Repblica Bolivariana de Venezuela

Universidad Nacional Experimental Politcnica

Antonio Jos de Sucre
Vice-Rectorado Barquisimeto

CROMATOGRAFA DE GASES

ii

NDICE

N de pg.
Introduccin

Cromatografa

Clasificacin de las tcnicas cromatograficas

Cromatografa de gases

Tipos de cromatografa de gases

Instrumentacin de la cromatografa de gases

Gas portador y regulador de caudal:

Sistema de inyeccin de la muestra

Inyectores

Recinto termostatizado

Columnas

Detectores:

13

Fase estacionaria

17

Anlisis cualitativo de la cromatografa de gases

18

Anlisis cuantitativo de la cromatografa de gases

19

Conclusiones

20

Referencias

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iii

INTRODUCCIN

La cromatografa es un procedimiento de separacin de los constituyentes de

una mezcla. Este mtodo analtico es de gran relevancia para identificar y cuantificar
compuestos de una fase liquida o gaseosa homognea. Se fundamenta en los
equilibrios de concentracin de los compuestos presentes entre dos fases. Este es uno
de los procesos ms implementados por su amplio campo de aplicabilidad. Las
tcnicas cromatograficas pueden clasificarse segn el procedimiento utilizado, segn
el fenmeno fisicoqumico originario del coeficiente de distribucin K, y segn la
naturaleza fsica de las fases; esta ltima se subdivide en: cromatografa liquida (LC)
cromatografa de gases (GC), y cromatografa de fluidos supercriticos, para efectos de
este trabajo nos enfocaremos solo en el estudio de cromatografa de gases.

En la cromatografa de gases se separan sustancias gaseosas con base en su

adsorcin o particin en una fase estacionaria a partir de una fase gaseosa. La forma
ms usual de realizar este procedimiento es utilizando un lquido como fase
estacionaria; recibiendo el nombre de cromatografa gas-lquido (CGL). Tambin se
utilizan absorbentes, dando lugar a la cromatografa gas-slido (CGS), pero en menor
proporcin. Es una de las tcnicas de ms amplia utilizacin, sus primeras
aplicaciones se fundamentaron en el control de las fracciones ligeras de las refineras
de petrleo, y se ha ido desarrollando cada vez ms desde sus inicios en los aos 40.

Actualmente las aplicaciones de la cromatografa de gases se ha extendido a

varios campos como en la qumica industrial, la biociencia, para el medio ambiente,
como en los anlisis de los pesticidas, entre otros, con esto y con lo anterior
mencionada, es notorio la relevancia del estudio de esta tcnica.

CROMATOGRAFA DE GASES

Cormatografia:

Mikhail Tswett, un cientfico ruso, dio a conocer en 1906 informacin acerca

de la separacin de los componentes de diferentes colores procedentes de hojas al
hacer pasar un extracto de stas a travs de una columna de carbonato de calcio,
almina y sacarosa. Acu el trmino cromatografa, que en griego significa color
y escribir. Actualmente se interpreta la cromatografa como la separacin de
componentes de una muestra al distribuirse entre dos fases: una estacionaria y otra
mvil.
La Unin Internacional de Qumica Pura y Aplicada (IUPAC) ha propuesto
una definicin de cromatografa: cromatografa es un mtodo fsico de separacin,
en el que los componentes a separar se distribuyen entre dos fases, una estacionaria
(fase estacionaria) y otra que se mueve (fase mvil) en una direccin definida [L. S.
Ettre, Nomenclature for Chromatography, Pure & Appl. Chem. (1993) 819-872].
Adicionalmente se puede mencionar que la cromatografa es un procedimiento
fsico-qumico de separacin de la misma relevancia de otros procedimientos como lo
son la destilacin, la cristalizacin o la extraccin fraccionada. Este mtodo es un
procedimiento de aplicacin muy amplia, mediante el cual muchas mezclas
heterogneas o en forma solida pueden transformarse en fase liquida por el empleo de
un disolvente.
Se conoce que se han propuesto muchas teoras con complejos modelos
matemticos para explicar el comportamiento de los solutos en las columnas
cromatografas. Las ms estudiadas son:
Teora de las placas tericas (Martin y Synge)

Teora cintica (Van Deenter, Zuiderweg, Klinkenberg y Sjenitzer)

Teora desarrollada para columnas capilares (Golay)
Siendo la principal la teora de las placas tericas, la cual plantea que una
columna cromatografa est constituida por una serie de placas contenidas en la fase
estacionaria. Supone como constante el volumen de la fase estacionaria en cada placa;
que el volumen de fase mvil entre placas es constante; que las dos fases estn en
equilibrio en cada placa, y que el valor de coeficiente de distribucin es constante e
independiente de la concentracin del soluto.
Clasificacin de las tcnicas cromatografas:
Las tcnicas cromatografas pueden clasificarse:
Segn la naturaleza fsica de las fases.
Segn el procedimiento utilizado.
Segn el fenmeno fsico-qumico originario del coeficiente de distribucin.
Estudiaremos las tcnicas cromatografas segn la naturaleza de las fases, la cual
se divide en:
Cromatografa liquida (LC):
La fase mvil es un lquido, este tipo engloba la forma ms antigua que se
conoce como mtodo preparativo de separacin. Este tipo de cromatografa es
muy extensa y puede subdividirse en las siguientes:
-

Cromatografa liquido-solido o de adsorcin

Cromatografa inica.

Cromatografa de exclusin.

Cromatografa liquido-liquido o de reparto.

Cromatografa de afinidad, fase enlazada.

Cromatografa de gases (GC)

Cromatografa de fluidos supercrticos (SFC)
Cromatografa de gases:
La cromatografa de gases es la tcnica a elegir para la separacin de
compuestos orgnicos e inorgnicos trmicamente estables y voltiles. Tiene como
objetivo principal la cuantificacin de cada compuesto presente en la mezcla.
En esta tcnica la muestra se volatiliza y se inyecta en la cabeza de una
columna cromatografca. La elucin se produce por el flujo de una fase mvil que es
un gas inerte, y a diferencia de la mayora de los tipos de cromatografa, la fase mvil
no interacciona con las molculas del analito; su nica funcin es la de transportar el
analito a travs de la columna.
Adems de lo ya mencionado, la cromatografa de gases solo se emplea
cuando los componentes de la mezcla problema son voltiles o semivoltiles y
principalmente que sean trmicamente estables a temperaturas de hasta 350-400C, lo
cual es un obstculo y limita esta tcnica a solo usar este tipo de mezcla. No obstante
sus primeras aplicaciones se dieron a inicios de 1940, donde se utilizo en el control de
las fracciones ligeras de las refineras de petrleo. En la actualidad las aplicaciones
son numerosas, por lo menos en las industrias se enfoca principalmente a evaluar la
pureza de los reactantes y productos de reaccin o bien a monitorear la secuencia de
la reaccin. Para los fabricantes de reactivos qumicos, su aplicacin es en la
determinacin de la pureza.
En lneas generales para las aplicaciones de la cromatografa de gases
podemos mencionar los siguientes campos:
Medioambientales:

Anlisis

de

pesticidas

herbicidas, anlisis

hidrocarburos, semivoltiles y voltiles, anlisis del aire, entre otros.

de

Alimentos y aromas: Fragancias y aromas, aceites, bebidas, cidos orgnicos,

azcares, steres metlicos, triglicridos, alcoholes, etc.
Qumica Industrial: Alcoholes, cidos orgnicos, aminas, aldehdos y cetonas,
steres y glicoles, hidrocarburos, disolventes, anilinas, gases inorgnicos.
Biociencia: Drogas, frmacos, alcoholes y contaminantes en sangre,
disolventes residuales.
Derivadas del petrleo: Gas natural, gases permanentes, gas de refinera,
gasolinas, gasleos, parafinas.

Tipos de cromatografa de gases:

Este tipo de cromatografa puede subdividirse segn el fenmeno aplicado:
Cromatografa Gas-Liquido:
La fase mvil es un gas y la fase estacionaria es un lquido inmovilizado por
impregnacin o por enlace sobre un soporte inerte que puede ser simplemente
la pared de la columna. Martin y Synge propusieron la sustitucin de la fase
mvil liquida por un gas para mejorar las separaciones.

Cromatografa Gas-Solido:
La fase estacionaria es un slido poroso (grafito o gel de slice o aluminio) y
la fase mvil de un gas. Este tipo de GC es muy efectiva para analizar
compuestos que presentan puntos de ebullicin bajos, y mezclas de gases.
Instrumentacin de la cromatografa de gases
Un equipo de GC est conformado por tres partes especficas: un inyector, una
columna, y un detector, todo esto reunido en una sola instalacin, llamado
cromatografo. (ver figura N1)

Figura N1: Diagrama esquemtico de un cromatografo de gases con detector de

conductividad trmica.

Un cromatgrafo de gases consiste en varios mdulos bsicos ensamblados para:

1. Proporcionar un gasto o flujo constante del gas transportador (fase mvil).
2. Permitir la introduccin de vapores de la muestra en la corriente de gas que
fluye.

3. Contener la longitud aproximada de fase estacionaria.

4. Mantener la columna a la temperatura apropiada.
5. Detectar los componentes de la muestra conforme salen de la columna
6. Proveer una seal legible proporcional en magnitud a la cantidad de cada
componente.
Adicionalmente de manera ms desglosada los componentes del cromatografo son:
Fuente de gas
Sistema de inyeccin
Horno y columna cromatografica
Sistema de deteccin
Sistema de registro
Los cuales se pueden observar en la siguiente figura:

Figura N2: Esquema de un cromatografo de gases

La fase mvil que arrastra la muestra a travs de la columna es un gas. Deben
ser controlados con precisin los caudales, esto para permitir una gran repetitividad
de los tiempos de retencin. En anlisis inicia en el momento en que se introduce una

pequea cantidad de muestra en forma lquida o gaseosa en el inyector, que tiene

doble funcin, es decir de transformar a estado de vapor y de introducirlo en el seno
de la corriente gaseosa en el principio de la columna, la cual no es ms que un tubo
de seccin delgada, enrollado sobre s mismo en espiral, de uno a mas de cien metros
de longitud segn los casos, y que contiene la fase estacionaria. La columna donde
est situada se encuentra a temperatura controlada, adicionalmente la fase gaseosa a
la salida de la columna pasa por el detector antes de salir al aire libre.
Gas portador y regulador de caudal:
Como fase mvil se utiliza alguno de estos tres gases: helio, nitrgeno, o
hidrogeno, los cuales pueden provenir de un cilindro bajo presin o bien obtenido a
partir de un generador (para N2 yH2), que es ventajoso por que proporciona un gas
muy puro.
El gas portador debe estar exento de trazas de hidrocarburos, de vapor de agua y
de oxigeno, ya que se comportan como impurezas que pueden perjudicar la fase
estacionaria y pueden reducir la sensibilidad de algunos detectores.
Si el gas es de origen industrial se debe colocar doble filtro, desecante y reductor,
antes del cromatografo.
Sistema de inyeccin de la muestra
La inyeccin de la muestra se realiza introduciendo la misma en el equipo con
una microjeringa, de las que existen numerosos modelos adaptados o los diversos
inyectores y columnas, en cantidad muy pequea y en disolucin.
Con el fin de tener una alta eficiencia de la columna se requiere que la
muestra sea de un tamao adecuado y que se introduzca como un tapn de vapor; la
inyeccin lenta o muestras demasiado grandes causan dispersin de las bandas y una
mala resolucin. Las microjeringas calibradas, se utilizan para inyectar muestras

lquidas, a travs de un diafragma de goma de silicn, en una cmara caliente especial

para la muestra que se ubica en la cabeza de la columna. La cmara de la muestra
est casi siempre a unos 50C por encima del punto de ebullicin del componente
menos voltil de la muestra. En el caso de las columnas analticas rellenas ordinarias,
el tamao de la muestra vara desde unas pocas dcimas de microlitro a 20 L. Las
columnas capilares requieren muestras menores por un factor de 100 o ms. En estos
casos se emplea un sistema divisor de la muestra que permite entregar una pequea
fraccin conocida (1 :50 a 1 :500) de la muestra inyectada y el resto se desecha.

Figura N3: Juego de microjeringas para inyectar la muestra.

Inyectores:
Es la puerta de entrada de la muestra en el cromatografo. Entre sus funciones esta
vaporizar y arrastrar a la cabeza de la columna la muestra mezclada con el gas
portador. Entre los tipos de inyectores, podemos mencionar:
-

Inyector de vaporizacin directa

Inyector con o sin divisin

Inyector a temperatura programable

Inyeccin directa en la columna (en frio)

Recinto termostatizado:
El cromatografo incluye una cmara calentada de volumen suficiente y fcil
acceso para instalar la columna, dicha cmara es comnmente llamada horno. Este
debe tener una baja inercia trmica para permitir una subida controlada y rpida de
temperatura y una gran estabilidad.

Percha de
columna
Columna de
capilaridad

Figura N 4: Horno con columna capilar.

Columnas :
Existen dos tipos de columnas, las columnas empaquetadas o columnas rellenas, y
las columnas capilares o tambin llamadas columnas abiertas, donde ambas tienen

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diferentes eficacia. Para la primera columna mencionada, la fase estacionaria esta

inmovilizada por la impregnacin o por reaccin qumica con el soporte poroso,
mientras que en las columnas capilares una fina capa de fase estacionaria es o
depositada o unida mediante un enlace qumico en la superficie interna de la
columna.
-

Columnas empacadas:

Estas columnas pueden tener cualquier forma para llenar el horno de

calentamiento; entre stas se hallan los serpentines, los tubos en forma de U y en
forma de W, pero las de mayor utilizacin son las primeras. Las columnas empacadas
miden en general 1 a 10 m de longitud y 0.2 a 0.6 cm de dimetro. Las columnas
cortas pueden ser de vidrio, pero las ms largas se hacen de acero inoxidable, por lo
que se les puede enderezar para llenarlas y empacarlas; tambin se hacen de tefln.
Para que sean inertes, se sigue prefiriendo el vidrio en las columnas ms largas.
En las columnas largas se requiere mayor presin y mayores tiempos de anlisis
y slo se usan cuando no hay otra opcin. En general se intenta llevar a cabo las
separaciones seleccionando las columnas con longitudes en mltiplos de 3, como de 1
o 3 m.
La columna se empaca con pequeas partculas que en s pueden servir como fase
estacionaria o, con ms frecuencia, se recubren con una fase lquida no voltil de
polaridad variable. La cromatografa gas-slido es adecuada para separar especies
gaseosas pequeas, como H2, N2, CO2, CO, O2, NH3 y CH4, as como
hidrocarburos voltiles usando empaques inorgnicos de gran superficie, como
almina (Al2O3) o polmeros porosos.
Los gases se separan de acuerdo con su tamao debido a la retencin por
adsorcin sobre las partculas. La cromatografa gas-slido se prefiere para

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muestras acuosas. Debe ser trmicamente estable y estar disponible en tamaos

uniformes. Los soportes que se usan con mayor frecuencia se preparan
El material de empaque de la columna se recubre mezclndolo con la cantidad
correcta de fase lquida disuelta en un disolvente de bajo punto de ebullicin,
como acetona o pentano.
-

Columnas clsicas de relleno

Constituidas por un tubo de metal o vidrio con relleno de soporte granular con
la superficie recubierta por una pelcula de la fase estacionaria. Su longitud varia
de 1-10 m, adems de otros para metros como dimetro interno 2-4 mm hasta 5
cm en escala preparativa, el tamao de la partcula de relleno diez veces menor
que el dimetro del tubo, poseen una capacidad de carga grande y relacin de
fases pequea, aparte presenta una permeabilidad baja. A mayor tamao de
partcula del relleno mayor ser su permeabilidad, cuanto ms rugosa sea su
superficie mayor capacidad de carga se obtendr.
Es el nico tipo de columna que se usa a escala preparativa. La suspensin del
soporte en la disolucin de la fase estacionaria debe agitarse mecnicamente y, si
es necesario, calentar ligeramente para evaporar la mayor parte del solvente. El
tubo de la columna debe estar perfectamente limpio, para rellenarlo se debe
introducir un extremo de sta en el relleno preparado con la ayuda de un embudo,
mientras que por el otro extremo se hace vaco con una bomba. Como tapones es
conveniente utilizar lana de vidrio o cuarzo y una malla metlica.
-

Columnas capilares de capa porosa

En este caso el soporte es depositado en la pared interior del tubo, despus es

recubierto por la fase estacionaria y la parte central del capilar permanece vaca.
Su longitud puede variar de 25-200 m, su dimetro interno oscila entre de 0.1-0.5
mm, por otro lado el tamao de la partcula de relleno vara entre el de un soporte

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clsico y las partculas de carbono producidas por la pirlisis de una sustancia

orgnica.
Si la columna es metlica se prepara una suspensin del soporte, se llena la
columna con la suspensin, se cierra un extremo y se evapora el agente
dispersante quedando as adheridos a la pared del capilar.
Si la Columna es de vidrio, similar a las columnas clsicas rellenas donde la
diferencia consiste en introducir una varilla de acero inoxidable un el tubo de
vidrio y situar el soporte entre ambos. Despus se procede al estirado
manteniendo fija la varilla.
-

Columnas capilares abiertas

Se conocen tambin como columnas Golay, quien fue el primero en utilizarla.

La fase estacionaria va depositada en la pared interior del tubo que acta como
soporte Longitud hasta 200 m, los ms utilizados varan entre 50-100 m, su dimetro
interno 0.1-0.5 mm, adems la capacidad de carga muy pequea y la relacin de fases
es la ms alta, necesita detectores ms sensibles. La naturaleza del tubo y el
procedimiento seguido para su limpieza son de gran importancia en este tipo de
columnas, ya que la pared del mismo sirve como soporte y su capacidad de retencin
del solvente influir notablemente en la uniformidad de la pelcula formada.
Uno de los mtodos consiste en llenar el tubo con una disolucin diluida de la
fase estacionaria en un disolvente voltil, cerrar un extremo e introducirla en una
estufa con una temperatura superior al punto de ebullicin del solvente, la fase
quedar depositada sobre la pared del capilar.

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Figura N:5 Columnas empaquetadas

Factores que disminuyen la eficacia de una columna:
Entre los factores que disminuyen la eficacia de una columna se encuentran:
o Longitud de la columna. Limita en cuanto a las velocidades lineales del gas
portador, originando tiempos de anlisis muy largos y sin mejorar la
resolucin.
o Dimetro de la columna: De relevancia en las columnas capilares abiertas, por
la resistencia que opone la fase mvil a la transferencia de masas.
o Tamao de la partcula de relleno.
o Naturaleza de las fases. Valores del coeficiente de difusin en la fase mvil.
o Cantidad de fase estacionaria. A menor cantidad mayor eficacia.
o Temperatura de la columna. Al aumentar esta disminuye la eficacia al afectar
directamente en el coeficiente de reparto.
o Velocidad del gas portador. Una velocidad elevada es la ptima.
o Cantidad de muestra inyectada.

Detectores:
Son dispositivos que indican y miden los solutos en la corriente del gas acarreador,
convirtiendo una seal no medible directamente en una seal elaborable de una

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propiedad fsica. Esta seal es elaborada por una comparacin entre el gas acarreador
puro (blanco) y el mismo gas llevando cada uno de los componentes previamente
separados en la columna, esto es traducido en una seal elctrica que es amplificada y
Registrada al momento de salir de la columna.
En cromatografa de gases, un detector ideal tiene las siguientes
caractersticas:
1. Adecuada sensibilidad: En general, las sensibilidades de los detectores
actuales se encuentran en el intervalo de 10-8 a 10-15 g de analito/s.
2. Buena estabilidad y reproducibilidad.
3. Una respuesta lineal para los analitos que se extienda a varios rdenes de
magnitud.
4. Un intervalo de temperaturas de trabajo comprendido desde la temperatura
ambiente hasta al menos 400C.
5. Un tiempo de respuesta corto que lo haga independiente del caudal.
6. Alta fiabilidad y manejo sencillo. Hasta el punto de estar a prueba de la
impericia de operadores inexpertos.
7. Respuesta semejante para todos los analitos, o por el contrario, una
respuesta selectiva y altamente predecible para una o ms clases de analitos.
-

Detector de ionizacin de llama (FID) :

Es uno de los detectores ms extensamente utilizado y, por lo general, uno de

los ms aplicables. En un quemador, el efluente de la columna se mezcla con
hidrgeno y con aire para luego encenderse elctricamente. La mayora de los
compuestos orgnicos, cuando se pirolizan a la temperatura de una llama de
hidrgeno/aire, producen iones y electrones que pueden conducir la electricidad a

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travs de la llama. Entre el extremo del quemador y un electrodo colector situado por
encima de la llama, se aplica una diferencia de potencial de unos pocos cientos de
voltios, y para la medicin de la corriente que resulta (de unos 10-12A) se utiliza un
amplificador operacional de alta impedancia. La ionizacin en la llama de los
compuestos que contienen carbono no es un proceso bien establecido, aunque se
observa que el nmero de iones que se produce es aproximadamente igual al de
tomos de carbono transformados en la llama.

Figura N6: Detector de ionizacin de flama

-

Detector de conductividad trmica (TCD thermal conductivity detector):

Consiste de dos celdas metlicas idnticas, cada una conteniendo un filamento

de alambre, de tungsteno o de tungsteno con lmina de oro. El efluente fluye a travs
de una celda y el gas portador (He o H2) fluye a travs de la otra. En un lado de la
muestra el gas fluye por el filamento mientras que en el lado de referencia el gas

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puede pasar sobre el alambre del filamento y difundir a travs de l. Los filamentos
son calentados por una corriente elctrica. La temperatura del elemento censor
depende de la conductividad trmica del gas que fluye alrededor. Cambios en
conductividad trmica, como cuando las molculas orgnicas desplazan un poco al
gas portador, provocan un incremento en la temperatura del elemento el cual est
siendo monitoreado como un cambio en la resistencia.
Dos pares del TCD son utilizados en cromatgrafos de gases, un par
localizado en la salida de la columna para detectar los componentes separados
mientras van saliendo, el otro par localizados antes del inyector o en una columna de
referencia separando las resistencias de los dos pares y estn acomodados en un
circuito de puente.
Este es un mtodo no destructivo dependiente de concentracin, con
selectividad universal, con un lmite de deteccin de ~400 pg/ml de gas portador.

Figura N:7 Detector de conductividad trmica.

Existen otro tipo de detectores, entre los cuales podemos mencionar:
-

Detector termoinico de llama (FTD):

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Detector de captura de electrones (ECD)

Detector de emisin atmica (AED)

El detector fotomtrico

El detector de fotoionizacin.

Fase estacionaria:
En una columna cromatogrfica de gas-lquido las propiedades deseables para
una fase lquida inmovilizada incluyen:
1. Baja volatilidad (idealmente, el punto de ebullicin del lquido debe ser al
menos 100C mayor que la temperatura de trabajo mxima de la columna)
2. Estabilidad trmica
3. Qumicamente inerte
4. Caractersticas de disolvente tales que los valores de k y de los solutos a
resolver estn dentro de un intervalo conveniente.
La eleccin adecuada entre esos disolventes es una etapa crtica para el
xito de la separacin; de hecho existen guas cualitativas para realizar la
eleccin, pero al final, la mejor fase estacionaria solamente se puede determinar
en el laboratorio. El tiempo de retencin de un soluto en una columna depende de
su coeficiente de distribucin, el cual a su vez est relacionado con la naturaleza
qumica de la fase estacionaria; es por ello que, para ser til en cromatografa gaslquido, el lquido inmovilizado ha de originar diferentes coeficientes de
distribucin para los distintos solutos. Adems, estos coeficientes no deben ser ni
extremadamente grandes ni extremadamente pequeos, dado que los primeros
producen tiempos de retencin prohibitivamente largos y los ltimos dan como
resultado tiempos tan cortos que las separaciones son incompletas.
Para que una especie tenga un tiempo de residencia razonable en la columna,
debe poseer cierto grado de compatibilidad (solubilidad) con la fase estacionaria,

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Aqu, se aplica el principio de semejante disuelve semejante, donde

semejante se refiere a las polaridades del soluto y del lquido inmovilizado.

Anlisis cualitativo de la cromatografa de gases:

Un anlisis cromatogrfico puede dar una amplia informacin
cualitativa si se escoge el sistema de deteccin adecuado para determinar y evaluar
los analitos separados, as si se utiliza un detector que permita obtener un espectro de
cada compuesto separado y a su vez contenga una base de datos que pueda realizar su
comparacin con una biblioteca de espectros se podra, de una forma muy precisa,
establecer la identidad de los componentes de una muestra, de hecho esto se logra
fcilmente con cromatgrafos que contienen sistema de deteccin como el Infrarrojo
(IR), el de Resonancia Magntica Nuclear (RMN) o el espectrmetro de Masas (MS).
Sin embargo, los sistemas nombrados anteriormente son muy costosos, es por
ello que la mayora de los laboratorios cuentan con cromatografos con sistemas de
deteccin sencillos como el detector de ionizacin a la llama o el detector de
conductividad trmica, en el caso de cromatografa de gases. La nica informacin
cualitativa que pueden ofrecer estos sistemas es el tiempo de retencin del analito, el
cual, solo puede ser usada controlando bien las condiciones cromatogrficas como:
flujo, temperatura, tipo de fase estacionaria en el caso de gases o composicin
qumica de la fase mvil, adems de que se debe tener conocimiento de los posibles
compuestos de la muestra y una amplia variedad de patrones para realizar
comparaciones.
Sin embargo, se puede dar el caso que dos compuestos tengan el mismo
tiempo de retencin, lo que imposibilita su identificacin. Por supuesto que, a partir
de cromatogramas obtenidos con diferentes fases estacionarias y a diversas

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temperaturas de elusin (para cromatografa gaseosa), se puede obtener datos

adicionales.

Anlisis cuantitativo de la cromatografa de gases:

Las concentraciones de los solutos eluidos son proporcionales a las reas bajo
los mximos registrados. Las integraciones electrnicas en los instrumentos de
cromatografa de gases imprimen las reas de los mximos y generalmente tambin
sus tiempos de retencin.
Tambin es posible medir la altura del mximo para construir una curva de
calibracin. Siempre debera ser posible establecer la linealidad de una curva de
calibracin.
El mtodo de adiciones de estndar es una tcnica til para efectuar
calibraciones, en especial para muestras ocasionales. A una o ms alcuotas de la
muestra se les mezcla con una concentracin conocida del estndar, y el incremento
en el rea del mximo es proporcional a la cantidad de estndar agregado. Este
mtodo tiene la ventaja de verificar que el tiempo de retencin del analito
desconocido sea igual al del estndar.
Un mtodo ms importante en el anlisis cuantitativo es el uso de estndares
internos. En l, a la muestra y a los estndares se les adiciona una cantidad igual de
soluto cuyo tiempo de retencin sea cercano al del analito. La relacin del rea del
estndar o del analito a la del estndar interno se usa para preparar la curva de
calibracin y determinar la concentracin desconocida. Este mtodo compensa
variaciones de parmetros fsicos, en especial inexactitudes en el pipeteado o la
inyeccin de volmenes de muestras del orden de microlitros. Adems, la retencin
relativa permanecera constante, aun cuando la rapidez de flujo pueda variar.

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CONCLUSIONES
En la cromatografa de gases (GC), la muestra se vaporiza y se inyecta en la
entrada de la columna. La elusion se efecta con un gas inerte (He) o no
reactivo respecto de la muestra (N2 o H2).
La fase mvil no interacta con el analito, solo lo lleva. El analito pasa a la
fase mvil por su presin de vapor, que es funcin de la temperatura y de la
afinidad que tenga por la fase estacionaria
Para la inyeccin de la cromatografa de gases, la inyeccin debe ser rpida y
ocupar lo menos posible en el inicio de la columna (como cuando se siembra
en una capa bien fina en una columna separativa manual).
La inyeccin con divisin sirve para analitos en concentracin apreciable, ya
que diluye mucho la muestra. Es la que da los picos ms finos y la mejor
separacin. Mal limite de deteccin y baja repetitividad para anlisis
cuantitativo.
Se estudiaron dos tipos de dos tipos bsicos de columnas: las empaquetadas
(partculas dentro de la columna) y las capilares o abiertas, que solo tienen
fase estacionaria en la superficie interior.
Las columnas se realizan de acero inoxidable, de vidrio, de silica fundida y de
tefln. Suelen venir enrolladas para que entren dentro del horno del equipo de
GC.
La fase estacionaria, es un lquido que est cubriendo al soporte slido. Donde
para separar diversos componentes, se usan fases afines con los analitos a
resolver: lo similar disuelve lo similar.
El detector ideal debe tener buena sensibilidad, alta estabilidad y
reproducibilidad, una respuesta lineal de varios rdenes de magnitud, adems
de un rango de temperaturas de 25oC a 400 oC. Donde es relevante acotar que
ningn detector llega a ser ideal.

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REFERENCIAS

Gary, Christian. Qumica analtica. McGraw Hill, Mexico, sexta edicin.

Rouessac, Francis. Rouessac, Anick. Mtodos y tcnicas instrumentales

modernas. Analisis qumico. McGraw hill. Espaa 2003

Rodrguez Hctor, Mtodos en la Biotecnologa. Cromatografa de gases.

UNAM Mxico 2004.

Skoog, Douglas. Holler, James. Crouch, Stanley. Principios de anlisis

instrumental. Cengage Learning. 6ta Edicin.

Underwood A,L. Day R.A. Qumica analtica cuantitativa. 5ta edicin. Pretice
Hall.

Cromatografa de gases [Pgina Web en lnea] Consultado: 06/05/2015

Disponible:http://laboratoriotecnicasinstrumentales.es/analisisqumicos/cromatografa-de-gases

Gua de cromatografa. Facultad de ciencias.UCV. Venezuela 2008 [Pgina

Web

en

lnea]

Consultado:

06/05/2015

Disponible:

http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/LIApregrado/archivos/Guia%2
0para%20cromatografia.pdf

La cromatografa de gases [Pgina Web en lnea] Consultado: 06/05/2015

Disponible:
30746.htm

http://www.quiminet.com/articulos/la-cromatografia-de-gases-