protena de ligao a TGF- latente
forma uma ponte de dissulfureto com o homodmero TGF- para formar o complexo
latente grande, permitindo a exportao alvo matriz extracelular (11).
Aps a exportao, o complexo latente grande interage com fibrilas de
fibronectina e proteoglicanos de sulfato de heparina na membrana celular.
Eventualmente, o complexo latente grande localiza a fibrilina-rico microfibrilas na
matriz extracelular, onde armazenado at sua ativao (13,14). Ento, TGF-
armazenada, onde permanece biologicamente indisponvel at a sua ativao (10). TGF latente ativado por vrios fatores, incluindo as proteases (14,15), trombospondina 1
(16), espcies reativas de oxignio (17), e as integrinas (18,19). Esses fatores liberam
TGF- maduro, libertando-o do complexo latente grande ligado a microfibrila. Isto
ocorre atravs da liberao de protenas associadas latncia, degradao da protena de
ligao a TGF- latente, ou modificao de conformao complexa latente.

Vias de sinalizao TGF-

Uma vez que o ligante ativado, a sinalizao de TGF- mediada atravs
SMAD e vias no-SMAD para regular a transcrio, a traduo, microARN biognese,
a sntese de protenas, e as modificaes ps-traducionais (20-22). Embora os efeitos de
TGF- sejam fortemente dependentes do contexto, a sinalizao , pelo menos
parcialmente, conservada em muitos tipos de clulas (23). Na via canonical, o ligando a
TGF- liga-se ao receptor de tipo 2, TGF- (TGFBR2) que recruta o receptor de TGF-
tipo 1 (TGFBR1). Estes receptores dimerizam e autofossorilam serina / treonina,
permitindo a fosforilao de SMAD2 e Smad3 por TGFBR1. As protenas SMAD agora
activados dissociar da a protena ncora SMAD para a activao do receptor (SARA),
hetero-oligomerizar com SMAD4, e translocam-se para o ncleo, interagindo com
coregulators mirade de transcrio e outros factores para mediar a expresso do gene
alvo ou da represso (23,24) (Figura 1)

Figura 1. Canonical fator de crescimento transformador (TGF-) de sinalizao. O

ligando a TGF- se liga ao seu receptor transmembranar de tipo 2 (TGFBR2), o
recrutamento do receptor de tipo 1 (TGFBR1), que conduz fosforilao de SMAD2
e Smad3. Este evento de fosforilao permite para complexao com SMAD4 e
translocao nuclear, levando paragem do crescimento em clulas epiteliais
benignas. P = fosforilao.

Existe tambm um receptor de tipo 3 de TGF- (TGFBR3 ou betaglicano), um

proteoglicano transmembranar que se liga ao ligando de TGF-, cuja funo
relativamente desconhecido. Embora TGFBR3 parece carecer de um domnio de
sinalizao citoplasmtica, que parece ter um papel importante em desenvolvimento,
bem como na regulao TGFBR1 TGFBR2 e (25-27).
TGF- tambm sinaliza atravs de um nmero de vias no-SMAD, incluindo
MAPK p38, p42 / p44 MAPK, c-Src, m-TOR, RhoA, RAS, PI3K / Akt, protena
fosfatase 2A (PP2A) / p70S6K, e JNK MAPK (22,28-32). Alm disso, dois estudos
ligaram regulao traducional ao programa citosttico governada por TGF-. O
primeiro mecanismo envolve a ativao da transcrio da protena do fator de iniciao
da traduo eucaritica-4E inibindo a traduo da protena de ligao 1 (4E-BP1)
mediada pela SMAD via de sinalizao (33), enquanto que a segunda baseia-se na

inativao catalticado eEF1A1 fator de iniciao da traduo (fator de alongamento

eucaritica 1A1) por TGFBR1 (21).
Tanto a sinalizao dependente de SMAD e Smad-independente desempenham
mltiplos papis na homeostase, particularmente no crescimento e na plasticidade das
clulas epiteliais. Dependente da sinalizao de TGF-SMAD induz a paragem do
crescimento por meio de um nmero de mecanismos, incluindo o controlo sobre vrios
inibidores de cinase dependentes de ciclina (5,34-37). Mecanismos independentes de
SMAD de apoptose induzida por TGF- envolvem Daxx / HIPK2 e factor de
transformao de crescimento quinase associada (TAK1) / TRAF6 dependente de
activao de p38 / JNK (38,39).

MAPK regulamento de sinalizao SMAD

Sinalizao TGF- rigidamente controlado por protenas quinases ativadas por
mitgeno (MAPKs). Embora regulada por sinal extracelular quinase (ERK) de
sinalizao MAPK mais comumente associado com tirosina-quinases receptoras, tem
sido demonstrado que TGFBR1 tambm tem atividade de tirosina-quinase. TGFBR1
fosforila diretamente tirosina em ShcA, permitinda pela interao com Grb2 e Sos. Isto
leva activao de Ras e ERK fosforilao (40)
ERK e outras MAPKs regulam a sinalizao do brao de TGF- dependente da
SMAD atravs de fosforilao de SMAD2 e Smad3 em especficos resduos de
aminocidos. Juntas, essas regies conhecidas como o domnio da regio de interligao
SMAD.A fosforilao do ERK da regio de interligao ocorre na Ser245/250/255 e os
resduos do Thr220 ficam no SMAD2 e nos Ser204/208 e Thr17 permanecem no
SMAD3 e supostamente reduzindo a sinalizao dos SMAD2/3. Por outro lado, a
fortificao da sinalizao SMAD poder correr atravs da fosforilao em diversos
SMAD3 resduos, inclusive no Thr8 pelo ERK, no Ser204/208/213 pelo p38
MAPK/ROCK, ou no Ser/208/213 pelo JNK MAPK. A fosforilao SMAD3 nos
resduos de Ser208/213 so comuns em tumores avanados e podem ter parte
importante na resposta anormal do TGF- nos canceres.

Paradoxo do TGF- sobre os tumores

A expresso TGF- tem sido estudada em praticamente todos os canceres
epiteliais, incluindo os de prstata, pulmo, peito, colorretal, pancretico e cncer de
pele. Atravs desses estudos, ficou claro que o TGF- pode adotar ambos papeis de
supressor e de promotor. Em tumores epiteliais benignos e muitos outros em fase inicial
o TGF- um potente redutor do crescimento tumoral. Entretanto, em tumores
avanados, os caminhos da sinalizao do TGF- esto severamente desregulados. Ao
invez de inibir os carcinogeneses, o TGF- promove o crescimento do tumor e
progresso para estgios finais. Essa troca de funcionalidade conhecida como o
paradoxo de TGF-.
Este paradoxo visto clinicamente, onde nos primeiros estgios dos canceres,
nveis de TGF- so positivamente associados com um diagnostico favorvel. Porem

em tumores avanados, os nveis de TGF- no microambiente do tumor so

positivamente associados ao seu tamanho, invisibilidade e desdiferenciaso, fazendo
com que o TGF- se torne um til biomarcador de prognostico e previsor de recorrncia
depois do inicio ou falha de uma terapia.

Regenerao TGF- Homeosttico

TGF- o regulador chave de sua prpria expresso e em alguns canceres , a

progresso dos tumores corresponde a mudanas no regulador do TGF-, que pode
incluir infra-regulao ou inativao do TGFBRs. A represso deste receptor pode
corresponder com a induo compensatria do ligante TGF-, que ainda mais
complicada pela sugesto de informaes que o TGF- pode atuar como um promotor
de tumor de clula-autonomas atravs do mecanismo no cannico.
Dados recentes sugerem que um ponto crucial importante do Paradoxo de TGF em canceres de prstata podem ser a diferenciao da ativao de MAP cinase, como
o ERK, entre clulas benignas e malignas. Nesta ao, acredita-se controlar snteses do
mecanismo de regenerao TGF- homeosttica. Ativao ERK atravs da sinalizao
TGF- induz a sntese do ligante TGF- em clulas de prstata in vitro.