Estructura de la Membrana

Plasmtica

Tres visiones de una membrana celular

La membrana plasmtica rodea a la
clula, definiendo su extensin y
manteniendo las diferencias
esenciales entre el contenido de la
clula y su entorno
Los gradientes inicos establecidos a
travs de las membranas pueden ser
usados para:
Sintetizar ATP
Dirigir el movimiento de solutos
Producir y transmitir
seales
elctricas

Contienen protenas que actan

como sensores de seales externas
(receptores)

Funciones

Divisin de compartimientos
Sitios para actividades bioqumicas
Barrera con permeabilidad selectiva
Transporte de solutos
Respuesta a seales externas
Interaccin celular
Transduccin de energa

Las zonas de una molcula de fosfolpido

La bicapa lipdica ha sido establecida
como la base universal de la
estructura de la membrana celular
Las molculas lipdicas son afipticas
(o anfiflicas):
Un extremo hidroflico (o polar)
Un extremo hidrofbico (no polar)

Los ms abundantes son

fosfolpidos:
Una cabeza polar y dos colas
hidrocarbonadas hidrofbicas
Las colas suelen ser cidos grasos de
entre 14 a 24 tomos de carbono
Una de las colas tiene uno o mas
dobles enlaces cis (insaturada)

Cmo molculas hidroflicas e

hidrofbicas interactan diferente con
el agua?

Micela de lpidos y bicapa lipdica

Cuando se agregan las molculas
anfipticas en una ambiente acuoso,
sus colas hidrofbicas se esconden
en el interior y sus cabezas
hidroflicas quedan expuestas al
agua
Dependiendo de su forma pueden
ser:
Micelas esfricas, con las colas hacia
el interior
Laminas biomoleculares (bicapas),
con las colas hidrofbicas
escondidas entre dos capas de
cabezas hidroflicas

Arreglo de las molculas de

lpidos en una ambiente acuoso

Liposomas

Bicapas producidas en forma de

vesculas esfricas, cuyo tamao
puede variar de 25 nm a 1 m
Bicapas sintticas tiles para
estudios experimentales, como
modelos de membranas
La bicapa lipca es un fluido
bidimensional

Seccin transversal de una bicapa lipdica

sinttica (membrana negra)

Bicapas planas
Formadas a travs de un agujero
situado en una separacin entre
dos compartimientos acuosos
Se utilizan para medir las
propiedades de permeabilidad de
las membranas artificiales

Movilidad de los fosfolpidos

Pueden ocurrir 4 tipos de
movimientos de las molculas
fosfolpidos en una bicapa lipdica
Raramente migran de un lado a
otro de la monocapa (flip-flop)
aprox. una vez por mes
Intercambian fcilmente su lugar
con la molcula vecina dentro de
una monocapa (107 veces por
segundo)
Giran con gran rapidez alrededor
de sus ejes longitudinales y sus
cadenas hidrocarbonadas son
flexibles

Influencia de los dobles enlaces cis en las

cadenas hidrocarbonadas
La fluidez de las membranas
celulares es biolgicamente
importante
La fluidez depende tanto de su
composicin como de la
temperatura
La membrana es mas difcil de
congelar si las cadenas
hidrocarbonadas son cortas o
tienen dobles enlaces cis:
Una menor longitud de la cadena
reduce la interaccin entre s
Los dobles enlaces cis producen
pliegues en las cadenas que
dificultan su empaquetamiento

Estructura del colesterol

La bicapa lipdica de muchas
membranas celulares no estn
compuestas exclusivamente por
fosfolpidos
Las bicapas contiene adems
colesterol y glucolpidos
Las membranas plasmtica de
eucariotas contienen cantidades
elevadas de colesterol (aprox 1
por 1 de fosfolpido)
Las molculas de colesterol
refuerzan el carcter de barrera
permeable de la bicapa lipdica

El colesterol en una bicapa lipdica

El colesterol se orienta en la
bicapa con sus grupos hidroxilo
prximos a las cabezas polares de
las molculas de fosfolpidos
Sus anillos esteroides, planos y
rgidos, interactan con y en
parte inmovilizan las regiones de
las cadenas hidrocarbonadas
cercanas a los grupos polares de la
cabeza, dejando al resto de las
cadenas ms flexibles

Principales fosfolpidos de las membranas

plasmticas de mamferos
Cuatro grupos de fosfolpidos
predominan en la membrana
Plasmtica de muchas clulas de
mamferos:

Fosfatidiletanolamida
Fosfatidilserina
Fosfatidilcolina
Esfingomielina

Slo la fosfotidilserina tiene una

carga neta negativa
Las tres molculas restantes son
elctricamente neutras a pH
fisiolgico (carga + y - negativa)
Otros fosfolpidos, tales como los
fosfolpidos de inositol son
funcionalmente importantes pero se
hallan en cantidades pequeas

PERCENTAGE OF TOTAL LIPID BY WEIGHT

LIPID

LIVER CELL
PLASMA
MEMBRANE

RED BLOOD
CELL PLASMA
MEMBRANE

MYELIN

MITOCHONDRION
(INNER AND OUTER
MEMBRANES)

ENDOPLASMIC
RETICULUM

E. COLI
BACTERIUM

Cholesterol

17

23

22

Phosphatidylet
hanolamine

18

15

25

17

70

Phosphatidylse
rine

trace

Phosphatidylch
oline

24

17

10

39

40

Sphingomyelin

19

18

Glycolipids

28

trace

trace

Others

22

13

21

27

30

Una balsa lipdica (Lipid raft)

Las balsas lipdicas son

pequeas reas
especializadas
Donde algunos lpidos
(primariamente esfingolipidos
y colesterol) y protenas
estn concentrados
Como la bicapa lipdica es
ms gruesa en estas reas,
ciertas protenas de
membrana se acumulan

Distribucin asimtrica de fosfolpidos y

glucolpidos en la bicapa lipdica
La bicapa lipdica es asimtrica

La composicin lipdica de las dos

mitades de la bicapa es
marcadamente diferentes
La molculas lipdicas que tienen
colina se encuentran en la mitad
exterior de la bicapa
Los que contienen un grupo amino
terminal (fosfatidiletanolamina y
fosfatidilserina) se hallan en la
mitad interior
Dado que la fosfatidil serina, de
carga negativa, esta en la
monocapa interior, existe una
importante diferencia de carga
entre las dos monocapas

Algunas funciones de fosfolpidos

de membrana en la sealizacin
celular

Molculas de glucolpidos

Son las molculas lipdicas que

presentan una simetra ms
marcada en cuanto a su distribucin
en las membranas
Se encuentran exclusivamente en la
mitad no citoplasmtica
Se autoasocian formando
microagregados mediante enlaces
de hidrgenos entre ellas
En la membrana plasmtica sus
grupos azcar quedan en la
superficie de la clula
Los galoctocerebrsidos son
glucolpidos neutros, el azcar no
esta cargado
Un ganglisido siempre tiene uno o
ms residuos de cido silico
cargado negativamente

Protenas de Membrana

Sistemas de asociacin de protenas con la

membrana lipdica

Asociacin de protenas a cidos grasos o

grupos prenil

Una cadena de cido graso

(mirstico) se une a un grupo
amino terminal de una glicina por
medio de un enlace amida
Un grupo prenil (fernesil) se halla
unido mediante un enlace tioter
a un residuo cisteina situado a
cuatro residuos del carboxilo
terminal

Protenas que atraviesan la bicapa lipdica en

forma de hlice
En la mayora de las protenas
transmembranal, las regiones de la
cadena polipeptdica que cruzan la bicapa
presentan una conformacin en hlice
Las uniones peptdicas son polares y el
agua no esta presente en este ambiente,
todas las uniones en la cadena embebida
en la bicapa tienden a formar enlaces de
H+, formando una h
Los glucolpidos estn siempre en el lado
no citoplasmtico de la membrana, los
residuos de azcar se aaden en la luz del
retculo y en el aparato de Golgi
El caracterstico ambiente reductor del
citosol impide la formacin de enlaces
disulfuro

Grficas de hidropata
La energa libre necesaria para
transferir segmentos sucesivos de
una cadena polipeptdica de un
solvente no polar al agua se calcula
a partir de la composicin de
aminocidos
El ndice de hidropata del
segmento se esquematiza en el eje Y
como funcin de su localizacin en
la cadena
Un valor positivo indica que se
necesita energa libre para la
transferencia hacia el agua
(hidrofbico)
Los picos del ndice de hidropata
aparecen en la posicin de los
segmentos hidrofbicos de la
secuencia de aminocidos

 barriles formados de diferentes

nmeros de cadenas

10

Las protenas de membrana pueden solubilizarse

y purificarse con detergentes
Los detergentes son compuestos
que alteran las propiedades
bioqumicas de las membranas
pequeas molculas afipticas
que tienden a formar micelas en
el agua
Rompen las asociaciones
hidrofbicas y destruyen la bicapa

Al mezclarlo con las membranas

Los extremos hidofbicos del
detergente se unen a las regiones
hidrofbicas de la zona externa
de las protenas de membrana,
desplazando a las molculas
lipdicas

Detergentes suaves para solubilizar, purificar y

reconstruir protenas de membrana

Muchas protenas hidrofbicas pueden

ser solubilizadas y posteriormente
purificadas en forma activa mediante
el uso de detergentes suaves, como
Tritn X-100

Aninico

No inico

Por ejemplo: se purifican molculas

funcionales de la ATPasa Na+-K+ y se
incorporan a vesculas de fosfolpidos

11

El lado citoplasmtico de las protenas de

membrana se pueden estudiar en
fatasmas de eritrocitos
Se pueden obtener en gran nmero
Estn relativamente poco
contaminados por otros tipos celulares
La nica membrana que poseen es la
membrana plasmtica
No tiene ncleo
No tiene organelos
Exponiendo las clulas a un medio
donde la concentracin de sal sea
menor que dentro de la clula se
preparan membranas celulares, vacas
o fantasmas

Fantasmas de eritrocito, soldados y no

soldados, y de vesculas normales o volteadas
Los eritrocitos se rompen en un
nico punto
Produciendo fantasmas con un
solo agujero
Fantasma permeable
Fantasma sellado

Las vesculas ms pequeas se

producen rompiendo
mecnicamente los fantasmas
Dependiendo de las condiciones
inicas utilizadas las vesculas son:
Vesculas normales (derechas)
Vesculas volteadas (al revs)

Patrn de electroforesis en geles (PAGE-SDS) de

las protenas de membrana de eritrocitos

Se detectan aprox. 15 bandas

protenicas principales
Los pesos moleculares oscilan
entre 15,000 y 250,000
Tres de estas protenas
espectrina, glucoforina y la banda
3 constituyen ms del 60% de la
protena total de la membrana

12

Espectrina, protena del citoesqueleto asociada a

la cara citoplasmtica de la membrana
Muchas de las protenas asociadas con la
membrana de los eritrocitos son protenas
perifricas asociadas con el lado citoplasmtico
de la bicapa
La ms abundante de estas protena es la
espectrina, una barra larga, delgada y flexible,
de 100 nm que constituye el 25% de la masa
total de protenas asociadas
Es un heterodmero formado por dos grandes
subunidades estructuralmente similares
Los heterodmeros se autoasocian cabeza con
cabeza, formando tetrmeros de 200 nm de
largo
Las colas de 5 o 6 tetrmeros se enlazan entre
si mediante su unin a filamentos cortos de
actina y otras protenas del citoesqueleto
(banda 4.1)

El citoesqueleto de espectrina del lado

citoplasmtico de la membrana
Los dmeros de espectrina asociados
cabeza-con-cabeza forman
tetrmeros que se hallan unidos
formando una red por medio de
complejos de unin compuestos de
cortos filamentos de actina,
tropomiosina, banda 4.1 y aducina.
El citoesqueleto esta unido a la
membrana mediante la unin
indirecta de los tetrmeros de
espectrina
a algunas protenas banda 3, a
travs de la anquirina
Por medio de la unin de la protena
banda 4.1 a la glucoforina

La criofractura muestra imgenes del interior

hidrofbico de la bicapa
Las clulas son congeladas en
nitrgeno lquido y el bloque de
hielo se fractura con una cuchilla
El plano de la fractura tiende a pasar
a travs de la mitad hidrofbica de
los lpidos de la membrana,
separndolas en dos monocapas
Las caras de fractura expuestas (cara
protoplasmtica P y cara externa E)
se metalizan con platino y la replica
de platino se observa al microscopio
electrnico

13

Destino de la glucoforina y banda 3 de la

membrana del eritrocito por la criofractura
La protena tiende a permanecer
en la monocapa en la que se halla
la mayor parte de su volumen
Las molculas de la banda 3
quedan asociadas a la cara de la
fractura interna (P) y pueden
observarse como partculas
intramembranal
Las molculas de glucoforina
permanecen unidas a la cara de
fractura exterior (E), por lo que se
cree que sus colas citoplasmticas
tienen una masa insuficiente para
que sean vistas

La bacterirrodopsina, una bomba de protones

que atraviesa la bicapa en forma de 7 hlices

Halobacterim halobium

Cada molcula de bacteriorrodopsina un

nico grupo que la luz o cromforo que
da a la protena su color prpura
El retinal esta unido a una lisina de la
protena, cuando es activado por un
fotn de luz, el cromforo excitado
cambia de forma provocando cambios
conformacionales en la protena y
transfiere uno o dos H+ desde el interior
hasta el exterior de la clula
Se establece un gradiente de H+ a travs
de la membrana plasmtica, que impulsa
la sntesis de ATP por otra protena
membranal
As, la bactriorrodopsina es parte de un
transductor de energa solar que provee a
la bacteria de energa

Las porinas son protenas transmembranal

formadoras de canales que cruzan la membrana en
forma de un barril
Las porinas tiene una lamina en lugar
de una hlice como estructura
transmembranal primordial
las porinas consisten de un trmero en
que cada monmero forma un barril
tubular, que atraviesa la bicapa
Cada monmero consiste de un barril
de 16 cadenas antiparalelas que
forman un canal transmembranal lleno
de agua
Cadenas polares laterales revisten el
interior del canal acuoso

14

Las protenas de membrana actan a

menudo como grandes complejos
Con el centro de reaccin fotosinttico
bacteriano se demostr que mltiples
polipptidos pueden asociarse en una
membrana formando una compleja
maquinaria protenica
Estos complejos fotosintticos capturan
la energa lumnica y la usan para
bombear H+ a travs de la membrana
El complejo esta formado por cuatro
subunidades (L, M, H y un citocromo)
Las subunidades L y M forman el ncleo
del centro de reaccin y cada una
contiene cinco hlices que atraviesan la
bicapa lipdica
Tambin se localizan varias coenzimas
transportadoras de electrones

Agrupamiento y formacin de capping de

una protena de superficie
Se obtuvieron otras evidencias de la
movilidad de las protenas por los
procesos llamados patches y
capping.
Cuando los ligandos, como Ab, que
tienen ms de un lugar de unin se
unen a protenas especficas de la
superficie celular, las protenas
tienden a agregarse, mediante enlaces
cruzados, formando grandes grupos
(patches), indicando el
desplazamiento lateral de protenas
Una vez formados los agregados en la
superficie de una clula son
trasladados activamente a uno de los
polos celulares formando un cap

Las clulas pueden confinar lpidos y protenas en

dominios especficos de la membrana
Muchas clulas tienen sistemas que
les permiten limitar sus protenas de
membrana en dominios especficos
de la bicapa lipdica continua
En clulas epiteliales ciertas enzimas
de la membrana plasmtica y
algunas protenas de transporte
estn limitadas a la superficie apical
de las clulas mientras que otras se
hallan confinadas a la superficie
basolateral
Esta distribucin asimtrica de las
protenas es esencial para la funcin
del epitelio

15

Tres dominios de la membrana plasmtica

del espermatozoide
Una clula tambin puede crear
dominios de membrana sin utilizar
uniones intercelulares
El espermatozoide es una clula
aislada que presenta varias zonas
estructural y funcionalmente
distintas delimitadas por una
membrana plasmtica continua
La membrana plasmtica tiene al
menos tres dominios diferentes:
parte anterior de la cabeza, parte
posterior de la cabeza y la cola

Sistemas que restringen la movilidad lateral

de protenas de membrana
Las clulas tambin tiene sistemas
ms drsticos para inmovilizar
ciertas protenas de membrana
Las molculas de bacterrodopsina
se ensamblan formando grandes
cristales bidimensionales, fijando
las molculas protenicas
Pueden estar trabadas por
interacciones con agregados
macromoleculares del exterior o
del interior de la clula
Pueden interactuar con protenas
de la superficie de otra clula

Muchas protenas de membrana difunden en

el plano de la membrana
Como los lpidos, muchas protenas no
hacen flip-flop, sino que giran alrededor
de un eje perpendicular al plano de la
bicapa (difusin rotacional)
Muchas protenas son capaces de
desplazarse lateralmente por la
membrana (difusin lateral)
Mediante la fusin artificial de clulas de
ratn con clulas humanas se producen
clulas hbridas (heterocariontes)
Al principio se encontraban en su propia
mitad
Despus, las dos clases de protenas
difundieron y se mezclaron ocupando
toda la superficie del heterocarionte

16

Transporte a travs de la
membrana

Permeabilidad de una bicapa lipdica a

diferentes clases de molculas
Relativa

Coeficientes

17

COMPONENT

INTRACELLULAR
CONCENTRATION (mM)

EXTRACELLULAR
CONCENTRATION (mM)

Cations
Na+

5-15

K+

140

Mg2+

0.5

1-2

Ca2+

10-4

1-2

7 10-5 (10-7.2 M or pH 7.2)

4 10-5 (10-7.4 M or pH 7.4)

5-15

110

H+

145

Anions*
Cl-

Protenas acarreadoras y canales

Comparacin de transporte pasivo y

activo

18

Ionforos: un formador de canal y un

acarreador de iones mvil

Modelo de un cambio conformacional para

mediar el transporte pasivo de soluto

Cintica de difusin simple y difusin

mediada por acarreador

19

Tres tipos de transporte mediado por

acarreadores

20

Transportador de Glucosa con ayuda

de un gradiente de Na+

Distribucin asimtrica de
acarreadores en clulas epiteliales

La bomba de Na+-K+

21

Modelo del ciclo de bombeo de la

bomba de Na+-K+

Respuesta de eritrocitos a cambios en

la osmolaridad del fluido extracelular

22

Transportadores ABC

23

Protenas acarreadores y canales

Comparacin entre transporte

activo y pasivo

24

Modelo de transporte pasivo

Canal inico tpico, Flucta entre

La conformacin abierta y cerrada

Activando canales inicos

25

Especificidad por K+

Bases del potencial de

membrana

26

Inactivacin del canal de K+

Transportador de acetil colina

27

Modelo del receptor para acetilcolina

Activacin de la unin neuromuscular

Familias de canales inicos

28