(1) Los enzimas son biocatalizadores producidos en las clulas,
que catalizan, es decir facilitan y aceleran las reacciones qumicas que
tienen lugar en los seres vivos, ya que disminuyen la energa de activacin que se necesita para que tengan lugar dichas reacciones, permitiendo que se produzcan a velocidades y temperaturas adecuadas. Como catalizadores que son actan mediante su presencia, no se consumen en la reaccin y al finalizar esta quedan libres pudiendo utilizarse de nuevo, por eso se necesitan en pequeas cantidades. Adems tienen otras caractersticas: Son muy especficas, por lo que actan en una determinada reaccin sin alterar otras. Actan a temperatura ambiente, la del ser vivo. Son muy activas, algunas aumentan la velocidad de la reaccin ms de un milln de veces Las enzimas suelen realizar su accin en las clulas en las que se producen, aunque a veces pueden actuar fuera de ellas ej. Enzimas digestivas. (2) Segn su composicin molecular las enzimas pueden ser de dos tipos: Enzimas que son protenas simples u holoprotenas. Estn formadas nicamente por una o varias cadenas de aminocidos. Son poco frecuentes, un ejemplo lo constituye la ribonucleasa que cataliza la hidrlisis del ARN Enzimas que son protenas conjugadas o heteroprotenas. Estas son la mayora, en este caso se denominan holoenzimas. En ellas se diferencia: una parte proteica llamadaapoenzima y una parte no proteica denominada cofactor. El cofactor puede ser de distinta naturaleza: Pueden ser cationes metlicos como: Fe++, Mg2+, Cu2+ etc. Ej la citocromo oxidasa que tiene como cofactor un tomo de hierro y uno de cobre. (3) Pueden ser molculas orgnicas complejas, en este caso se denominan: Coenzimas si se unen dbilmente y de forma temporal al apoenzima, por ejemplo el NAD+, FAD, etc, algunos de ellos tienen en su composicin una vitamina. Grupo prosttico si se unen mediante enlaces covalente y de forma permanente al apoenzima, por ejemplo el grupo hemo del citocromo c. Tanto la apoenzima como el cofactor son inactivas por si mismas, han de estar unidas para que la enzima (holoenzima) sea activa. El apoenzima determina la especificidad de la reaccin, es decir determina el sustrato sobre el que puede actuar, mientras que el cofactor presenta los grupos que permiten la transformacin del sustrato. Un mismo cofactor puede ser constituyente de diferentes holoenzimas. (4) MECANISMO DE LA ACCION ENZIMATICA En toda reaccin enzimtica se diferencian dos fases: 1) El sustrato (reactivos) se fija especficamente al enzima, formndose el complejo enzima-sustrato. La unin entre el enzima y el sustrato se debe a enlaces dbiles (puentes de hidrgeno, atracciones electrostticas etc), que
se rompen fcilmente una vez que el enzima ha realizado su accin. La unin
se produce en una zona del enzima denominado centro activo. El centro activo es una pequea regin de la superficie del enzima que tiene forma de hueco o repliegue, y cuya estructura tridimensional se adapta perfectamente a la estructura complementaria del sustrato. Este centro activo esta formado por: los aminocidos de uninque son los que le unen al sustrato y, los aminocidos catalticos que son los que realizan la accin enzimtica. Estos aminocidos pueden encontrarse muy alejados en la secuencia de la protena enzimtica, pero se encuentran muy prximos entre si debido a la estructura terciaria de la protena enzimtica; por eso si la protena enzimtica se desnaturaliza el centro activo se destruye y el enzima dejara de realizar su funcin. Una vez que el enzima se une al sustrato mediante los aminocidos de unin, actan sobre l los aminocidos catalticos que sern los que producen la ruptura de enlaces y la formacin de otros nuevos, transformando el sustrato en producto. Cuando el enzima presenta un cofactor, este se localiza en el centro activo. 2)Liberacin de los productos. Una vez producida la accin enzimtica, el complejo enzima-sustrato se desintegra quedando libre por un lado el enzima, el cual podr volver a ser utilizado de nuevo y, por otro lado el sustrato pero ya convertido en producto. (5) ESPECIFICIDAD ENZIMTICA Una de las caractersticas ms importantes de los enzimas es su alta especificidad sobre la reaccin que catalizan. Cada enzima cataliza un solo tipo de reaccin, y casi siempre acta sobre un nico sustrato o sobre un grupo muy reducido de ellos. Esta especificidad se debe a la complementariedad que debe existir entre el sustrato y el centro activo del enzima. La especificidad se establece a dos niveles: Especificidad de accin: Es decir un enzima solo puede realizar un determinado tipo de reaccin: hidrlisis, xido-reduccin, etc. Especificidad de sustrato: Esto significa que cada enzima slo puede actuar sobre un sustrato, o sobre un reducido nmero de sustratos. Esta especificidad puede ser: Absoluta. El enzima acta sobre un nico sustrato. Ej. ureasa acta sobre la urea y la desdobla en CO2 y NH3. De grupo. El enzima acta sobre un grupo de sustratos que presentan un determinado tipo de enlace. Ej las descarboxilasas eliminan un grupo CO2 de los aminocidos. Estereoqumica. La enzima acta sobre un estereoismero y no sobre el otro. Ej. la aspartasa acta sobre el L-asprtico y no sobre la forma D. (6) Factores que influyen en la actividad enzimtica La actividad de las enzimas se ve afectada por diversos factores entre los que destacan los siguientes:
Concentracin del sustrato
En toda reaccin catalizada por un enzima, si se mantiene constante la concentracin del E, la velocidad de la reaccin aumenta exponencialmente al incrementarse la concentracin del sustrato, ya que al existir ms molculas de sustrato es ms probable el encuentro con el enzima y la formacin del complejo E-S. Este aumento de velocidad es rpido para concentraciones bajas de sustrato y, a medida que este aumenta, se va haciendo ms lento hasta que la concentracin del sustrato alcanza un cierto valor, a partir del cual, aunque aumente la concentracin del mismo, no aumenta la velocidad de la reaccin. Esto es debido a que el enzima esta saturada por el sustrato; es decir, todas las molculas del enzima estn unidas al sustrato formando el complejo E-S. Cuando ocurre esto, se dice que la reaccin ha alcanzado la velocidad mxima. (7)Temperatura La T influye en la actividad enzimatica. En general por cada 10C que aumente la temperatura la velocidad de la reaccin aumenta de 2 a 4 veces. Esta regla se cumple hasta que la temperatura alcanza un valor mximo (T ptima) donde la actividad es mxima. Esto se debe a que al aumentar la T aumenta el movimiento de las molculas y, por tanto aumenta la probabilidad de encuentro entre el S y el E. Si la T aumenta por encima de la T ptima, disminuye e incluso cesa la actividad enzimtica debido a que la enzima se desnaturaliza. Cada enzima posee una T ptima, en las enzimas humanas suele estar alrededor de 37C. Los animales poiquilotermos debido a que carecen de mecanismos para regular la T corporal, se ven obligados a hibernar en la estacin fra pues la actividad de sus enzimas debido a las bajas temperaturas es muy baja. (8)pH El pH es otro factor que influye en la actividad enzimtica, debido a que el pH influye en la ionizacin de los grupos funcionales de los aminocidos que forman la protena enzimtica. Cada enzima realiza su accin dentro de un determinado intervalo de pH, dentro de este intervalo habr un pH ptimo donde la actividad enzimatica ser mxima. Por debajo del pH minimo o por encima del pH mximo el enzima se inactiva ya que se desnaturaliza. En la mayora de las enzimas el pH ptimo esta prximo a la neutralidad, aunque hay excepciones. (9)Inhibidores: Son compuestos qumicos que se unen al enzima, en distintos puntos del mismo y disminuyen o incluso impiden su actividad. Estos compuestos pueden ser de distintos tipos: iones, molculas orgnicas y a veces el producto final de la reaccin. A la accin que realizan se la denomina inhibicin. La inhibicin puede ser: Inhibicin irreversible: Cuando el inhibidor impide permanentemente la actividad enzimtica, bien porque se une de forma permanente con grupos funcionales importantes del centro activo o bien porque altera su estructura. A estos inhibidores se les denomina venenosy a la inhibicin que realizan se la
denomina envenenamiento del enzima. Ej. La penicilina que inhibe las
enzimas que sintetizan la pared bacteriana. El in cianuro acta sobre la citocromo oxidasa (enzima respiratorio). (10) Inhibicin reversible: El inhibidor se une al enzima de forma temporal mediante enlaces dbiles e impide el normal funcionamiento del mism, pero no la inutiliza permanentemente. Puede ser de dos tipos: Competitiva: El inhibidor es similar al sustrato y se puede unir al centro activo del enzima impidiendo que lo haga el sustrato. Es decir ambos, inhibidor y sustrato compiten por unirse al centro activo del enzima. La accin suele anularse aumentando la concentracin del sustrato No competitiva: El inhibidor no compite con el sustrato, puede actuar de 2 formas: -Sobre el enzima, unindose a el en un lugar diferente al centro activo y modificando su estructura lo que dificulta que el enzima se pueda unir con el sustrato. -Sobre el complejo E-S unindose a l y dificultando su desintegracin y por lo tanto la formacin de los productos. (11)NOMENCLATURA Y CLASIFICACION DE LAS ENZIMAS La forma de nombrar a los enzimas ha cambiado a lo largo de la historia, al principio se las nombr sin seguir unas normas, a capricho. Hoy da a muchas se las nombra con el nombre del sustrato acabado en asa. Ej. Maltasa, sacarasa etc. Aunque la forma ms correcta es la siguiente: 1) Se nombra el sustrato sobre el que acta. 2) A continuacin el nombre de la coenzima, si la hay. 3) Por ltimo la funcin que realiza acabado en asa. A los enzimas se las ha dividido en 6 grupos segn el tipo reaccin que catalizan. A cada uno de estos grupos se les designa con el nombre de la reaccin acabado en asa. (12)Clase I Oxidorreductasas: Catalizan reacciones de oxido-reduccin o redox. Normalmente las reacciones de oxidacin van siempre acopladas a las de reduccin, pues cuando un compuesto se oxida otro se reduce. La oxidacinreduccin se puede producir de 3 formas: Oxidacin Reduccin 1- Ganancia de oxgeno 1- Perdida de oxgeno. 2- Perdida de hidrgeno. 2- Ganancia de hidrgenos 3- Perdida de electrnes 3- Ganancia de electrnes A H2 + B -----------> A + B H2 reducido oxidado oxidado reducido A2+ + reducido
B3+ -----------> A3+ +
oxidado oxidado
B2+ reducido
(13)Clase II Transferasas: Catalizan reacciones en las que se transfieren
grupos funcionales de un compuesto a otro. A-X + B ------> A + B-X Clase III Hidrolasas: Catalizan reacciones de hidrlisis, es decir la ruptura de enlaces con la intervencin del agua. A este grupo pertenecen las enzimas digestivas. A-B + H2O ------> A-OH + B-H. Clase IV Liasas: Catalizan la adicin y separacin de grupos funcionales sin la intervencin de agua, mediante la eliminacin o la formacin de dobles enlaces. A-B ------> A=B + X | X (14)Clase V Isomerasas: Catalizan reacciones de isomerizacin, que producen reordenaciones de los tomos dentro de la molcula. A-B ------> A-B | | X X Clase VI Ligasas o sintetasas: Catalizan la unin de dos molculas para sintetizar una mayor. Obtienen la energa necesaria para crear el enlace de la hidrlisis del ATP. A + B + ATP ------> A-B + ADP+P (15)Biotecnologa La biotecnologa se refiere a toda aplicacin tecnolgica que utilice sistemas biolgicos y organismos vivos o sus derivados para la creacin o modificacin de productos o procesos para usos especficos. La BIOTECNOLOGA TRADICIONAL utiliza organismos vivos, que pueden ser animales, plantas o microorganismos (bacterias, hongos, etc.) La BIOTECNOLOGA MODERNA recurre a los mtodos y tcnicas de la ingeniera gentica con el objeto de conseguir mejoras en la calidad o en el rendimiento de los procesos industriales Aplicaciones (16) Biotecnologa Roja: Agrupa todos aquellos usos de la biotecnologa relacionados con la medicina. La biotecnologa roja incluye la obtencin de vacunas y antibiticos, el desarrollo de nuevos frmacos, tcnicas moleculares de diagnstico, las terapias regenerativas y el desarrollo de la ingeniera gentica para curar enfermedades a travs de la manipulacin gentica.
(17) Biotecnologa Blanca Engloba a todos aquellos usos de la biotecnologa
relacionados con los procesos industriales. Por esta razn, es tambin conocida como biotecnologa industrial. La biotecnologa blanca presta especial atencin al diseo de procesos y productos que consuman menos recursos que los tradicionales, hacindolos energticamente ms eficientes o menos contaminantes. (18) Biotecnologa Azul Se basa en la explotacin de los recursos del mar para la generacin de productos y aplicaciones de inters industrial. Si tenemos en cuenta que el mar ofrece la mayor biodiversidad. (19) Biotecnologa Verde Se centra en la agricultura, incluyen la creacin de nuevas variedades de plantas de inters agropecuario, la produccin de biofertilizantes y biopesticidas, el cultivo in vitro y la clonacin de vegetales, persigue tres objetivos fundamentales: busca la obtencin de variedades resistentes a plagas y enfermedades, utiliza las plantas transgnicas para el desarrollo de variedades con mejores propiedades nutricionales y la transgnesis en plantas tambin se estudia como medio para obtener variedades de plantas que acten como productoras de sustancias de inters mdico, biosanitario o industrial en cantidades fcilmente aislables y purificables. (20) Biotecnologa Gris: Est constituida por todas aquellas aplicaciones al medio ambiente. Se subdivide en dos grandes ramas de actividad: el mantenimiento de la biodiversidad y la eliminacin de contaminantes, tambin pueden incluirse las tcnicas de clonacin con el fin de preservar especies y la utilizacin de tecnologas de almacenamiento de genomas. En cuanto a la eliminacin de contaminantes o biorremediacin, hace uso de microorganismos y especies vegetales para el aislamiento y la eliminacin de diferentes sustancias (21) ADN recombinante La biotecnologa moderna se basa en la manipulacin del ADN de los diferentes organismos. Con herramientas de la biologa molecular (enzimas de restriccin) es posible tomar un fragmento pequeo de ADN de un organismo (por ejemplo bacteria) e insertarlo en el ADN (genoma) de una planta. Eso se conoce con el nombre de tecnologa del ADN recombinante (ADN de 2 o ms fuentes diferentes) (22) Aplicacin farmalgicas: se transfieren de genes humanos a bacterias para conseguir que estos organismos produzcan protenas de grandes cantidades, que son necesarias para el tratamiento de ciertas enfermedades.
Aplicacin mdica: La terapia gnica se encarga del tratamiento de
enfermedades producidas por una alteracin gentica (diabetes,parkinson) ya que sustituye el gen defectuoso por un gen sano para producir con normalidad la protena Aplicacin en la industria: se han creados plantas resistentes a herbicidas, animales ms grandes y resistente a condiciones ambientales adversas, etc. (23) Alimentos Transgnicos Los alimentos transgnicos son aquellos alimentos a los que se les han insertado genes exgenos (de otras plantas o animales) en sus cdigos genticos, con el objeto que se exprese en el alimento las caractersticas del nuevo gen introducido. Por medio de la biotecnologa, se han alterado genticamente los tomates, las patatas (papas), la ahuyama o calabaza y el maz. Muchos alimentos ms contienen ingredientes modificados y se estn desarrollando otros ms. La creacin de organismos transgnicos ha generado un debate cientfico y tico, debido a que se cuestiona su impacto sobre la salud, la economa y la biodiversidad.