15/8/2015

Lacentrifugacinsepuedellevaracaboaescalapreparativaoescalaanaltica.Laprimeraseutilizaparaaislarpartculasparasuaprovechamiento
posteriorylasegundapermitedeterminarpropiedadesfsicascomolavelocidaddesedimentacinoelpesomolecular.
La centrifugacin preparativa se utiliza para separar partculas segn la velocidad de sedimentacin (centrifugacin diferencial), la masa
(centrifugacinzonal)oladensidad(centrifugacinisopcnica).Enelprimercasoseobtieneunlquidosobrenadanteyunmaterioalsedimentado.En
losotrosdoscasoslaspatculassedistribuyenenfraccionesdediferentesdensidadesdeunfluidolquido(centrifugacinmedianteungradientede
densidades).
Las partculas se pueden separar en funcin de la velocidad de sedimentacin (centrifugacin diferencial), la masa (centrifugacin zonal) o la
densidad (centrifugacin isopcnica). La centrifugacin zonal y la centrifugacin isopcnica constituyen ejemplos de centrifugacin mediante un
gradientededensidades.
Haydiferentestiposdecentrfugassegnelrangodevelocidadesdegiro:

A.Centrfugasdebajavelocidad,desobremesaoclnicas.Depequeotamaoysinrefrigeracin.Alcanzanunavelocidadmximade5000
rpm.Sontilesparalaseparacindepartculasgrandescomoclulasoprecipitadosdesalesinsolubles.

Las centrfugas micrfugas son una variante de las anteriores que permiten llegar a velocidades de ms de 10.000 rpm, Los volmenes de
trabajosonmuypequeos.Sontilesenelcampodelabiologamolecular.

B.Centrfugasdealtavelocidad.Alcanzanvelocidadesdeentre18.000y25.000rpm.Sonrefrigeradasyalgunas tienen sistema de vaco

paraevitarelcalentamientodelrotoracausadelrozamientoconelaire.Sontilesenlaseparacindefraccionescelulares,peroinsuficientes
paralaseparacinderibosomas,virusomacromolculasengeneral.

C. Ultracentrfugas. Superan las 50.000 rpm, por lo que tienen sistemas auxiliares de refrigeracin i de alto vaco. Hay ultracentrfugas
analticasquepermitenlaobtencindedatosprecisosdepropiedadesdesedimentacin(coeficientesdesedimentacin,pesosmoleculares),y
preparativas,tilesparaaislarpartculasdebajocoeficientedesedimentacin(microsomas,virus,macromolculas).

11.2.1Centrifugacindiferencial
Eselprocesoquetienecomoresultadolaobtencindeunsobrenadanteyunmaterialsedimentado.

11.2.2Centrifugacinmedianteungradientededensidades:
Estetipodecentrifugacinesunprocesomedianteelcuallaspartculassedistribuyenenfraccionesdediferentesdensidadesdeunfluidolquido.El
mtodo es un poco ms elaborado que la centrifugacin diferencial, no obstante presenta ventajas que compensan el trabajo aadido. La tcnica
permitelaseparacindevariosotodosloscomponentesdelamuestraylarealizacindemedidasanalticas.Elmtododegradientededensidades
implica la utilizacin de un soporte fluido cuya densidad aumenta desde la zona superior a la inferior. El gradiente se consigue con un soluto
preferiblementede baja masa molecular, de tal manera que la muestra a analizar pueda ser suspendida en la solucin resultante. Como solutos se
utilizanlasacarosa,polisacridossintticos,derivadosyodadosdelcidobenzoico,osalesdemetalesalcalinospesadoscomoelrubidiooelcesio,
entreotros.Lamuestrasedepositaenlapartesuperiordelgradientecomounafinabanday,trascentrifugar,laseparacindeloscomponentesdela
muestrasepresentacomodiferentesbandasozonasquepuedenserseparadas(ofraccionadas).
Haydosvariantesdeestemtodo,lacentrifugacinzonalylacentrifugacinisopcnica:

11.2.2.1Centrifugacinzonal
Enlacentrifugacinzonallamuestraaanalizarsedepositaenlapartesuperiordeungradientededensidadespreviamenteformado.A
causa de la fuerza centrfuga las partculas se mueven a velocidades que dependen de la masa y sedimentan en diferentes zonas del
gradiente.Ladensidadmximadelgradientenohadeexcederaladelaspartculasaseparar.

11.2.2.2Centrifugacinisopcnica
Lacentrifugacinisopcnicaseparalespartculasenungradientededensidadesenfuncindeladensidaddelasmismas.Laspartculas
semuevenenelgradientehastaquelleganaunpuntodondeladensidaddestasiladelgradientesonidnticas(deaquelnombrede
isopcnico).Enestecaso,escondicinfundamentalqueladensidadmximadelgradientefinalhadeexcedersiemprealadensidadde
http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/centrifugacio_tipus.html

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laspartculas.Porestemotivolasedimentacinfinalnoseproducesisecontrolanlascondicionesdecentrifugacin,yaquelaspartculas
flotansobreun"colchn"dematerialqueposeeunadensidad superior a la de stas. Esta tcnica se utiliza, por ejemplo, para separar
partculas similares en tamao pero de diferente densidad. En este sentido, la centrifugacin isopcnica es un mtodo adecuado para
separarcidosnucleicosodiferentesorgnuloscelulares.

http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/centrifugacio_tipus.html

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