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NTE INEN 1638 (1989) (Spanish): Miel de

abejas. Determinacin del nmero de diastasa

CDU: 638.16:543.06

Instituto Ecuatoriano de Normalizacin, INEN Casilla 17-01-3999 Baquerizo Moreno E8-29 y Almagro Quito-Ecuador Prohibida la reproduccin

Norma Tcnica
Ecuatoriana
Obligatoria

AL 02.04-312

MIEL DE ABEJAS. DETERMINACIN DEL NMERO DE

DIASTASA.

INEN 1 638
1989-02

1. OBJETO

1.1 Esta norma establece el mtodo para determinar el nmero de diastasa en la miel de abejas.

2. RESUMEN
2.1 El nmero de diastasa es la cantidad, en centmetros cbicos, de una solucin de almidn al 1%,
hidrolizada en una hora por la enzima contenida en 1g de miel. El nmero de diastasa tambin se
conoce como actividad diastsica, ndice de diastasa o poder diastsico.

3. INSTRUMENTAL

3.1 Equipo usual de laboratorio y en particular:

3.1.1 Balanza analtica, sensible al 0,1 mg.
3

3.1.2 Vaso de precipitacin, de 20 cm .

3

3.1.3 Probetas graduadas, de 25 y 50 cm .

3

3.1.4 Pipetas graduadas, de 5 y 10 cm .

3

3.1.5 Matraz aforado, de 25 cm .

3

3.1.6 Matraz Erlenmeyer, de 50 cm .

3.1.7 Bao de Mara, con regulador de temperatura.
3.1.8 Cronmetro.
3.1.9 Espectrofotmetro, que permita leer a 660 nm.

4. REACTIVOS

4.1 Solucin madre de yodo.

3

Disolver 8,8 g de yodo de calidad para anlisis, en 30-40 cm de agua que contenga 22 g de yoduro de
3

potasio y diluir en agua hasta 1000 cm .

(Contina)
-1-

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1989-02

4.2 Solucin de yodo 0,0007 N.

3

Disolver 20 g de yoduro de potasio de calidad para anlisis en 30-40 cm de agua en un matraz

3
3
volumtrico de 500 cm . Aadir 5,0 cm de solucin madre de yodo y completar hasta aforar.
Preparar una solucin nueva en das alternos.
4.3 Solucin tampn de acetato de sodio, pH 5,3
3

Disolver 87 g de acetato de sodio trihidratado (CH3C00Na.3H20), en 400 cm de agua, aadir 10,5

3
cm de cido actico glacial disuelto en un poco de agua y completar hasta 500 cm3 Ajustar el pH
a 5,3 con acetato de sodio o cido actico, segn el caso, utilizando un potencimetro.
4.4 Solucin de cloruro de sodio 0,5 M.
Disolver 14,5 g de cloruro de sodio de calidad para anlisis en agua destilada y completar hasta
3
500 cm .
4.5 Solucin de almidn.
3

En un Erlenmeyer de 250 cm se mezclan 90 cm de agua destilada, 2g de almidn soluble,

reactivo para anlisis. Se hace hervir rpidamente agitando continuamente la solucin. Se reduce el
calentamiento y se deja hervir suavemente a 3 min., enfriar hasta temperatura ambiente. Se transfiere
3
el Iquido a un matraz de 100 cm y se afora hasta la marca.
4.5.1 Normalizacin de la solucin de almidn.
Para determinar la dilucin normal necesaria para la preparacin de la solucin diluida de almidn que
3
debe emplearse, se transfieren a un Erlenmeyer, con una pipeta, 5 cm de la solucin de almidn,
3
preparada como se indica en el punto 4.5, 10 cm de agua y se mezclan homogneamente. De
3
esta solucin se toma 1 cm , se vierte en varias probetas y se determina la dilucin con agua
necesaria para obtener una absorbancia de 0,760 0,02. Este proceso debe repetirse cuando se
prepara una nueva solucin de almidn.
5. PREPARACION DE LA MUESTRA

5.1 La muestra de miel debe ser perfectamente homognea antes de analizada.

5.2 La miel de panal debe prepararse para el ensayo, cortando los panales a lo largo y separando la
miel del panal, utilizando un tamiz No. 40 (425 m).
5.3 Para este ensayo, la muestra de miel no debe calentarse, y se realiza en cada una de las
muestras que constituyen un grupo de muestras elementales o muestras globales por recipiente.
6. PROCEDIMIENTO
6.1 La determinacin efectuar por duplicado sobre la muestra convenientemente homogenizada

(Continua)
-2-

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1989-02

6.2 Pesar 5g de muestra, disolverla en 10 cm de agua destilada y 2,5 cm de solucin tampn.

3

6.3 Transferir a un matraz que contenga 1,5 cm de la solucin de cloruro de sodio y aforar hasta 25
3
cm .
3

6.4 Se toman dos matraces Erlenmeyer de 50 cm ; en uno se transfieren con una pipeta 5 cm de la
3
solucin de almidn y, en el otro, 10 cm de la solucin de miel.

6.5 Los matraces se colocan en bao Mara, a 40 0,02 C durante 15 minutos y, al cabo de este
tiempo, se agrega la solucin de almidn en la de miel, se agita bien y se toma el tiempo.
3

6.6 Luego de 5 minutos se retira 1 cm con una pipeta, y se agrega rpidamente en una probeta
3
que contenga 10 cm de solucin diluida de yodo.
6.7 Mezclar, diluir al volumen determinado en el punto 4.5.1 de Normalizacin de la solucin de
almidn y se determina la absorbancia en el espectofotmetro.
6.8 Se anota, como tiempo de reaccin, el tiempo transcurrido desde el momento en que se mezclan
las soluciones de almidn y miel, hasta el momento en que la alcuota se agrega a la solucin diluida
de yodo.
3

La pipeta de 1 cm debe colocarse en el Erlenmeyer que contiene la solucin, para volver a usarla
con las alcuotas que deben tomarse.
3

6.9 Se contina tomando alcuotas de 1 cm cada cierto tiempo, anotando los tiempos de reaccin
y las absorbancias correspondientes, hasta que la absorbancia sea menor de 0,235.
6.10. El punto final aproximado, en minutos, se puede estimar a partir del valor de la absorbancia
obtenida a los 5 minutos, segn la tabla siguiente:
TABLA 1.
Tolerancia a los
5 minutos

Tiempo aproximado para

alcanzar el tiempo
final, en minutos
> 25
20 - 25
15 - 18
11 - 13
9 - 10
7 - 8

0,7
0,67
0,6
0,55
0,5
0,45

(Continua)
-3-

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1989-02

7. CLCULOS

7.1 El nmero de diastasa en la miel de abejas se obtiene de la siguiente manera:

7.1.1 Representar grficamente la absorbancia en funcin del tiempo (minutos) sobre papel
milimetrado. Trazar una lnea recta a travs del mayor nmero de puntos posibles.
7.1.2 Se lee el tiempo de reaccin correspondiente a la absorbancia de 0,235 y luego se aplica la
siguiente ecuacin:

ND =

300
t

Siendo:
3

ND Nmero de diastasa; este nmero expresa la actividad de la diastasa en cm de solucin de

almidn al 1 por ciento, hidrolizada por la enzima contenida en 1 g de miel, en una hora, a 40 C.
t

tiempo de reaccin correspondiente a la absorbancia de 0,235, en minutos.

8. ERRORES DE METODO

8.1 La diferencia entre los resultados de una determinacin efectuada por duplicado no debe exceder
del 1,0% del promedio de ambos ensayos, en caso contrario, se debe repetir la operacin.

9. INFORME DE RESULTADOS
9.1 Como resultado final, debe reportarse la media aritmtica de los resultados de la determinacin.
9.2 Deben indicarse el mtodo usado y el resultado obtenido. Debe mencionarse, adems, cualquier
condicin no especificada en esta norma o considerada como opcional, as como cualquier
circunstancia que pueda haber influido sobre los resultados.

-4-

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APENDICE Z

Z.1 NORMAS A CONSULTAR

Esta norma no requiere de otra para su aplicacin.

Z. 2 BASES DE ESTUDIO
Anlisis Moderno de los Alimentos, Leslie Hart y Harry Johnstone Fisher, Editorial Acribia, Zaragoza
Espaa ,1971.
Codex Alimentarius. Normas del Codex para los azcares incluida la miel. Volumen III. Roma, 1981.
Official Methods of Analysis. Associations of Official Analytical Chemists Fourteenth Edition.
Edited by Sidney Williams, Arlington, Virginia, 1984.
ICAITI. .34.099-h9 Norma Centroamericana, Miel. Determinacin del nmero de diastasa o
actividad diastsica. Instituto Centroamericano de Investigacin y Tecnologa Industrial. Guatemala,
1974.

-5-

1988-047

INFORMACIN COMPLEMENTARIA
Documento:
NTE INEN 1638

TITULO: MIEL DE ABEJAS.

NMERO DE DIASTASA.

ORIGINAL:
Fecha de iniciacin del estudio: 1988-05-20

DETERMINACION

DEL Cdigo:
AL 02.04-312

REVISIN:
Fecha de aprobacin anterior por Consejo Directivo
Oficializacin con el Carcter de
por Acuerdo No.
de
publicado en el Registro Oficial No.
de
Fecha de iniciacin del estudio:

Fechas de consulta pblica: de

Subcomit Tcnico: AL 02.04 Azcares

Fecha de iniciacin: 1988-06-03
Integrantes del Subcomit Tcnico:

Fecha de aprobacin: 1988-06-03

NOMBRES:

INSTITUCIN REPRESENTADA:

Dr. Jos Escudero (Presidente)

Ing. Carolina Palacio de Way
Lic. Flor de Gallardo
Ing. Renne Palacios
Dra. Luz Guerrero
Dra. Delia de Mora

ADAP
MAG-INCCA
LA COLMENA
SUPERBA
PASTEURIZADORA QUITO S.A.
INSTITUTO NACIONAL DE HIGIENEGUAYAQUIL
ASOCIACIN DE APICULTORES DE
TUNGURAHUA
ASOCIACIN DE APICULTORES DE
TUNGURAHUA
INSTITUTO NACIONAL DE HIGIENE QUITO
EL PARAISO
MINISTERIO DE SALUD PUBLICA
INEN

Agr. Becker Ayala

Agr. Alfredo Zuiga
Dar. Rosa de Len
Sr. Silvio Durn
Dra. Magdalena Bus
Ing. Norma Santamara (Secretaria Tcnica)

Otros trmites: 4 Esta norma sin ningn cambio en su contenido fue DESREGULARIZADA, pasando de
OBLIGATORIA a VOLUNTARIA, segn Resolucin de Consejo Directivo de 1998-01-08 y oficializada
mediante Acuerdo Ministerial No. 235 de 1998-05-04 publicado en el Registro Oficial No. 321 del 1998-05-20
El Consejo Directivo del INEN aprob este proyecto de norma en sesin de 1989-02-15
Oficializada como: OBLIGATORIA
Registro Oficial No. 218 del 1989-06-23

Por Acuerdo Ministerial No. 210 del 1989-05-10