Christian Dennis Olvera Torres

Omar Radhames Urqudez Calvo

Biologa Celular

Prctica No.1
Manejo, Cuidado y Uso del Microscopio

1. Observacin de las esferas de vidrio. (fotos o dibujos).

Fig. Esferas de vidrio en agua

2. Diferencias de clulas teidas y sin teir.

Clulas epiteliales de la boca (fotos o dibujos).

Conclusin:
A. Iluminacin de Khler
La iluminacin Khler elimina la iluminacin dispareja en el campo de observacin
para que todas las partes de la fuente de luz contribuyan a la iluminacin del
espcimen y permite el funcionamiento del microscopio.
B. Esferas de vidrio
El medio de aceite es mejor para la observacin de las esferas, debido a la mayor
apreciacin de los detalles en comparacin al agua y al aire, siendo ste ltimo el
peor.
C. Clulas teidas y sin teir
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Las tinciones nos brindan contraste, por ende las clulas no teidas son poco
visibles y esquivas a la vista, mientras que las clulas teidas estaban bien
diferenciadas y era posible su observacin.

Cuestionario
1.

Cules son los sistemas que componen el microscopio de luz? Indica

sus partes de cada sistema.

Sistema Mecnico
La parte mecnica del microscopio comprende el pie o la base, el tubo, el revlver,
el asa, la platina, el carro y el tornillo micromtrico. Estos elementos sostienen la
parte ptica y de iluminacin; adems, permiten los desplazamientos necesarios
para el enfoque del objeto.
Pie o soporte: sirve como base al microscopio y en l se encuentra la fuente de
iluminacin.
Platina: superficie sobre la que se colocan las preparaciones. En el centro se
encuentra un orificio que permite el paso de la luz. Sobre la platina hay un
sistema de pinza o similar, para sujetar el portaobjetos con la preparacin, y
unas escalas que ayudan a conocer qu parte de la muestra se est observando.
La platina presenta 2 tornillos, generalmente situados en la parte inferior de la
misma, que permiten desplazar la preparacin sobre la platina, en sentido
longitudinal y transversal respectivamente.
Tubo: cilindro hueco que forma el cuerpo del microscopio. Constituye el
soporte de oculares y objetivos.
Revlver: estructura giratoria que contiene los objetivos.
Brazo o asa: une el tubo a la platina. Lugar por el que se debe tomar el
microscopio para trasladarlo de lugar.

 Tornillo macromtrico o de enfoque grosero: sirve para obtener un primer

enfoque de la muestra al utilizarse el objetivo de menor aumento. Desplaza la
platina verticalmente de forma perceptible.
Tornillo micromtrico o de enfoque fino: sirve para un enfoque preciso de
la muestra, una vez que se ha realizado el enfoque con el macro mtrico.
Pinzas: son dos piezas metlicas que sirven para sujetar el objeto. Se
encuentran en la platina.

Sistema Mecnico
Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de
lentes que lo componen. Est formado por el ocular y los objetivos. El objetivo
proyecta una imagen de la muestra que el ocular luego ampla.
Oculares: son los sistemas de lentes ms cercanos al ojo del observador,
situados en la parte superior del microscopio. Son cilindros huecos provistos de
lentes convergentes cuyo aumento se resea en la parte superior de los mismos
(normalmente 10X en los microscopios que se utilizarn en esta prctica).
Dependiendo de que exista uno o dos oculares, los microscopios pueden se
mono o binoculares.
Objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revlver y producen
el aumento de las imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan
cerca de la preparacin que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente
son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersin.

Objetivos secos: se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre

ellos y la preparacin. En la cara externa llevan una serie de ndices que
indican el aumento que producen, la abertura numrica y otros datos. As, por
ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que
el objetivo es planacromtico, su aumento 40 y su apertura numrica 0,65,
calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El nmero de objetivos vara
con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los
objetivos secos ms frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.

Objetivo de inmersin: est compuesto por un complicado sistema de

lentes. Para observar a travs de este objetivo es necesario colocar una gota
de aceite de cedro entre el objetivo y la preparacin, de manera que la lente
frontal entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos
son de 100X y se distingue por uno o dos crculos o anillos de color negro que
rodea su extremo inferior

Sistema de Iluminacin
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera
que ilumine la preparacin u objeto que se va a observar en el microscopio de la
manera adecuada. Comprende los siguientes elementos:

 Condensador: sistema de lentes convergentes que capta los rayos de luz y los
concentra sobre la preparacin, de manera que proporciona mayor o menos
contraste. Se regula en altura mediante un tornillo (letra J de la figura).
Fuente de iluminacin: en los microscopios a utilizar, el aparato de
iluminacin est constituido por una lmpara halgena de bajo voltaje (12V)
situada en el pie del microscopio. La luz procedente de la bombilla pasa por un
reflector que enva los rayos luminosos hacia la platina.
Diafragma o iris: sobre el reflector de la fuente de iluminacin. Abrindolo o
cerrndolo permite graduar la intensidad de la luz

2. A qu se le llama poder de resolucin?

El poder de resolucin es la distancia ms pequea entre dos puntos los
cuales pueden ser vistos como separados. Tiene que ver con la calidad
ptica con la cual una lente permite discriminar los detalles finos de un
espcimen.

3. Cul es el lmite de resolucin del ojo humano, del microscopio de luz y el

microscopio electrnico?
El ojo humano tiene una
resolucin cerca de 100m.
Mientras que el microscopio
ptico tiene un lmite de
resolucin cerca de 200 nm
(0.2 m). Este lmite se debe a
la longitud de onda de la luz
(0.4-0.7 m).
Adems, los microscopios
electrnicos
se
dividen
principalmente en 2 grupos donde cada uno tiene un poder de resolucin distinto:

El microscopio electrnico de transmisin (MET) tiene un lmite de resolucin

de cerca de 2 nm. Esto es debido a limitaciones del lente usado para enfocar
electrones hacia la muestra.

El microscopio electrnico de barrido (MEB). Su resolucin est entre 4 y 20

nm, dependiendo del microscopio.

4. Indique las caractersticas de las diferentes microscopias de luz y electrnica.

Microscopia
Caractersticas
de luz
Campo claro Es el mtodo de microscopa ptica ms usual, ya que con su
ayuda se pueden observar sencilla y rpidamente los preparados
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bien contrastados o teidos.

En este tipo de microscopa se obstruyen los haces centrales de
luz, iluminando solo la periferia de la preparacin.

Campo
Obscuro

Contraste
de Fases

Fluorescenci
a

Luz
Polarizada

Solamente los rayos de luz difractados y dispersados por el

objeto penetran en el objetivo, mientras que los haces de luz
directos, no influenciados, pasan por delante del objetivo.
Esta forma de iluminacin se utiliza para analizar elementos
biolgicos transparentes y sin manchas, invisibles con
iluminacin normal. Ideal para observar clulas vivas y
estructuras principalmente externas cilios y flagelos.
El principio es semejante al de campo oscuro; se ilumina la
muestra con un cono hueco de luz pero mucho ms estrecho. Se
emplea un filtro en forma de anillo que disminuye la intensidad
de la luz y al mismo tiempo provoca un retraso o desfase en la
longitud de onda de la luz.
Los heterogneos componentes celulares absorben la luz de
diferente manera y causan pequeas variaciones de fase en las
radiaciones luminosas, es decir, las retrasan ligeramente al
disminuir la velocidad a la cual viajan y el retraso vara segn el
tipo de estructura.
Es ideal para espcimenes delgados, o clulas aisladas pues este
tipo de iluminacin provoca variaciones minsculas en el ndice
de refraccin de un espcimen transparente, hacindolo visible.
Tcnica microscpica que hace uso de sustancias naturales de
algunas clulas, o bien, de fluorocromos (colorantes
fluorescentes) que en contacto con la muestra se adhieren
especficamente a alguna zona.
Al ser iluminado con luz ultravioleta y con filtros adecuados, el
fluorocromo absorbe la energa y luego la emite en el rango de la
zona visible.
Es un microscopio de campo claro al cual se le adicionan filtros
que modifican la luz, aprovechando la propiedad ptica de
birrefringencia que poseen ciertas sustancias.
La luz proveniente de una fuente estndar de iluminacin vibra y
se propaga en todas las direcciones, pero al pasar por un filtro
polarizador las ondas y su campo elctrico oscilan todos en un
mismo plano. El polarizador es un dispositivo que solo deja pasar
la luz que vibra en un plano determinado denominado eje de
polarizacin.
El contraste de la imagen se observa gracias a la interaccin de
la luz polarizada con los elementos birrefringentes del espcimen
que producen las dos ondas refractadas, cada una de ellas
polarizada en planos perpendiculares.
Este tipo de microscopio se usa para poder identificar mejor
5

Confocal

Estereoscpico

sustancias cristalinas o fibrosas.

La microscopa confocal, a diferencia de la microscopa de
fluorescencia convencional, permite eliminar la seal
fluorescente que proviene de una muestra semitranslcida y que
est fuera de foco, mediante lser.
Esto permite conseguir, de forma no destructiva, secciones
pticas a diferentes planos de la muestra que pueden ser
utilizadas para hacer un anlisis tridimensional o para la
observacin de una parte interna de la muestra.
El microscopio estreo o "microscopio de diseccin" es un
microscopio ptico utilizado para una visin tridimensional.
Capturando la luz con dos objetivos, los microscopios estreos
permiten mejores estudios de un espcimen grueso.
Capaz de permitir la observacin de superficies oscuras, las
funciones del microscopio estreo permiten ver dos rayos de luz
haciendo un efecto visual estreo.
Los microscopios estreos no son muy populares, la habitual
magnificacin no es ms grande que 100 y 10 veces del tiempo
promedio.

Microscopia
electrnica

Caractersticas
En esta tcnica la preparacin teida es traspasada por un haz
de electrones, lo cual proporciona la imagen ultra fina sobre
una pantalla ad hoc.

Transmisin

Barrido

El microscopio electrnico de transmisin es capaz de generar

un haz de electrones a alta tensin (80kV) y concentrarlo sobre
la preparacin mediante un complejo sistema de campos
electromagnticos equivalentes a las "lentes" del microscopio
de luz.
En el microscopio electrnico de barrido (MEB) la muestra es
recubierta con una capa de metal delgado, y es barrida con
electrones enviados desde un can.
Un detector mide la cantidad de electrones enviados que arroja
la intensidad de la zona de muestra, siendo capaz de mostrar
figuras en tres dimensiones, proyectados en una imagen de TV.
Su resolucin est entre 3 y 20 nm, dependiendo del
microscopio. Permite obtener imgenes de gran resolucin en
materiales ptreos, metlicos y orgnicos.

La luz se sustituye por un haz de electrones, las lentes por

electroimanes y las muestras se hacen conductoras
Christian Dennis Olvera Torres
metalizando su superficie.
Biologa Celular
Omar Radhames Urqudez Calvo

PRACTICA No. 2

Observacin de Clulas Eucariotas

Resultados
Haz esquemas de las clulas que observaste, indicando el aumento usado.
Seala las partes en cada tipo de clula y marca las diferencias entre ellas.

Ncleo

Pared Celular

Citosol

Ncleo

Citosol

. Diferencias Observadas .
Su tamao es
considerablemente menor.

Conclusin:

Posee un tamao
ms significativo.
Forma de celda.

Figura amorfa
cercana a la
esfrica.

Cuenta con
pared celular.

Sin pared celular

Distribucin
uniforme

Posiciones

Las clulas eucariotas de origen animal y vegetal son claramente distinguibles

entre s debido a su composicin.

Discusin:
Las principales diferencias que podemos observar son que las clulas animales
carecen de paredes celulares y de cloroplastos, mientras que sus centrolos y
vacuolas ms pequeas y, generalmente, ms abundantes.
Adems, gracias a la vacuola central grande de la clula vegetal, sta mantiene su
forma y controla el movimiento de molculas entre citosol y savia. Debido a la
carencia de pared celular rgida, las clulas animales pueden adoptar una variedad
de formas e incluso pueden fagocitar otras estructuras.