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I NGENIERA EN
A LIMENTOS
Apellido y Nombre:..
PRCTICA DE LABORATORIO N 1- A
Determinacin de Nitrgeno total en protenas
Objetivos
El alumno al finalizar la prctica deber:
Fundamento
Las protenas comprenden un grupo de compuestos complejos que contienen nitrgeno.
Mtodo Kjeldahl se utiliza en qumica analtica para la determinacin del contenido de
nitrgeno en muestras orgnicas de gran inters en mbitos alimentario y el medioambiental.
En esta tcnica se digieren las protenas y otros compuestos orgnicos de los alimentos, en
una mezcla con cido sulfrico en presencia de catalizadores. Se pueden distinguir tres
etapas: digestin, destilacin y titulacin.
Destilacin, se libera amoniaco, el cual es retenido en una solucin con una cantidad
conocida de cido brico. Inicialmente se realiza una destilacin con vapor por el mtodo
de arrastre de vapor de agua, mediante la cual acelera la obtencin del destilado.
Equipos y materiales
Anillo de hierro
Balanza analtica
Refrigerante
Equipo de titulacin
Erlenmeyer de 500 ml
Embudo chico
Drogas y reactivos
cido sulfrico
Selenio
Rojo de metilo
BROMATOLOGIA
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Procedimiento
Digestin.
1- Pesar entre 1,5 y 2,0 g de muestra y transferir a un baln de kjeldhal seco de 500 800 ml
de vidrio Pyrex.
2- Pesar aproximadamente 10 g de sulfato de sodio anhidro y 0,6 0,8 g de selenio (tambin
se puede tener el catalizador ya preparado y agregarle una punta de esptula y agregarlo a
la mezcla en el baln.
3- Verter 25 ml de cido sulfrico concentrado de modo que sea arrastrado cualquier resto de
slido que quede en el cuello. Sostener el baln en posicin inclinada a 45 grados sobre el
soporte con anillo en una campana bien ventilada.
4- Calentar suavemente el contenido con una llama pequea. Al principio la mezcla formar
espuma y se ennegrecer. Cuando la espuma comienza a formarse con menos vigor,
aumentar la llama hasta que la mezcla hierva tranquilamente. A medida que progresa el
calentamiento la mezcla queda marrn y finalmente la solucin se vuelve perfectamente
incolora. Continuar el calentamiento a llama fuerte 15 minutos despus de la decoloracin.
5- Retirarla de la llama y dejarla enfriar en el baln.
Destilacin.
6- Al producto de la digestin, una vez fro por lo menos a 50C, se le agrega 200 ml de agua
destilada para minimizar los efectos de las mezclas que contienen altas proporciones
acido/sales, se agita.
7- Agregar 100 ml de hidrxido de sodio al 50 % y proceder a la destilacin.
Recoger el destilado en un Erlenmeyer de 500 ml que contenga 50 ml de HCl 0,1 N y unas
gotas de rojo de metilo como indicador.
Titulacin.
8- Titule la muestra con 0.1N de HCl. Un color violeta indica el punto final de la titulacin.
Cada equivalente del HCl usado corresponde a un equivalente de NH3 o a un equivalente de N
en la muestra original. El peso del N en mg est dado por miliequivalentes del cido X 14 (el
peso equivalente del N). El equipo completo utilizado se muestra en la figura 1.
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Clculos
Los valores de nitrgeno y protenas se obtienen a partir de las siguientes ecuaciones.
Donde:
V1: Volumen de HCl, expresada en ml
V2: Volumen de NaOH expresada en ml
P: Peso de la muestra en g.
= Factor de conversin para pasar de contenido en nitrgeno a contenido en protenas.
Discusin de resultados
Los valores obtenidos en la muestra sern constatados por los valores legales permitidos.
Informe
El formato general de presentacin debe respetar segn el Anexo I.
En el informe se debern incluir:
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Conclusiones generales.
El informe final deber ser ppresentado al profesor una semana despus de finalizada la
prctica.
Bibliografa