DROGAS CON HETERSIDOS FLAVONOIDES

Universidad Nacional Mayor de san Marcos (2015)

Catedra de Farmacognosia y Medicina Tradicional

Drogas con hetersidos flavonoides

Angelo P. Motta,I Gabriela S. Donayre,I Roxana Y. Ancasi,I Yuly Y. Cotrina,I Dra. Arilmi Gorriti, II Dra. Augusta Crdoba R, II
Q.F Katherine Acosta A. II
I Alumnos de la Facultad de Farmacia y Bioqumica- Escuela de Farmacia y Bioqumica. UNMSM. Lima-Per
II Profesoras de Laboratorio de la Asignatura de Farmacognosia I.

RESUMEN
El presente trabajo tuvo como objetivo reconocer la importancia de los compuestos fenlicos
en farmacognosia e identificar flavonoides cualitativamente en naranja Citrus sinensis, ruda
Ruta graveolens y cebolla Allium cepa L.. Se realiz la extraccin de flavonoides utilizando
diferentes mtodos, as mismo se realizaron pruebas de identificacin de flavonoides y se us
el estndar de hesperidina para el anlisis cromatogrfico del albedo de la naranja. Al
presentar respuestas positivas en todas las reacciones de identificacin, los resultados indican
que el extracto seco de naranja contiene hesperidina. El extracto acuoso y etanlico de ruda
contiene rutina. El extracto alcohlico de cebolla contiene quercetina.
Palabras clave: Flavonoides, hesperidina, rutina, quercetina, naranja, ruda, cebolla

ABSTRACT
The present study aimed to recognize the importance of phenolic compounds in
pharmacognosy and identify qualitatively flavonoids in orange Citrus sinensis, rude Ruta
graveolens and onion Allium cepa L.. Extraction of flavonoids was conducted using different
methods, also flavonoids identification tests were performed and the Standard hesperidin was
used for chromatographic analysis of the orange. At present positive responses in all reactions
of identification, the results indicate that dry orange extract contains hesperidin. The aqueous
and ethanol extract contains rough routine. The alcoholic onion extract containing quercetin.

Key words: Flavonoids, hesperidin, rutin, quercetin, orange, rue, onion

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I.

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Catedra de Farmacognosia y Medicina Tradicional

INTRODUCCIN

Los flavonoides son pigmentos naturales

presentes en los vegetales y que protegen al
organismo del dao producido por agentes
oxidantes, como los rayos ultravioletas, la
polucin ambiental, sustancias qumicas
presentes en los alimentos, etc. El organismo
humano no puede producir estas sustancias
qumicas protectoras, por lo que deben
obtenerse mediante la alimentacin o en
forma de suplementos. Estn ampliamente
distribuidos en plantas, frutas, verduras y en
diversas bebidas y representan componentes
sustanciales de la parte no energtica de la
dieta humana 1
Los flavonoides contienen en su estructura
qumica un nmero variable de grupos
hidroxilo fenlicos y excelentes propiedades
de quelacin del hierro y otros metales de
transicin, lo que les confiere una gran
capacidad antioxidante. Tres caractersticas
estructurales son importantes para su
funcin: a) La presencia en el anillo B de la
estructura catecol u O-dihidroxi; b) La
presencia de un doble enlace en posicin 2,3;
c) La presencia de grupos hidroxilo en
posicin 3 y 514. La quercetina presenta las
tres caractersticas mientras que la catequina
solo presenta la segunda y la diosmetina la
primera.2

II. OBJETIVOS
- Reconocer
cualitativa
y
cuantitativamente flavonoides en
Citrus sinensis.
- Identificar
cualitativamente
flavonoides cebolla, Allium cepa L
- Evaluar la presencia de flavonoides
en ruda, Ruta graveolens

Figura 1. Flavonoides. Estructura bsica y tipos

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III.

DESARROLLO

3.1.

ANLISIS CUALITATIVO

3.1.1. Hesperidsido:
Naranja Citrus sinensis
A. Extraccin
Se pes 20g de albedo de naranja en un
frasco mbar, se agrega 20 mL de
etanol y 2 mL de NaOH y se dej
reposar por 7 das. Pasado el tiempo de
maceracin, se decant el lquido de
maceracin, se acidific a pH5 y se dej
reposar por 30minutos para la formacin
de cristales. Luego se filtr, para obtener
los cristales de hesperidina en la torta,
se llev a secar para la ebullicin de los
solventes hasta obtener el extracto seco
de hesperidina.
B. Reacciones
especficas
de
identificacin
Reaccin con H2SO4 cc.
Se coloc 1mg de extracto seco de
hesperidina en un tubo de ensayo, se
agreg gotas de H2SO4cc. Se observ la
coloracin naranja
Reaccin con HCl cc.
Se coloc 1mg de extracto seco de
hesperidina en un tubo de ensayo,
agregue gotas de HClcc. Se observ el
precipitado blanco.
Reaccin con HNO3
Se coloc 1mg de extracto seco de
hesperidina en un tubo de ensayo, se
agreg gotas de HNO3. Se observ la
coloracin parda rojiza.
Reaccin con NaOH 30%
Se coloc 1mg de extracto seco de
hesperidina en un tubo de ensayo,
agreg gotas de NaOH 30%. Se
observ la coloracin amarillo naranja
3.1.2. Rutinsido
Ruda Ruta graveolens
Para realizar el ensayo de los
rutinsidos se pes 10 g de Ruta

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graveolens, se separ 5 g para un

extracto acuoso y 5 g para un extracto
etanlico.
A. Extracto etanlico
En un beaker de 250 mL se coloc 5 g
del material vegetal y se agreg
alcohol de 96 c.s.p. recubrir. Se pas
a un bao mara durante 20 minutos,
luego se decant con ayuda de una
pipeta Pasteur a los tubos donde se
le
agreg
respectivamente,
los
reactivos siguientes: wilson, shinoda,
FeCl3 (ac)
B. Extracto acuoso
En un beacker de 250 mL se coloc 5 g
del material vegetal y se agreg agua
destilada c.s.p. recubrir. Se pas a un
bao mara durante 20 minutos, luego
se decant con ayuda de una pipeta
Pasteur a los tubos donde se le agreg
respectivamente,
los
reactivos
siguientes: wilson, shinoda,FeCl3 (ac)
3.1.3. Quercetina :
Cebolla Allium cepa L.
Para realizar el ensayo de quercetina,
se pes 2 g de cscara de cebolla y se
agreg 25 mL de alcohol. Luego se
llev a bao mara por 15 minutos.
A. Reacciones
especficas
de
identificacin
Reaccin con Pb(CH3COO)2 Se

coloc 0.5 mL de extracto

etanlico de cebolla en un tubo de
ensayo , se agreg gotas de
FeCl3 . Se observ la coloracin
verde en frio ,rojo oscuro en
caliente
Reaccin con FeCl3

Se coloc 0.5 mL de extracto

etanlico de cebolla en un tubo
de ensayo, se agreg gotas de
FeCl3. Se observ el precipitado
de color amarillo

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3.2.

ANLISIS
CROMATOGRFICO

En la Tabla N 1 se muestra los resultados

obtenidos para la caracterizacin de
hesperidsido en la Naranja.

Sistema de solventes: Acetato de etilo:

metanol: agua (100: 13.5:10)
Revelador: Solucin etanlica de
cloruro frrico
Soporte: Slica gel
Estndar: Solucin de hesperidina
Muestra: Extracto seco de albedo de
naranja

IV.

RESULTADOS

4.1.
ANLISIS CUALITATIVO
4.1.1.
Hesperidsido:
En la figura 2, se detalla la preparacin
de los extracto seco de naranja.

pH 5

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pH
inicial

Tabla 1. Reacciones especficas de identificacin del

hesperidsido

Reaccin

Observacin

Resultad
o

H2SO4 cc

Coloracin
naranja

+++

HCl cc

Precipitad
o blanco

+++

Coloracin
pardo
rojizo

HNO3

NAOH 30%

Coloracin
amarillo
naranja

+++

Nota: positivo trazas (+), abundante (+++)

4.1.2. Rutinsido
En la figura 3, se detalla la preparacin de
los extractos de ruda.

Figura 3.Obtencin de rutinsidos. A. Hojas de Ruda; B.

Extracto Acuoso; C. Extracto Etanlico.

Figura 2. Preparacin del extracto seco de Citrus sinensis .

A. Maceracin alcohlica del albedo de naranja en un frasco
mbar por 7 das (izquierda) y decantacin del lquido de
maceracin (derecha) B. Acidificacin del macerado a pH 5
para la formacin de cristales C. Filtracin D. Secado de la
torta en una estufa por 1 da E. Obtencin del extracto seco
de hesperidina.

En la Tabla N 2 y 3 se muestran los

resultados
obtenidos
para
la
caracterizacin de Rutina de la Ruta
graveolens. En la figura 3 y 4 se visualiza
respuestas similares para las extracciones
acuosa y alcohlica.

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Tabla 2. Caracterizacin de rutina de la Ruta

graveolens, extraccin acuosa
DROGA

RUDA
Ruta
graveolens
Extracto
acuoso

REACCIN

OBSERVACIN

Wilson (Ac.
Brico +
Citrato de
sodio)

Coloracin
rosada.
Observacin en el
Uv: Fluorescencia
verde

Shinoda
Coloracin rosada
FeCl3
Coloracin verde
Nota: positivo trazas (+), abundante (++)

Tabla 3. Caracterizacin de rutina de la Ruta

graveolens, extraccin alcohlica
RESULT
ADOS

++

+
++

DROGA

RUDA
Ruta
graveolens
Extracto
alcohlico

REACCIN

OBSERVACIN

RESUL
TADOS

Wilson
(Ac.
Brico +
Citrato
de sodio)

Coloracin amarilla
rosada
Observacin en el
Uv: Fluorescencia
verde

++

Shinoda

Coloracin rosada

++

FeCl3

Coloracin verde

++

Nota: positivo trazas (+), abundante (++)

Figura 4. Caracterizacin del extracto acuoso de Ruta graveolens. A. Blanco (extracto acuoso); B. Extracto
con el reactivo de Wilson; C. Extracto con reactivo Shinoda; D. Extracto con solucin de FeCl3; E. Extracto
acuoso con el reactivo de Wilson observado en lmpara UV

Figura 5. Caracterizacin del extracto alcohlico de Ruta graveolens. A. Blanco (extracto alcohlico); B.
Extracto con el reactivo de Wilson; C. Extracto con reactivo Shinoda; D. Extracto con solucin de FeCl3; E.
Extracto acuoso con el reactivo de Wilson observado en lmpara UV

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4.1.3. Quercetinsido

4.2. ANLISIS CROMATOGRFICO

En la figura 6, se detalla la preparacin del

extracto etanlico de cebolla.

Debido a la probable contaminacin del

sistema de solventes no se determin
R.F ni de la muestra, ni del estndar de
hesperidina

Bf.

Figura 6. Extracto etanlico de cebolla. A. 2 g de

cascara de cebolla en 25 mL de acochol. B. Extraccin
por decoccin, en bao mara por 15 minutos. C.
Obtencin del extracto etanlico

En la Tabla N 4 se muestra los resultados

obtenidos para la caracterizacin de
quercetinsido en la cebolla
Tabla 4. Reacciones especficas de identificacin del
quercetinsido

Reaccin

Pb(CH3COO)2

Observacin

Resultado

Precipitado
de color
amarillo

+++

Coloracin
verde en
frio

Coloracin
rojo oscuro
en caliente

FeCl3

Nota: positivo trazas (+), abundante (+++)

Figura 7. Anlisis Cromatogrfico A. Cromatoplaca

observada en lampara UV. Bf. Bandas
fluorescentes. B. Revelado con solucin de FeCl3
bajo campana de extraccin C. Cromatoplaca,
revelada con FeCl3, vista a luz visible. D.
Cromatoplaca, revelada con FeCl3, vista a luz UV, no
se aprecian las fosforescencias iniciales.

En la Tabla N 5 se muestra que no se

obtuvo el R.F de la cromatografa, del
extracto seco de naranja Citrus sinensis
para la identificacin la hesperidina
Tabla 5. Resultado de la cromatografa del
hesperidsido

Hetersidos
Relacin de Flujo
flavonoides
(R.F)
Estndar
de No se determino
Hesperidina
Muestra
del No se determino
extracto seco de
albedo de naranja

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V. DISCUSIN
Las mltiples investigaciones que se han
realizado sobre la quercetina, evidencian
que este flavonol contiene un alto poder
antioxidante y est presente en extractos
vegetales como la cebolla tipo bulbo. 3
Generalmente, los solventes polares son
empleados en la extraccin de glicosidos o
agliconas.4 Por lo cual, en la prctica se
utiliz etanol como solvente de la
decoccin. As se obtuvo el extracto
alcohlico que se emplea en las reacciones
de identificacin cualitativa.
En la tabla 4 se observ que la muestra
presento coloracin amarilla al reaccionar
con Pb(CH3COO)2. Al reaccionar con FeCl3
en frio, se observ una coloracin verde,
mientras que luego de someterla a calor,
presento coloracin roja.5
La reaccin del FeCl3 con grupos fenlicos
puede dar lugar a la formacin de
compuestos coloreados, dado que los
grupos hidroxilo actan como activadores
del anillo bencnico al donarle densidad,
esto ocasiona que la aromaticidad del anillo
se
debilite,
adquiriendo
ms
las
caractersticas de un polieno conjugado.2
La aparicin de un color verde sugiere la
presencia de un derivado de catecol.4
La reaccin con el acetato de plomo se
fundamenta en formacin de un complejo
coloreado entre el plomo y los di y
polihidroxifenoles como las flavonas,
flavonoles, flavanonas dihidroxiladas,
flavanoles
y
antocianidinas
di
y
trihidroxiladas.2 Es as que se apreci un
ligero precipitado amarillo.
Para el experimento de la caracterizacin
de Rutina de la Ruta graveolen se
realizaron dos extractos: acuosos y
etanlico resultando reacciones positivas

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para ambos, que demuestra que los

rutinsidos son compuestos solubles en
agua y etanol debido a su carcter
fenlico,6 destacando prioritariamente en el
extracto alcohlico, por su solubilidad
relativamente alta7 por ser el rutinsido un
flavonoide. Entre las reacciones de anlisis
cualitativo que se llevaron a cabo podemos
mencionar a la reaccin de Shinoda,
donde el magnesio metlico es oxidado
por el HCl concentrado, dando como
productos al H2, que es eliminado en forma
de gas y el MgCl2, que es el que forma
complejos con los flavonoides dando
coloraciones caractersticas6, esto fue
evidenciable en la prctica ya que el
rutinsido por ser un flavonol (quercetin 3rutinoside)8 dio una coloracin amarillenta,
la cual fue mucho ms notoria en la
reaccin con el extracto etanlico debido a
que el magnesio divalente intensific la
coloracin
por
estar
doblemente
coordinado en presencia de una alta
concentracin del rutinosido. Adems, se
logr observar una fluorescencia verde en
una cmara UV que demuestra su intensa
absorcin en la regin ultravioleta
(340nm)8, esto debido a los sistemas
aromticos conjugados6 presente en la
estructura de rutinsido.
En la tabla 1, los resultados en la
coloracin con los reactivos usados para el
anlisis de Hesperidina en la Naranja
(Citrus sinensis) dieron positivo sin
excepcin, por parte del cido ntrico la
coloracin result parda rojiza pero con
una intensidad baja, esto pudo deberse a
que el cido a pesar de ser fuerte no se
encontraba en la concentracin ptima. 9
En el caso de la reaccin de Shinoda, el
extracto de ruda en contacto con cido
clorhdrico con virutas de magnesio
metlico se genera hidrgeno, este ltimo
reduce al flavonoide (rutina), lo cual se

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reconoce por la coloracin rosada. En la

reaccin de coloracin con FeCl3, la
muestra de extracto de ruda cambio a una
coloracin verde. Esto se debe a que la
naturaleza polifenlica de los flavonoides,
especficamente compuestos con ortodifenoles, lleva a la formacin de
coloraciones variadas en presencia de
FeCl3, que en este caso por presentar
rutina, produce una coloracin verde . 9

VI. CONCLUSIONES
-

Se
reconoci
cualitativamente
hesperidina en albedo de naranja,
Citrus sinensis, mediante las
reacciones con cido sulfrico
concentrado,
cido
clohdrico
concentrado,
cido
ntrico
e
hidrxido al 30% mientras que por el
mtodo cromatogrfico no se
corrobor la presencia de este tipo
de hetersido flavonoide.
Se identific cualitativamente los
flavonoides, de tipo quercetina en la
cascara de cebolla por medio de la
reaccin de acetato de plomo y
cloruro frrico.
Se evalu la presencia de
hetersidos flavonoides de tipo
quercetn3-rutinside (flavonol) en
Ruta graveolens mediante anlisis
cualitativo.

VII.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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