REA DE SUSTENTABILIDAD PARA EL DESARROLLO

PROGRAMA ACADMICO DE QUMICA

ESPECIALIDAD TECNOLOGIA AMBIENTAL
GRUPO
QU-301
MATERIA
MICROBIOLOGIA AMBIENTAL
TITULO
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE MICROORGANISMOS
DE LA MATRIZ AMBIENTAL: ___SUELO______
ASESORA
Dra. ROSA RICO MATA
DATOS DE IDENTIFICACIN DE LOS ANALISTAS
Fecha de inicio del anlisis: 1 de julio de 2015
Fecha de trmino: 13 de julio de 2015
Nombre
Cruz Romo Diana Laura

Cargo
Responsable

Gonzlez Snchez Carla Valeria

Administrador

Gaona Aboytes Mara Alejandra

Laboratorista 1

Mireles Villasana Alejandra

Laboratorista 2

Prez Gmez Cynthia Sarai

Laboratorista 3

GENERACIN: 2014-2016

MICROBIOLOGA AMBIENTAL UTL

ASESORA:

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DATOS DEL SITIO EN ESTUDIO

1.- Breve descripcin del estatus ambiental del sitio de estudio:
Es una presa en la cual desembocan todo tipo de desechos industriales y domsticos, y su destino final es
para el riego de alfalfa y lechuga, estas aguas estn fuertemente contaminadas qumica y bacteriolgicamente,
al no sufrir ningn tratamiento de remediacin en el lugar hay diversos tipos de plantas as como diferentes
zonas de cultivos a los alrededores de la presa, en la zona estn presentes diferentes tipos de suelo y a pesar de
que haya suelo frtil es regado con agua contaminada.
Nombre
Presa Blanca

Ubicacin
/coordenadas GPS
Ubicada al sureste
del municipio de
Len en el estado
de Guanajuato.
Coordenadas:
21 5'10.97"N
10142'35.19"O

Imagen de mapa satelital

2. Evidencia fotogrfica del sitio

Fecha: 11/10/2015
Hora: 10:32 am

SITIO DE
MUESTREO

Fecha: 11/06/2015
Hora: 10:34 am

DATOS DE LAS MUESTRAS A ANALIZAR

1. Identificacin
Fecha y hora de toma de muestra:
Fecha y hora de siembra: 01/07/15 a
11/06/15 a las 12:02 pm
las 10:36 am
Punto de Muestreo (ubicacin /coordenadas GPS):
Tiempo de exposicin (aplica solo para muestra de aire)
21 5 40.97 N 121 42 39.98 O
Nombre del/ los analistas que tomaron la muestra:
Nombre del/ los analistas que sembr la muestra:
Diana Erndira Uribe Jurez
Diana Erndira Uribe Jurez
Matriz ambiental: Suelo

2.Parmetros Fisicoqumicos
Color: caf oscuro

Temperatura (oC) ambiental: 23.4C

Olor: a humedad

Describir condiciones climatolgicas:

Temperatura de 24C, soleado

3. Evidencia fotogrfica del sitio de toma de muestra

MICROBIOLOGA AMBIENTAL UTL

ASESORA:

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pH: 6.5

AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS
1. Justificacin del proceso para la identificacin bacteriana
La identificacin bacteriana se realiz mediante pruebas bioqumicas debido que estas son un conjunto de
reacciones que determinan la actividad de una va metablica de la bacteria a partir de un sustrato que se
incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer transforma o no, tambin si existe o no
fermentacin. Para ello es necesario partir de un cultivo puro obtenido en el aislamiento, resembrado una
colonia bien aislada. Entonces esto permite estudiar las caractersticas generales de la bacteria, su
metabolismo, etc., lo que nos permitir conocer los beneficios o perjuicios que aporta al ambiente, lo que dar
pauta a tomar decisiones o precauciones , por ejemplo saber la bacteria es capaz para utilizarse en un tipo de
biorremediacin.
2. Dos medios de siembra (Nombre y Composicin)
(1) Agar EMB (agar eosina azul de metileno)
Frmula* por litro de agua destilada
Digerido pancretico de gelatina..10.0 g
Lactosa..5.0 g
Sacarosa..5.0 g
Fosfato dipotsico..2.0 g
Agar..13.5 g
Eosina..0,4 g
Azul de metileno..0.065 g

(2) Mac Conkey

Frmula* por litro de agua destilada
Gelatina digerida por enzimas pancreticas17 g
Casena digerida por enzimas pancreticas1.5 g
Tejido animal digerido por enzimas
peptdicas..1.5 g
Lactosa10 g
Sales biliares..1.5 g
Cloruro de sodio..5 g
Rojo neutro..0.03 g
Violeta cristal..0.001 g
Agar..13.5 g

Morfologa Colonial (Medio 1)

Descripcin

Morfologa Colonial (Medio 2)

Descripcin

En este medio se pueden observar colonias

verdosas con brillo metlico y centro negro azulado,
rosas prpura, incoloras, puntiformes, de forma
circular o sin forma especfica ya que se forman
agrupamientos, con contorno redondeado, elevacin
convexa, mucosas, con aspecto semihumedo,
pequeas o grandes, con superficie lisa.

En este medio pueden crecer colonias color

rosa a rojo, incoloras a color rosa o incoloras con en
centro anaranjado a mbar , puntiformes, de forma
circular o irregulares, de superficie convexa, planas
convexas o papilada con borde redondeado u
ondulado, colonias mucoides , inhibicin de
agrupamiento dinmico alrededor de colonias
aisladas.
Imagen

Imagen

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ASESORA:

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3. Dos Medios selectivos de resiembra (Nombre y Composicin)

(1) Agar EMB (agar eosina azul de metileno)
Frmula* por litro de agua destilada
Digerido pancretico de gelatina..10,0 g
Lactosa..5,0 g
Sacarosa..5,0 g
Fosfato dipotsico ..2,0 g
Agar 13,5.. g
Eosina..0,4 g
Azul de metileno 0,065..g

(2) Agar bilis rojo violeta

Frmula* por litro de agua destilada
Extracto de levadura........3,0 g
Peptona......7,0 g
Lactosa.........10,0 g
Cloruro de sodio.........5,0 g
Rojo neutro.......0,03 g
Cristal violeta......0,002 g
Agar.......15,0 g

Morfologa Colonial (Medio 1)

Morfologa Colonial (Medio 2)

Descripcin

Descripcin

En este medio se pueden observar colonias

verdosas con brillo metlico y centro negro azulado,
rosas prpura, incoloras, puntiformes, de forma
circular o sin forma especfica ya que se forman
agrupamientos, con contorno redondeado, elevacin
convexa, mucosas, con aspecto semihumedo,
pequeas o grandes, con superficie lisa.

En este medio pueden crecer colonias incoloras,

rosadas, rojas con halo de precipitacin rojizo, su
elevacin puede ser convexa o plana-convexa,
puntiformes, de formar circular, borde redondeado u
ondulado, superficie lisa, con aspecto hmedo o
semihumedo, de consistencia blanda con elevacin
convexa o planoconvexa.

Imagen

Imagen

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ASESORA:

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4. Procedimiento de Aislamiento
(describir detalladamente la cantidad de materiales y los pasos a seguir)
Materiales/Reactivos/Medios de cultivo/ Equipo a utilizar
2 Cajas Petri
1 Asa de nicromo
1 Mechero Bunsen
1 Matraz Erlenmeyer
1 Charola de pesado
1 Esptula
Algodn
Autoclave
Agar EMB (Eosina y Azul de Metileno)
Agar MacConkey
Preparacin de medios de cultivo
Agar EMB
Pesar 2.88 g del medio y suspender el polvo en 80 mL de agua destilada. Reposar 5 minutos; mezclar,
calentando a ebullicin durante 1 o 2 minutos hasta su disolucin. Esterilizar en autoclave a no ms de 121C
durante 15 minutos. Enfriar a 45C y distribuir a las dos placas de Petri agitando suavemente el medio.
Agar MacConkey
Suspender 4 g del medio y suspender el polvo en 80 mL de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta
uniformar. Calentar suavemente y hervir 1 a 2 minutos hasta disolver. Esterilizar en autoclave a 121C durante
15 minutos. Enfriar y distribuir a las dos placas de Petri agitando suavemente el medio.
Pasos para el aislamiento del microorganismos (siembra, seleccin de la colonia y resiembra):
Siembra
1. Flamear el asa bacteriolgica con ayuda de un mechero bunsen hasta que est al rojo vivo (para
eliminar cualquier microorganismo) y dejarla enfriar.
2. Tomar la muestra de suelo con el asa estril, abrir la caja de Petri con un ngulo de 45
(mantenerla siempre cerca del mechero para evitar contaminacin) y sembrarla en forma de estra
(pasar el asa a travs de la superficie de la caja con agar EMB, con movimientos en forma de s de
tras hacia adelante) y rastreando la siembra en la caja Petri. Como se muestra a continuacin.
(Figura 1)

Figura 1. Forma de estriar para el aislamiento.

3. Rotular la caja Petri y meter a incubar en la posicin en la que se encuentra a 37C por 24 horas.

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ASESORA:

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Resiembra
1. Flamear el asa bacteriolgica en el mechero Bunsen, hasta que el asa quede de color rojo (para
eliminar cualquier microorganismo).
2. Dejar enfriar por pocos segundos y levantar la caja de Petri en un ngulo de 45.
3. Tomar la azada de la colonia seleccionada ms separada de la siembra en agar EMB (cerca del rea
estril del mechero) y hacer una serie de estras (Figura 2) sobre la superficie de la placa que
contiene agar EMB flamear el asa cada vez que se vaya a realizar un estriado. Si es necesario estar
girando la placa para realizar las estras.
4. Rotular la caja de Petri e incubarlas a 37 C por 24 horas

Figura 2. Tcnica para el aislamiento por estra.

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ASESORA:

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5. Esquema del Perfil bioqumico (metablico )

para la identificacin del microorganismo seleccionado

Bacteria a identificar

Gramm -

Movilidad -

Gramm +

Movilidad +
TSI

Citrato

Indol
Rojo de metilo
+
Catalasa
+
H2S
+

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RESULTADOS DEL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN

1. EVIDENCIA FOTOGRAFICA DEL CULTIVO DE LA MUESTRA (SIEMBRA)

2. MORFOLOGA COLONIAL OBSERVADA

Tipo de colonia 1: Descripcin

FOTO 1

Colonias color rosa claro, elevadas, crecimiento por

agrupamientos, de borde ondulado o entero, superficie
rugosa, con aspecto hmedo y consistencia blanda.
Presencia de burbujeo de gas.

Tipo de colonia 2: Descripcin

FOTO 2

Colonias un poco ms aisladas, incoloras con una

reflexin de luz mate, de forma circular y elevacin
convexa, aspecto semihumedo, borde entero u
ondulado.

Tipo de colonia 3: Descripcin

FOTO 3

Colonias de color caf oscuro a simple vista,

puntiformes, con elevacin convexa, superficie lisa y con
borde entero u ondulado.

Colonia seleccionada para su identificacin

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ASESORA:

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3. EVIDENCIA FOTOGRAFICA DEL CULTIVO PURO ( RESIEMBRA)

FOTO 1: Colonia que se resembr Agar EMB (agar eosina
FOTO 2: Cultivo puro Agar bilis rojo violeta
azul de metileno)

4. MORFOLOGIA COLONIAL OBSERVADA

FOTO 1
Descripcin

Colonias pequeas de color rosa aunque a

simple vista se ven de un color caf oscuro, de
forma circular, su elevacin es convexa y tiene
un borde redondeado su aspecto es casi seco,
superficie lisa.
FOTO 2

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5. EVIDENCIA FOTOGRFICA DEL RESULTADO DEL PERFIL BIOQUMICO

Nombre de la
prueba

Medio de cultivo
utilizado

Resultado obtenido
(positivo/negativo)

1.- Tincin de
Gram

N/A

Negativo

Evidencia fotogrfica

Fundamento de la prueba
Se utiliza para poder diferenciarse la morfologa celular bacteriana que radica en la diferente estructura de la
pared celular de ambos grupos: las bacterias Gram+ tienen una gruesa capa de peptidoglicano en su pared,
mientras que las bacterias Gram- tienen una capa de peptidoglicano ms fina y una capa lipopolisacardica
externa.
Tras la tincin con el primer colorante (Cristal violeta) se efecta un lavado con etanol que arrastrar al
colorante slo en las Gram (-), mientras que las Gram (+) y se tien de color purpura. Las clulas Gram (-) se
teirn despus con un colorante de contraste (safranina) para que puedan observarse.
Considerndose gram positiva a las que se visualizan de color moradas y gram negativas a las que se visualizan
de color rosa o rojo.

2.- Movilidad

Medio SIM

Negativo

Control
(sin
muestra)

Muestra

Fundamento de la prueba
Las bacterias tienen movilidad por medio de sus flagelos, que se encuentran principalmente entre los bacilos;
sin embargo algunas formas de cocos son inmviles. Las bacterias mviles pueden contener un solo flagelo o
muchos; adems su localizacin vara con su especie bacteriana y las condiciones de cultivo. A veces, las
bacterias con movilidad producen variantes no mviles que parecen ser estables y raramente se revierten en
formas mviles. Los organismos no mviles carecen de flagelos, en el caso del medio SIM (medio
semislido) los microorganismos mviles pueden apreciarse por la turbidez que producen alrededor de la
puncin de siembra.

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ASESORA:

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3.- Catalasa

N/A

Control (sin
muestra)

Negativo

Muestra

Fundamento de la prueba
La enzima catalasa descompone el perxido de hidrgeno (H2O2) en agua y oxgeno bajo la frmula 2 H2O2----2
H2O + O2. De esta manera las bacterias se protegen del efecto txico del H2O2, que es un producto final del
metabolismo aerobio de los azcares.
Permite diferenciar: A) gneros: Streptococcus (-) de Micrococcus (+) y/o Staphylococcus (+); Bacillus (+) de
Clostridium (-) y Corynebacterium (+) de Erysipelothrix (-), siendo excepciones en este ltimo caso,
Corynebacteriumpyogenes (-) y Corynebacteriumhaemolyticum (-). B) especies: Moraxellabovis (variable) y
Moraxellakingii (-) de otras especies de Moraxella (+).
Catalasa

H2O2

H2O2 +e- +H+

H2O+OH+

H2O + OH

4.- Produccin de citrato de

permeasa

Agar citrato

No hubo
crecimiento
Muestra
Control
(sin
muestra)

Blanco

Fundamento de la prueba
El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar citrato como nica
fuente de carbono, usan sales de amonio como nica fuente de nitrgeno, con la consiguiente produccin de
alcalinidad.
El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras de citrato permeasa, a travs del ciclo
del cido tricarboxlico. El desdoblamiento del citrato da progresivamente, oxalacetato y piruvato. Este ltimo,
en presencia de un medio alcalino, da origen a cidos orgnicos que, al ser utilizados como fuente de carbono,
producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces vira al azul y esto es indicativo de la
produccin de citrato permeasa.
PRUEBA DEL CITRATO

Enzima

Citrato de sodio

Productos metablicos alcalinos ( carbonatos y bicarbonatos) TpH

Azul de bromotimol
(verde)

Azul de bromotimol
(azul)

pH 6.9

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ASESORA:

pH 7.6

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5.- Produccin de cido

sulfhdrico

Medio SIM

No hubo
crecimiento

Control
(sin
muestra)

Muestra

Fundamento de la prueba
Algunos microorganismos tienen enzimas que desprenden el tomo de azufre de aminocidos trptfano, el
cual es luego reducido con hidrgeno (de los substratos), para formar cido sulfhdrico las enzimas
responsables de esta actividad son la cistena, desulfhidrasa y la tiosulfato reductasa, en este proceso los
microorganismos cumplen con la actividad que puede catalogarse como fermentacin proteica. La actividad de
las bacterias sobre aminocidos que contienen azufre, frecuentemente produce liberacin de sulfhdrico, lo
cual se demuestra empleando sales de metales pesados como el hierro. El sulfhdrico reacciona con tales
metales dando una coloracin oscura al medio de cultivo.
Para detectar la capacidad de producir sulfhdrico, utilizamos tambin el medio de Kliger, el medio contiene
tiosulfato de sodio como sustrato necesario para la produccin de sulfhdrico, citrato de hierro y amonio como
fuente de iones de Fe+3 que se combinan con el cido sulfhdrico y producen sulfuro de hierro que se observa
como un precipitado en el medio de color negro que es la produccin de cido sulfhdrico.

6.- Fermentacin de
lactosa

Agar TSI

No hubo
crecimiento

Control
(sin
muestra)

Muestra

Fundamento de la prueba
Tambin conocida coma fermentacin heterolctica se denomina as porque su producto final no es
exclusivamente cido lctico.
El proceso tiene un rendimiento menor al de la fermentacin homolctica como se desprende de la
produccin de solo un mol de ATP por mol de glucosa fermentada.
La obtencin de piruvato en bacterias se logra mediante el catabolismo de la glucosa por la ruta e las pentosas.
Su reaccin es:
Glucosa + ADP +Pi
Ac. Lctico + etanol + CO 2 + ATP
Si la bacteria problema fermenta lactosa o sacarosa, acidificara el medio en su superficie volvindolo de color
amarillo, mientras que si no lo es, la superficie del medio continuara de color rojo.
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7.- Fermentacin de
glucosa

Agar TSI

No hubo
crecimiento
Control
sin
muestra

Muestra

Fundamento de la prueba
Es una ruta metablica anaerbica que ocurre en el citosol de la clula, en la cual se oxida parcialmente la
glucosa para obtener energa y donde el producto de desecho es el cido lctico.
En este tipo de fermentacin, la molcula de glucosa (de 6 tomos de carbono) se degradan y forma dos
molculas de cido lctico (de 3 tomos, cada una) como nico producto final.
Su ecuacin global es:
Glucosa + 2ADPA + 2Pi
2 lactato + 2ATP + 2 H2O
Si la bacteria problema fermenta la glucosa, acidificara el medio haciendo virar a amarillo el indicador en el
fondo del tubo, mientras que si no es fermentadora de glucosa, el medio permanecer de color rojo.

8.- Fermentacin de
sacarosa

Agar TSI

No hubo
crecimiento

Control
sin
muestra

Muestra

Fundamento de la prueba
Es una prueba usada para la fermentacin de sacarosa por parte de la bacteria sumndole produccin de gas.
Superficie acida/profundidad acida (pico amarillo/ fondo amarillo) fermenta sacarosa, si la superficie es
alcalina/ profundidad alcalina (pico rojo/fondo rojo) no fermenta sacarosa. La presencia de burbujas o ruptura
del medio de cultivo produce gas (CO2).
Sacarosa (C12H22O11)+H2O

Glucosa(C6H12O6)+ Fructosa(C6H12O6)

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9.- Rojo de metilo,

Fermentacin Acidomixta

Caldo RMVP

Negativo

Muestra

Control
(sin
muestra)

Fundamento de la prueba
Determinar la capacidad de un microorganismo para producir y mantener estables los productos terminales
cidos de la fermentacin de la glucosa y vencer la capacidad amortiguadora del sistema. Las bacterias que
utilizan la glucosa por la va cido mixta generan como productos finales cido actico, cido frmico, cido
succnico y cido lctico, los cuales provoca un fuerte descenso en el pH del medio, La prueba Rojo de metilo
es cuantitativa para la produccin de cido y requiere que los microorganismos produzcan cidos fuertes a
partir de la glucosa, de forma que el medio del pH descienda a menos de 4.4. Esta distincin puede hacerse a
travs del indicador Rojo de metilo que presenta color amarillo por encima de un pH de 5.1 y solo presenta
color rojo cuando el pH desciende a 4.4.

10.- Indol

Medio SIM

No hubo
crecimiento

Control
(sin
muestra)

Muestra

Fundamento de la prueba
La prueba del indol se genera mediante la desaminacin reductiva del triptfano y esta reaccin es llevada a
cabo por algunas bacterias que poseen las enzimas denominadas en su conjunto triptofanasas. Para detectar la
produccin de indol se utiliza el medio Caldo triptfano y la lectura de la prueba se realiza con el reactivo de
Kovacs (alcohol isoamilo, p-dimetilaminobenzaldehdo y cido clorhdrico concentrado) con el que el
indol producido reacciona generando una coloracin rosa intensa.
Triptofanasa
Trp
Indol+Ac. Pirvico +NH3

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IDENTIFICACIN DEL MICROORGANISMO AMBIENTAL

EN LA MATRIZ DE ESTUDIO: __SUELO__
1.- Nombre cientfico del o los microorganismo identificado de acuerdo a los resultados
del perfil bioqumico planteado ( gnero y especie)
Los resultados de las pruebas bioqumicas realizadas a nuestro microorganismo aislado corresponde al
perfil bioqumico de la bacteria Klebsiella pneumoniae. Sin embargo no es definitivo ya que en algunas pruebas
bioqumicas como la fermentacin de lactosa, glucosa y lactosa, en medio TSI, no se obtuvo crecimiento por lo
que se puede concluir un resultado conciso de esta prueba. En base a los resultados favorables que obtuvimos
podemos decir que el microorganismo identificado es:
Klebsiella pneumoniae

2. Taxonoma del o los microorganismo identificados

Dominio: bacteria
Filo: Proteobacteria
Clase :Gammaproteobacteria
Orden: Enterobacteriales
Familia: Enterobacteriaceae
Gnero: Klebsiella
Especie: K. pneumoniae
3. Caractersticas generales
Klebsiella es una bacteria gram-negativa, una bacteria en forma de varilla y no mviles de familia
Enterobacteriaceae. Es un anaerobio facultativo, y tiene una caracterstica de ser tanto aerbica como
anaerbica, dependiendo de la situacin, la asimilacin y la fermentacin de la lactosa se puede observar en
el agar MacConkey donde las colonias son de color rosado y en el medio Kliger o TSI donde son cido/cido, es
decir fermentador de la lactosa ms produccin de gas; y en la fermentacin acetnica o prueba de Voges
Proskauer son positivos. Por ltimo, sus condiciones ptimas de cultivo son en agar nutritivo a 37 C, pH de 7.0,
presin osmtica de 1 atm, esta bacteria se encuentra de forma natural en el suelo, el agua y las verduras (las
coles, lechuga, vegetales de hojas verdes, etc.). Es la especie de mayor relevancia clnica, desempean un
importante papel como causa de las enfermedades infecciosas oportunistas . El gnero fue llamado as en
honor a Edwin Klebs, un microbilogo alemn de finales del siglo XIX. El bacilo ahora conocido como Klebsiella
pneumoniae tambin fue descrito por Karl Friedlnder, y durante muchos aos se conoci como el bacilo de
Friedlnder.
4. Ciclo(s) biogeoqumicos en el(los) que intervienen
Ciclo biogeoqumico del nitrgeno.

5. La funcin que juegan en la transformacin de la materia orgnica a travs

de los ciclos biogeoqumicos
El papel que juegan las bacterias es en la fijacin del nitrgeno molecular a amoniaco.
Esta incorporacin de nitrgeno a la biosfera ocurre gracias a la existencia en las bacterias fijadoras de la
enzima nitrogenasa, capaz de realizar en las condiciones ambientales normales, una reaccin qumica que
requiere ms de 800 de temperatura y bastantes atmsferas de presin.
Este proceso microbiano es llevado a cabo por organismos procariticos en vida libre o en simbiosis, esto
ltimo si ocurre en asociacin mutualista con las plantas. Hay una gran representacin de especies microbianas
portadoras de esta caracterstica pertenecientes a muy diferentes grupos de bacterias.
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Se trata de un proceso altamente consumidor de energa. El triple enlace que une los dos tomos de nitrgeno
es duro de romper. El trabajo es llevado a cabo por la enzima nitrogenasa con el consumo de 16 molculas de
ATP por N2 reducido, segn la ecuacin:
N2 + 16ATP + 8e- + 8H+ = 2NH3 + 8H2 + 16ADP + 16Pi
La fijacin de nitrgeno es un proceso altamente consumidor de energa. La reduccin y la provisin de los
electrones necesarios requieren el consumo de bastantes molculas de ATP, hasta 24 por N2, por lo que la
eficiencia del proceso es bastante baja, como se manifiesta en el caso de los fijadores libres.
La reduccin del nitrgeno molecular a amoniaco es catalizada por un complejo enzimtico conocido como
nitrogenasa y el nitrgeno molecular es el principal depsito de nitrgeno para los organismos vivos.
La fijacin biolgica del nitrgeno, es llevada a cabo por bacterias capaces de tomar nitrgeno y combinarlo por
medio de enzimas. Algunas de estas bacterias viven libres en el suelo, y otras forman simbiosis con algunos
tipos de plantas.
Estos microorganismos aerbicos protegen la nitrogenasa mediante: la remocin de oxgeno por el proceso de
respiracin; ej. En Azotobacter y Klebsiella, se observan cadenas de transporte abreviadas que rinden menos
ATP por molcula de sustrato oxidado, generndose un aumento en el consumo de oxgeno por molcula de
sustrato oxidado; o mediante asociacin sinergstica con bacterias heterotrficas aerobias, como es el caso de
la relacin entre Anabaena y Pseudomonas aeruginosa.

6. Conclusin parcial sobre las interacciones bacterianas en la matriz estudiada y la importancia de la

microbiologa en el rea ambiental
Al realizar esta prctica fue posible adquirir conocimientos tales como: preparacin de material y medios
de cultivo, toma de muestra, diferentes tcnicas de siembra y resiembra y tambin fue posible la realizacin de
diferentes pruebas bioqumicas como catalasa, indol, movilidad, fermentacin de lactosa, glucosa y sacarosa,
entre otras, las cueles sirvieron para conocer algunas bacterias que se encuentran en el medio ambiente ya
que las pruebas bioqumicas son un conjunto de reacciones que nos permiten determinar la actividad
metablica de la bacteria a partir de un sustrato (presente el medio de cultivo) y que la bacteria al crecer puede
transformarlo o no, entonces esos cambios que produce la bacteria nos permite determinar si la prueba es
positiva o negativa, para ello es necesario partir de un cultivo puro previamente obtenido del aislamiento.
Tambin entendimos la importancia que tiene la buena ejecucin de las pruebas bioqumicas ya que para
ello es necesario realizar todo con pleno consentimiento y con los cuidados, precauciones y factores
necesarios. As como la importancia que tienen para identificar microorganismos debido al su metabolismo
que muestran es los resultados de cada prueba.
La aplicacin de la microbiologa ambiental nos ayud identificar microorganismos existentes en las
matrices ambientales (especficamente suelo), a comprender la importancia, intervencin y funcin que tienen
los microorganismos identificados en diversos mbitos por ejemplo en los ciclos biogeoqumicos, en la
transformacin de los componentes orgnicos e inorgnicos, incluyendo los contaminantes, etc. Adems los
daos y beneficios que pueden causar las bacterias al ambiente, y como a partir de ello se pueden elegir
diferentes tipos de microorganismos de acuerdo a su metabolismo para realizar o aplicar procesos de
biorremediacin o algn otro proceso con la finalidad de mejorar la situacin ambiental.
Con la prctica reafirmamos nuestros conocimientos obtenidos en clase referente a los microorganismos
presentes en el suelo y a preciar de forma real sus caractersticas como sus tipos de respiracin, fermentacin,
etc.
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Por lo tanto podemos concluir que en el suelo existen relaciones entre una gran variedad de
microorganismos, siendo los microorganismos los componentes ms importantes del suelo, ya que constituyen
la parte viva de este y son los responsables de la dinmica de transformacin y desarrollo.
Pudimos darnos cuenta que la capacidad de multiplicacin les permite crear poblaciones muy grandes en
un tiempo muy corto, colonizando rpidamente los sustratos a degradar, como pudimos observar en cada
prueba bioqumica realizada en el laboratorio microbiolgico.
Entendimos que la interaccin bacteriana puede generar que los grupos bacterianos que actan primero
sobre los sustratos disponibles sean dominantes hasta que termina su accin y luego dan oportunidad a que
otros grupos crezcan en el residuo del metabolismo de los primeros.

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