Tecnologa del Caf

13 de Abril 2015.

Cafena, y su determinacin cromatogrfca

Caffeine, and chromatographic determination
RESUMEN
La cafena es una sustancia que se encuentra en ciertas plantas naturales y puede producirse sintticamente en
laboratorio. Se localiza en cantidades variables en las semillas, las hojas y los frutos de algunas plantas, donde
acta como un pesticida natural que paraliza y mata ciertos insectos que se alimentan de las plantas. Se
encuentra en el caf, t, chocolate, yoco, cacao y, en bebidas de cola y energticas. El caf es una de las
fuentes de cafena consumidas con mayor frecuencia aunque los expertos recomiendan generalmente limitar
la ingesta en torno a 300 mg al da. La semilla de cafeto contiene un 2% de cafena.
En 1943 se comprob que un gramo diario de cafena (equivalente a 10 tazas de caf express o a 5 de caf
filtrado por goteo), absorbido durante una semana basta para inducir un cuadro carencial o sndrome de
abstinencia. Dependiendo del procesado al que es sometido el caf, se obtiene una mayor o menor cantidad de
cafena. Por lo general los cafs con tostado natural o mezcla son los que tienen una mayor cantidad de
cafena, seguidos de los cafs instantneos. Los que menos cantidad tienen son los cafs naturales o mezclas
descafeinados, seguidos de los cafs instantneos descafeinados que son los que menos tienen de todos.
(Calle, S.)
La determinacin de la cafena se suele llevar a cabo mediante tcnicas de separacin como HPLC
(Cromatografa lquida de alta eficiencia), CE (Electroforesis capilar), TLC (Cromatografa de capa fina) o
GC (Cromatografa de gases). A continuacin se pone en manifiesto informacin relacionada con el concepto
de caf y cafena as como su determinacin y anlisis cromatogrfico.
Palabras clave: Caf, cafena, anlisis cromatogrfico.

ABSTRACT
Caffeine is a substance found in some natural plant and can be produced synthetically in the laboratory. Is
found in varying quantities in the seeds, leaves and fruit of some plants, where it acts as a natural pesticide
that paralyzes and kills certain insects that feed on plants. It is found in coffee, tea, chocolate, yoco, cacao and
in colas and energy. Coffee is one of the sources of caffeine consumed more frequently although experts
usually recommend limiting intake about 300 mg per day.
Coffee seed contains 2% caffeine. Already in 1943 it was found that one gram daily of caffeine (equivalent to
10 cups of espresso or coffee filter 5 drip), absorbed for a week is sufficient to induce a deficiency box or
withdrawal. Depending on the processing that is subjected to coffee, a larger or smaller amount of caffeine is
obtained. Usually natural roasted coffees or mixture are those which have higher amounts of caffeine,
followed by instant coffees. The least amount they are natural or decaffeinated coffee blends, followed
decaffeinated instant coffees that are the less fortunate of all. The determination of caffeine is usually carried
out through separation techniques such as HPLC (high efficiency liquid chromatography), CE (capillary
electrophoresis), TLC (thin layer chromatography) and GC (gas chromatography). Below is underlined
related to the concept of coffee and caffeine information and its determination and chromatographic analysis.
Keywords: Coffee, caffeine, chromatographic analysis.

INTRODUCCIN
El primer caf instantneo fue inventado y patentado por el qumico japons Satori Kato, en Chicago, hacia el
ao 1900. Algunos aos despus el ingls George C. Washington, mientras viva en Guatemala, invent el La
cafena es una sustancia que se encuentra en ciertas plantas naturales y puede producirse sintticamente en
laboratorio. Se localiza en cantidades variables en las semillas, las hojas y los frutos de algunas plantas, donde
acta como un pesticida natural que paraliza y mata ciertos insectos que se alimentan de las plantas. Se
encuentra en el caf, t, chocolate, yoco, cacao y, en bebidas de cola y energticas. Tambin se encuentran en
bebidas que contienen guaran y a menudo como ingrediente en los suplementos de prdida de peso y
energizantes, las bebidas deportivas, preparaciones herbales y analgsicos.
El caf es una de las fuentes de cafena consumidas con mayor frecuencia aunque los expertos recomiendan
generalmente limitar la ingesta en torno a 300 mg al da. La cafena ha sido consumida durante siglos a pesar
de los intentos repetidos de prohibir su uso por motivos morales, econmicos, mdicos o polticos. El
descubrimiento del caf tuvo lugar en el siglo IX en Arabia y se cultiv por primera vez en Etiopa. En el
siglo XV se desarroll la tcnica de tostar y moler los granos de caf y el consumo de los productos con
cafena se expandi rpidamente por todo el mundo.

El Caf soluble
El caf soluble se obtiene por extraccin industrial del caf tostado y molido, para fabricar este importante
producto de la industria cafetera, se prepara un extracto mezclando con agua caliente el caf tostado y molido
de forma tosca. Acto seguido se separa el agua del extracto. El producto se envasa al vaco en frascos de
vidrio o latas que cerradas al vaco conservarn intactas sus cualidades de aroma y sabor por largos periodos
de tiempo. El mayormente consumo es el de la primera variedad: secado o deshidratado. Donde segn su
fabricante o procesador le agrega azcar y otros compuestos para resaltar alguna caracterstica de su sabor.

Para crear el caf instantneo, se selecciona los granos ms adecuados, se tuestan, muelen y se infusionan
hasta producir un tanque gigante de caf tostado y molido recin elaborado. Entonces extraemos las partculas
del caf, y el lquido restante se evapora mediante el mtodo de secado por congelacin o liofilizacin, que es
superior, ya que produce un caf de mejor calidad y gusto ms suave.

Cafena
La cafena es uno de los principales alcaloides del caf cuya frmula es C8H10O2N4 denominada 1, 3, 7,
trimetil Xantina, y participa en la caracterstica del sabor amargo del caf y se encuentra en mayor proporcin
en los caf de Robustas.

Propiedades qumicas de la cafena

La cafena por ser alcaloide del grupo de las xantinas, concretamente pertenece a la familia de las
metilxantinas. Las bases xnticas o pricas son alcaloides derivados de la purina. Concretamente, provienen
del anillo de la purina que se forma a travs de la condensacin de una pirimidina con un imidazol. Poseen
una estructura cristalina y su frmula molecular es C3H4N2. Es soluble en agua y es funcin directa de la
temperatura. A 25 C se disuelven 22 mg de cafena en 1 ml de agua, mientras que a 80 C se diluyen 180
mg/ml y a 100 C lo hacen 670 mg/ml. Es muy soluble en agua hirviendo en la que cristaliza como
monohidrato, ya que va perdiendo progresivamente la molcula de agua, hasta que lo hace totalmente a los
100 C.
La cafena puede formar combinaciones estables con sales alcalinas de cidos dbiles, como el benzoato y
silicato de sodio, pero su reaccin con cidos da lugar a compuestos muy inestables. Se descompone
fcilmente por la accin de lcalis calientes y por cloro. Causa una aglomeracin de finos con las gotitas
lquidas que convierten los finos en el polvo grueso.

La determinacin de cafena
Esta ha adquirido mucha importancia, debido a su uso en la industria farmacutica y en la industria de
alimentos; ya sea como ingrediente en la elaboracin de refrescos y bebidas energticas o por su presencia en
productos como el t, el mate, el cacao y el caf. En todos estos casos, el control de calidad del parmetro
cafena es necesario en los productos que la contienen. Por esta razn, se han desarrollado nuevos mtodos
instrumentales para su determinacin en diversas matrices, especialmente en alimentos.
Para elegir una tcnica de separacin de la cafena, adems de tener en cuenta los criterios econmicos y de
accesibilidad. Las tcnicas analticas ms empleadas en la actualidad pueden englobarse en dos grandes
grupos: tcnicas de separacin y tcnicas espectroscpicas. Las tcnicas espectroscpicas proporcionan, para
cada compuesto analizado, una informacin compleja, relacionada con sus caractersticas estructurales
especficas, por otro lado las tcnicas de separacin se utilizan para resolver los componentes de una mezcla y
la seal obtenida puede utilizarse con fines analticos cuantitativos o cualitativos.

Mtodo Cromatogrfico

La cromatografa no solo permite la separacin de los componentes de una mezcla, sino tambin su
identificacin y cuantificacin. El anlisis cualitativo est basado en la medida de parmetros cromatogrficos
(tiempos y volmenes de retencin) mientras que el anlisis cuantitativo est basado en la medida de alturas o
reas de picos cromatogrficos que se relacionan con la concentracin. La columna cromatogrfica y la forma
con la que se disea, constituye el corazn de la separacin. El detector, situado al final de la columna es el
que garantiza la respuesta de los componentes que se separan.
Un rasgo caracterstico de la cromatografa es la presencia de dos fases; dispuestas de tal manera que mientras
una permanece estacionaria dentro del sistema (fase estacionaria), la otra se desplaza a lo largo de l (fase
mvil). La clave de la separacin en cromatografa es que la velocidad con la que se mueve cada sustancia
depende de su afinidad relativa por ambas fases (equilibrio de distribucin). Esta tcnica es muy usada en
diversos anlisis que se aplican al caf, a continuacin se enuncian dos de las practicas realizadas a nivel
industrial ms importantes.
La metodologa de cromatografa para este anlisis, es multiresiduo, determina 14 plaguicidas de manera
simultnea, los cuales representan el mayor riesgo y la mayor importancia en el caso del caf, ellos tienen un
principio activo y generalmente son organofosforados, organoclorados y piretroides en caf verde. En el
procedimiento como tal se usan tres tcnicas cromatogrficas, las cuales son selectivas, precisas y exactas
(Dallos Corredor & Guerrero Dallas, 2005). La eleccin de la tcnica a usar depende del problema a resolver,
el volumen de la muestra y su concentracin.
La cromatografa se utiliza en la extraccin con diversos fines, se usa entonces la Cromatografa de gases
acoplada a un detector selectivo de masas, para la extraccin y el anlisis cualitativo de los voltiles del aceite
de caf.

Clasificacin de los mtodos cromatogrficos

La cromatografa es un mtodo de separacin y anlisis basado en el uso de una fase estacionaria y una mvil.
Los componentes de una muestra se hacen pasar por una fase estacionaria mediante el flujo de una fase mvil
de manera que las sustancias se distribuyen entre las dos fases; aquellos solutos cuya relacin de distribucin
sea favorable a la fase estacionaria quedan retenidos por sta, mientras que los solutos que se encuentran
preferentemente en la fase mvil sern los primeros en arrastrar. De esta forma los solutos sern separados en
orden creciente a sus coeficientes de distribucin con respecto a la fase estacionaria. El conjunto de tcnicas
que se valen de una fase mvil que se desplaza a lo largo del sistema y una fase estacionaria que permanece
fija reciben el nombre de cromatografa.

1. Segn el dispositivo utilizado para conseguir poner en contacto la fase estacionaria y fase mvil:
Cromatografa en columna: Consiste en columnas huecas de longitud y dimetro variable en cuyo interior
hallamos la fase estacionaria. La fase mvil se hace pasar por ellas ya sea por gravedad o aplicacin de
presin.
Cromatografa plana: la fase estacionaria se encuentra sujeta por una placa plana o en papel (cromatografa
en capa fina y en papel, respectivamente) y la fase mvil se desplaza por ella mediante capilaridad o
influenciada por la gravedad.

2. Segn los estados de las fases implicadas, en especial de la fase mvil:

Cromatografa de gases: En este caso la fase mvil es un gas inerte (helio o nitrgeno) y la fase
estacionaria es un slido (cromatografa gas-slido) o un lquido sostenido por un slido
inerte (cromatografa gas-lquido). Este tipo de cromatografa siempre es en columna, ya que es la nica
manera de que la fase mvil gaseosa se mantenga fluyendo, confinada dentro del sistema. La columna puede
estar rellena con la fase estacionaria, en forma semejante a la cromatografa lquida, o bien la fase estacionaria
puede depositarse sobre las paredes de un tubo muy delgado (0.25mm de dimetro) y largo (hasta 100m). Este
tipo de columnas se conocen como columnas capilares y proporcionan la mayor capacidad de separacin.
Cromatografa de lquidos: La fase mvil es un disolvente o mezcla de disolventes y la fase estacionaria
un slido que interacta con las sustancias que se desea separar (cromatografa lquido-slido),o bien un
lquido inmiscible con la fase mvil, depositado en la superficie de un slido (cromatografa lquido-lquido).
La cromatografa de lquidos (siempre la fase mvil es un lquido) puede realizarse con diferentes arreglos
experimentales:
Cromatografa en columna, la fase estacionaria se encuentra rellenando un tubo; en la cromatografa en
papel, la fase estacionaria es la solucin acuosa contenida en el interior de las celdas formadas por las fibras
de la celulosa, y es por tanto una forma de cromatografa lquido - lquido; en la cromatografa en capa fina,
se dispersa sobre una lmina de vidrio o aluminio formando un lecho de espesor uniforme.
Cromatografa de fluidos supercrticos(cualquier sustancia que se halle en condiciones de presin y
temperatura superiores a su punto crtico).

La cromatografa lquida
Cromatografa de reparto o particin: se vale de una fase estacionaria lquida que forma una pelcula sobre
un soporte slido. La distribucin del soluto vienen dada por el equilibrio entre la fase estacionaria y mvil.
Se utiliza para especies poco polares pero no inicas de masa molecular menor de 104 g/mol.
Cromatografa de adsorcin o cromatografa lquido-slido: el soluto presente en una fase mvil lquida o
gaseosa se adsorbe a las partculas slidas de la fase estacionaria. La separacin de los diferentes solutos se
debe al equilibrio entre las fases estacionaria y mvil. Se utiliza para especies no polares, ismeros
estructurales y grupos de compuestos de masa molecular menor de 104 g/mol.
Cromatografa de intercambio inico: Consiste en hacer pasar una fase mvil lquida sobre una fase
estacionaria que presenta grupos inicos en su superficie de modo que los iones de signo opuesto quedarn
retenidos por fuerzas electrostticas. Se utiliza para especies inicas de masa molecular menor de 104 g/mol.
Cromatografa de exclusin por tamao o cromatografa en gel: Se basa en la habilidad de materiales de
porosidad controlada para separar los componentes de una mezcla de acuerdo al tamao y forma de las
molculas. Se utiliza para solutos con masa molecular mayor de 104 g/mol.
Cromatografa de afinidad: Emplea interacciones especficas entre una clase de molculas de soluto y una
segunda molcula unida covalentemente a la fase estacionaria.

CONCENTRACIN

Desde el punto de vista del proceso industrial, el caf soluble se obtiene a partir del extracto de caf. Para
retirar el agua que hace parte del extracto se requieren fundamentalmente de procesos industriales. Consiste
en reducir el contenido de agua en el extracto de caf, tpicamente desde un 85% a 90% hasta un 55% a 60%
de agua. Hay diversos sistemas para retirar agua, y los ms utilizados en la industria son la evaporacin,
realizada al vaco para que el agua se evapore a unos 45C. En este proceso se usan intercambiadores de
calor especiales donde se busca conservar las propiedades del caf, calentndolo el menor tiempo posible y en
forma muy homognea. (Federacin Nacional de Cafeteros de Colombia, 2010)
Como producir caf soluble sin tener un concentrador?
Tal y como se observ en el artculo anterior, para realizar el proceso de concentracin en la produccin del
caf soluble, existen otras dos operaciones diferentes a la concentracin que generalmente es realizada por
evaporacin. Las otras dos operaciones son la Crioconcentracin y el uso de tecnologa de membranas.
Tecnologa de membranas
Esta tecnologa est basada en la permeabilidad selectiva de uno o ms componentes del sustrato lquido a
travs de una membrana y gracias a un gradiente de presin hidrosttica. Entre estas tecnologas se
encuentran: microfiltracin (MF), ultrafiltracin (UF), nanofiltracin (NF), smosis inversa (OI) y
electrodilisis (ED). El uso de estas tecnologas en la industria alimentaria, adems de mejorar notablemente
ndices de calidad y productividad, es una herramienta valiosa para los planes de produccin ms limpia.
(Restrepo, M.)
Usando esta tcnica, se elimina la mayor parte del contenido en sales del agua:
1. El agua fluye desde una columna con bajo contenido en slidos disueltos a una columna con alto contenido
en slidos disueltos.
2. La presin osmtica es la presin necesaria para impedir que el agua fluya a travs de la membrana, con el
objeto de obtener un equilibrio.
3. Aplicando una presin superior a la presin osmtica, el agua fluir en sentido inverso; el agua fluye desde
la columna con elevado contenido en slidos disueltos hacia la columna con bajo contenido en slidos
disueltos. (Lenntech, 2015).

A continuacin un ejemplo de determinacin de Cafena, algunos equipos y materiales importantes:

Determinacin de cafena en caf normal y descafeinado (mtodo cromatografia Hplc)

Equipos y Materiales
Cromatgrafo de fase liquida de alta resolucin HPLC Agilent 1260 compuesto de bomba para gradiente con
desgasificador en lnea , bandejas para solventes, automuestreador ,horno de columnas , detector de arreglo de
diodos , detector de flourescencia , software LC Openlab.
Columna cromatogrfca para HPLC, zorbax, eclipse XDB C18 4.6X150mm, tamao de partcula 5 m.
Balanza digital analtica con precisin de 0.0001 g.
Molino para caf verde ROMER serie RAS.
Molino para caf tostado.

 Equipo para purificacin de agua.

Equipo para filtracin de vaco.
Esptula
Vasos de precipitados de 50 y100 ml
Cilindro graduado de 250 y 500 ml
Embudos de filtracin, vstago corto.
Balones volumtricos de 100 ml, y 1 L, clase, CFCA (certificado por lote), fondo plano, cuello ancho
esmerilado y tapa de vidrio.
Jeringas desechables de 5 o 10 ml.
Filtros millex de 0.45 micras tipo durapore.
Papel filtro de 150 mm
Pipetas volumtricas de 0.5 ,1, 2, 5, 10, 20, y 50 ml
Viales de virio con zona de escritura de 2 ml.
Reactivos.
Metanol 99.8 % grado HPLC
Cafena patrn primario para HPLC.
Oxido de magnesio Grado analtico.
Estndar cafena pura, anhdrida.
Agua, grado Milli Q.
Membranas de filtracin de 0.45 micras.
Variables de Control
Tiempo de retencin.
Caf normal y descafeinado (HPLC Agilent 1100)
Cafena: minutos 10+/- 2
Presin mxima en bombas
HPLC Agilent 1100 400 bar
HPLC Agilent 1260 600 bar
Temperatura del horno: 25C
Tiempo de corrida 13 min
Flujo : 1.0 ml /min
Volumen de inyeccin 10ul
Longitud de onda : 273+/- 2nm
Fase mvil H2O: Metanol , A:B 80:20
Peso de la muestra 1 +- 0.1 g .
Preparacin de las curvas
-Prepare 5 puntos para cada curva de calibracin.
El rango de concentraciones recomendado para caf normal es de 25 mg/L a 500 mg /L .
-Trasfiera de la solucin stock para caf normal: 5 mL , 10 mL y 50 mL en balones aforados de 100 mL.
-Enrasar a volumen con agua grado Milli-Q.
Las concentraciones finales de las soluciones son de 25 mg/L , 50 mg/L , 100 mg/L , 250mg/L y 500 mg/L .
El rango de concentraciones recomendado para caf descafeinado es de 5 a 100 mg/L para cafena.
Trasfiera de la solucin stock para caf normal: 5 mL , 10 mL 20 ml y 50 mL en balones aforados de 100mL.
Enrasar a volumen con agua grado Milli-Q.
Las concentraciones finales de las soluciones son de 5 mg/L , 10 mg/L , 20 mg/L , 50 mg/L y 100 mg/L.
Preparacin de la muestra
Para caf verde

-Pese 1 g +- 0,1 de caf verde molido en un beaker o erlenmeyer de vidrio de 250 ml, y adicione 5g de Oxido
de magnesio, complete con agua ultrapura hasta 100g .Tenga en cuenta el peso total (p1)
-Caliente aproximadamente a 90 C durante 5 min agitando peridicamente.
-deje enfriar y adicione agua ultrapura hasta recuperar el peso total inicial (P1) y filtre la solucin con papel
filtro.
-Filtre a travs de una membrana de 0,45 micras o filtro millez en un vial y coloque lo en el inyector
automtico.
Para caf tostado
-Muela la muestra de caf tostado.
-Pese 1 g +- 0,1 de caf tostado y molido en un beaker o erlenmeyer de vidrio de 250 ml, y adicione 5g de
Oxido de magnesio, complete con agua ultrapura hasta 100g .Tenga en cuenta el peso total (p1)
-Caliente aproximadamente a 90 C durante 5 min agitando periodicamente.
-Deje enfriar y adicione agua ultrapura hasta recuperar el peso total inicial (P1) y filtre la solucin con papel
filtro.
-Filtre a travs de una membrana de 0,45 micras o filtro millez en un vial y coloque lo en el inyector
automtico.
Para extractos de caf
Pese en un baln aforado 100 ml , 1g de extracto concentrado , 0 3 gramos de extracto diluido .
Adicione 15 ml de agua ultrapura caliente (90 C ). Agite y deje enfriar hasta temperatura ambiente y
complete el volumen a 100 ml con agua ultrapura .
Filtre a travs de una membrana de 0,45 micras o filtro millez en un vial y coloque lo en el inyector
automtico.
Para caf soluble .
Pese 1g +- 0,1 g de caf soluble en baln aforado 250 ml .
Adicione 50 ml de agua ultrapura caliente (90 C ). Agite y deje enfriar hasta temperatura ambiente y
complete el volumen con agua ultrapura .
Filtre a travs de una membrana de 0,45 micras o filtro millez en un vial y coloque lo en el inyector
automtico.
Expresin de los resultados
-Cromatografa de la separacin por la tcnica HPLC de cafena.
-A partir de la construccin de las curvas de calibracin en los intervalos de concentraciones preparadas,
aplique el mtodo de los mnimos cuadrados a los resultados obtenidos y obtenga los valores de la pendiente y
de los interceptos.
-Utilice las ecuaciones de las rectas para calcular la concentracin de cafena expresadas en mg/L .
-el contenido de cafena en la muestra se expresa como porcentaje en peso (g/100g ) empleo la siguiente
ecuacin .
Wx =Pc V 100= Pc 0,01
1000 ms ms
Donde
Pc es la concentracin de cafena obtenida de las curvas de calibracin, expresada en mg/L.
ms es el peso de la muestra en gramos .
V es el volumen del extracto de la muestra, expresado en L como esta (v=0,1 L ).
-Tome como resultado la media aritmtica de dos determinaciones independientes de la muestra.
-Los coeficientes de evaluacin de los resultados en base seca de las dos rplicas de cada muestra de caf no
deben superar el criterio establecido por las buenas prcticas de laboratorio estndar (GPL), que dicho
coeficiente debe ser menor o igual a 5%.
CONCLUSIONES

La cafena es el estimulante leve psicoactivo ms consumido en el mundo y se encuentra en bebidas no

alcohlicas como el caf, Aunque ms dbil que otros estimulantes, la cafena puede producir sntomas de
intoxicacin, tolerancia y abstinencia causados por esta sustancia en algunos individuos.
La determinacin de cafena ha adquirido mucha importancia, debido a su uso en la industria farmacutica y
en la industria de alimentos; ya sea como ingrediente en la elaboracin de refrescos y bebidas energticas o
por su presencia en productos como el t, el mate, el cacao y el caf. En todos estos casos, el control de
calidad del parmetro cafena es necesario en los productos que la contienen. Por esta razn, se han
desarrollado nuevos mtodos instrumentales para su determinacin en diversas matrices, especialmente en
alimentos.
La metodologa analtica empleada para cuantificar la cafena, consiste pues en separar por sistemas
tradicionales de extraccin lquido-lquido el principio activo y valorarla despus por tcnicas
cromatogrficas y espectrofotomtricas, teniendo en cuenta la exactitud y precisin de los mtodos
empleados.
La cromatografa no solo permite la separacin de los componentes de una mezcla, sino tambin su
identificacin y cuantificacin. El anlisis cualitativo est basado en la medida de parmetros cromatogrficos
(tiempos y volmenes de retencin) mientras que el anlisis cuantitativo est basado en la medida de alturas o
reas de picos cromatogrficos que se relacionan con la concentracin. La columna cromatogrfica y la forma
con la que se disea, constituye el corazn de la separacin. El detector, situado al final de la columna es el
que garantiza la respuesta de los componentes que se separan. La determinacin de la cafena se suele llevar a
cabo mediante tcnicas de separacin como HPLC (Cromatografa lquida de alta eficiencia), CE
(Electroforesis capilar), TLC (Cromatografa de capa fina) o GC (Cromatografa de gases). Estos mtodos
realizan la deteccin mediante tcnicas electroqumicas (potencio mtricas, conductimtricas,
amperomtricas, etc.), pticas (espectrofotomtricas, fluorimtricas, etc.) y otras (termoqumicas). La eleccin
de una u otra tcnica depende del problema a resolver, del volumen de muestra y de su concentracin.

REFERENCIAS

Federacin Nacional de Cafeteros de Colombia. Colombia y la industria internacional del caf soluble.
Recuperado de: http://www.federaciondecafeteros.org/static/files/Gerencia%20Comercial%20-%20Colombia
%20y%20la%20industria%20internacional%20del%20cafe%20soluble.pdf
Federacin Nacional de Cafeteros de Colombia. (2010). Produccin de Caf Soluble. Recuperado de:
http://www.cafedecolombia.com/particulares/es/sobre_el_cafe/el_cafe/industrializacion/produccion_de_cafe_
soluble/
Restrepo, M. (s.f.). Produccin ms Limpia en la Industria Alimentaria. Recuperado de:
http://www.lasallista.edu.co/fxcul/media/pdf/RevistaLimpia/Vol1n1/PL_V1_N1_87_PL_INDUSTRIA_ALIM
ENTARIA.pdf
International Standard -ISO 10095 -1992- coffee - determination of caffeine content method using high
performance liquid chromatography.
NTC 456, caf y productos de Cafe , determinacin de cafena usando cromatografa HPLC
Calle Aznar, S. (12 de Junio de 2011). Determinacin analtica de la cafena en diferentes productos
comerciales.
Obtenido
de
Universidad
Politcnica
de
Catalunya:
http://upcommons.upc.edu/pfc/bitstream/2099.1/11148/2/Mem%C3%B2ria.pdf
Dallos Corredor, D., & Guerrero Dallas, J. A. (2005). Desarrollo y validacin de una metodologa para la
determinacin de plaguicidas en caf verde por cromatografa de gases. Revista Colombiana de Qumica,
175-188.
Lpez Fontal, E. M. (Enero de 2007). Extraccin de aceite de caf. Obtenido de Ingeniera e Investigacin.
Universidad
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de
Colombia:
http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=s012056092007000100004&script=sci_arttext