Ecologia Microbiana Periodontal

Copyrigh t Gru po Ars XXI de Com u n icacin , S.L.
Periodon tology 2000 (Ed Esp), Vol. 12, 2006, 135-187
Cop yrigh t Bla ck w ell M u n k sga a rd
PERIOD ONTOLOGY 2 0 0 0 (Ed Es p )
PERIOD ONTOLOGY 2 0 0 0
ISSN 1695- 1808
ISSN 0906- 6713
Ecologa microbial periodontal

SIGMUND S. SOCRANSKY Y ANNE D. H AFFAJEE
Los autores se han tom ado la libertad de presen tar este
origin al en dos partes. La prim era parte es un a breve in troduccin a la ecologa m icrobian a, porque, aun que la
im portan cia de la ecologa m icrobian a en las en ferm edades periodon tales est am pliam en te recon ocida, la m ayora de los odon tlogos n o con oce de form a precisa el
sign ificado de este trm in o. La segun da seccin es un a
revisin bastan te exten sa de los estudios actuales de la
ecologa m icrobian a bucoden tal, basada casi por com pleto en los ltim os estudios realizados in vivo.
Principios de la ecologa microbiana

La ecologa m icrobian a estudia las in terrelacion es en tre los m icrobios y sus en torn os. Los ecologistas del hbitat, in cluidos los m icrobilogos periodon tales, exam in an los m icroorgan ism os de un hbitat con creto e
in ten tan an alizar los efectos de estos m icrobios sobre su
en torn o, as com o los efectos de la in fluen cia del hbitat
sobre sus residen tes. Muchos de los prin cipios de la ecologa m icrobian a fueron esbozados en un a excelen te m on ografa realizada por Alexan der (2), y sern an alizados
de form a breve a con tin uacin , jun to con algun os ejem plos adecuados, para destacar algun os de sus pun tos
clave.
El ecosistema
Un con cepto clave en la ecologa m icrobian a es el ecosistem a. Un ecosistem a es un com plejo con stituido por
los m icroorgan ism os situados en un en torn o especfico
y por com pon en tes n o m ricobian os circun dan tes con los
que los m icroorgan ism os estn asociados. El ecosistem a
in cluye el en sam blaje en tre especies y con stituyen tes orgn icos e in orgn icos que caracterizan esa zon a en particular. Cada ecosistem a posee un a coleccin de m icroorgan ism os y com pon en tes n o m icrobian os sin gulares
para l y slo para l. El en sam blaje de los m icroorgan ism os que con stituyen un a com un idad con sta de poblacion es de especies m icrobian as in dividuales. Esto con duce a un a jerarqua desde el ecosistem a hasta la
com un idad, la poblacin y un a n ica clula. Un o de los
objetivos de este n m ero de Periodon tology 2000 es defin ir el en sam blaje de las especies en el hbitat periodon tal, para determ in ar de qu m odo los cam bios en el
hbitat afectan a la com un idad y de qu m odo la com un idad afecta al hbitat.
Hbitat y nichos ecolgicos

El hbitat es la zon a en la que un a poblacin o com un idad crece, se reproduce o sobrevive. El papel de un
m icroorgan ism o den tro de un determ in ado hbitat es su
n icho. El n icho ecolgico n o con n ota la localizacin sin o
m s bien la fun cin . Un a especie puede ten er un n icho
en un hbitat y un n icho diferen te en otro hbitat distin to.
Sucesin microbiana
En un ecosistem a que evolucion a, ciertas especies den om in adas m icroorgan ism os pion eros colon izan en prim er lugar. Estas especies a m en udo son sustituidas por
otras especies, tras haber alterado el hbitat, con virtin dolo en adecuado para que sea colon izado por otras especies. Existen dos tipos de sucesin m icrobian a. En la
sucesin autgen a, la secuen cia de las especies surge porque las poblacion es residen tes alteran sus en torn os de
tal m an era que son sustituidas por especies m ejor adaptadas al hbitat m odificado. En la sucesin algen a, un
tipo de com un idad es sustituido por otro porque el hbitat es alterado por factores n o m icrobian os, tales com o
los cam bios en las propiedades fsicas o qum icas de la
regin o los cam bios en el an fitrin . Los factores que con tribuyen a la sucesin son :
Provisin por un a com un idad de un n utrien te que con fiere un a ven taja ecolgica para la especie en el siguien te estadio de sucesin .
El hecho de que un a poblacin haga dispon ible un
con stituyen te presen te en in suficien te sum in istro, para
perm itir el crecim ien to de un a poblacin posterior.
Alteracin en la con cen tracin de un n utrien te in orgn ico.
Modificacin de los substratos heterogn eos tales com o
el tejido an im al.
Un efecto de autoin toxicacin .
Elim in acin de un m icroorgan ism o por m edios fsicos.
Aparicin de barreras, debido a la retroalim en tacin
am bien tal.
El desarrollo de la gin givitis proporcion a un ejem plo
de la sucesin m icrobian a, as com o la in teraccin en tre
las especies del hbitat. Loe y cols. (90) y Theilade y cols.
(170) dem ostraron que la placa bacterian a causaba gin givitis. Se m ostr que la in terrupcin del cepillado de los
135
Socran sk y y Haffajee
dien tes duran te 28 das en volun tarios con periodon cio

san o dio com o resultado un a rpida acum ulacin de placa
bacterian a sobre los dien tes. La gin givitis se produjo en
todos los in dividuos en el plazo de 10-21 das. El restablecim ien to de los procedim ien tos de higien e bucoden tal elim in la placa bacterian a e in virti la gin givitis. Los
preparados citolgicos te idos obten idos en el tran scurso
de los 28 das revelaron un a colon izacin in icial de cocos
y bacilos gram positivos, seguidos por cocos y bacilos
gram n egativos, luego, fusobacterias y filam en tos, y, fin alm en te, espirilos y espiroquetas. La aparicin de gin givitis cln ica se relacion con la presen cia de form as gram n egativas. Estos datos con cuerdan con los de otros
estudios que dem ostraron la sucesin m icrobian a en el
desarrollo de la placa bacterian a (140, 161, 188). Los estudios dan eses asociaron ciertos m orfotipos bacterian os
con un cam bio en el estado cln ico de la zon a, es decir,
el desarrollo de gin givitis. Los datos presen tados a con tin uacin dem uestran que las especies de los com plejos
rojo y n aran ja (que se describirn m s adelan te) son m s
prevalen tes y se en cuen tran en m ayores can tidades en
las lesion es de un a gin givitis establecida. Los m ism os taxon es son , in cluso, m s predom in an tes y n um erosos en
las lesion es que supuran . Por lo tan to, el cam bio en la
com posicin de la placa bacterian a parece afectar al hbitat, ocasion an do un a gin givitis cln icam en te eviden te.
Otros estudios in dican que un cam bio en el hbitat, com o
el desarrollo de la gin givitis, tam bin afecta al desarrollo
de la placa bacterian a. Tras la lim pieza, la placa bacterian a se acum ul m ucho m s rpidam en te en las zon as
que exhiban gin givitis m s que en aquellas zon as san as
(25, 132). En con secuen cia, es posible postular un orden
de sucesin m icrobian a en la in teraccin recproca en tre
el an fitrin y las bacterias (fig. 1). Los m iem bros de cada
un o de los com plejos codificados por colores se describen m s adelan te en otro apartado. La colon izacin in icial parece in volucrar a los m iem bros de los com plejos
am arillo, verde y m orado, jun to con las especies Acti-
nom yces. Ello con duce a un a sucesin autgen a en la que

los m iem bros del com plejo n aran ja y, luego, del rojo se
vuelven m s dom in an tes. Se form ul la hiptesis de que
el aum en to de las con cen tracion es de los dos ltim os
com plejos ocasion a un cam bio en el hbitat, cln icam en te
m an ifestado por la gin givitis. La gin givitis, a su vez, favorece la proliferacin adicion al n o slo de los m iem bros
de los com plejos n aran ja y rojo, sin o probablem en te tam bin los m iem bros de las prim eras especies colon izadoras. Este ciclo podra rom perse de m uchas m an eras. La
prim era sera elim in ar la placa bacterian a; esta estrategia
parcialm en te exitosa es la m s frecuen tem en te em pleada
hoy en da. La segun da sera elim in ar los m iem bros de
los com plejos rojo y/ o n aran ja. Esto seguram en te lim itara la gin givitis y su efecto de retroalim en tacin de un a
m ayor form acin de placa bacterian a. La tercera sera reducir la gin givitis con tratam ien to n o an tibitico; esto
con ducira a reducir la acum ulacin de placa bacterian a
y, posiblem en te, a reducir el desarrollo de los com plejos
rojo y n aran ja. Merece la pen a destacar que el efecto de
un a pauta de preven cin o de tratam ien to sera un ejem plo de la sucesin algen a.
Factores que limitan la colonizacin

Existen determ in ados factores que lim itan la colon izacin . Un a lim itacin obvia es la dispon ibilidad del espacio fsico. La colon izacin preven tiva es un a segun da
situacin en la que la previa colon izacin por un a especie excluye a otra. La exclusin est producida por la ocupacin , por parte de un a especie, de un n icho ecolgico
que estaba ocupado por otra. La prim era especie realiza
las actividades, utiliza los n utrien tes y/ o ocupa los lugares fsicos de la especie excluida. La resisten cia am bien tal es la restriccin en can tidades de in dividuos o biom asa im puesta por factores fsicos, qum icos o biolgicos
del ecosistem a. La con dicin que sostien e a la poblacin
bajo con trol es con siderada un a barrera. La colon izacin
Sucesin m icrobiana
Morado
Actinom yces sp.
Am arillo
Verde
Fig. 1. Hiptesis de la adicin de especies durante la sucesin

microbiana que ocasiona la aparicin de la inflamacin gin-
136
Naranja
Interaccin recproca
Rojo
Gingivitis
gival. A su vez, el aumento de la inflamacin ocasionara un

incremento del crecimiento de las especies colonizadoras.
Ecologa m icrobial periodon tal
preven tiva es un o de los prin cipales m edios de exclusin

de los m icrobios que llegan m s tarde y con stituye, jun tam en te con las barreras fsicas y qum icas locales, un o
de los com pon en tes de la resisten cia del en torn o. Cualquier in vestigador periodon tal que ha in ten tado in troducir un a especie de prueba en la placa bacterian a periodon tal puede atestiguar la eficacia de estas barreras.
Diseminacin de los microorganismos

Para que los m icroorgan ism os que estn lim itados por
su n aturaleza a vivir en asociacin con un an fitrin adecuado puedan con tin uar sobrevivien do, su dispersin es
esen cial. La disem in acin puede realizarse de un m odo
activo o pasivo. Por ejem plo, el crecim ien to y la m ovilidad pueden propagar activam en te un a especie de un lugar a otro den tro de la cavidad bucal y de un a person a a
otra person a. La disem in acin pasiva se produce tan to
den tro de la cavidad bucal com o de un in dividuo a otro.
Los m icroorgan ism os m uestran cen tros de dispersin ,
region es desde las que las especies se disem in an o extien den . En estas zon as, las con dicion es son favorables
para un aum en to en la den sidad de la especie, y las zon as sirven com o pun tos desde los cuales las especies pueden em an ar. Un a zon a con estas caractersticas recibe el
n om bre de reservorio de la in feccin . Cuan to m ayor sea
la eficien cia del m ecan ism o de dispersin , m en or es el
n m ero de m icroorgan ism os n ecesarios para la dispersin . Las especies bucales pueden disem in arse desde un
in dividuo a travs de peque as gotculas o de objetos
in an im ados. Se han utilizado herram ien tas de la epidem iologa m olecular para dem ostrar la tran sm isin vertical (de padres a hijos) por Actin obacillu s actin om ycetem com itan s (124, 125, 128) y Porphyrom on as gin givalis
(125), as com o la tran sm isin horizon tal que sucede en tre la pareja por P. gin givalis (143, 175). Otro ejem plo de
tran sm isin procede de estudios an teriores realizados
acerca de la gin givitis ulcerativa n ecrosan te aguda, tam bin con ocida com o an gin a de Vin cen t (boca de trin chera). Esta en ferm edad era tran sm itida en tre las tropas
en la prim era guerra m un dial y, posteriorm en te, a la poblacin civil (154).
Riviere y cols. (141) descubrieron que la in ciden cia de
espiroquetas y P. gin givalis era m ayor en las zon as en ferm as de in dividuos en ferm os que en las zon as san as
de in dividuos en ferm os (fig. 2). De m ayor im portan cia
fue el descubrim ien to adicion al de que las zon as san as
de los in dividuos en ferm os albergaban estas especies con
m ayor frecuen cia que las zon as san as de las person as san as. Este hallazgo se ha con firm ado en otros estudios, tal
com o se describir m s delan te. Los autores pen saron
que las bolsas m s profun das de las person as en ferm as
estaban actuan do com o reservorios para exten der la in feccin a las zon as san as. Esto de hecho es un a posibilidad, aun que son posibles otras hiptesis altern ativas.
Enfermedad infecciosa
La en ferm edad in fecciosa represen tan un a categora
de in teraccion es en tre la poblacin y el en torn o, que in volucra a un an fitrin y a un m icroorgan ism o con poten cial tan to para la colon izacin com o para la patogen ia. Desde el pun to de vista ecolgico, la caracterstica
que gobiern a el ecosistem a es la vida an im al y hum an a.
El an fitrin debe poder ser colon izado, es decir, debe ser
receptivo a la in vasin efectuada por un agen te patgen o
con creto. No todos los an im ales superiores pueden ser
colon izados por todas las bacterias, hon gos o virus pa-
P. gingivalis
Espiroquetas
154
60
% de
zonas
16
Sanas
342
Gingivitis
45
12
Periodontitis precoz
1214 360
Periodontitis avanzada
342
30
1214
408
408
Salud Gingivitis
609
11
1708
Periodontitis
precoz
61
363
609
4
136
268
363
360
15
154
136
Periodontitis
avanzada
29
Fig. 2. Grficos de barras de la frecuencia de deteccin de

espiroquetas y P. gingiva lis en zonas e individuos con caractersticas clnicas distintas. Las espiroquetas fueron
identificadas utilizando la m icroscopia de contraste de
fase, y P. gingiva lis, m ediante el anlisis inm unocitoqum ico. Los nm eros encim a de las barras indican la canti-
1708
268
Salud Gingivitis
5
11
Periodontitis
precoz
61
Periodontitis
avanzada
29
dad de m uestras exam inadas. Los colores de las barras indican las caractersticas de la m uestra. Las calificaciones
bajo las barras indican la clasificacin del sujeto de estudio, y los nm eros bajo las barras indican el nm ero de
individuos exam inados. Datos adaptados de Riviere y cols.
(141).
137
tgen os. Tres tipos de barreras son la base de la ausen cia de receptividad:
Las barreras del an fitrin n o receptivo.
Los factores asociados con la resisten cia del an fitrin
receptivo an tes de su prim er con tacto.
Los obstculos para un m ayor desarrollo o actividad
bacterian a, que aparecen a con secuen cia de la in feccin .
En efecto, existe un a retroalim en tacin am bien tal, un a
m odificacin del hbitat ocasion ada por la presen cia de
un a o m s poblacion es bacterian as, un cam bio que puede
afectar al tam a o, la actividad o la superviven cia de la
poblacin in vasora o un o o m s segm en tos de la com un idad. La produccin de an ticuerpos fren te a las especies colon izadas es un ejem plo de retroalim en tacin am bien tal. Este tem a se an alizar en m ayor detalle m s
adelan te en este captulo.
Colonizacin exitosa
El xito de la colon izacin de un a especie depen de de:
Su presen cia en el lugar colon izable en el m om en to
adecuado.
Posesin de capacidad de superviven cia que perm ita
un a viabilidad prolon gada en circun stan cias n ocivas.
Capacidad para obten er del ecosistem a todos los n utrien tes que n ecesita.
Capacidad para tolerar todos los factores n o m icrobian os ecolgicam en te sign ificativos del en torn o, por
ejem plo, pH, con cen tracion es de O2, tem peratura, presin osm tica, poten cial de reduccin de oxidacin .
Posesin de m ecan ism os para superar la resisten cia del
en torn o atribuible a an fitrion es viables, o para hacerle
fren te.
Capacidad para ven cer la resisten cia am bien tal atribuible a las especies que ya form an parte del hbitat,
o para hacerle fren te.
Capacidad para crecer tan rpidam en te com o sus vecin os.
Capacidad para adherir a las superficies apropiadas.
El papel que desem pe an algun os de estos factores en
la form acin de com plejos m icrobian os fue an alizado en
Socran sky y cols. (156).
La comunidad culminante (clmax)

La in teraccin en tre los com pon en tes m icrobian os y
n o m icrobian os de un ecosistem a con duce, fin alm en te,
a un a form a de estabilizacin en la que las form as m icrobian as y n o m icrobian as existen en arm on a y equilibrio con su en torn o. ste es el clm ax de la com un idad.
Esta situacin perm an ece relativam en te estable a travs
del tiem po y refleja un a situacin din m ica en la que las
clulas m ueren y se sustituyen . Este clm ax es esen cialm en te un a en tidad autorreplican te, que se reproduce a
s m ism a con un a fidelidad extraordin aria. Dada la pre-
138
sen cia de zon as con las m ism as caractersticas fsicas y

qum icas in iciales, o la presen cia de an fitrion es idn ticos, sern in iciadas y prom ovidas las m ism as secuen cias
de sucesin gen erales, que darn lugar a com un idades
clm ax n otablem en te sim ilares. El clm ax puede m odificarse de tiem po en tiem po, debido a la accin de fuerzas exgen as. El equilibrio tien de a ser restaurado a m edida que el hbitat vuelve a su estado origin al. En otras
ocasion es, los en torn os pueden estar irreversiblem en te
alterados; esta situacin con duce a un diferen te estado
de equilibrio y a un diferen te clm ax de la com un idad. El
clm ax con tien e m uchos n ichos ecolgicos, y las especies que ocupan cada un o de ellos estn exclusivam en te
adaptadas a la fun cin asociada con el n icho, al m en os
en tre las especies que tien en acceso al lugar. A m edida
que hay m s n ichos o fun cion es poten ciales, particularm en te cuan do existe un en tram ado de caden as alim en tarias, m uchos grupos diferen tes de m icrobios pueden
coexistir in defin idam en te.
La m ayora de las placas bacterian as desarrolladas represen tan un a com un idad clm ax. Las perturbacion es
m en ores probablem en te producen un n uevo desarrollo
de la m ism a com un idad. Las estrategias preven tivas o teraputicas posiblem en te en cuen tran un a ten den cia del
ecosistem a a regresar al equilibrio origin al tras fin alizar
el tratam ien to. Esta ten den cia puede ser frustran te para
el m dico, pues es n ecesaria un a fase de m an ten im ien to
prolon gada despus de la terapia. A m en udo, el profesion al desea que se produzcan cam bios m s profun dos
en la m icrobiota periodon tal tras el tratam ien to. Sin em bargo, com o dice el viejo refrn : cuidado con lo que deseas, porque puede hacerse realidad. Pueden efectuarse
cam bios perm an en tes en la m icrobiota em plean do poten tes fuerzas exgen as de n aturaleza persisten te. Resulta in structivo an alizar un caso cln ico recien te de un
pacien te en el que la m icrobiota ofreca un a con stan te
resisten cia al tratam ien to. El pacien te en cuestin es un
profesion al de la odon tologa que exhibi sign os in iciales de periodon titis hace aproxim adam en te 10 a os. Su
tratam ien to in icial con sisti en raspado y alisado radicular y, posteriorm en te, tratam ien to quirrgico. La en ferm edad con tin u avan zan do y produjo la prdida de
cin co piezas den tarias en 2 a os, acom pa ada, adem s,
por m ucho dolor. Se le adm in istraron , en secuen cia: tetraciclin a in traven osa, am picilin a, am oxicilin a + m etron idazol, clin dam icin a, ciprofloxacin o, dosis bajas a largo
plazo de doxiciclin a y diversos agen tes locales com o Actidite , clorhexidin a y Triclosn (flum etason a) duran te
un perodo aproxim ado de 4 a os. En el m om en to en
que se tom aron m uestras, su m icrobiota se haba sim plificado, de form a que Streptococcu s oralis com pren da
el 95 % de la m icrobiota cultivable. Las espiroquetas, form as m viles, Fu sobacteriu m , Veillon ella, Prevotella, Capn ocytophaga y Eiken ella fueron in detectables por cultivo
o son da de ADN. Un a n ueva poblacin clm ax se haba
establecido en este in dividuo, la que im peda el establecim ien to de taxon es adicion ales. Lam en tablem en te, esta
poblacin clm ax n o era com patible con el an fitrin . Se
Estudios actuales de la ecologa

microbiana bucodental
LQUIDO CIRCULATE
Los 215 cm 2 de rea de superficie de la cavidad bucal

(23) presentan num erosas superficies para la colonizacin m icrobiana. Las diversas superficies m ucosas estn
recubiertas por distintos tipos de epitelios, m ientras que
las superficies duras son representadas por las piezas dentarias o diversos tipos de prtesis. Estas superficies se encuentran continuam ente baadas por un volum en de
fluido, principalm ente saliva, Existe, por lo tanto un entorno excelente para el desarrollo de la biopelcula. Los
m icroorganism os que colonizan estas superficies producen biopelculas de distintas com plejidades, en funcin
de la localizacin intrabucal, los antecedentes genticos
y los factores am bientales especficos de cada persona.
Las superficies de la cavidad bucal pueden ser colonizadas por 700 bacterias (120). Se ha dem ostrado que pueden producirse notables diferencias en la com posicin
m icrobiana de una persona a otra, de un tipo de localizacin intrabucal a otro en el m ism o individuo (p. ej.,
dorso de la lengua frente a placa subgingival) y de tipos
parecidos de zonas en el m ism o individuo (por ejem plo,
dos bolsas periodontales separadas). Tan com pleja com o
pueda parecer esta m icrobiota, las aproxim adam ente 500
especies que pueden detectarse en la placa subgingival
son una m inscula fraccin de las especies bacterianas
presentes en el planeta Tierra (aproxim adam ente, m il m illones, o m s), las que, potencialm ente, podran colonizar la cavidad bucal. Est claro que existen potentes fuerzas que controlan el establecim iento de la m icrobiota
bucal, gobiernan su com posicin e influyen sobre su restablecim iento cuando el ecosistem a ha sido alterado. La
intencin de este apartado es describir algunos de los factores que influyen sobre el desarrollo y la com posicin de
las biopelculas intrabucales hum anas y que originan las
variaciones que pueden observarse de un individuo a otro
y de una zona a otra en la m ism a persona.
El estudio de las relaciones entre el anfitrin y el m icrobio no es fcil, en parte a causa de la com plejidad de
la m icrobiota, y en parte a causa de la m ultiplicidad de
factores que influyen sobre la com posicin m icrobiana
de una biopelcula en una zona dada. Todas las biopel-
culas constan de tres com ponentes (fig. 3): la necesidad

de una superficie para la adherencia de la biopelcula, la
propia com unidad de la biopelcula, y el caudal de fluido
que pasa sobre la biopelcula, proporcionando nutrientes para los m icroorganism os colonizadores, elim inando
los productos m etablicos de desecho y transportando
las clulas a nuevas zonas de colonizacin. Cada uno de
estos com ponentespuede ser alterado por factores locales o del individuo, que pueden influir sobre la com posicin m icrobiana de la biopelcula colonizadora. Por
ejem plo, la naturaleza de la superficie presentada para la
colonizacin puede estar influida por el tipo de tejido presente, los antecedentes genticos del individuo (que pueden alterar los receptores de superficie), la posible introduccin de superficies artificiales, las prcticas higinicas,
etc. Dada esta heterogeneidad, es esencial exam inar grandes cantidades de m uestras de em plazam ientos sim ilares y diferentes para intentar discrim inar los factores locales y del anfitrin que gobiernan la com posicin de las
biopelculas bucodentales hum anas. Es crtico para la
com prensin de estos factores el reconocim iento de que
estas relaciones no son unidireccionales. El anfitrin
puede influir sobre la m icrobiota, pero, a su vez, la m icrobiota influye sobre el anfitrin, localm ente y, quizs,
de un m odo sistm ico. La colonizacin bacteriana que
provoca una respuesta inflam atoria local est, a su vez,
influida por la respuesta inflam atoria que, a su vezetc.
Las interacciones entre las especies bacterianas en una
biopelcula y entre las especies bacterianas y el hbitat no
bacteriano son dinm icas. stas reflejan una interaccin
de ida y vuelta perm anente entre el anfitrin y las espe-
SUPERFICIE
supon e que cada un o de estos tratam ien tos reduca los

n m eros de n uevas poblacion es clm ax y se lograba un
alivio que duraba 5-6 sem an as. Sin em bargo, la m ism a
especie resurga despus de la terapia (la n ueva com un idad clm ax n o ten a com peten cia) y proseguan los da os al hbitat. Este caso cln ico refuerza la im portan cia
de con trolar los m icroorgan ism os patgen os, pero sin
que se produzcan cam bios n ocivos en el ecosistem a restan te. Es prim ordial defin ir con claridad los ecosistem as
com patibles con el an fitrin , a fin de proporcion ar las
variables teraputicas deseadas. Los efectos de varias form as de terapia sobre la com un idad clm ax subgin gival
son an alizados en Haffajee y Socran sky (65).
BIOPELCULA
Fig. 3. Com ponentes de la biopelcula.
139
cies colonizadas. Cuando los investigadores obtienen

m uestras de diversas biopelculas, obtienen una serie de
fotos en especficos m om entos de esta dinm ica relacin,
que intentan integrar en una im agen coherente. La com prensin de las relaciones ecolgicas que existen dentro
de las biopelculas intrabucales y entre la com posicin de
la biopelcula y el anfitrin ha sido lenta, debido a la dificultad para obtener suficientes fotos de la com posicin m icrobiana de las biopelculas recogidas en situaciones clnicas estrecham ente controladas. La principal
lim itacin ha sido la carencia, hasta hace poco, de tcnicas m icrobianas lo suficientem ente especficas y rpidas
para perm itir la evaluacin de grandes cantidades de
m uestras, necesarias para llevar a cabo provechosos estudios in vivo. El siguiente apartado proporcionar una
revisin de las tcnicas que se han em pleado para el estudio de la com posicin de las biopelculas intrabucales
y describir el desarrollo, en los ltim os aos, de m todos, que perm iten realizar estudios ecolgicos vlidos.
Deteccin y enumeracin de las especies

bacterianas en las muestras del complejo
de la biopelcula
El estudio de las enferm edades infecciosas tradicionalm ente se ha centrado en un agente patgeno (o en un
pequeo nm ero de agentes) en una enferm edad infecciosa dada. Incluso cuando se tom an m uestras de las reas
donde coexisten com plejas m ezclas de especies, se ha
puesto nfasis en buscar un nm ero lim itado de agentes
patgenos de esa zona. El resto de los m icroorganism os
frecuentem ente son considerados parte de la flora norm al. En la m ayora de los casos tales especies pueden
m uy bien ser com patibles con el anfitrin, y residentes
habituales de la zona analizada; sin em bargo, en otros casos, estas especies pueden contribuir a la patogenia de la
enferm edad observada. Adem s, la ausencia de algunas
especies com patibles con el anfitrin puede ser tan im portante en el inicio o en la progresin de la enferm edad
com o la presencia de una o m s especies patgenas. El
exam en de las com plejas m ezclas de m icrobios se ha visto
obstaculizado por, al m enos, dos factores. El prim ero es
la costum bre de centrarse en un escaso nm ero de especies consideradas patgenas. El segundo es la ausencia de tcnicas de identificacin tiles y rpidas para aevaluar grandes cantidades de m uestras tom adas de reas
con com plejas m icrobiotas. Esta capacidad ha evolucionado de una form a lenta y, por lo tanto, hasta hace pocos aos no se realizaban estudios acerca de las com plejas relaciones ecolgicas que existen entre las especies
bacterianas y el anfitrin y los efectos que producen las
diferentes terapias sobre el ecosistem a gingival.
Los prim eros estudios de la com posicin de la biopelcula subgin gival utilizaban las tcn icas de m icroscopia
ptica. Estas tcn icas eran razon ablem en te rpidas, pero
lim itadas en cuan to a la precisin de la iden tificacin de
cada un a de las especies. Por lo tan to, m ien tras podan
recon ocerse con ven ien tem en te un os n ueve m orfotipos
140
(88), de hecho haba alrededor de 500 especies bacterian as en las m uestras de la biopelcula bucal (120). El exam en ,a travs del m icroscopio ptico, de preparacion es
de base hm eda se hizo popular duran te algun os a os
com o parte de un a terapia periodon tal m on itorizada y
m odulada en la que se em ple la erradicacin de las
form as m viles, in cluidas las espiroquetas, com o un a
ayuda para guiar la in ten sidad de la terapia periodon tal
(70). El adven im ien to del m icroscopio electrn ico perm iti el exam en de las m uestras de la biopelcula con
un a m ayor resolucin . Las tcn icas de m icroscopio electrn ico perm itieron un a m ejor distin cin de los grupos
m icrobian os, basn dose en la ultraestructura de la pared celular y la presen cia y la organ izacin de varios apn dices de la clula m icrobian a, com o los filam en tos axiales o los flagelos. El m icroscopio electrn ico por s solo
n o poda iden tificar de form a exacta un a clula com o
perten ecien te a un a especie en particular; sin em bargo,
en com bin acin con las tcn icas in m un oqum icas o de
hibridacin in situ , la tcn ica perm ita un a precisa localizacin de las clulas bacterian as, en su relacin recproca y en relacin con el an fitrin , cuan do se tom aban
seccion es en bloque del an fitrin (72, 110-113). La gran
fuerza de las tcn icas de m icroscopia, in cluido el prom etedor m icroscopio con focal, es la delin eacin de las
disposicion es espaciales de los m icroorgan ism os. La gran
flaqueza de estas tcn icas, desde un a perspectiva ecolgica, es que son len tas y m uy laboriosas y, por lo tan to,
lim itan el n m ero de m uestras que pueden exam in arse.
Adem s, la clasificacin exacta de la especie m edian te
tcn icas in m un olgicas o de hibridacin slo puede ser
realizada en un n m ero m uy lim itado de especies en
cualquier m uestra dada.
Durante m uchos aos, la principal tcnica de que disponan los investigadores para identificar las bacterias de
la placa era el cultivo de los m icroorganism os y la identificacin de las especies por sus rasgos fenotpicos, lo que
representaba un proceso largo, com plicado y caro (tabla
1). En consecuencia, podan exam inarse relativam ente pocas m uestras de placa en reducidos nm eros de individuos. Por ejem plo, en los estudios llevados a cabo en The
Forsyth Institute entre 1982 y 1988, se evaluaron 300 m uestras de placa subgingival procedentes de lesiones periodontales con progresin activa antes del tratam iento y
despus de ste, utilizando las tcnicas de cultivos
convencionales (37, 62). En aquel m om ento, esto estaba
considerado un estudio en gran escala, y por supuesto la
caracterizacin de aproxim adam ente 15.000 cepas clnicas
en un perodo de 6 aos fue un proyecto enorm e. Sin em bargo, nicam ente se tom aron dos o tres m uestras por individuo, en cada uno de los intervalos de m uestreo establecidos, de un total de 88 participantes. Los clsicos
estudios de Moore y Moore (105), en los que se exam in
la com posicin de las m uestras de placa subgingival de individuos con el periodoncio sano y con diferentes estados
de enferm edad periodontal, em plearon tcnicas de cultivos para exam inar m s de 17.000 cepas clnicas de m s de
600 zonas periodontales. Ello represent una enorm e can-
tidad de trabajo sobre un lim itado nm ero de m uestras,

segn los estndares del m om ento, A pesar de sus lim itaciones, estos estudios y otros estudios de cultivos m icrobiolgicos de las dcadas de 1970 y 1980 definieron las especies consideradas im portantes en el inicio y la progresin
de las enferm edades periodontales, as com o las especies
consideradas com patibles o beneficiosas para el anfitrin.
El principal punto fuerte del cultivo es que, en teora, la
m ayora de las especies bacterianas m uestreadas crecern
y podrn ser identificadas. Sin em bargo, las especies que
son difciles de cultivar o las incultivables, com o m uchas
de las espiroquetas, no podrn detectarse m ediante esta
tcnica. Otras especies requieren condiciones especiales
para su crecim iento. Si no se cum plen estas condiciones,
sus recuentos se vern seriam ente subestim ados. Por ejem plo, la im portancia del reconocido agente patgeno periodontal, Tannerella forsythia (Bacteroides forsythus), no
fue confirm ada por cultivo hasta que se determ inaron los
singulares requerim ientos de crecim iento de este m icroorganism o (182). Sin em bargo, fueron necesarias las tcnicas de inm unofluorescencia para m ostrar, por prim era
vez, la relativam ente elevada incidencia de T. forsythia en
las m uestras de placa subgingival de los individuos con pe-
riodontitis crnica (52). Pese a sus desventajas, los cultivos

an ocupan un lugar destacado en los estudios de m icrobiologa periodontal, especialm ente para la identificacin
de m icrobios en las enferm edades clnicas infrecuentes y
en las situaciones donde son necesarios cultivos puros para
anlisis adicionales.
Las tcnicas de m icroscopia ptica, m icroscopia electrnica y de cultivos m icrobiolgicos han sido sustituidas, en gran parte, por los estudios de la ecologa m icrobiana y el tratam iento periodontal realizados m ediante
tcnicas m s rpidas. Los m todos basados en los anticuerpos fueron unos de los prim eros en ser utilizados para
enum erar las especies especficas de m icroorganism os,
sin realizar su cultivo. Las tcnicas de inm unofluorescencia y los anlisis de inm unoabsorcin enzim tica
(ELISA) han sido utilizadas con xito para exam inar una
serie lim itada de especies bacterianas en m ayores cantidades de m uestras de placa de las que han sido exam inadas utilizando las tcnicas de cultivo (8, 46, 51, 52, 56,
97, 187). Estas tcnicas dependen de la especificad de los
anticuerpos desarrollados para taxones especficos. El antisuero m onoclonal o policlonal adecuadam ente preparado y evaluado proporciona un m todo sensible y espe-
Tabla 1. Mtodos p ara determ in ar la com p osicin m icrobian a de las m u estras bu cales
Mtodo
Puntos fuertes
Puntos dbiles
Aplicacin
Predom in an tes
cu ltivables
Pu ede detectar esp ecies n o

recon ocidas; p rop orcion a
cu ltivos p ara el an lisis
p osterior
Proceso su m am en te largo y caro;

con frecu en cia los cu ltivos son
difciles de esp eciar
Estu dios de n u evos ecosistem as
Medio selectivo
Moderadas can tidades de

m u estras p ara m oderadas
can tidades de esp ecies
Escasos m edios selectivos tiles

Estu dios de alcan ce lim itado qu e
disp on ibles; a m en u do los
im p lican 1-10 esp ecies en escasos
m edios de cu ltivo son dem asiado n m eros de m u estras
selectivos o n o su ficien tem en te
selectivos; costoso
In m u n oflu orescen cia Esp ecificidad;

razon ablem en te rp ida
Can tidad lim itada de an tisu ero

til; realizado en p equ e as
can tidades de m u estras
Posiblem en te m s til p ara estu dios

diagn sticos qu e ecolgicos o de
tratam ien to
PCR
Sen sibilidad; esp ecificidad
No cu an titativo
(p resen cia/ au sen cia); caro;
dep en dien te de am p liacin
Deteccin de esp ecies en u n

in dividu o (in ciden cia); deteccin
de bajas can tidades de esp ecies
desp u s del tratam ien to
PCR en tiem p o real
Sen sibilidad; esp ecificidad;

cu an titativo
Com p arativam en te len to; m u y

caro; lim itado en el n m ero de
m u estras y esp ecies
Estu dios en los qu e se requ iere la

cu an tificacin de u n a gam a m u y
lim itada de esp ecies en escasos o
m oderados n m eros de m u estras
Hibridacin ADNADN

cu an titativa
Con fin ado a las esp ecies p ara las

qu e se disp on e de son das;
escasas can tidades de esp ecies
p ara escasos n m eros de
m u estras
B squ eda de u n con ju n to esp ecfico

de esp ecies en m oderadas
can tidades de m u estras
Hibridacin ADNADN en dam ero

cu an titativa; p u ede u tilizar
la m u estra en tera; gran des
can tidades de esp ecies y
m u estras; econ m ica
Con fin ado a las esp ecies p ara las

qu e se disp on e de son das;
p osibilidad de reaccion es
cru zadas
Estu dios de gran des can tidades de

esp ecies y m u estras, p or ejem p lo,
estu dios de ecologa y tratam ien to
Clon acin am p liada

de ADNr 16S
Deteccin de esp ecies

cu ltivables e in cu ltivables;
p osicin filogen tica de los
taxon es
Su m am en te caro; n m ero de
m u estras extrem adam en te
p equ e o
Son dea u n a serie de esp ecies qu e

p u eden p rodu cirse en h bitats
esp ecficos
141
cfico de deteccin de especies bacterianas especficas en

las m uestras de placa bacteriana. Estas tcnicas tienen la
ventaja de que las m uestras no tienen que ser cultivadas
para su enum eracin; adem s, son m s rpidas y m enos
costosas que los cultivos. Sin em bargo, estn lim itadas a
aquellas especies para las que se dispone de reactivo. Por
otra parte, es difcil utilizar estas tcnicas, en particular
las tcnicas de inm unofluorescencia, para evaluar m uchsim as especies en grandes volm enes de m uestras de
placa bacteriana. Sin em bargo, Singleton y cols. (152) han
descrito recientem ente un m todo com pletam ente autom atizado de enum eracin bacteriana m ediante el m icroscopio, que perm ite evaluar m ayores cantidades de
m uestras. Otra desventaja de las tcnicas basadas en los
anticuerpos es el tiem po requerido para elaborar y validar un antisuero especfico frente a las nuevas especies.
Duran te la ltim a dcada, se ha utilizado la tcn ica de
reaccin en caden a de la polim erasa (PCR) para detectar la presen cia de seleccion adas especies bacterian as en
las m uestras de placa subgin gival (5, 82, 92, 101, 102, 172).
Con los cebadores apropiados, este m todo es rpido y
sen cillo y puede detectar can tidades m uy peque as de
clulas de un a determ in ada especie. Tien e la desven taja
de n o proporcion ar in form acin cuan titativa (hasta hace
poco) (69, 95), pero habitualm en te in dica la presen cia o
la ausen cia de algun a especie en la m uestra. Para algun as aplicacion es, esto sera suficien te. Para las aplicacion es don de se con sideran im portan tes las con cen tracion es relativas de las especies, el m todo PCR puede n o
ser ideal. Adem s, exam in ar gran des can tidades de especies en un gran n m ero de m uestras es difcil y, posiblem en te, poco ren table. La tcn ica PCR en tiem po real
ha sido a adida a los m todos poten ciales para exam in ar la com posicin de la biopelcula (69, 95). Este m todo tien e las ven tajas de ser especfico, sen sible y proporcion ar la cuan tificacin de la con cen tracin de
especies seleccion adas en las m uestras de la biopelcula.
Sin em bargo, tien e lim itacion es sim ilares a la tcn ica PCR
con ven cion al, pues n o es un m todo adecuado para iden tificar sistem ticam en te gran des volm en es de m uestras
de n um erosas especies bacterian as.
Las son das de ADN proporcion an otro acercam ien to
para la iden tificacin y la en um eracin de las especies
bacterian as en com un idades com plejas, tales com o la
placa bacterian a. Las son das oligon ucletidas son son das cortas dise adas para iden tificar region es n icas de
ADN en el in terior de la clula de un a determ in ada especie bacterian a. Se ha sugerido que estas son das son
m uy especficas y que, por lo tan to, la probabilidad de
reaccion es cruzadas con otras especies es m uy baja. Algun os estudios han utilizado estas son das para iden tificar bacterias periodon tales (47, 103, 104, 106). Dado que
su objetivo es un lim itado segm en to del ADN de un m icroorgan ism o, las son das oligon ucletidas tien den a ser
m en os sen sibles para detectar bajos n m eros de bacterias que las son das gen m icas com pletas. Sin em bargo,
las son das oligon ucletidas dirigidas hacia objetivos que
tien en m ltiples copias en las clulas, com o el ARNr 16S,
142
tien en el poten cial de ser m s sen sibles. Hasta la fecha,

n o se ha llevado a cabo n in gn estudio en gran escala de
la m icrobiota gin gival que haya utilizado son das oligon ucleotidas para detectar y en um erar un a am plia gam a
de especies bacterian as.
Las son das de ADN gen m icas com pletas han sido
m uy utilizadas en los estudios que evalan la com posicin de la placa bacterian a subgin gival (24, 61, 94, 116118, 156, 183, 184). Las son das gen m icas com pletas se
con struyen utilizan do el gen om a com pleto de un a especie bacterian a com o objetivo y, por lo tan to, pueden
ser m uy sen sibles. Un a de las crticas hacia estas son das
es que el uso del gen om a com pleto puede aum en tar la
probabilidad de que se produzcan reaccion es cruzadas
en tre las distin tas especies, debido a las region es de ADN
com un es en tre las especies que estn estrecham en te relacion adas. Se ha plan teado, tam bin , que es posible que
las son das de ADN gen m icas com pletas n o detecten todas las cepas de un a determ in ada especie y que las son das ten gan un a baja sen sibilidad en cuan to al n m ero
de clulas que detectan . Sin em bargo, las in vestigacion es realizadas por The Forsyth In stitute, que utilizaron
son das de ADN gen m icas com pletas, han m ostrado que
m uchas de las objecion es con cern ien tes a su em pleo son
in justificadas o pueden superarse (159).
Las son das de ADN pueden ser m uy eficaces para la
deteccin de especies bacterian as, pero cuan do se em plean con el form ato tpico (un a son da dirigida hacia
m ltiples objetivos), slo pueden em plearse n m eros de
son das lim itados para en um erar can tidades relativam en te gran des de m uestras. Los procedim ien tos en dam ero (checkerboard), tan to si se em plean procedim ien tos de hibridacin directa com o de hibridacin in versa,
pueden am pliar n otablem en te el n m ero de m uestras
evaluadas para un a am plia gam a de especies bacterian as. Paster y cols. (9, 122) han com bin ado la poten cialm en te elevada especificidad del m todo de son da oligon ucletida con un form ato en dam ero de captura
in versa Los in vestigadores ven cieron el tem a de la sen sibilidad de la son da oligon ucletida am plian do la regin ADNr 16S del ADN extrado directam en te de las
m uestras de la biopelcula m edian te la utilizacin de cebadores de con sen so (con sen su s prim ers), in iciadores
que perm itirn la am pliacin de un a exten sa gam a de
taxon es bacterian os. Las son das oligon ucletidas especficas para diferen tes especies se fijan en ln eas paralelas sobre un a m em bran a de n ailon , y las m uestras in dividuales que se m arcaron con digoxigen in a duran te la
am pliacin de PCR se hibridizan en can ales paralelos, en
n gulos rectos a las ln eas de la son da. Esta tcn ica perm ite la deteccin de al m en os 28 taxon es en 44 m uestras en un a sola m em bran a de n ailon (9). La tcn ica tien e
la ven taja de ser rpida, relativam en te econ m ica y poten cialm en te especfica para un a especie, un gn ero o
un a fam ilia (a eleccin del in vestigador). Tam bin ofrece
la ven taja de detectar las especies in cultivables. Tien e la
desven taja de n o perm itir la cuan tificacin exacta y de
ser algo m s cara que la tcn ica en dam ero directa, des-
crita a con tin uacin , a causa de la n ecesidad de am pliar

la m uestra utilizan do PCR. Adem s, la am pliacin por
PCR puede in troducir cierto sesgo en los resultados, a
causa de las posibles diferen cias en la am pliacin de las
especies dian a en la m uestra biolgica.
La tcn ica de hibridacin ADN-ADN en dam ero directo (fig. 4) ofrece algun as ven tajas en el estudio de
m ltiples especies de bacterias en gran des can tidades de
m uestras con m ezclas com plejas de m icroorgan ism os.
Dado que esta tcn ica proporcion a la in form acin de la
m ayora de los ejem plos descritos en este captulo, se la
describir en m ayor detalle. Es n ecesario en fatizar que
esta tcn ica n o es el n ico m todo de valor para el estudio de la com posicin de las biopelculas bucales. Sin
em bargo, la capacidad para poder estudiar gran des volm en es de m uestras en un gran n m ero de especies
proporcion a un m ayor ben eficio para los estudios de la
ecologa m icrobian a bucoden tal. La tcn ica en dam ero
es rpida, sen sible y relativam en te econ m ica. Supera
m uchas de las lim itacion es de los cultivos m icrobiolgicos, com o la prdida de viabilidad de los m icroorgan ism os duran te el tran sporte, el problem a de en um erar las
especies difciles de cultivar (o in cluso in cultivables) y las
com plicacion es para clasificar en especies determ in ados
taxon es que son difciles de crecer en cultivos o que exhiben escasos rasgos fen otpicos positivos. Otra ven taja
es que la m uestra com pleta puede em plearse sin dilucin o am pliacin (si el tam a o total de la m uestra se
determ in a adecuadam en te), superan do los problem as
de cuan tificacin im puestos por los procedim ien tos de
dilucin en serie (utilizado en los cultivos) o de am pliacin por PCR. La tcn ica en su form ato origin al evala
28 m uestras para determ in ar el con ten ido de 40 taxon es
(es decir, 1.120 recuen tos bacterian os) en un a sola m em bran a de n ylon de 15 15 cm . Posteriorm en te, si se desea, se despojan las m em bran as y se fija un n uevo con jun to de otras 40 son das de ADN diferen tes. La tcn ica
es sen sible, dado que puede detectar habitualm en te 104
clulas de un a determ in ada especie en un a m uestra, y
las con dicion es de hibridacin y deteccin pueden m odificarse para detectar 103 clulas (31). Por lo gen eral, se
ha en con trado que las son das de ADN gen m icas com pletas son n otablem en te especficas; 93,5 % de son da: las
reaccion es cruzadas de las especies hetrologas fueron
in feriores al 5 % de la se al de son da hom loga (159).
La hibridacin ADN-ADN en dam ero tien e lim itacion es. La tcn ica slo puede detectar las especies para las
cuales se han preparado son das de ADN. Por lo tan to,
este m todo n o podra detectar n uevas especies patgen as o relevan tes del en torn o que fueran detectadas m edian te cultivos u otras tcn icas m oleculares. Las son das
deben usarse para detectar los m icroorgan ism os en
m uestras de tam a o apropiado. Las son das optim izadas
para detectar especies en el in tervalo de 104-107 con frecuen cia proporcion arn reaccion es cruzadas si se em plean m uestras m s gran des.
Cuan do se em plean adecuadam en te, las tcn icas de
hibridacin ADN-ADN en dam ero y otras tcn icas m i-
crobiolgicas rpidas perm iten la in vestigacin de los

problem as etiolgicos, teraputicos y ecolgicos que n o
podran ser alcan zados por otros m edios. Los datos de
las m uestras cln icas presen tados en este captulo dem uestran la viabilidad de describir la m icrobiota en zon as con en ferm edades cln icas locales diferen tes, as
com o en in dividuos con distin tos an teceden tes sistm icos y diferen tes estados de en ferm edad periodon tal o de
salud. Adem s, a partir de los datos obten idos con esta
tcn ica pueden calcularse la abun dan cia de la especie,
la diversidad de especies y la estructura de la com un idad (156). A m edida que se dise en n uevas y m ejores
son das de ADN y se em pleen tcn icas m icrobiolgicas
m s rpidas, la com pren sin de las relacion es ecolgicas de las com plejas com un idades m icrobian as podr
desarrollarse en un grado hasta ahora fuera de n uestro
alcan ce.
El primer componente: composicin microbiana

de las biopelculas subgingivales
Recuentos totales de bacterias subgingivales
en individuos con periodoncio sano y enfermo
La prim era pregun ta que se podra form ular, con respecto a la ecologa m icrobian a es: cul es la can tidad de
clulas bacterian as presen tes en las biopelculas subgin givales en los in dividuos con el periodon cio san o y en
los in dividuos con el periodon cio en ferm o? Podra realizarse un a estim acin de la can tidad de bacterias subgin givales a partir de los datos sum in istrados por Sharawy y cols. (149). Estos in vestigadores recogieron
cuidadosam en te toda la placa subgin gival (o toda la que
fue posible) de las superficies den tarias subgin givales de
m edia boca en 14 in dividuos con el periodon cio san o y
21 con periodon titis. El peso m edio de las m uestras en
seco fue de 1,6 0,8 y 8,3 3,9 m g, respectivam en te, para
los dos grupos cln icos. Esto se tradujo en un peso en
m ojado por m edia boca de alrededor de 8,0 y 41,5 m g,
respectivam en te, o en un total de peso en m ojado de
placa bacterian a de 16 y 83 m g, respectivam en te. Dado
que, por trm in o m edio, el recuen to m icroscpico total
de m icroorgan ism os en la placa subgin gival es de 2,1
108 por m g de peso en m ojado (153), la can tidad total de
clulas m icrobian as en la placa subgin gival de los in dividuos san os puede estim arse en 33,6 108, y la can tidad de clulas m icrobian as en la placa subgin gival de los
in dividuos con periodon titis, en 174,3 108, con un a con siderable variacin in terperson al. Es in teresan te que los
recuen tos m edios de toda la boca difirieran por un factor slo de 5, ya que en ocasion es los odon tlogos retiran gran des can tidades de placa bacterian a de los in dividuos con periodon titis. No obstan te, debe recon ocerse
que la acum ulacin m asiva de placa subgin gival se produce n icam en te en un peque o n m ero de pacien tes,
y que la m ayora de las zon as periodon tales en la m ayor
parte de los in dividuos con periodon titis estn san as,
es decir, exhiben m n im a en ferm edad y poca placa subgin gival.
143
11 12 13 14 15 16 17 21 22 23 24 25 26 27 31 32 33 34 35 36 37 41 42 43 44 45 46 47 10 5 10 6
A. naeslund ii I
S. constellatus
E. nod atum
P. gingivalis
A. actinom ycetem .
F. nuc. ss vincentii
C. rectus
T. socranskii
E. saburreum
P. m icros
V. parvula
A. naeslund ii II
S. anginosus
S. sanguis
A. gerencseriae
S. oralis
C. ochracea
A. israelii
S. interm ed ius
T. d enticola
P. nigrescens
A. od ontolyticus
F. nuc. ss p olym orp hum
C. show ae
F. p eriod onticum
N. m ucosa
F. nuc. ss nucleatum
C. gingivalis
S. gord onii
T. forsythia
S. noxia
P. acnes
P. m elaninogenica
S. m itis
E. corrod ens
G. m orbillorum
C. sputigena
L. buccalis
C. gracilis
P. interm ed ia
Fig. 4. Ejem plo de hibridacin de ADN-ADN en dam ero, utilizado para detectar 40 especies bacterianas en 28 m uestras
de placa subgingival en un solo paciente. Las lneas verticales son las m uestras de placa num eradas desde el 11 (incisivo central derecho del m axilar superior) hasta el 47 (segundo m olar derecho m andibular). Este individuo careca
de las piezas dentarias 16, 17, 21 y 37. Las dos lneas verticales de la derecha son valores estndar con 10 5 o 10 6 clulas de cada especie de prueba. Las lneas horizontales contienen las sondas de ADN indicadas en un am ortiguador de
hibridacin. Una seal en la interseccin de las lneas vertical y horizontal indica la presencia de una especie. La intensidad de la seal est relacionada con el nm ero de m icroorganism os de esa especie en la m uestra. Poco despus,
las m uestras de placa se colocaron en tubos Eppendorf y el
ADN fue liberado de los m icroorganism os tras hervirlos en
NaOH. Despus de la neutralizacin, el ADN liberado fue

transferido a la superficie de una m em brana de nailon utilizando los 30 canales de un dispositivo Minishot (Im m unetics, Cam bridge, MA). El ADN se fij a la m em brana con
luz UV y coccin y se coloc en un Miniblotter 45 (Im m unetics) con las lneas de ADN form ando ngulos rectos con
los 45 canales del dispositivo Miniblotter. Las sondas de ADN
genm icas com pletas radiom arcadas con digoxigenina se
colocaron en un am ortiguador de hibridacin en 40 de las
lneas y fueron hibridadas durante toda la noche. Tras un
lavado estricto, las seales se detectaron utilizando anticuerpos conjugados por fosfatasa frente a la digoxigenina y
sustratos quim iofluorescentes. Las seales se com pararon
a los valores estndar m ediante un Store Fluorim ager y se
convirtieron a recuentos. Reim presin, tom ado de Socransky y cols. (159), con autorizacin.
Abundancia de especies
las biopelculas subgin givales podan en con trarse aproxim adam en te 500 especies, y resum ieron la n aturaleza
de los taxon es en con trados. La figura 5 (de Paster y cols.
[121]) describe los 10 filotipos que han sido detectadas
en las m uestras de placa subgin gival, proporcion a ejem plos de con ocidas especies de estos filotipos y dem uestra que m s de la m itad de los grupos taxon m icos de-
Un o de los prim eros pasos que realizara un ecologista

en el estudio de cualquier ecosistem a sera an alizar el alcan ce y la n aturaleza de las especies que existen en un
hbitat de in ters. Esto ha sido adm irablem en te descrito
por Paster y cols. (121). Estos autores in dicaron que en
144
tectados eran especies n uevas. Sin em bargo, est claro

que los aproxim adam en te 500 taxon es que pueden en con trarse n o estn un iform em en te distribuidos en las
m uestras de placa subgin gival, por ejem plo, algun os taxon es se detectan con m ucha m ayor frecuen cia y en m ayores n m eros que otros en cualquier hbitat bucal de
in ters. En la figura 6 se m uestra la frecuen cia de deteccin de los taxon es cultivables y de los todava n o cultivados en m uestras tom adas de diferen tes zon as periodon tales (121). Vein tisis de los 306 taxon es detectados
correspon dan a m s del 50 % de los clon es secuen ciados, m ien tras que 103 taxon es (43 %) fueron detectados
solam en te en un o de los 31 in dividuos.
La con clusin de que las especies n o se en cuen tran
distribuidas de un m odo un iform e en las zon as periodon tales tam bin puede ser sacada de otros datos. Las
40 son das de ADN m en cion adas en la figura 4 iden tificaron un 85 % de 3.400 cultivos puros en las m uestras de
placa subgin gival de 62 in dividuos. El 15 % restan te se
iden tific m edian te pruebas fen otpicas o secuen ciacin
de ARNr 16S. Nin gun a de estas cepas cln icas aisladas
era un a especie en la serie de pruebas, lo que in dica que
las son das podan captar todas las cepas cln icas de esa
especie. Dado que, por trm in o m edio, se recupera aproxim adam en te el 70 % de las clulas en um eradas por re-
Tipo bacteriano
N de especies
conocidas
cuen to m icroscpico, las 40 son das de ADN represen taran el 55-60 % de las bacterias en las biopelculas subgin givales. Este hallazgo coin cide con los datos proporcion ados por Paster y cols. (121) y apoya la n ocin de que
un lim itado con jun to de especies represen ta la vasta m ayora de las clulas bacterian as en con tradas en las m uestras de biopelcula subgin gival.
La abundancia de las especies puede expresarse de m uchas m aneras. La figura 7 m uestra los recuentos m edios
105 de 40 taxones en 20.247 m uestras subgingivales recogidas de 184 individuos con periodoncio sano y 592 individuos con periodontitis crnica. La especie dom inante
fue Actinom yces naeslundii de la genoespecie 2. Esto no
es sorprendente, dado que la m ayor parte de las zonas
m uestreadas presentaban bolsas periodontales poco profundas. Si se hubiesen obtenido m uestras de bolsas profundas, surgira un cuadro algo distinto, com o se com probar m s adelante. Otras especies predom inantes
fueron: Prevotella nigrescens, Prevotella interm edia, Veillonella parvula, T. forsythia y Prevotella m elaninogenica.
Diversidad de especies
Los ndices de diversidad son utilizados con frecuencia
por los ecologistas para describir la riqueza de especies y
N de nuevos Especies conocidas detectadas
filotipos
alm enos en 4 individuos
_
_
_
0
0
0
1
5
8
10
45
T. m ed ium , T. d enticola, T. m altop hilum

T. lecithinolyticum , T. socranskii
13
F. naviform e, F. nuc ss nucleatum ,

F. nuc ss p olym orp hum , F. anim alis
L. buccalis
Actinobacteria
12
18
Firm icutes
23
12
S. oralis, S. m itis, S. sanguis, S. cristatus

S. interm ed ius, S. constellatus,
S. anginosus, Abiotrophia ad iacens
G. m orbillorum , G. haem olysans
19
40
E. brachy, E. saphenum , Filifacter alocis

P. m icros, Catonella m orbi, V. d ispar
V. parvula, Dialister pneum osintes
Sel. sputigena, S. noxia, S. infelix
Proteobacteria
26
19
N. m ucosa, H. parainfluenzae,
C. gracilis, C. concisus, C. rectus
Bacteroid etes
17
24
Prev. d enticola, P. oris, P. tannerae,

T. forsythia, P. gingivalis
P. end od ontalis, Capno gingivalis
C. ochracea
Obsidian pool
TM7
Deferribacteres
Spirochaeta
Fusobacteria
Clostrid ia
113
Fig. 5. Gam a de especies cultivables e incultivables (hasta
el m om ento) detectadas en las m uestras de placa subgingival. Los 10 tipos bacterianos detectados se ilustran a la
izquierda, acom paados del nm ero de especies conocidas
195
A. naeslund ii 2, R. d entocariosa,
C. m atruchotii, Atopobium parvulum
A. rim ae
y los filotipos nuevos detectados en cada tipo. A la derecha

se presentan ejem plos de especies para cada tipo bacteriano. Todas estas especies fueron detectadas en cuatro individuos, al m enos. Datos tom ados de Paster y cols. (121).
145
N Clones of a
taxon detected
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11-19
20-29
30-39
40-49
50-99
100+
N taxa
103
52
30
11
11
10
6
11
5
3
38
11
4
5
2
4
103 taxones (34 %) cada uno representa el 0,04 %: total = 4,1 %

52 taxones (17 %) cada uno representa el 0,08 %: total = 4,1 %
242 taxones (79 %) representan el total de 661/ 2522 = 26,2 %
26 taxones (8,5 %) representan > 50 % de la m icrobiota
Fig. 6. Relativa en las muestras de placa subgingival de 31 individuos empleando la tcnica de ampliacin PCR de los genes ADNr 16S, seguida por la clonacin y secuenciacin de los
insertos. La figura indica el nmero de taxones que fueron detectados una, dos, tres veces, etc., en las muestras de los individuos de estudio. Datos tomados de Paster y cols. (121).
la uniform idad de especies en los diversos ecosistem as

(93). En la figura 8 se presentan algunos ejem plos del uso
de estos ndices. Para cada ndice, se calcul la diversidad
en cada zona, se obtuvo la m edia de todas las zonas en
un individuo, y luego la m edia entre individuos en los grupos con periodoncio sano y con periodontitis crnica
arriba descritos. Los tres prim eros ndices (N0, N1 y N2 de
Hill) fueron elegidos porque son fcilm ente interpretables
en trm inos de la cantidad de especies reales. El ndice N0
de Hill representa el nm ero de especies detectadas, con
una m edia de 22 y 24 por zona para los individuos sanos
y con periodontitis, respectivam ente. La cantidad efectiva
de especies abundantes fue casi igual en am bos grupos
clnicos, m ientras que la cantidad efectiva de especies m uy
abundantes fue m s elevado en las m uestras obtenidas de
los periodoncios sanos que en las m uestras de aquellos
con periodontitis. El ndice de uniform idad de Hill oscila
de 0 a 1; el valor 1 indica una distribucin perfectam ente
uniform e de las especies, y el valor 0, una distribucin m uy
desviada. Pareci haber una m ayor uniform idad en las
m uestras de los individuos sanos que en las de los individuos con periodontitis. Segn puntualizan Ludwig y Reynolds (9), en ecologa se utilizan a m enudo los ndices de
diversidad, pero son difciles de interpretar.
un clim a seco puede seleccionar un conjunto de especies

de plantas, un clim a hm edo, otro, y un clim a que alterna
perodos de nevadas con estaciones calurosas, otros conjuntos de plantas. El hbitat es tam bin un factor destaco
en la determ inacin de las asociaciones de especies entre
m icroorganism os. Algunas de las presiones selectivas que
determ inan los ensam blajes de las especies bacterianas
fueron brevem ente m encionados al analizar los principios
de la ecologa m icrobiana, en este trabajo: nutrientes o requerim ientos del entorno com partidos, receptores sim ilares para su adhesin inicial, m ecanism os com partidos
de proteccin contra el anfitrin y otras especies, y dependencia de una especie hacia la otra, para la colonizacin. Se han realizado intentos in vitro para definir algunos de los principios de la asociacin de especies, por
ejem plo, los esfuerzos para definir pares de especies especficas involucradas en la coagregacin (74, 75) o para
investigar las interacciones entre las especies que pueden
producirse en los experim entos de cultivos m ixtos in vitro (142, 164, 180). En el ao 1998 (156), se intentaron definir las asociaciones de especies que suceden, in vivo, en
las biopelculas bacterianas subgingivales. El origen de este
acercam iento fue la expectacin de que en las biopelculas subgingivales deben producirse asociaciones de especies especficas, ya que stas se producen regularm ente
en otros ecosistem as en la naturaleza. Adem s, en los prim eros aos, las m em branas de hibridacin ADN-ADN en
dam ero eran ledas visualm ente por los autores, quienes
acabaron reconociendo que cuando ciertas especies se detectaban en una zona, era virtualm ente seguro que otras
ciertas especies tam bin estuvieran all. Esta nocin se
com prob analizando los datos de m s de 13.000 m ues-
Asociaciones microbianas en las biopelculas

subgingivales
El exam en casual de nuestro m acroentorno indica que
existen asociaciones de especies especficas fcilm ente discernibles en los distintos hbitats. Con frecuencia estas
asociaciones son conducidas por el hbitat. Por ejem plo,
146
0,0
Recuentos 10 5
1,2
2,5
3,8
5,0
A. naeslund ii 2
P. nigrescens
P. interm ed ia
V. parvula
T. forsythia
P. m elaninogenica
C. gingivalis
P. gingivalis
A. naeslund ii 1
F. nucleatum ss nucleatum
F. nucleatum ss vincentii
A. gerencseriae
C. gracilis
N. m ucosa
A. israelii
C. rectus
F. nucleatum ss polym orphum
P. m icros
F. period onticum
C. sputigena
L. buccalis
E. nod atum
T. d enticola
E. corrod ens
S. noxia
C. show ae
A. od ontolyticus
C. ochracea
E. saburreum
G. m orbillorum
S. sanguis
A. actinom ycetem com itans
S. oralis
S. god onii
S. m itis
P. acnes
S. anginosus
T. socranskii
S. interm ed ius
S. constellatus
Fig. 7. Grfico de barras de de los taxones subgingivales,
determ inado por hibridacin de ADN-ADN en dam ero. Se
presentan los recuentos m edios de 40 especies en las m uestras de 184 individuos periodontalm ente sanos y 592 individuos adultos con preriodontitis crnica. El nm ero to-
tal de m uestras fue de 20.247 (m edia de 26,1 por individuo). Se obtuvo la m edia de los recuentos de cada especie
dentro de un individuo e interindividual. Las barras y patillas representan los recuentos m edios 10 5 , ESM (error
estndar de la m edia).
tras de biopelcula subgingival procedentes de 185 individuos con diferentes estados de salud y enferm edad periodontal (156). Las asociaciones entre todos los pares de
especies fueron determ inadas segn varios coeficientes
de sem ejanza, y las m atrices de sem ejanza resultantes fueron som etidas al anlisis por grupos (cluster analysis). Estos anlisis reforzaron la hiptesis de que existan distintos com plejos de m icroorganism os en las biopelculas
subgingivales. Posteriorm ente, los datos fueron exam inados utilizando dos tcnicas de ordenacin de com unidades: el anlisis de los principales com ponentes y el anlisis de correspondencia. Estos anlisis fueron valiosos,
porque confirm aron los com plejos descritos por los anlisis por grupos em parejados y sugirieron la naturaleza de
la relacin que existe entre cada uno de los com plejos (com unidades). La publicacin de este trabajo se recibi con
un entusiasm o m ayor que el anticipado. Esto pareci ser
en gran parte debido a que la delineacin de los com plejos por colores proporcion una estructura para describir y com prender el ecosistem a subgingival. En la figura
9 se presenta la sntesis original de los anlisis de ordenacin por grupos y com unidades.
Tal com o se ver m s adelan te, los com plejos especficos estn relacion ados con su hbitat en trm in os de
salud/ en ferm edad, las caractersticas cln icas locales y
los an teceden tes sistm icos del an fitrin . Las relacion es
en tre las especies descritas por Socran sky y cols. (156) se
equipararon a los hallazgos de los estudios de coagrega-
147
N0 d e Hill (Nm ero d e especies)
N1 d e Hill (Nm ero d e especies abund antes)

ns
P < 0,05
24
16
18
12
12
N2 d e Hill (Nm ero efectivo d e especies m uy abund antes)

12
P < 0,05
nd ice d e uniform id ad (E5)

1,00
0,75
0,50
0,25
0,00
Periodoncio sano
P < 0,001
Periodontitis
Fig. 8. Grfico de barras de cuatro ndices de diversidad utilizados para com parar las m uestras subgingivales de 184
individuos con periodoncio sano con los 592 individuos
adultos con periodontitis crnica presentadas en la figura
7. Los ndices de diversidad se calcularon (93) para cada

zona, se obtuvo la m edia dentro de un individuo y luego
la m edia interindividual en los dos grupos.
cin realizados in vitro (74, 75). Las especies que con stituyen los com plejos tam bin parecen estar distribuidas
en diferen tes region es de la bolsa periodon tal o surco
gin gival segn se determ in a por el an lisis in m un ocitoqum ico in situ . La figura 10, basada en las publicacion es de Kigure y cols. (72) y Noiri y cols. (110-113), in dica
las region es en el rea subgin gival que parecen estar en riquecidas por especficos com plejos m icrobian os.
en dam ero para com parar la com posicin de la m icrobiota obten ida de 11 zon as, en el m ism o in dividuo: saliva, placa supragin gival, placa subgin gival y ocho superficies de tejido blan do diferen tes. Las m uestras
difirieron n otablem en te en cuan to a las proporcion es de
los 40 taxon es de prueba exam in ados. Por ejem plo, se
observaron proporcion es m ucho m s altas de especies
Actin om yces en las m uestras proceden tes de las superficies den tarias; se apreciaron altas proporcion es de P. m elan in ogen ica en las m uestras de la saliva y de las superficies dorsal y lateral de la len gua, y altas proporcion es
de Streptococcu s m itis y S. oralis en las m uestras de las
restan tes superficies de tejido blan do (fig. 11). El an lisis por grupos de las m uestras (fig. 12) revel que las
m uestras obten idas de las superficies dorsal y lateral de
la len gua y las m uestras de la saliva eran sim ilares en tre
s; de ese m odo, se con firm la previa n ocin de que la
fuen te de la m ayora de las clulas bacterian as en la saliva era la superficie de la len gua. Las m icrobiotas de las
otras superficies de tejido blan do la parte ven tral de la
len gua, el suelo de la boca, el paladar duro, las m ejilla,
el vestbulo labial y la in sercin gin gival form aron un
segun do grupo. Los dos grupos form ados por las m uestras de tejido blan do y saliva fueron m s sim ilares en tre
El segundo componente:
influencia de la superficie en la composicin de
las biopelculas intrabucales
Comparacin de la composicin microbiana
entre las biopelculas que se forman sobre las piezas
dentarias y sobre los tejidos blandos
Un o de los determ in an tes clave de la com posicin de
la biopelcula bacterian a es la n aturaleza de la superficie
sobre la cual se desarrolla esta biopelcula. En n in gn lugar puede dem ostrarse esto con m ayor facilidad que en
la cavidad bucal, exam in an do la com posicin de las biopelculas que se desarrollan sobre las superficies de los
dien tes y de los diversos tejidos blan dos de dicha cavidad. Mager y cols. (98) utilizaron hibridacin ADN-ADN
148
Especies d e
Actinom yces
V. parvula
A. od ontolyticus
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
C. rectus
C. gracilis
P. interm ed ia
P. nigrescens
Streptococcus sp.
P. m icros
S. gord onii
F. nuc. vincentii
S. interm ed ius
S. constellatus F. nuc. nucleatum
E. nod atum
F. nuc. polym orphum
F. period onticum
E. corrod ens
C. gingivalis
C. sputigena
C. ochracea
C. concisus
A. actino. a
P. gingivalis
T. forsythia
T. d enticola
C. show ae
A. actino. b
S. noxia
Fig. 9. Representacin en form a de diagram a de las relaciones entre las especies dentro de los com plejos m icro-
bianos y entre los com plejos. Actualizado de Socransky y

cols. (156); B. forsythus fue cam biado por T. forsythia .
s que las m uestras tom adas de la placa supragin gival y

subgin gival, que con stituyeron un tercer grupo.
Los descubrim ien tos de este estudio subrayan la im portan cia de la n aturaleza de la superficie que es colon izada sobre la com posicin de biopelcula subsecuen te.
En este estudio, cada in dividuo actuaba com o su propio
con trol, descartan do posibles diferen cias de an teceden tes del an fitrin . El caudal de fluido de la saliva que ba aba las superficies era esen cialm en te idn tico para
todas las localizacion es, excepto para las m uestras subgin givales. A pesar de estos factores del en torn o idn ticos, las biopelculas difirieron n otablem en te a causa de
las sin gulares diferen cias en las superficies que se colon izaban . En n in gn otro em plazam ien to fue esto tan eviden te com o para el dorso de la len gua fren te el paladar
duro. Estas dos superficies de tejido blan do en tran en
con tacto cien tos de veces cada da y, an as, los m icroorgan ism os que colon izan estas superficies eran radicalm en te diferen tes en trm in os de proporcion es tan to
de abun dan cia com o de especies.
todo directo de valorar el posible efecto de los cam bios

en las superficies de tejido duro intrabucales sobre la com posicin de las biopelculas que recubren el tejido duro
y el blando. La m icrobiota del individuo desdentado no
es del todo com prendida, ya que se han realizado relativam ente pocos estudios de la m icrobiota que coloniza las
prtesis dentales o de las m em branas m ucosas o la saliva en individuos desdentados. En uno de los extrem os
de edad, los estudios de la cavidad bucal desdentada de
los lactantes antes de la erupcin dentaria sugieren que
pueden detectarse especies anaerobias en ausencia de
piezas dentarias. P. m elaninogenica fue la especie anaerobia aislada con m ayor frecuencia: fue hallada en el 70 %
de los lactantes (77). Otros anaerobios com unes fueron
Fusobacterium nucleatum , especies de Veillonella y Prevotella no pigm entada. La fuente de anaerobios pareci
ser la m adre, ya que haba una correlacin entre la concentracin salivar m aterna y la colonizacin por P. m elaninogenica del lactante (78). Al otro extrem o del espectro
de edad, se estudi la m icrobiota de 51 individuos desdentados (m edia de 74 aos de edad) con prtesis totales (76). Las m uestras se recogieron de la superficie de
acoplam iento de la dentadura, as com o del paladar, m ucosa bucal, dorso de la lengua y saliva. Se encontraron
Bacteroides pigm entados de negro en el 96 % de los individuos, y hongos en el 49 % de los participantes. De las
m uestras de saliva, en el 84 % se hallaron m utantes de es-
Comparacin de la composicin microbiana

entre las biopelculas que recubren las piezas
dentarias y las prtesis dentales
La sustitucin de todas las piezas dentarias naturales
por dentaduras postizas com pletas proporciona un m -
149
jo
na
ra n
ja
li o
Ep
i
te
Co
m
p le
jo r
o jo
p le
Co
m
PARED DE LA BOLSA
SUPERFICIE RADICULAR
A
Am c tin
Ve
rd
ar o s
e
i ll
o
M
or
ad
o
Fig. 10. Seccin histolgica de placa bacteriana subgingival hum ana teida con toluidina azulazul de m etileno. La
superficie del diente est a la izquierda, y el revestim iento
epitelial de la bolsa periodontal, a la derecha. La placa bacteriana adherida a la superficie dentaria se aprecia hacia
la parte superior derecha del corte, en tanto que puede ob-
servarse una segunda zona de m icroorganism os revistiendo la pared de la bolsa periodontal. (Cortesa del Dr.
Max Listgarten.) La localizacin sospechada de especies en
los diferentes com plejos ha sido indicada en la seccin, sobre la base de los datos de Kigure y cols. (72) y Noiri y cols.
(110-113).
treptococos y en el 92 %, lactobacilos. Los datos en la bibliografa sugieren que ciertas especies, com o Streptococcus m utans, requieren superficies duras para m antener la colonizacin (18, 43, 91, 169), aunque pueden
detectarse, en bajas concentraciones, en los tejidos blandos de individuos desdentados. Los estudios han sugerido que S. m utans prcticam ente desaparece de la cavidad bucal cuando todos los dientes son extrados y
reaparece si las superficies duras se proporcionan en la
form a de prtesis dentales com pletas (18, 43, 91, 169).
Otros estudios han sugerido que A. actinom ycetem com itans y P. gingivalis desaparecen de la cavidad bucal tras
la extraccin de todas las piezas dentarias y no reaparecen incluso cuando las superficies duras se sustituyen por
prtesis com pletas (26). S. m utans, as com o los lactobacilos, pueden encontrarse en las bocas de personas desdentadas que llevan dentaduras postizas, lo que indica
que las dentaduras proporcionan una superficie para la
colonizacin (18, 43, 169). Theilade y cols. (168, 169) exam inaron la m icrobiota cultivable predom inante en las
prtesis dentales en pacientes con m em branas m ucosas
sanas o con estom atitis inducida por la prtesis. Descubrieron que la m icrobiota en las dos situaciones estaba
dom inada por m icroorganism os gram positivos, principalm ente de los gneros Streptococcus, Actinom yces y Lactobacillus. Las especies de Veillonella constituyeron alrededor del 10 % de la m icrobiota, m ientras que los bacilos
gram negativos constituyeron m enos del 1 %.
Los datos de los estudios citados son in teresan tes, pues
sugieren que la existen cia de piezas den tarias puede ser
esen cial para la colon izacin de especies com o A. actin om ycetem com itan s y P. gin givalis. Adem s, las superficies duras parecen ser prim ordiales para la colon izacin
de S. m u tan s. Los datos de Theilade y cols. (168) in dican
que el surco gin gival, as com o el lquido que pasa por
l, pueden ser im prescin dibles para la colon izacin de la
m ayora de las especies de bacilos gram n egativos, in cluidas las especies m s habituales, com o F. n u cleatu m ,
P. in term edia y P. n igrescen s.
Por con siguien te, los hallazgos en la bibliografa sugieren la n ecesidad de superficies duras para la colon izacin de algun as especies y el lquido crevicular gin gival del surco gin gival o bolsas periodon tales para la
colon izacin de otras. Esta n ocin n os im puls a com parar la m icrobiota de las den taduras postizas de aquellos in dividuos totalm en te desden tados y que haban es-
150
Recuento de la sonda
0
de ADN e n %
Supra
9
18 0
Dorso de
la lengua
Saliva
Sub
18 0
18 0
Laterales de Parte ventral

la lengua de la lengua
18 0
18 0
18
Suelo de
la boca
Bucal
18 0
18 0
Paladar
duro
Vestbulo
labial
Insercin
gingival
18 0
18 0
18
A. naeslund ii 2
A. naeslund ii 1
V. parvula
N. m ucosa
A. israelii
A. gerencseriae
L. buccalis
E. corrod ens
S. sanguis
A. od ontolyticus
E. nod atum
F. period onticum
C. gracilis
S. m itis
S. oralis
C. gingivalis
P. interm ed ia
C. sputigena
E. saburreum
G. m orbillorum
P. gingivalis
S. gord onii
P. m icros
C. ochracea
S. noxia
P. nigrescens
P. m elaninogenica
C. show ae
S. anginosus
T. forsythia
C. rectus
P. acnes
S. constellatus
T. socranskii
T. d enticola
S. interm id us
Fig. 11. Porcentaje m edio del recuento de la sonda de ADN

( ESM) para las m uestras procedentes de 11 zonas en 41
individuos con el periodoncio sano y 39 con periodontitis.
Las especies estn ordenadas segn su proporcin m edia
de placa subgingival. La significacin estadstica de las diferencias entre la localizacin de las m uestras se determ in
utilizando la prueba de Kruskal-Wallis, y se la ajust para
com paraciones m ltiples (157). Todas las especies fueron

significativam ente diferentes entre los grupos, con un valor
p < 0,001, con la excepcin de Streptococcus constellatus y
Gem ella m orbillorum . Las barras de colores representan las
especies que m ostraron diferencias especialm ente acusadas entre las zonas de m uestra. Actualizado de Mager y cols.
(98), con la adicin de 36 individuos de estudio.
tado llevan do prtesis den tales duran te com o m n im o

1 a o con la m icrobiota presen te en las m uestras de placa
supragin gival de in dividuos con periodon cio san o o que
sufran periodon titis crn ica. Las m uestras de placa supragin gival fueron recogidas del aspecto m esial de cada
pieza den taria (o pieza de la prtesis) en 28 participan tes con periodon cio san o, 8 con periodon titis y 18 totalm en te desden tados portadores de prtesis com pletas, y
se an alizaron in dividualm en te para evaluar el con ten ido
de 41 especies bacterian as (el estn dar de 40 especies +
S. m u tan s) utilizan do hibridacin de ADN-ADN en dam ero. Se obtuvo la m edia de los recuen tos en cada in dividuo por separado y, luego, en tre in dividuos en los
3 grupos cln icos. Los recuen tos de son da de ADN totales m edios ( 105, error estn dar de la m edia, ESM) fueron 45 7, 66 13 y 52 11 en los in dividuos san os, con
periodon titis y desden tados, respectivam en te. La m edia
de los perfiles m icrobian os difiri de form a bastan te n otable en tre los grupos cln icos (fig. 13). Es de destacar que
se hallaron bajas con cen tracion es de Capn ocytophaga
ochracea, Capn ocytophaga spu tigen a, Cam pylobacter rectu s, Cam pylobacter show ae, T. forsythia, Neisseria m u cosa
y P. m elan in ogen ica en las m uestras de los participan tes
con den taduras postizas. Estos datos, aun que lim itados
al n m ero de in dividuos estudiados hasta la fecha, reafirm an el con cepto de que la n aturaleza de la superficie
de tejido duro im pacta en la com posicin de las biopelculas que se form an sobre las superficies de tejido duro.
Asim ism o, se exam in aron las m uestras de tejido blan do
y saliva en el m ism o grupo de in dividuos m edian te hibridacin ADN-ADN en dam ero (fig. 14). En gen eral, los
perfiles m icrobian os m edios en los distin tos lugares de
m uestreo fueron m s sim ilares en tre los in dividuos san os y con periodon titis que en [en tre/ con respecto a] los
in dividuos desden tados. Las proporcion es de subespecies de F. n u cleatu m , Eiken ella corroden s y V. parvu la fueron sign ificativam en te bajas para la m ayor parte de los
lugares de m uestreo en los in dividuos desden tados. En
cam bio, las proporcion es de S. m itis y Streptococcu s gordon ii fueron sign ificativam en te altas en todas las zon as
de tejido blan do, excepto en el dorso y los laterales de la
len gua en los in dividuos desden tados. Se detect Fu sobacteriu m periodon ticu m de form a con stan te en proporcion es sign ificativam en te m s altas en las superficies
de tejido blan do y en la saliva de los pacien tes sin dien tes. Adem s, los recuen tos totales de la son da de ADN
fueron m s elevados en los tejidos blan dos de estos in dividuos. Estos datos sugieren que la m icrobiota del te-
151
60
% sim ilitud (coeficiente de sem ejanza m nim a)

70
80
90
Subgingival
Supragingival
Grupo A
Dorso d e la lengua
Saliva
Grupo B
Laterales d e la lengua
Palad ar d uro
Parte ventral d e la
lengua
Bucal
Suelo d e la boca
Grupo C
Insercin gingival
Vestbulo labial
Fig. 12. Dendrogram a de un anlisis por grupos de las proporciones de especies m edias de las 11 zonas descritas en
la figura 11. Se em ple un coeficiente de sem ejanza m nim a
y una m edia de ordenacin de enlace no equilibrada. Se

form aron tres grupos, considerando una sem ejanza > 80 %.
El Grupo B fue m s sem ejante al Grupo C que el Grupo A.
jido blan do bucal de los in dividuos desden tados tam bin es m uy diferen te de la observada en los in dividuos
san os o con periodon titis e in dican que la n aturaleza de
la superficie del tejido duro en la cavidad bucal n o slo
im pacta sobre la n aturaleza de las especies que colon izan sobre estas superficies duras, sin o tam bin sobre las
que colon izan en las superficies del tejido blan do. Un a
adverten cia para la in terpretacin de los hallazgos en con trados en esta seccin es que los diferen tes m todos
utilizados por los in dividuos den tados y desden tados para
cepillar sus dien tes tam bin pueden in fluir en la m icrobiota colon izadora.
quietan tes. Por ejem plo, por trm in o m edio, los recuen tos viables totales de bacterias en la saliva son de un os
108 por m l (13, 66, 139). La can tidad total diaria de saliva
secretada ha sido diversam en te estim ada: 500 m l (178,
179), 1.000 m l (138) o 1.500 m l (32, 45). Por con siguien te,
tericam en te, se tragan aproxim adam en te 1 1011 bacterias cada da. Esto se traduce en alrededor de 1 gram o
de peso en m ojado de clulas bacterian as. De dn de
proceden estas bacterias? Se ha estim ado que la m asa
total m edia de bacterias sobre los dien tes de un in dividuo san o es aproxim adam en te de 16 m g, m ien tras que
el valor m edio para los in dividuos con periodon titis fue
de un os 83 m g (149). Se descon oce la m asa y el n m ero
de m icroorgan ism os que colon izan los tejidos blan dos.
Collin s y Dawes (23) m idieron el rea de superficie de la
cavidad bucal y en con traron que las piezas den tarias
con stituan aproxim adam en te el 20 % de la superficie
dispon ible para la colon izacin m icrobian a. Si los m icroorgan ism os colon izan con la m ism a den sidad sobre
los tejidos blandos que sobre los dientes, entonces puede
estim arse que la m asa de m icroorganism os sobre los tejidos blandos es cuatro veces superior a la m asa de bacterias sobre los tejidos duros, quizs, hasta un total de 400
m g. Por lo tanto, se podra estim ar que aproxim adam ente
500 m g de bacterias pueden colonizar la cavidad bucal.
Incluso si la m asa total fuera 1 gram o de bacterias, ello
sugerira que la entera m asa de m icroorganism os, por trm ino m edio, se duplicara cada da. Los tiem pos de las
generaciones tendran que ser m s cortos si m asas inferiores de bacterias colonizaran la cavidad bucal o si nicam ente un lim itado segm ento de la m icrobiota fuera capaz de m ultiplicarse. Una posible explicacin para las
El tercer componente: influencia

del caudal de fluido sobre la composicin
de las biopelculas intrabucales
La crtica funcin de la saliva
El caudal de fluido es crtico para la superviven cia
de los m icroorgan ism os en la biopelcula. Este lquido
proporcion a n utrien tes, elim in a los productos de desecho y acta com o vehculo para el tran sporte de las clulas bacterian as de un lugar a otro en el in terior de la
cavidad bucal y, probablem en te, facilita la tran sferen cia
de person a a person a. El prin cipal fluido en la cavidad
bucal es el con stituido por la saliva, que es esen cial para
la superviven cia de casi todas las biopelculas bucoden tales, con la excepcin de las biopelculas en las reas
subgin givales o reas den tro de lesion es patolgicas tales com o las in feccion es del can al radicular o los abscesos bucales. La revisin de la bibliografa existen te
sugiere cierto n m ero de aparen tes in con gruen cias in -
152
Recuentos 10 5 0,0
2,3
A. gerencseriae
A. israelii
A. naeslund ii 1
A. naeslund ii 2
A. od ontolyticus
V. parvula
S. gord onii
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E. corrod ens
C. gracilis
C. rectus
S. show ae
E. nod atum
F. period onticum
P. m icros
P. interm ed ia
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingivalis
T. d enticola
E. saburreum
G. m orbillorum
L. buccalis
N. m ucosa
P. acnes
P. m elaninogenica
S. anginosus
S. m utans
S. noxia
T. socranskii
4,6
6,9
9,2
Actinos
Morado
Am arillo
Verde
Desdentados
Periodoncio sano
Naranja
Periodontitis
Rojo
Otros
Fig. 13. Perfiles de los recuentos m edios de 41 taxones en

m uestras de placa supragingival de 28 individuos con un
periodoncio sano, 8 con periodontitis crnica y 18 com pletam ente desdentados. Las m uestras de placa se recogieron del aspecto m esial de cada pieza dentaria natural o
protsica, y fueron analizadas por separado para evaluar el
contenido de 41 especies. Se obtuvo la m edia de los datos
de cada especie en un individuo y, posteriorm ente, la m edia interindividual en los tres grupos clnicos por separado.
Se busc la significacin estadstica de las diferencias entre los grupos utilizando la prueba de Kruskal-Wallis, y se
la ajust para com paraciones m ltiples (157); *p < 0,05; **p
< 0,01; ***p < 0,001. Las especies fueron ordenadas segn
los com plejos descritos por Socransky y cols. (156).
grandes cantidades de bacterias en la saliva es que sta

favorezca la reproduccin bacteriana m ientras las bacterias estn en la saliva (14, 28-30, 174). Ello es posible, pero
el alto ritm o de recam bio de la saliva en la cavidad bucal
lo hace im probable. Se ha estim ado que el volum en de
saliva dentro de la cavidad bucal habitualm ente oscila entre 0,77 y 1,07 m l (81). Si la velocidad del flujo fuera, por
trm ino m edio, de 1 m l por m inuto, entonces el recam bio de la saliva sera m uy corto y la probabilidad de una
m ultiplicacin bacteriana en la saliva que explicara la cantidad de bacterias observadas sera bastante escasa.
Estas observacion es preparan el escen ario para un con jun to de in teresan tes in terrogan tes. Si la velocidad del
flujo de saliva estuviera n otablem en te dism in uida, qu

es lo que pasara con los recuen tos de bacterias en la saliva, con las m icrobiotas que colon izan los tejidos blan dos y con las que colon izan las superficies duras? Por un
lado, la saliva puede elim in ar o lim itar la can tidad de bacterias sobre los tejidos duros y blan dos y, quizs, afecte
a la com posicin m icrobian a. Por el otro lado, la saliva
puede proporcion ar n utrien tes para las especies que colon izan las superficies y proporcion ar un m edio de tran sporte de un a superficie a otra, aum en tan do la carga bacterian a. As pues, un a dism in ucin de saliva podra alterar
la com posicin m icrobian a de un a form a tan to ben eficiosa com o perjudicial. Los estudios sobre la xerostom a,
153
Dorso de
la lengua
Saliva
Recuento de la sonda 0
de ADN en %
10
20
10
20
Laterales de
la lengua
Parte ventral
de la lengua
10
20
10
20
Suelo de
la boca
0
10
Paladar
duro
Bucal
20
10
20
10
Vestbulo
labial
20
10
Insercin
gingival
20
10
20
A. gerencseriae
A. israelii
A. naeslund ii 1
A. naeslund ii 2
A. od ontolyticus
V. parvula
S. gord onii
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E corrod ens
C. gracilis
C. rectus
C. show ae
E. nod atum
F. period onticum
P. m icros
P. interm ed ia
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingalis
T. d enticola
E. saburreum
G. m orbillorum
L. buccalis
N. m ucosa
P. acnes
P. m elaninogenica
S. anginosus
S. m utans
S. noxia
T. socranskii
Periodoncio sano
Periodontitis
Desdentados
Fig. 14. Perfiles del porcentaje m edio del recuento de la

sonda de ADN de 41 taxones en m uestras de 8 superficies
de tejido blando y saliva obtenidas de 28 individuos con
un periodoncio sano, 8 con periodontitis crnica y 18 com pletam ente desdentados. Las m uestras de saliva se recogieron por expectoracin, y las m uestras de las superficies
indicadas de tejido blando se obtuvieron utilizando un ce-
pillo bucal. Las m uestras fueron analizadas por separado

para evaluar el contenido de 41 especies. Se busc la significacin estadstica de las diferencias entre los grupos
utilizando la prueba de Kruskal-Wallis, y se la ajust para
com paraciones m ltiples (157); *p < 0,05; **p < 0,01; ***p
< 0,001. Las especies fueron ordenadas segn los com plejos descritos por Socransky y cols. (156).
un a en ferm edad cln ica frecuen te que afecta a un a gran

proporcin de la poblacin adulta, particularm en te a los
an cian os, podran ayudar a con testar algun as de estas
pregun tas. La xerostom a se produce a con secuen cia de
ciertas m edicacion es, radiacion es o quim ioterapia o
com o parte de un sn drom e autoin m un itario llam ado
sn drom e de Sjgren . Esta ltim a en ferm edad afecta, en tre otras cosas, a la produccin de saliva, dism in uyen do
la velocidad de flujo n o estim ulado m edio hasta alcan zar valores m uy in feriores a 0,1 m l por m in uto (177). Esta
en ferm edad proporcion a un excelen te m odelo para form ular las pregun tas crticas relacion adas con la biopelcula: es diferen te la com posicin de la m icrobiota en los
in dividuos con el sn drom e de Sjgren de la observada
en con troles em parejados por edad? Ser diferen te el redesarrollo de las biopelculas del tejido blan do en aquellos in dividuos cuya produccin de saliva est con siderablem en te dism in uida? En los estudios que se estn
llevan do a cabo en asociacin con el Dr. Athen a Papas
en Tufts School of Den tal Medicin e se estn abordan do

estas cuestion es. El objetivo de la prim era fase de la in vestigacin fue com parar la m icrobiota supragin gival y
subgin gival de los in dividuos del grupo Sjgren con la de
aquellos in dividuos con periodon cio san o y con periodon titis. Se recogieron , por separado, m uestras de placa
supragin gival y subgin gival del aspecto m esial de cada
pieza den taria al com ien zo del estudio en 24 in dividuos
con el sn drom e de Sjgren , 30 con el periodon cio san o
y 53 con periodon titis, y se an alizaron por separado para
evaluar el con ten ido de 40 especies bacterian as utilizan do
la tcn ica de hibridacin ADN-ADN en dam ero.
Los recuen tos totales m edios de son da de ADN ( 105,
ESM) de las m uestras de placa supragin gival de los grupos con sn drom e de Sjgren , san os y con periodon titis
fueron 13 3, 44 7 y 43 4, respectivam en te (p < 0,001).
Esto sugiere que la saliva puede favorecer el crecim ien to
de especies bacterian as en las biopelculas supragin givales o que los in dividuos con Sjgren eran m s m eti-
154
culosos con su higien e bucal en casa que los in dividuos

con un flujo salivar n orm al. En las m uestras de placa subgin gival los recuen tos m edios fueron de 11 1, 15 2 y
25 2, respectivam en te (p < 0,001). La sign ificativa diferen cia en tre los grupos en las m uestras subgin givales se
debi a recuen tos m edios m s elevados en los in dividuos
con periodon titis que en los otros dos grupos. Esto sugiere que el dom in io subgin gival estaba m en os afectado
en los in dividuos con Sjgren , posiblem en te debido al lquido crevicular gin gival, que proporcion a m ayor volum en de lquido local que el aportado por la saliva. En las
m uestras supragin givales, los recuen tos m edios de 30 especies (fig. 15) y las proporcion es de 10 especies difirieron sign ificativam en te en tre los grupos tras ajustarlos
para com paracion es m ltiples. En las m uestras subgin givales, los recuen tos m edios de 19 especies (fig. 16) y las
proporcion es de 16 especies difirieron de form a sign ificativa en tre los grupos. Las especies con los recuen tos
m edios m s altos tan to en las m uestras supragin givales
com o subgin givales obten idas de in dividuos con el sn drom e de Sjgren fueron V. parvu la y N. m u cosa. Aun que los recuen tos m edios supragin givales de V. parvu la
n o se diferen ciaron de form a sign ificativa en tre los tres
grupos cln icos (fig. 15), las proporcion es m edias de estas especie s lo hicieron . El porcen taje m edio ( ESM)
en el grupo de Sjgren , san o y de periodon titis fue de
17 2, 9 1 y 10 1 (p < 0,05), respectivam en te. La especie N. m ucosa tam bin exhibi proporcion es sign ificativam en te diferen tes: 14 2, 11 2 y 4 1 (p < 0,001),
respectivam en te. La m icrobiota subgin gival de los in dividuos con Sjgren m ostr recuen tos bajos de la m ayora de las especies, en com paracin con la de los in dividuos con periodon titis y la de los san os. T. Forsythia,
P. gin givalis, Trepon em a den ticola y Trepon em a socran skii estaban bastan te m s elevados en los in dividuos con
periodon titis que en los in dividuos con Sjgren o san os.
Estos datos in dican que existan m uchas diferen cias sign ificativas en la com posicin m icrobian a supragin gival
y subgin gival de los in dividuos con periodon cio san o,
con periodon titis crn ica y con el sn drom e de Sjgren .
No obstan te, las diferen cias en los perfiles m icrobian os
m edios en tre los tres grupos cln icos para la placa subgin gival n o fueron los m ism os que los observados para
la placa supragin gival.
Se com par la m icrobiota de los tejidos blan dos bucales y de la saliva de in dividuos con el sn drom e de Sjgren con la m icrobiota de in dividuos con un flujo salival
n orm al. Al com ien zo del estudio se obtuvieron m uestras
de biopelcula del tejido blan do de 24 in dividuos con Sjgren y de 11 in dividuos que actuaron com o con troles. Se
recogieron , con un cepillo bucal, m uestras de siete zon as: superficie dorsal, lateral y ven tral de la len gua, suelo
de la boca, bucal, paladar duro, vestbulo/ labios e in sercin gin gival. Estas m uestras, as com o un a m uestra de
saliva n o estim ulada, fueron an alizadas para evaluar el
con ten ido de 41 especies, m edian te hibridacin de ADNADN en dam ero. Se obtuvieron los recuen tos y las proporcion es de recuen tos de son da de ADN de cada espe-
cie para cada zon a m uestreada, y se obtuvo la m edia de

todos lo in dividuos en los en los dos grupos cln icos.
Se obtuvieron recuen tos totales m edios de son da de
ADN sign ificativam en te in feriores ( 105, ESM) en los
in dividuos con el sn drom e de Sjgren con respecto a los
con troles (fig. 17) en las m uestras de tres zon as: superficie dorsal de la len gua (47 10 fren te a 98 22), bucal
(6 1 fren te a 16 4) y paladar duro (8 2 fren te a 33
15). Para estas zon as, las especies que estaban en can tidades sign ificativam en te elevadas en m ltiples zon as de
m uestreo en los in dividuos de con trol fueron : S. oralis,
E. corroden s, N. m u cosa, Propion ibacteriu m acn es y P. m elan in ogen ica (fig. 18). Utilizan do el an lisis por grupos
(fig. 19) los perfiles m icrobian os m edios para los in dividuos con Sjgren y de con trol fueron agrupados por separado. Adem s, en cada grupo cln ico se form aron dos
grupos que con sistan habitualm en te en m uestras tom adas de la saliva y del dorso de la len gua, fren te a las
dem s superficies. Estos datos in dican que las especies
m icrobian as sobre el tejido blan do y en la saliva de los
in dividuos con el sn drom e de Sjgren difirieron en can tidad y proporcion es de las especies detectadas en los in dividuos de con trol, y perm iten supon er que la dism in ucin del volum en de saliva en los in dividuos con el
sn drom e de Sjgren puede haber afectado la can tidad y
la n aturaleza de las especies expuestas a este fluido.
La crtica funcin del lquido crevicular gingival
El prin cipal caudal de fluido que afecta a la m ayora
de las superficies expuestas de la cavidad bucal es la saliva. Un segun do caudal de lquido im portan te desde el
pun to de vista local y, posiblem en te, gen eral, es el lquido
crevicular gin gival, que em an a del surco o la bolsa periodon tal en los in dividuos den tados. Algun os estudios
sugieren que este lquido puede ser clave para la colon izacin sosten ida de determ in ados taxon es (26). Tam bin
se ha sugerido que el estado in flam atorio del surco gin gival o bolsa periodon tal es im portan te para el ritm o y,
quizs, la n aturaleza, de la colon izacin m icrobian a en
el m argen gin gival o debajo de ste (54, 67, 129, 131, 133,
146). Las zon as que exhiben gin givitis n atural (131) o in ducida de form a experim en tal (67, 129, 133) m uestran
un a reacum ulacin de placa bacterian a m ucho m s rpida que las zon as con periodon cio san o. La explicacin
para esto ha sido, al m en os en parte, un m ayor caudal
de lquido crevicular gin gival. El flujo del lquido crevicular gin gival est relacion ado con m edidas sustitutas
com o el n dice gin gival u otras m edicion es de in flam acin gin gival (115, 163, 171).
Ya se ha sealado que la com posicin de las biopelculas presentes sobre los dientes naturales es diferente de
la observada en las m uestras procedentes de prtesis dentales. Algunas de las diferencias pueden haber sido debidas a la naturaleza de la superficie presente para la colonizacin inicial. Otras, sin em bargo, pueden haber sido
debidas a la disponibilidad de lquido crevicular gingival
en los individuos dentados, pero no en los desdentados.
155
SUPRAGINGIVAL
Recuentos 10 5 0,0
1,3
A. gerencseriae***
A. israelii***
A. naeslund ii 1***
A. naeslund ii 2***
A. od ontolyticus***
V. parvula
S. gord onii**
S. interm ed ius
S. m itis***
S. oralis***
S. sanguis***
A. actinom ycetem com itans***
C. gingivalis***
C. ochracea***
C. sputigena***
E. corrod ens***
C. gracilis
C. rectus***
S. show ae***
E. nod atum
F. nucleatum ss nucleatum ***
F. nucleatum ss vincentii***
F. period onticum ***
P. m icros
P. interm ed ia***
P. nigrescens***
S. constellatus*
T. forsythia***
P. gingivalis***
T. d enticola**
E. saburreum **
G. m orbillorum **
L. buccalis
N. m ucosa*
P. acnes***
P. m elaninogenica
S. anginosus**
S. noxia
T. socranskii***
2,5
3,8
5,1
Actinos
Morado
Am arillo
Periodontitis
Salud
Sndrome de Sjgren
Verde
Naranja
Rojo
Otros
Fig. 15. Perfiles de los recuentos m edios de 40 taxones en

m uestras de placa sup ra gingiva l de 28 individuos sanos,
53 con periodontitis crnica y 24 con el sndrom e de Sjgren. Las m uestras de placa se tom aron del aspecto m esial
de cada pieza dentaria, y fueron analizadas por separado
para evaluar el contenido de 40 especies. Se sacaron las
m edias de los datos de cada especie en cada individuo y,
posteriorm ente, la m edia interindividual en los tres grupos clnicos por separado. Se busc la significacin estadstica de las diferencias entre los grupos utilizando la
prueba de Kruskal-Wallis, y se la ajust para com paraciones m ltiples (157); *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001. Las
especies fueron ordenadas segn los com plejos descritos
por Socransky y cols. (156).
Se ha sugerido que A. actinom ycetem com itans y P. gingivalis desaparecen de la cavidad bucal tras la extraccin
de todas las piezas dentarias y no vuelven a aparecer incluso aunque se utilicen prtesis totales (26). Es eso cierto?
O esos hallazgos se produjeron debido a la baja sensibilidad de las tcnicas de cultivo em pleadas? La resolucin
de estos interrogantes perm itir derivar im portantes conclusiones, porque ya hace algn tiem po que ha sido reconocido que A. actinom ycetem com itans es un colonizador habitual de los tejidos blandos y de la placa
supragingival (39, 44, 107-109, 160). Sin em bargo, si la extraccin de los dientes naturales conduce a la erradica-
cin de esta especie, as com o de P. gingivalis, entonces

ello im plica fuertem ente al entorno del lquido crevicular gingival o de la bolsa periodontal com o esencial para
m antener la colonizacin de este consenso de agentes
patgenos periodontales. En los estudios arriba descritos
llevados a cabo en individuos desdentados se detectaron
tanto P. gingivalis com o A. actinom ycetem com itans, as
com o T. forsythia, sobre las prtesis dentales y los tejidos
blandos en algunos individuos, pero no en todos. Dado
que esto no concordaba con la bibliografa existente, exam inam os la com posicin de m uestras m icrobianas divididas del dorso de la lengua y de la prtesis dental de
156
Recuentos 10 0,0
SUBGINGIVAL
0,6
1,1
A. gerencseriae***
A. israelii***
A. naeslund ii 1***
A. naeslund ii 2***
A. od ontolyticus***
V. parvula
S. gord onii
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
A. actinom ycetem com itans*
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E. corrod ens
C. gracilis
C. rectus***
S. show ae
E. nod atum *
F. nucleatum ss nucleatum ***
F. nucleatum ss vincentii***
F. period onticum ***
P. m icros**
P. interm ed ia*
P. nigrescens***
S. constellatus
T. forsythia***
P. gingivalis***
T. d enticola***
E. saburreum
G. m orbillorum
L. buccalis
N. m ucosa
P. acnes
P. m elaninogenica
S. anginosus
S. noxia***
T. socranskii***
1,7
2,3
Actinos
Morado
Am arillo
Periodontitis
Sano
Sndrome de Sjgren
Verde
Naranja
Rojo
Otros
Fig. 16. Perfiles de los recuentos medios de 40 taxones en muestras de placa subgingival de 28 individuos sanos, 53 con perio-
dontitis crnica y 24 con el sndrome de Sjgren. El mtodo y el

anlisis estadstico corresponden a los indicados en la figura 15.
10 individuos com pletam ente desdentados utilizando hibridacin de ADN-ADN en dam ero, tcnicas de cultivo
convencionales y PCR. Mediante hibridacin aplicada a
las m uestras de las prtesis, se detect P. gingivalis en 9
m uestras y T. forsythia en 8 m uestras. Sin em bargo, las especies no fueron detectadas en el cultivo puro sobre un
m edio enriquecido. La tcnica de PCR con cebadores dirigidos a los genes ARNr 16S (5) s detect las especies en
porciones de las m ism as m uestras. Estos hallazgos perm iten deducir que la tcnica de cultivo es m enos sensible a la deteccin de bajos nm eros de estas especies en
las m uestras de biopelcula que los m todos m oleculares. Los datos indican que pueden detectarse P. gingivalis, A. actinom ycetem com itans y T. forsythia en los individuos desdentados transcurrido un ao, o m s, despus
de la extraccin de todos los dientes.
Comparacin de la composicin
de la biopelcula supragingival y subgingival
Se han m encionado ya los tres com ponentes que constituyen una biopelcula: la superficie que se coloniza, la
m icrobiota colonizadora y el fluido circulante. En las biopelculas supragingivales y subgingivales estos com ponentes son diferentes y, por lo tanto, influyen sobre la
com posicin m icrobiana de las m uestras de biopelcula
de am bas localizaciones. La figura 20 refleja una com paracin entre los recuentos m edios de especies en las biopelculas supragingivales y los recuentos en las biopelculas subgingivales. La figura 21 presenta la com paracin
entre las proporciones m edias de especies en am bos tipos de pelcula. Dado que el estado de enferm edad periodontal im pacta de form a tan acusada en la com posi-
157
125,2
P < 0,05
Recuentos 10 5
93,9
Controles (n = 10)
Sndrom e de
Sjgrens (n = 24)
62,6
P < 0,07
P < 0,05
31,3
P < 0,05
0,0
Saliva
Dorso de
la lengua
Laterales
de la lengua
Parte ventral
de la lengua
Suelo de
la boca
Bucal
Paladar
duro
Vestbulo
labial
Insercin
gingival
Fig. 17. Grfico de barras de los recuentos m edios de las

sondas de ADN en 24 individuos con el sndrom e de Sjgren y 10 controles em parejados. Se tom aron m uestras en
la saliva y en 8 zonas de tejido blando intrabucal. Las m uestras de saliva y las m uestras m icrobianas recogidas de la
superficie de los tejidos blandos se analizaron de form a individual para evaluar el contenido de 40 especies bacte-
rianas. Se calcularon los recuentos totales de las sondas de

ADN totales en cada individuo para cada zona de m uestreo y, luego, se obtuvo la m edia interindividual en los dos
grupos para cada zona de m uestreo por separado. La significacin estadstica de las diferencias en los recuentos
totales entre los individuos de Sjgren y controles se determ in em pleando la prueba de Mann-Whitney.
cin de la biopelcula (com o se analizar a continuacin),

los datos obtenidos de 50 voluntarios con periodoncio
sano (paneles de la izquierda) y 89 con periodontitis (paneles de la derecha) se presentan por separado. En los individuos con periodoncio sano los recuentos m edios de
la m ayora de las especies son significativam ente m s altos en las biopelculas supragingivales que en las subgingivales (fig. 20, panel izquierdo). Esto no debera sorprender a nadie que haya tratado a individuos con
periodoncio sano. La principal diferencia est dada por
los recuentos m ucho m s altos de especies de Actinom yces y m iem bros de los com plejos m orado, am arillo, verde
y otros. Las proporciones m edias de especies en la placa
supragingival y en la placa subgingival no presentaron
grandes diferencias en este grupo de individuos con periodoncio sano (fig. 21, panel izquierdo). Las proporciones de Actinom yces y Streptococcus sanguis fueron algo
m ayores en las zonas supragingivales, m ientras que las
especies del com plejo naranja se encontraban en proporciones algo m ayores en las zonas subgingivales.
Los recuentos m edios de la placa supragingival y de la
placa subgingival fueron m ayores en los individuos con
periodontitis (fig. 20, panel derecho) que en aquellos con

periodoncio sano. La com paracin entre el panel izquierdo y el derecho de la figura 20 indica que haba un
m arcado increm ento en m uchos taxones en las biopelculas subgingivales de los individuos con periodontitis,
en particular, de especies de los com plejos naranja y rojo.
Tam bin se apreci un aum ento en m uchas de las especies de la placa supragingival de los individuos con periodontitis (fig. 20, panel derecho). Se observaron m uchas
m s diferencias significativas entre las proporciones de
especies bacterianas en las biopelculas supragingivales
con respecto a las subgingivales en el grupo de individuos
con periodontitis (fig. 21, panel derecho) que en el de los
controles sanos. Se hallaron proporciones aum entadas de
la especie Actinom yces y especies del com plejo verde, juntam ente con N. m ucosa, en las biopelculas supragingivales, y proporciones significativam ente m s altas de
m iem bros del com plejo naranja y todas las especies del
com plejo rojo en las biopelculas subgingivales.
Los recuentos generalm ente m s elevados de m uchas
especies en las m uestras de biopelcula supragingival con
respecto a la subgingival, particularm ente en individuos
158
Saliva
Recuentos 10 5
0,0
2,7
Dorso de
la lengua*
5,4 0,0
Laterales de
la lengua
5,4 10,70 0,0
3,1
Parte ventral
de la lengua
6,1 0,0
0,7 1,3 0,0
Suelo de
la boca
Bucal*
0,9
1,2
1,8 0,0
A. gerencseriae
A. israelii
A. naeslund ii 1
A. naeslund ii 2
A. od ontolyticus
V. parvula
S. gord onii
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E corrod ens
C. gracilis
C. rectus
C. show ae
E. nod atum
F. p eriod onticum
P. m icros
P. interm ed ia
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingalis
T. d enticola
E. saburreum
G. m orbillorum
L. buccalis
N. m ucosa
P. acnes
P. m elaninogenica
S. anginosus
S. m utans
S. noxia
T. socranskii
Paladar
duro*
2,5 0,0
1,7
Vestbulo
labial
3,5 0,0
1,1
Insercin
gingival
2,3 0,0
3,6
7,1
Actinos
Morado
Am arillo
Verde
Naranja
Rojo
Otros
Controles
Sjgren
Fig. 18. Perfiles m icrobianos m edios de la saliva y 8 superficies de tejido blando bucal en 24 individuos con el sndrom e de Sjgren y 10 controles em parejados. Las m uestras se recogieron y analizaron tal com o se describe en la
figura 17. La significacin estadstica de las diferencias en
los recuentos bacterianos entre los dos grupos se determ in para cada zona de m uestreo utilizando la prueba de
Mann-Whiney. Se observaron diferencias significativas entre los dos grupos en los perfiles m icrobianos del dorso de
la lengua, la m ucosa bucal y el paladar duro.
con periodoncio sano, probablem ente reflejan, en gran

parte, el espacio disponible para la colonizacin, es decir,
una barrera fsica frente a la colonizacin. El surco gingival en las zonas sanas proporciona un escaso espacio para
que habiten grandes cantidades de m icroorganism os. Y
aunque la bolsa periodontal en los individuos enferm os
proporciona un m ayor espacio para la colonizacin m icrobiana, los recuentos en el rea supragingival todava
son algo m s altos que en la zona subgingival adyacente
para la m ayor parte de especies. Esto vari de un individuo a otro en el grupo de individuos con periodontitis. Algunos individuos m ostraron recuentos m ucho m ayores
en las m uestras supragingivales que en las subgingivales,
m ientras que otros exhibieron recuentos m ayores en las
m uestras subgingivales. Es posible que estos resultados
hayan reflejado las prcticas individuales de higiene bucodental.
Las diferencias entre la com posicin m icrobiana del
ecosistem a supragingival y la com posicin m icrobiana
del ecosistem a subgingival, tan fuertem ente dem ostradas
en los individuos con periodontitis, probablem ente sean
consecuencia de m ltiples factores. La biopelcula supragingival presenta una sola superficie para la colonizacin, las piezas dentarias, m ientras que la zona subgingival proporciona dos superficies, los dientes y el epitelio
que recubre el surco gingival o bolsa periodontal. De he-
cho, la bolsa periodontal o surco gingival parece ser nico

en la cavidad bucal en cuanto a que parece haber dos biopelculas en un solo espacio anatm ico. La anatom a de
esta rea perm ite el establecim iento de una tercera zona
dentro de la bolsa, la zona de placa de poca adherencia, con m enos m atriz intracelular (86). Esta zona se produce entre la biopelcula adherida al diente y la biopelcula adherida al epitelio en las bolsas periodontales m s
profundas. No est claro lo fuerte que estos m icroorganism os adhieren a una u otra biopelcula, pero su existencia es posible porque los m icroorganism os en esta rea
estn rodeados de tejidos por todos los lados, excepto el
orificio de la bolsa. Sin este confinam iento fsico, las especies con una dbil adherencia probablem ente seran
arrastradas fuera de las superficies colonizadas. Una segunda diferencia im portante entre el hbitat supragingival y el subgingival es la naturaleza del fluido que los baa;
para las biopelculas supragingivales este lquido es la saliva, y para las subgingivales, el lquido crevicular gingival. La com posicin del lquido crevicular gingival es diferente de la de la saliva, y la com posicin tam bin es
diferente en estado de salud y en una enferm edad periodontal. Estas diferencias en la com posicin pueden afectar notablem ente a la naturaleza de la especie que coloniza esta rea. Por ejem plo, el lquido crevicular gingival
que em ana de las zonas afectadas de enferm edad perio-
159
% sem ejanza (coeficiente de sem ejanza m nim a)

60
70
80
90
Bucal
Parte ventral d e la lengua
Suelo d e la boca
Controles
Insercin gingival
Vestbulo labial
Insercin gingival
Vestbulo labial
Suelo d e la boca
Parte ventral d e la lengua
Sjgren
Palad ar d uro
Bucal
Palad ar d uro
Dorso d e la lengua
Controles
Saliva
Dorso d e la lengua
Saliva
Sjgren
Fig. 19. Dendrogram a de un anlisis de grupo de las proporciones m edias de especies en la saliva y en 8 superficies
de tejido blando bucal en 24 individuos con el sndrom e de
Sjgren y 10 controles em parejados. Se em ple un coefi-
ciente de sem ejanza m nim a y una m edia de ordenacin

de enlace no equilibrada. Se form aron dos grupos con los
individuos con el sndrom e de Sjgren y dos grupos con los
controles.
dontal favorece m ucho el desarrollo de algunas especies

de espiroquetas (41).
ten sam en te in vivo las variacion es m icrobian as que se

producen duran te el desarrollo de la placa supragin gival
y subgin gival, y n in gn estudio publicado ha exam in ado
los cam bios en la com posicin de la biopelcula del tejido blan do a largo plazo.
Ritz (140) describi los cam bios que sucedan en la
placa que se form aba sobre las superficies labiales de los
seis m axilares an teriores y los seis m an dibulares an teriores. Utiliz un m edio de cultivo selecto para en um erar siete gn eros de m icroorgan ism os estreptococos,
Actin om yces, corin ebacterias, Neisseria, fusobacterias,
Veillon ella y Nocardia en dos m uestras recogidas de cada
un o de los seis participan tes adultos en los das 1, 3, 5,
7 y 9. Hubo predom in io de estreptococos en el da 1, los
que con stituyeron , com o prom edio, el 46 % de las colon ias seleccion adas. Las proporcion es m edias de Neisseria (9 %) y Nocardia (6 %) tam bin fueron elevadas en el
da 1, pero fueron decrecien do en recuen tos y proporcion es con el tiem po (2 % y 0,1 %, respectivam en te, a los
9 das). La proporcin de Actin om yces fue in icialm en te
baja (0,2 %), pero aum en t hasta el 23 % de la m icrobiota
a los 9 das. Ritz (140) pen s que haba un a sucesin m icrobian a en el desarrollo de la placa, y que las especies
aerobias o facultativas reducan el en torn o para el posterior crecim ien to de especies an aerobias. El estudio fue
Desarrollo de las biopelculas

intrabucales
Desarrollo de la biopelcula:
los primeros estudios
Dado el crtico papel que desem pe an los m icroorgan ism os de las biopelculas en la etiologa de las en ferm edades odon tolgicas, es sorpren den te que los cam bios m icrobian os in vivo que se producen en el desarrollo
de estas biopelculas n o sean con ocidos con gran detalle. Se han dise ado com plicados escen arios de desarrollo de placa, basados en la observacin a travs del m icroscopio ptico o electrn ico (86, 87, 89), m odelos de
adhesin y coagregacin in vitro (35, 48-50, 74, 75, 100,
147, 150, 165, 166), y estudios in vitro de cultivos con tin uos (142, 164, 180). A partir de estos estudios y de otros
revisados por Socran sky y cols. (155), se han postulado
los posibles pasos en el desarrollo de las biopelculas in trabucales, tal com o se ilustra en la figura 22. No obstan te, prcticam en te n in gn estudio ha exam in ado ex-
160
Recuentos 10
A. gerencseriae
A. israelii
A. naeslund ii 1
A. naeslund ii 2
A. od ontolyticus
V. parvula
S. gord onii
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E corrod ens
C. gracilis
C. rectus
C. show ae
E. nod atum
F. period onticum
P. m icros
P. interm ed ia
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingalis
T. d enticola
E. saburreum
G. m orbillorum
L. buccalis
N. m ucosa
P. acnes
P. m elaninogenica
S. anginosus
S. m utans
S. noxia
T. socranskii
SANO
6
12
PERIODONTITIS
3
6
9
12
Actinos
Morado
Am arillo
Verde
Naranja
Rojo
Supragingival
Otros
Subgingival
Fig. 20. Perfiles de los recuentos medios de 40 taxones en las

muestras de placa supragingival y subgingival (separadamente) de 50 individuos sanos (panel izquierdo) y 89 individuos con periodontitis crnica (panel derecho). Las
muestras se tomaron por separado, primero muestras supragingivales y luego muestras subgingivales, del aspecto
mesial de cada pieza dentaria. Las muestras fueron analizadas de forma individual para evaluar el contenido de 40 especies, empleando hibridacin de ADN-ADN en damero. Se
obtuvo la media de los recuentos supragingivales y subgingivales de cada especie en cada individuo y, luego, la media
interindividual para los dos grupos clnicos y las dos zonas
de muestreo. Las especies se ordenaron segn los complejos descritos por Socranski y cols. (156). Se busc la significacin estadstica de las diferencias entre los grupos de muestras supragingivales y subgingivales utilizando la prueba de
orden con signo de Wilcoxon, y se la ajust para comparaciones mltiples (157); *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001.
un clsico de su tiem po, pero, de acuerdo con los estn dares actuales, es posible se alar ciertas lim itacion es:
fueron evaluados pocos in dividuos y m uestras, los m icroorgan ism os de prueba n o fueron especiados y las tcn icas de cultivo an aerobio em pleadas fueron defectuosas debido a la falta de H 2 en la m ezcla de gas an aerobio.
Son cran sky y cols. (161) utilizaron tcn icas de m icrobiota cultivable predom in an te para estudiar las variacion es en las poblacion es m icrobian as que se producan
en la placa supragin gival que se form aba sobre la superficie bucal de un solo dien te en un in dividuo. Los datos
in dicaron que se producan pocas variacion es en la com posicin m icrobian a desde los 5 m in utos hasta las 8 horas. Hubo un m arcado aum en to en los recuen tos totales
y los recuen tos de especies especficas en el da 1, pero

esto se n ivel en tre los 2 y 16 das. Las proporcion es de
la especie Actin om yces fueron elevadas desde los 5 m in utos hasta las 8 horas, pero descen dieron el prim er da,
aum en taron del da 1 al da 2, n iveln dose a los 16 das.
S.san gu is fue detectado en todos los in tervalos de tiem po,
aum en t el da 1, y luego fue descen dien do. Este estudio especi m icroorgan ism os con el detalle posible en
esos m om en tos, pero fue lim itado, pues n icam en te se
estudi un a zon a de m uestreo en un in dividuo.
La valoracin m icrobiolgica m s exhaustiva del desarrollo de la placa a travs del tiem po en el ser hum an o
fue llevada a cabo por Zee y cols. (188). En ese estudio,
se recogi un a sola m uestra de placa de 5 in dividuos con
161
Recuentos 10
SANO
8
A. gerencseriae
A. israelii
A. naeslund ii 1
A. naeslund ii 2
A. od ontolyticus
V. parvula
S. gord onii
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E corrod ens
C. gracilis
C. rectus
C. show ae
E. nod atum
F. period onticum
P. m icros
P. interm ed ia
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingalis
T. d enticola
E. saburreum
G. m orbillorum
L. buccalis
N. m ucosa
P. acnes
P. m elaninogenica
S. anginosus
S. noxia
T. socranskii
12
16
Actinos
Morado
Am arillo
Verde
Naranja
Rojo
Otros
Supragingival
Subgingival
Fig.21. Perfiles del porcentaje m edio del recuento de ADN

de 40 taxones en las m uestras de placa supragingival y subgingival (separadam ente) de 50 individuos sanos y 89 con
Propagacin lateral
periodontitis crnica. El m todo y el anlisis estadstico

corresponden a los indicados en la figura 20.
Crecim iento vertical
Canales d e agua
lquido circulante
Superficie d entaria
16
PERIODONTITIS
4
8
12
glucocliz
Ad herencia
Coagregacin
Fig.22. Diagram a que representa los acontecim ientos que,

segn se cree, suceden durante el desarrollo de las biope-
162
Propagacin
lculas bacterianas dentales. Estos estadios se analizan en
Socransky y cols. (155).
form acin rpida de placa bacterian a y de 6 in dividuos

con form acin len ta de placa en los das 1, 3, 7 y 14.
Las m uestras fueron dispersadas de form a an aerobia, diluidas y em plazadas en portaobjetos, y se iden tificaron
de 20 a 30 colon ias por in dividuo. Las bacterias gram positivas fueron las especies cultivables predom in an tes
en am bos grupos cln icos, pero las especies gram n egativas aum en taron m s rpidam en te en los form adores
rpidos de placa. A los 14 das, los form adores de placa
rpidos m ostraban un a m edia de bacilos gram n egativos del 38 %, en com paracin con el 17 % en el da 14 de
m uestras obten idas de los form adores de placa len tos.
La m ayora de los bacilos gram n egativos cultivables eran
de los gn eros Fu sobacteriu m y Capn ocytophaga. Un hallazgo sorpren den te en el estudio de Zee y cols. fue un a
dism in ucin de la proporcin de cocos gram positivos,
desde el 50-60 % el prim er da hasta m en os del 15 % a
los 14 das. Este descen so estuvo acom pa ado por un
aum en to en la proporcin de especies Actin om yces y bacilos gram n egativos. Radford y cols. (130) realizaron un
estudio sim ilar en m on os. Se realiz un a lim pieza de las
superficies labiales de los in cisivos cen trales de 15 m on os y se tom aron m uestras de placa a los 0,5, 1, 2, 4, 7,
14 y 28 das. En con traron un a alta proporcin de especies Streptococcu s en el da 1 (35 %), que descen di hasta
el 7 % el da 7 del estudio. Las especies Actin om yces aum en taron duran te todo el perodo de form acin de placa
y con stituyeron el 15 % de las un idades totales form adoras de colon ias a los 28 das.
Desarrollo de la biopelcula supragingival

Li y cols. (84) realizaron un estudio de los estadios m s
tem pran os de form acin de placa supragin gival sobre las
superficies bucal/ labial en 15 volun tarios san os. Se recogi un a m uestra de saliva por expectoracin an tes de
lim piar las superficies den tarias con piedra pm ez. Los
con jun tos de m uestras de placa supragin gival se recogieron a las 0, 2, 4 y 6 horas despus de realizar un a lim pieza con un a m em bran a de PVDF. Tras cada m uestreo,
los dien tes se volvieron a lim piar y se perm iti la form acin de m uestras para el siguien te perodo de tiem po. Se
determ in aron los recuen tos y proporcion es de 40 especies bacterian as utilizan do hibridacin de ADN-ADN en
dam ero. Los datos in dicaron que la distribucin de las
especies en la saliva fue diferen te de la observada en las
m uestras de placa del m ism o in dividuo, lo que m ostraba
la capacidad selectiva del proceso de adhesin in icial (fig.
23). Se observ que las especies Actin om yces aum en taron de las 0 a las 2 horas, pero perm an ecieron esen cialm en te con stan tes hasta las 6 horas. Los m ayores in crem en tos observados fueron para S. m itis y S. oralis, que
aum en taron n otablem en te hasta las 6 horas. Otras especies perm an ecieron en con cen tracion es bajas o in sign ifican tes duran te este in tervalo de tiem po.
Un segun do estudio del recrecim ien to de la biopelcula supragin gival realizado duran te un perodo de
tiem po m s prolon gado tam bin em ple tcn icas m ole-
culares (134). Los autores dem ostraron que el crecim ien to

de placa de 4 das en ausen cia de cuidados en el dom icilio fue bastan te lim itado en 10 in dividuos que haban
ten ido un perodo preparatorio duran te el cual la placa
supragin gival y la in flam acin gin gival se redujeron al
m n im o m edian te m edidas de higien e den tal profesion al y person al. En ausen cia de in flam acin gin gival, las
variacion es m icrobian as en estos in dividuos fueron tam bin m n im as.
Otro estudio se in ici en The Forsyth In stitute con el
fin de com parar los cam bios m icrobian os tem pran os en
la form acin de la biopelcula supragin gival en in dividuos con el periodon cio san o, con periodon titis y portadores de prtesis. Las m uestras de placa supragin gival
se tom aron del aspecto m esial de cada dien te (o pieza
den taria de den tadura postiza) en 30 in dividuos san os,
8 con periodon titis y 18 portadores de den taduras postizas, en el m om en to de en trar en el estudio, y se an alizaron in dividualm en te utilizan do hibridacin de ADNADN en dam ero. Se lim piaron los dien tes (o den taduras) e, in m ediatam en te, se volvieron a recoger m uestras
para proporcion ar un valor de tiem po 0 basal. Duran te 7 das los participan tes en el estudio se abstuvieron de
realizar la higien e bucoden tal. Se tom aron m uestras
de placa de siete piezas den tarias en cuadran tes seleccion ados al azar, en los das 1, 2, 4 y 7 del estudio, las que
fueron an alizadas m edian te hibridacin de ADN-ADN
en dam ero. Se determ in aron los recuen tos de cada especie para cada zon a de m uestreo, y se sac su m edia en
cada in dividuo en cada in tervalo fijado.
Los recuen tos totales m edios de son da de ADN ( 105,
ESM) fueron 45 7, 66 12 y 52 11 al en tran al estudio, y 6 1, 9 4 y 6 1 in m ediatam en te despus de
la higien e den tal en los in dividuos periodon talm en te san os, con periodon titis y portadores de prtesis, respectivam en te (fig. 24). Los recuen tos totales en los in dividuos san os y con periodon titis excedieron los valores
basales (61 11 y 64 13, respectivam en te) a los 2 das,
pero recin a los 4 das en los in dividuos desden tados
(57 18). Los recuen tos basales m edios m s elevados de
la m ayora de las especies correspon dieron a los in dividuos con periodon titis y los m s bajos, a los in dividuos
desden tados (fig. 24). Los recuen tos de estreptococos, A.
actin om ycetem com itan s,Peptostreptococcu s m icros,E.corroden s y V. parvu la regresaron a los valores basales en
2 das (fig. 25). Las restan tes especies volvieron a los valores basales a los 4-7 das. Los estreptococos m ostraron
un a m eseta en tre los 2 y 7 das. El patrn de recolon izacin supragin gival en los in dividuos san os y con periodon titis fue virtualm en te idn tico y m s rpido que el
observado en los in dividuos desden tados. No obstan te,
cada especie difiri en el ritm o y en el grado m xim o de
recolon izacin alcan zada duran te 7 das higien e den tal.
De las figuras 24 y 25 pueden extraerse dos con clusion es acerca de la higien e den tal person al. En prim er
lugar, la higien e bucal en casa ben eficia al m ism o in dividuo, ya que los recuen tos totales de bacterias en las
m uestras de placa supragin gival estaban n otablem en te
163
Recuentos 10 5 0,0
1,2
2,4
3,6
4,8
A. gerencseriae
A. israelii
A. naeslund ii 1
A. naeslund ii 2
A. od ontolyticus
V. parvula
S. gord onii
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E. corrod ens
C. gracilis
C. rectus
S. show ae
E. nod atum
F. period onticum
P. m icros
P. interm ed ia
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingivalis
T. d enticola
E. saburreum
G. m orbillorum
L. buccalis
N. m ucosa
P. acnes
P. m elaninogenica
S. anginosus
S. noxia
T. socranskii
Actinos
Morado
Am arillo
Verde
Naranja
Rojo
Otros
Muestras de biopelcula
Saliva 0 h
0h
2h
4h
6h
Fig. 23. Perfiles m icrobianos del recuento m edio ( 10 5 ) de

40 taxones en m uestras de saliva y de la biopelcula de la
placa recogidas de al m enos 20 superficies bucales inm ediatam ente despus de realizar la higiene dental profesional (0 horas) y a las 2, 4 y 6 horas en 15 individuos. Las
m uestras se analizaron para evaluar el contenido de 40 es-
pecies utilizando hibridacin de ADN-ADN en dam ero. Se

calcularon los recuentos de cada una de las especies en
cada individuo y, luego, se obtuvo la m edia de form a interindividual para cada intervalo de m uestreo. Las especies
estn ordenadas segn los com plejos descritos por Socransky y cols. (156).
aum en tados tras 7 das sin higien e bucal con respecto a

los valores basales. En segun do lugar, el hecho de que la
higien e bucoden tal profesion al dism in uy n otablem en te
los recuen tos totales m edios (desde los valores previos a
la lim pieza a los valores basales) in dica que hay m ucho
espacio para m ejorar en los procedim ien tos de la higien e
bucoden tal person al.
totales en estos dos grupos excedieron los valores basales

(22 6, 56 31). Hubo diferencias destacadas entre el periodoncio sano y la periodontitis en cuanto a los patrones
de recolonizacin (fig. 26). En individuos con periodontitis, los recuentos de la m ayora de las especies aum entaron rpidam ente y alcanzaron valores m uy por encim a de
los basales a los 2 das con respecto a 17 especies, entre
las que se incluan especies de Actinom yces y Streptococcus; posteriorm ente los recuentos descendieron hasta alcanzar, aproxim adam ente, los valores basales a los 7 das.
Para las otras especies, los recuentos alcanzaron una m eseta o aum entaron. Algunas especies no alcanzaron los
valores basales en 7 das, entre ellas, C. gracilis, Eubacterium nodatum , P. gingivalis y T. denticola. Para los individuos sanos, los recuentos de la m ayor parte de las especies aum entaron lentam ente con el tiem po, hasta alcanzar
o exceder los valores basales a los 7 das. Estos datos indican que la cintica del redesarrollo de la placa subgingival en individuos con periodontitis o periodoncio sano
Desarrollo de la biopelcula subgingival

Se com pararon los cam bios m icrobianos que se produjeron en la form acin de la biopelcula subgingival de
durante 7 das en los individuos con periodoncio sano y
en los individuos con periodontitis, m encionados previam ente. Los recuentos totales m edios de sonda de ADN (
105, ESM) fueron 16 3 y 32 10 al entrar en el estudio,
y 5 1 y 4 1 inm ediatam ente despus de la higiene dental en los individuos con periodoncio sano y con periodontitis, respectivam ente (fig. 24). Alos 2 das, los recuentos
164
Subgingival
Sup ragingival
140
Recuentos 10 5
105
70
35
Pre Post 1
Lim pieza
Sano
4
Das
Pre Post 1
Lim pieza
Periodontitis
4
Das
Prtesis dental
Fig. 24. Recuentos totales medios de sonda de ADN ( 10 5,

ESM) de las muestras de placa bacteriana obtenidas antes de
la higiene profesional, inmediatamente despus de ella, y 1,
2, 4 y 7 das despus de no realizar ningn tipo de higiene bu-
codental en individuos sanos, con periodontitis o portadores

de prtesis dentales totales. Se proporcionan las lneas interrumpidas horizontales para indicar los valores previos a la
limpieza dental profesional para cada grupo clnico.
difiere notablem ente, al m enos en ausencia de procedim ientos de higiene bucodental.

Al exam in ar la cin tica del redesarrollo de la biopelcula asociada al tejido duro, llam a la aten cin la celeridad de este proceso. En ausen cia de higien e bucal, el recrecim ien to, com probado por los recuen tos totales, se
alcan z en un plazo de 2-4 das en los tres grupos cln icos. Sin em bargo, debe pun tualizarse que se observ un a
gran variabilidad in terin dividual en la velocidad de redesarrollo de la biopelcula. Hace a os que se recon oce
este hecho, a partir de la observacin cln ica y de los estudios que han cuan tificado el recrecim ien to de la placa
bacterian a (149). Se descon oce la causa de estas diferen cias en tre in dividuos. En un apartado an terior, se ha
descrito la con tribucin de la in flam acin gin gival y del
flujo de lquido crevicular gin gival. Sin em bargo, puede
que sta n o sea toda la respuesta. Las diferen cias en la
velocidad de form acin de biopelcula pueden ser observadas en tre in dividuos o en tre zon as con grados sim ilares de in flam acin gin gival cln ica. Tam bin se observaron diferen cias en la velocidad de form acin de
biopelcula en tre los in dividuos o en tre zon as cuan do la
in flam acin gin gival n o era cln icam en te eviden te. Dado
que la in flam acin gin gival explica slo en parte las diferen cias en la velocidad de form acin de la biopelcula,
existe un vaco en la com pren sin de los factores ecol-
gicos que favorecen o lim itan el desarrollo de la biopelcula en distin tos in dividuos.
Los datos presentados en este captulo fortalecen la nocin de una sucesin m icrobiana, analizada al estudiar los
principios de la ecologa m icrobiana, segn la cual las especies parecieron m ultiplicarse en oleadas (fig. 27). Por
ejem plo, en las m uestras de placa supragingival de los individuos con periodoncio sano, S. oralis alcanz su valor
basal en 1 da y su valor m xim o a los 2 das. E. corrodens excedi su valor basal a los 2 das y se m antuvo en
una m eseta durante 4 das. En cam bio, A. naeslundii genoespecie 2 alcanz su valor basal a los 4-7 das. Esta especie y C. showae exhibieron una velocidad de crecim iento
m s lenta inicialm ente, y, aparentem ente, continuaban
creciendo en el da 7, da de finalizacin del estudio. Estos datos concuerdan con los patrones observados m ediante cultivos (161, 188). En estos estudios, el desarrollo
de la biopelcula supragingival en los individuos con periodontitis m ostr oleadas de sucesin sim ilares. Las especies S. oralis y E. corrodens alcanzaron picos m uy por
encim a de sus niveles basales a los 2-4 das, m ientras que
A. naeslundii genoespecie 2 y C. showae alcanzaron los valores previos a la lim pieza entre los 4 y los 7 das, y pareca que continuaban aum entando a los 7 das.
Tam bin pudo observarse la sucesin m icrobian a en
las m uestras de placa subgin gival de in dividuos san os y
165
Sano
Periodontitis
Prtesis dental
A. gerencseriae
A. israelii
A. naeslund ii 1
A. naeslund ii 2
A. od ontolyticus
V. parvula
S. gord onii
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E. corrod ens
C. gracilis
C. rectus
C. show ae
E. nod atum
F. period onticum
P. m icros
P. interm ed ia
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingivalis
T. d enticola
E. saburreum
G. m orbillorum
L. buccalis
N. m ucosa
P. acnes
P. m elaninogenica
S. anginosus
S. m utans
S. noxia
T. socranskii
Pre. 0 1 2 4 7
Das
14,0
10,5
7,0
3,5
0,0
Recuentos 10 5
Fig. 25. Recuentos medios ( 10 5) de 41 taxones en las muestras de placa supragingival obtenidas antes de la higiene profesional, inmediatamente despus de ella, y 1, 2, 4 y 7 das
despus de no realizar ningn tipo de higiene bucodental en
individuos sanos, con periodontitis o portadores de prtesis
dentales totales. Cada representa los recuentos medios de

una sola especie en los diversos intervalos de muestreo. El
borde izquierdo del proporciona el recuento medio antes de
la higiene. El rpido descenso a su derecha representa los
valores medios inmediatamente despus de la limpieza.
con periodon titis (fig. 27). Sin em bargo, existieron asom brosas diferen cias en el patrn de recrecim ien to en las
m uestras de estos hbitats cln icam en te distin tos. En las
m uestras de los in dividuos con periodon cios san o hubo
un patrn sim ilar al observado en las m uestras supragin givales: los recuen tos de S. oralis y E. corrodens aum en taron hasta los valores previos a la lim pieza a los 12 das y, a partir de all presen taron un estado de m eseta,
con ligeras variacion es; en cam bio, los recuen tos de A.
naeslundii gen oespecie 2 y C. showae aum en taron m s
len tam en te y n o excedieron los valores previos a la lim pieza an tes de los 4-7 das. En drstico con traste, en las
m uestras subgin givales de los in dividuos con periodon titis, hubo un rpido in crem en to de A. naeslundii gen oespecie 2, que alcan z su pico a los 2 das y dism in uy a
los 4 y 7 das. El rpido aum en to de esta especie estuvo
acom pa ado por un rpido in crem en to de S. oralis y E.
corrodens, que tam bin dism in uyeron en recuen tos m edios despus de 2 das. C. showae m ostr un len to in crem en to de crecim ien to y alcan z los valores basales a los
4 das. Se ign ora la causa de este patrn de crecim ien to
subgin gival explosivo seguido de un declive en ciertas especies.
Relacin entre el estado

de enfermedad periodontal
y la composicin de la biopelcula
166
Composicin microbiana de las biopelculas

en el perio doncio sano y enfermo
Duran te m s de 100 a os, cada gen eracin de m icrobilogos bucoden tales ha llegado a la m ism a con clusin :
que la m icrobiota subgin gival de los in dividuos con periodon cio san o difiere de la en con trada en los in dividuos
con periodon titis. In icialm en te, se lleg a esta con clusin con la ayuda del m icroscopio ptico (88) y, m s tarde,
de los cultivos m icrobiolgicos (para un a revisin , v. 63),
la m icroscopia electrn ica (86), las tcn icas basadas en
los an ticuerpos (33, 185) y las tcn icas m oleculares (73).
Hace aproxim adam en te m edio siglo, Ted Rosebury, el
preem in en te m icrobilogo bucoden tal de su tiem po, se
pregun taba (en un a con versacin ) si todo el m un do ten a todas las especies, y la diferen cia en tre el estado de
salud y el de en ferm edad radicaba sim plem en te en la
can tidad. Esta pregun ta n o pudo respon derse con claridad con las tcn icas dispon ibles en esos m om en tos,

Sano
Periodontitis
A. gerencseriae
A. israelii
A. naeslund ii 1
A. naeslund ii 2
A. od ontolyticus
V. parvula
S. gord onii
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E. corrod ens
C. gracilis
C. rectus
C. show ae
E. nod atum
F. period onticum
P. m icros
P. interm ed ia
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingivalis
T. d enticola
E. saburreum
G. m orbillorum
L. buccalis
N. m ucosa
P. acnes
P. m elaninogenica
S. anginosus
S. m utans
S. noxia
T. socranskii
Pre. 0 1 2 4 7
Das
6,6
5,0
3,3
1,7
0,0
Recuentos 10 5
Fig. 26. Recuentos medios ( 105) de 41 taxones en las muestras de placa subgingival obtenidas antes de la higiene profesional, inmediatamente despus de ella, y 1, 2, 4 y 7 das despus de no realizar ningn tipo de higiene bucodental en
individuos sanos o con periodontitis crnica. Cada representa

los recuentos medios de una sola especie en los diversos intervalos de muestreo. El rpido descenso a su derecha representa
los valores medios inmediatamente despus de la limpieza.
pero puede respon derse hoy parcialm en te. La figura 28

proporcion a perfiles m icrobian os m edios de las m uestras subgin givales obten idas de 184 in dividuos san os y
592 in dividuos con periodon titis crn ica. Las especies estn organ izadas segn los com plejos an tes descritos. La
figura in dica que, por trm in o m edio, los recuen tos subgin givales son m s elevados en los in dividuos con periodon titis que en los in dividuos que m uestran un periodon cio san o, y que las prin cipales diferen cias en tre
san o y en ferm o se producen fun dam en talm en te en tre
las especies de los com plejos rojo y n aran ja. En realidad,
11 de 12 especies en el com plejo n aran ja y los tres m iem bros del com plejo rojo estaban sign ificativam en te elevados en los in dividuos con periodon titis, in cluso tras los
ajustes para com paracion es m ltiples. Estos datos con cuerdan con los estudios publicados que han utilizado
la tcn ica PCR para exam in ar la frecuen cia de deteccin
de salud y en ferm edad (5, 22, 55, 80, 83, 99, 167), PCR en
tiem po real (69, 95), los cultivos (para un a revisin , vase 63), las son das de ADN (1) y las tcn icas basadas en
los an ticuerpos (20, 33, 53, 151, 185). Al m om en to actual,
n o cabe duda que ciertas especies, com o P. gin givalis, T.

forsythia y T. den ticola pueden ser detectadas con m ayor
frecuen cia, en m ayores proporcion es y en m ayores can tidades, en los in dividuos con periodon titis que en los
san os. Asim ism o, m edian te tcn icas PCR, se ha sugerido
que otras especies, in cluidas las especies in cultivables,
se detectan con m ayor frecuen cia en un periodon cio en ferm o que en un o san o (80).
La diferen cia en la com posicin de la m icrobiota subgin gival en tre los estados de salud y de en ferm edad es
in structiva desde un pun to de vista ecolgico. Mien tras
que la en ferm edad es in iciada por las especies colon izadoras, n o est claro si los pasos in iciales proceden de algn cam bio en un a o m s especies en un a zon a subgin gival o de algn cam bio en el hbitat (an fitrin ), tan to
local com o sistm ico. Algun os de los cam bios en el an fitrin in ducidos por las especies colon izadoras en los
prim eros estadios de la periodon titis pueden producir el
estado in flam atorio local, y algun os pueden llevar a la
prdida de tejido periodon tal. En cualquier caso, se produce un a alteracin en el hbitat (tejido del an fitrin ),
167
Sano
Periodontitis
Supragingival
Recuentos 10 5
A. naeslund ii 2
S. oralis
E. corrod ens
Subgingival
Recuentos 10 5
4
4
C. show ae
4
Pre Post 1
Lim pieza
4
Das
Pre Post 1
Lim pieza
4
Das
Fig. 27. Variaciones en los recuentos m edios (x 105) de cuatro especies en las m uestras de placa supragingival y subgingival obtenidas antes de la higiene profesional, inm e-
diatam ente despus de ella, y 1, 2, 4 y 7 das despus de no

realizar ningn tipo de higiene bucodental en individuos
sanos o con periodontitis crnica.
que luego afecta a la com posicin y a las actividades m etablicas de la m icrobiota colon izadora. Estas m odificacion es de ida y vuelta en tre el an fitrin y la m icrobiota
even tualm en te con ducen a un equilibrio, un a n ueva com un idad clm ax que, a su vez, puede ocasion ar un in estable equilibrio en tre an fitrin y parsito duran te un perodo de tiem po prolon gado. Es de esta n ueva com un idad
clm ax de la que proceden las m uestras, en los in dividuos con periodon titis. Esta n ueva com posicin m icrobian a n o se logr de la n oche a la m a an a. La com un idad clm ax puede m an ten erse m uchos a os, y pueden
producirse in n um erables in teraccion es en tre el an fitrin
y los parsitos de la com un idad clm ax, los m ism os parsitos que estaban in icialm en te presen tes, cuan do el periodon cio estaba san o. Es posible que para cam biar esta
com un idad clm ax, que est adaptada al estado de en ferm edad, y regresar al estado de salud origin al, sea n ecesario algo m s que un os cuan tos toques de cureta bien
hechos, tal com o se an aliza en otro trabajo (65).
A travs de todo este trabajo se han utilizado valores
m edios para describir las com un idades m icrobian as en
diversos tipos de hbitat. Los valores m edios, si bien son
de ayuda, pues perm iten en ten der los in creblem en te
com plejos datos, pueden ser algo en ga osos. Estos valores n o pueden reflejar la variabilidad in terin dividual,
tan to en el grupo de pacien tes con en ferm edad com o
en el de volun tarios san os. Tam poco pueden represen tar los estados de la tran sicin desde la salud a la en ferm edad. A pesar de estas lim itacion es, es eviden te que
el estado de en ferm edad periodon tal tien e un gran im pacto sobre la com posicin de la m icrobiota subgin gival y que, por trm in o m edio, el estado de en ferm edad
in volucra a ciertas especies, particularm en te a los m iem bros de los com plejos rojo y n aran ja, m s que a otras.
Algunos de los cam bios que pueden ocurrir a m edida
que el estado de salud periodontal de la persona evoluciona hacia un estado de enferm edad periodontal pueden ser deducidos exam inando los perfiles m icrobianos
m edios en los individuos con diferentes grados de periodontitis. Los 592 sujetos de estudio con periodontitis crnica m encionados en la figura 28 se dividieron en subconjuntos al valor cuartil de la profundidad basal m edia
de la bolsa periodontal en toda la boca (fig. 29). Se apreci un cam bio sorprendente en la configuracin de los
perfiles m icrobianos m edios con el aum ento de la gravedad de la enferm edad. Esta variacin est particularm ente
168
Recuentos 10 5 0,0
1,2
2,4
3,6
4,8
A. gerencseriae
A. israelii
A. naeslund ii 1
A. naeslund ii 2
A. od ontolyticus
V. parvula
S. gord onii
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E. corrod ens
C. gracilis
C. rectus
S. show ae
E. nod atum
F. period onticum
P. m icros
P. interm ed ia
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingivalis
T. d enticola
E. saburreum
G. m orbillorum
L. buccalis
N. m ucosa
P. acnes
P. m elaninogenica
S. anginosus
S. noxia
T. socranskii
Fig. 28. Perfiles m icrobianos de los recuentos m edios ( 10 5 )

de 40 taxones m icrobianos en las m uestras de placa subgingival obtenidas de 184 individuos sanos y 592 con periodontitis crnica al com ienzo del estudio. Los perfiles representan los recuentos m edios derivados de prom ediar los
recuentos de cada especie en un individuo y luego interindividualm ente para am bos grupos clnicos. Las especies estn ordenadas y codificadas por colores segn los com ple-
jos m icrobianos descritos en Socransky y cols. (156). La tonalidad m s oscura de cada color representa a los individuos con periodontitis, m ientras que la tonalidad m s suave
representa a los individuos sanos. Se determ in la significacin estadstica de las diferencias para cada especie entre los grupos utilizando la prueba de Mann-Whitney, y se
la ajust para com paraciones m ltiples (157); *p < 0,05; **p
< 0,01; ***p < 0,001.
determ inada por las especies del com plejo rojo, cuya cantidad se eleva a m edida que aum enta la profundidad m edia de la bolsa y, hasta cierto punto, por algunas de las
especies del com plejo naranja. El cam bio del perfil m icrobiano m edio puede estar directam ente relacionado
con el aum ento de la cantidad de bolsas periodontales
profundas en los grupos con m ayor afectacin, ya que la
profundidad de la bolsa de una zona guarda una relacin
m uy estrecha con la com posicin de la m icrobiota subgingival, tal com o se analizar a continuacin.
tejidos periodontales adyacentes. Dos factores parecen ser

crticos: el estado inflam atorio de la bolsa y la profundidad de la bolsa periodontal o surco gingival. La relacin
de estos factores con la com posicin m icrobiana ha sido
reconocida desde hace algn tiem po (157). En la figura
30 se m uestra la relacin que existe entre la profundidad
de la bolsa y la cantidad de determ inadas especies. Los
datos indican que para la m ayora de las especies m icrobianas existe una escasa relacin con la profundidad de
la bolsa; sin em bargo, la m ayora de las especies del com plejo naranja y todas las especies del com plejo rojo aum entaron de form a significativa al aum entar la profundidad de la bolsa periodontal. Pueden sugerirse algunas
causas de la relacin que existe entre el aum ento de la
profundidad de la bolsa y el aum ento de las concentraciones de las especies de los com plejos rojo y naranja. Las
bolsas periodontales m s profundas tienen una m ayor
Relacin de los parmetros clnicos

en la zona periodontal con la composicin
de la microbiota subgingival
Probablem ente, el factor m s im portante que influye
sobre la m icrobiota subgingival es el estado clnico de los
169
Recuentos 10 5 0,0
1,4
2,8
A. gerencseriae
A. israelii
A. naeslundii 1
A. naeslundii 2
A. odontolyticus
V. parvula
S. gordonii
S. interm edius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E. corrodens
C. gracilis
C. rectus
S. show ae
E. nodatum
F. periodonticum
P. m icros
P. interm edia
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingivalis
T. denticola
E. saburreum
G. m orbillorum
L. buccalis
N. m ucosa
P. acnes
P. m elaninogenica
S. anginosus
S. noxia
T. socranskii
4,2
5,6
Actinos
Morado
Am arillo
Verde
PB m edia de
toda la boca (m m )
< 2,90
2,91-3,96
Naranja
> 3,96
Rojo
Otros
Fig. 29. Perfiles m icrobianos de los recuentos m edios ( 10 5 )

de 40 taxones m icrobianos en las m uestras de placa subgingival obtenidas de los 592 individuos con periodontitis
crnica de la figura 28. Los individuos se dividieron en subconjuntos de acuerdo con la profundidad basal m edia de
la bolsa periodontal en toda la boca a los valores cuartiles
de 2,90 y 3,86 m m . Los perfiles representan los recuentos
m edios derivados de prom ediar los recuentos de cada es-
pecie en un individuo y luego interindividualm ente para

los 3 grupos clnicos. Las especies estn ordenadas y codificadas por colores segn los com plejos m icrobianos descritos en Socransky y cols. (156). Se determ in la significacin estadstica de las diferencias para cada especie entre
los grupos utilizando la prueba de Mann-Whitney, y se la
ajust para com paraciones m ltiples (157); *p < 0,05; **p <
0,01; ***p < 0,001. PB: profundidad de la bolsa.
rea de superficie epitelial a la que pueden adherir las especies del com plejo rojo tales com o P. gingivalis y T. denticola (72). La zona de bacterias poco adherentes, que parece contener grandes proporciones de especies del
com plejo naranja (113), est aum entada en las bolsas profundas con respecto a las bolsas superficiales. Adem s, los
factores locales pueden lim itar el crecim iento de las especies asociadas al diente y, en cam bio, favorecer el crecim iento de bacterias poco adherentes asociadas al epitelio. Por ejem plo, la disponibilidad de hidratos de carbono
ferm entables puede lim itar el crecim iento de las bacterias
sacarolticas en la biopelcula del diente, m ientras que una
relativa abundancia de fuentes de energa no procedente
de los hidratos de carbono, tales com o hidrgeno, form iato, productos m etablicos de desecho, cidos y productos de degradacin de las protenas, puede m antener
m ejor el crecim iento de algunas de las especies asacarolticas en los com plejos naranja y rojo.
La presen cia de in flam acin gin gival en un a zon a tam bin afecta n otablem en te a la com posicin de la m icrobiota en esa zon a (fig. 31). Los m iem bros de los com plejos rojo y n aran ja se en cuen tran en can tidades m uy
elevadas en las reas que san gran duran te el son daje periodon tal, lo que se con sidera un in dicador cln ico de in flam acin periodon tal. Las especies que estn elevadas
en las zon as in flam adas pueden haberse ben eficiado de
la in flam acin , en parte porque estaban m s cerca de la
fuen te aum en tada de lquido crevicular gin gival (ocupaban el prim er lugar en la ln ea de alim en tacin ) y en parte
porque este lquido puede estar en riquecido por los productos derivados de la degradacin tisular, los que pueden favorecer el crecim ien to de m uchas de las especies
que requieren proten as o pptidos para su desarrollo (p.
ej., P. gin givalis y T. den ticola) o que pueden utilizar los
productos m etablicos derivados de otras especies para
su crecim ien to (p. ej., las especies de Cam pylobacter).
170
Comparacin entre la microbiota de las zonas

enfermas y sanas de los individuos
con periodontitis y las zonas sanas
de las personas con un periodoncio sano
La figura 32 com p ara los p erfiles m icrobian os subgin givales basales m edios de las zon as p eriodon tales
12
Recuentos 10 5
Tf
Pg
Pm ei
Pn
Pi
Fnv
An2
3
An1
Ag
Ai
Cgr
Cg
Vp
Ao
Si
Sg
So Ss
Sm
Ec
Co
Aa
>8
<3
Profundidad de la bolsa (mm )
Actinos
Morado
Am arillo
Fnn
En
CrCs
Td
Fp Pm
Fnp
Csp
Lb
Es Gm
Sc
Rojo
Nm
Sn Ts
Pa
Sa
Otros
Naranja
Verde
Fig. 30. Recuentos m edios ( 10 5 ) de 40 especies en las m uestras de placa subgingival de bolsas periodontales de diferentes profundidades en individuos con periodontitis. Estas m uestras se obtuvieron de 14.577 zonas en 588 individuos con periodontitis crnica en el m om ento inicial,
y fueron analizadas para evaluar el contenido de 40 especies subgingivales utilizando hibridacin de ADN-ADN en
dam ero. Se obtuvo la m edia de los recuentos de cada especie en cada individuo en las categoras de profundidad
de la bolsa de < 3, 3, 4, 5, 6, 7, 8 y > 8 m m , y luego se obtuvo la m edia interindividual para cada categora. Las especies fueron agrupadas de acuerdo con el orden de com plejos m icrobianos presentado en la figura 28. La altura de
cada representa los recuentos m edios para cada especie
en cada categora de profundidad de la bolsa. nicam ente
las especies de los com plejos rojo y naranja estuvieron significativam ente relacionadas con la profundidad de la
bolsa, tras realizar el ajuste para com paraciones m ltiples.
que cualquier p eriodon cista estara de acuerdo en con siderar p atolgicas, p or ejem p lo, las reas con p rofun didades de la bolsa 6 m m que san graron duran te el
son daje p eriodon tal, con la m icrobiota de las zon as con
p eriodon cio san o en los m ism os in dividuos, que p resen taban un a p rofun didad de la bolsa < 4 m m y n o san graron duran te el son daje. Las diferen cias m s sign ificativas se en con traron en los recuen tos subgin givales
m edios de m uchas esp ecies, p articularm en te de las esp ecies de los com p lejos rojo y n aran ja, en tre las reas
san as y las afectadas en p erson as con p eriodon titis avan zada. Adem s de los p erfiles de los in dividuos con p eriodon titis, se obtuvo el p erfil m icrobian o m edio p roceden te de las m uestras obten idas en las zon as
subgin givales de p erodon cio san o de volun tarios san os.
Existieron n otables diferen cias, virtualm en te p ara todas
las esp ecies exam in adas, en tre las zon as de p eriodon cio san o de los volun tarios san os y las zon as de p eriodon cio san o de los in dividuos con p eriodon titis crn ica.
Las diferen cias fueron determ in adas, m ayoritariam en te, p or las esp ecies de los com p lejos n aran ja y rojo.
Estos datos coin ciden con los descubrim ien tos de Riviere y cols. (141), que dem ostraron un a m ayor fre-
cuen cia de deteccin de esp iroquetas y P. gin givalis en

las zon as san as de los p acien tes con p eriodon titis que
en las zon as san as de los volun tarios con p eriodon cio
san o (fig. 2).
Desde un a p ersp ectiva cln ica, estos datos sugieren
que en las zon as san as en los in dividuos con p eriodon titis p uede existir un riesgo de sufrir un a futura crisis p eriodon tal m ucho m ayor que el riesgo existen te en
las zon as san as en los in dividuos con un p eriodon cio
san o. Desde un p un to de vista ecolgico, las diferen cias
que existen en tre los dos con jun tos de zon as san as son
difciles de exp licar. Los factores locales con siderados
im p ortan tes p rofun didad de son daje y san grado en el
son daje fueron esen cialm en te los m ism os en los dos
grup os. La p regun ta en ton ces es: p or qu, p ese a las
sim ilitudes del hbitat local, las m icrobiotas eran tan
diferen tes en los in dividuos con p eriodon cio san o y en
los in dividuos con p eriodon titis? La resp uesta exacta es
que an n o se sabe. Se p odra sup on er que las m ayores can tidades de m icroorgan ism os que residen en las
bolsas p eriodon tales m s p rofun das p odran sem brar
las zon as adyacen tes de m an era que, en cuestin de
tiem p o, se em p ezara a p roducir un a len ta colon izacin
171
Recuentos 10 5 0,0
1,3
A. gerencseriae
A. israelii
A. naeslund ii 1
A. naeslund ii 2
A. od ontolyticus
V. parvula
S. gord onii
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E. corrod ens
C. gracilis
C. rectus
S. show ae
E. nod atum
F. p eriod onticum
P. m icros
P. interm ed ia
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingivalis
T. d enticola
E. saburreum
G. m orbillorum
L. buccalis
N. m ucosa
P. acnes
P. m elaninogenica
S. anginosus
S. m utans
S. noxia
T. socranskii
2,6
4,0
5,3
Actinom yces
Morado
Am arillo
Verde
Naranja
Rojo
Otros
SAS negativo
SAS positivo
Fig. 31. Recuento s m edio s ( 10 5 ) de 40 especies en m uestras de placa subgingival o btenidas de zo nas que sangraro n o no sangraro n durante el so ndaje en individuo s
co n perio do ntitis. Las m uestras de placa subgingival se
reco giero n de 6.920 zo nas que sangraro n durante el so ndaje de pro fundidad y 7.656 zo nas sin sangrado en el so ndaje en 588 individuo s co n perio do ntitis cr nica al co m ienzo del estudio, y se analizaro n para evaluar el
co ntenido de 40 especies subgingivales utilizando hibridaci n de ADN-ADN en dam ero. Se saco la m edia de lo s
recuento s de cada especie en cada individuo en las zo nas que sangraro n y en las que no sangraro n durante el
so ndaje de pro fundidad, y luego se o btuvo la m edia interindividual para cada catego ra. Las especies se o rdenaro n segn lo s co m plejo s m icro biano s descrito s en So cransky y co ls. (156). Se determ in la significaci n
estadstica de las diferencias entre lo s grupo s utilizando
la prueba de Mann-Whitney, y se la ajust para co m paracio nes m ltiples (157); *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001.
SAS: sangrado al so ndaje.
de estas zon as. Otra p osibilidad es que la p erson a ya tuviera colon izadas varias zon as p eriodon tales m s sup erficiales an tes de que la en ferm edad surgiera en algun as de las zon as. Cualquiera que fuera la causa de la
diferen cia en las con cen tracion es en las zon as de p eriodon cio san o, la p resen cia de m ayores con cen tracion es de m icroorgan ism os p eriodon tales p atgen os en
las zon as san as de los in dividuos con p eriodon titis con stituye un im p ortan te asp ecto que debe ser ten ido en
cuen ta en el tratam ien to, tal com o se ha an alizado en
otro artculo (65).
Relacin entre los parmetros

del anfitrin y la composicin
de la biopelcula subgingival
172
Ya se han m encionado los factores locales que afectan

a la com posicin de la m icrobiota bucal: la naturaleza de
la superficie que se coloniza y el estado clnico del anfitrin Reviste im portancia clnica que la placa supragingival y subgingival asociada con una zona periodontal
sana es bastante diferente de la placa asociada con tejidos gingivales inflam ados, sangrado al sondaje y bolsas
Recuentos 10 5
0,0
3,2
A. gerencseriae
A. israelii
A. naeslund ii 1
A. naeslund ii 2
A. od ontolyticus
V. parvula
S. gord onii
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E. corrod ens
C. gracilis
C. rectus
S. show ae
E. nod atum
F. period onticum
P. m icros
P. interm ed ia
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingivalis
T. d enticola
E. saburreum
G. m orbillorum
L. buccalis
N. m ucosa
P. acnes
P. m elaninogenica
S. anginosus
S. noxia
T. socranskii
6,5
Actinom yces
Morado
Am arillo
Verde
Sano
PB < 4 m m , SAS
PB 6 m m , SAS +
Naranja
Rojo
Otros
Todas las esp ecies se diferen ciaban sign ificativam en te en tre gru p os in clu so
desp u s del aju ste seg n com p aracion es m ltip les
Fig. 32. Recuentos m edios ( 10 5 ) de 40 especies subgingivales de las zonas y en 209 individuos con periodontitis
avanzada y de las zonas en 78 individuos periodontalm ente sanos. Las zonas de periodoncio enferm o en los individuos con periodontitis presentaron unas profundidades bsales de la bolsa periodontal 6 m m y sangraron en
el sondaje, m ientras que en las zonas las profundidades
basales fueron < 4 m m y no sangraron durante el sondaje
tanto en el grupo de periodontitis com o en el grupo sano.
Las m uestras de placa subgingival se recogieron al com ienzo del estudio (basales) y se analizaron para evaluar
el contenido de 40 especies subgingivales utilizando hi-
bridacin de ADN-ADN en dam ero. Se obtuvo la m edia de

los recuentos de cada especie en cada individuo en una categora de zona dada y, luego, interindividualm ente para
cada categora. Las especies estn ordenadas segn los
com plejos m icrobianos descritos en Socransky y cols. (156).
La tonalidad m s oscura de cada color representa a los individuos con periodontitis, m ientras que la tonalidad m s
suave representa a los individuos sanos. Todas las especies
difirieron de form a significativa entre los grupos utilizando
la prueba de Kruskal-Wallis, incluso tras ajustar para com paraciones m ltiples (157). PB: profundidad de la bolsa;
SAS: sangrado al sondaje.
periodontales profundas. Asim ism o, existen factores nicos para cada anfitrin que afectan considerablem ente a
la com posicin de la placa subgingival. No se analizarn
ahora todos los factores del anfitrin que pueden influir
sobre la com posicin de la placa subgingival, pero a continuacin se describirn los efectos de ciertos factores
clave, incluidos los antecedentes genticos, la obesidad y
ciertos hbitos com o el tabaquism o sobre la com posicin de la placa subgingival. Adem s, se sugerir que la
naturaleza de la m icrobiota subgingival puede estar influida por la localizacin geogrfica del individuo.
Segn se ha m en cion ado al an alizar los prin cipios de
la ecologa m icrobian a, el an fitrin puede m odificar la
con cen tracin de especies que colon izan y, posiblem en te,
m odular el desen lace cln ico de la en ferm edad, m edian te
un m ecan ism o con ocido com o retroalim en tacin am bien tal. En la figura 33 se ilustra un ejem plo de este m ecan ism o. Se obtuvieron m uestras de suero y de placa subgin gival de 48 pacien tes con periodon titis crn ica. Se
determ in aron las con cen tracion es sricas de an ticuerpos an ti-P. gin givalis utilizan do el m todo ELISA, y la con cen tracin de este m icroorgan ism o en la placa subgin gival, m edian te las tcn icas de cultivo. Los datos in dicaron
un a sign ificativa relacin in versa en tre las con cen tracion es de an ticuerpos an ti-P. gin givalis y las con cen tracion es de esta especie, por ejem plo, altos valores de an ticuerpos an ti-P. gin givalis se asociaron a bajos valores de
este m icroorgan ism o en la m icrobiota subgin gival. Dada
la im portan te relacin de estas especies con la in ten sidad de la en ferm edad periodon tal, la dism in ucin de sus
con cen tracion es por retroalim en tacin am bien tal debera ayudar a lim itar el avan ce de la en ferm edad y a aum en tar las estrategias teraputicas.
Tabaquismo
Nu m erosos estu dios en la bibliografa h an exam in ado la relacin qu e existe en tre el tabaqu ism o y los
173
UNIDADES ELISA
200
r (s) = 0,35
P < 0,05
150
100
50
10
RECUENTOS 10 5
Fig. 33. Representacin grfica de los recuentos m edios de

P. gingivalis ( 10 5 ) y concentraciones de anticuerpos sricos anti-P. gingivalis en 48 individuos con periodontitis crnica. Cada crculo representa los valores para un solo individuo. El anlisis de regresin indic una significativa
relacin negativa entre los recuentos de P. gingivalis en las
m uestras de placa subgingival y los anticuerpos sricos
frente a esta especie.
p arm etros cln icos de las en ferm edades p eriodon tales. Estos estu dios h an in dicado u n m ayor grado de en ferm edad p eriodon tal en trm in os de m ayor p rdida
de h u eso alveolar (11, 56, 114, 123), bolsas p eriodon tales m s p rofu n das (10, 11, 59, 126) y m ayor p rdida
del n ivel de in sercin (3, 6, 7, 12, 15, 34, 42, 57, 58, 96,
97, 148) en las p erson as fu m adoras con resp ecto a aqu ellas p erson as qu e fu m aron en el p asado o qu e n u n ca
h an fu m ado. Los m ism os estu dios tam bin in dicaron
qu e los fu m adores de tabaco p resen tan u n m en or san grado en el son daje, en com p aracin con los n o fu m adores. Si bien m ltip les estu dios dem u estran de m odo
con cordan te fu ertes relacion es en tre los datos cln icos
p eriodon tales y el tabaqu ism o, el efecto del con su m o
de tabaco sobre la com p osicin de la m icrobiota su bgin gival es m en os claro. Algu n os estu dios su gieren qu e
fu m ar tabaco tien e u n escaso im p acto sobre la com p osicin de la p laca su bgin gival. Preber y cols. (127),
en u n estu di qu e in clu y 142 p acien tes con p eriodon titis del adu lto, m ostraron qu e los recu en tos de A.
actin om ycetem com itan s, P. gin givalis y P. in term edia n o
fu eron sign ificativam en te diferen tes en tre fu m adores y
n o fu m adores, sobre la base de u n a sola m u estra de
p laca p or in dividu o obten ida de u n a zon a con u n a p rofu n didad de la bolsa 6 m m . Stolten berg y cols. (162)
evalu aron och o m u estras de p laca su bgin gival recogidas de u n sextan te p osterior elegido de form a aleatoria en cada u n o de los 615 adu ltos p articip an tes en el
estu dio. Utilizan do tcn icas de in m u n oan lisis, n o se
en con traron diferen cias sign ificativas en tre fu m adores
174
y n o fu m adores en la in ciden cia de las esp ecies de

p ru eba: A. actin om ycetem com itan s, P. gin givalis, P. in term edia, E. corroden s y F. n u cleatu m . En u n gru p o de
25 jven es adu ltos con gin givitis, Lie y cols. (85) n o en con traron n in gu n a diferen cia en tre fu m adores y n o fu m adores en los recu en tos de n u eve esp ecies su bgin givales o gru p os en u n con ju n to de m u estras de p laca
su p ragin gival y su bgin gival, con la excep cin de recu en tos m s elevados de esp ecies de Streptococcu s en
los n o fu m adores. Ren vert y cols. (137) evalu aron el
efecto de la terap ia p eriodon tal sobre la m icrobiota su bgin gival en in dividu os fu m adores y n o fu m adores y su girieron qu e el cam bio m icrobian o p ostratam ien to
coin cida m s bien con los cam bios cln icos qu e con la
in flu en cia del tabaco.
Otros estudios h an en con trado diferen cias en tre la
m icrobiota subgin gival de las p erson as fum adoras y la
de las n o fum adoras. Eggert y cols. (40), m edian te in m un oan lisis, dem ostraron que P. gin givalis, P. in term edia y A. actin om ycetem com itan s eran en con tradas
con m ayor frecuen cia en las zon as p eriodon tales sup erficiales ( 5 m m ) en fum adores que en zon as sim ilares en n o fum adores. Kam m a y cols. (68) utilizaron las
tcn icas de cultivo p ara exam in ar dos m uestras de p laca
obten idas de cada un o de los 60 in dividuos con p eriodon titis de in icio p recoz. Los autores en con traron que
las p rop orcion es y/ o la in ciden cia de P. m icros, Cam pylobacter con cisu s, T. forsythia, C. rectu s, Cam pylobacter
gracilis, Selen om on as spu tigen a y P. gin givalis se m ostraban sign ificativam en te elevadas en los fum adores,
m ien tras que las esp ecies Streptococcu s in term ediu s, A.
n aeslu n dii, Actin om yces israelii y Eu bacteriu m len tu m
fueron sign ificativam en te m s altas en los n o fum adores. Zam bon y cols. (187) en con traron que los fum adores ten an con cen tracion es m uch o m s altas de T. forsythia y m ayor riesgo de con traer la in feccin que los n o
fum adores. Tam bin in form aron que los fum adores ten an un a p robabilidad 2,3 veces sup erior de albergar
este agen te p atgen o p eriodon tal con resp ecto a los ex
fum adores o n o fum adores, tras ajustar p ara la gravedad de la en ferm edad. Um eda y cols. (173) en con traron que las p erson as que h aban fum ado en el p asado
ten an m en or riesgo de albergar A. actin om ycetem com itan s en la saliva (odds ratio, cocien te de p osibilidades [CP] = 0,23), m ien tras que los fum adores activos
p resen taban un m ayor riesgo de albergar subgin givalm en te T. den ticola (CP = 4,61), aun que el riesgo de colon izacin p or T. forsyth ia, P. in term edia, P. gin givalis y
P. n igrescen s n o difiri en tre los grup os de fum adores.
Los datos de n uestro estudio, que exam in aron la m icrobiota subgin gival m edian te hibridacin de ADNADN en dam ero, en 124 in dividuos n o fum adores que
n un ca haban fum ado, 98 ex fum adores y 50 fum adores activos, in dicaron que n o h ubo n in gun a diferen cia
sign ificativa en las con cen tracion es y p rop orcion es de
las 29 esp ecies de p rueba en tre los distin tos grup os de
fum adores (64). No obstan te, la in ciden cia (% de zon as
colon izadas) de algun as esp ecies del com p lejo n aran ja
E. n odatu m , F. n u cleatu m ss. Vin cen tii, P. in term edia, P.

m icros y P. n igrescen s as com o las tres esp ecies del
com p lejo rojo, P. gin givalis, T. forsythia y T. den ticola, fue
sign ificativam en te m ayor en los fum adores, con resp ecto a los ex fum adores o a aquellos que n un ca fum aron (fig. 34). La diferen cia en la in ciden cia de las esp ecies subgin givales en tre los grup os de fum adores fue
p articularm en te acusada en las bolsas 4 m m , sin en con trar n in gun a diferen cia sign ificativa en las bolsas
> 4 m m . Esta colon izacin m s am p lia p or p arte de
agen tes p atgen os p eriodon tales en fum adores activos,
en com p aracin con los n o fum adores, esp ecialm en te
en las zon as p oco p rofun das, p uede exp licar en p arte
la dificultad p ara tratar con xito las in feccion es p eriodon tales en estos in dividuos.
Obesidad
En la ltim a dcada se ha producido un gran aum ento
en la preocupacin en la prensa popular y la bibliografa
m dica por la creciente proporcin de personas con sobrepeso y obesidad en las poblaciones del prim er m undo.
La causa de esta preocupacin es que el riesgo de padecer m uchas enferm edades im portantes, com o diabetes,
cardiopatas coronarias, cncer y osteoartritis es m ayor
% de zonas
0
colonizadas
S. noxia
A. naeslund ii 2
A. od ontolyticus
V. parvula
S. gord onii
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
A. actinom ycetem com
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena
E. corrod ens
C. gracilis
C. rectus
C. show ae
E. nod atum
F. nuc ss nucleatum
F. nuc ss polym orphum
F. nuc ss vinventii
D. p eriod onticum
P. interm ed ia
P. m icros
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingivalis
T. d enticola
Tod as las zonas

25
50
75
en las personas con sobrepeso u obesas (16, 19, 38, 71,

135, 136, 176). En efecto, se ha determ inado que la obesidad pronto se convertir en la prim era causa de enferm edad prevenible y m uerte, reem plazando al tabaquism o
com o la principal causa de enferm edad m odificable (27).
Los datos proceden tes de diversos estudios tran sversales han sugerido que puede existir un a relacin en tre
el sobrepeso o la obesidad y la periodon titis. Los datos
del estudio NHANES III in dicaron que exista un a relacin en tre un n dice de m asa corporal (IMC) aum en tado
y el alcan ce de prdida de in sercin periodon tal (181).
Un segun do exam en del estudio NHANES III apoy la
existen cia de un a relacin en tre el IMC, y tam bin la obesidad abdom in al, y el estado periodon tal e in dic que
esta relacin era m ayor en in dividuos jven es (con edades com pren didas en tre los 18 y 34 a os) y m en or en la
edad m adura y en los an cian os (4). Un IMC aum en tado
tam bin fue asociado con un m ayor riesgo de sufrir periodon titis en in dividuos japon eses; particularm en te
aquellos con un alto n dice cin tura-cadera (144).
En estudios dirigidos por The Forsyth In stitute, actualm en te en curso, se m idieron la altura y el peso en
415 in dividuos sistm icam en te san os con periodon titis
crn ica (n = 329) o con el periodon cio san o (n = 86). Se
m idieron los parm etros cln icos periodon tales, en seis
PB > 4 m m
100 0
25
50
PB < = 4 m m
75
100 0
25
50
75
100
Otros
Otros
Otros
Morado
Morado
Morado
Am arillo
Am arillo
Am arillo
Verde
Verde
Verde
Estado de
tabaquism o
nunca
fum
ex
fum ador
fum ador
activo
Naranja
Naranja
Naranja
Rojo
Rojo
Rojo
Fig. 34. Perfiles microbianos de la incidencia media de 29 taxones microbianos en las muestras de placa subgingival obtenidas en 124 individuos no fumadores que nunca haban
fumado, 98 ex fumadores y 50 fumadores activos. Los perfiles representan una incidencia media (% de zonas colonizadas) obtenida promediando la incidencia de cada especie interindividualmente en cada grupo de fumadores. El panel de
la izquierda representa todas las zonas; el panel central, las
zonas con una profundidad de la bolsa > 4 mm, y el panel de

la derecha, las zonas con una profundidad de la bolsa 4 mm.
Se busc la significacin estadstica de la diferencia entre los
grupos empleando ANCOVA, ajustando para la profundidad
de la bolsa y el nivel de insercin; *p < 0,05; **p < 0,01; ***p <
0,001. Las especies se ordenaron y agruparon segn los complejos descritos por Socransky y cols. (156). Datos adaptados
de Haffajee y cols. (64). PB: profundidad de la bolsa.
175
zon as por pieza den taria. Las m uestras de placa subgin gival fueron recogidas del aspecto m esial de cada pieza,
y se las an aliz por separado para evaluar el con ten ido
de 40 especies bacterian as, utilizan do hibridacin de
ADN-ADN en dam ero. Se determ in aron los valores y el
porcen taje de los recuen tos por la son da de ADN de cada
especie para cada sitio, y se obtuvo la m edia de todas las
zon as en cada in dividuo. Se calcul el IMC para cada in dividuo, y los in dividuos del estudio fueron clasificados
en tres subcon jun tos: peso n orm al (IMC < 25, n = 168),
sobrepeso (IMC 25-30, n = 136) y obesidad (IMC 30,
n = 111). La sign ificacin estadstica de las diferen cias en
los parm etros cln icos y m icrobian os en tre los grupos
fue an alizada m edian te ANCOVA, ajustan do para la edad
y estado de fum ador. Los resultados in dicaron que el porcen taje de los in dividuos con peso n orm al, con sobrepeso y obesidad fue del 63 %, 24 % y 13 % en los in dividuos periodon talm en te san os y del 30 %, 35 % y 35 % en
los in dividuos con periodon titis, respectivam en te (fig.
35). El porcen taje de los in dividuos con obesidad fue sign ificativam en te m ayor en aquellos con periodon titis (p
< 0,001), y el porcen taje de in dividuos con peso n orm al
fue sign ificativam en te m ayor en los in dividuos san os (p
< 0,001). Los in dividuos con IMC elevados exhibieron un
porcen taje sign ificativam en te m s alto de zon as con placa
bacterian a y san grado duran te el son daje, as com o un a
profun didad m edia de la bolsa periodon tal y un n ivel
m edio de in sercin sign ificativam en te m ayores, en com paracin con los in dividuos n o obesos (fig. 36). La obesidad tam bin se asoci con recuen tos y proporcion es
m ayores de ciertos agen tes patgen os periodon tales,
com o T. forsythia (fig. 37). El aum en to en la proporcin
de T. forsythia fue especialm en te acusado en los in dividuos extrem adam en te obesos, con un IMC > 35. Estos
datos sugieren que los in dividuos obesos eran m s pro-
100
13
Obesidad
P < 0,001
% d e ind ivid uos
35
75
24
Sobrepeso
35
50
63
25
Norm al
P < 0,001
30
Period oncio sano

N = 86
Period ontitis
N = 329
Fig. 35. Grfico de barras apilada que indica el porcentaje

de individuos con periodoncio sano o con periodontitis que presentaron un ndice de m asa corporal (IMC)
< 25 (norm al), 25-30 (sobrepeso) o > 30 (obesidad). La asociacin entre la categora de IMC y el estado periodontal
se com prob utilizando el anlisis de la 2 .
176
pen sos a m an ifestar periodon titis, ten an un a m ayor profun didad m edia de la bolsa, m ayor porcen taje de zon as
con placa bacterian a y proporcion es m s elevadas de T.
forsythia que los in dividuos con sobrepeso o peso n orm al.
Efecto de los antecedentes genticos sobre

la composicin de la placa subgingival
En 1997, Korn m an y cols. (79) p rop orcion aron datos
que sugeran que los p olim orfism os en el grup o de gen es de la in terleucin a 1 (IL-1) p arecan relacion ados con
el estado de en ferm edad p eriodon tal en n o fum adores.
Los in dividuos que exhibieron alelo 2 o p olim orfism os
en los gen es de la IL-1 y la IL-1 eran m ucho m s p rop en sos a m ostrar p eriodon titis grave que los in dividuos
que n o p resen taban estos p olim orfism os. Estos gen es
estn relacion ados con la sobreexp resin de las citocin as asociadas con la in flam acin , la IL-1 y la IL-1. Se
p lan te el in terrogan te de si los in dividuos que exhiban diferen tes p olim orfism os de IL-1 p resen taran diferen cias en la com p osicin de la biop elcula subgin gival. Socran sky y cols. (158) exam in aron el efecto de los
p olim orfism os de la IL-1 sobre los p arm etros cln icos
y m icrobiolgicos de la p eriodon titis. Se realiz el exam en cln ico de seis zon as p or dien te, y se an alizaron las
m uestras de p laca subgin gival tom adas de cada dien te
p ara evaluar el con ten ido de 40 esp ecies bacterian as,
m edian te hibridacin de ADN-ADN en dam ero. Adem s, se tom aron m uestras de san gre p or p un cin en la
yem a del dedo de cada in dividuo, y el ADN extrado fue
utilizado p ara el gen otip ado de los p olim orfism os de la
IL-1 (79). Estos autores en con traron que la p rin cip al diferen cia en la m icrobiota subgin gival en tre un in dividuo con un gen otip o p ositivo y un in dividuo con un gen otip o n egativo estaba en las zon as con un a p rofun didad
de la bolsa > 6 m m . Doce de 29 esp ecies estaban sign ificativam en te elevadas en las bolsas > 6 m m en los in dividuos con gen otip o p ositivo con resp ecto a los de gen otip o n egativo (fig. 38). En tre estas esp ecies se en con traron los tres m iem bros del com p lejo rojo: P. gin givalis, T. forsythia y T. Den ticola, siete m iem bros del
com p lejo n aran ja C. gracilis, E. n odatu m , F. n u cleatu m
ss. n u cleatu m , F. n u cleatu m ss. polym orphu m , F. n u cleatu m ss. vin cen tii, F. periodon ticu m y Streptococcu s con stellatu s, as com o S. gordon ii y S. in term ediu s. En cam bio, n o hubo n in gun a diferen cia sign ificativa en la
m icrobiota subgin gival en tre los in dividuos con gen otip o p ositivo y los in dividuos con gen otip o n egativo en
las zon as con p rofun didades de las bolsas 6 m m . Estos datos sugieren que el aum en to de las con cen tracion es, p rin cip alm en te de las esp ecies de los com p lejos n aran ja y rojo, en las zon as p rofun das de los in dividuos con gen otip o p ositivo p uede ser debido al
aum en to de la p roduccin de citocin as in flam atorias,
que ocasion an un aum en to de la resp uesta in flam atoria con tra la exp osicin m icrobian a. Esta m ayor resp uesta in flam atoria llevara a un aum en to de la p ro-
Placa
IMC
P < 0,001
P < 0,05
36
80
%
60
27
40
18
20
Profund id ad d e la bolsa
3,2
mm
P < 0,01
Norm al
(n = 168)
Nivel d e insercin
3,6
mm
2,9
3,2
2,6
2,8
2,3
2,4
2,0
2,0
P < 0,001
Sobrepeso
(n = 136)
Obesidad
(n = 111)
Fig. 36. Cuadros de barras de los parm etros clnicos periodontales en individuos que presentaban un ndice de
m asa corporal (IMC) < 25 (norm al), 25-30 (sobrepeso) o >
30 (obesidad). Las barras representan los valores para cada
parm etro clnico. La m edia fue obtenida de form a indivi-
dual y, luego, interindividualm ente en cada grupo de IMC

por separado. Las patillas representan el error estndar de
la m edia. La significacin estadstica de las diferencias entre los grupos de IMC para cada parm etro se obtuvo utilizando la prueba de Kruskal-Wallis.
duccin de lquido crevicular gin gival, el fluido que ba a

la biop elcula subgin gival y que p rop orcion a n utrien tes
a las bacterias de esta biop elcula. La p roxim idad de las
esp ecies del com p lejo n aran ja y, p articularm en te, del
com p lejo rojo, al revestim ien to ep itelial de la bolsa p eriodon tal p odra asegurar que estas esp ecies reciban los
m xim os ben eficios de la m ayor can tidad de lquido
crevicular gin gival. Los valores aum en tados de estos taxon es afectaran a los tejidos locales, ocasion an do un
aum en to de la in flam acin y de la p rofun didad de la
bolsa, lo que a su vez favorecera el crecim ien to de estas esp ecies. En los in dividuos con gen otip os p ositivos,
la in teraccin en tre el an fitrin y las esp ecies subgin givales colon izadas estaba alterada, favorecien do el aum en to de la in flam acin gin gival y de la colon izacin
subgin gival p or agen tes p atgen os p eriodon tales.
tin tas en estas dos poblacion es. Por lo gen eral se ha supuesto, sin em bargo, que los in dividuos con en ferm edades cln icas sim ilares, por ejem plo, periodon titis crn ica,
exhibiran , por trm in o m edio, perfiles m icrobian os subgin givales sim ilares, in depen dien tem en te de la localizacin geogrfica en la que residan estas person as. Diversos estudios han in dicado que las especies subgin givales
exam in adas hasta la fecha frecuen tem en te se en cuen tran en m uchas poblacion es diferen tes por todo el m un do
(17, 36, 119, 145, 186). Sin em bargo, los estudios que han
com parado directam en te las m icrobiotas de los in dividuos que residen en localizacion es geogrficas distin tas
sugieren que pueden existir diferen cias en cuan to al alcan ce, las con cen tracion es y el predom in io de especies
subgin givales (119, 145, 186).
Un estudio recien te (60) ha exam in ado la com posicin de la m icrobiota subgin gival en los in dividuos con
periodon titis crn ica proceden tes de cuatro localizacion es geogrficas distin tas. Se som eti a con troles cln icos a 58 in dividuos de Brasil, 26 de Chile, 101 de Suecia
y 115 de Boston , Estados Un idos, y se recogieron m uestras de placa subgin gival de todos ellos. Las m uestras
fueron an alizadas in dividualm en te para evaluar el con ten ido de 39 especies bacterian as, m edian te hibridacin
de ADN-ADN en dam ero, y se calcul la proporcin m e-
Efecto de la localizacin geogrfica sobre

la composicin de la placa subgingival
En las seccion es previas, se han descrito las diferen cias sign ificativas en la com posicin de la placa bacterian a subgin gival en tre los in dividuos con periodon cio
san o y con periodon titis. Estas diferen cias n o fueron sorpren den tes, dadas las m an ifestacion es cln icas tan dis-
177
Recuento de la sonda de ADN en %
Recuentos 10 5
3,4
p < 0,01
10,7
2,5
8,1
1,7
5,4
0,8
2,7
133
0,0
107
63
p < 0,01
19
< 25 25-29,9 30-35
> 35
0,0
< 25
25-29,9 30-35 > 35
ndice de m asa corporal

Fig. 37. Media de los recuentos y proporciones de T. forsythia
en individuos con un ndice de masa corporal (IMC) < 25 (normal), 25-30 (sobrepeso), 30-35 (obesidad) o > 35 (obesidad extrema). Los recuentos de T. forsythia se determinaron utilizando hibridacin de ADN-ADN en damero.Se obtuvo la media
dentro de cada individuo y, luego, entre todos los individuos
correspondientes a cada grupo de IMC por separado. Las ba-
PB < 4 m m
Recuentos 10 5
B. fragilis
B. ureolyticus
C. curvus
C. sputorum ss bub
C. sput ss sput
C. sputigena
P. end od ontalis
S. noxia
W. succinogenes
A. naeslund ii 2
A. od ontolyticus
V. parvula
S. gord onii
Stretococcu sp.
S. interm ed ius
S. m itis
S. oralis
S. sanguis
A. actino. a
A. actino b
C. concisus
C. gingivalis
C. ochracea
C. sputigena 4
E. corrod ens
C. gracilis
C. rectus
C. show ae
E. nod atum
F. nuc. ss nucleatum
F. nuc. ss polym .
F. nuc. ss vincentii
F. period onticum
P. m icros
P. interm ed ia
P. nigrescens
S. constellatus
T. forsythia
P. gingivalis
T. d enticola
PB 4-6 m m
22
44 0
22
PB > 6 m m
44
22
44
Otros
Actinom yces
Morado
Am arillo
Verde
Naranja
* P < 0,05
** P < 0,01
*** P < 0,001
Prueba de
Mann-Whitney
Rojo
PST negativo N = 7
Fig. 38. Perfiles m icrobianos m edios para los individuos

con periodontitis crnica que dieron PTS negativo (n = 79)
o positivo (n = 29). Los recuentos m edios se obtuvieron
prom ediando los recuentos de cada especie en el m ism o
178
rras representan los valores medios y las patillas representan

el error estndar de la media (ESM). Los nmeros en el conjunto de barras del lado izquierdo indican el nmero de individuos examinados en cada grupo. La significacin estadstica de las diferencias en los recuentos y proporciones de T.
forsythia se determin utilizando la prueba de Kruskal-Wallis, y los valores p se ajustaron para 40 comparaciones (157).
PST positivo N = 29
individuo y, luego, de form a interindividual en los dos grupos clnicos. La significacin estadstica de las diferencias
para cada especie se determ in utilizando la prueba de
Mann-Whitney. PB: profundidad de la bolsa
dia de cada especie en cada in dividuo. Los datos in dicaron acusadas diferen cias en tre las cuatro poblacion es
en cuan to a las proporcion es de las especies de prueba
(fig. 39): 12 de 39 especies de prueba diferan de m odo
sign ificativo en tre los grupos. Los in dividuos brasile os
exhibieron las proporcion es m edias m s elevadas de A.
n aeslu n dii gen oespecie 1, diversos estreptococos, com o
S. ordon ii, S. san gu is, S. in term ediu s y S. con stellatu s, as
com o E. n odatu m y T. den ticola. Se observaron las proporcion es m s elevadas de P. gin givalis y F. periodon ticu m en los in dividuos chilen os, en tan to que los suecos
m ostraron las proporcion es m edias m s elevadas de
Capn ocytophaga gin givalis, C. gracilis, P. m icros y Leptotrichia bu ccalis. De especial in ters fue la diferen cia en
las proporcion es de las especies del com plejo rojo en tre
los cuatro grupos dem ogrficos (fig. 40). No se detect
n in gun a diferen cia sign ificativa en tre los cuatro grupos
en las proporcion es de T. forsythia, aun que esta especie
fue la especie dom in an te del com plejo rojo en la po-
blacin sueca. Se observaron diferen cias sign ificativas

en tre los grupos tan to para P. gin givalis com o para T.
den ticola. Los in dividuos chilen os presen taron las proporcion es m s elevadas de P. gin givalis con respecto a
los otros grupos, y los brasile os tuvieron las proporcion es m s elevadas de T. den ticola. Debera destacarse
que n o hubo n in gun a diferen cia sign ificativa en tre los
grupos en trm in os de caractersticas cln icas, aun que
los an teceden tes raciales y tn icos de los in dividuos diferan y el porcen taje de los fum adores activos oscil
desde el 2 %, en los in dividuos brasile os, hasta el 62 %,
en los suecos. Las diferen cias en las m icrobiotas subgin givales de los in dividuos con grados de en ferm edad
com parables en las distin tas localizacion es geogrficas
podran im pactar sobre los resultados teraputicos. Es
probable que los in dividuos con distin tos perfiles m icrobian os respon dan de form a diferen te a un determ in ado tratam ien to periodon tal. Adem s, estas diferen cias
m icrobian as en tre los in dividuos pueden explicar, en
Recuento de la sonda de ADN en %

10,20
7,65
5,10
2,55
Estados Unidos
0,00
Suecia
Chile
Brasil
ii
n sk
cr a
T. so
s
a
o xi a
S. n gi n o su gen ei c
n
o
S. a el a n i n
P. m n es
c
P. a u co sa
N . m cca l i s r u m
u
L. b o r b i l l o
G. m n t i co l a
e
s
T. d gi v a l i
n
P. gi r sy t h i a t u s
T. fo n st el l a s
o
n
S. c gresce i a
i
P. n t er m ed
i
P. i ni cro s t i cu m n cen t i h u m
p
i
P. m d o n ss v l y m o r m
m
o
er i o
F. p cl ea t u m ss p cl ea t u
u
u
F. n cl ea t u m ss n
u
F. n cl ea t u
u
F. n o d a t u m
E. n o w a e
h s
C. s
e ct u
C. r a c i l i s s
r d en
C. g
o r ro a
E. c i gen
s
p ut
it a n
C. s h ra ceas
om
c
v a li em c
C. o
i n gi y c e t
C. g t i n o m
c
A. a n gu i s
S. sa a l i s
r
s
S. o i t i s
d iu
S. m t er m e
i
S. i n rd o n i
o
S. g r v u l a t i cu s
a t o ly
V. p
ii 2
d on
A. o esl u n d i 1
i
a
A. n l u n d
a es
A. n a el l i a e
i
r
A. i s ren cser
e
A. g
Fig. 39. Porcentajes medios ajustados del recuento de sonda

de ADN total de 39 especies bacterianas en las muestras de
placa subgingival basales obtenidas de 114 individuos americanos, 101 suecos, 26 chilenos y 58 brasileos con periodontitis crnica. La parte superior de cada panel representa los
porcentajes medios tras ajustar para la edad, profundidad media de la bolsa periodontal, sexo y estado de fumador. Se calcularon los porcentajes medios de cada especie promediando
las muestras procedentes de las cuatro profundidades de bolsa
ms profundas y de las tres ms superficiales de cada individuo y, luego, obteniendo la media de todos los individuos en
los cuatro pases. La significacin estadstica de las diferencias entre los grupos se logr utilizando ANCOVA, ajustando
para la edad, profundidad media de la bolsa, sexo y estado de
fumador; *p < 0,05; **p < 0,01, ***p < 0,001, tras ajustar para
comparaciones mltiples (157). Las especies se ordenaron y
agruparon segn los complejos descritos en Socransy y cols.
(156). Los datos proceden de Haffajee y cols. (60).
179
T. forsythia
Recuento
de la 0,0
sonda de
ADN en
%
6,5
P. gingivalis
13,0
0,0
NS
Brasil
6,5
T. d enticola
13,0
0,0
P < 0,001
Chile
Suecia
6,5
13,0
P < 0,001
Estados Unidos
Fig. 40. Grfico de barras de los porcentajes m edios ajustados ( ESM) del recuento de la sonda de ADN total de las
especies del com plejo rojo, T. forsythia , P. gingiva lis y
T. d enticola en las m uestras de placa subgingival basales
obtenidas de las cuatro bolsas periodontales m s profundas y las tres m s superficiales obtenidas de 58 individuos
brasileos, 26 chilenos, 101 suecos y 114 am ericanos con
periodontitis crnica. Las barras representan los porcen-
tajes m edios tras ajustar para la edad, profundidad m edia

de la bolsa periodontal, sexo y estado de fum ador. Las patillas indican el error estndar de la m edia. La significacin estadstica de las diferencias entre los grupos se logr
utilizando ANCOVA y ajustando para la edad, profundidad
m edia de la bolsa, sexo y estado de fum ador. Los valores p
se ajustaron para 40 com paraciones (157). Los datos proceden de Haffajee y cols. (60).
parte, las diferen cias en la gravedad de la en ferm edad

observadas en las distin tas region es del m un do.
bitat em pieza incluso antes del individuo (ser hum ano) y

puede abarcar desde los factores controlados por la localizacin geogrfica de la poblacin hasta los antecedentes genticos, caractersticas raciales y tnicas, costum bres
sociales, posicin socioeconm ica, hbitos alim entarios
y, de form a im portante, la naturaleza de los m icroorganism os que colonizan a otros individuos en la m ism a com unidad. Una vez que se pasa de la com unidad hum ana
al ser hum ano individual, existen factores singulares en el
anfitrin que desem pean un papel principal, entre ellos:
estructura gentica, estado de salud, dieta, procedim ientos de higiene bucodental, tabaquism o, drogodependencias y personas con las que el anfitrin interacta. Al avanzar desde el individuo hacia su cavidad bucal, surgen
factores adicionales que influyen sobre la colonizacin m icrobiana. Entre estos ltim os se encuentran: la naturaleza
de los receptores, tanto en los tejidos duros com o en los
blandos, para la adherencia inicial de las especies; la naturaleza de las especies que ya estn colonizando las superficies disponibles, la com posicin y la naturaleza del
lquido circulante principal que m antiene a estos m icroorganism os, y, una vez m s, las propias m edidas de higiene bucodental practicadas. Los datos presentados antes indican que cada uno de estos factores puede im pactar
sobre la naturaleza de los m icroorganism os colonizadores y que las especies que colonizan un rea de la boca
tienen el potencial de m overse hacia otras zonas y colonizarlas, si bien en cantidades y proporciones diferentes
y ocupando distintos nichos ecolgicos.
Comentarios conclusivos
A estas alturas el cerebro de los lectores probablem ente
se haya convertido en gelatina. La m ultiplicidad de factores que parecen im pactar sobre la naturaleza de la m icrobiota bucodental puede parecer abrum adora. Por esta
razn, hem os decidido resum ir algunos de los elem entos
clave que, segn creem os, son fundam entales para com prender la ecologa de la m icrobiota bucal y la form a en
que las infecciones bucales pueden ser controladas. El prim ero de esos elem entos no es exactam ente una noticia
de ltim a hora: la boca no es estril. Nos guste o no nos
guste, la cavidad bucal estar colonizada por m icroorganism os. Lo m ejor que podem os hacer es guiar la com posicin de la m icrobiota hacia una que est libre, de un
m odo sostenido, de sufrir los efectos de las infecciones
bucales. Para em prender este proceso, es necesario entender los factores que gobiernan la com posicin m icrobiana y la actividad biolgica, con el fin de convertir esta
m icrobiota en una que sea com patible con el anfitrin.
Hbitat
Un reconocim iento clave es que m ientras la m icrobiota
afecta a su hbitat, el hbitat afecta a la com posicin y los
procesos m etablicos de las especies colonizadoras. El h-
180
Las piezas dentarias proporcionan un hbitat nico

para la colonizacin de m icroorganism os. Un factor crtico es que los dientes (o dentaduras postizas) no son superficies que se descam an y, por lo tanto, perm iten el desarrollo de biopelculas m uy com plejas con un denso
glucocliz. La com posicin de las biopelculas sobre los
dientes est afectada por la naturaleza de la superficie
proporcionada, los otros m icroorganism os en la biopelcula y la naturaleza del lquido circulante. Los receptores
en los dientes son, con m ayor probabilidad, las protenas
salivales depositadas durante el proceso de form acin de
la pelcula, y estas protenas diferirn de una persona a
otra, segn la estructura gentica. Estas protenas seleccionan m icroorganism os con adhesinas especficas, y stos pueden adherirse, m ultiplicarse y proporcionar las especies pioneras que preparan el escenario para la
colonizacin de otras bacterias. La prim era especie puede
proporcionar puntos de adherencia (coagregacin) para
otras especies o puede proporcionar el entorno para el
crecim iento de otras especies, alterando los factores fisiom ecnicos, proporcionando nutrientes o degradando
com plejas m acrom olculas a form as que puedan ser utilizadas por otras especies. As pues, la naturaleza de las
especies que entran en el desarrollo de la biopelcula influye en gran m edida sobre la naturaleza de las otras especies que podrn habitar en la m ism a zona. Nos quedam os im presionados por la velocidad a la que se produce
esta fase de colonizacin inicial. Determ inadas especies
pueden alcanzar concentraciones m xim as en unas horas, y m uchas de las especies habrn logrado un crecim iento m xim o en 1-4 das. No obstante, esta rpida form acin es anloga a la construccin de una casa. La
estructura puede m ontarse de form a bastante rpida (en
unos das), pero transcurrirn de sem anas a m eses para
que la construccin term ine de com pletarse. La abundancia y la com posicin del lquido circulante que baa
esta rea tam bin influir en las cantidades y proporciones totales de especies en las superficies dentarias. Los
datos de los pacientes con el sndrom e de Sjgren sugieren que la dism inucin del flujo de saliva lim ita el crecim iento de especies bacterianas sobre la superficie tanto
de las piezas dentarias com o de los tejidos blandos y altera la com posicin m icrobiana. Por ltim o, la placa supragingival y las biopelculas del tejido blando albergan
especies anaerobias, incluidos los patgenos periodontales, aunque las cantidades pueden ser pequeas.
Las piezas dentarias, juntam ente con los tejidos gingivales, proporcionan un dom inio nico para la colonizacin bacteriana, el entorno subgingival. En esta rea, las
superficies, tanto de tejido duro com o de tejido blando,
estn disponibles para colonizar y proporcionan una situacin en la que pueden form arse dos tipos de biopelculas. La prim era inicialm ente sera una extensin subgingival de la biopelcula supragingival asociada al diente
y, la segunda, la biopelcula que se desarrolla en la superficie epitelial proporcionada por el surco gingival o la
pared de la bolsa periodontal. De nuevo, surgen los principales factores que determ inan la colonizacin: la natu-
raleza de las superficies y la naturaleza del lquido circulante que m antiene la colonizacin. La superficie de tejido blando ser diferente de una persona a otra, segn
los antecedentes genticos, en cuanto a la naturaleza de
los receptores proporcionados para la adherencia de las
bacterias bucales. Adem s, las especies colonizadoras
pueden alterar las superficies epiteliales y ocasionar la colonizacin de otras especies (21). Asim ism o, puede detectarse una tercera zona entre el diente y las biopelculas asociadas a los tejidos. Esta zona es m s evidente en
las bolsas periodontales m s profundas y consta de bacterias con poca adherencia, que pueden sobrevivir en las
bolsas m s profundas porque el confinam iento fsico de
tales bolsas no exige la tenaz adherencia a la superficie
que es necesaria para la supervivencia de la m ayora de
las biopelculas. El lquido circulante que nutre las biopelculas subgingivales es el lquido crevicular gingival. La
com posicin de este lquido es notablem ente diferente
de la com posicin de la saliva, y su com posicin y volum en se encuentran extraordinariam ente influidos por el
estado inflam atorio de los tejidos gingivales. Un bajo volum en de lquido crevicular gingival puede lim itar el crecim iento de las biopelculas subgingivales, m ientras que
el aum ento de su volum en con los productos de degradacin de los tejidos adyacentes puede aum entar el crecim iento bacteriano, favoreciendo el desarrollo de especies especficas, com o P. gingivalis y T. denticola, que
requieren productos m etablicos de degradacin, com o
las protenas o los pptidos.
Comunidad clmax
Un segun do con cepto clave en la estabilidad de la com un idad clm ax, es decir, la com pleja m ezcla de especies bacterian as que se produce en las biopelculas
m aduras. Fin alm en te, tras las in teraccion es de todo el
hbitat local, determ in an tes del an fitrin y m icrobiolgicos, se establece un a com un idad clm ax estable. Los
m icroorgan ism os en esta com un idad han alcan zado un
equilibrio en tre ellos y con el hbitat proporcion ado por
el an fitrin . Este equilibrio es din m ico, en cuan to a que
con tin uam en te se producen perturbacion es m en ores y
ajustes, realizados tan to por el an fitrin com o por las
especies colon izadoras. Un a vez establecida, es m uy difcil hacer gran des cam bios a esta com un idad clm ax.
Los cam bios a corto plazo en el an fitrin , com o un a in feccin de las vas respiratorias superiores, un a breve variacin en la dieta, un lapso en los procedim ien tos de
higien e bucoden tal, m odificarn de algun a m an era la
com un idad m icrobian a, pero sta regresar a su estado
de clm ax un a vez elim in ados estos factores. In cluso la
terapia periodon tal puede ten er n icam en te un efecto
m odificador tem poral sobre la com un idad clm ax, aun que los tratam ien tos que proporcion an alteracion es im portan tes a la com un idad m icrobian a o al hbitat pueden llevar a un a n ueva com un idad clm ax que, se espera,
sea ben eficiosa para el an fitrin . A m edida que se exam in a la historia de la terapia periodon tal, se hace evi-
181
den te que se han utilizado diversos procedim ien tos para

alterar la m icrobiota subgin gival, con la esperan za de
que estos procedim ien tos ben eficiaran al an fitrin . En
su m ayor parte, n o se ten a un a cabal idea acerca de los
efectos que estos procedim ien tos ten dran sobre el ecosistem a subgin gival. En los ltim os a os, cierto n m ero
de estudios, revisados por Haffajee y Socran sky (65), han
in ten tado defin ir las variacion es que se producen com o
resultado de tratam ien tos in dividuales o com bin ados.
La siguien te fase ser proporcion ar la terapia periodon tal ptim a para cada in dividuo, con el fin de desarrollar
un a com un idad clm ax estable, que proporcion e un a estabilidad periodon tal prolon gada.
Y ahora, qu?
Existe un ren ovado in ters en la com un idad biom dica acerca del estudio de las biopelculas, ya que las com un idades que con stituyen la biopelcula son respon sables de la m ayora de las en ferm edades bacterian as
in fecciosas del ser hum an o. Por ello, esta situacin represen ta un a oportun idad n ica para fusion ar las in vestigacion es in vitro, in vivo y tran slation al, aun que es
crucial que estos tres acercam ien tos sean realizados en
paralelo, con in teraccion es colaboradoras. Los autores
tem en que la com un idad cien tfica y los organ ism os que
fin an cian las in vestigacion es se queden absortos con la
m etagen m ica, la protem ica y los sistem as in vitro. Los estudios de esta en vergadura, aislados, pueden
ten er un a relevan cia escasa o n o recon ocida respecto al
ecosistem a in vivo de in ters. El reto para el futuro ser
equilibrar los acercam ien tos de las in vestigacion es in
vivo, in vitro y tran slation al, a fin de poder avan zar en
la com pren sin de los ecosistem as de las biopelculas.
Agradecimientos
Este trabajo fue fin an ciado en parte por las becas de
in vestigacin DE-10977, DE-12108, DE-12861, DE-13232
del Nation al In stitute of Den tal an d Cran eofacial Research.
Periodon tology 2000, Vol. 38, 2005, 135-187
Bibliografa
182
183
184
185
186
187

Ecologia Microbiana Periodontal

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Periodon tology 2000 (Ed Esp), Vol. 12, 2006, 135-187

Cop yrigh t Bla ck w ell M u n k sga a rd

PERIOD ONTOLOGY 2 0 0 0 (Ed Es p )

ISSN 1695- 1808

ISSN 0906- 6713

Ecologa microbial periodontal

Principios de la ecologa microbiana

Hbitat y nichos ecolgicos

dien tes duran te 28 das en volun tarios con periodon cio

nom yces. Ello con duce a un a sucesin autgen a en la que

Factores que limitan la colonizacin

Fig. 1. Hiptesis de la adicin de especies durante la sucesin

gival. A su vez, el aumento de la inflamacin ocasionara un

Ecologa m icrobial periodon tal

preven tiva es un o de los prin cipales m edios de exclusin

Diseminacin de los microorganismos

Fig. 2. Grficos de barras de la frecuencia de deteccin de

La comunidad culminante (clmax)

sen cia de zon as con las m ism as caractersticas fsicas y

Ecologa m icrobial periodon tal

Estudios actuales de la ecologa

Los 215 cm 2 de rea de superficie de la cavidad bucal

culas constan de tres com ponentes (fig. 3): la necesidad

supon e que cada un o de estos tratam ien tos reduca los

cies colonizadas. Cuando los investigadores obtienen

Deteccin y enumeracin de las especies

Ecologa m icrobial periodon tal

tidad de trabajo sobre un lim itado nm ero de m uestras,

riodontitis crnica (52). Pese a sus desventajas, los cultivos

Pu ede detectar esp ecies n o

Proceso su m am en te largo y caro;

Estu dios de n u evos ecosistem as

Moderadas can tidades de

Escasos m edios selectivos tiles

In m u n oflu orescen cia Esp ecificidad;

Can tidad lim itada de an tisu ero

Posiblem en te m s til p ara estu dios

Sen sibilidad; esp ecificidad

Deteccin de esp ecies en u n

PCR en tiem p o real

Sen sibilidad; esp ecificidad;

Com p arativam en te len to; m u y

Estu dios en los qu e se requ iere la

Sen sibilidad; esp ecificidad;

Con fin ado a las esp ecies p ara las

B squ eda de u n con ju n to esp ecfico

Hibridacin ADNADN en dam ero

Sen sibilidad; esp ecificidad;

Con fin ado a las esp ecies p ara las

Estu dios de gran des can tidades de

Clon acin am p liada

Deteccin de esp ecies

Son dea u n a serie de esp ecies qu e

cfico de deteccin de especies bacterianas especficas en

tien en el poten cial de ser m s sen sibles. Hasta la fecha,

Ecologa m icrobial periodon tal

crita a con tin uacin , a causa de la n ecesidad de am pliar

crobiolgicas rpidas perm iten la in vestigacin de los

El primer componente: composicin microbiana

NaOH. Despus de la neutralizacin, el ADN liberado fue

Un o de los prim eros pasos que realizara un ecologista

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tectados eran especies n uevas. Sin em bargo, est claro