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FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

RED NACIONAL UNIVERSITARIA


UNIDAD ACADMICA DE SANTA CRUZ

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

BIOQUMICA Y FARMACIA
CUARTO SEMESTRE

GUIA DE PRACTICAS DE LA ASIGNATURA DE


FARMACOGNOSIA

Elaborado por: Dra. Victoria MornLazarte


Gestin Acadmica II /2015

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GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 1


LABOATORIO # 1
TITULO: Normas de Bioseguridad
FECHA DE ENTREGA: 2 semana de clases
PERIODO DE EVALUACIN: 6 semana de clases

No entrar en el laboratorio sin que est presente el profesor o responsable.


Seguir las instrucciones del profesor o persona responsable, no se arriesgue, si no sabe

pregunte al profesor.
Estudiar cada experiencia antes de llevarla a cabo.
Mantener una actitud responsable, no se deben gastar bromas, correr ni gritar.
Comprobar la ubicacin de todos los materiales, reactivos e insumos de laboratorio
Observe atentamente las etiquetas de los reactivos antes de utilizarlos
Presuma que todos los reactivos son venenosos, no los pruebe, toque o huela a menos

que reciba instrucciones especficas de hacerlo.


Rotular debidamente todos los materiales de trabajo para evitar confusiones.
No contaminar los reactivos, en especial los que se encuentran en su envase original.
No se debe mantener reactivos inflamables cerca del fuego.
Al calentar un tubo de ensayo nunca dirija la boca hacia el cuerpo de otra persona.
No distraiga a sus compaeros de trabajo.
Al botar residuos al desage deje caer abundante agua.
Lavar profusamente todos aquellos materiales que han estado en contacto con sustancias

corrosivas o toxicas.
Nunca eche agua sobre un cido concentrado.
No pipetee los reactivos con la boca.
En caso de sufrir algn accidente o quemadura informe inmediatamente al profesor.
No comer, beber o fumar en el laboratorio de prcticas
No usar lentes de contacto.
No debe usar pulseras colgantes o prendas sueltas
Queda completamente prohibido la mezcla de cualquier sustancia que no este
debidamente indicada en su gua de laboratorio.

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El mesn de trabajo y los materiales utilizados deben quedar limpios al finalizar la prctica

(lavar con agua y detergente).


Lavar las manos antes de abandonar el laboratorio.
INSTRUCCIONES GENERALES DEL LABORATORIO

1. El ingreso a laboratorio es puntual y de forma ordenada.


2. El estudiante que no ingrese a laboratorio no puede presentar su informe de laboratorio
porque no estuvo presente en la prctica.
3. Para poder ingresar a laboratorio el estudiante deber estar provisto de:
a) Una bata blanca manga larga
b) Pantaln y zapatos cerrados.
c) Cuaderno de anotaciones (libreta pequea de bolsillo)
d) Un toalla pequea para limpieza
e) Papel absorbente (higinico o kleenex)
f)

Una caja de fsforos

g) Un lapicero y un lpiz
h) Un marcador de vidrio
i)

El pelo recogido

j)

Un reloj en la mueca de la mano

4. Se tomara un examen previo oral antes de iniciar cada prctica de laboratorio para verificar
si el estudiante conoce el desarrollo completo de la prctica as como tambin su
fundamentacin terica, esto buscando un desarrollo seguro de la prctica y garantizar que
se realiza un aprendizaje significativo y no una mera repeticin de lo escrito.
5. Los mesones de trabajo deben estar limpios y libres de cualquier objeto ajeno a la prctica,
no se puede colocar sobre ellos bolsos, mochilas, ropa, cuadernos, maquillaje, celulares,
etc.
6. Para el trabajo en laboratorio el primer da de clases se formaran grupos de laboratorio,
que deben mantenerse hasta el final, registrando el docente los nombres de los
integrantes.
7. Los estudiantes deben completar con todo lo registrado durante la prctica, los Gips,
formular

la

conclusin,

responder

el

respectivo

cuestionario

colocar

la

bibliografa.RECORDAR QUE LOS GIPS SE SELLARAN EN CADA CLASE DE


LABORATORIO

DEBEN

PRESENTARSE

AL

INGRESAR

AL

EXAMEN

DE

LABORATORIO.
8. Los estudiantes al recibir los materiales de laboratorio deben verificar el estado de estos y
si hubiera alguna rotura o deterioro informar al responsable. Al terminar la prctica los
materiales deben ser entregados en las mismas condiciones. Si alguno de los materiales

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se rompiera o dejara caer el grupo a cargo se hace responsable de su devolucin a la


universidad en la siguiente clase y deber pasar por la jefatura de laboratorio a registrar el
nombre.
9. Al recibir sus materiales debe lavarlos con detergente y cepillo, realizar un primer enjuague
con agua de grifo, un segundo enjuague con agua destilada y finalmente con etanol al 70
%, para facilitar el secado. De la misma forma se realiza la limpieza del mesn.
10. El mesn de trabajo y los materiales, se deben entregar lavados con detergente y agua de
grifo, y secos.
CUESTIONARIO

1.- Dibuje una etiqueta de reactivos de laboratorio con las partes que debe
tener.
R.-

2.- Dibujar los pictogramas de seguridad utilizados en laboratorio


R.-

3.- Investigar cuales son los residuos que se eliminan a la bolsa roja, negra y
amarilla (azul).
R.-

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4.- Indique en laboratorio como procede a diluir una acido concentrado en


laboratorio.
R.-

5.- Investigar que se debe realizar en caso de accidente con un cido y un


lcali por va externa y por va interna.
R.-

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GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 2


LABORATORIO 2
TITULO: Estudio de Plantas medicinales
FECHA DE ENTREGA: 3 semana de clases
PERIODO DE EVALUACIN: 5 semana de clases
2.1.- OBJETIVOS
-

Describir el origen y distribucin de plantas medicinales ms utilizadas en nuestro medio.


Investigar las propiedades fisicoqumicas de la planta medicinal estudiada y relacionar los

compuestos qumicos presentes con la accin farmacolgica de la planta.


Socializar los usos farmacolgicos que tiene la especie vegetal estudiada.

2.2.- PARTE EXPERIMENTAL


Cada grupo de laboratorio debe realizar una investigacin de una planta medicinal en base a los
siguientes parmetros:
-

Nombre cientfico
Droga vegetal utilizada
Descripcin botnica de la planta
Origen
Distribucin
Necesidades nutricionales y climatolgicas durante el cultivo
Compuestos qumicos presentes y su relacin con la actividad farmacolgica que presenta

la especie vegetal
Formas farmacuticas

Calificacin:

Presentacin del tema


Dominio del tema
Pedagoga de enseanza
Droga vegetal
Elementos complementarios

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 3

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LABORATORIO 3
TITULO: Extraccin e identificacin de almidn
FECHA DE ENTREGA: 6 semana de clases
PERIODO DE EVALUACIN: 6 semana de clases
3.1.- OBJETIVOS

Extraer el almidn proveniente de diferentes fuentes naturales (cereales y tubrculo)


Determinar el origen vegetal del almidn segn sus caractersticas microscpicas por

comparacin con datos bibliogrficos.


Identificar qumicamente el almidn.

3.2.- FUNDAMENTO TEORICO


3.2.1.- Caractersticas qumicas
El almidn, es un polisacrido de reserva de vegetales. Se trata de un polmero de glucosa,
formado por dos tipos de molculas: amilosa (20 a 30%), ligadas a travs de un enlace (1 - 4)
para formar un polmero lineal, que se encuentra enrollado en forma de hlice, y amilopectina (80 a
70%), formado por enlaces (1 4) y (1 6) formando un polmero altamente ramificado. El
almidn da una coloracin azul intenso con soluciones de yodo. Puede ser hidrolizado mediante la
accin enzimtica (amilasa) o en presencia de soluciones acidas, dando molculas de glucosa, que
fcilmente puede ser identificado con el reactivo de fehling, Tollens y otros.
3.2.2.- Propiedades fsicas
El almidn se presenta en masas irregulares, angulosos, en forma de polvo blanco. Es insoluble en
agua fra, pero forma una solucin coloidal por ebullicin, por enfriamiento se forma una jalea
traslcida conocido como engrudo de almidn. El engrudo de almidn se colorea en azul intenso
con solucin de yodo, color que desaparece por calentamiento a 93 C, reapareciendo por
enfriamiento.
3.2.3.- Caractersticas Microscpicas
El almidn formado en la clula vegetal, se acumula en forma de granos que van creciendo a partir
de un punto o hilo, que puede ser central o excntrico. Los granos con hilo excntricos suelen ser
ms largos que anchos.

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Figura 2: Grnulos de almidn en la celula


El grano de almidn se forma a partir de capas sucesivas que giran alrededor del hilo, pudiendo
observarse claramente la presencia de anillos o estriaciones concntricas, siendo estas
importantes para la caracterizacin e identificacin. El aspecto final del grano de almidn es
variable y caracterstico de un vegetal, como se puede detallar a continuacin:
a) Almidn de Papa
Proveniente del tubrculo Solanumtuberosum L. (Solanceas). Son granos aislados de forma
ovoide, tamao variable, hilo excntrico situado en la parte ms estrecha del grano y estras
visibles.
b) Almidn de Maz
Proveniente de los frutos del Zea mays L. (Gramneas). Son granos aislados o en grupos de 2 a 3,
forma polidrica, tamao ms o menos uniforme (15 ), con hilo central y sin estras visibles.
c) Almidn de Arroz
Proveniente de Oryza sativa L. (Gramneas). Son granos aislados o compuestos, estos granos
compuestos se disocian fcilmente frotando ligeramente el cubre sobre el portaobjeto. Forma
polidrica, tamao alrededor de 5 , hilo central, sin estras visibles.
d) Almidn de Trigo
Proveniente de Triticumsativum L. (Gramneas). Son granos aislados de forma ms o menos
redondeada, tamao variable, granos pequeos de 2 20 y granos grandes de alrededor de 30
, hilo central, estriaciones concntricas pero bien dbiles.
e) Almidn de Yuca
Proveniente del tubrculo Manihot utilsima (Eurphorbiaceae). Son granos de 2 a 7 corpsculos
reunidos. La superficie de contacto de unos con otros son planas, la mayora son subesfricas o
redondas-polidricas, presenta hilo punteado o hendido y estriaciones concntricas.
f) Almidn de Leguminosas
Granos de forma generalmente arrionada y estratificaciones concntricas muy visibles. En el
centro presentan una gran hendidura de la cual parten hacia la periferia del grano una serie de
ranuras radiales, cortas y anchas tomando el aspecto de palo bifurcado, todas las leguminosas
tienen el mismo tipo de almidn diferencindose solo en el tamao.

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Figura 2: Grnulos de almidn A) Papa; B) Maz; C) Avena; D) Trigo


3.3. PARTE PRCTICA
Las muestras vegetales a utilizar sern proporcionadas por el grupo # 1 de laboratorio, sin ninguna
excusa.

1 Papa
1 Cuchillo
1 Rallador

1/8 kilo Arroz


1/8 kilo Maz blanco
1/8 kilo trigo
Yuca

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NOTA IMPORTANTE: Si el grupo asignado no trae las muestras vegetales se queda sin
nota para esta prctica, en informe, examen previo y examen de laboratorio.
Cada grupo de laboratorio debe llevar su muestra de almidn extrado y traerla todas las
clases hasta finalizar esta prctica.

1.

EXPERIENCIA N 1
EXTRACCION DEL ALMIDON
PROCEDIMIENTO
Si se parte de cereales, triturar a polvo grueso, si es a partir de tubrculos, primeramente

lavar y rallar para hacer como especie de papilla.


2. En primer caso (polvo triturado), tamizar.
3. El polvo obtenido, o la papilla, se deja remojar en agua destilada, para que los granos de
almidn (parte solida) pase a la fase liquida (agua destilada).
4. Dejar en reposo durante media hora para completar la disolucin de los granos de almidn
en la fase liquida.
5. Lavar con tres aguas, las aguas del lavado se guardan, debido a que los granos se
6.
7.
8.
9.

encuentran sobrenadando en este medio.


Dejar reposar durante media hora, los granos de almidn sedimentan como polvo blanco.
Decantar toda el agua.
Se recoge todo el polvo blanco obtenido en papel filtro.
Se deja secar.

EXPERIENCIA N 2
IDENTIFICACION MICROSCOPICA
Los almidones pueden ser caracterizados mediante un examen microscpico. Los granos
de almidn tienen un tamao, forma y estructura determinada, segn su procedencia. Por
lo que es posible distinguir los almidones procedentes de especies distintas segn sus
caractersticas.

a) Se debe observar las siguientes caractersticas:


b) Estado del grano (aislado o en masas de formas definidas).
c) Forma y dimensin.
d) Presencia o ausencia de hilo, su forma y posicin.
e) Presencia o ausencia de estras.

PROCEDIMIENTO

1. Realizar un montaje con agua


2. En un portaobjeto, colocar una gota de agua destilada
3. Suspender en esta gota una pequea porcin de la muestra
4. Cubrir con un cubre objeto, evitando la formacin de burbujas de aire
5. Observar al microscopio con objetivo 40 X

6. Describir las caractersticas observadas

EXPERIENCIA N 3

CARACTERIZACION QUIMICA

La amilosa reacciona con el yodo formando un complejo de color azul intenso, mientras
que la amilopectina presenta coloracin azul-violeta en presencia de yodo.

HIDRLISIS ACIDA DEL ALMIDON


La hidrlisis acida del almidn tiene lugar utilizando cidos inorgnicos; esta degradacin
acida, da lugar a varios compuestos intermedios, antes de obtener la glucosa.
Durante el proceso de la hidrlisis tanto la amilosa como la amilopectina se van
desdoblando o rompiendo los enlaces (1-4) en el primer caso, y los enlaces (1-6) en el
segundo caso, dando lugar a la formacin de polisacridos de cadena corta pero
ramificadas las llamadas dextrina, que segn el color que dan al reaccionar con el yodo en
solucin de Lugol, se denomina:

Amilodextrina + I2 = Rojo violeta


Eritrodextrina + I2 = Rojo
Acrodextrina + I2 = Amarillo (color del lugol)

PROCEDIMIENTO
1. Tomar 1g de almidn obtenido, preparar una suspensin en 10 ml de agua, obtenindose
una suspensin lechosa.
2. Llevar a ebullicin 200 ml de agua, verter los 10 ml de suspensin del almidn, hasta que
se torne transparente la suspensin.
3. Tomar de esta solucin 5 ml y dividir en dos tubos, en el primer tubo se aade 1 gota de
lugol, al segundo tubo 0.5 ml del reactivo de fehling (Fehling A: CuSO4 disuelto en H2O y
Fehling B: NaOH y tartrato Na-K disueltos en agua ), observar las reacciones (fehling
reacciona en medio bsico).
4. Al resto de la solucin que continua en ebullicin se agrega 5 ml de HCl concentrado,
pasados 5 minutos se procede a tomar 5 ml. Se divide en dos tubos y se siguen los
mismos pasos indicados en la anterior etapa.
5. Continuar con los pasos ya indicados hasta observar en el tubo con la solucin de lugol un
color amarillo y el tubo con el reactivo de fehling aparece un precipitado anaranjado o rojo
ladrillo, que indican que se llev a cabo la hidrlisis total, dando por consiguiente la
siguiente reaccin.
CuSO4 +

2NaOH

Cu(OH)2

Na2SO4(azul)

Cu (OH)2 +

RCOH

Cu2O

RCOOH+H2O(rojo ladrillo)

6. Esta reaccin indica la presencia de molculas de glucosa; dando lugar por consiguiente a
la reaccin de xido reduccin.

3.4. DESARROLLO DE LA PRCTICA

3.5.- CONCLUSION

3.6.- CUESTIONARIO

1.- Realice un flujograma de la extraccin del almidn


R.

2.- La hidrolisis del almidn, se realiza mediante cidos fuertes y enzimas, indique cul de
ellas produce una hidrolisis parcial y cul de ellas produce una hidrolisis total, explique el
proceso.
R.


3.- Indique el mecanismo por el cual un azcar simple como la glucosa da color rojo ladrillo
durante su identificacin por fehling
R.

4.- Puede usarse HNO3 como medio acido para la reaccin de fehling?
R.

3.7.- BIBLIOGRAFIA

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD

GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 4

LABORATORIO 4

FECHA DE ENTREGA: 9 semana de clases

PERIODO DE EVALUACIN: 12 semana de clases

TITULO: Factores que influyen en la extraccin de


productos naturales.

4.1. OBJETIVO
Evaluar el proceso de extraccin de los productos naturales a partir de fuentes vegetales
en funcin de factores tales como: tipo de solvente, tiempo de extraccin, numero de
extracciones, pH del medio y estado de agregacin de la muestra.

4.2. FUNDAMENTO TEORICO


El termino extraccin significa retirar de la forma ms selectiva y lo ms completamente
posible las sustancias o fracciones activas contenidas en una muestra vegetal.

4.3. FACTORES QUE INFLUYEN EN EL PROCESO DE EXTRACCION


Existen muchos factores que influyen en el proceso de extraccin, entre ellos tenemos:
4.3.1. Solvente
El solvente utilizado debe ser eficiente y selectivo, gracias a la selectividad se puede
extraer la sustancia deseada (principios activos), la selectividad depende de la polaridad
del solvente, por lo tanto, conociendo la polaridad de las sustancia a extraer, se determina
el tipo de solvente a utilizar en la extraccin. Cuando no se conoce la polaridad de la
sustancia a extraer, sometemos la muestra vegetal a varias extracciones consecutivas con
solventes de polaridad creciente, obteniendo as una extraccin fraccionada, donde cada
fraccin contiene tambin compuesto de polaridad creciente.
4.3.2. Estado de divisin de la droga

Cuanto menor sea el tamao de las partculas, mayor la superficie de contacto entre la
sustancia a extraer y el solvente extractor.
4.3.3. Agitacin
La eficiencia de extraccin, es funcin del equilibrio de saturacin del solvente en las
proximidades de la membrana celular, por lo tanto, es evidente la ayuda de agitacin en el
cambio de solvente extractor, para alcanzar nuevo equilibrio de saturacin.
4.3.4. Temperatura
Generalmente el aumento de temperatura, aumenta la solubilidad de las sustancias, por lo
tanto, la eficiencia de extraccin.
4.3.5. pH
Muchas sustancias contenida en las clulas vegetales, tienen propiedades acidas o
bsicas, consecuentemente es recomendable su extraccin en solventes en medio acido o
bsico.
4.3.6. Otros
Entre otros factores tenemos: el tiempo de extraccin, numero de extracciones, etc.

4.4. PARTE EXPERIMENTAL


Las muestras vegetales que se utilizaran en esta prctica deben ser tradas a laboratorio
por el grupo # 2.
Las muestras vegetales a utilizar:
Semillas de uruc (Bixa Orellana)
Hojas de coca (Erithroxylum coca)
Los metabolitos a extraer y su correspondiente prueba de reconocimiento son: pigmentos
carotenoides del uruc mediante colorimetra visual y alcaloides de la coca mediante
reactivo cidos.
NOTA IMPORTANTE: Si el grupo asignado no trae las muestras vegetales se queda sin
nota para esta prctica en informe de laboratorio, examen previo y examen de laboratorio.
4.4.1. EXPERIENCIA No 1
Extraccin en funcin del tipo de solvente

Colocar 5 semillas de uruc en cada uno de 3 tubos de ensayo.


Agregar al primero 2 ml de agua destilada (agitar)
Agregar al segundo tubo 2 ml de etanol al 96 (agitar)
Agregar al tercer tubo 2 ml de Acetona (agitar)
Observar en que solvente se realiza la mayor extraccin de carotenoide

4.4.2. EXPERIENCIA No 2
Extraccin en funcin del tiempo de extraccin

Colocar 5 semillas de uruc en 3 tubos de ensayo


Agregar a cada tubo 2 ml de etanol al 96%

Dejar macerar el primer tubo por 1 minuto y luego separa el sobrenadante


Dejar macera el segundo tubo por 3 minutos y luego separar el sobrenadante
Dejar macerar el tercer tubo por 6 minutos y luego separar el sobrenadante

4.4.3. EXPERIENCIA No 3
Extraccin en funcin del nmero de extraccin

Identificar un tubo de ensayo con 1 extraccin


Identificar otro tubo de ensayo con 5 extracciones
Colocar 5 semillas de uruc en cada uno de los tubos de ensayo etiquetados
Al tubo 1 extraccin agregar 10 ml de etanol al 96%
Dejar extraer durante 5 minutos con agitacin ocasional y luego decantar a otro tubo.
Al tubo 5 extracciones agregar 2 ml de etanol al 96 %
Dejar extraer durante 5 minutos con agitacin ocasional
Decantar el sobrenadante a otro tubo de ensayo
Repetir esta operacin con este mismo tubo por 5 veces
Comparar el extracto del tubo 1 extraccin con extracto del tubo 5 extracciones
Observar e interpretar los resultados obtenidos

4.4.4. EXPERIENCIA No 4
Extraccin en funcin del pH del medio
Identificar 3 tubos de ensayo de la siguiente manera: Tubo 1, Tubo 2 y Tubo 3
Colocar 5 semillas de uruc en cada uno de los tres tubos de ensayo
Al Tubo 1 agregar 2 ml de H2O (d)
Al Tubo 2 agregar 2 ml de solucin acuosa de HCl
Al tubo 3 agregar 2 ml de solucin acuosa diluida de NaOH
Dejar extraer durante 5 minutos con agitacin ocasional
Observar e interpretar los resultados obtenidos

Repetir este mismo procedimiento utilizando hoja de coca triturada en lugar de semillas de
uruc.
4.4.5. EXPERIENCIA No 5
Extraccin en funcin del estado de agregacin de la muestra
Identificar dos tubos de ensayo de la siguiente manera: Tubo 1 y Tubo 2
En el Tubo 1 colocar una hoja de coca entera
Agregar 2 ml de NaOH diluido
Dejar extraer por 5 minutos con agitacin ocasional
Al Tubo 2 colocar un hoja de coca triturada
Agregar a este tubo 2 ml de NaOH diluido
Dejar extraer por 5 minutos con agitacin ocasional
Observar e interpretar los resultados obtenidos comparando los tubos

4.5. DESARROLLO DE LA PRACTICA

1.

2.

3.

4.

4.6. CONCLUSION

4.7. CUESTIONARIO
Explique cul es el medio de mejor extraccin para alcaloides.
R.

Explique porque al agitar se logra mejor extraccin de la muestra vegetal


R.

La Bixa Orellana, es acida o bsica, explique cmo ha llegado a esta conclusin


R.

Realice los clculos para preparar 125 ml de solucin 0,2 N en H2SO4, a partir de un
cido concentrado de laboratorio con un 98% de pureza y 1,84 g/ml de densidad.
R.

5. Realice los clculos para preparar 75 ml de solucin 0,22 M de KOH


R.

4.7. BIBLIOGRAFIA

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD

GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 5

LABORATORIO 5

TITULO: Extraccin de cafena

FECHA DE ENTREGA: 10 semana de clases

PERIODO DE EVALUACIN: 12 semana de clases

5.1.- OBJETIVOS

Extraer la cafena a partir de t negro, utilizando diferentes mtodos.


Caracterizar microscpicamente los cristales de cafena.
Identificar qumicamente la cafena.

5.2.- FUNDAMENTO TEORICO


La cafena es un alcaloide identificado casi simultneamente por Runge (1820), Robiquet
(1821) en el caf. Luego, unos aos despus Mulder y Jobstl demostraron que la cafena era
idntica a la tena obtenida del t. Aos despus, se reconoci que la guaranina obtenida de la
pasta de guaran no era ms que cafena, es as, que la cafena est presente en diferentes
especies como el mate, t, nuez de cola, semillas de cacao. El porcentaje de cafena en
diferentes especies vegetales se muestra en el siguiente cuadro:

Especie Vegetal
T comn

% de cafena
2.4 3.5

T perla

T Himalaya

Semillas de guaran
Semillas de caf

3.2
2

Mate
Nuez de cola
Semilla de cacao

5.2.1.- PROPIEDADES FISICAS


La cafena se presenta como un polvo incoloro o agujas resplandecientes, flexibles, sabor
amargo, es soluble en agua y mucho ms soluble en presencia de compuestos como cido
ctrico, benzoatos, silicatos y bromuros. Sometida al calentamiento sublima sin
descomponerse.

5.2.2.- PROPIEDADES QUIMICAS

La cafena es conocida sistemticamente como 1, 3, 7 - trimetilxantina, es un


alcaloide, esto quiere decir que es un producto natural que contiene nitrgeno y
que presenta propiedades bsicas (o alcalinas)
La cafena pertenece a una familia de productos naturales llamados XANTINAS,
que son estimulantes que excitan al sistema nervioso central y los msculos
esquelticos, despejando la mente y disminuye la sensacin del sueo.
La cafena se ha extrado principalmente del t, hojas de arbusto Camelia sinensis
(theasinensis), de la familia de las teceas. Es originaria de los altos valles del
sudeste de Asia y se cultiva en la India, China, Japn, Ceiln y Brasil. El t verde
del comercio es la hoja natural seca. El color del t negro es la flor fermentada y
seca. El color del t negro se debe probablemente a la accin de la oxidasa sobre
el tanino. En el t verde del comercio la oxidasa ha sido destruida rpidamente por
el calor, mientras que el t negro se fermenta por la oxidasa antes de secarlo. El t
negro contiene hasta 4% de cafena y el t verde no suele tener ms 3%.
5.2.3.- METODOS DE EXTRACCION
Existen dos mtodos de extraccin.
a) Por cocimiento y precipitaciones sucesivas
Esta tcnica se basa en la extraccin de la cafena utilizando un solvente a la
temperatura de ebullicin del solvente durante 5 10 minutos. Luego el extracto se
purifica para eliminacin de impurezas por precipitaciones sucesivas.
b) Por sublimacin

0.5 1
2.4
Trazas

Esta tcnica se basa en una de las propiedades que posee la cafena, que al ser
calentada sublima, es decir pasa al estado de vapor, el cual se solidifica al ponerse en
contacto con una superficie fra.
LA SUBLIMACIN es el proceso por el cual una sustancia cristalina adsorbe una
cantidad determinada de energa por unidad de masa y pasa directamente al estado
vapor.
El calor de sublimacin de una sustancia, es la cantidad de calor necesaria para
pasar a la fase vapor una unidad de masa de dicha sustancia a una determinada
temperatura que es igual a la suma de sus calores de fusin y vaporizacin a esta
temperatura.
La sublimacin es usualmente una propiedad de sustancias relativamente no
polares y las cuales tienen tambin una estructura altamente simtrica.

5.3.- DESARROLLO DE LA PRCTICA


Las muestras vegetales que se utilizaran en esta prctica deben ser tradas a laboratorio
por el grupo # 3.
Las muestras vegetales a utilizar:
Hojas de t negro coopercotya (1 caja)u otro t negro.
NOTA IMPORTANTE: Si el grupo asignado no trae las muestras vegetales se queda sin
nota para esta prctica en informe de laboratorio, examen previo y examen de laboratorio.
EXPERIENCIA # 1
EXTRACCION LIQUIDO-LIQUIDO DE CAFEINA
En un vaso precipitado colocar aproximadamente 3g de t negro y 100 ml de agua
destilada caliente, llevar a ebullicin.
En una probeta colocar 20 ml del filtrado y agregar 1 ml de acetato de plomo para
precipitar los taninos.
Filtrar o centrifugar para separar el precipitado, luego se vuelve a agregar el acetato de
plomo y filtrar, esta operacin se repite hasta que no aparezca ms el precipitado.
En un tubo de ensayo tomar 0.5 ml de sobrenadante y agregar el reactivo de Mayer. Para
identificar la cafena como alcaloide.
El resto del sobrenadante se coloca en un embudo de separacin para realizar tres
extracciones o lavados lquidolquido con 5 ml de cloroformo cada una. El cloroformo
posee una densidad mayor que la del agua por ello estar en la parte de inferior del
embudo.
La cafena se encuentra disuelta en cloroformo. Se recoge la fase orgnica en un vaso
precipitado y dejar que evapore todo el solvente a temperatura ambiente, donde la cafena
cristalizar en forma de agujas.
EXPERIENCIA # 2

SUBLIMACION DE LA CAFEINA

Colocar 2 a 3 gr de t (COOPER COTIA) en una vaso de precipitado de 250 ml


Cubrir la boca del vaso precipitado con un vidrio de reloj.
Encima del vidrio de reloj colocar hielo
Calentar el vaso suavemente, la cafena sublimar y quedara adherida en la superficie
inferior del vidrio de relojo en las paredes del vaso precipitado en forma de agujas,

observar. (tener cuidado de que no caiga agua a las paredes del vaso).
Colocar los cristales de cafena formados en un portaobjeto y observar en el microscopio

con los objetivos 10X Y 40X


Esquematizar la forma de los cristales

EXPERIENCIA # 3
PRUEBA DE LA MUREXIDA

En una capsula de porcelana se coloca una pequea cantidad de cafena muestra


y 1 ml de HNO3(c), y se pone a calentar por encima de una malla con amianto en un
mechero de bunsen hasta que est mezcla se seque, se obtendr un residuo
amarillomostaza en la capsula.

Se deja enfriar la capsula hasta temperatura ambiente.

posteriormente se le agregan unas gotas de NH3(c), y observar. La prueba confirma


la presencia de cafena si aparece un color rojo prpura.

5.4.- DESARROLLO DE LA PRCTICA

5.5.- CONCLUSION

5.6.- CUESTIONARIO
1.

2.

3.

4.

Cul es la frmula qumica desarrollada de la cafena?


R.

Realice un flujograma de la extraccin de cafena por ambos mtodos de extraccin.


R.

Qu actividad biolgica tiene la cafena?


R.

Qu actividad farmacolgica tiene la cafena?


R.

5. Cules son sus principales usos?


R.

5.7.- BIBLIOGRAFIA

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD

GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 6

UNDAD VII: Laboratorio No 6

TITULO: Extraccin de aceites esenciales

FECHA DE ENTREGA: 11 semana de clases

PERIODO DE EVALUACIN: 12 semana de clases

6.1. OBETIVO
-

Realizar una extraccin adecuada de aceite esencial de una muestra vegetal determinada.

Comparar el porcentaje de extraccin experimental con el porcentaje de extraccin terica.


Analizar las causas por las que pudieron darse las diferencias experimentales y el valor
terico.

6.2.- FUNDAMENTO TEORICO


Los aceites esenciales son productos qumicos generalmente olorosos, encontrados en
diversas partes dela planta (hojas, flores, frutos, semillas, etc.). Debido a que se evaporan
por

exposicin

al

aire

temperatura

ambiente;

se

llaman

aceites

voltiles.

Cuantitativamente, los contenidos de aceites esenciales en las plantas, son muy bajos, o
inferiores al 1%, con excepcin de los botones floreales del clavo que contiene hasta 15%.
Las esencias se utilizan por su accin teraputica (por Ej. Eucalipto, manzanilla, hinojo,
tomillo, etc.), como aromatizantes (esencia de limn y menta), en perfumera (esencia de
rosas) o como materias primas de partida para sntesis de otras esencias (esencia de
trementina).

6.2.1.- Funcin de los aceites esenciales en la planta


La volatilidad y el marcado olor de los aceites esenciales constituyen un medio de defensa
de las plantas contra depredadores, cumple un papel como atrayentes de insectos con
fines de polinizacin y en fenmenos de alelopata.
6.2.2.- Propiedades fsicas
Los aceites esenciales son lquidos a temperatura ambiente, son incoloros o ligeramente
amarillentos, generalmente su densidad es inferior a la del agua, tiene un ndice de
refraccin elevado, son solubles en alcohol y en disolventes orgnicos, muy poco solubles
en agua.
6.2.3.- Composicin qumica
Los compuestos qumicos ms frecuentes encontrados en los aceites esenciales son: los
monoterpenos C10H16 (cerca del 90% de los aceites esenciales), sesquiterpenos C15H24 y
los compuestos fenilpropanoides. Estas sustancias constituyen un importante grupo de
hidrocarburos, alcoholes, cetonas y esteres.
6.2.4.- Mtodos de extraccin
El mtodo de extraccin a utilizar depende de muchos factores: de la composicin qumica
de la esencia a obtener, de la parte del vegetal de donde se va a extraer, de la cantidad de
esencia que contiene la droga y de su valor econmico. Los mtodos ms comunes son:
a) Arrastre con vapor de agua
Pueden existir tres variantes segn la textura y la fragilidad de la materia prima a tratar:
-

Destilacin con agua: Se utiliza cuando el material es seco y no se altera por ebullicin,
consiste en sumergir directamente el material vegetal a tratar (intacto o pulverizado) en

agua, luego se somete a ebullicin. Los principios voltiles son arrastrados con el vapor y
-

luego es condensado el destilado, finalmente separado por decantacin.


Destilacin con agua y vapor de agua: Se usa para las sustancias secas o frescas,
consiste en sumergir la muestra en agua, seguidamente los compuestos voltiles son

arrastrados por el vapor de agua producido por un generador.


Destilacin directa con vapor de agua: se utiliza para material fresco, consiste en pasar
directamente una corriente de vapor de agua a travs dela muestra vegetal, sin

maceracin previa.
b) Por expresin y otros procesos mecnicos
Algunos aceites esenciales, no pueden ser destilados, porque se descomponen por el
efecto trmico, por lo que se extrae por expresin o por otros procesos mecnicos. Existen
distintas variantes en la aplicacin de este principio.
-

Rallado de las pieles en corriente de agua, luego separar la fase acuosa del aceite esencial

por centrifugacin o decantacin.


Aplastamiento de los frutos enteros entre dos cilindros metlicos, se eliminan los desechos

slidos, se separa por centrifugacin el zumo de fruto y el aceite esencial.


- Presin directa de los frutos partidos privados de su zumo.
c) Extraccin con solvente
Los aceites son extrados preferencialmente con solventes apolares con ter de petrleo y
diclorometano, que entre tanto extraen otros compuestos lipfilos adems de los aceites
esenciales, por eso los productos as obtenidos raramente poseen valor comercial.
d) Enfleuraje (enfloracin)
Consiste en una extraccin con grasa. El material vegetal fresco, generalmente flores, se
extiende sobre una placa de vidrio o bandeja cubierta de una capa de grasa, y se deja por
unas horas o das. Una vez saturada la grasa con la esencia se procede a un extraccin
con alcohol. Se utiliza para obteneresencias de jazmn y de otras flores, que contienen
poca esencia pero que son muy valiosas en la industria.
6.3. PARTE EXPERIMENTAL
Las muestras vegetales que se utilizaran en esta prctica son aquellas que han sido
estudiadas para el trabajo de investigacin, cada grupo debe aplicar los conocimientos de
la materia y muestrear su droga vegetal.

NOTA IMPORTANTE: Si el grupo no trae la muestra vegetales queda suspendido de la


investigacin.

EXPERIENCIA # 1
EXTRACCION DEL ACEITE ESENCIAL DE CANELA

Dependiendo, si la muestra a procesar es fresca o seca, se debe utilizar mtodo adecuado


segn el caso. En este caso se trabajara con una muestra vegetal fresca, la corteza de la
canela, mediante la extraccin con vapor de agua directo, llamado tambin extraccin por
arrastre con vapor de agua. Se debe cuantificar en porcentaje el contenido del aceite
esencial respecto a la muestra.

PROCEDIMIENTO
-

Armar un equipo de destilacin por arrastre de vapor con dos balones, un baln A

(generador de vapor) y un baln B (que contiene la muestra).


Colocar una cantidad determinada de agua en el baln A y algunos ncleos de ebullicin,
este baln debe estar provisto de un tubo de vidrio en U que conduce el vapor generado al
otro baln B que contiene la muestra (pesar la muestra) y es sumergido en esta, el baln B
se conecta a un tubo refrigerante mediante un codo de cuello corto (para evitar la

condensacin prematura del agua).


Recibir el destilado en una probeta.
Destilar hasta obtener unos 150 a 200 ml del destilado.
En la probeta se observaran dos fases, una acuosa y otra aceitosa.
Cuantificar y separar el aceite obtenido.
Colocar en un envase oscuro protegido de la luz y con cierre hermtico, para su posterior
valoracin.

6.4.- DESARROLLO DE LA PRCTICA

6.5.- CONCLUSION

6.6.- CUESTIONARIO
1. Investigar las propiedades fsicas, qumicas y farmacolgicas del aceite esencial que
extrajo.
R.


2. Investigar las propiedades fsicas, qumicas y farmacolgicas del aceite de esencial del
clavo de olor.
R.

3. Investigar el porcentaje de aceite que contienen estas muestra vegetal


R.

4. Realizar los clculos correspondientes para determinar el porcentaje de aceite esencial


que extrajo en laboratorio, comparar con el valor terico, y finalmente evaluar todos los
aspectos que pudieron hacer variar el valor experimental del valor terico.
R.

6.7.- BIBILIOGRAFIA

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD

GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 7

UNDAD VII: Laboratorio No 7

TITULO: Valoracin de aceites esenciales

FECHA DE ENTREGA: 17 semana de clases

PERIODO DE EVALUACIN: 18 semana de clases

7.1.- OBJETIVOS
-

Determinar los parmetros de control de calidad a los aceites esenciales obtenidos en

la anterior prctica de laboratorio.


Evaluar los parmetros obtenidos comparando con los valores tericos.

7.2.- PARTE EXPERIMENTAL


Las muestras vegetales sern proporcionadas por el grupo # 4: Aceite esencial, quita
esmalte comercial.
NOTA IMPORTANTE: Si el grupo asignado no trae las muestras vegetales se queda sin
nota para esta prctica en informe de laboratorio, examen previo y examen de laboratorio.
EXPERIENCIA No 1
DETERMINACION DE LA SOLUBILIDAD
Se determina la solubilidad del aceite tomando en cuenta la capacidad que tiene una
sustancia denominada solvente para formar una masa homognea con otra sustancia
denominada soluto.
PROCEDIMIENTO:
-

Marcar tres tubos de ensayo A, B C.


Coloca 10 gotas de aceite esencial a cada uno.
Al tubo A, se agrega 2 ml de agua destilada, se agita y se observa la solubilidad.
Posteriormente se lleva a calentar a fuego directo hasta llegar a ebullicin para
observar la solubilidad de la mezcla.

Al tubo B, se agrega 2 ml de alcohol, se agita y se observa la solubilidad, luego se

calienta a bao mara y se observa la solubilidad.


Al tubo C, se agrega 2 ml de acetona, se agita y se observa la solubilidad.

EXPERIENCIA No 2
DETERMINACION DE DENSIDAD
La mayora de los aceites esenciales tienen densidad menor a 1, con algunas excepciones.
PROCEDIMIENTO:
Pesar 5 ml de aceite esencial en una probeta, registrar el peso, y determinar la densidad
con la siguiente formula:

D= m/v

Dnde:
D = Es la densidad, obtenida en gramos sobre ml (g/ml)
m = Es el peso del aceite esencial, en gramos
v = Es el volumen medido, en este caso 10 ml

EXPERIENCIA No 3
DETERMINACION DEL INDICE DE ACIDEZ
Son los ml de hidrxido de potasio necesarios para neutralizar los cidos libres contenidos
en un g de sustancia dada (aceite). De este nmero se puede deducir la cantidad de los cidos
terpenicos o fenlicos libres contenidos en el aceite.
PROCEDIMIENTO
-

Pesar 1g de muestra en un Erlenmeyer del 250 ml


Agregar 25 ml de etanol neutralizado con fenoftalina
Calentar en bao mara lo necesario para homogeneizar la muestra por agitacin
Se aade dos gotas de fenoftaleina
Titular con KOH 0,1 N hasta obtener color rosado persistente registre V1

Clculos:
N X 0,0282
%A = --------------------- X 100
P

Dnde:
n = Numero de ml de KOH gastados para neutralizar el aceite
P = Peso de la muestra
%A = gramos de cido por cada 100 gramos de muestra

7.3.- DESARROLLO DE LA PRCTICA

7.4.- CONCLUSION

7.5.- CUESTIONARIO
1.- A que llamamos alcohol neutralizado y como se prepara este
reactivo?
R.

2.- Explicar en qu consiste el proceso de titulacin


R.

3.- Que es la fenolftalena, indique el rango de pH en la cual tiene su


punto de viraje?
R.

4.- Por qu es necesario la determinacin del ndice de acidez en un


aceite esencial?
R.

7.6.- BIBLIOGRAFIA

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